CN111733256A - 一种基于Cytb基因片段的蛇鮈和长蛇鮈的分子鉴别方法 - Google Patents

一种基于Cytb基因片段的蛇鮈和长蛇鮈的分子鉴别方法 Download PDF

Info

Publication number
CN111733256A
CN111733256A CN202010402982.2A CN202010402982A CN111733256A CN 111733256 A CN111733256 A CN 111733256A CN 202010402982 A CN202010402982 A CN 202010402982A CN 111733256 A CN111733256 A CN 111733256A
Authority
CN
China
Prior art keywords
saurogobio
ventralis
gobiocobius
ventricosa
ventricosus
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202010402982.2A
Other languages
English (en)
Inventor
李大命
张彤晴
唐晟凯
刘燕山
谷先坤
殷稼雯
刘小维
蒋琦辰
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Freshwater Fisheries Research Institute of Jiangsu Province
Original Assignee
Freshwater Fisheries Research Institute of Jiangsu Province
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Freshwater Fisheries Research Institute of Jiangsu Province filed Critical Freshwater Fisheries Research Institute of Jiangsu Province
Priority to CN202010402982.2A priority Critical patent/CN111733256A/zh
Publication of CN111733256A publication Critical patent/CN111733256A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6876—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
    • C12Q1/6888—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for detection or identification of organisms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6844—Nucleic acid amplification reactions
    • C12Q1/686—Polymerase chain reaction [PCR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
    • C12Q2600/124—Animal traits, i.e. production traits, including athletic performance or the like

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明公开了一种基于Cytb基因序列的蛇鮈和长蛇鮈的分子鉴别方法。该方法包含以下步骤：(1)分别提取蛇鮈和长蛇鮈的基因组DNA；(2)PCR扩增蛇鮈和长蛇鮈的细胞色素b基因片段；(3)扩增产物纯化后，直接测序，蛇鮈的Cytb基因扩增产物如SEQ ID NO.3所示，长蛇鮈的Cytb基因扩增产物如SEQ ID NO.4所示。COI基因序列第15位点碱基是G的为蛇鮈，若该位点是C的为长蛇鮈。该方法可以简便、快速、准确、有效地鉴别蛇鮈和长蛇鮈，结果稳定性好，重复率高，填补了目前国内分子生物学标准鉴别蛇鮈和长蛇鮈的空白，也有利于开展蛇鮈和长蛇鮈资源调查及渔业资源物种多样性和遗传多样性保护。

Description

一种基于Cytb基因片段的蛇鮈和长蛇鮈的分子鉴别方法
技术领域
本发明属于遗传学领域，涉及一种基于Cytb基因片段的蛇鮈和长蛇鮈的分子鉴别方法。
背景技术
蛇鮈(Saurogobio dabryi)和长蛇鮈(Saurogobio dumerili)是我国淡水水体中常见的两种小型鱼类，隶属于鲤形目鮈亚科蛇鮈属，常栖息于江河、湖泊的中下层水域。蛇鮈和长蛇鮈均为杂食性鱼类，分布广泛，数量较多，是鱼类群落结构中的常见种类。两种鱼类均可供食用，具有一定的经济价值。多年来，受过度捕捞、环境污染、水利工程建设等不利因素的影响，鱼类的栖息环境受到破坏，渔业资源量急剧下降，加强渔业资源保护迫在眉睫。开展渔业资源调查是保护及修复渔业资源的基础和前提。蛇鮈和长蛇鮈生态位相近，形态和体色相似，在鱼类调查中很难区分和鉴别。目前，分子生物学技术被广泛用于鱼类的种类鉴别。线粒体DNA具有进化速率快、母系遗传、几乎无重组等特点，是鱼类鉴别中常用的分子标记。细胞色素b基因(Cytochrome b gene,Cytb)是线粒体DNA的13个蛋白质编码基因之一，进化速率适中，被广泛用于鱼类鉴别。但目前尚未见以Cytb作为检测靶点用于蛇鮈和长蛇鮈鉴别的相关报道。
发明内容
本发明的目的是针对鱼类形态区分和鉴定的困难，提供一种蛇鮈和长蛇鮈的分子遗传鉴别方法。
本发明的另一目的是提供一种用于蛇鮈和长蛇鮈的分子遗传鉴别的引物对。
本发明的又一目的是提供该引物对的应用。
本发明的目的通过以下技术方案实现：
一种蛇鮈和长蛇鮈的分子遗传鉴别方法，包含以下步骤：
(1)分别提取待鉴定的蛇鮈和长蛇鮈的基因组DNA；
(2)以提取的基因组DNA为模板，PCR扩增蛇鮈和长蛇鮈的细胞色素b基因片段，所述的上游引物为F：SEQ ID NO.1，下游引物为R：SEQ ID NO.2；
(3)扩增产物纯化后，直接测序，蛇鮈的Cytb基因扩增产物如SEQ ID NO.3所示，长蛇鮈的Cytb基因扩增产物如SEQ ID NO.4所示。Cytb基因序列第15位点碱基是G的为蛇鮈，该位点碱基是C的为长蛇鮈。
作为本发明方法的优选，所述的PCR反应体系为50μL：100ng/μL的模板DNA 1μL，PCR混合液25μL，10μmol/L的上、下游引物各1μL，灭菌去离子水22μL。所述的PCR混合液由1.25IU的Taq酶，20mmol/L Tris-HCl，pH8.9，100mmol/L KCl，3mmol/L MgCl2，0.4mmol/LdNTP组成。PCR扩增反应程序为：94℃预变性4min，94℃变性30s，56℃退火40s，72℃延伸50s，经30个循环后再72℃延伸8min。
一种用于蛇鮈与长蛇鮈的分子遗传鉴别的引物对，能够同时扩增出包含蛇鮈和长蛇鮈Cytb基因第15位点的基因片段的PCR引物；蛇鮈的Cytb基因扩增产物如SEQ ID NO.3所示，长蛇鮈的Cytb基因扩增产物如SEQ ID NO.4所示。
作为本发明的一种优选，所述的引物对的上游引物为F：SEQ ID NO.1，下游引物为R：SEQ ID NO.2。
本发明所述的引物对在分子遗传鉴别蛇鮈与长蛇鮈中的应用。
本发明所述的引物对在制备蛇鮈与长蛇鮈分子遗传鉴别试剂中的应用。
一种蛇鮈与长蛇鮈分子遗传鉴别试剂，包含本发明所述的引物对。
所述的蛇鮈与长蛇鮈分子遗传鉴别试剂，还优选包括PCR混合液，所述的PCR混合液由1.25IU的Taq酶，20mmol/L Tris-HCl，pH8.9，100mmol/L KCl，3mmol/L MgCl2，0.4mmol/L dNTP组成。
有益效果：
本发明针对蛇鮈与长蛇鮈细胞色素b(Cytochrome b,Cytb)基因序列差异，首次以蛇鮈与长蛇鮈的Cytb基因序列作为依据，从而定性鉴别蛇鮈与长蛇鮈。该方法可以快速、简便、准确、有效地鉴别蛇鮈与长蛇鮈，结果稳定性好，重复率高，填补了目前国内分子生物学标准鉴别蛇鮈与长蛇鮈的空白，也有利于开展渔业资源调查及鱼类物种多样性和遗传多样性研究。
附图说明
图1为本发明中Cytb基因测序序列比对结果，相同的碱基用连接号标识，差异的碱基用星号标识。蛇鮈与长蛇鮈从第15位点(Cytb-15)开始，碱基序列出现差异，其中蛇鮈的第15位点碱基为G，长蛇鮈的第15位点碱基为C。
具体实施方式
以下结合实施例来进一步阐明本发明，但并不是对本发明做任何形式的限定，仅仅作示例说明。
实施例1
1、引物设计
设计一对特异性PCR扩增引物，引物序列为：F：5’-CAACACCAGTT-AATATCTCAGCA-3’(SEQ ID NO.1)，下游引物为R：5’-GGCCTCGTTGTTTTGAA-GTG-3’(SEQ ID NO.2)。
2、样本采集
取待鉴定的蛇鮈与长蛇鮈个体各40尾。
3、基因组DNA提取
利用基因组提取试剂盒提取蛇鮈与长蛇鮈的基因组DNA，将DNA溶于TE溶液。DNA完整性采用1.0％的琼脂糖凝胶电泳鉴定，紫外分光光度计测其OD值并稀释至100ng/μL，-20℃保存备用。
4、PCR扩增与检测
已提取的DNA为模板，用上述引物(F和R)进行PCR扩增。PCR反应体系为50μL：1μL模板DNA(100ng/μL)；PCR混合液25μL(1.25IU的Taq酶，20mmol/L Tris-HCl，pH8.9，100mmol/LKCl，3mmol/L MgCl2，0.4mmol/L dNTP)；上、下游引物(10μmol/L)各1μL；灭菌去离子水22μL。扩增反应程序为：PCR扩增反应程序为：94℃预变性4min，94℃变性30s，55℃退火40s，72℃延伸50s，经30个循环后再72℃延伸8min。
PCR产物在1.5％琼脂糖凝胶电泳中检测分离，120V电压下电泳30min之后，经凝胶成像分析系统确定PCR扩增产物的大小及特异性。
5、测序比对
检测后的PCR扩增产物纯化后送至生物公司纯化双向测序，经分析获得长度为836bp基因序列片段，蛇鮈的Cytb基因扩增产物如SEQ ID NO.3所示，长蛇鮈的Cytb基因扩增产物如SEQ ID NO.4所示。比对分析后可以发现Cytb基因从第15位点(Cytb-15)的碱基序列存在差异：40尾蛇鮈第15位点(Cytb-15)碱基是G，40尾长蛇鮈第15位点(Cytb-15)碱基是C。
实施例2
按照实施例1方法，将样本扩大到蛇鮈和长蛇鮈个体各80尾，结果依然显示蛇鮈的Cytb基因第15位点(Cytb-15)碱基是G，长蛇鮈第15位点(Cytb-15)碱基是C。
序列表
<110> 江苏省淡水水产研究所
<120> 一种基于Cytb基因片段的蛇鮈和长蛇鮈的分子鉴别方法
<160> 4
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 23
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 1
caacaccagt taatatctca gca 23
<210> 2
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 2
ggcctcgttg ttttgaagtg 20
<210> 3
<211> 836
<212> DNA
<213> 蛇鮈(Artificial Sequence)
<400> 3
tgatgaaact ttgggtccct attaggatta tgcctaattg cacaaatcct aacggggcta 60
tttttagcca tgcactacac ctcggacatc tcaaccgctt tctcatcagt agcccatatt 120
tgccgagacg taaattacgg ctgacttatt cgcaacttac acgctaacgg agcatccttc 180
ttttttattt gtatttatat acatgtcgcc cgaggcctat actacggatc atatctttat 240
aaagaaacct gaaacatcgg agtagtcctt ctattacttg taataataac agccttcgtt 300
gggtatgtcc tcccatgagg tcaaatatct ttttgagggg ctacagttat tacaaaccta 360
ctttcagcgg tcccctacat aggagacacc ctcgtccaat gaatctgagg gggcttctca 420
gtagataacg caaccctaac acgattcttc gccttccact tcctactacc ctttattatt 480
gctgccgcaa ccctccttca cctcctgttt ttacacgaaa ccggatcaaa taatccagtt 540
ggcctaaatt cagacgcaga caaaatctcc ttccacccct acttttctta caaagatctc 600
ctaggatttg ttctaatgtt actagcctta acatcactag cactcttctc ccctaacctc 660
ctaggggacc ccgacaactt tacgcccgcc aacccgatag ttaccccgcc acacatcaag 720
ccggaatggt acttcttatt tgcctacgcc atcctacgct ctattccgaa caagctgggg 780
ggtgttctcg ccctcctgtt ctctatctta atcctaatag tagtaccaat tctcca 836
<210> 4
<211> 836
<212> DNA
<213> 长蛇鮈(saurogobio dumerili)
<400> 4
tgatgaaact ttggctccct tctgggccta tgcttaatcg cacaaatcct aacaggactc 60
ttcctagcta tacactatac ctcagacatc tcaaccgcat tctcatcagt cgcccacatt 120
tgccgagacg taaactatgg ttgacttatc cgaaacctgc acgccaacgg agcgtccttc 180
ttctttattt gtatctacat acatgtcgcc cggggccttt attatggctc ctacctctac 240
aaagaaacct gaaacattgg agtggtcctc ctcctacttg taataataac agccttcgtc 300
gggtatgttc tcccatgagg ccaaatatcc ttctgagggg ccacagtaat tacaaacctc 360
ctctcagcag tcccctatat aggtgacaca ctcgttcaat gaatctgagg gggcttctca 420
gtagacaacg caacactaac acgattcttc gccttccact tcctattccc attcatcatt 480
gccgccgcaa cccttctcca ccttctattc ctacacgaga caggatcaag taacccagcc 540
ggcctaaact ccgatgcaga caaaatctct ttccacccat acttttcata taaagacctc 600
ctaggattcg tactaatact actagccttg acatccctag cactattctc cccaaaccta 660
ttaggagacc cagacaactt cacacccgcc aacccaatag ttacaccccc acatatcaag 720
cccgaatgat attttttatt tgcctacgcc atcctacgct ctattccaaa caagctgggg 780
ggcgttcttg cactcctatt ttctatccta atcctcatag tagtcccaat cttaca 836

Claims (10)

1.一种蛇鮈和长蛇鮈的分子鉴别方法，其特征在于包含以下步骤：
(1)分别提取待鉴定的蛇鮈和长蛇鮈的基因组DNA；
(2)以提取的基因组DNA为模板，PCR扩增蛇鮈和长蛇鮈的细胞色素b基因片段，PCR扩增蛇鮈或长蛇鮈上游引物为F：SEQ ID NO.1，下游引物为R：SEQ ID NO.2；
(3)扩增产物纯化后，直接测序，蛇鮈的Cytb基因扩增产物如SEQ ID NO.3所示，长蛇鮈的Cytb基因扩增产物如SEQ ID NO.4所示；Cytb基因第15位点碱基是G的为蛇鮈，该位点是C的为长蛇鮈。
2.根据权利要求1所述的分子遗传方法，其特征在于所述的PCR反应体系为50μL：100ng/μL的模板DNA 1μL，PCR混合液25μL，10μmol/L的上、下游引物各1μL，灭菌去离子水22μL；所述的PCR混合液由1.25IU的Taq酶，20mmol/L Tris-HCl，pH8.9，100mmol/L KCl，3mmol/L MgCl2，0.4mmol/L dNTP组成；PCR扩增反应程序为：94℃预变性4min，94℃变性30s，56℃退火40s，72℃延伸50s，经30个循环后再72℃延伸8min。
3.一种用于蛇鮈和长蛇鮈的分子鉴别的引物对，其特征在于所述的引物对由能够同时扩增出包含蛇鮈和长蛇鮈Cytb基因第15位点的基因片段的PCR上游引物和下游引物组成；蛇鮈的Cytb基因扩增产物如SEQ ID NO.3所示，长蛇鮈的Cytb基因扩增产物如SEQ ID NO.4所示。
4.根据权利要求3所述的引物对，其特征在于上游引物为F：SEQ ID NO.1，下游引物为R：SEQ ID NO.2。
5.权利要求3或4所述的引物对在分子鉴别蛇鮈和长蛇鮈中的应用。
6.权利要求3或4所述的引物对在制备蛇鮈和长蛇鮈分子鉴别试剂中的应用。
7.一种蛇鮈和长蛇鮈的分子鉴别试剂，其特征在于包含权利要求3或4所述的引物对。
8.根据权利要求7所述的蛇鮈和长蛇鮈分子鉴别试剂，其特征在于还包括PCR混合液，所述的PCR混合液由1.25IU的Taq酶，20mmol/L Tris-HCl，pH8.9，100mmol/L KCl，3mmol/LMgCl2，0.4mmol/L dNTP组成。
9.蛇鮈和长蛇鮈Cytb基因第15位点作为检测靶点在鉴别蛇鮈和长蛇鮈中的应用。
10.蛇鮈和长蛇鮈Cytb基因第15位点作为检测靶点在制备蛇鮈和长蛇鮈鉴别试剂中的应用。
CN202010402982.2A 2020-05-13 2020-05-13 一种基于Cytb基因片段的蛇鮈和长蛇鮈的分子鉴别方法 Pending CN111733256A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010402982.2A CN111733256A (zh) 2020-05-13 2020-05-13 一种基于Cytb基因片段的蛇鮈和长蛇鮈的分子鉴别方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010402982.2A CN111733256A (zh) 2020-05-13 2020-05-13 一种基于Cytb基因片段的蛇鮈和长蛇鮈的分子鉴别方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN111733256A true CN111733256A (zh) 2020-10-02

Family

ID=72647258

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202010402982.2A Pending CN111733256A (zh) 2020-05-13 2020-05-13 一种基于Cytb基因片段的蛇鮈和长蛇鮈的分子鉴别方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN111733256A (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113943730A (zh) * 2021-09-02 2022-01-18 天津中医药大学 一种引物组合物及其应用

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107699628A (zh) * 2017-11-24 2018-02-16 福建海洋研究所 一种鉴别梅芳蛇鲻和花斑蛇鲻的分子标记引物及方法

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107699628A (zh) * 2017-11-24 2018-02-16 福建海洋研究所 一种鉴别梅芳蛇鲻和花斑蛇鲻的分子标记引物及方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
TANG QY等: "Saurogobio punctatus sp. nov., a new cyprinid gudgeon (Teleostei: Cypriniformes) from the Yangtze River, based on both morphological and molecular data", 《J FISH BIOL》 *
张伟等编著: "《野生动物产业管理学》", 30 November 2012, 东北林业大学出版社 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113943730A (zh) * 2021-09-02 2022-01-18 天津中医药大学 一种引物组合物及其应用
CN113943730B (zh) * 2021-09-02 2023-09-22 天津中医药大学 一种引物组合物及其应用

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN106434949A (zh) 一种达氏鲟微卫星标记及其筛选方法和应用
CN114686597A (zh) 一种银龙鱼性别鉴定snp分子标记及其应用
CN113462787B (zh) 光倒刺鲃的雄性分子标记及其应用
CN111733256A (zh) 一种基于Cytb基因片段的蛇鮈和长蛇鮈的分子鉴别方法
CN112779274B (zh) 桑树膏药病病原菌的核糖体rna基因及其应用
CN111979340B (zh) 一种鉴定欧洲樱桃实蝇的特异性引物、探针及其应用
CN112522422A (zh) 一种基于coi基因片段的飘鱼和寡鳞飘鱼的分子鉴别方法
CN110699462B (zh) 一种砗蚝微卫星位点及鉴定引物
CN111733257A (zh) 一种基于coi基因片段的蛇鮈和长蛇鮈的分子鉴别方法
CN104099423A (zh) 用于刀鲚不同生态型种群识别的分子标记
CN104073562B (zh) 一种用于刀鲚不同生态型种群识别的分子标记
CN113881786A (zh) 用于乌苏里拟鲿、圆尾拟鲿及二者正反杂交个体鉴定的引物、引物试剂盒及鉴定方法
CN110616270A (zh) 一种基于coi基因序列的*和贝氏*的分子鉴别方法
CN110951892A (zh) 用于几种鲟鱼物种鉴定的ssr引物对组、试剂盒、鉴定方法及应用
KR100769367B1 (ko) 기장에서 유래한 ｓｓｒ 프라이머 및 이의 용도
KR100901817B1 (ko) 한우 생산이력체계 구축용 프라이머 세트 및 이를 이용한한우 개체 판별방법
CN110551830A (zh) 人y-str基因座荧光标记试剂盒及检测方法
CN114990201B (zh) 一种基于粪便总dna应用于不同遗传分析的可行性评估方法
CN112301136B (zh) 一种基于线粒体coi基因鉴别花鰶和斑鰶的分子标记及其应用
CN113388595B (zh) 高效末端加A的突变型Taq DNA聚合酶及其编码DNA
KR102304789B1 (ko) 백조어 검출용 프라이머 세트 및 이를 이용한 백조어 검출방법
KR102293200B1 (ko) 흰수마자 검출용 pcr 프라이머 세트와 프로브 및 이를 이용한 실시간 pcr 방법
CN101880662B (zh) 东方白鹳的微卫星标记位点引物及遗传学个体识别方法
CN112592982B (zh) 基于snp分子标记鉴定马苏金枪鱼的引物、方法和试剂盒
CN111518938B (zh) 鉴定长芒苋、糙果苋和沙地苋单粒种子的基于SNP位点的CAPs分子标记及其应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20201002