CN112881313A - 一种金龙胆草中总皂苷含量的检测方法及质量控制方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及属于金龙胆草的检测领域，具体的涉及一种金龙胆草中总皂苷含量的检测方法及质量控制方法。本发明建立了采用紫外‑可见分光光度法检测金龙胆草中总皂苷的测定方法，以人参皂苷Re为对照品计算总皂苷，以能更好地控制金龙胆草浸膏及浸膏片的产品质量。解决了目前金龙胆草药材没有金龙胆草总皂苷的检测方法，不能准确的把握金龙胆草的质量的技术问题。
Description
技术领域
本发明属于金龙胆草的检测领域，具体的涉及一种金龙胆草中总皂苷含量的检测方法及质量控制方法。
背景技术
金龙胆草(学名：熊胆草，拉丁学名：Conyza blinii)为菊科白酒草属一年生草本植物。产于云南、四川及贵州。常生长于海拔1800-2600米的山坡草地，荒地路旁或旷野。全草供药用，有消炎止血，截疟之功效。
金龙胆草为菊科植物苦蒿的干燥地上部分。在《中国药典》中收载的质量标准中只有苦蒿素的检测方法，所以可以通过该标准测得苦蒿素的含量。
但是总皂苷是金龙胆草的主要药用成分，但目前却没有金龙胆草总皂苷的检测方法，不能准确把握金龙胆草的质量，也不能对后续金龙胆草浸膏及金龙胆草浸膏片的质量进行控制。
发明内容
本发明为了解决上述背景技术中目前却没有金龙胆草总皂苷的检测方法，不能准确的把握金龙胆草的质量的技术问题，提供一种金龙胆草中总皂苷含量的检测方法及质量控制方法。
本发明采用的技术方案如下：
本发明一方面提供了一种金龙胆草中总皂苷含量的检测方法，包括以下步骤：
S1、取人参皂苷Re对照品，加入溶剂溶解，得到对照品溶液；
S2、将步骤S1中的所述对照品溶液利用紫外-可见分光光度法在500～600nm的波长下测定吸收度，以吸收度为横坐标，以浓度为纵坐标绘制得到标准曲线；
S3、取待测金龙胆草制成粉末后加水，接着超声处理后过滤，得到待测滤液；
S4、将步骤S3的所述待测滤液用水饱和正丁醇提取，得到提取液后稀释，接着蒸干后加入无水乙醇溶解并定容，得到供试品溶液；
S5、将步骤S4中的所述供试品溶液蒸干后采用紫外-可见分光光度法在500～600nm的波长下测定吸收度，接着根据步骤S2中的所述标准曲线计算得到总皂苷的含量。
本发明的有益效果是：首先取标准品人参皂苷Re，通过处理后配置成若干个浓度后用紫外-可见风光光度计测得吸光度。然后以此制得标准曲线，接着取待测金龙胆草，经过处理后用紫外-可见风光光度计测得吸光度，然后根据标准曲线测定具体的金龙胆草总皂苷的含量。本发明建立了金龙胆草总皂苷的检测方法。使得能够根据金龙胆草的药用成份来判断金龙胆草的质量，解决了目前却没有金龙胆草总皂苷的检测方法，不能准确把握金龙胆草的质量，也不能对后续金龙胆草浸膏及金龙胆草浸膏片的质量进行控制的技术问题。超声处理能够让金龙胆草的粉碎度更高。
在上述技术方案的基础上，本发明还可以做如下改进。
进一步，在步骤S1中，所述溶剂为甲醇或乙醇。
采用上述进一步方案的有益效果是，甲醇或乙醇的作为溶剂对人参皂苷Re的溶解性好。
进一步，在步骤S1中，所述溶剂为甲醇。
采用上述进一步方案的有益效果是，甲醇作为溶剂的溶解性最好。
进一步，在步骤S2中，所述紫外-可见分光光度法具体的操作步骤为：分别取所述步骤S1中的所述对照品溶液200μl、400μl、600μl、800μl和1000μl至容器中，挥尽溶剂后分别添加5％浓度的香草醛冰醋酸溶液-高氯酸的混合溶液1ml，接着分别在50～70℃下水浴10～20min,冷却后添加冰醋酸5ml，摇匀后按照比色法测定吸光度。
采用上述进一步方案的有益效果是，所述紫外-可见分光光度法具体的操作步骤能够顺利测出人参皂苷Re的吸光度，其中香草醛冰醋酸溶液-高氯酸能够很好的与人参皂苷Re进行反应，测出其吸光度。
进一步，所述香草醛冰醋酸溶液与高氯酸的体积比为2:8。
采用上述进一步方案的有益效果是，上述配比能够让人参皂苷Re的吸光度测量的更加准确。
进一步，在步骤S5中，所述紫外-可见分光光度法具体的操作步骤为：将步骤S4中的所述供试品溶液蒸干后置于容器中，水浴蒸干，挥尽溶剂后添加5％浓度的香草醛冰醋酸溶液-高氯酸的混合溶液1ml，接着在50～70℃下水浴10～20min,冷却后添加冰醋酸5ml，摇匀后按照比色法测定吸光度。
采用上述进一步方案的有益效果是，香草醛冰醋酸溶液-高氯酸有利于金龙胆草中人参皂苷Re的测出，排除其他杂质的干扰。
进一步，所述香草醛冰醋酸溶液与高氯酸的体积比为2:8。
采用上述进一步方案的有益效果是，上述配比能够让人参皂苷Re的吸光度测量的更加准确。
进一步，在步骤S2中，所述波长为555nm。
采用上述进一步方案的有益效果是，上述波长下，测量的人参皂苷Re的吸光度更加的准确。
进一步，在步骤S5中，所述波长为555nm。
采用上述进一步方案的有益效果是，上述波长下，测量的人参皂苷Re的吸光度更加的准确。
另一方面，提供了一种金龙胆草的质量控制方法，采用如上所述的金龙胆草中总皂苷含量的检测方法对金龙胆草的总皂苷进行检测。
附图说明
图1为本发明人参皂苷Re的标准曲线图；
具体实施方式
以下结合附图对本发明的原理和特征进行描述，所举实例只用于解释本发明，并非用于限定本发明的范围。
实施例1、
一种金龙胆草中总皂苷含量的检测方法，包括以下步骤：
S1、取人参皂苷Re对照品15mg，置100ml量瓶中，加甲醇使溶解并稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液(每1ml中含人参皂苷Re 0.15mg)；
S2、分别称取步骤S1中的所述对照品溶液200μl、400μl、600μl、800μl、1000μl，分别置10ml具塞试管中，挥尽溶剂，精密加5％香草醛冰醋酸溶液-高氯酸(2：8)(临用新配)的混合溶液1ml，于60℃水浴中放置15分钟，取出置冰水浴中冷却，精密加冰醋酸5ml，摇匀，立即照比色法，在555nm的波长处测定吸收度，以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制如图1所示的标准曲线。具体的测量数据如下表1：
表1
| 标样 | 浓度mg/ml | 吸光值 |
| 标样1 | 0.004893 | 0.0812 |
| 标样2 | 0.009787 | 0.1881 |
| 标样3 | 0.014680 | 0.2986 |
| 标样4 | 0.019573 | 0.4075 |
| 标样5 | 0.024467 | 0.5135 |
绘制标准曲线校正方程：Abs＝22.15228*浓度-0.02742
相关系统R＝0.99995
S3、取待测金龙胆草样品1制成粉末10g后加水20ml，超声处理15分钟，滤过，得到待测滤液；
S4、将步骤S3的所述待测滤液精密量取10ml，置分液漏斗中，用水饱和正丁醇振摇提取3次，每次20ml，合并正丁醇提取液，置100ml量瓶中，加水饱和正丁醇稀释至刻度，摇匀。精密量取10ml，水浴蒸干，残渣加无水乙醇使溶解并定量转移运动25ml量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，得到供试品溶液；
S5、将步骤S4中的所述供试品溶液1ml于试管中，水浴中蒸干，挥尽溶剂后添加5％香草醛冰醋酸溶液-高氯酸(2：8)(临用新配)的混合溶液1ml，接着在60℃下水浴15min,冷却后添加冰醋酸5ml，摇匀后按照比色法在555nm的波长处测定吸收度。接着根据步骤S2中的所述标准曲线计算得到总皂苷的含量，具体的结果如下表2：
表2
| 样品 | 浓度mg/ml | 吸光值 | 含量％ |
| 样品1 | 0.001725 | 0.0108 | 0.109％ |
实施例2、
与实施例1的区别在于，在步骤S3中，取待测金龙胆草样品2制成粉末20g后加水20ml，得到的总皂苷的含量如下表3：
表3
| 样品 | 浓度mg/ml | 吸光值 | 含量％ |
| 样品2 | 0.003237 | 0.0443 | 0.467％ |
在本说明书的描述中，术语“一个实施例”、“一些实施例”、“具体实施例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不一定指的是相同的实施例或实例。而且，描述的具体特征、结构、材料或特点可以在任何的一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。
以上所述仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种金龙胆草中总皂苷含量的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、取人参皂苷Re对照品，加入溶剂溶解，得到对照品溶液；
S2、将步骤S1中的所述对照品溶液利用紫外-可见分光光度法在500～600nm的波长下测定吸收度，以吸收度为横坐标，以浓度为纵坐标绘制得到标准曲线；
S3、取待测金龙胆草制成粉末后加水，接着超声处理后过滤，得到待测滤液；
S4、将步骤S3的所述待测滤液用水饱和正丁醇提取，得到提取液后稀释，接着蒸干后加入无水乙醇溶解并定容，得到供试品溶液；
S5、将步骤S4中的所述供试品溶液蒸干后采用紫外-可见分光光度法在500～600nm的波长下测定吸收度，接着根据步骤S2中的所述标准曲线计算得到总皂苷的含量。
2.根据权利要求1所述的金龙胆草中总皂苷含量的检测方法，其特征在于，在步骤S1中，所述溶剂为甲醇或乙醇。
3.根据权利要求2所述的金龙胆草中总皂苷含量的检测方法，其特征在于，在步骤S1中，所述溶剂为甲醇。
4.根据权利要求1所述的金龙胆草中总皂苷含量的检测方法，其特征在于，在步骤S2中，所述紫外-可见分光光度法具体的操作步骤为：分别取所述步骤S1中的所述对照品溶液200μl、400μl、600μl、800μl和1000μl至容器中，挥尽溶剂后分别添加5％浓度的香草醛冰醋酸溶液-高氯酸的混合溶液1ml，接着分别在50～70℃下水浴10～20min,冷却后添加冰醋酸5ml，摇匀后按照比色法测定吸光度。
5.根据权利要求4所述的金龙胆草中总皂苷含量的检测方法，其特征在于，所述香草醛冰醋酸溶液与高氯酸的体积比为2:8。
6.根据权利要求1所述的金龙胆草中总皂苷含量的检测方法，其特征在于，在步骤S5中，所述紫外-可见分光光度法具体的操作步骤为：将步骤S4中的所述供试品溶液蒸干后置于容器中，水浴蒸干，挥尽溶剂后添加5％浓度的香草醛冰醋酸溶液-高氯酸的混合溶液1ml，接着在50～70℃下水浴10～20min,冷却后添加冰醋酸5ml，摇匀后按照比色法测定吸光度。
7.根据权利要求6所述的金龙胆草中总皂苷含量的检测方法，其特征在于，所述香草醛冰醋酸溶液与高氯酸的体积比为2:8。
8.根据权利要求1至7任一项所述的金龙胆草中总皂苷含量的检测方法，其特征在于，在步骤S2中，所述波长为555nm。
9.根据权利要求1至7任一项所述的金龙胆草中总皂苷含量的检测方法，其特征在于，在步骤S5中，所述波长为555nm。
10.一种金龙胆草的质量控制方法，其特征在于，采用如权利要求1至9任一项所述的金龙胆草中总皂苷含量的检测方法对金龙胆草的总皂苷进行检测。
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