CN112806580A - 含有具有脂连蛋白刺激特性的肽组分的营养组合物及其用途 - Google Patents

Abstract

本公开内容涉及包括蛋白等价物源的营养组合物，所述蛋白等价物源包括含有选择的肽的肽组分。蛋白等价物源还可包含完整蛋白、水解蛋白(包括部分水解蛋白)或其组合。本公开内容还涉及通过提供给目标受试者本文公开的营养组合物刺激脂连蛋白的水平，促进目标受试者的健康体重的方法，所述目标受试者包括儿童受试者。

Description

含有具有脂连蛋白刺激特性的肽组分的营养组合物及其用途

本申请是申请日为2014年3月11日，中国国家申请号为201480015731.1，发明名称为“含有具有脂连蛋白刺激特性的肽组分的营养组合物及其用途”的发明申请的分案申请。

技术领域

本公开内容涉及包含可促进维持健康体重的肽组分的营养组合物。更具体地说，所述营养组合物可通过在目标受试者中刺激脂连蛋白生产，促进健康体重。本文描述的营养组合物适合给予成人和儿童受试者。

此外，本公开内容提供通过提供给目标受试者包含本文公开的肽组分的营养组合物，维持健康体重的方法。此外，本文公开通过提供给目标受试者包含本文描述的肽组分的营养组合物，刺激脂连蛋白生产和/或提高脂连蛋白水平的方法。

背景技术

肥胖症，特别是儿童肥胖症是发展中国家的一个日益增加的问题。例如，在美国在2000年，约15%的年龄最大11岁的儿童，被认为是肥胖的，而在1980年仅7%被认为是肥胖的。然而，发展为肥胖症的儿童非常有可能持续肥胖进入成人期。

肥胖症的特征是身体脂肪积累增加和各种疾病的可能性增加，所述疾病包括，但不限于，冠心病、2型糖尿病、阻塞性睡眠呼吸暂停、呼吸问题、癌症(包括子宫内膜癌、乳腺癌和结肠癌)、高血压、血脂异常(例如高总胆固醇和/或高水平的甘油三酯)、中风、肝病、胆囊疾病和骨关节炎。

脂连蛋白(也称为ACRP30、adipoQ或GBP28)，是一种由脂肪组织的脂肪细胞以及妊娠期胎盘产生的蛋白质激素。脂连蛋白具有几种有益的和保护的作用，包括抗炎、血管保护和抗-糖尿病作用。然而，脂连蛋白调节几种可影响人发育的代谢过程。例如，脂连蛋白参与调节葡萄糖水平以及脂肪酸代谢，与成人的体脂肪百分比呈负相关。在儿童中，与体重指数和胰岛素抵抗的类似关联性已有报道。

高浓度的循环脂连蛋白具有积极的健康作用，至少部分是由于减少促炎细胞因子，提高胰岛素敏感性和增加脂肪酸代谢。在人体中，脂连蛋白水平与独立于肥胖症的胰岛素抵抗呈负相关，在患有2型糖尿病的个体中具有最低水平的脂连蛋白。而且，低脂连蛋白先于胰岛素抵抗的发展，提示脂连蛋白对胰岛素敏感性的直接作用。小鼠研究已证实，脂连蛋白改进葡萄糖利用。高脂连蛋白还与具有抗-致动脉粥样硬化的脂质分布有关。

脂连蛋白还与血浆甘油三酯呈负相关，和与血浆高密度脂蛋白胆固醇水平呈正相关。脂连蛋直接影响脂质代谢和氧化。此外，脂连蛋白具有强的抗炎特性。脂连蛋白降低TNFα和IL-6生产，并增加抗炎细胞因子在巨噬细胞中的表达。脂连蛋白还在TNF-a的下游起作用以抑制其激活NF-kb路径的能力。脂连蛋白抑制体内粒细胞-巨噬细胞集落的形成，和抑制成熟巨噬细胞的吞噬活性。

因此，提供能够增加受试者中脂连蛋白的生产的营养组合物或医疗食品将是有用的。特别是，改进早期生命的脂连蛋白水平，以减少或防止成人代谢性疾病可能是有用的。

因此，本公开内容提供包含蛋白等价物源的营养组合物，所述蛋白等价物源包括含有以下肽的肽组分：SEQ ID NO 4、SEQ ID NO 13、SEQ ID NO 17、SEQ ID NO 21、SEQ IDNO 24、SEQ ID NO 30、SEQ ID NO 31、SEQ ID NO 32、SEQ ID NO 51、SEQ ID NO 57、SEQ IDNO 60和SEQ ID NO 63。在一些实施方案中，肽组分包含至少10种选自表1的另外的肽。

在一些实施方案中，肽组分可包含至少5种选自表1的肽和至少3种选自表2的另外的肽。在还有的其它实施方案中，肽组分可包含至少10种选自表1的另外的肽。

不受任何特殊的理论的束缚，相信本文描述的肽组分当被个体消费时，可对脂连蛋白水平具有有利的作用。此外，本公开内容包括通过提供包含本文公开的肽组分的营养组合物，刺激脂连蛋白生产的方法。

此外，本公开内容涉及通过刺激目标受试者中的脂连蛋白生产，促进和/或维持健康体重的方法，该方法包含提供给目标受试者包含本文公开的肽组分的营养组合物。

本发明的公开内容

简单地说，在一个实施方案中，本公开内容涉及包含肽组分的营养组合物，所述肽组分包含以下的肽：SEQ ID NO 4、SEQ ID NO 13、SEQ ID NO 17、SEQ ID NO 21、SEQ ID NO24、SEQ ID NO 30、SEQ ID NO 31、SEQ ID NO 32、SEQ ID NO 51、SEQ ID NO 57、SEQ ID NO60和SEQ ID NO 63。在一些实施方案中，肽组分可包含至少10种选自表1的另外的肽。

在一些实施方案中，肽组分可包含至少5种选自表1的肽和至少3种选自表2的肽。在还有的其它实施方案中，肽组分可包含至少10种选自表1的另外的肽。

在一些实施方案中，营养组合物包括蛋白等价物源，其中20%-80%的蛋白等价物源包含本文描述的肽组分和20%-80%的肽组分包含完整蛋白、水解蛋白(包括部分水解蛋白)及其组合。

本公开内容的营养组合物可还包含婴儿配方食品。在一些实施方案中，本公开内容的营养组合物可包含儿童营养组合物、营养补剂、营养添加剂或成人营养组合物。

在一些实施方案中，本公开内容涉及一种通过提供包含本文公开的肽组分的营养组合物维持健康体重的方法。此外本公开内容提供在目标受试者中刺激脂连蛋白生产的方法，该方法包括提供包含本文公开的肽组分的营养组合物。在一些实施方案中，本公开内容提供通过刺激脂连蛋白维持健康体重的方法，其包括给予包含本文描述的肽组分的营养组合物。

应理解，前面的一般性描述和下面的详细描述二者提供本公开内容的实施方案，并意欲提供用于理解如所要求保护的本公开内容的性质和特征的概观或框架。说明书起着解释要求保护的主题的原理和操作的作用。本公开内容的其它和进一步的特征和优点在本领域技术人员阅读以下公开内容后将是显而易见的。

附图简述

图1显示暴露于酪蛋白水解产物后皮下组织的脂连蛋白分泌。

图2说明原代人脂肪细胞的脂连蛋白分泌。

图3说明原代人脂肪细胞的脂连蛋白分泌。

图4说明含其它补剂的高脂肪饮食喂养的小鼠的血清脂连蛋白水平。

实施本发明的最佳方式

现在将详细地参照本公开内容的实施方案，下文阐述了其一个或多个实例。各个实例通过解释本公开内容的营养组合物来提供，并且不是限制。实际上，对于本领域技术人员将是显而易见的是，可在不偏离本公开内容的范围的情况下对本公开内容的教义进行各种修改和变动。例如，作为一个实施方案的一部分说明或描述的特征，可以与另一个实施方案一起使用以产生又一个实施方案。

因此，预期本公开内容涵盖落入随附权利要求书的范围的这类修改和变动及其等同内容。本公开内容的其它目的、特征和方面公开于下面的详细描述，或从下面的详细描述来看是显而易见的。本领域普通技术人员要理解，本讨论仅是示例性实施方案的描述，并无意限制本公开内容的更宽泛的方面。

本公开内容总体上涉及包含蛋白等价物源的营养组合物，所述蛋白等价物源包含本文作为SEQ ID NO 4、SEQ ID NO 13、SEQ ID NO 17、SEQ ID NO 21、SEQ ID NO 24、SEQID NO 30、SEQ ID NO 31、SEQ ID NO 32、SEQ ID NO 51、SEQ ID NO 57、SEQ ID NO 60和SEQ ID NO 63公开的肽。在一些实施方案中，肽组分可包含至少10种在表1中公开的另外的肽。

在一些实施方案中，20%-80%的蛋白等价物源包含本文描述的肽组分和20%-80%的蛋白等价物源包括完整蛋白、部分水解蛋白及其组合。

此外，本公开内容涉及通过提供给目标受试者包含本文描述的肽组分的营养组合物来维持健康体重的方法。此外，本公开内容涉及通过提供给目标受试者包含本文公开的肽组分的营养组合物，刺激脂连蛋白水平来维持健康体重的方法。

当给予个体时，肽组分具有对代谢和炎性反应的有利的作用。更具体地说，肽组分能够增加脂连蛋白生产。虽然不受任何特殊理论的束缚，增加的脂连蛋白具有几种有益的和保护的作用，包括抗炎、血管保护和抗-糖尿病作用。例如，在一些实施方案中，肽组分减少总胆固醇水平。在某些实施方案中，肽组分减少低-密度脂蛋白胆固醇(LDL)，和更特别地，在一些实施方案中，肽组分促进总胆固醇与高密度脂蛋白(HDL)胆固醇的健康比例。例如，5:1或更少的比例被认为是健康的，和约3.5:1的比例是理想的。

在一些实施方案中，肽组分促进受试者的健康体重和/或健康体脂肪质量。健康体重可通过计算受试者的体重指数(BMI)来评价，其中对于成人，约18.5至约25的BMI被认为是健康的。体脂肪常常作为体脂肪百分率评价，其中正常健康的女性具有范围从约21至约31%的体脂肪百分率，而正常健康的男性具有范围从约14至约24%的体脂肪。这些值也可根据受试者的年龄而变化，其中老年受试者的健康体脂肪百分率稍高。

“营养组合物”意指满足受试者的营养需要的至少一部分的物质或制剂。术语“营养品”、“营养配方食品”、“肠内营养品”和“营养补剂”在整个公开内容中使用作为营养组合物的非限制性实例。而且，“营养组合物”可指液体剂、散剂、凝胶剂、糊剂、固体剂、浓缩剂、混悬剂或即用形式(ready-to-use forms)的肠内配方食品、口服配方食品、婴儿配方食品、儿童受试者配方食品、儿童配方食品、成长乳和/或成人配方食品。

术语“肠内”意指可通过胃肠道或消化道或在胃肠道或消化道内传递的。“肠内给予”包括经口喂食、灌胃给食、经幽门给予或任何其它给予进入消化道。“给予”比“肠内给予”更广义并包括胃肠外给予或使物质进入受试者体内的任何其它给予途径。

术语“医疗食品”指被配制或打算用于疾病或病症的膳食管理的肠内组合物。医疗食品可以是用于口服摄取或管饲(鼻胃插管)的食品，可被标记为有不同营养需求的特殊医学病况、疾病或病症的膳食管理，和可打算在医疗监督下使用。

如本文所用的术语“肽”描述氨基酸的线性分子链，包括单一链分子或它们的片段。本文描述的肽包含总共不超过50个氨基酸。肽还可形成低聚体或由至少两个相同或不同的分子组成的多聚体。而且，术语“肽”也涵盖这样的肽的拟肽(其中氨基酸和/或肽键已被功能类似物替代)。这样的功能类似物可包括，但不限于，除了20个基因编码的氨基酸之外的所有已知的氨基酸，例如硒代半胱氨酸。

术语“肽”也可指其中进行了修饰的天然修饰肽，例如，通过糖基化、乙酰化、磷酸化和本领域熟知的类似修饰。在一些实施方案中，将肽组分与也在本文公开的蛋白质源相区分。此外，肽可例如经重组地、半-合成地、合成地生产，或从天然来源例如蛋白质(包括但不限于酪蛋白)水解后获得，所有都依据本领域已知的方法。

术语“水解度”指肽键被水解方法打破的程度。例如，在一些实施方案中，本公开内容的蛋白等价物源可包含具有水解度不大于40%的蛋白质。

术语“部分水解的”意指具有大于0%但少于50%的水解度。

术语“广泛水解的”意指具有大于或等于50%的水解度。

术语“摩尔质量分布”当用于提及水解蛋白或蛋白水解物时，指存在于蛋白水解物中的各种肽的摩尔质量。例如，具有摩尔质量分布大于500道尔顿的蛋白水解物意指蛋白水解物中包含的各种肽具有至少500道尔顿的摩尔质量。因此，在一些实施方案中，表1和表2中公开的肽衍生自具有大于500道尔顿的摩尔质量分布的蛋白水解物。为提供具有摩尔质量分布大于500道尔顿的蛋白水解物，蛋白水解物可经受某些过滤程序或本领域已知的用于除去肽、氨基酸和/或其它具有摩尔质量少于500道尔顿的蛋白质材料的任何其它程序。为了本公开内容的目的，本领域已知的任何方法可以用来生产具有摩尔质量分布大于500道尔顿的蛋白水解物。

术语“蛋白等价物”或“蛋白等价物源”包括任何蛋白质源，例如大豆、蛋、乳清或酪蛋白，以及非-蛋白质源，例如肽或氨基酸。此外，蛋白等价物源可以是本领域使用的任何来源，例如，脱脂乳、乳清蛋白、酪蛋白、大豆蛋白、水解蛋白、氨基酸等。可用于实施本公开内容的牛乳蛋白源包括，但不限于，乳蛋白粉、乳蛋白浓缩物、乳蛋白分离物、脱脂乳固体、脱脂乳、脱脂奶粉、乳清蛋白、乳清蛋白分离物、乳清蛋白浓缩物、甜乳清、酸乳清、酪蛋白、酸酪蛋白、酪蛋白酸盐(如酪蛋白酸钠、酪蛋白酸钠钙、酪蛋白酸钙)、大豆蛋白质及其任何组合。在一些实施方案中，蛋白等价物源可包含水解蛋白，包括部分水解蛋白和广泛水解蛋白。在一些实施方案中，蛋白等价物源可包括完整蛋白。

术语“蛋白等价物源”还包含游离氨基酸。在一些实施方案中，氨基酸可包含，但不限于，组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、半胱氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、苏氨酸、色氨酸、缬氨酸、丙氨酸、精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、甘氨酸、脯氨酸、丝氨酸、肉毒碱、牛磺酸及其混合物。在一些实施方案中，氨基酸可以是支链氨基酸。在某些其它实施方案中，小氨基酸肽可以作为营养组合物的蛋白质组分被包括在内。这样的小氨基酸肽可以是天然存在的或合成的。

“儿童受试者”意指年龄不足13岁的人。在一些实施方案中，儿童受试者是指介于出生和8岁之间的人受试者。在其它实施方案中，儿童受试者是指介于1到6岁之间的人类受试者。在更进一步的实施方案中，儿童受试者是指介于6到12岁之间的人类受试者。术语“儿童受试者”可指如下所述的婴儿(早产或足月)和/或儿童。

“婴儿”意指年龄范围从出生至不满1岁的人类受试者并包括从0至12个月的矫正年龄的婴儿。短语“矫正年龄”意指婴儿的实足年龄减去婴儿早产的时间量。因此，如果怀胎已达足月，则矫正年龄是该婴儿的年龄。术语婴儿包括低出生体重婴儿、非常低出生体重婴儿，和早产婴儿。“早产儿”意指在妊娠的第37周结束前出生的婴儿，而“足月儿”意指在妊娠的第37周结束后出生的婴儿。

“儿童”意指年龄范围从约12个月至约13岁的受试者。在一些实施方案中，儿童是年龄介于1和12岁之间的受试者。在其它实施方案中，术语“儿童”是指介于1和约6岁之间或介于约7和约12岁之间的受试者。在其它实施方案中，术语“儿童”是指介于12个月和约13岁之间的任何年龄范围。

“儿童的营养制品”指满足儿童的至少一部分营养需要的组合物。成长乳是儿童的营养制品的实例。

“婴儿配方食品”意指满足婴儿的至少部分营养需求的组合物。在美国，21 C.F.R.第100、106和107章阐述的联邦法规规定了婴儿配方食品的内含物。这些法规限定尽力模拟人母乳的营养和其它性质的常量营养物、维生素、矿物质和其它成分水平。

术语“成长乳”是指预期用作不同膳食的一部分，以支持年龄介于约1和约6岁之间的儿童的正常成长和发育的一大类营养组合物。

“营养完全的”意指可用作营养的唯一来源的组合物，其可供应基本上所有每日必需量的维生素、矿物质和/或痕量元素以及蛋白质、碳水化合物和脂质。实际上，“营养全面的”描述了提供支持受试者的正常生长和发育所需的足量碳水化合物、脂质、必需脂肪酸、蛋白质、必需氨基酸、条件必需氨基酸、维生素、矿物质和能量的营养组合物。

因此，按定义，对早产儿是“营养完全的”营养组合物提供早产儿生长所需要的质量上和数量上足量的碳水化合物、脂质、必需脂肪酸、蛋白质、必需氨基酸、条件必需氨基酸、维生素、矿物质和能量。

按定义，对足月婴儿是“营养完全的”的营养组合物提供足月婴儿生长所需要的质量上和数量上足量的所有碳水化合物、脂质、必需脂肪酸、蛋白质、必需氨基酸、条件必需氨基酸、维生素、矿物质和能量。

按定义，对儿童是“营养完全的”的营养组合物可提供儿童生长所需要的质量上和数量上足量的所有碳水化合物、脂质、必需脂肪酸、蛋白质、必需氨基酸、条件必需氨基酸、维生素、矿物质和能量。

当应用于营养物时，术语“必需的”是指机体无法以足用于正常生长和维持健康的量合成，因此必须通过膳食供应的任何营养物。术语“条件必需的”在应用于营养物时意指在机体出现无法获得用于内源合成的足量的前体化合物的条件下营养物必须通过膳食供应。

“益生元”意指不易消化的食物成分，其通过选择性地刺激消化道中一种或有限数量的可增进宿主健康的细菌生长和/或活性而有益地影响宿主。

“益生菌”意指对宿主的健康发挥至少一种有益作用的具有低致病性或无致病性的微生物。

术语“灭活的益生菌”意指这样的益生菌，其中所提及的益生菌生物体的代谢活性或繁殖能力已经减少或被破坏。然而，“灭活的益生菌”在细胞水平上仍然保留至少一部分其生物二醇-蛋白和DNA/RNA结构。如本文所用的，术语“灭活的”与“无活力的”同义。更具体地说，灭活的益生菌的非-限制性实例是灭活的鼠李糖乳杆菌GG (Lactobacillus rhamnosus GG) (“LGG”)或“灭活的LGG”。

如本文所用的所有百分比、份数和比例均基于总制剂的重量计，除非另外指明。

本公开内容的营养组合物可基本上不含任何本文所述的任何任选的或选择的成分，条件是其余的营养组合物仍含有本文所述的所有必需成分或特征。在本上下文中，并且除非另外指明，否则术语“基本上不含”意指所选的组合物可含有小于有用量的任选成分，通常小于0.1%重量，并且还包括0%重量的此类任选或选择的成分。

本公开内容提及的所有单数特性或限制应包括相应的复数特征或限制，并且反之亦然，除非另外指明或在提及的上下文中有相反的明显提示。

可以任何顺序进行本文所采用的方法或过程步骤的所有组合，除非另有说明或在作出所提及的组合的上下文中明确说明与之相反。

本公开内容的方法和组合物(包括其组分)，可包含本文所述实施方案的必需要素和限制以及本文或别处描述的可用于营养组合物的任何额外或任选的成分、组分或限制；由本文所述实施方案的必需要素和限制以及本文或别处描述的可用于营养组合物的任何额外或任选的成分、组分或限制组成；或基本由它们组成。

本文所用术语“约”应解释为是指任何范围的端点所指定的两个数字。对范围的任何提及应视为对该范围内的任何子集提供支持。

肥胖症是其中过多的体脂肪积累至引起对健康的不利作用的这样程度的医学病症。例如，肥胖症可导致减少的预期寿命、心脏病、2型糖尿病、阻塞性睡眠呼吸暂停和骨关节炎。专家推测，肥胖症是世界范围内导致死亡的主要可预防的原因之一，并在成人和儿童中具有增加的患病率。脂连蛋白参与调节葡萄糖水平以及脂肪酸代谢，并与成人体脂肪百分率呈负相关。

因此，本公开内容总体上涉及包含蛋白等价物源的营养组合物，其中蛋白等价物源包括包含SEQ ID NO 4、SEQ ID NO 13、SEQ ID NO 17、SEQ ID NO 21、SEQ ID NO 24、SEQID NO 30、SEQ ID NO 31、SEQ ID NO 32、SEQ ID NO 51、SEQ ID NO 57、SEQ ID NO 60和SEQ ID NO 63的肽组分。在一些实施方案中，肽组分可包含在表1中公开的另外的肽。例如，组合物可包括至少10种在表1中公开的另外的肽。在一些实施方案中，20%-80%的蛋白等价物源包含肽组分，和20%-80%的蛋白等价物源包括完整蛋白、部分水解蛋白及其组合。在一些实施方案中，术语“另外的”意指选择与那些枚举的不同的肽。

在另一个实施方案中，20%-80%的蛋白等价物源包括肽组分，所述肽组分包含至少3种选自SEQ ID NO 4、SEQ ID NO 13、SEQ ID NO 17、SEQ ID NO 21、SEQ ID NO 24、SEQ IDNO 30、SEQ ID NO 31、SEQ ID NO 32、SEQ ID NO 51、SEQ ID NO 57、SEQ ID NO 60和SEQID NO 63的肽，和至少5种选自表1的另外的肽；和其中20%-80%的蛋白等价物源包含完整蛋白、部分水解蛋白或其组合。

不受任何特殊的理论的束缚，提供包含本公开内容的肽组分的营养组合物可有利地提高脂连蛋白水平，因而促进维持目标受试者的健康体重。

下表1鉴定可以包括在营养组合物的肽组分中的具体氨基酸序列。

表1

下表2还鉴定来自表1的氨基酸序列的亚组，其可包括和/或包含在本文公开的肽组分中。

表2

在一些实施方案中，肽组分可以从约0.2 g/100 kcal至约5.6 g/100 kcal的量存在于营养组合物中。在其它实施方案中，肽组分可以从约1 g/100 kcal至约4 g/100 kcal的量存在于营养组合物中。在还有的其它实施方案中，肽组分可以从约2 g/100 kcal至约3g/100 kcal的量存在于营养组合物中。

本文公开的肽组分可与营养组合物中的其它成分一起配制，以为目标受试者提供适宜的营养物水平。在一些实施方案中，肽组分被包括在适合于支持正常生长的营养完全的配方食品中。

在其它实施方案中，肽组分可包含可加入到其它营养制剂(包括，但不限于，食品和/或饮料)中的营养补剂或添加剂。为了本公开内容的目的，“营养补剂”包括营养物的浓缩来源，例如本文鉴定的肽，或者备选地，其目的是为了补充正常饮食的具有营养或生理有效性的其它物质。

肽组分可以作为蛋白等价物源的要素提供。在一些实施方案中，在表1和2中鉴定的肽可由从牛乳蛋白(包括但不限于牛酪蛋白和牛乳清)获得的蛋白等价物源提供。在一些实施方案中，蛋白等价物源包括水解牛酪蛋白或水解牛乳清。因此，在一些实施方案中，在表1和2中鉴定的肽可由酪蛋白水解产物提供。这样的肽可通过水解获得或可通过技术人员已知的方法在体外合成。

本文公开水解方法的非限制性实例。在一些实施方案中，可使用这种方法以获得本公开内容的蛋白水解物和肽。蛋白质使用蛋白水解酶，蛋白酶N水解。蛋白酶N “Amano”可从Amano Enzyme U.S.A. Co., Ltd., Elgin, Ill经市售获得。蛋白酶N是源自菌种枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的蛋白水解酶制剂。蛋白酶粉末被规定为“不少于150,000单位/g”，意思是蛋白酶N的一个单位是在7.0的pH下经60分钟产生等同于100微克酪氨酸的氨基酸的酶的量。为提供本发明的婴儿配方食品，蛋白酶N可以被水解总蛋白质的约0.5%-约1.0%重量的水平使用。

经蛋白酶N的蛋白质水解通常在约50℃-约60℃的温度下进行。水解发生一段时间以获得介于约4%和10%之间的水解度。在具体的实施方案中，水解发生一段时间以获得介于约6%和9%之间的水解度。在另一个实施方案中，水解发生一段时间以获得约7.5%的水解度。这种水解的水平可能需要花费约半小时-约3小时。

在水解期间应维持恒定的pH。在本发明的方法中，pH被调整至和维持在约6.5和8之间。在特定的实施方案中，pH维持在约7.0。

为维持乳清蛋白、酪蛋白、水和蛋白酶N的溶液的最适pH，氢氧化钠和/或氢氧化钾的苛性碱溶液可被用来在水解期间调节pH。如果使用氢氧化钠调节pH，加入到该溶液的氢氧化钠的量应控制在这样的水平，即在最终蛋白水解物中包含少于约0.3%的总固体。在加入酶之前或者在水解过程期间，10%的氢氧化钾溶液也可用来调节溶液的pH至所需值，以维持最适pH。

在蛋白质水解期间加入到该溶液的苛性碱溶液的量可通过pH固定计(pH-stat)或通过连续和按比例加入苛性碱溶液加以控制。水解产物可通过标准分批过程或通过连续过程制备。

为了更好地确保一致的蛋白质部分水解产物的质量，水解产物经受酶失活以终止水解过程。酶失活步骤可包括在约82℃的温度下热处理约10分钟。或者，酶可通过加热该溶液至约92℃的温度约5秒钟而失活。在酶失活完成后，水解产物可在低于10℃的温度下呈液态贮存。

实施例1

实施例1进一步说明一种产生蛋白质部分水解产物的方法。首先，将60.3 kg非-乳固体(奶粉)和37.4 kg乳清蛋白浓缩物(60%)在含有54℃的水的罐中混合。浆液具有介于20%和23%之间的总固体含量。然后测量浆液的pH。将氢氧化钠和氢氧化钾加入到浆液以调节浆液的pH至7.0。在调节pH后，将0.5 kg的Amano N酶加入到浆液中。在加入Amano N至浆液后，使用氢氧化钠和氢氧化钾将pH连续地调节至pH 7.0。加入到浆液中的氢氧化钠总量是0.3 kg。加入到浆液中的氢氧化钾总量是1.5 kg。

允许水解发生90分钟，该时间自加入Amano N酶至浆液中开始计。在90分钟结束时，浆液经热处理以灭活酶。热处理包括升高浆液的温度至82℃达10分钟。在该实施例中获得的水解度是在6%和9%之间。然后冷却浆液和喷雾干燥，得到粉末状水解产物。

实施例2

实施例2提供一种测定水解产物肽的分子量分布的非-限制性方法。

尺寸排阻色谱法(SEC)被用来测定由本文描述的水解过程建立的水解产物肽的分子量分布。具体而言，称出足够量的粉末状婴儿配方食品以提供0.5克蛋白质至50 ml尖底离心管中。加水使管到45毫升的体积。将该混合物置于Sarstedt D-5223混合器中并混合1小时。混合后，通过加入另外5 ml水至管中创立1%蛋白质溶液。准备储备液标准并且还混合1小时。

此外，将14.91克氯化钾(KCl)加入到1000 ml烧瓶中。通过加入700 ml水至烧瓶来溶解KCl。然后将250 ml乙腈和1.0 ml三氟乙酸加入到KCl溶液(洗脱液)。使用0.2M K₂HPO₄溶液将pH调节至3.0。

填充HPCL试剂瓶并用洗脱液洗涤瓶，保留约50 ml用于稀释样品和标准品。用洗脱液清洗Hitachi L-6200 A智能泵线(Hitachi L-6200 A Intelligent Pump line)且柱用洗脱液平衡1小时。

在样品混合1小时后，将5.0 ml的每个样品移进玻璃螺帽管中。5.0 ml二氯甲烷也移入各管中。盖帽各管并经反复颠倒4次来混合。然后将样品以200×g离心5分钟。

在样品置于离心分离机中的同时，用洗脱液稀释储备标准品1-5 (800 ul+3200ul)。将约1 ml的各个标准品移入两个自动采样瓶的每一个中并盖帽。

离心的样品1-10的上(含水)层用洗脱液(100 ul+900 ul)稀释。将如下的小瓶装载到自动采样器托盘中：空白品、标准品、样品和第二标准品。将托盘置于Hitachi自动采样器中。使用自动采样器前部的键使要运行的小瓶的总数目进入自动采样器程序，并运行样品。结果指明了蛋白质的分子量分布。

在一些实施方案中，蛋白等价物源包括水解蛋白，例如酪蛋白，其包括部分水解蛋白和广泛水解蛋白。在一些实施方案中，蛋白等价物源包括水解蛋白，其包含具有大于500道尔顿的摩尔质量分布的肽。在一些实施方案中，它们水解包含具有摩尔质量分布在从约500道尔顿至约1,500道尔顿范围内的肽的蛋白。在一些实施方案中，水解蛋白还可包含具有从约500道尔顿至约2,000道尔顿的摩尔质量分布范围的肽。

在一些实施方案中，蛋白等价物源可包含肽组分、完整蛋白、水解蛋白(包括部分水解蛋白)，及其组合。在一些实施方案中，20%-80%的蛋白等价物源包含本文公开的肽组分。在一些实施方案中，40%-70%的蛋白等价物源包含本文公开的肽组分。在还有的其它实施方案中，50%-60%的蛋白等价物源包含肽组分。

在一些实施方案中，20%-80%的蛋白等价物源包含完整蛋白、部分水解蛋白或其组合。在一些实施方案中，30%-60%的蛋白等价物源包含完整蛋白、部分水解蛋白或其组合。在更进一步的实施方案中，40%-50%的蛋白等价物源可包含完整蛋白、部分水解蛋白或其组合。

在一些实施方案中，蛋白等价物源包括具有少于40%的水解度的部分水解蛋白。在还有的其它实施方案中，蛋白等价物源可包含具有水解度少于25%或少于15%的部分水解蛋白。

在一些实施方案中，营养组合物包含约1 g-约7 g的蛋白等价物源/100 kcal。在其它实施方案中，营养组合物包含约3.5 g-约4.5 g的蛋白等价物源/100 kcal。

此外，肽组分可通过本领域熟知的任何方法加入或掺入营养组合物中。在一些实施方案中，肽组分可被加入到营养组合物中以补充营养组合物。例如，在一个实施方案中，肽组分可以加入到可市售获得的婴儿配方食品中。例如，Enfalac、Enfamil®、Enfamil®早产儿配方食品(Premature Formula)、含铁Enfamil®、Enfamil® LIPIL®、Lactofree®、Nutramigen®、Pregestimil®和ProSobee® (从Mead Johnson & Company, Evansville,IN, U.S.A.购得)可用合适的水平的肽组分补充，并用于本公开内容的实践中。

本公开内容的包含肽组分的营养组合物可以每日一个或多个剂量给予。本公开内容涵盖任何口服可接受的剂量形式。这样的剂型的实例包括，但不限于丸剂、片剂、胶囊、软凝胶、液体剂、液体浓缩剂、散剂、酏剂、溶液剂、混悬剂、乳剂、糖锭剂、珠粒、香囊剂及其组合。

在一些实施方案中，包含肽组分的蛋白等价物源可以加入到较完全的营养制品中。在这个实施方案中，营养组合物可含有脂肪和碳水化合物源或组分，并可用来补充饮食或可以用作营养物的唯一来源。

在一些实施方案中，营养组合物包含至少一种碳水化合物源。碳水化合物源可以是本领域使用的任何来源，例如，乳糖、葡萄糖、果糖、玉米糖浆固体、麦芽糊精、蔗糖、淀粉、大米糖浆固体等。碳水化合物组分在营养组合物中的量通常可在约5 g/100 kcal和约25g/100 kcal之间变化。在一些实施方案中，碳水化合物的量在约6 g/100 kcal和约22 g/100 kcal之间。在其它实施方案中，碳水化合物的量在约12 g/100 kcal和约14 g/100kcal之间。在一些实施方案中，玉米糖浆固体是优选的。此外，由于它们的易消化性，水解的、部分水解的和/或广泛水解的碳水化合物包括在营养组合物中可能是合乎需要的。特别地，水解的碳水化合物不太可能含有变应原表位。

适用于本文的碳水化合物材料的非限制性实例包括来源于玉米、木薯、大米或马铃薯的水解或完整的、天然或化学改性的淀粉(蜡质或非-蜡质形式)。合适的碳水化合物的非限制性实例包括特征为水解玉米淀粉、麦芽糊精、麦芽糖、玉米糖浆、右旋糖、玉米糖浆固体、葡萄糖和各种其它葡萄糖聚合物及其组合的各种水解淀粉。其它合适的碳水化合物的非限制性实例包括通常称为蔗糖、乳糖、果糖、高果糖玉米糖浆、不消化的寡糖(例如果寡糖)及其组合的那些。

在一些实施方案中，营养组合物可以是不含蛋白质的，并含有游离氨基酸作为蛋白等价物源的要素。在某些其它实施方案中，小氨基酸肽可以作为营养组合物的蛋白质组分被包括在内。这样的小氨基酸肽可以是天然存在的或合成的。游离氨基酸在营养组合物中的量可从约1 g/100 kcal至约5 g/100 kcal变化。

营养组合物还可包含脂肪源。本公开内容的营养组合物的合适脂肪或脂质源可以是本领域已知的或使用的任何来源，包括但不限于，动物来源，例如，乳脂肪、黄油、黄油脂肪、蛋黄脂质；海洋来源，例如鱼油、海产油、单细胞油；蔬菜和植物油，例如玉米油、油菜油(canola oil)、向日葵油、大豆油、棕榈液油、椰子油、高油酸向日葵油、月见草油、菜籽油、橄榄油、亚麻仁(亚麻籽)油、棉籽油、高油酸红花油、棕榈硬脂酸甘油酯、棕榈仁油、麦胚芽油；中链甘油三酯油和乳液和脂肪酸的酯；及其任何组合。

在一些实施方案中，营养组合物包含介于约1.3 g/100 kcal至约7.2 g/100 kca之间的脂肪源。在其它实施方案中，脂肪源可以从约2.5 g/100 kcal至约6.0 g/100 kcal的量存在。在还有的其它实施方案中，脂肪源可以从约3.0 g/100 kcal至约4.0 g/100kcal的量存在于营养组合物中。

在某些实施方案中，营养组合物还可含有一种或多种益生元(也称为益生元来源)。益生元可刺激消化的益生菌生物的生长和/或活性，选择性地减少肠道中存在的病原体，和有利地影响肠道的短链脂肪酸分布。这样的益生元可以是天然-存在的、合成的，或通过生物体和/或植物的基因操作开发的，无论这种新的来源是现在已知的还是以后开发的。可用于本公开内容的益生元可包括寡糖、多糖和含有果糖、木糖、大豆、半乳糖、葡萄糖和甘露糖的其它益生元。

更具体地说，可用于本公开内容的益生元可包括聚葡萄糖、聚葡萄糖粉、乳果糖、乳蔗糖、棉子糖、葡-寡糖、菊糖、果-寡糖、异麦芽-寡糖、大豆寡糖、乳蔗糖、木-寡糖、壳-寡糖、甘露-寡糖、阿拉伯-寡糖、唾液酸-寡糖、岩藻-寡糖、半乳-寡糖和龙胆-寡糖。在一些实施方案中，存在于营养组合物中的益生元的总量可为从约0.1 g/100 kcal至约1 g/100kcal。在某些实施方案中，存在于营养组合物中的益生元的总量可为从约0.3 g/100 kcal至约0.7 g/100 kcal。此外，营养组合物可包含含有聚葡萄糖(“PDX”)和/或半乳-寡糖(“GOS”)的益生元组分。在一些实施方案中，益生元组分包含至少20% GOS、PDX或其混合物。

如果PDX用于益生元组合物中，在一个实施方案中，PDX在营养组合物中的量可在从约0.1 g/100 kcal至约1 g/100 kcal的范围内。在另一个实施方案中，聚葡萄糖的量在从约0.2 g/100 kcal至约0.6 g/100 kcal的范围内。在还有的其它实施方案中，PDX在营养组合物中的量可以是从约0.1 mg/100 kcal至约0.5 mg/100 kcal。

在一个实施方案中，如果GOS用于益生元组合物，GOS在营养组合物中的量可以是从约0.1 g/100 kcal至约1 g/100 kcal。在另一个实施方案中，GOS在营养组合物中的量可以是从约0.2 g/100 kcal至约0.5 g/100 kcal。在其它实施方案中，GOS在营养组合物中的量可以是从约0.1 mg/100 kcal至约1.0 mg/100 kcal或从约0.1 mg/100 kcal至约0.5mg/100 kcal。

本公开内容的营养组合物也可含有长链多不饱和脂肪酸(“LCPUFA”)源。合适的LCPUFA包括，但不限于DHA、二十碳五烯酸(“EPA”)、ARA、亚油酸(18:2 n-6)、γ-亚麻酸(18:3 n-6)、在n-6途径中的二同型-γ-亚麻酸(20:3 n-6)、α-亚麻酸(18:3 n-3)、十八碳四烯酸(18:4 n-3)、二十碳四烯酸(20:4 n-3)、二十碳五烯酸(20:5 n-3)和二十二碳五烯酸(22:6 n-3)。

营养组合物中LCPUFA的量为至少约5 mg/100 kcal，且可从约5 mg/100 kcal至约100 mg/100 kcal，更优选从约10 mg/100 kcal至约50 mg/100 kcal变化。

LCPUFA源包括乳制品像蛋和黄油脂肪；海产油，例如鳕鱼、鲱鱼、沙丁鱼、金枪鱼和许多其它鱼；某些动物脂肪、猪油、牛油和微生物油如真菌和藻类油，或来自任何其它强化或未强化的来源，从中可获得LCPUFA并用于营养组合物。LCPUFA可以是经本领域已知的分离技术获得的复杂混合物的部分，所述分离技术旨在富集这样的混合物中的LCPUFA和LCPUFA的衍生物或前体。

LCPUFA可以以游离脂肪酸的酯；单-、二-和三-甘油酯；磷酸甘油酯(phosphoglyerides)，包括卵磷脂；和/或其混合物的形式在营养组合物中提供。此外，LCPUFA可以以磷脂，特别是磷脂酰胆碱的形式在营养组合物中提供。

在一个实施方案中，特别地，如果营养组合物是婴儿配方食品，营养组合物用DHA和ARA二者补充。在这个实施方案中，ARA:DHA的重量比可以是介于约1:3和约9:1之间。在一特别的实施方案中，ARA:DHA的重量比是从约1:2至约4:1。

在一些实施方案中，DHA有利地以至少约17 mg/100 kcal存在于营养组合物中，且可从约5 mg/100 kcal至约75 mg/100 kcal变化。在一些实施方案中，DHA以约10 mg/100kcal-约50 mg/100 kcal存在。

营养组合物可采用本领域已知的标准技术，补充含有DHA和/或ARA的油。例如，可通过替换正常存在于组合物中的等量的油(例如高油酸向日葵油)，将DHA和ARA加入组合物中。作为另一个实例，通过替换正常存在于没有DHA和ARA的组合物中的等量的其余的总脂肪混合物，可将含有DHA和ARA的油加入组合物中。

如果利用，DHA和/或ARA的来源可以是本领域已知的任何来源例如海产油、鱼油、单细胞油、蛋黄脂质和脑脂质。在一些实施方案中，DHA和ARA源自单细胞Martek油、DHASCO®和ARASCO®，或其变化。DHA和ARA可呈天然形式，条件是LCPUFA源的其余部分不导致对婴儿有任何重大的有害作用。或者，DHA和ARA可以精制形式使用。

在一个实施方案中，DHA和ARA源是美国专利号5,374,567、5,550,156和5,397,591中教导的单细胞油，其公开内容通过引用以其整体结合到本文中。然而，本公开内容不仅仅限于这些油。

而且，一些营养组合物的实施方案可模拟人类母乳的某些特征。然而，为满足一些受试者的特定营养需要，营养组合物可包含比人乳含有的更大量的一些营养成分。例如，营养组合物可包含比人类母乳含有的更大量的DHA。营养组合物的DHA的升高水平可以补偿现有营养DHA的缺乏。

在一些实施方案中，营养组合物可含有一种或多种益生菌。本领域已知的任何益生菌可以是这个实施方案中可接受的。在一特别的实施方案中，益生菌可以选自任何乳杆菌类(Lactobacillus species)、鼠李糖乳杆菌GG (Lactobacillus rhamnosus GG) (ATCC编号53103)、双歧杆菌类(Bifidobacterium species)、长双歧杆菌(Bifidobacterium longum) BB536 (BL999, ATCC: BAA-999)、长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)AH1206 (NCIMB: 41382)、短双歧杆菌(Bifidobacterium breve)AH1205 (NCIMB: 41387)、婴儿双岐杆菌(Bifidobacterium infantis)35624 (NCIMB: 41003)和动物双歧杆菌产乳酸亚种BB-12 (Bifidobacterium animalis subsp. lactis BB-12) (DSM No. 10140)或其任何组合。

如果包括在组合物中，益生菌的量可以从约1 x 10⁴至约1.5 x 10¹⁰ cfu的益生菌/100 kcal，更优选从约1 x 10⁶至约1 x 10⁹ cfu的益生菌/100 kcal变化。在某些其它实施方案中，益生菌的量可从约1 x 10⁷ cfu/100 kcal至约1 x 10⁸ cfu/100 kcal变化。

在一个实施方案中，益生菌可以是有活力的或无活力的。本文所用术语“有活力的”是指活的微生物。术语“无活力的”或“无活力的益生菌”意指无生命的益生菌微生物、其细胞组分和/或其代谢物。所述无活力的益生菌可以被热杀或以别的方式灭活，但它们保留有利地影响宿主健康的能力。可用于本公开内容的益生菌可以是天然-存在的、合成的或通过生物体的基因操作开发的，无论这种新的来源是现在已知的还是以后开发的。

令人惊讶地，当包括在本文描述的蛋白等价物源中的肽组分结合LGG + Lipil(ARA/DHA)补剂测试时，在肥胖症的实验动物模型中观察到体重增加的减少。此外，给予本文描述的蛋白等价物源中的肽组分与LGG + Lipil (ARA/DHA)，表现出对体重组成的有益作用。例如，有总脂肪质量的减少并观察到较低的胆固醇水平。

因此，在一些实施方案中，营养组合物包含肽组分、LGG和至少一种选自ARA或DHA的长链多不饱和脂肪酸。不受任何特殊的理论的束缚，相信这些要素的组合提供协同健康益处，例如促进脂肪丢失和较低胆固醇水平。

在一些实施方案中，本公开内容的营养组合物可包含来自益生菌分批培养过程的后指数增长期的培养上清液(此处称为“培养上清液”)，而不是益生菌本身；在特定的实施方案中，益生菌是LGG。分批培养上清液(其也可称为“用尽的培养基”)可具有对抗病原体感染，包括阪崎肠杆菌(C. sakazakii)感染的保护作用。特别地，收获的培养上清液可防止阪崎肠杆菌对器官例如脑的入侵并减少与阪崎肠杆菌有关的死亡率。

在一些实施方案中，营养组合物包含来自益生菌分批培养过程的后指数增长期的培养上清液，用于治疗或预防病原体感染。在某些实施方案中，益生菌是LGG，和病原体是阪崎肠杆菌。

不希望受理论的束缚，相信培养上清液的活性可归因于如在LGG的分批培养的指数(或“log”)期的后阶段发现的释放到培养基中的组分(包括蛋白质材料，和可能包括(exo)多糖材料)的混合物。培养上清液的化学组成被认为是各种分子量的多种氨基酸、寡肽和多肽和蛋白质的混合物。培养上清液可还包含多糖结构和/或核苷酸。在一些实施方案中，培养上清液属于完全的，即未分级的培养上清液。此外，在一些实施方案中，培养上清液属于完全的，即未分级的培养上清液。

分批培养的细菌中公认的阶段是技术人员已知的。这些是“lag”、“log” (“对数的”或“指数的”)、“静止”和“死亡” (或“对数下降”)期。在活菌存在的所有阶段中，细菌从培养基中代谢营养物，并将材料分泌(施加、释放)到培养基中。在生长阶段的给定的时间点分泌的材料的组成一般是不可预测的。

在一些实施方案中，依据本公开内容和/或其实施方案的组合物可通过包括以下步骤的方法获得：(a) 使益生菌例如LGG使用分批过程在合适的培养基中培养；(b) 在培养步骤的后指数生长期收获培养上清液，该期参照分批-培养过程的滞后期和静止期之间的后半段时间限定；(c) 任选地从上清液除去低分子量成分以保留5千道尔顿(kDa)以上或甚至在6kDa以上分子量的成分；(d) 从培养上清液除去液体内容物以获得组合物。

在本公开内容及其实施方案中，从后指数期收获分泌的材料。后指数期在中指数期(其为指数期持续时间的中段时间，因此将后指数期称为滞后期和静止期之间的后半段时间)之后的时间发生。具体而言，本文使用术语“后指数期”是指分批-培养过程的滞后期和静止期之间时间的后四分之一部分。在本公开内容的一些实施方案中，收获培养上清液是在指数期持续时间的75%-85%的时间点，和最优选是在指数期中流逝的约5/6的时间。

术语“培养(cultivation)”或“培养(culturing)”指微生物(在该情况下为LGG)在合适的培养基上或培养基中的繁殖。这样的培养基可以是多种多样的，并且特别是液体肉汤，如本领域所惯用的。一种优选的肉汤，例如，是如一般用于乳酸菌培养的MRS肉汤。MRS肉汤一般包含聚山梨醇酯、乙酸盐、镁和锰(已知它们用作乳酸菌的特殊生长因子)以及富含营养物的基质。典型的组合物包含(以g/升计的量)：来自酪蛋白的蛋白胨10.0；肉提取物8.0；酵母提取物4.0；D(+)-葡萄糖20.0；磷酸氢二钾2.0；Tween® 80 1.0；柠檬酸三铵2.0；乙酸钠5.0；硫酸镁0.2；硫酸锰0.04。

在一些实施方案中，本公开内容的培养上清液可以包括在为婴儿配方食品的营养组合物中。收获分泌的细菌产物带来一个问题，即培养基不能容易地剥脱不期望的组分。这尤其涉及相对脆弱的受试者的营养制品，例如婴儿配方食品或临床营养物。如果首先从培养上清液分离、纯化特定组分，然后应用于营养制品，则这个问题不会产生。然而，利用更完全的培养上清液是合乎需要的。这将适合提供更好反映益生菌(即LGG)的天然作用的组合物。然而，人们不能仅使用培养上清液本身作为要特别用于婴儿配方食品等的无活力益生菌材料的基础。

在一些实施方案中，从LGG培养收获的培养上清液物不含有不需要的组分(因为可存在于培养基中)，或一般在营养组合物例如婴儿配方食品中为常规的组分。关于通常存在于MRS肉汤中的聚山梨醇酯，用于细菌培养的培养基可包括例如基于聚乙氧基化脱水山梨醇和油酸的乳化的非-离子型表面活性剂(通常作为Tween®聚山梨醇酯，例如Tween® 80获得)。虽然这些表面活性剂频繁地存在于食品，如冰淇淋中，且一般认为是安全的，但它们并不是在所有的司法管辖区内都被认为是可取的或甚至对用于相对脆弱的受试者的营养产品，例如婴儿配方食品或临床营养物是可接受的。

因此，在一些实施方案中，本公开内容利用其中前述聚山梨醇酯可以被避免的培养基。为此，本公开内容的培养基缺乏聚山梨醇酯例如Tween 80。在本公开内容的优选实施方案和/或其实施方案中，培养基可包含选自油酸、亚麻仁油、橄榄油、油菜籽油、向日葵油及其混合物的油性成分。应该理解，如果聚山梨醇酯表面活性剂的存在基本或完全被避免，则获得油性成分的完全利益。

在一些实施方案中，培养上清液可具有中性pH，例如pH 5和pH 7之间的pH，优选pH6。

除了前述，还应该注意到，乳酸菌，包括LGG的分批培养是本领域技术人员可获得的普通常识。因此这些方法不需要在此进一步的说明。本公开内容的培养上清液可通过任何已知的用于从细菌培养物分离培养上清液的技术收获。这样的技术是本领域熟知的并包括，例如，离心、过滤、沉降等。

本公开内容的营养组合物可以本领域已知的任何形式提供，例如粉末、凝胶剂、混悬剂、糊剂、固体剂、液体剂、液体浓缩物、可复溶奶粉代用品或即用制品。在某些实施方案中，营养组合物可包含营养补剂、儿童营养制品、婴儿配方食品、人乳强化剂、成长乳或设计用于婴儿或儿童受试者的任何其它的营养组合物。本公开内容的营养组合物包括例如可口服摄入的促进健康的物质，包括例如食品、饮料、片剂、胶囊剂和散剂。而且，可使本公开内容的营养组合物标准化至特定的含热量，可作为即用制品提供，或可以浓缩形式提供。在一些实施方案中，营养组合物呈粉末形式，其粒径范围为5 μm-1500 μm，更优选范围为10 μm-300 μm。

如果营养组合物呈现即用制品的形式，营养组合物的渗透压可介于约100和约1100 mOsm/kg水，更通常在约200至约700 mOsm/kg水之间。

在某些实施方案中，营养组合物是低变应原的。在其它实施方案中，营养组合物是犹太教规食品(kosher)和/或伊斯兰教规食品(halal)。在更进一步的实施方案中，营养组合物含有非-遗传修饰的成分。在一个实施方案中，营养制剂是无蔗糖的。营养组合物也可以是无乳糖的。在其它实施方案中，营养组合物不含有任何中-链甘油三酯油。在一些实施方案中，组合物不存在角叉菜胶。在其它实施方案中，营养组合物不含所有胶质。

本公开内容的营养组合物不限于包含本文特别列出的营养物的组合物。为了满足营养需要的目的和/或为了使受试者的营养状态最优化，任何营养物可以作为组合物的部分递送。

此外，在一些实施方案中，营养组合物是营养完全的，含有为受试者营养物的唯一来源的合适类型和量的脂质、碳水化合物、蛋白质、维生素和矿物质。事实上，营养组合物可任选地包含任何数目的蛋白质、肽、氨基酸、脂肪酸、益生菌和/或它们的代谢副产物、益生元、碳水化合物和任何其它营养物或可提供给受试者许多营养和生理学益处的其它化合物。此外，本公开内容的营养组合物可包含香料、增味剂、甜味剂、色素、维生素、矿物质、治疗成分、功能食物成分、食物成分、加工成分或其组合。

本公开内容的营养组合物可被标准化为特别的卡路里含量，它可以作为即用制品提供，或可以作为浓缩的形式提供。

在一些实施方案中，本公开内容的营养组合物是成长乳。成长乳为预期用于1岁以上年龄(通常1-3岁年龄、4-6岁年龄或1-6岁年龄)儿童的强化型基于乳的饮料。它们不是医用食品，且无意作为代餐或补充剂以解决特定的营养缺乏。取而代之的是，设计成长乳以期用作不同膳食的补充，为儿童获得所有的必需维生素和矿物质、常量营养物加其它功能性膳食组分(例如具有声称的促进健康性质的非必需营养物)的持续的每日摄取量提供额外的保障。

依据本公开内容的营养组合物的确切组成在市场之间可变化，这取决于地方法规和目标人群的膳食摄入量信息。在一些实施方案中，依据本公开内容的营养组合物包含乳蛋白源，例如全脂乳或脱脂乳，加上实现所需感官性能的添加的糖和甜味剂和添加的维生素和矿物质。脂肪组合物通常源自乳原材料。可设计总蛋白质的指标以与人乳、牛乳或下限值的相符。通常确定总的碳水化合物的指标以提供尽可能少的添加糖(例如蔗糖或果糖)以实现可接受的味道。通常，以符合地方性牛乳的营养基值的水平添加维生素A、钙和维生素D。此外，在一些实施方案中，可以提供膳食参考摄入量(DRI)的约20%或每份每日值(DV)的约20%的水平，添加维生素和矿物质。而且，根据已确定的预期人群的营养需求、原料基值和地区法规，营养值在市场间可变化。

还可以足以供应受试者每日营养需要的量将一种或多种维生素和/或矿物质加入营养组合物中。本领域普通技术人员要了解，维生素和矿物质需要将根据例如儿童的年龄而改变。例如，与年龄介于1岁和13岁之间的儿童相比，婴儿可具有不同的维生素和矿物质需要。因此，实施方案无意将营养组合物限于具体的年龄组，而是提供一定范围的可接受的维生素和矿物质组分。

在为儿童提供营养组合物的实施方案中，组合物可任选地包括但不限于下列维生素或其衍生物的一种或多种：维生素B₁ (硫胺、焦磷酸硫胺、TPP、三磷酸硫胺、TTP、盐酸硫胺、一硝酸硫胺)、维生素B₂ (核黄素、黄素单核苷酸、FMN、黄素腺嘌呤二核苷酸、FAD、核黄素(lactoflavin)、核黄素(ovoflavin))、维生素B₃ (烟酸、尼克酸、尼克酰胺、烟酰胺、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸、NAD、烟酸单核苷酸、NicMN、吡啶-3-甲酸)、维生素B₃-前体色氨酸、维生素B₆ (吡哆醇、吡哆醛、吡哆胺、盐酸吡哆醇)、泛酸(泛酸盐、泛醇)、叶酸盐(叶酸、叶酸(folacin)、蝶酰谷氨酸)、维生素B₁₂ (钴胺素、甲基钴胺素、脱氧腺苷钴胺素、氰钴胺、羟钴胺素、腺苷钴胺素)、生物素、维生素C (抗坏血酸)、维生素A (视黄醇、乙酸视黄酯、棕榈酸视黄酯、与其它长链脂肪酸所成的视黄酯、视黄醛、视黄酸、视黄醇酯)、维生素D (骨化醇、胆骨化醇、维生素D₃、1,25,-二羟基维生素D)、维生素E (α-生育酚、α-生育酚乙酸酯、α-生育酚琥珀酸酯、α-生育酚烟酸酯、α-生育酚)、维生素K (维生素K₁、叶绿醌、萘醌、维生素K₂、甲基萘醌-7、维生素K₃、甲基萘醌-4、甲萘醌、甲基萘醌-8、甲基萘醌-8H、甲基萘醌-9、甲基萘醌-9H、甲基萘醌-10、甲基萘醌-11、甲基萘醌-12、甲基萘醌-13)、胆碱、肌醇、β-胡萝卜素及其任何组合。

在提供儿童的营养制品(例如成长乳)的实施方案中，所述组合物可任选地包括，但不限于，以下矿物质或其衍生物的一种或多种：硼、钙、乙酸钙、葡糖酸钙、氯化钙、乳酸钙、磷酸钙、硫酸钙、氯化物、铬、氯化铬、吡啶甲酸铬、铜、硫酸铜(copper sulfate)、葡糖酸铜、硫酸铜(cupric sulfate)、氟化物、铁、羰基铁、三价铁、富马酸亚铁、正磷酸铁、铁研制剂、多糖铁、碘化物、碘、镁、碳酸镁、氢氧化镁、氧化镁、硬脂酸镁、硫酸镁、锰、钼、磷、钾、磷酸钾、碘化钾、氯化钾、乙酸钾、硒、硫、钠、多库酯钠、氯化钠、硒酸钠、钼酸钠、锌、氧化锌、硫酸锌及其混合物。矿物质化合物的非限制性示例性衍生物包括任何矿物质化合物的盐、碱性盐、酯和螯合物。

可按以下盐的形式将矿物质加入成长乳或其它儿童营养组合物中：例如磷酸钙、甘油磷酸钙、柠檬酸钠、氯化钾、磷酸钾、磷酸镁、硫酸亚铁、硫酸锌、硫酸铜、硫酸锰和亚硒酸钠。可加入本领域已知的其它维生素和矿物质。

在一个实施方案中，儿童的营养组合物可含有任何指定国家最大膳食推荐的每份约10和约50%之间，或一组国家平均膳食推荐的每份约10和约50%之间的维生素A、C和E、锌、铁、碘、硒和胆碱。在另一个实施方案中，儿童的营养组合物可供应任何指定国家最大膳食推荐的每份约10-30%，或一组国家平均膳食推荐的每份约10-30%的B-维生素。在又一个实施方案中，儿童营养制品中的维生素D、钙、镁、磷和钾的水平可与存在于乳中的平均水平一致。在其它实施方案中，儿童营养组合物中的其它营养物的每份量可以任何指定国家最大膳食推荐的约20%，或一组国家平均膳食推荐的约20%存在。

本公开内容的营养组合物可任选包括下列矫味剂的一种或多种，包括但不限于调味提取物、挥发油、可可或巧克力调味料、花生酱调味料、饼干屑、香草或任何可市售获得的调味料。有用的矫味剂的实例包括但不限于纯茴香提取物、仿制香蕉提取物、仿制樱桃提取物、巧克力提取物、纯柠檬提取物、纯橙提取物、纯薄荷提取物、蜂蜜、仿制菠萝提取物、仿制朗姆酒提取物、仿制草莓提取物、葡萄和/或葡萄籽提取物、苹果提取物、越橘提取物或香草提取物；或挥发油，例如蜜蜂花油、月桂油、香柠檬油、雪松木油、樱桃油、肉桂油、丁子香油或薄荷油；花生酱、巧克力调味料、香草饼干屑、奶油糖果、太妃糖及其混合物。矫味剂的量可根据所用的矫味剂而大幅变化。可按本领域已知的，选择矫味剂的类型和量。

本公开内容的营养组合物可任选地包含可为最终产品的稳定性而加入的一种或多种乳化剂。合适的乳化剂的实例包括，但不限于，卵磷脂(例如，来自蛋或大豆或任何其它植物和动物来源)、α乳白蛋白和/或甘油单酯和甘油二酯，及其混合物。其它乳化剂对技术人员而言是显而易见的和合适的乳化剂的选择将部分取决于制剂和最终产品。

本公开内容的营养组合物可任选地包含一种或多种也可加入以延长产品保质期的防腐剂。合适的防腐剂包括，但不限于，山梨酸钾、山梨酸钠、苯甲酸钾、苯甲酸钠、EDTA二钠钙，及其混合物。

本公开内容的营养组合物可任选地包括一种或多种稳定剂。用于实施本公开内容的营养组合物的合适稳定剂包括但不限于阿拉伯树胶、茄替胶、刺梧桐树胶、西黄蓍胶、琼脂、红藻胶、瓜尔胶、吉兰糖胶、刺槐豆胶、果胶、低甲氧基果胶、明胶、微晶纤维素、CMC (羧甲基纤维素钠)、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羟丙基纤维素、DATEM (甘油单酯和甘油二酯的二乙酰基酒石酸酯)、葡聚糖、角叉菜胶、CITREM及其混合物。

本公开还提供通过提供营养组合物促进和/或维持健康体重的方法，所述营养组合物包括包含本文公开的肽组分的蛋白等价物源。在一些实施方案中，20%-80%的蛋白等价物源包含肽组分和20%-80%的蛋白等价物源包含完整蛋白、部分水解蛋白或其组合。

还提供的是通过在目标受试者中刺激脂连蛋白水平促进健康体重的方法。方法包括提供给目标受试者包含蛋白等价物源的营养组合物，所述蛋白等价物源包含本文公开的肽组分。

脂连蛋白是一种主要由脂肪组织合成和分泌的脂肪细胞因子(adipocytokin)。在结构上，脂连蛋白是247个氨基酸蛋白质的单体，其形成三聚体，后者进一步聚合为大小在180kDa (六聚体；LMW)或400-600kDa (16-聚体；HMW)之间变化的较大的聚合物复合体。

脂连蛋白具有几种有益的和保护作用。这些作用包括抗炎、血管保护和抗-糖尿病作用。而且，研究提示脂连蛋白可在代谢综合征和冠状动脉疾病的病理生理学中起重要作用(Huang, K.等, “在非糖尿病青少年女性中的血浆脂连蛋白水平和血压(PlasmaAdiponectin Levels and Blood Pressures in Nondiabetic Adolescent Females)”，The Journal of Clinical Endocrinology & Metabolism, 88(9): 4130-4134)。在人体研究中，脂连蛋白的血浆水平被一致报告与体重指数(BMI)、腰围、血浆葡萄糖、胰岛素和甘油三酯呈负相关，但与高-密度-脂蛋白胆固醇(HDL)呈正相关。

脂连蛋白在人血中的水平在5-20 µg/ml之间且在患有胰岛素抵抗和2型糖尿病的受试者中有所下降，确实，脂连蛋白-缺乏的小鼠表现出糖尿病。而且，脂连蛋白已表明在实验模型中增加胰岛素敏感性。给予脂连蛋白引起降低葡萄糖的作用和改善胰岛素抵抗。因此对增加人血中脂连蛋白的水平是有益的。

因此，本公开内容包括通过给予目标受试者包括含有本文描述的肽组分的蛋白等价物源的营养组合物，增加目标受试者中脂连蛋白的血浆浓度的方法。在一些实施方案中，该方法包括通过给予本公开内容的营养组合物(其包含本文描述的肽组分)，增加目标受试者中脂连蛋白的血浆浓度至介于约5-20 µg/ml之间。

在一些实施方案中，目标受试者可以是儿童受试者。此外，在一个实施方案中，提供给儿童受试者的营养组合物可以是婴儿配方食品。本文描述并加入到婴儿配方食品中的肽组分可以选自特定来源，且其浓度可以被调节以使健康益处最大化。在该方法的另一个实施方案中，包含本文公开的肽组分的营养组合物是成长乳。

在营养组合物是婴儿配方食品的实施方案中，组合物可有利地促进健康身体、健康身体脂肪质量、刺激脂连蛋白生产、降低总胆固醇水平，或其任何组合。更特别地，在一些实施方案中，消费前述婴儿配方食品的婴儿在一些实施方案中可在整个儿童期和进入成人期经历这些有益作用。类似地，当营养组合物是成长乳时，摄取成长乳的儿童可在进入成人期时，以及在儿童期间经历这些有益作用。

实施例3

实施例3描述将皮下脂肪组织暴露于某个酪蛋白水解产物部分的方法。

从经受整形手术的健康的瘦或中等超重的妇女获得皮下脂肪组织。手术由海因里希海涅大学(Heinrich-Heine-University) (Düsseldorf, 德国)伦理委员会批准。经胶原酶消化法分离前脂肪细胞(Preadipocyte)。使分离的细胞颗粒悬浮于补充有10% FCS的DMEM/F12培养基中，分别接种于6-孔或12-孔培养皿中，并于37℃伴有5% CO₂下维持。达到汇合(分化的第0天)后，细胞培养物在脂肪细胞分化培养基(DMEM/F12，33 mM生物素，17mmol/l d-泛酸(d-panthothenic-acid)，66 nM胰岛素，1 nM三碘-L-甲腺原氨酸(triiodo-L-thyronine)，100 nM可的松，10 mg/ml脱铁运铁蛋白，50 mg/ml庆大霉素，0.25 mg/ml两性霉素B，15 mM HEPES，14 nM NaHCO₃，pH 7.4)中用曲格列酮(5 µM)培养3天。一旦分化开始，使细胞在脂肪细胞分化培养基中进一步培养14天的总分化期，每2-3天更换培养基。

分化期(14天)后，脂肪细胞用不同的浓度(分别为0.01%、0.1%和1%)的广泛酪蛋白水解产物攻击24小时。

对分离的人前脂肪细胞仔细地计数并每孔接种相同的细胞数。分化期后，细胞用0.01%、0.1%和1%的酪蛋白水解产物处理。24小时后，收集上清液并于-20℃贮存供用ELISA试剂盒分析脂肪细胞因子(adipokine)含量。

ELISA试剂盒包括具有孔的培养板，所述孔用针对人脂连蛋白的第一抗体包被。加入上清液并在适宜的孵育时间后，洗涤样品以使仅有结合于抗体的脂肪细胞因子留下。将另一种含有与HRP缀合的第二抗体的缓冲液加入到各孔中。在指定的孵育时间后，经洗涤除去过量的第二抗体，而剩余的结合于脂肪细胞因子-抗体复合物的HRP在加入TMB缓冲液时反应。通过加入酸性溶液停止反应并测量反应的黄色。吸光度与指示所述脂肪细胞因子存在的黄色成比例。通过对标准品的浓度对比其吸光度作图获得标准曲线，从标准曲线内推，计算样品中脂肪细胞因子的浓度。

试剂盒包括用来计算脂连蛋白浓度的人重组脂连蛋白的标准品。此外，试剂盒包括具有已知浓度的质量控制高和低标准品。用于脂连蛋白ELISA的试剂盒识别天然和重组人脂连蛋白(仅形成全长的突变-修饰的三聚体和球状结构域)。

一旦孵育条件有效，和单独的乳部分的非特异性效应被弃去，发明人评价先前用酪蛋白水解产物刺激的脂肪细胞的上清液中的脂连蛋白分泌。

酪蛋白水解产物部分(“APZ1”)触发脂连蛋白分泌的1%的显著上调(290.6 ±56.6%对比对照品，见图1)，遵循剂量-依赖性趋势。APZ1部分的效应不依赖于单个氨基酸混合物(见代表单个氨基酸混合物的APAA6)，后者对脂连蛋白分泌未发挥任何显著的作用(见图1)。

实施例4

酪蛋白水解产物(APZ-1)对脂连蛋白分泌和细胞内表达的作用在原代人脂肪细胞中评价。

如在图2中所述，当与LCPUFA (在APZ-1的不存在下于24小时测定时)比较时，APZ-1 (1%)与ARA:DHA (100μM:50μM)的组合显示不提高原代人脂肪细胞的脂连蛋白分泌。然而，图3显示，与LC-PUFA (在APZ-1的不存在下于24小时测定时)的作用比较，APZ-1与ARA:DHA (100μM:50μM)的组合协同地增加人原代脂肪细胞的脂连蛋白的细胞内表达。由于在24小时时发现脂连蛋白表达，因此脂肪细胞的脂连蛋白分泌在后来的时间点可能是增加的。

实施例5

评价补充有酪蛋白水解产物和DHA/ARA的高脂肪饮食(HFD)，同时经口管饲给予LGG对CVD和2型糖尿病和脂肪组织炎性状态的危险因素发展的影响。低脂肪饮食(LFD)和高脂肪饮食(HFD)喂养的小鼠用作参照。以上制剂的作用与HFD + 磷酸盐缓冲的盐水(PBS)管饲对照组比较，以控制用LGG的重复经口管饲处理。

与HFD和PBS管饲对照小鼠比较，用补充有酪蛋白水解产物和DHA/ARA的高脂肪饮食伴有LGG管饲(NHLL)处理小鼠，显示出有益作用。如在图4中所示，给予补充有NHLL的高脂肪饮食的小鼠证实血清脂连蛋白水平增加。另外的特殊有益作用包括降低体重的增加(尽管增加的食物摄入量)，降低体重的增加(尽管增加的食物摄入量)，身体肥胖强烈地减少，降低空腹胰岛素，降低血浆胆固醇，降低血浆甘油三酯，降低血清淀粉样蛋白A (SAA；全身炎症标志物)，降低微量白蛋白脲(提示改善肾功能)，降低肠系膜和腹股沟脂肪团，强烈减少附睾脂肪炎症，降低肝质量和循环丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平，改善组织病变，和减少炎症。

制剂实施例

表3提供包含5种选自表1的肽和3种选自表2的肽的肽组分的实施例实施方案，其可包含本文描述的肽组分。

表3. 实施例肽组分的营养分布

用于肽组分的经选择的肽的实例
	SEQ ID NO 5
SEQ ID NO 24
	SEQ ID NO 33
SEQ ID NO 56
	SEQ ID NO 64
SEQ ID NO 13
	SEQ ID NO 24
SEQ ID NO 60

表4提供包含5种选自表1的肽、3种选自表2的肽和10种选自表1的另外的肽的肽组分的实施例实施方案，其可包含本文描述的肽组分。

表4. 实施例肽组分的营养分布

用于肽组分的经选择的肽的实例
	SEQ ID NO 13
SEQ ID NO 24
	SEQ ID NO 60
SEQ ID NO 5
	SEQ ID NO 11
SEQ ID NO 22
	SEQ ID NO 25
SEQ ID NO 33
	SEQ ID NO 45
SEQ ID NO 46
	SEQ ID NO 47
SEQ ID NO 48
	SEQ ID NO 52
SEQ ID NO 34
	SEQ ID NO 36
SEQ ID NO 61
	SEQ ID NO 62
SEQ ID NO 64

表5提供依据本公开内容的营养组合物的实施例实施方案，并描述包括在每100kcal份中的各成分的量。

表5. 实施例营养组合物的营养分布

本说明书引用的所有参考文献，包括而不限于所有的论文、出版物、专利、专利申请、简报、教科书、报告、底稿、小册子、书籍、互联网文章、杂志文章、期刊等，通过引用以其整体结合到本说明书中。本文的参考文献的阐述仅仅意在概括其作者所做出的断言，并非承认任何参考文献构成先有技术。申请人保留对所引用的参考文献的准确性和相关性提出异议的权利。

虽然使用特定术语、装置和方法已描述了本公开内容的实施方案，但是这类描述只用于说明目的。所用词汇是描述词汇而不是限制词汇。要了解，在不偏离随附权利要求书中阐述的本公开内容的精神和范围的情况下，本领域普通技术人员可进行变动和改变。另外，应了解，不同实施方案的方面可全部或部分互换。例如，在举例说明依据那些方法制备的市售无菌液体营养补剂的生产方法的同时，考虑了其它的应用。因此，随附权利要求书的精神和范围不应限于其中所含形式的描述。

<110> MJN 美国控股有限责任公司

<120> 含有具有脂连蛋白刺激特性的肽组分的营养组合物及其用途

<130> MJE00374NP

<160> 64

<170> PatentIn version 3.5

<210> 1

<211> 8

<212> PRT

<213> 牛

<400> 1

Ala Ile Asn Pro Ser Lys Glu Asn

1 5

<210> 2

<211> 5

<212> PRT

<213> 牛

<400> 2

Ala Pro Phe Pro Glu

1 5

<210> 3

<211> 6

<212> PRT

<213> 牛

<400> 3

Asp Ile Gly Ser Glu Ser

1 5

<210> 4

<211> 7

<212> PRT

<213> 牛

<400> 4

Asp Lys Thr Glu Ile Pro Thr

1 5

<210> 5

<211> 5

<212> PRT

<213> 牛

<400> 5

Asp Met Glu Ser Thr

1 5

<210> 6

<211> 4

<212> PRT

<213> 牛

<400> 6

Asp Met Pro Ile

1

<210> 7

<211> 4

<212> PRT

<213> 牛

<400> 7

Asp Val Pro Ser

1

<210> 8

<211> 7

<212> PRT

<213> 牛

<400> 8

Glu Thr Ala Pro Val Pro Leu

1 5

<210> 9

<211> 6

<212> PRT

<213> 牛

<400> 9

Phe Pro Gly Pro Ile Pro

1 5

<210> 10

<211> 7

<212> PRT

<213> 牛

<400> 10

Phe Pro Gly Pro Ile Pro Asn

1 5

<210> 11

<211> 4

<212> PRT

<213> 牛

<400> 11

Gly Pro Phe Pro

1

<210> 12

<211> 4

<212> PRT

<213> 牛

<400> 12

Gly Pro Ile Val

1

<210> 13

<211> 9

<212> PRT

<213> 牛

<400> 13

Ile Gly Ser Glu Ser Thr Glu Asp Gln

1 5

<210> 14

<211> 8

<212> PRT

<213> 牛

<400> 14

Ile Gly Ser Ser Ser Glu Glu Ser

1 5

<210> 15

<211> 9

<212> PRT

<213> 牛

<400> 15

Ile Gly Ser Ser Ser Glu Glu Ser Ala

1 5

<210> 16

<211> 6

<212> PRT

<213> 牛

<400> 16

Ile Asn Pro Ser Lys Glu

1 5

<210> 17

<211> 5

<212> PRT

<213> 牛

<400> 17

Ile Pro Asn Pro Ile

1 5

<210> 18

<211> 6

<212> PRT

<213> 牛

<400> 18

Ile Pro Asn Pro Ile Gly

1 5

<210> 19

<211> 9

<212> PRT

<213> 牛

<400> 19

Ile Pro Pro Leu Thr Gln Thr Pro Val

1 5

<210> 20

<211> 4

<212> PRT

<213> 牛

<400> 20

Ile Thr Ala Pro

1

<210> 21

<211> 4

<212> PRT

<213> 牛

<400> 21

Ile Val Pro Asn

1

<210> 22

<211> 7

<212> PRT

<213> 牛

<400> 22

Lys His Gln Gly Leu Pro Gln

1 5

<210> 23

<211> 5

<212> PRT

<213> 牛

<400> 23

Leu Asp Val Thr Pro

1 5

<210> 24

<211> 6

<212> PRT

<213> 牛

<400> 24

Leu Glu Asp Ser Pro Glu

1 5

<210> 25

<211> 5

<212> PRT

<213> 牛

<400> 25

Leu Pro Leu Pro Leu

1 5

<210> 26

<211> 6

<212> PRT

<213> 牛

<400> 26

Met Glu Ser Thr Glu Val

1 5

<210> 27

<211> 11

<212> PRT

<213> 牛

<400> 27

Met His Gln Pro His Gln Pro Leu Pro Pro Thr

1 5 10

<210> 28

<211> 5

<212> PRT

<213> 牛

<400> 28

Asn Ala Val Pro Ile

1 5

<210> 29

<211> 5

<212> PRT

<213> 牛

<400> 29

Asn Glu Val Glu Ala

1 5

<210> 30

<211> 6

<212> PRT

<213> 牛

<400> 30

Asn Gln Glu Gln Pro Ile

1 5

<210> 31

<211> 5

<212> PRT

<213> 牛

<400> 31

Asn Val Pro Gly Glu

1 5

<210> 32

<211> 6

<212> PRT

<213> 牛

<400> 32

Pro Phe Pro Gly Pro Ile

1 5

<210> 33

<211> 6

<212> PRT

<213> 牛

<400> 33

Pro Gly Pro Ile Pro Asn

1 5

<210> 34

<211> 8

<212> PRT

<213> 牛

<400> 34

Pro His Gln Pro Leu Pro Pro Thr

1 5

<210> 35

<211> 5

<212> PRT

<213> 牛

<400> 35

Pro Ile Thr Pro Thr

1 5

<210> 36

<211> 4

<212> PRT

<213> 牛

<400> 36

Pro Asn Pro Ile

1

<210> 37

<211> 6

<212> PRT

<213> 牛

<400> 37

Pro Asn Ser Leu Pro Gln

1 5

<210> 38

<211> 8

<212> PRT

<213> 牛

<400> 38

Pro Gln Leu Glu Ile Val Pro Asn

1 5

<210> 39

<211> 7

<212> PRT

<213> 牛

<400> 39

Pro Gln Asn Ile Pro Pro Leu

1 5

<210> 40

<211> 6

<212> PRT

<213> 牛

<400> 40

Pro Val Leu Gly Pro Val

1 5

<210> 41

<211> 4

<212> PRT

<213> 牛

<400> 41

Pro Val Pro Gln

1

<210> 42

<211> 5

<212> PRT

<213> 牛

<400> 42

Pro Val Val Val Pro

1 5

<210> 43

<211> 6

<212> PRT

<213> 牛

<400> 43

Pro Val Val Val Pro Pro

1 5

<210> 44

<211> 11

<212> PRT

<213> 牛

<400> 44

Ser Ile Gly Ser Ser Ser Glu Glu Ser Ala Glu

1 5 10

<210> 45

<211> 7

<212> PRT

<213> 牛

<400> 45

Ser Ile Ser Ser Ser Glu Glu

1 5

<210> 46

<211> 11

<212> PRT

<213> 牛

<400> 46

Ser Ile Ser Ser Ser Glu Glu Ile Val Pro Asn

1 5 10

<210> 47

<211> 7

<212> PRT

<213> 牛

<400> 47

Ser Lys Asp Ile Gly Ser Glu

1 5

<210> 48

<211> 6

<212> PRT

<213> 牛

<400> 48

Ser Pro Pro Glu Ile Asn

1 5

<210> 49

<211> 7

<212> PRT

<213> 牛

<400> 49

Ser Pro Pro Glu Ile Asn Thr

1 5

<210> 50

<211> 7

<212> PRT

<213> 牛

<400> 50

Thr Asp Ala Pro Ser Phe Ser

1 5

<210> 51

<211> 5

<212> PRT

<213> 牛

<400> 51

Thr Glu Asp Glu Leu

1 5

<210> 52

<211> 6

<212> PRT

<213> 牛

<400> 52

Val Ala Thr Glu Glu Val

1 5

<210> 53

<211> 5

<212> PRT

<213> 牛

<400> 53

Val Leu Pro Val Pro

1 5

<210> 54

<211> 4

<212> PRT

<213> 牛

<400> 54

Val Pro Gly Glu

1

<210> 55

<211> 6

<212> PRT

<213> 牛

<400> 55

Val Pro Gly Glu Ile Val

1 5

<210> 56

<211> 6

<212> PRT

<213> 牛

<400> 56

Val Pro Ile Thr Pro Thr

1 5

<210> 57

<211> 4

<212> PRT

<213> 牛

<400> 57

Val Pro Ser Glu

1

<210> 58

<211> 9

<212> PRT

<213> 牛

<400> 58

Val Val Pro Pro Phe Leu Gln Pro Glu

1 5

<210> 59

<211> 5

<212> PRT

<213> 牛

<400> 59

Val Val Val Pro Pro

1 5

<210> 60

<211> 6

<212> PRT

<213> 牛

<400> 60

Tyr Pro Phe Pro Gly Pro

1 5

<210> 61

<211> 8

<212> PRT

<213> 牛

<400> 61

Tyr Pro Phe Pro Gly Pro Ile Pro

1 5

<210> 62

<211> 9

<212> PRT

<213> 牛

<400> 62

Tyr Pro Phe Pro Gly Pro Ile Pro Asn

1 5

<210> 63

<211> 5

<212> PRT

<213> 牛

<400> 63

Tyr Pro Ser Gly Ala

1 5

<210> 64

<211> 5

<212> PRT

<213> 牛

<400> 64

Tyr Pro Val Glu Pro

1 5

Claims (18)

1.一种营养组合物，其包含：

(i) 碳水化合物源；

(ii) 脂肪源；和

(iii) 蛋白等价物源，

其中

a) 20%-80%的蛋白等价物源包括包含SEQ ID NO 4、SEQ ID NO 13、SEQ ID NO 17、SEQID NO 21、SEQ ID NO 24、SEQ ID NO 30、SEQ ID NO 31、SEQ ID NO 32、SEQ ID NO 51、SEQID NO 57、SEQ ID NO 60和SEQ ID NO 63的肽组分；和

b) 20%-80%的蛋白等价物源包含完整蛋白、部分水解蛋白或其组合。

2.权利要求1的营养组合物，其中肽组分以从约0.2 g/100 kcal至约5.6 g/100 kcal的量存在。

3.权利要求1的营养组合物，其中肽组分还包含至少10种选自表1的另外的肽。

4.权利要求1的营养组合物，其中蛋白等价物源包含具有水解度少于40%的部分水解蛋白。

5.权利要求1的营养组合物，其还包含至少一种长链多不饱和脂肪酸。

6.权利要求5的营养组合物，其中至少一种长链多不饱和脂肪酸选自二十二碳六烯酸和花生四烯酸。

7.权利要求1的营养组合物，其还包含得自益生菌分批培养过程的后指数生长期的培养上清液，用于治疗或预防由病原体所致的感染。

8.权利要求1的营养组合物，其还包含益生菌。

9.权利要求1的营养组合物，其还包含益生元。

10.权利要求1的营养组合物，其中当给予受试者时，营养组合物促进健康重量，促进健康身体脂肪质量，刺激脂连蛋白生产，降低胆固醇水平，或其任何组合。

11.一种营养组合物，其包含：

(i) 碳水化合物源；

(ii) 脂肪源；和

(iii) 蛋白等价物源；

其中

a) 20%-80%的蛋白等价物源包含肽组分，所述肽组分包含至少5种选自表1的肽和至少3种选自表2的另外的肽；和

b) 20%-80%的蛋白等价物源包含完整蛋白、部分水解蛋白或其组合。

12.权利要求11的营养组合物，其包含至少10种选自表1的另外的肽。

13.权利要求11的营养组合物，其中蛋白等价物源包含具有大于500道尔顿的摩尔质量分布的酪蛋白水解产物。

14.权利要求11的营养组合物，其中蛋白等价物源包含具有少于40%的水解度的部分水解蛋白。

15.权利要求11的营养组合物，其还包含益生元。

16.权利要求11的营养组合物，其还包含得自益生菌分批培养过程的后指数生长期的培养上清液，用于治疗或预防由病原体所致的感染。

17.权利要求1的营养组合物在制备用于通过刺激脂连蛋白生产促进健康体重的组合物中的用途。

18.权利要求11的营养组合物在制备用于通过刺激脂连蛋白生产促进健康体重的组合物中的用途。

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