CN112458031B

CN112458031B - 一株源自白酒酿造窖泥的产乳酸型己酸菌及其应用

Info

Publication number: CN112458031B
Application number: CN202011543232.3A
Authority: CN
Inventors: 任聪; 徐岩; 沈才洪; 林锋; 李勇; 辜杨; 敖灵
Original assignee: Jiangnan University; Luzhou Laojiao Co Ltd
Current assignee: Jiangnan University; Luzhou Laojiao Co Ltd
Priority date: 2020-12-23
Filing date: 2020-12-23
Publication date: 2022-04-29
Anticipated expiration: 2040-12-23
Also published as: CN112458031A

Abstract

本发明公开了一株源自白酒酿造窖泥的产乳酸型己酸菌及其应用，该菌株命名为Caproiciproducens sp.JNLZ26，保藏编号CGMCC No.17440。该菌株可以利用淀粉、葡萄糖，发酵同时产生己酸和乳酸，利用淀粉发酵己酸的产量为1.32g/L，乳酸产量为10.68g/L。该菌株可以在酿酒领域应用，包括窖泥制作、米酒风味提升，也可以应用于己酸和乳酸的同步发酵生产，具有重大的工业应用价值。

Description

一株源自白酒酿造窖泥的产乳酸型己酸菌及其应用

技术领域

本发明涉及一株源自白酒酿造窖泥的产乳酸型己酸菌及其应用，属于酿酒领域。

背景技术

白酒基本香型分为浓香型、清香型、酱香型和米香型四大香型，在此四大香型基础上衍生出凤香型、兼香型、芝麻香型、药香型、特香型、馥郁香型、老白干香型、豉香型。白酒发酵采用多菌种发酵的方式进行生产，涉及霉菌、酵母和细菌三大类微生物。从代谢物质角度来看，乙醇(5～10％，质量分数)为含量最高的发酵产物，而乳酸(1～3％，质量分数)为含量仅次于乙醇的发酵产物。发酵容器类型对白酒风味物质具有重要影响，采用泥窖或半泥窖发酵时，来源于窖泥的C4～C10长度短中链脂肪酸成为重要的风味物质，其中最为重要的风味物质为己酸和丁酸。短中链脂肪酸与酒醅中的乙醇在脂肪酶的作用下，生成种类多样的乙酯，如己酸乙酯、丁酸乙酯；此外，短中链脂肪酸还能与微量醇类，如正丁醇、异戊醇等发生酯化反应，生成微量酯类，如己酸正丁酯、己酸异戊酯。

在众多酯类中，己酸乙酯因具有优雅的水果香味，是泥窖或半泥窖发酵重要的酯类化合物，对酒体呈香和呈味均具有重要贡献作用。己酸乙酯的合成前体为己酸与乙醇，其中己酸的合成源于窖泥微生物己酸菌的代谢作用。目前已发现的产己酸微生物菌株有克氏梭菌(Clostridium kluyveri)、埃氏巨球型菌(Megasphaera elsdenii T81)、半乳糖醇己酸菌(Caproiciproducens galactitolivorans)、瘤胃菌CPB6菌株(Ruminococcaceaesp.CPB6)、发酵己杆菌(Caprobacter fermentans)等，其中来源于白酒酿造体系内的己酸菌主要为克氏梭菌(Clostridium kluyveri)、瘤胃菌CPB6菌株(Ruminococcaceaesp.CPB6)。现有白酒酿造环境内已知的己酸菌少，己酸菌作为浓香型白酒窖泥内的关键微生物，筛选己酸菌株对白酒酿造生产具有重要意义。白酒固态酿造体系产生高浓度乳酸意义在于抑制杂菌生长，保障酿造过程安全性。但迄今为止，发现乳酸主要由利用还原糖的乳杆菌合成，己酸由以乙醇为底物的克氏梭菌和以乳酸为底物的Ruminococcaceae CPB6等菌株合成，尚未有同时能产生乳酸和己酸的微生物被发现和应用。挖掘能同时产生乳酸和己酸的微生物菌株，对于简化菌株培养及菌株应用工艺具有重要意义。

发明内容

本发明提供一株源自白酒酿造环境的可同时产乳酸和产己酸的菌株及其应用，该菌株从浓香型白酒酿造窖泥内筛选获得，具有利用葡萄糖作为主要碳源，同时合成乳酸和己酸的特征，可用于酿酒领域，如窖泥制作和浓香风格米酒发酵。

本发明的技术方案如下：

本发明提供了一株己酸菌Caproiciproducens sp.JNLZ26，所述己酸菌(Caproiciproducens sp.)JNLZ26已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.17440，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，保藏日期为2019年03月25日。

所述己酸菌Caproiciproducens sp.JNLZ26是通过白酒酿造环境内采集到的窖泥样品中分离筛选的，在含葡萄糖的培养基中进行多次富集，并进行纯培养菌株筛选与纯化而得。通过对其16S rRNA基因序列(序列如SEQ ID NO.1所示)进行BLAST比对分析，将该菌种鉴定为己酸菌属微生物；将其命名为己酸菌Caproiciproducens sp.JNLZ26。

所述己酸菌Caproiciproducens sp.JNLZ26在含葡萄糖的培养基中，其菌落特征为：形成的菌落为圆形，乳白色，表面光滑，边缘整齐。

本发明还提供了含有所述己酸菌Caproiciproducens sp.JNLZ26菌株的微生物菌剂。

在本发明的一种实施方式中，所述微生物菌剂为含有己酸菌Caproiciproducenssp.JNLZ26菌株的活细胞、冷冻干燥得到的己酸菌Caproiciproducens sp.JNLZ26干菌体、固定化的己酸菌Caproiciproducens sp.JNLZ26细胞中的一种或多种的液体菌剂或固体菌剂，或者所述微生物菌剂为以其他任何形式存在的己酸菌菌株Caproiciproducenssp.JNLZ26制剂。

本发明还提供了微生物冻干菌粉，所述冻干菌粉按如下步骤制备：将己酸菌Caproiciproducens sp.JNLZ26活化后，接种至培养基中，于35-38℃厌氧培养20-26h获得活性较高的菌悬液；将得到的菌悬液离心收集菌体，添加脱脂牛奶作为冻干保护剂，混匀后进行真空冷冻干燥，获得冻干菌粉。

在本发明的一种实施方式中，所述方法为，将己酸菌Caproiciproducenssp.JNLZ26活化后，按所述培养基的10％(v/v)的接种量接种至发酵培养基中，于37℃厌氧培养24h获得活性较高的菌悬液；在8000rpm离心10～20min，收集菌体，添加脱脂牛奶作为冻干保护剂，混匀后进行真空冷冻干燥，获得冻干菌粉。

本发明中的一种实施方式中，所述梭菌葡萄糖发酵培养基的成分为(/L)：乙酸钠2～3g、丁酸钠3～4g、葡萄糖10～20g，硫酸铵1～2g，无水磷酸氢二钾1～2g，无水磷酸二氢钾0.5～1g，蛋白胨5～10g，酵母粉5～10g，七水合硫酸镁0.05～0.1g，七水合硫酸亚铁0.005～0.01g，一水合硫酸镁0.01～0.02g，氯化钙0.01～0.02g，硫酸锌0.001～0.002g，氯化钴0.001～0.002g，pH为6.5。

本发明还提供了上述己酸菌，或上述微生物菌剂，或上述冻干菌粉在酿酒发酵中的应用。

在本发明的一种实施方式中，所述应用为，应用于浓香型白酒酿造，培养获得所述产乳酸己酸菌，替代乳酸菌与己酸菌的复合菌剂，用于淡雅浓香型风格白酒的酿造。

在本发明的一种实施方式中，所述应用为，将上述己酸菌或上述微生物菌剂加入至窖泥中。

本发明还提供了上述己酸菌，或上述微生物菌剂，或上述冻干菌粉在米酒酿造中的应用；所述己酸菌应用于米酒的制作，其产己酸与乳酸的代谢产物特性可赋予浓香型米酒风格。

在本发明的一种实施方式中，所述应用为，将上述己酸菌或上述微生物菌剂在米酒发酵过程中添加。

本发明还提供了上述己酸菌，或上述微生物菌剂，或上述冻干菌粉在发酵生产乳酸和己酸中的应用。

本发明还提供了一种发酵淀粉生产乳酸和己酸复合酸的方法，将上述己酸菌，或上述微生物菌剂，或上述冻干菌粉添加至含有淀粉的反应体系中。

在本发明的一种实施方式中，所述发酵条件为，于35-38℃厌氧培养20～26h。

有益效果

本发明提供的己酸菌Caproiciproducens sp.JNLZ26属于一种来源于白酒酿造环境的全新的己酸菌类型，兼具乳酸与己酸产生能力。该菌株具有较好的酸碱耐受性，可在pH4.5-9.5的条件下生长，易于培养。己酸菌Caproiciproducens sp.JNLZ26具有利用淀粉的能力，可应用于淀粉质材料发酵生产乳酸和己酸混合酸，降低生产成本。

生物材料保藏

一株己酸菌Caproiciproducens sp.JNLZ26，分类学命名为Caproiciproducenssp.，已于2019年03月25日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.17440，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所。

附图说明

图1：己酸菌Caproiciproducens sp.JNLZ26镜检图。

图2：己酸菌Caproiciproducens sp.JNLZ26利用葡萄糖的生长曲线。

图3：己酸菌Caproiciproducens sp.JNLZ26利用葡萄糖的己酸生成情况。

图4：己酸菌Caproiciproducens sp.JNLZ26利用葡萄糖的乳酸生成情况。

图5：己酸菌Caproiciproducens sp.JNLZ26的葡萄糖利用情况。

图6：己酸菌Caproiciproducens sp.JNLZ26的耐盐情况。

图7：己酸菌Caproiciproducens sp.JNLZ26的耐pH情况。

图8：己酸菌Caproiciproducens sp.JNLZ26利用淀粉作为底物的产己酸情况。

图9：己酸菌Caproiciproducens sp.JNLZ26利用淀粉作为底物的产乳酸情况。

具体实施方式

下面结合具体的实施例对本发明进行具体描述。

下述实施例中所涉及的培养基如下：

梭菌葡萄糖液体培养基成分为(/L)：乙酸钠2.5g，丁酸钠3.3g，葡萄糖20g，硫酸铵2g，无水磷酸氢二钾1g，无水磷酸二氢钾0.5g，蛋白胨10g，酵母粉10g，七水合硫酸镁0.1g，七水合硫酸亚铁0.015g，一水合硫酸镁0.01～0.02g，氯化钙0.01～0.02g，硫酸锌0.001～0.002g，氯化钴0.001～0.002g，pH为6.5。

梭菌葡萄糖固体培养基：以梭菌葡萄糖液体培养基为基础，添加15g/L的琼脂粉。

可溶性淀粉培养基：以梭菌葡萄糖培养基为基础，将20g/L葡萄糖替换为40g/L可溶性淀粉。

普通淀粉培养基：以梭菌葡萄糖培养基为基础，将20g/L葡萄糖替换为40g/L普通淀粉。

下述实施例中所涉及的检测方法如下：

己酸含量的检测：取1mL细菌培养物，在12000rpm离心5min，取200μL上清液，加入50μL内标(经5％的浓盐酸酸化，浓度为12.5g/L的叔戊酸，pH 2.5)，涡旋振荡30s，之后在10000rpm离心5min，吸取150μL进行气相色谱分析。色谱柱为Econo Cap-Wax毛细管柱(30m×0.25mm×0.25μm)，程序升温条件为:初始温度60℃，保持0.5min，以20℃/min升到190℃，保持3min。分流比为30∶1，进样口温度220℃，氢火焰离子检测器(FID)检测温度220℃。

乳酸含量的检测：取1mL细菌培养物，在12000rpm离心5min，取300μL上清液，过0.22μm水系滤膜后使用高效液相色谱仪分析系统测定乳酸，色谱柱为Aminex HPX-87H(Bio-Rad)，流动相为5mmol/L稀硫酸溶液，流速0.6mL/min，柱温60℃，检测器为示差检测器。

实施例1：产乳酸己酸菌菌株Caproiciproducens sp.JNLZ26的分离与鉴定

(1)己酸菌菌株分离纯化

从窖池窖泥中取1g样品加入到梭菌葡萄糖液体培养基中，培养20d后，按10％(v/v)的接种量，再次接种于梭菌葡萄糖液体培养基中，菌体生长明显后，将菌悬液稀释涂布于梭菌葡萄糖固体培养基中，37℃培养5-7d，挑取典型单菌落，接种至梭菌葡萄糖液体培养基中培养，2-3d后测定体系内己酸含量，筛选产己酸浓度较高的单菌。重复进行液体培养与稀释涂布操作，进行菌株的分离纯化，获得单菌落进行鉴定。

(2)菌株鉴定

1)革兰氏染色

用光学显微镜，通过革兰氏染色法对获得的单菌菌株进行鉴定，为革兰氏阳性菌，如图1所示，菌形态为梭状。

2)分子鉴定：采用16S rRNA基因鉴定

取培养的菌液，离心处理(12000rpm，2min，4℃)，弃上清后用常规DNA提取方法进行基因组DNA的提取，引物采用细菌通用引物对27F/1492R扩增16S rRNA基因。

扩增引物序列为：

27F：5’-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3’(SEQ ID NO.2)

1492R：5’-GGTTACCTTGTTACGACTT-3’(SEQ ID NO.3)

反应条件为：94℃预变性5min后进入以下循环：94℃变性30s，55℃退火30s，72℃延伸2min，30个循环；72℃延伸5min，经1％琼脂糖凝胶电泳鉴定结果良好。将扩增产物送测序，测序结果序列如SEQ ID NO.1所示。将得到的菌株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.17440，并将其命名为己酸菌Caproiciproducenssp.JNLZ26。

实施例2：己酸菌Caproiciproducens sp.JNLZ26的发酵培养及菌株性质

(1)将实施例1分离得到的己酸菌Caproiciproducens sp.JNLZ26经梭菌葡萄糖液体培养基培养，如图2-图5，生长24h，OD₆₀₀达最大，此时的OD₆₀₀为3.02，发酵72h后消耗葡萄糖8.11g/L，己酸产量0.81g/L，乳酸产量11.3g/L。

(2)菌株的性质

耐盐的检测：将实施例1分离得到的己酸菌Caproiciproducens sp.JNLZ26以梭菌葡萄糖培养基作为基础，设置培养基内NaCl的浓度梯度为0-8％(w/v)，浓度间隔为为1％(w/v)。

步骤如下：分别检测己酸菌Caproiciproducens sp.JNLZ26在NaCl的浓度梯度为0-8％(w/v)的培养基中的菌生长情况，每个梯度设置三个平行样。37℃下培养，每隔12h取样，测定生长OD₆₀₀吸光值，确定己酸菌Caproiciproducens sp.JNLZ26的耐盐性能。

结果为：将实施例1分离得到的己酸菌Caproiciproducens sp.JNLZ26经含不同NaCl浓度的梭菌葡萄糖液体培养基培养后，如图6所示，己酸菌Caproiciproducenssp.JNLZ26可在含0-1％(w/v)的NaCl的梭菌葡萄糖培养基的生长,生长36h后OD₆₀₀达最大，此时在含0％、1％NaCl梯度下的OD₆₀₀分别为1.69、0.94。

耐pH的检测：将实施例1分离得到的己酸菌Caproiciproducens sp.JNLZ26以梭菌葡萄糖培养基作为基础，设立培养基初始pH范围3.5、4、4.5、5、5.5、6、6.5、7、7.5、8、8.5、9、9.5。

步骤如下：分别检测己酸菌Caproiciproducens sp.JNLZ26在pH为3.5-9.5的梭菌葡萄糖培养基内的生长状况，每个梯度设置三个平行样。37℃下培养，每隔12h取样，测定生长OD₆₀₀吸光值，确定己酸菌Caproiciproducens sp.JNLZ26的耐pH性能。

结果为：将实施例1分离得到的己酸菌Caproiciproducens sp.JNLZ26经不同初始pH的梭菌葡萄糖液体培养基培养后，如图7所示，己酸菌Caproiciproducens sp.JNLZ26可在初始培养pH为4.5-9.5的梭菌葡萄糖培养基的生长，其中以pH 6.5的条件下，己酸菌Caproiciproducens sp.JNLZ26生长最快，24h后OD₆₀₀达最大，此时pH 6.5梯度下的OD₆₀₀为1.86。

实施例3：己酸菌Caproiciproducens sp.JNLZ26应用于淀粉发酵产乳酸和己酸

具体步骤如下：

(1)将实施例1得到己酸菌Caproiciproducens sp.JNLZ26接种至梭菌葡萄糖液体培养基，在37℃条件下，培养24h，得到种子液；

(2)取步骤(1)得到的种子液，按10％(v/v)接种比例分别接种至可溶性淀粉培养基与普通淀粉培养基，在37℃条件下发酵60h，发酵培养体系体积为80mL。

结果如图8-图9所示，在0-36h己酸菌Caproiciproducens sp.JNLZ26处于生长旺盛期，发酵48-60h后菌体沉降。

经检测，己酸菌Caproiciproducens sp.JNLZ26利用可溶性淀粉可发酵生产1.32g/L己酸，10.68g/L乳酸；

己酸菌Caproiciproducens sp.JNLZ26利用普通淀粉可发酵产生1.26g/L己酸，8.59g/L乳酸。

己酸菌Caproiciproducens sp.JNLZ26具有淀粉利用能力，可发酵淀粉，同时产生可观的乳酸与己酸；利用普通淀粉即可生产己酸与乳酸的混合酸；应用该菌株可利用淀粉质原料，如木薯、玉米淀粉生产乳酸和己酸混合酸，混合酸可作为生产食品级乳酸乙酯和己酸乙酯的前体。

实施例4：己酸菌Caproiciproducens sp.JNLZ26应用于具有浓香型白酒风格的米酒生产

传统米酒是以大米为原料，利用米曲作为糖化发酵剂酿造而成的发酵酒。传统米酒在前发酵时期，米曲内的霉菌将淀粉质原料水解，产生大量发酵性糖，前发酵后期，糖浓度适宜于所述己酸菌生长，并可被所述己酸菌所利用，该己酸菌具有产生乳酸和己酸的能力，将本发明中的己酸菌于米酒前发酵后期加入，培养2～3天后进行后发酵，可以很好的增加米酒的浓香型风味特性，具体步骤如下：

(1)称取大米50g于无菌250mL三角瓶中，加蒸馏水浸泡12h左右，于115℃蒸米15min。蒸饭后冷却，可利用冷水冲三角瓶外壁，加速冷却，设置实验组与对照组。

(2)按0.5％(w/w)(物料比)加米曲。曲块磨成粉添加50mL无菌蒸馏水后与蒸好的大米混合，混合均匀，封口置于30℃下进行发酵，前发酵为6d，前发酵结束后进行5d后发酵。

(3)采用梭菌液体葡萄糖培养基培养己酸菌Caproiciproducens sp.JNLZ26，得到种子液。

(4)在前发酵第4d时，向实验组中按5％(v/v)的接种量接种步骤(3)得到的己酸菌(Caproiciproducens sp.)JNLZ26种子液，继续于30℃发酵2d。前发酵结束于15℃进行6d后发酵。

添加己酸菌Caproiciproducens sp.JNLZ26菌液至米酒发酵醪中可以参与米酒后发酵，可促进米酒更多元酯类香气物质的生成，赋予米酒浓香型白酒典型风格。

实施例5：己酸菌Caproiciproducens sp.JNLZ26在人工窖泥制作中的应用

具体步骤如下：

(1)种子液制备：将实施例1得到的己酸菌Caproiciproducens sp.JNLZ26接种于含葡萄糖5g/L的1.5L富集培养基中(发酵罐容积为3L)，发酵罐的厌氧环境以高纯氮维持(流量1L/min)，温度控制为37℃，发酵24h，得到一级种子液，此时OD₆₀₀为1.68。

(2)第二级放大：上述种子液培养24h后，以高纯氮将1.5L菌液泵入含有15L富集培养基的发酵罐中(发酵罐容积30L，葡萄糖5g/L)，培养条件为37℃，培养24h，得到二级种子液，此时OD₆₀₀为2.68。

(3)第三级放大：以高纯氮将步骤(2)得到的二级种子液15L液泵入含有120L梭菌葡萄糖液体培养基的发酵罐中(发酵罐容积200L)培养条件为37℃，培养时间为24h，得到三级种子液，此时OD₆₀₀为2.89。

(4)人工窖泥制备：制备1000kg人工窖泥，所需组分为，黄泥600kg，窖皮泥100kg，老窖泥50kg，中温大曲粉50kg，酵母粉10kg，玉米浆10kg，上述步骤(3)得到的己酸菌Caproiciproducens sp.JNLZ26三级种子液100kg，添加水分至水量30-40％(v/v)，混合均匀后静止于发酵池，室温控制在30℃进行发酵，发酵时间60天得到人工窖泥。

实施例6：己酸菌CGMCC No.17440菌剂制备

具体步骤如下：

(1)己酸菌Caproiciproducens sp.JNLZ26的活化：

将实施例1得到的己酸菌Caproiciproducens sp.JNLZ26接种于含葡萄糖20g/L的100mL梭菌葡萄糖培养基中，温度控制为37℃，发酵24h，得到一级种子液，活化后扩大培养三代，获得三级种子液。

(2)按10％(v/v)接种比例，将三级种子液接种到梭菌葡萄糖液体培养基中，在37℃条件下厌氧培养24h获得活性较高的菌悬液，此时OD₆₀₀为2.72。在4℃下12000rpm离心10min，收集菌体，于厌氧箱内按菌体质量添加冻干保护剂(100g/L脱脂牛奶、20mL/L甘油、50g/L麦芽糊精和余量水)，混合均匀后进行真空冷冻干燥，最后得到冻干菌生物菌剂。

虽然本发明已以较佳实施例公开如上，但其并非用以限定本发明，任何熟悉此技术的人，在不脱离本发明的精神和范围内，都可做各种的改动与修饰，因此本发明的保护范围应该以权利要求书所界定的为准。

SEQUENCE LISTING

<110> 江南大学

泸州老窖股份有限公司

<120> 一株源自白酒酿造窖泥的产乳酸型己酸菌及其应用

<130> BAA201234A

<160> 3

<170> PatentIn version 3.3

<210> 1

<211> 1397

<212> DNA

<213> 人工序列

<400> 1

cctaacacat gcaagtcgaa cgaagctttt gatttcggtt gagagcttag tggcggacgg 60

gtgagtaacg cgtgagtaac ctgccttaca gagggggata acgtctggaa acggacgcta 120

ataccgcatg acatttcttt atcacatggt aaagaaatca aaggagcaat ccgctgtaag 180

atggactcgc gtccgattag ctagatggtg agataacagc ccaccatggc gacgatcggt 240

agccggactg agaggttgaa cggccacatt gggactgaga cacggcccag actcctacgg 300

gaggcagcag tgggggatat tgcacaatgg aggaaactct gatgcagcaa cgccgcgtga 360

aggatgaagg tcttcggatt gtaaactttt gtacttgggg acgataatga cggtacccaa 420

gcagcaagct ccggctaact acgtgccagc agccgcggta atacgtaggg agcaagcgtt 480

gtccggattt actgggtgta aagggtgcgt aggcggctat gcaagtcagt tgtgaaaact 540

atgggctcaa cccatagcct gcaattgaaa ctgcgtggct tgagtgaagt agaggtaggt 600

ggaattcccg gtgtagcggt gaaatgcgta gagatcggga ggaacaccag tggcgaaggc 660

gacctactgg gctttaactg acgctgaggc acgaaagcat gggtagcaaa caggattaga 720

taccctggta gtccatgccg taaacgatga ttactaggtg tggggggtct gaccccctcc 780

gtgccggagt taacacaata agtaatccac ctggggagta cgaccgcaag gttgaaactc 840

aaaggaattg acgggggccc gcacaagcag tggagtatgt ggtttaattc gaagcaacgc 900

gaagaacctt accaggtctt gacatcctac taacgaagca gagatgcatt aggtgccctt 960

cggggaaagt agagacaggt ggtgcatggt tgtcgtcagc tcgtgtcgtg agatgttggg 1020

ttaagtcccg caacgagcgc aacccttatt gttagttgct acgcaagagc actctagcaa 1080

gactgccgtt gacaaaacgg aggaaggtgg ggacgacgtc aaatcatcat gccccttatg 1140

acctgggcta cacacgtact acaatggccg ttaacaaaga gaagcgaaac cgcgaggtgg 1200

agcaaaccta taaaaacggt ctcagttcgg attgtaggct gaaacccgcc tgcatgaagt 1260

tggaattgct agtaatcgcg gatcataatg ccgcggtgaa tacgttcccg ggccttgtac 1320

acaccgcccg tcacaccatg ggagccggta atacccgaag tcagttgcct aaccgcaagg 1380

agggcgctgc cgaaggt 1397

<210> 2

<211> 20

<212> DNA

<213> 人工序列

<400> 2

agagtttgat cctggctcag 20

<210> 3

<211> 19

<212> DNA

<213> 人工序列

<400> 3

ggttaccttg ttacgactt 19

Claims

1.一株己酸菌(Caproiciproducens sp.)JNLZ26，其特征在于，所述己酸菌(Caproiciproducens sp.)JNLZ26保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.17440，保藏日期为2019年03月25日。

2.一种微生物菌剂，其特征在于，含有权利要求1所述的己酸菌。

3.如权利要求2所述的菌剂，其特征在于，所述菌剂为含有己酸菌活细胞、冷冻干燥得到的己酸菌干菌体、固定化的己酸菌细胞中的一种或多种的液体菌剂或固体菌剂。

4.一种冻干菌粉，其特征在于，所述冻干菌粉按如下方法制备：将权利要求1所述的己酸菌活化后，接种至培养基中，于35-38℃厌氧培养20-26h，获得菌悬液；将得到的菌悬液离心收集菌体，添加脱脂牛奶作为冻干保护剂，混匀后进行真空冷冻干燥，获得冻干菌粉。

5.权利要求1所述的己酸菌，或权利要求2或3所述的微生物菌剂在酿酒发酵中的应用。

6.如权利要求5所述的应用，其特征在于，将权利要求1所述的己酸菌，或权利要求2或3所述的微生物菌剂加入至窖泥中。

7.权利要求1所述的己酸菌，或权利要求2或3所述的微生物菌剂，或权利要求4所述的冻干菌粉在米酒酿造中的应用。

8.如权利要求7所述的应用，其特征在于，将权利要求1所述的己酸菌，或权利要求2或3所述的微生物菌剂，或权利要求4所述的冻干菌粉在米酒发酵过程中添加。

9.权利要求1所述的己酸菌，或权利要求2或3所述的微生物菌剂，或权利要求4所述的冻干菌粉在发酵生产乳酸和己酸中的应用。

10.如权利要求9所述的应用，其特征在于，将权利要求1所述的己酸菌，或权利要求2或3所述的微生物菌剂，或权利要求4所述的冻干菌粉添加至含有淀粉的发酵体系中进行发酵；所述发酵条件为，于35-38℃厌氧培养20～26h。