CN112778797B - 一种绿僵菌中的天然绿色色素的提取方法 - Google Patents

一种绿僵菌中的天然绿色色素的提取方法 Download PDF

Info

Publication number
CN112778797B
CN112778797B CN202110195947.2A CN202110195947A CN112778797B CN 112778797 B CN112778797 B CN 112778797B CN 202110195947 A CN202110195947 A CN 202110195947A CN 112778797 B CN112778797 B CN 112778797B
Authority
CN
China
Prior art keywords
pigment
precipitate
extracting
impurity removing
culture medium
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN202110195947.2A
Other languages
English (en)
Other versions
CN112778797A (zh
Inventor
胡丰林
陆瑞利
尉杰
赵铖
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Anhui Agricultural University AHAU
Original Assignee
Anhui Agricultural University AHAU
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Anhui Agricultural University AHAU filed Critical Anhui Agricultural University AHAU
Priority to CN202110195947.2A priority Critical patent/CN112778797B/zh
Publication of CN112778797A publication Critical patent/CN112778797A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN112778797B publication Critical patent/CN112778797B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • C09B—ORGANIC DYES OR CLOSELY-RELATED COMPOUNDS FOR PRODUCING DYES, e.g. PIGMENTS; MORDANTS; LAKES
    • C09B67/00—Influencing the physical, e.g. the dyeing or printing properties of dyestuffs without chemical reactions, e.g. by treating with solvents grinding or grinding assistants, coating of pigments or dyes; Process features in the making of dyestuff preparations; Dyestuff preparations of a special physical nature, e.g. tablets, films
    • C09B67/0096—Purification; Precipitation; Filtration
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • C09B—ORGANIC DYES OR CLOSELY-RELATED COMPOUNDS FOR PRODUCING DYES, e.g. PIGMENTS; MORDANTS; LAKES
    • C09B61/00—Dyes of natural origin prepared from natural sources, e.g. vegetable sources
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N3/00—Spore forming or isolating processes

Abstract

本发明涉及一种绿僵菌中的天然绿色色素的提取方法，属于生物制品的提取制备技术领域。操作步骤包括以绿僵菌属的真菌培养菌种，扩大培养收集孢子，孢子除杂，制备色素粗提液，浓缩干燥，精制色素沉淀物，将精制色素沉淀物干燥得到墨绿色粉末状的天然绿色色素。本发明解决了绿僵菌绿色真菌色素无法提取的问题，为进一步的结构鉴定和利用奠定了基础。本发明提取的天然绿色色素稳定性优于目前天然绿色色素中普遍应用的叶绿素，具有广泛的应用前景。本发明工艺简便稳定、生产设备投资规模可控，生产灵活，可规模化生产。

Description

一种绿僵菌中的天然绿色色素的提取方法
技术领域
本发明属于生物制品的提取制备技术领域，具体涉及从绿僵菌孢子中提取绿色色素的工艺方法。
背景技术
绿僵菌的孢子呈现绿色，但其绿色色素至今未得到分离鉴定，其主要原因是目前常用的天然色素提取方法均无法从绿僵菌中提取出绿色色素。只有将该绿色色素提取出来，才可为其分子结构与代谢通路的鉴定，及商品化应用奠定基础。
目前合成色素对消费者和环境的有害影响受到普遍的关注，寻求天然色素作为合成色素的代替品正成为研究热点。世界范围内对天然着色剂的需求在食品、化妆品和纺织行业迅速增长。
目前，通过植物和微生物生产的色素和着色剂是现代色素工业开发的主要来源。天然色素中，黄色色素和红色色素较多，但绿色色素除叶绿素外，其它种类较少。并且，天然叶绿素脱离植物细胞后易受环境中的光照、温度、氧化剂等因素的影响而被破坏，性质不稳定，因此亟需一种环境耐受更佳的天然绿色色素作为叶绿素的替代品。本发明的绿僵菌绿色色素，是从绿僵菌孢子中，通过除杂等方法提取。该色素在光照时不易降解，在室温下放置一年，色素保存率仍在80%以上。染色后不易被水、有机溶剂和洗涤剂洗掉。
发明内容
本发明的目的是提供一种绿僵菌属真菌中的天然绿色色素的提取方法。
一种绿僵菌中的天然绿色色素的提取操作步骤如下：
（1）菌种筛选
将绿僵菌属（Metarhizium）真菌接种于PDA培养基上，在20～30℃条件下，培养3～7天，获得固体菌种；
（2）扩大培养
将所述固体菌种接入PDB液体培养基中，在转速150～250转/分钟条件下，21～30℃摇瓶培养2～6天，按1～10%体积重量比接种到大米培养基中进行培养，培养8～16天，得到大米培养物；
（3）孢子收集
将大米培养物在-50～130℃干燥，使用收孢机或旋风分离器收取孢子；
（4）孢子除杂
按重量体积比1g ：0.5～5 mL，在孢子中加入除杂剂1号，在温度10～50℃、第一次回流提取30～600分钟，提取液回收用于下一批样品处理，第一次固体部分按重量体积比1g ：0.5～5 mL，加入除杂剂2号，第二次回流提取30～600分钟，提取液回收用于下一批样品处理，第二次固体部分再按重量体积比1g ：0.5～5 mL，加入除杂剂3号，搅拌均匀，在温度20～90℃、超声提取20～400分钟，然后过滤或离心，弃去滤液或离心上清，获得除杂孢子；
（5）制备粗提液
将除杂孢子按重量体积比1g ：0.5～5 mL加入提取剂，搅拌或者超声提取2～10小时，过滤或离心，滤液或离心上清即为色素粗提液；
（6）浓缩干燥
将色素粗提液减压浓缩，减压干燥即得到色素粗提物；
（7）精制色素沉淀
采用去杂法进行精制：用提取剂将色素粗提物溶解，加入1～20倍体积的除杂剂3号使色素沉淀，离心或过滤出沉淀；第二次用提取剂复溶，然后加入1～15倍体积的除杂剂2号使色素沉淀，离心或过滤出沉淀；第三次用提取剂复溶，加入1～10倍体积的除杂剂1号使色素沉淀，离心去除上清，得到精制色素沉淀；
（8）色素干燥
将精制色素沉淀在压力小于或等于-0.1MP，温度-50～120℃条件下，干燥，得到色素精制品，即天然绿色色素，为墨绿色粉末。
进一步限定的技术方案如下：
所述绿僵菌属（Metarhizium）真菌为金龟子绿僵菌（ M. anisopliae）、罗伯茨绿僵菌 (M. robberstii)、蝗绿僵菌（M. acridum）中的一种。
步骤（1）中，PDA培养基即马铃薯葡萄糖培养基，其配方为：6g马铃薯干粉或20g去皮鲜马铃薯，20g葡萄糖，15g琼脂，加水至1000mL。
步骤（2）中，PDB培养基的配方：6g马铃薯干粉或20g去皮鲜马铃薯，20g葡萄糖，加水1000mL；大米培养基为在水中浸泡10～100 mim、并高压灭菌的大米。
步骤（4）中，除杂剂1号配方为：按体积比由乙酸乙酯或三氯甲烷：石油醚为0.1～3：3～0.1配制成；
除杂剂2号配方为：按体积比由甲醇或乙醇：丙酮为0.1～3：3～0.1配制成；
除杂剂3号配方为：按体积比由水：二甲基亚砜为1：0～0.1配制成。
过滤的滤膜为100～600目滤膜；离心条件为：离心转速5000～20000转/分钟、时间5～20分钟。
步骤（5）中，提取剂配方为：按体积比由甲酸：乙醇为1：0～1配制成的混合液；过滤的滤膜为100～600目滤膜；离心条件为：离心转速5000～20000转/分钟、时间5～20分钟。
步骤（6）中，所述减压浓缩条件：压力小于或等于-0.08MP、温度20～98℃；减压干燥条件：压力小于或等于-0.1MP、温度-50～120℃。
本发明的有益技术效果体现在下述几个方面：
1、本发明解决了绿僵菌属的真菌中的绿色色素无法提取的问题，为绿色色素分子结构与代谢通路的鉴定及商品化应用奠定基础。
2、本发明获得的绿色色素为天然色素，稳定性远强于植物叶绿素，在室内散失光下其稳定性是叶绿素的520倍；室温下放置一年色素保存率仍有83%。研究发现其不溶于常见溶剂如水、乙醇、汽油、食用油及洗洁剂等常见试剂，因此着色后不易被水、有机溶剂或洗涤剂洗掉，因此具有广泛的应用前景。
3、本发明提取的绿色色素原料是绿僵菌孢子，该菌容易培养，生产成本较低，易进行大规模工业化生产。
具体实施方式
下面结合实施例，对本发明作进一步地描述。
实施例1
绿僵菌中天然绿色色素的具体提取操作步骤如下：
1.1培养菌种
将金龟子绿僵菌（ M. anisopliae）接种于PDA培养基，在20℃条件下培养3天，得到固体菌种。
PDA培养基的配方为：6g马铃薯干粉、20g葡萄糖、15g琼脂，加水至1000mL。
1.2扩大培养
将步骤（1）获得的固体菌种接入PDB液体培养基，于三角瓶中，转速150转/分钟、21℃摇瓶培养2天，按1%体积重量比（V/W）接种到大米培养基中进行培养，培养8天，得到大米培养物。
PDB培养基的配方：6g马铃薯干粉、20g葡萄糖，加水至1000mL；大米培养基为在水中浸泡10mim，高压灭菌的大米。
1.3孢子收集
将大米培养物在-50℃干燥，接着使用收孢机收取孢子。
收孢机是一种以旋风收集为主要原理的机械。
1.4孢子除杂
按重量体积比1g ：0.5mL，在孢子中加入除杂剂1号，在温度10℃、第一次回流提取30分钟，提取液回收用于下一批样品处理；固体部分按重量体积比1g ：0.5mL，加入除杂剂2号，第二次回流提取30分钟，提取液回收用于下一批样品处理；固体部分再按重量体积比1g ：0.5mL，加入除杂剂3号，搅拌均匀，在温度20℃、40KHz超声提取20分钟，然后用100目滤膜过滤，弃去滤液，获得过滤残渣。
除杂剂1号配方为：按体积比乙酸乙酯：石油醚 = 0.1：3（V/V）；
除杂剂2号配方为：按体积比甲醇：丙酮 = 0.1：3（V/V）；
除杂剂3号为水。
1.5制备粗提液
将获得的过滤残渣按重量体积比1g：0.5mL加入提取剂，室温下40KHz超声提取2小时，然后离心分离，滤液即为色素粗提液。
提取剂为甲酸离心条件为：离心转速5000转/分钟、时间20分钟。
1.6浓缩干燥
将色素粗提液于-0.08MP，20℃减压浓缩，然后-0.1MP、-50℃条件下减压干燥，即得到色素粗提物。
1.7绿色色素精制
采用去杂法进行精制：按1g色素/mL提取剂将色素粗提物溶解，加入1倍体积的除杂剂3号使色素沉淀，离心沉淀，第一次离心沉淀物再用提取剂按第一次溶解的比例复溶，加入1倍体积的除杂剂2号使色素沉淀，离心沉淀，第二次离心沉淀物再用提取剂按第一次溶解的比例复溶，加入1倍体积的除杂剂1号使色素沉淀，离心去除上清，得到精制绿色色素。
1.8色素干燥
将上述精制的色素沉淀在压力-0.1MP，温度-50℃条件下干燥，得到色素精制品，即为墨绿色粉末状的天然绿色色素。
实施例2
绿僵菌中的绿色色素的具体提取操作步骤如下：
2.1培养菌种
将罗伯茨绿僵菌 （M. robberstii））接种于PDA培养基中，在30℃条件下，培养7天，得到固体菌种。
PDA培养基的配方为：20g去皮鲜马铃薯，20g葡萄糖，15g琼脂，加水至1000mL。
2.2扩大培养
将步骤（1）获得的固体菌种接入PDB液体培养基，于三角瓶中，转速250转/分钟、30℃摇瓶培养6天，按10%体积重量比（V/W）接种到大米培养基中，培养16天，得到大米培养物。
PDB培养基的配方：20g去皮鲜马铃薯，20g葡萄糖，加水至1000mL；大米培养基为在水中浸泡10mim，高压灭菌的大米。
2.3孢子收集
将大米培养物在130℃干燥，然后使用旋风分离器收取孢子。
2.4孢子除杂
按重量体积比1g ：5mL，在孢子中加入除杂剂1号，在温度50℃、第一次回流提取600分钟，提取液回收用于下一批样品处理；固体部分按重量体积比1g ：5mL，加入除杂剂2号，第二次回流提取600分钟，提取液回收用于下一批样品处理；固体部分再按重量体积比1g ：5mL，加入除杂剂3号，搅拌均匀，在温度90℃、40KHz超声提取400分钟，然后5000转/分钟离心20分钟，弃去离心上清，获得离心沉淀物。
除杂剂1号配方为：按体积比取三氯甲烷：石油醚 = 3：0.1（V/V）；
除杂剂2号配方为：按体积比取乙醇：丙酮 = 3：0.1（V/V）；
除杂剂3号配方为：按体积比取水：二甲基亚砜 = 1：0.1（V/V）。
2.5制备粗提液
将离心沉淀物按重量体积比1g：5mL加入提取剂，搅拌10小时，然后离心过滤，滤液即为色素粗提液。
提取剂为按体积比取甲酸：乙醇 = 1：1（V/V）的混合液；过滤的滤膜为600目；离心条件为：离心转速20000转/分钟、时间5分钟。
2.6浓缩干燥
将色素粗提液于-0.06MP，98℃减压浓缩，然后在-0.08MP，120℃条件下，减压干燥，即得到色素粗提物。
2.7精制色素沉淀物
采用去杂法进行精制：按1g色素/mL提取剂将色素粗提物溶解，加入20倍体积的除杂剂3号使色素沉淀，离心，再次用提取剂复溶，然后加入15倍体积的除杂剂2号使色素沉淀，离心，再次用提取剂复溶，加入10倍体积的除杂剂1号使色素沉淀，离心去除上清，得到精制色素沉淀物。
2.8色素干燥
将精制色素沉淀物在压力-0.08MP，温度120℃条件下干燥，得到色素精制品，即为墨绿色粉末状的天然绿色色素。
实施例3
绿僵菌中天然绿色色素的具体提取操作步骤如下：
3.1培养菌种
将蝗绿僵菌（M. acridum）接种于PDA培养基，在25℃培养5天，获得固体菌种。
PDA培养基的配方为：6g马铃薯干粉，20g葡萄糖，15g琼脂，加水至1000mL。
3.2扩大培养
将步骤（1）获得的固体菌种接入PDB液体培养基，于三角瓶中，转速200转/分钟、26℃摇瓶培养4天，按5%的体积重量比（V/W）接种到大米培养基，培养12天，得到大米培养物。
PDB培养基的配方：6g马铃薯干粉，20g葡萄糖，加水至1000mL；大米培养基为在水中浸泡10mim、高压灭菌的大米。
3.3孢子收集
将大米培养物在50℃干燥，然后使用旋风分离器收取孢子。
3.4孢子除杂
按重量体积比1g ：3mL，在孢子中加入除杂剂1号，在温度30℃、回流提取300分钟，提取液回收用于下一批样品处理。固体部分按重量体积比1g ：3mL，加入除杂剂2号，回流提取300分钟，提取液回收用于下一批样品处理。固体部分再按重量体积比1g ：3mL，加入除杂剂3号，搅拌均匀，在温度55℃、40KHz超声提取210分钟，然后10000转/分钟离心10分钟，弃去离心上清。
除杂剂1号配方为：乙酸乙酯或三氯甲烷：石油醚=1.5：1.5（V/V）；除杂剂2号配方为：甲醇或乙醇：丙酮=1.5：1.5（V/V）；除杂剂3号配方为：水：二甲基亚砜=1：0.05（V/V）。
3.5制备粗提液
将获得的离心沉淀按重量体积比1g：5mL加入提取剂，搅拌或者40KHz超声提取10小时，然后过滤，滤液即为色素粗提液。
提取剂为甲酸：乙醇=1：1（V/V）的混合液；过滤的滤膜为600目；离心条件为：离心转速20000转/分钟、时间5分钟。
3.6浓缩干燥
将色素粗提液于-0.07MP，98℃减压浓缩，然后-0.09MP，50℃减压干燥即得到色素粗提物。
3.7精制色素沉淀物
采用去杂法进行精制：按1g色素/mL提取剂将色素粗提物溶解后加入20倍体积的除杂剂3号使色素沉淀，离心或过滤出沉淀后，再次用提取剂复溶，然后加入15倍体积的除杂剂2号使色素沉淀，离心或过滤出沉淀后，再次用提取剂复溶后加入10倍体积的除杂剂1号使色素沉淀，离心去除上清，获得精制色素沉淀物。
3.8色素干燥
将精制色素沉淀物在压力-0.09MP，温度50℃条件下干燥，得到色素精制品，即为墨绿色粉末状的天然绿色色素。

Claims (5)

1.一种绿僵菌中的天然绿色色素的提取方法，其特征在于操作步骤如下：
（1）菌种筛选
将绿僵菌属的真菌接种于PDA培养基上，在20～30℃条件下，培养3～7天，获得固体菌种；
（2）扩大培养
将所述固体菌种接入PDB液体培养基中，在转速150～250转/分钟条件下，21～30℃摇瓶培养2～6天，按1～10%体积重量比接种到大米培养基中进行培养，培养8～16天，得到大米培养物；
（3）孢子收集
将大米培养物在-50～130℃干燥，使用收孢机或旋风分离器收取孢子；
（4）孢子除杂
按重量体积比1g ：0.5～5 mL，在孢子中加入除杂剂1号，在温度10～50℃、第一次回流提取30～600分钟，提取液回收用于下一批样品处理，第一次固体部分按重量体积比1g ：0.5～5 mL，加入除杂剂2号，第二次回流提取30～600分钟，提取液回收用于下一批样品处理，第二次固体部分再按重量体积比1g ：0.5～5 mL，加入除杂剂3号，搅拌均匀，在温度20～90℃、超声提取20～400分钟，然后过滤或离心，弃去滤液或离心上清，获得除杂孢子；
除杂剂1号配方为：按体积比由乙酸乙酯或三氯甲烷：石油醚为0.1～3：3～0.1配制成；
除杂剂2号配方为：按体积比由甲醇或乙醇：丙酮为0.1～3：3～0.1配制成；
除杂剂3号配方为：按体积比由水：二甲基亚砜为1：0～0.1配制成；
过滤的滤膜为100～600目滤膜；离心条件为：离心转速5000～20000转/分钟、时间5～20分钟；
（5）制备粗提液
将除杂孢子按重量体积比1g ：0.5～5 mL加入提取剂，搅拌或者超声提取2～10小时，过滤或离心，滤液或离心上清即为色素粗提液；
提取剂配方为：按体积比由甲酸：乙醇为1：0～1配制成的混合液；过滤的滤膜为100～600目滤膜；离心条件为：离心转速5000～20000转/分钟、时间5～20分钟；
（6）浓缩干燥
将色素粗提液减压浓缩，减压干燥即得到色素粗提物；
（7）精制色素沉淀
采用去杂法进行精制：用提取剂将色素粗提物溶解，加入1～20倍体积的除杂剂3号使色素沉淀，离心或过滤出沉淀；第二次用提取剂复溶，然后加入1～15倍体积的除杂剂2号使色素沉淀，离心或过滤出沉淀；第三次用提取剂复溶，加入1～10倍体积的除杂剂1号使色素沉淀，离心去除上清，得到精制色素沉淀；
（8）色素干燥
将精制色素沉淀在压力小于或等于-0.1MP，温度-50～120℃条件下，干燥，得到色素精制品，即天然绿色色素，为墨绿色粉末。
2.根据权利要求1所述的一种绿僵菌中的天然绿色色素的提取方法，其特征在于：所述绿僵菌属的真菌为金龟子绿僵菌、罗伯茨绿僵菌、蝗绿僵菌中的一种。
3.根据权利要求1所述的一种绿僵菌中的天然绿色色素的提取方法，其特征在于：步骤（1）中，PDA培养基即马铃薯葡萄糖培养基，其配方为：6g马铃薯干粉或20g去皮鲜马铃薯，20g葡萄糖，15g琼脂，加水至1000mL。
4.根据权利要求1所述的一种绿僵菌中的天然绿色色素的提取方法，其特征在于：步骤（2）中，PDB培养基的配方：6g马铃薯干粉或20g去皮鲜马铃薯，20g葡萄糖，加水1000mL；大米培养基为在水中浸泡10～100 mim、并高压灭菌的大米。
5.根据权利要求1所述的一种绿僵菌中的天然绿色色素的提取方法，其特征在于：步骤（6）中，所述减压浓缩条件：压力小于或等于-0.08MP、温度20～98℃；减压干燥条件：压力小于或等于-0.1MP、温度-50～120℃。
CN202110195947.2A 2021-02-22 2021-02-22 一种绿僵菌中的天然绿色色素的提取方法 Active CN112778797B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202110195947.2A CN112778797B (zh) 2021-02-22 2021-02-22 一种绿僵菌中的天然绿色色素的提取方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202110195947.2A CN112778797B (zh) 2021-02-22 2021-02-22 一种绿僵菌中的天然绿色色素的提取方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN112778797A CN112778797A (zh) 2021-05-11
CN112778797B true CN112778797B (zh) 2022-04-29

Family

ID=75761690

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202110195947.2A Active CN112778797B (zh) 2021-02-22 2021-02-22 一种绿僵菌中的天然绿色色素的提取方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN112778797B (zh)

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101016331A (zh) * 2006-12-26 2007-08-15 华南农业大学 分离纯化绿僵菌素的方法
CN103751030A (zh) * 2013-12-12 2014-04-30 安徽农业大学 具有抑制酪氨酸酶活性的白僵菌提取物的应用及制备方法
CN106947728A (zh) * 2017-05-22 2017-07-14 重庆聚立信生物工程有限公司 昆虫病原真菌分生孢子收集工艺
CN111286999A (zh) * 2020-03-23 2020-06-16 江苏鑫缘丝绸科技有限公司 基于金龟子绿僵菌孢子粉的丝绵染色方法
CN111471600A (zh) * 2020-05-08 2020-07-31 北京化工大学 用于制备绿僵菌孢子粉的培养基及绿僵菌高孢粉的制备方法

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101016331A (zh) * 2006-12-26 2007-08-15 华南农业大学 分离纯化绿僵菌素的方法
CN103751030A (zh) * 2013-12-12 2014-04-30 安徽农业大学 具有抑制酪氨酸酶活性的白僵菌提取物的应用及制备方法
CN106947728A (zh) * 2017-05-22 2017-07-14 重庆聚立信生物工程有限公司 昆虫病原真菌分生孢子收集工艺
CN111286999A (zh) * 2020-03-23 2020-06-16 江苏鑫缘丝绸科技有限公司 基于金龟子绿僵菌孢子粉的丝绵染色方法
CN111471600A (zh) * 2020-05-08 2020-07-31 北京化工大学 用于制备绿僵菌孢子粉的培养基及绿僵菌高孢粉的制备方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN112778797A (zh) 2021-05-11

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN103702754B (zh) 助滤剂的制造方法
CN101985641B (zh) 一种利用麦秆制备细菌纤维素的方法
CN106661082A (zh) 用于从微藻生物质提取可溶性蛋白的方法
CN100522982C (zh) 一种用水作溶剂从油茶饼粕中提取茶皂素的生产方法
CN102051395A (zh) 一种利用玉米秆制备细菌纤维素的方法
CN103073652A (zh) 一种螺旋藻多糖的提取方法
CN108997471A (zh) 一种高纯茶皂素的绿色制备方法
CN112515032A (zh) 一种堇叶碎米荠中硒蛋白的提取方法和由该提取方法得到的硒蛋白及其应用
CN110818456A (zh) 一种木醋液叶面肥的制备方法
CN103146794B (zh) 一种利用微生物发酵提高剑麻皂苷产率的方法
CN102766658B (zh) 一种发酵法制备黑木耳黑色素的生产工艺
CN101985642B (zh) 一种利用稻秆制备细菌纤维素的方法
CN106488927A (zh) 用于从微藻生物质提取可溶性蛋白的方法
CN112778797B (zh) 一种绿僵菌中的天然绿色色素的提取方法
CN112778792B (zh) 一种木霉属真菌中天然绿色色素的提取方法
CN105463040A (zh) 一种提高低聚木糖产率的方法
CN105542032A (zh) 一种果胶的提取方法
CN112760240B (zh) 一种青霉真菌中天然绿色色素的提取方法
CA2082859A1 (en) Method for preparing chitosan
CN111448298B (zh) 微生物油脂的分离方法
CN107513042A (zh) 一种非化学溶剂提取申嗪霉素的方法
CN1654670A (zh) 一种硫酸软骨素的制备方法
CN102229754A (zh) 一种从银耳栽培废料中提取黑色素的方法
CN107557399A (zh) 一种从生物发酵液中同时提取β‑聚苹果酸和普鲁兰多糖的方法
CN113754671A (zh) 一种叶绿素铜钠盐的制备方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant