CN112301136B - 一种基于线粒体coi基因鉴别花鰶和斑鰶的分子标记及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明属于生物技术领域，尤其涉及一种基于线粒体COI基因鉴别花鰶和斑鰶的分子标记及其应用。斑鰶，广泛分布于我国沿海，以及韩国、日本沿海。花鰶，主要分布于我国东海，南海以及韩国沿海。两种鱼类分布区重叠，外形非常相似，均为我国近海经济鱼类，且难以从外形快速辨别。本申请通过对mtDNA中COⅠ基因特异性位点比对和分析，设计并筛选出一对特异性引物(HB3)。特异性引物HB3可在花鰶中扩增获得537bp的单一产物，而在斑鰶中无产物。通过PCR扩增产物的有无，可以区分两个物种，并在随机选择的30个样本中得到验证。本研究提供了一种可以快速且不需要测序的方法来鉴别花鰶和斑鰶。
Description
技术领域
本发明属于生物技术领域，尤其涉及一种基于线粒体COI基因鉴别花鰶和斑鰶的分子标记及其应用。
背景技术
斑鰶，隶属鲱形目、鲱科、鰶亚科，斑鰶属，广泛分布于我国沿海，以及韩国、日本沿海。花鰶，隶属鲱形目、鲱科、鰶亚科，花鰶属，主要分布于我国东海，南海和韩国沿海。斑鰶和花鰶均为我国近海经济鱼类。两种鱼类分布区重叠，外形非常相似，且难以从外形快速辨别(特别是长时间上水后)。目前，还没有关于使用分子标记区分两种鱼的研究报道。
发明内容
针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种基于线粒体COI基因鉴别花鰶和斑鰶的分子标记及其应用，目的在于解决现有技术中的一部分问题或至少缓解现有技术中的一部分问题。
本发明是这样实现的，一种基于线粒体COI基因鉴别花鰶和斑鰶的分子标记，所述分子标记的引物序列为F:5-TAGTATTCGGTGCCTGAGCAG-3’，SEQ ID NO.1；R:5’-CGGTCTGTAAGGAGCATTGTGA-3’，SEQ ID NO.2。
如上述的一种基于线粒体COI基因鉴别花鰶和斑鰶的分子标记在花鰶和斑鰶的鉴别中的应用。
进一步地，鉴别方法包括提取样本鱼的DNA，利用权利要求1中所述的分子标记对样本DNA进行PCR扩增，在537bp处有特异性条带的样品为花鰶，无条带的样品为斑鰶。
进一步地，PCR扩增时，反应体系为25μL，包括：dNTP(2.5mM)2μL，模板DNA 1μL，上、下游引物(10μmol)各0.5μL，Taq聚合酶0.5μL，10×Buffer 2.5μL，加水至25μL。
进一步地，PCR扩增时，PCR反应反应条件为：94℃变性2min，60℃退火30s，72℃延伸2min，35个循环，72℃延伸10min。
如上述的一种基于线粒体COI基因鉴别花鰶和斑鰶的分子标记在制备用于鉴定花鰶和斑鰶的试剂盒中的应用。
本发明还披露了一种用于鉴定花鰶和斑鰶的试剂盒，所述试剂盒包括引物序列F:5-TAGTATTCGGTGCCTGAGCAG-3’，SEQ ID NO.1；R:5’-CGGTCTGTAAGGAGCATTGTGA-3’，SEQ IDNO.2。
综上所述，本发明的优点及积极效果为：
本申请研发了一种分子鉴定技术。从NCBI上获得花鰶和斑鰶的线粒体全序列，通过对mtDNA中COⅠ基因特异性位点比对和分析，设计并筛选出一对特异性引物(HB3)。特异性引物HB3可在花鰶中扩增获得537bp的单一产物，而在斑鰶中无产物。通过PCR扩增产物的有无，可以区分两个物种，并在随机选择的30个样本中得到验证。本研究提供了一种可以快速且不需要测序的方法来鉴别花鰶和斑鰶。
附图说明
图1是回收引物HB3扩增产物测序与花鰶COⅠblast比对；
图2是特异性引物在群体中验证的电泳图。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例对本发明进行进一步详细说明，各实施例及试验例中所用的设备和试剂如无特殊说明，均可从商业途径得到。此处所描述的具体实施例仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
根据本申请包含的信息，对于本领域技术人员来说可以轻而易举地对本发明的精确描述进行各种改变，而不会偏离所附权利要求的精神和范围。应该理解，本发明的范围不局限于所限定的过程、性质或组分，因为这些实施方案以及其他的描述仅仅是为了示意性说明本发明的特定方面。实际上，本领域或相关领域的技术人员明显能够对本发明实施方式作出的各种改变都涵盖在所附权利要求的范围内。
为了更好地理解本发明而不是限制本发明的范围，在本申请中所用的表示用量、百分比的所有数字、以及其他数值，在所有情况下都应理解为以词语“大约”所修饰。因此，除非特别说明，否则在说明书和所附权利要求书中所列出的数字参数都是近似值，其可能会根据试图获得的理想性质的不同而加以改变。各个数字参数至少应被看作是根据所报告的有效数字和通过常规的四舍五入方法而获得的。本发明中，“约”指给定值或范围的10％以内，优选为5％以内。
本发明披露了一种基于线粒体COI基因鉴别花鰶和斑鰶的分子标记及其应用，具体如下各实施例所示。
实施例
1.实验材料
实验所用的30条花鰶和30条斑鰶均来自广东省的珠江流域。使用DNA提取试剂盒，提取30条花鰶和30条斑鰶的全基因组DNA，并存放在-20℃备用。
2.引物设计
从NCBI上获得花鰶和斑鰶的线粒体DNA序列，通过clustalX2.1进行两种鱼的mtDNA比对。再根据花鰶和斑鰶COⅠ基因序列差异性，使用Primer6.0将上游引物的3’端设计到差异位点，一共设计了3对特异性引物来筛选。
3.特异引物筛选
用设计的引物对两种鱼样本DNA分别进行PCR扩增，再对扩增产物进行比较，根据PCR产物大小是否与设计相符，初步判断引物是否能被利用。
PCR扩增反应体积为25μL，包括：dNTP(2.5mM)2μL，模板DNA 1μL，上、下游引物(10μmol)各0.5μL，Taq聚合酶0.5μL，10×Buffer 2.5μL，加水至25μL。PCR反应条件为：94℃变性2min，60℃退火30s，72℃延伸2min，35个循环，72℃延伸10min。用1.0％琼脂糖凝胶电泳检测扩增，凝胶成像仪扫描记录。再用鱼类线粒体COⅠ基因通用引物)(如下表)扩增提取的DNA，证明提取的线粒体DNA可以用于正常的PCR扩增。根据设计，花鰶样本DNA可以扩增出条带，而斑鰶样本DNA则无法扩增，电泳后就可以进行判断。
表1鱼类线粒体COⅠ基因通用引物
本实验设计了3引物HB1、HB2、HB3，在筛选阶段HB1和HB2在两种鱼中均无法扩增出产物，无法起到差异性鉴别作用。引物HB3在花鰶个体中能扩增出大小相同的产物，而在斑鰶中均无扩增产物，从电泳图上判断产物大小也与预期相符，判断可以作为待选引物。引物HB3的序列为：F:5-TAGTATTCGGTGCCTGAGCAG-3’，SEQ ID NO.1；R:5’-CGGTCTGTAAGGAGCATTGTGA-3’，SEQ ID NO.2。
表2实验设计引物
4.特异引物扩增片段测序验证
将PCR扩增产物用E.Z.N.A.TM Gel Extraction Kit(Omega Bio-Tek,Guangzhou,China)纯化回收，将回收的DNA连接到的PMDTM18-T(TaKaRa Biotech nology,Guangzhou,China)载体，挑选阳性克隆检测，再进行测序。
测序结果同花鰶和斑鰶线粒体DNA序列进行比对，验证PCR扩增获得的DNA片段是否由线粒体DNA作为模板合成。
将花鰶扩增产物回收测序后得到537bp的片段，在NCBI中将该片段与花鰶的COⅠ基因序列进行比对，发现该片段与COⅠ的片段相似度为100％，见图1，其中Query:回收引物HB3扩增产物；Sbjct：花鰶COⅠ。
扩增序列：
GAATAGTAGGAACTGCCCTAAGTCTCCTAATTCGAGCGGAACTTAGCCAACCTGGCGCGCTCCTGGGAGACGATCAAATCTACAATGTCATCGTTACAGCACACGCCTTCGTAATGATCTTCTTCATAGTAATGCCAATTCTGATTGGGGGCTTCGGTAACTGACTGGTCCCACTAATGATCGGAGCACCCGACATGGCATTCCCACGAATGAACAACATGAGCTTCTGACTTCTTCCTCCCTCTTTCCTACTTCTCTTGGCCTCTTCAGGAGTAGAAGCCGGGGCAGGGACAGGATGAACAGTCTACCCCCCTCTATCAGGAAACCTCGCCCATGCAGGGGCATCCGTGGATCTTACCATCTTCTCCCTCCACCTCGCGGGTATCTCATCAATCCTTGGGGCAATCAACTTCATTACCACAATTATTAACATGAAACCTCCCGCAATTTCACAGTACCAGACACCTCTGTTTGTTTGAGCCGTGCTTGTTACTGCTGTACTACTCCTACTATCCCTTCCAGTACTGGCAGCCGGAA，SEQ ID NO.3。
5.特异引物在群体中的验证
获得初步筛选的引物，进一步在两种鱼群体中验证。每种鱼随机选取30个样本进行PCR扩增、电泳，观察筛选的引物是否能在群体中正常发挥作用，判断引物的准确性。
每种鱼随机选取30个样本进行验证，结果与预期相同，30个花鰶随机样本在537bp处均有PCR特异性条带，而所有斑鰶样本则没有条带出现，见图2，其中A：花鰶30个随机个体样本；B：斑鰶30个随机个体样本。表明HB3引物具有种的特异性。通过PCR扩增产物的有无，可以区分两个物种，本研究提供了一种可以快速、低成本、且不需要测序的方法来鉴别花鰶和斑鰶。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
序列表
<110> 中国水产科学研究院珠江水产研究所
<120> 一种基于线粒体COI基因鉴别花鰶和斑鰶的分子标记及其应用
<160> 11
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 1
tagtattcgg tgcctgagca g 21
<210> 2
<211> 22
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 2
cggtctgtaa ggagcattgt ga 22
<210> 3
<211> 537
<212> DNA
<213> Clupanodon thrissa
<400> 3
gaatagtagg aactgcccta agtctcctaa ttcgagcgga acttagccaa cctggcgcgc 60
tcctgggaga cgatcaaatc tacaatgtca tcgttacagc acacgccttc gtaatgatct 120
tcttcatagt aatgccaatt ctgattgggg gcttcggtaa ctgactggtc ccactaatga 180
tcggagcacc cgacatggca ttcccacgaa tgaacaacat gagcttctga cttcttcctc 240
cctctttcct acttctcttg gcctcttcag gagtagaagc cggggcaggg acaggatgaa 300
cagtctaccc ccctctatca ggaaacctcg cccatgcagg ggcatccgtg gatcttacca 360
tcttctccct ccacctcgcg ggtatctcat caatccttgg ggcaatcaac ttcattacca 420
caattattaa catgaaacct cccgcaattt cacagtacca gacacctctg tttgtttgag 480
ccgtgcttgt tactgctgta ctactcctac tatcccttcc agtactggca gccggaa 537
<210> 4
<211> 43
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 4
tgtaaaacga cggccagtca accaaccaca aagacattgg cac 43
<210> 5
<211> 43
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 5
tgtaaaacga cggccagtcg actaatcata aagatatcgg cac 43
<210> 6
<211> 43
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 6
caggaaacag ctatgacacc tcagggtgtc cgaaraatca raa 43
<210> 7
<211> 43
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 7
caggaaacag ctatgacact tcagggtgac cgaagaatca gaa 43
<210> 8
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 8
tggcagagcc cggtaaatgc a 21
<210> 9
<211> 23
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 9
caaatcgttt cttgcgttac gct 23
<210> 10
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 10
ctcccactga ctactagcat g 21
<210> 11
<211> 23
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 11
catttaggta taaatcctgt tag 23
Claims (1)
1.一种基于线粒体COI基因鉴别花鰶和斑鰶的分子标记在花鰶和斑鰶的鉴别中的应用，鉴别方法包括提取样本鱼的DNA，利用分子标记对样本DNA进行PCR扩增，在537 bp处有特异性条带的样品为花鰶，无条带的样品为斑鰶；PCR扩增时，反应体系为25μL，包括：浓度为2.5mM 的dNTP 2 µL，模板DNA 1µL，浓度为10µmol的上、下游引物各0.5µL，Taq聚合酶0.5µL，10× Buffer 2.5µL，加水至25μL； PCR扩增时，PCR反应条件为：94℃变性 2min，60℃退火 30 s，72℃延伸 2min，35个循环，72℃延伸 10 min；所述分子标记的引物序列为F:5-TAGTATTCGGTGCCTGAGCAG-3’，SEQ ID NO.1；R:5’-CGGTCTGTAAGGAGCATTGTGA-3’，SEQ IDNO.2。
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Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102392075A (zh) * | 2011-11-17 | 2012-03-28 | 山东省农业科学院植物保护研究所 | 一种利用pcr-rflp技术鉴别西花蓟马品系的方法 |
| CN106282334A (zh) * | 2016-08-08 | 2017-01-04 | 江苏省淡水水产研究所 | 一种用于鉴别刀鲚和短颌鲚的分子标记及其应用 |
| CN108034730A (zh) * | 2017-12-15 | 2018-05-15 | 海南华大海洋科技有限公司 | 鉴别青斑的分子特异性标记引物及方法 |
| CN108588241A (zh) * | 2018-02-05 | 2018-09-28 | 深圳华大海洋科技有限公司 | 鉴别棕点石斑鱼的分子特异性标记引物及方法 |
| CN108998538A (zh) * | 2018-08-15 | 2018-12-14 | 浙江海洋大学 | 一种斑鰶snp标记及其筛选方法和应用 |
-
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Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102392075A (zh) * | 2011-11-17 | 2012-03-28 | 山东省农业科学院植物保护研究所 | 一种利用pcr-rflp技术鉴别西花蓟马品系的方法 |
| CN106282334A (zh) * | 2016-08-08 | 2017-01-04 | 江苏省淡水水产研究所 | 一种用于鉴别刀鲚和短颌鲚的分子标记及其应用 |
| CN108034730A (zh) * | 2017-12-15 | 2018-05-15 | 海南华大海洋科技有限公司 | 鉴别青斑的分子特异性标记引物及方法 |
| CN108588241A (zh) * | 2018-02-05 | 2018-09-28 | 深圳华大海洋科技有限公司 | 鉴别棕点石斑鱼的分子特异性标记引物及方法 |
| CN108998538A (zh) * | 2018-08-15 | 2018-12-14 | 浙江海洋大学 | 一种斑鰶snp标记及其筛选方法和应用 |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| Biological identifications through DNA barcodes:the case of the Crustacea;Filipe O. Costa等;《Can. J. Fish. Aquat. Sci》;20070224(第64期);第272-295页 * |
| 基于线粒体 COI 基因的中国近海鲱形目和鲈形目银鲈科银鲈属鱼类 DNA 条形码研究;宫亚运;《中国优秀硕士学位论文全文数据库 基础科学辑》;20170215(第02期);第1-87页 * |
| 基于线粒体COⅠ基因鉴别云斑尖塘鳢和线纹尖塘鳢的分子标记;陈海港等;《基因组学与应用生物学》;20160517;第35卷(第6期);第1388-1392页 * |
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