CN112236156A - 包含经加工的人参提取物的用于促进肌肉分化的组合物 - Google Patents

包含经加工的人参提取物的用于促进肌肉分化的组合物 Download PDF

Info

Publication number
CN112236156A
CN112236156A CN201980035332.4A CN201980035332A CN112236156A CN 112236156 A CN112236156 A CN 112236156A CN 201980035332 A CN201980035332 A CN 201980035332A CN 112236156 A CN112236156 A CN 112236156A
Authority
CN
China
Prior art keywords
muscle
composition
differentiation
ginseng extract
disease
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201980035332.4A
Other languages
English (en)
Inventor
朴宣奎
金点溶
刘泳孝
张珉廷
吴畅泽
林玟姝
李宽洙
李夷
李允赫
俞载喆
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
GC Wellbeing Corp
Original Assignee
Green Cross Wellbeing Corp
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Green Cross Wellbeing Corp filed Critical Green Cross Wellbeing Corp
Publication of CN112236156A publication Critical patent/CN112236156A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/25—Araliaceae (Ginseng family), e.g. ivy, aralia, schefflera or tetrapanax
    • A61K36/258—Panax (ginseng)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/105—Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/40—Complete food formulations for specific consumer groups or specific purposes, e.g. infant formula
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7028—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages
    • A61K31/7034—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages attached to a carbocyclic compound, e.g. phloridzin
    • A61K31/704—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages attached to a carbocyclic compound, e.g. phloridzin attached to a condensed carbocyclic ring system, e.g. sennosides, thiocolchicosides, escin, daunorubicin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0053—Mouth and digestive tract, i.e. intraoral and peroral administration
    • A61K9/0056—Mouth soluble or dispersible forms; Suckable, eatable, chewable coherent forms; Forms rapidly disintegrating in the mouth; Lozenges; Lollipops; Bite capsules; Baked products; Baits or other oral forms for animals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2200/00—Function of food ingredients
    • A23V2200/30—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
    • A23V2200/316—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health having an effect on regeneration or building of ligaments or muscles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2250/00—Food ingredients
    • A23V2250/20—Natural extracts
    • A23V2250/21—Plant extracts
    • A23V2250/2124—Ginseng
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/10—Preparation or pretreatment of starting material
    • A61K2236/19—Preparation or pretreatment of starting material involving fermentation using yeast, bacteria or both; enzymatic treatment
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/50—Methods involving additional extraction steps
    • A61K2236/51—Concentration or drying of the extract, e.g. Lyophilisation, freeze-drying or spray-drying

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Pediatric Medicine (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Physiology (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

本发明涉及一种用于促进肌肉分化的组合物，所述组合物包含微量的人参皂苷成分增加的经加工的人参提取物作为有效成分，通过确认所述经加工的人参提取物促进成肌细胞分化成肌肉，并抑制由作为肌肉分化抑制因子的肌肉生长抑制素引起的肌萎缩现象，期望可以开发出一种效果优异的用于预防或治疗肌肉障碍相关疾病的组合物。

Description

包含经加工的人参提取物的用于促进肌肉分化的组合物
技术领域
本发明涉及一种包含经加工的人参提取物的用于促进肌肉分化的组合物，更详细地，涉及一种包含经加工的人参提取物作为有效成分的用于预防或治疗肌肉疾病的组合物，所述经加工的人参提取物中具有促进肌肉分化的效果的微量的人参皂苷成分增加。
背景技术
肌肉(muscle)是人体中占最大组成的组织。在保持人体的结构、使人体的各个器官发挥各自的功能并预防各种疾病方面，确保人体适当的肌肉量是必须的。
肌肉主要分为平滑肌(smooth muscle)、心肌(cardiac muscle)、骨骼肌(skeletal muscle)。骨骼肌在我们整个身体中占相当一部分，并促进骨骼的运动。这种骨骼肌不分裂，由作为多核体的肌纤维组成，并且在胚的形成过程中形成。胚的形成过程结束后，通过出生后的生长或肌肉分化(myogenesis)过程形成肌肉。此外，由于冻伤、扭伤或瘀伤等而使肌肉损伤时，也会发生肌肉分化。
在肌肉分化(myogenesis)过程中，首先卫星细胞(satellite cell)被激活，被激活的卫星细胞分化成成肌细胞(myoblast)(Morgan,J.E.,et al.,2003)。分化的成肌细胞发生分裂，成肌细胞融合(fusion)而发育成肌管(myotube)，这种肌管聚集形成肌纤维(muscle fiber)，肌纤维形成束，最终形成肌肉。
肌肉分化过程受各种肌肉调节因子(muscle regulatory factors)的调节，如生肌决定因子(MyoD)、生肌因子5(myogenic factor 5，Myf5)、肌细胞生成素(myogenin)、生肌调节因子4(myogenic regulator factor 4，MRF4)，其中，MyoD启动诸如肌球蛋白重链(myosin heavy chain，MHC)、肌肉肌酸激酶(muscle creatine kinase，MCK)的肌肉特异性基因的表达，并诱导卫星细胞分化成成肌细胞，通过MyoD的活性诱导肌细胞生成素的表达是成肌细胞的融合中最重要的因素，并且参与肌管的形成(Zanou,N.,et al.,2013)。
另外，已知肌细胞因子(myokine)是在肌肉收缩的反应中由骨骼肌表达或者合成的活性物质，通过自分泌(autocrine)、旁分泌(paracrine)或内分泌(endocrine)的方式起作用，并且调节肌肉和其它组织的功能(Pedersen,B.K.,et al.,2008)。代表性的肌细胞因子包括肌肉生长抑制素(myostatin，MSTN)、白介素-6(interleukin-6，IL-6)、鸢尾素(irisin)等。
肌肉生长抑制素是属于转化生长因子-β(transforming growth factor-β，TGF-β)组的基因，并且是一种直接作用于肌肉细胞并抑制肌肉分化和肌肉细胞分化(differentiation)的蛋白质(Groussard,C.,et al.,2000；Huh,J.Y.,et al.,2014)。在以往的几项研究中，已知肌肉生长抑制素基因被敲减(knock-down)或敲除(knock-out)时，肌肉的肥大和胰岛素抗性降低(Groussard,C.,et al.,2000；Huh,J.Y.,et al.,2014)，在运动时，随着肌肉生长抑制素的表达量减少，肌肉的大小增加(Huh,J.Y.,et al.,2012)。
此外，已知对肌肉分化重要的肌原纤维蛋白的表达中的关键转录因子MyoD的分解过程通过由肌肉生长抑制素(MSTN)激活素II型受体(activin type II receptor，ActRIIB)-Smad2途径激活的泛素蛋白酶体途径(ubiquitin proteasome pathway，UPP)过程增加介导蛋白质的分解，从而诱导肌萎缩。
另外，在诸如衰老的细胞或卫星细胞分化成成肌细胞、成肌细胞的分裂等的肌肉分化过程中发生问题时，可能会发生各种肌肉障碍和疾病，如肌萎缩症(muscle atrophy)、肌病(myopathy)、肌肉损伤(muscle injury)、肌营养不良症(muscle dystrophy)、肌肉减少症(sarcopenia)、肌神经传导疾病(myoneural conductive disease)和神经损伤(nerveinjury)等(Bonaldo,P.,et al.,2013；Wagatsuma,A.,et al.,2014)。
此外，因所述肌肉分化过程中发生问题而出现的肌肉疾病之一的肌肉减少症也有可能是因恶病质(cachexia)引起的。恶病质是慢性消耗性复合综合征的一种，其是指在癌症、结核病、血友病等的晚期可见的高度的全身衰弱症状。特别地，恶病质的发生伴随恶性肿瘤、慢性心力衰竭等慢性疾病，并出现伴随厌食症的体重减少、肌肉量和体脂肪减少、炎症反应等。
这种恶病质引起的肌肉减少表现为骨骼肌量的持续减少和功能受损引起的复合综合征，与出现肌肉量逐渐且缓慢地流失的衰老和肌肉分化障碍引起的肌肉减少疾病不同，会出现急性肌肉减少症状。这种生理特性的差异在预防和治疗中也显示出差异。因此，即使出现肌肉减少的症候，也需要根据其发生原因，针对恶病质、衰老和肌肉分化障碍各自的特性进行治疗(Ryoo Seung-wan，2017)。
另外，作为用于克服肌肉分化障碍和疾病的方法，近年来报道了使肌肉细胞再生的方法，已知这种肌肉细胞的再生刺激存在于肌肉细胞外部的卫星细胞以引起卫星细胞的分裂，从而形成肌肉组织。并且，据报道，肌肉细胞的再生可以用于修复受损的肌肉，而且还可以用于衰老引起的自然的肌肉流失(Conboy,I.M.,et al.,2003)。
此外，报道了在癌症恶病质的进展过程中，作为对肌肉分化过程重要的肌肉调节因子的MyoD和肌细胞生成素的表达减少的研究结果(Blackwell,T.A.,et al.,2016)，并且报道了在癌症或艾滋病引起的肌肉消耗(恶病质)小鼠模型中，作为对肌肉分化过程重要的肌肉调节因子的肌细胞生成素、肌球蛋白(myosin)等的表达减少的研究结果(Ramamoorthy,S.,et al.,2009)。此外，还报道了在诱发癌症恶病质的小鼠模型中肌肉生长抑制素的抑制会影响肌肉的体积和功能的研究结果(Smith,R.C.,et al.,2013)，期望还可以通过促进肌肉分化来治疗恶病质。
作为人参的主要功能成分的人参皂苷(ginsenoside)是在植物界的各种皂苷中仅对人参的皂苷进行特别区分而命名的，迄今为止总共发现了150种以上的人参皂苷(Christensen,L.P.,2009)。已知人参皂苷除了具有抗癌、抗过敏、抗炎作用之外，还具有抑制中枢神经和心神安定、镇痛、改善记忆力、报护肝损伤、促进蛋白质和脂质合成、抗糖尿病、抗压、促进抗氧化活性物质的生成、免疫调节、抑制血小板凝聚、抗衰老作用等药理功效，并且根据人参皂苷的种类，各自显示出不同的功效。
已知人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1提高中枢神经系统的活动，人参皂苷Re、人参皂苷Rg1以及人参多糖(panaxan)A和人参多糖B有益于糖尿病，人参皂苷Re和人参皂苷Rg1促进血管生成，人参皂苷Rg3和人参皂苷Rh2显示出抗癌功效(Chen,C.F.,et al.,2008；Kim,H.S.,et al.,2004)。近年来的研究表明，几种人参提取物对恶病质、疲劳或肌肉萎缩显示出功效。含有0.9-1.4％的人参皂苷Rg1和1.7-3.0％的人参皂苷Rb1的GINSELECT预防了用作为抗肿瘤剂的顺铂(cisplatin)处理的小鼠的体重减少和运动能力降低(Lobina,C.,etal.,2014)，人参皂苷Rg1通过抑制蛋白质分解途径来预防由饥荒导致的肌萎缩(Li,F.,etal.,2017)。
因此，本发明人在利用人参的人参皂苷成分来确认促进肌肉分化的效果的过程中，确认了微量的人参皂苷成分增加的经加工的人参提取物抑制作为肌肉分化抑制因子的肌肉生长抑制素，并促进肌肉分化，从而完成了本发明。
作为现有技术的韩国授权专利第1771486号涉及一种含有选自20(R)(S)-人参皂苷Rh2、人参皂苷Rk2和人参皂苷Rh3中的一种以上的化合物并通过激活肌肉细胞的增殖来预防或治疗肌肉减少症(sarcopenia)、心肌梗塞和心血管疾病的组合物，该组合物与本发明的组合物的组成和作用机制以及应用疾病的范围存在差异。此外，韩国授权专利第1595426号中记载了包含人参皂苷Rh2和人参皂苷Rg3的含量增加的经加工的人参提取物的用于治疗肌肉减少症的组合物，但并未记载和暗示本发明的抑制肌肉生长抑制素和促进肌肉分化的效果。韩国公开专利第2017-0094292号中记载了包含肌肉生长抑制素拮抗剂的用于治疗肌肉减少症的组合物，但未记载和暗示本发明的人参皂苷Rh2和人参皂苷Rg3的含量增加的经加工的人参提取物的抑制肌肉生长抑制素的效果。
发明内容
要解决的技术问题
本发明的目的在于提供一种包含经加工的人参提取物的用于促进肌肉分化的组合物。
此外，本发明的目的在于提供一种包含所述用于促进肌肉分化的组合物的用于预防或治疗肌肉疾病的药学组合物和用于改善肌肉疾病的健康功能食品。
技术方案
本发明涉及一种包含经加工的人参提取物作为有效成分的用于促进肌肉分化的组合物。
所述经加工的人参提取物可以通过以下步骤制备：(a)将黑曲霉(Aspergillusniger)接种在由人参粉末和麦麸组成的培养基中；(b)培养所述步骤(a)的菌；(c)用超滤膜(ultrafilteration)对所述步骤(b)的培养物进行提纯；(d)从所述步骤(c)的提纯物中分离酶；(e)在人参粉末、红参粉末、人参提取物或红参提取物中添加所述步骤(d)的酶；(f)使所述步骤(e)的添加物发酵；(g)分离所述步骤(f)的发酵物；(h)浓缩所述步骤(g)的上清液；(i)使所述步骤(h)的浓缩物与选自乙酸、乳酸、柠檬酸、苹果酸和酒石酸中的一种以上的有机酸反应；以及(j)对所述步骤(i)的反应物进行中和、过滤、提纯、浓缩和干燥。
所述组合物可以含有分别为0.5-30重量％的人参皂苷Rh2和人参皂苷Rg3。
所述组合物可以促进肌管(myotube)的分化。
所述组合物可以抑制由肌肉生长抑制素(myostatin)引起的肌萎缩现象。
此外，本发明涉及一种用于预防或治疗肌肉疾病的药学组合物，所述药学组合物包含所述用于促进肌肉分化的组合物和药学上可接受的载体。
本发明还涉及一种用于改善肌肉疾病的健康功能食品，所述健康功能食品包含所述用于促进肌肉分化的组合物和食品学上可接受的食品辅助添加剂。
所述肌肉疾病可以选自肌萎缩症(muscular atrophy)、肌病(myopathy)、肌肉损伤(muscular injury)、肌营养不良症(muscular dystrophy)、肌无力症(myasthenia)、肌肉减少症(sarcopenia)、肌神经传导疾病(myoneural conductive disease)、皮肌炎(dermatomyositis)、糖尿病性肌萎缩症(diabetic amyotrophy)、神经损伤(nerveinjury)、肌萎缩侧索硬化症(amyotrophic lateral sclerosis，ALS)、恶病质(cachexia)和退行性肌肉疾病(degenerative muscle diseases)。
所述恶病质可以是艾滋病(acquired immune deficiency syndrome，AIDS)、腹腔疾病(celiac disease)、多发性硬化症(multiple sclerosis)、类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis)、慢性心力衰竭(chronic heart failure)、充血性心力衰竭(congestive heart failure)、尿毒症(uremia)、结核病(tuberculous)、克罗恩病(crohn's disease)、无法治愈或者严重的1型糖尿病、神经性厌食症和缺少激素引起的恶病质。
以下，对本发明进行详细的说明。
本发明涉及一种包含经加工的人参提取物作为有效成分的用于促进肌肉分化的组合物。
所述经加工的人参提取物是通过韩国授权专利第0992800号和第1595426号的制备方法制备的经加工的人参粉末或经加工的人参提取物，其中，在制备皂苷分解酶后，利用所制备的皂苷分解酶和有机酸的水解，使得所述经加工的人参粉末或经加工的人参提取物中的微量的人参皂苷成分增加。
所述经加工的人参提取物是通过以下步骤制备的微量的人参皂苷成分增加的经加工的人参粉末或经加工的人参提取物：(a)将黑曲霉(Aspergillus niger)接种在由人参粉末和麦麸组成的培养基中；(b)培养所述步骤(a)的菌；(c)用超滤膜(ultrafilteration)对所述步骤(b)的培养物进行提纯；(d)从所述步骤(c)的提纯物中分离酶；(e)在人参粉末、红参粉末、人参提取物或红参提取物中添加所述步骤(d)的酶；(f)使所述步骤(e)的添加物发酵；(g)分离所述步骤(f)的发酵物；(h)浓缩所述步骤(g)的上清液；(i)使所述步骤(h)的浓缩物与选自乙酸、乳酸、柠檬酸、苹果酸和酒石酸中的一种以上的有机酸反应；以及(j)对所述步骤(i)的反应物进行中和、过滤、提纯、浓缩和干燥。
所述微量的人参皂苷可以是具有促进肌肉分化效果的人参皂苷，优选可以是人参皂苷Rh2和人参皂苷Rg3。
所述用于促进肌肉分化的组合物含有人参皂苷Rh2和人参皂苷Rg3，与单独含有人参皂苷Rh2或人参皂苷Rg3的组合物相比，人参皂苷Rh2和人参皂苷Rg3的混合组合物的促进肌肉分化的效果更优异。
所述人参皂苷Rh2和人参皂苷Rg3的含量可以分别为0.2-30重量％，优选为0.5-30重量％，更优选为1-20重量％。
所述“肌肉分化”是指卫星细胞(satellite cell)被激活而分化成成肌细胞(myoblast)，成肌细胞融合形成肌管(myotube)，然后肌管形成肌纤维(muscle fiber)，肌纤维形成束而形成肌肉，诸如生肌决定因子(MyoD)、生肌因子5(Myf5)、肌细胞生成素、生肌调节因子4(MRF4)的各种肌肉调节因子和诸如肌球蛋白重链(MHC)、肌肉肌酸激酶(MCK)的肌肉特异性因子参与其中。
所述用于促进肌肉分化的组合物可以促进成肌细胞分化成肌管，并且可以增加肌管的宽度。
所述用于促进肌肉分化的组合物可以抑制肌管的萎缩。
所述用于促进肌肉分化的组合物可以增加诸如MyoD的肌肉调节因子的表达。
所述用于促进肌肉分化的组合物可以抑制肌肉生长抑制素。
所述“肌肉生长抑制素(myostatin)”是直接作用于肌肉细胞并抑制肌肉分化和肌肉细胞分化(differentiation)的蛋白质。已知肌肉生长抑制素在各种疾病中过表达，如衰老、肌营养不良症、肌萎缩侧索硬化症、慢性心力衰竭、艾滋病、癌症恶病质、肾衰竭(renalfailure)、尿毒症、类风湿性关节炎等。
此外，本发明涉及一种用于预防或治疗肌肉疾病的药学组合物，所述药学组合物包含所述用于促进肌肉分化的组合物作为有效成分。
所述药学组合物可以通过促进分化成肌肉细胞来预防或治疗肌肉疾病。
此外，本发明的药学组合物可以通过抑制肌肉生长抑制素来预防或治疗肌肉疾病。优选地，本发明的药学组合物通过抑制由肌肉生长抑制素引起的肌萎缩来预防或治疗肌肉疾病。
所述肌肉疾病是由于肌肉细胞的缺乏、异常减少或肌肉细胞的功能障碍而可能会发生的疾病。优选地，所述肌肉疾病是由于肌肉细胞的缺乏或异常减少而引起的。
所述肌肉疾病可以是肌萎缩症(muscular atrophy)、肌病(myopathy)、肌肉损伤(muscular injury)、肌营养不良症(muscular dystrophy)、肌无力症(myasthenia)、肌肉减少症(sarcopenia)、肌神经传导疾病(myoneural conductive disease)、皮肌炎(dermatomyositis)、糖尿病性肌萎缩症(diabetic amyotrophy)、神经损伤(nerveinjury)、肌萎缩侧索硬化症(amyotrophic lateral sclerosis，ALS)、恶病质(cachexia)、退行性肌肉疾病(degenerative muscle diseases)等，但并不限定于此。
所述恶病质也称为消耗综合征(wasting syndrome)，其特征在于，伴随厌食症的体重减少、肌肉量和体脂肪减少、炎症反应等。这种恶病质可能会由癌症、艾滋病(acquiredimmune deficiency syndrome，AIDS)、腹腔疾病(celiac disease)、多发性硬化症(multiple sclerosis)、类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis)、慢性心力衰竭(chronic heart failure)、充血性心力衰竭(congestive heart failure)、尿毒症(uremia)、结核病(tuberculous)、克罗恩病(crohn's disease)、无法治愈或者严重的1型糖尿病、神经性厌食症、缺少激素等引起，但并不限定于此。优选是由艾滋病(acquiredimmune deficiency syndrome，AIDS)、腹腔疾病(celiac disease)、多发性硬化症(multiple sclerosis)、类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis)、慢性心力衰竭(chronic heart failure)、充血性心力衰竭(congestive heart failure)、尿毒症(uremia)、结核病(tuberculous)、克罗恩病(crohn's disease)、无法治愈或者严重的1型糖尿病、神经性厌食症和缺少激素引起的恶病质，更优选是由艾滋病(acquired immunedeficiency syndrome，AIDS)引起的恶病质。
所述退行性肌肉疾病是指肌肉持续被破坏，可以是杜氏肌营养不良症(Duchennemuscular dystrophy)、贝克型肌营养不良症(Becker's muscular dystrophy)、肢带型肌营养不良症(Limb-girdle muscular dystrophy)、先天性肌营养不良症(congentialmuscular dystrophy)、面肩肱型肌营养不良症(facioscapulohumeral musculardystrophy)、强直性肌营养不良症(myotonic dystrophy)、眼咽型肌营养不良症(oculopharyngeal muscular atrophy)、远端型肌营养不良症(distal musculardystrophy)、埃-德二氏肌营养不良症(emery-dreifuss muscular dystrophy)等。
在本发明中，肌萎缩可能是由于持续保持肌肉收缩而引起的。在所述肌肉收缩中，肌肉内糖原的合成增加可以使肌肉保持持续收缩。例如，已确认患有所述退行性肌肉疾病之一的杜氏肌营养不良症的患者的肌肉中的糖原增加。此外，糖原贮积病(glycogenstorage disease)是由于糖原代谢异常而引起的疾病，骨骼肌中糖原的贮积会引起肌肉痉挛、进行性肌力下降。
所述药学组合物可以包含所述用于促进肌肉分化的组合物和药学上可接受的载体。
所述药学组合物可以通过常规的方法分别配制成散剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂、悬浮液、乳液、糖浆、气雾剂等口服剂型，外用剂，栓剂和无菌注射溶液的形式并使用。所述药学组合物中可以包含的载体、赋形剂和稀释剂可以列举乳糖、葡萄糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露醇、木糖醇、赤藓糖醇、麦芽糖醇、淀粉、阿拉伯树胶、藻酸盐、明胶、磷酸钙、硅酸钙、纤维素、甲基纤维素、微晶纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、水、羟基苯甲酸甲酯、羟基苯甲酸丙酯、滑石、硬脂酸镁和矿物油。在制剂化时，使用通常使用的填充剂、增量剂、粘合剂、润湿剂、崩解剂、表面活性剂等稀释剂或赋形剂来制备。用于口服施用的固体制剂包括片剂、丸剂、散剂、颗粒剂、胶囊剂等，这种固体制剂通过在本发明的用于促进肌肉分化的组合物中混合至少一种以上的赋形剂来制备，例如，淀粉、碳酸钙、蔗糖或乳糖、明胶等。此外，除了简单的赋形剂之外，还使用润滑剂，如硬脂酸镁、滑石等。用于口服的液体制剂包括悬浮剂、内服液剂、乳剂、糖浆剂等，除了可以包含常用的作为简单稀释剂的水、液体石蜡之外，还可以包含各种赋形剂，例如，润湿剂、甜味剂、芳香剂、防腐剂等。用于非口服施用的制剂包括无菌水溶液、非水溶剂、悬浮剂、乳剂、冻干制剂、栓剂。非水溶剂、悬浮剂可以使用丙二醇、聚乙二醇、诸如橄榄油的植物油、诸如油酸乙酯的可注射的酯等。作为栓剂的基质，可以使用witepsol、聚乙二醇、吐温(tween)-61、可可脂、月桂精油、甘油明胶等。
本发明的药学组合物的剂量根据被治疗的对象的年龄、性别、体重、要治疗的特定疾病或病理状态、疾病或病理状态的严重程度、施用途径和开处方者的判断而不同。基于这些因素的剂量的确定在本领域技术人员的水平内，通常的剂量为0.01mg/kg/天至约2000mg/kg/天的范围，更优选的剂量为1mg/kg/天至500mg/kg/天。就施用而言，一天可以施用一次，也可以分多次施用。所述剂量不以任何方式限定本发明的范围。
本发明的药学组合物可以通过各种途径施用于鼠、家畜、人类等哺乳动物。可以预期所有的施用方法，例如，可以通过口服、直肠或静脉、肌肉、皮下、子宫内膜或脑血管内注射和皮肤涂布来施用。
此外，本发明涉及一种用于改善肌肉疾病的健康功能食品，所述健康功能食品包含所述用于促进肌肉分化的组合物作为有效成分。
所述健康功能食品是包含所述用于促进肌肉分化的组合物和食品学上可接受的食品辅助添加剂的用于改善肌肉疾病的健康功能食品。
所述健康功能食品包括片剂、胶囊剂、丸剂或液剂等形式，可添加本发明的提取物的食品包括例如各种食品类、饮料、口香糖、茶、复合维生素、健康功能性食品类等。
有益效果
本发明涉及一种包含经加工的人参提取物作为有效成分的用于促进肌肉分化的组合物，其中，在制备皂苷分解酶后，利用所制备的皂苷分解酶和有机酸的水解产物，使得所述经加工的人参提取物中的微量的人参皂苷成分增加，已确认所述经加工的人参提取物促进成肌细胞分化成肌肉，并抑制作为肌肉分化抑制因子的肌肉生长抑制素。
因此，期望可以利用本发明的经加工的人参提取物来开发效果优异的用于预防或治疗肌肉疾病的组合物。
附图说明
图1示出确认作为成肌细胞的C2C12细胞是否分化成肌管的结果。
图2示出确认本发明的经加工的人参提取物的细胞毒性的结果。
图3是确认根据本发明的经加工的人参提取物的处理浓度和时间的肌管分化效果的结果，(A)示出肌管的细胞图像，(B)示出确认分化的肌管数量的结果，(C)示出确认分化的肌管的细胞核数量的结果。
图4是确认根据本发明的经加工的人参提取物的处理浓度的肌管的宽度增加的结果，(A)示出肌管的图像，(B)示出测量肌管的宽度并数值化的结果。
图5示出确认根据肌肉生长抑制素(MSTN)的处理浓度的肌管的萎缩程度的结果。
图6是确认本发明的经加工的人参提取物抑制由肌肉生长抑制素引起的肌管萎缩的效果的结果，(A)示出肌管的图像，(B)示出测量肌管的宽度并数值化的结果。
图7是确认本发明的经加工的人参提取物的抑制Smad2的磷酸化的效果的结果，所述Smad2是与由肌肉生长抑制素引起的肌管萎缩相关的信号传递因子，(A)示出确认磷酸化的Smad2(pSmad2)的表达的条带，(B)示出将表达条带的密度进行数值化的结果。
图8是确认本发明的经加工的人参提取物调节MyoD和分解该MyoD的酶MAFbx的表达的效果的结果，所述MyoD是肌原纤维蛋白的表达中的关键转录因子，(A)示出确认MyoD、MAFbx和GAPDH的蛋白质的表达的条带，(B)示出存在或不存在肌肉生长抑制素和本发明的经加工的人参提取物的条件下，将相对于GAPDH的MAFbx的表达进行数值化的结果，(C)示出存在或不存在肌肉生长抑制素和本发明的经加工的人参提取物的条件下，将相对于GAPDH的MyoD的表达进行数值化的结果。
具体实施方式
以下，对本发明的优选的实施例进行详细的说明。但是，本发明并不限定于以下说明的实施例，而是可以通过其它实施方案实施。提供以下实施例是为了使描述的内容详尽和完整，并向本领域技术人员充分传达本发明的思想。
通过韩国授权专利第0992800号和第1595426号中公开的方法制备本发明的经加工的人参提取物。
<比较例1.人参粉末的制备>
将200g的六年根人参进行热风干燥后粉碎，获得60g的人参粉末。
<比较例2.人参浓缩液的制备>
将200g的六年根人参进行热风干燥，然后添加1L的70％的乙醇，并在70℃下搅拌8小时后进行提取、过滤和浓缩，获得50g的人参浓缩液。
<比较例3.人参浓缩液粉末的制备>
将200g的六年根人参进行热风干燥，然后添加1L的70％的乙醇，并在70℃下搅拌8小时后进行提取、过滤、浓缩和干燥，获得30g的人参浓缩液粉末。
<比较例4.红参粉末的制备>
将200g的六年根人参在98℃下用蒸汽蒸1小时并干燥后粉碎，获得40g的红参粉末。
<比较例5.红参浓缩液的制备>
将200g的六年根人参在98℃下用蒸汽蒸1小时并干燥，然后添加1L的70％的乙醇，并在70℃下搅拌8小时后进行提取、过滤和浓缩，获得30g的红参浓缩液。
<比较例6.红参浓缩液粉末的制备>
将200g的六年根人参在98℃下用蒸汽蒸1小时并干燥，然后添加1L的70％的乙醇，并在70℃下搅拌8小时后进行提取、过滤、浓缩和干燥，获得25g的红参浓缩液粉末。
<比较例7.人参粉末+0.3％的Rh2+0.3％的Rg3的制备>
在99.4g的比较例1的人参粉末中混合0.3g的人参皂苷Rh2和0.3g的人参皂苷Rg3。
<比较例8.红参粉末+0.3％的Rh2+0.3％的Rg3的制备>
在99.4g的比较例4的红参粉末中混合0.3g的人参皂苷Rh2和0.3g的人参皂苷Rg3。
<比较例9.红参粉末+1％的Rh2的制备>
在99g的比较例4的红参粉末中混合1g的人参皂苷Rh2。
<比较例10.红参粉末+1％的Rg3的制备>
在99g的比较例4的红参粉末中混合1g的人参皂苷Rg3。
<比较例11.红参粉末+0.5％的Rh2+0.5％的Rg3的制备>
在99g的比较例4的红参粉末中混合0.5g的人参皂苷Rh2和0.5g的人参皂苷Rg3。
<实施例1.利用人参粉末制备经加工的人参粉末>
加入250g的人参粉末和750g的麦麸，并用高压蒸汽灭菌器在121℃和1.5个大气压下进行灭菌。在灭菌的培养基中加入2L的无菌水并混合，然后接种黑曲霉(Aspergillusniger)悬浮液(5×105孢子/培养基重量g)，并在28℃下培养7天。培养完成后，添加0.02M的乙酸钠缓冲溶液并混合，然后对培养基进行过滤。使用超滤膜(100kDa以上)对过滤的培养液进行过滤和浓缩，获得60g的酶液。在200g的比较例1的人参粉末中添加30g的酶液，在28℃下培养18小时后添加乙醇以使酶沉淀，并浓缩上清液。在200g的上述浓缩物中加入2L的纯净水后添加250g的柠檬酸，并在50℃下搅拌18小时。反应完成后，添加70％的乙醇并进行过滤和浓缩，获得200g的经加工的人参粉末。
<实施例2.利用人参浓缩液制备经加工的人参浓缩液>
加入250g的人参粉末和750g的麦麸，并用高压蒸汽灭菌器在121℃和1.5个大气压下进行灭菌。在灭菌的培养基中加入2L的无菌水并混合，然后接种黑曲霉(Aspergillusniger)悬浮液(5×105孢子/培养基重量g)，并在28℃下培养7天。培养完成后，添加0.02M的乙酸钠缓冲溶液并混合，然后对培养基进行过滤。使用超滤膜(100kDa以上)对过滤的培养液进行过滤和浓缩，获得60g的酶液。在200g的比较例2的人参浓缩液中添加30g的酶液，在28℃下培养18小时后添加乙醇以使酶沉淀，并浓缩上清液。在200g的上述浓缩物中添加2L的纯净水后添加250g的柠檬酸，并在50℃下搅拌18小时。反应完成后，添加70％的乙醇并进行过滤和浓缩，获得190g的经加工的人参浓缩液。
<实施例3.利用人参浓缩液粉末制备经加工的人参浓缩液粉末>
加入250g的人参粉末和750g的麦麸，并用高压蒸汽灭菌器在121℃和1.5个大气压下进行灭菌。在灭菌的培养基中加入2L的无菌水并混合，然后接种黑曲霉(Aspergillusniger)悬浮液(5×105孢子/培养基重量g)，并在28℃下培养7天。培养完成后，添加0.02M的乙酸钠缓冲溶液并混合，然后对培养基进行过滤。使用超滤膜(100kDa以上)对过滤的培养液进行过滤和浓缩，获得60g的酶液。在200g的比较例3的人参浓缩液粉末中添加30g的酶液，在28℃下培养18小时后添加乙醇以使酶沉淀，并浓缩上清液。在200g的上述浓缩物中添加2L的纯净水后添加250g的乙酸，并在50℃下搅拌8小时。反应完成后，添加70％的乙醇并进行过滤、浓缩和干燥，获得195g的经加工的人参浓缩液粉末。
<实施例4.利用红参粉末制备经加工的红参粉末>
加入250g的人参粉末和750g的麦麸，并用高压蒸汽灭菌器在121℃和1.5个大气压下进行灭菌。在灭菌的培养基中加入2L的无菌水并混合，然后接种黑曲霉(Aspergillusniger)悬浮液(5×105孢子/培养基重量g)，并在28℃下培养7天。培养完成后，添加0.02M的乙酸钠缓冲溶液并混合，然后对培养基进行过滤。使用超滤膜(100kDa以上)对过滤的培养液进行过滤和浓缩，获得60g的酶液。在200g的比较例4的红参粉末中添加30g的酶液，在28℃下培养18小时后添加乙醇以使酶沉淀，并浓缩上清液。在200g的上述浓缩物中添加2L的纯净水后添加250g的乙酸，并在50℃下搅拌8小时。反应完成后，添加70％的乙醇并进行过滤、浓缩和干燥，获得195g的经加工的红参粉末。
<实施例5.利用红参浓缩液制备经加工的红参浓缩液>
加入250g的人参粉末和750g的麦麸，并用高压蒸汽灭菌器在121℃和1.5个大气压下进行灭菌。在灭菌的培养基中加入2L的无菌水并混合，然后接种黑曲霉(Aspergillusniger)悬浮液(5×105孢子/培养基重量g)，并在28℃下培养7天。培养完成后，添加0.02M的乙酸钠缓冲溶液并混合，然后对培养基进行过滤。使用超滤膜(100kDa以上)对过滤的培养液进行过滤和浓缩，获得60g的酶液。在200g的比较例5的红参浓缩液中添加30g的酶液，在28℃下培养18小时后添加乙醇以使酶沉淀，并浓缩上清液。在200g的上述浓缩物中添加2L的纯净水后添加250g的柠檬酸，并在50℃下搅拌18小时。反应完成后，添加70％的乙醇并进行过滤和浓缩，获得190g的经加工的红参浓缩液。
<实施例6.利用红参浓缩液粉末制备经加工的红参浓缩液粉末>
加入250g的人参粉末和750g的麦麸，并用高压蒸汽灭菌器在121℃和1.5个大气压下进行灭菌。在灭菌的培养基中加入2L的无菌水并混合，然后接种黑曲霉(Aspergillusniger)悬浮液(5×105孢子/培养基重量g)，并在28℃下培养7天。培养完成后，添加0.02M的乙酸钠缓冲溶液并混合，然后对培养基进行过滤。使用超滤膜(100kDa以上)对过滤的培养液进行过滤和浓缩，获得60g的酶液。在200g的比较例6的红参浓缩液粉末中添加30g的酶液，在28℃下培养18小时后添加乙醇以使酶沉淀，并浓缩上清液。在200g的上述浓缩物中添加2L的纯净水后添加250g的乙酸，并在50℃下搅拌8小时。反应完成后，添加70％的乙醇并进行过滤、浓缩和干燥，获得195g的经加工的红参浓缩液粉末。
下表1中示出通过韩国授权专利第992800号中公开的方法分析的本发明的实施例和比较例的制备物中所含有的人参皂苷Rh2和人参皂苷Rg3的含量。在制备对应于本发明的实施例1至实施例6的人参粉末和红参粉末的皂苷分解酶后，利用所制备的皂苷分解酶和有机酸的水解，使得经加工的人参粉末或经加工的人参提取物中的微量的人参皂苷成分增加，确认了与作为反应对象物质的人参粉末和红参粉末相比，所述经加工的人参粉末或经加工的人参提取物中的人参皂苷Rh2和人参皂苷Rg3增加，因此含有大量的人参皂苷Rh2和人参皂苷Rg3。制备比较例7至比较例11是为了比较促进肌肉分化的效果，在比较例7至比较例11中，在没有进行如同本发明实施例的皂苷分解酶和有机酸水解处理的人参粉末和红参粉末中简单地添加人参皂苷Rh2和人参皂苷Rg3，以使人参皂苷Rh2和人参皂苷Rg3的含量与本发明的实施例相同。
[表1]
Figure BDA0002798276400000161
Figure BDA0002798276400000171
<实验例1.培养动物细胞和诱导肌管分化>
在肌肉分化过程中发生成肌细胞的分裂，成肌细胞之间发生融合而发育成肌管，最终形成肌肉。因此，为了确认本发明的经加工的人参提取物对肌肉分化的影响，确认了分化成肌管的活性。
为了确认促进分化成肌管的活性，利用作为小鼠成肌细胞(myoblast)的C2C12(C2C12 ATCC CRL-1772)细胞。将C2C12细胞放入包含10％的胎牛血清(fetal bovineserum，FBS)、100U/ml的青霉素(penicillin)和100U/ml的链霉素(streptomycin)的达尔伯克改良伊格尔培养基(Dulbecco's Modified Eagle's Medium，DMEM(Gibco))中，并在37℃和5％的CO2下，在培养基中进行培养。
将上述培养的C2C12细胞分配在平板上，并培养至细胞填充80-90％左右。去除培养液，添加包含2％的马血清(horse serum，Gibco)的DMEM培养基并培养，以诱导分化成肌管，然后通过显微镜确认形成的肌管，其结果示于图1中。
如图1所示，确认了与(A)中的分化之前不同，(B)中诱导分化后多个成肌细胞融合形成管状的肌管。
由此可知，通过用马血清处理C2C12细胞，可以诱导肌肉分化。
<实验例2.确认经加工的人参提取物的细胞毒性>
为了确认本发明的经加工的人参提取物是否具有细胞毒性，利用所述实验例1中分化的肌管。
将所述实验例1的肌管分配在96孔板中并培养24小时，然后用0-100μg/ml的所述本发明的经加工的人参提取物进行处理，并再培养24小时。培养后，利用普洛麦格(Promega)公司的CellTiter-Glo发光法细胞活力检测(CellTiter-Glo Luminescent cellviability assay)试剂盒和制造商提供的说明书测量细胞内ATP浓度，以此测量细胞存活率，其结果示于图2中。
如图2所示，直至所述经加工的人参提取物中的实施例2的经加工的人参提取物的浓度达到30μg/ml，细胞存活率的减少不明显，但在50μg/ml和100μg/ml下，与未用经加工的人参提取物进行处理的正常细胞相比，细胞存活率减少7-12％左右。即，可以预测实施例2的经加工的人参提取物的浓度为50μg/ml以上时，可能会产生细胞毒性。
对于这种结果，在用其它实施例的经加工的人参提取物进行处理时也可以获得相似的结果。
由此可知，本发明的经加工的人参提取物的最高处理浓度为30μg/ml。
<实验例3.确认经加工的人参提取物促进肌管的形成>
在肌肉分化过程中发生成肌细胞的分裂，成肌细胞之间发生融合而发育成肌管，最终形成肌肉。因此，为了确认本发明的经加工的人参提取物对肌肉分化的影响，确认了诱导形成肌管的活性。
通过与所述实验例1的诱导形成肌管的实验方法相同的方法进行实验。此时，用马血清进行处理后，用0μg/ml、10μg/ml、30μg/ml的所述实施例2的经加工的人参提取物进行处理，然后培养6天。对培养的第0天、第2天、第4天、第6天的细胞进行固定(fixing)，根据迪夫快速试剂盒(Diff Quick kit，希森美康，ZS0003，日本)和制造商提供的说明书，对细胞核和细胞质进行染色，然后利用显微镜拍摄图像，并分析肌管的数量和细胞核的数量，其结果示于图3中。
如图3所示，用实施例2的经加工的人参提取物进行处理时，通过细胞图像(A)、肌管的数量(B)和细胞核的数量(C)确认了根据处理时间和浓度的肌管的增加。
此外，通过与上述实验方法相同的方法，用10μg/ml的所述实施例1至实施例6和比较例1至比较例11的经加工的人参提取物进行处理后培养4天，并分析肌管的数量，其结果示于下表2中。
[表2]
分类 每个视野的肌管的数量
对照组(仅用马血清进行处理) 25
实施例1(经加工的人参粉末) 31
实施例2(经加工的人参浓缩液) 37
实施例3(经加工的人参浓缩液粉末) 41
实施例4(经加工的红参粉末) 33
实施例5(经加工的红参浓缩液) 34
实施例6(经加工的红参浓缩液粉末) 40
比较例1(人参粉末) 25
比较例2(人参浓缩液) 26
比较例3(人参浓缩液粉末) 27
比较例4(红参粉末) 26
比较例5(红参浓缩液) 26
比较例6(红参浓缩液粉末) 26
比较例7(99.5g的人参粉末+0.3g的Rh2+0.3g的Rg3) 30
比较例8(99.5g的红参粉末+0.3g的Rh2+0.3g的Rg3) 31
比较例9(99g的红参粉末+1g的Rh2) 29
比较例10(99g的红参粉末+1g的Rg3) 29
比较例11(99g的红参粉末+0.5g的Rh2+0.5g的Rg3) 32
从所述表2可知，用比较例1至比较例6的经加工的人参提取物进行处理时的肌管的数量与仅用马血清进行处理的对照组相似，另一方面，用实施例1至实施例6的经加工的人参提取物进行处理时，确认了肌管的数量增加。此外，与比较例1和比较例4的经加工的人参提取物相比，用将人参皂苷Rh2和人参皂苷Rg3分别添加或全部添加到比较例1和比较例4的人参粉末或红参粉末中的比较例7至比较例11的经加工的人参提取物进行处理时，肌管的数量增加，特别是与用分别添加人参皂苷Rh2或人参皂苷Rg3的比较例9和比较例10的经加工的人参提取物进行处理时相比，用同时添加两种人参皂苷的比较例7、比较例8、比较例10和比较例11的经加工的人参提取物进行处理时，确认了肌管的数量多。
由此可知，如同本发明的经加工的人参提取物，同时施用人参皂苷Rh2和人参皂苷Rg3时，促进肌肉分化的效果增加。
<实验例4.确认经加工的人参提取物的增加肌管宽度的效果>
在肌肉分化过程中形成的肌管的长度和宽度增加并与周围的肌管融合形成肌纤维。因此，为了确认本发明的经加工的人参提取物对肌肉分化的影响，确认了增加肌管的宽度的效果。
通过所述实验例1的方法，使C2C12细胞分化成肌管，然后用0μg/ml、1μg/ml、10μg/ml、30μg/ml的所述实施例2的经加工的人参提取物进行处理，并培养24小时。用4％的多聚甲醛(paraformaldehyde)对培养的细胞进行固定15分钟，并用0.2％的曲拉通X-100(triton X-100)进行处理15分钟，然后用5％的牛血清白蛋白(bovine serum albumin，BSA)进行封闭(blocking)6小时。封闭后，为了观察细胞形态，在细胞中加入针对作为保持肌管形成的蛋白质的肌球蛋白重链(MHC)的抗体，并在4℃下反应12小时，然后使结合有Alexa Fluor 488荧光物质的二抗在室温下反应4小时以进行免疫荧光染色，然后通过荧光显微镜，利用附着在MHC上的荧光物质观察肌管的图像，并利用Image J程序测量肌管的宽度。其结果示于图4中。此时，对于肌管的宽度，通过随机测量5个区域中的总共100个以上的肌管的宽度来进行定量。
通过图4的(A)中的肌管的图像和图4的(B)中的肌管宽度的测量结果可知，从C2C12分化的肌管的宽度随着实施例2的经加工的人参提取物的处理浓度而增加。
此外，尽管未在本说明书中示出，但是用本发明的实施例1至实施例5的经加工的人参提取物进行处理时，与用所述实施例2的经加工的人参提取物进行处理时相同，确认了肌管的宽度增加。
由此可知，本发明的经加工的人参提取物具有通过增加肌管的宽度来促进肌肉分化的效果。
<实验例5.确认经加工的人参提取物的抑制肌萎缩的效果>
实验例5-1.制造肌萎缩动物细胞模型
为了确认本发明的经加工的人参提取物的抑制肌萎缩的效果，制造了肌萎缩动物细胞模型。此时，基于发生肌萎缩时肌管的宽度和长度减小来制造动物细胞模型。
与所述实验例1的诱导肌管分化相同的方法分化肌管，然后加入不包含FBS的DMEM培养基并培养3小时。培养后，用不同浓度的作为肌肉分化抑制物质的肌肉生长抑制素(MSTN)处理各个细胞24小时，为了确认是否诱导肌萎缩，测量肌管的宽度变化。通过与所述实验例4相同的方法测量肌管的宽度变化，在进行免疫荧光染色后，通过荧光显微镜，利用附着在MHC上的荧光物质观察肌管的图像，并利用Image J程序测量肌管的宽度，其结果示于图5中。
如图5所示，与未用肌肉生长抑制素进行处理的肌管相比，用肌肉生长抑制素进行处理时，确认了肌管的宽度随着处理浓度的增加而减小，用0.4μg/ml的肌肉生长抑制素进行处理时，肌管的宽度减小最多。
因此，在制造用于确认本发明的经加工的人参提取物的抑制肌萎缩的效果的肌萎缩动物细胞模型时，决定用0.4μg/ml的肌肉生长抑制素进行处理。
实验例5-2.确认经加工的人参提取物的抑制肌萎缩的效果
为了确认本发明的经加工的人参提取物的抑制肌萎缩的效果，通过与所述实验例5-1的肌萎缩动物细胞模型的制造方法相同的方法诱导肌萎缩，然后观察肌管的宽度变化，其结果示于图6中。此时，单独用0.4μg/ml的肌肉生长抑制素(MSTN)和30μg/ml的所述实施例2的经加工的人参提取物进行处理或者进行联合处理24小时，并将未用肌肉生长抑制素和实施例2的经加工的人参提取物进行处理的肌管用作对照组。
通过图6的(A)中的肌管的图像和图6的(B)中的肌管宽度的测量结果可知，与对照组相比，用实施例2的经加工的人参提取物进行处理时，肌管的宽度增加，另一方面，用肌肉生长抑制素(MSTN)进行处理时，肌管的宽度减小。此外，同时用肌肉生长抑制素和实施例2的经加工的人参提取物进行处理时，确认了由于肌肉生长抑制素而减少的肌管的宽度增加。
由此可知，本发明的经加工的人参提取物在肌肉分化过程中增加肌管的宽度，而且抑制由肌肉生长抑制素引起的肌萎缩。
<实验例6.确认经加工的人参提取物的抑制肌肉生长抑制素相关信号传递的效果>
实验例6-1.确认抑制Smad2磷酸化的效果
已知肌肉生长抑制素(MSTN)通过激活素II型受体(ActRIIB)-Smad2信号传递途径的激活来增加泛素蛋白酶体途径(UPP)介导的蛋白质分解，从而诱导肌萎缩。因此，为了确认本发明的经加工的人参提取物的抑制由肌肉生长抑制素引起的肌萎缩的效果，确认了是否抑制ActRIIB-Smad2信号传递途径中Smad2的磷酸化。
对于通过与所述实验例5-2相同的方法分化的肌管，用肌肉生长抑制素和所述实施例2的经加工的人参提取物进行处理以获得细胞，并利用该细胞进行蛋白质印迹(Western blot)。此时，就实施例2的经加工的人参提取物而言，用0μg/ml、10μg/ml、30μg/ml、100μg/ml的处理浓度进行处理。在获得的细胞中加入裂解缓冲液(lysis buffer)并使细胞溶解，然后进行离心分离以获得上清液的蛋白质。通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl polyacrylamide gel electrophoresis，SDS-PAGE)分离所获得的上清液的蛋白质，并转移至聚偏二氟乙烯(polyvinylidenefluoride，PVDF)薄膜。用封闭溶液对薄膜进行封闭后，为了确认Smad2和磷酸化的Smad2(pSmad2)的量，用各自的一抗进行处理后用针对一抗的二抗进行处理，并利用增强化学发光(enhancedchemiluminescence，ECL)(安玛西亚(Amersham)公司)确认蛋白质表达。此时，测量蛋白质条带密度并进行数值化，其结果示于图7中。
如图7的(A)中的蛋白质表达条带结果和图7的(B)中的将表达量进行数值化的结果所示，用肌肉生长抑制素(MSTN)处理肌管时，Smad2的磷酸化(pSmad2)增加，另一方面，用实施例2的经加工的人参提取物进行处理时，确认了Smad2的磷酸化(pSmad2)随着处理浓度的增加而减少。
实验例6-2.确认抑制MyoD分解途径的效果
已知对肌肉分化重要的肌原纤维蛋白的表达中的关键转录因子MyoD的分解过程是由通过肌肉生长抑制素(MSTN)-ActRIIB-Smad2途径激活的UPP过程主导的。已知UPP过程受特异于靶蛋白的泛素化E3连接酶(ligase)的调节，该过程中的关键的MyoD的E3连接酶是MAFbx。因此，为了确认本发明的经加工的人参提取物的抑制由肌肉生长抑制素引起的肌萎缩的效果，确认了MyoD和MAFbx的含量变化。
对于通过与所述实验例5-2相同的方法分化的肌管，用肌肉生长抑制素和所述实施例2的经加工的人参提取物进行处理以获得细胞。此时，就实施例2的经加工的人参提取物而言，用30μg/ml的处理浓度进行处理。利用所获得的细胞，并通过与所述实施例6-1相同的方法，利用对应于MyoD和MAFbx的抗体进行蛋白质印迹，其结果示于图8中。
如图8的(A)中的MAFbx和MyoD的蛋白质表达条带结果、图8的(B)中的将MAFbx的表达量进行数值化的结果以及图8的(C)中的将MyoD的表达量进行数值化的结果所示，用肌肉生长抑制素(MSTN)处理肌管时，MAFbx的表达增加，MyoD的表达减少，另一方面，用实施例2的经加工的人参提取物进行处理时，确认了由于MSTN而增加的MAFbx减少，由于MSTN而减少的MyoD的表达增加。
通过所述实验例6-1和实验例6-2的结果可知，本发明的经加工的人参提取物通过抑制作为肌肉分化抑制剂的肌肉生长抑制素的信号传递过程来促进肌肉分化。

Claims (11)

1.一种用于促进肌肉分化的组合物，其包含经加工的人参提取物作为有效成分。
2.根据权利要求1所述的用于促进肌肉分化的组合物，其特征在于，通过以下步骤制备所述经加工的人参提取物：
(a)将黑曲霉(Aspergillus niger)接种在由人参粉末和麦麸组成的培养基中；
(b)培养所述步骤(a)的菌；
(c)用超滤膜对所述步骤(b)的培养物进行提纯；
(d)从所述步骤(c)的提纯物中分离酶；
(e)在人参粉末、红参粉末、人参提取物或红参提取物中添加所述步骤(d)的酶；
(f)使所述步骤(e)的添加物发酵；
(g)分离所述步骤(f)的发酵物；
(h)浓缩所述步骤(g)的上清液；
(i)使所述步骤(h)的浓缩物与选自乙酸、乳酸、柠檬酸、苹果酸和酒石酸中的一种以上的有机酸反应；以及
(j)对所述步骤(i)的反应物进行中和、过滤、提纯、浓缩和干燥。
3.根据权利要求1或2所述的用于促进肌肉分化的组合物，其特征在于，所述组合物含有分别为0.5-30重量％的人参皂苷Rh2和人参皂苷Rg3。
4.根据权利要求1或2所述的用于促进肌肉分化的组合物，其特征在于，所述组合物促进肌管的分化。
5.根据权利要求1或2所述的用于促进肌肉分化的组合物，其特征在于，所述组合物抑制由肌肉生长抑制素引起的肌萎缩现象。
6.一种用于预防或治疗肌肉疾病的药学组合物，其特征在于，所述药学组合物包含权利要求1或2所述的用于促进肌肉分化的组合物和药学上可接受的载体。
7.根据权利要求6所述的用于预防或治疗肌肉疾病的药学组合物，其特征在于，所述肌肉疾病选自肌萎缩症、肌病、肌肉损伤、肌营养不良症、肌无力症、肌肉减少症、肌神经传导疾病、皮肌炎、糖尿病性肌萎缩症、神经损伤、肌萎缩侧索硬化症(ALS)、恶病质和退行性肌肉疾病。
8.根据权利要求7所述的用于预防或治疗肌肉疾病的药学组合物，其特征在于，所述恶病质是艾滋病(AIDS)、腹腔疾病、多发性硬化症、类风湿性关节炎、慢性心力衰竭、充血性心力衰竭、尿毒症、结核病、克罗恩病、无法治愈或者严重的1型糖尿病、神经性厌食症和缺少激素引起的恶病质。
9.一种用于改善肌肉疾病的健康功能食品，其特征在于，所述健康功能食品包含权利要求1或2所述的用于促进肌肉分化的组合物和食品学上可接受的食品辅助添加剂。
10.根据权利要求9所述的用于改善肌肉疾病的健康功能食品，其特征在于，所述肌肉疾病选自肌萎缩症、肌病、肌肉损伤、肌营养不良症、肌无力症、肌肉减少症、肌神经传导疾病、皮肌炎、糖尿病性肌萎缩症、神经损伤、肌萎缩侧索硬化症(ALS)、恶病质和退行性肌肉疾病。
11.根据权利要求10所述的用于改善肌肉疾病的健康功能食品，其特征在于，所述恶病质是艾滋病(AIDS)、腹腔疾病、多发性硬化症、类风湿性关节炎、慢性心力衰竭、充血性心力衰竭、尿毒症、结核病、克罗恩病、无法治愈或者严重的1型糖尿病、神经性厌食症和缺少激素引起的恶病质。
CN201980035332.4A 2018-05-25 2019-05-24 包含经加工的人参提取物的用于促进肌肉分化的组合物 Pending CN112236156A (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020180059749A KR101966117B1 (ko) 2018-05-25 2018-05-25 가공인삼추출물을 포함하는 근육 분화 촉진용 조성물
KR10-2018-0059749 2018-05-25
PCT/KR2019/006265 WO2019226015A1 (ko) 2018-05-25 2019-05-24 가공인삼추출물을 포함하는 근육 분화 촉진용 조성물

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN112236156A true CN112236156A (zh) 2021-01-15

Family

ID=66103794

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201980035332.4A Pending CN112236156A (zh) 2018-05-25 2019-05-24 包含经加工的人参提取物的用于促进肌肉分化的组合物

Country Status (6)

Country Link
US (1) US20210205387A1 (zh)
EP (1) EP3804738A4 (zh)
JP (1) JP7214851B2 (zh)
KR (1) KR101966117B1 (zh)
CN (1) CN112236156A (zh)
WO (1) WO2019226015A1 (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114796295A (zh) * 2021-01-18 2022-07-29 福美来堂股份有限公司 包含人参提取物的用于促进肌肉分化及预防肌肉损伤的组合物、食品组合物及药学组合物
WO2024179269A1 (zh) * 2023-03-02 2024-09-06 河北以岭医药研究院有限公司 一种治疗肌萎缩侧索硬化症的中药组合物及其应用

Families Citing this family (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101966117B1 (ko) * 2018-05-25 2019-04-05 (주)녹십자웰빙 가공인삼추출물을 포함하는 근육 분화 촉진용 조성물
KR102095536B1 (ko) * 2019-06-04 2020-03-31 (주)녹십자웰빙 천연물 추출물의 용출률 및 붕해성이 개선된 경구용 제제
KR102483300B1 (ko) * 2019-10-28 2023-01-02 한국식품연구원 진세노사이드 Rf, 진세노사이드 Rf를 포함하는 진세노사이드 조성물, 또는 이들 중 어느 하나 이상의 혼합물을 유효성분으로 포함하는 근감소증 개선용 조성물
WO2021086017A1 (ko) * 2019-10-28 2021-05-06 한국식품연구원 진세노사이드 Rf, 진세노사이드 Rf를 포함하는 진세노사이드 조성물, 또는 이들 중 어느 하나 이상의 혼합물을 유효성분으로 포함하는 근기능 개선용 조성물
KR102291748B1 (ko) 2019-12-12 2021-08-24 아레즈 주식회사 진세노사이드 Rg2, Rg4, Rg6, Rh1 및 Rh4를 유효성분으로 포함하는 근육 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물
CN115349629A (zh) * 2022-08-02 2022-11-18 仙乐健康科技股份有限公司 一种激活肌卫星细胞的组合物以及其使用方法
WO2024094037A1 (en) * 2022-11-01 2024-05-10 Nutrir Limited Additive compositions for culture media, culture media comprising the same and methods of culturing cells

Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1771042A (zh) * 2002-06-11 2006-05-10 博新药业有限公司 用于治疗癌症之皂甙或皂甙配基组合物
CN1879640A (zh) * 2005-06-19 2006-12-20 彭康康 人参皂苷Rh2、Ck和Rg3在增加心肌收缩力的用途
CN101002785A (zh) * 2006-01-19 2007-07-25 云南天秀植物科技开发有限公司 一种抗肿瘤的药物组合物及其制备工艺
US20110135748A1 (en) * 2008-07-29 2011-06-09 Hebei Yiling Medicine Research Institute Co., Ltd. Use of a traditional chinese medicinal composition for preparing medicine for promoting bone marrow-derived mesenchymal stem cell survival in vivo and differentiation into cardiomyocytes
KR101595426B1 (ko) * 2013-08-30 2016-02-18 (주)녹십자웰빙 진세노사이드 성분이 증가된 가공인삼분말 또는 가공인삼추출물을 함유하는 암 관련 피로의 예방 및 치료용 조성물
CN105769891A (zh) * 2016-04-12 2016-07-20 深圳以诺生物制药有限公司 低极性稀有人参皂苷混合物及其用途
KR101771486B1 (ko) * 2015-06-25 2017-08-25 서울대학교산학협력단 특정 다마란 계열의 성분이 증가된 인삼추출물의 제조방법 및 이를 이용한 근육감소증 관련 질환 치료용 조성물

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6784209B1 (en) * 1999-10-18 2004-08-31 Muscletech Research And Development Inc. Food supplement for increasing lean mass and strength
KR101182358B1 (ko) * 2006-06-07 2012-09-11 허베이 이링 메디슨 리서치 인스티튜트 코오포레이션 리미티드 근육 퇴화 및 근무력증 치료를 위한 의약 조성물 및 그제조 방법
JP5271534B2 (ja) * 2006-12-25 2013-08-21 ライオン株式会社 筋萎縮抑制剤
KR100992800B1 (ko) 2010-05-14 2010-11-08 주식회사 지씨에이치앤피 미량의 진세노사이드 성분이 증가된 신규한 가공인삼 또는 가공인삼추출물의 제조방법
KR101493413B1 (ko) * 2012-06-27 2015-02-16 주식회사 녹십자에이치에스 진세노사이드 알지3 및 알에이치2를 유효성분으로 하는 인삼 또는 홍삼의 가공물을 함유하는 간섬유증 또는 간경화증의 치료 또는 예방용 조성물
CN103724391A (zh) * 2013-11-18 2014-04-16 大连杰信生物科技有限公司 人参皂苷m1与叔丁基二甲基氯硅烷的单醚化合成方法
KR20170094292A (ko) 2014-12-08 2017-08-17 노파르티스 아게 근육감소증의 치료를 위한 미오스타틴 또는 액티빈 길항제
KR20170058035A (ko) * 2015-11-18 2017-05-26 경희대학교 산학협력단 진세노사이드 Rb1, 및 진세노사이드 Rg1을 포함하는 신경세포 보호용 조성물
JP6626035B2 (ja) * 2017-04-10 2019-12-25 グリーン クロス ウェルビーイング コーポレーションＧｒｅｅｎ Ｃｒｏｓｓ Ｗｅｌｌｂｅｉｎｇ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ 筋肉減少症の予防または治療用薬学組成物及び予防または改善用健康機能食品組成物
KR101966117B1 (ko) * 2018-05-25 2019-04-05 (주)녹십자웰빙 가공인삼추출물을 포함하는 근육 분화 촉진용 조성물

Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1771042A (zh) * 2002-06-11 2006-05-10 博新药业有限公司 用于治疗癌症之皂甙或皂甙配基组合物
CN1879640A (zh) * 2005-06-19 2006-12-20 彭康康 人参皂苷Rh2、Ck和Rg3在增加心肌收缩力的用途
CN101002785A (zh) * 2006-01-19 2007-07-25 云南天秀植物科技开发有限公司 一种抗肿瘤的药物组合物及其制备工艺
US20110135748A1 (en) * 2008-07-29 2011-06-09 Hebei Yiling Medicine Research Institute Co., Ltd. Use of a traditional chinese medicinal composition for preparing medicine for promoting bone marrow-derived mesenchymal stem cell survival in vivo and differentiation into cardiomyocytes
KR101595426B1 (ko) * 2013-08-30 2016-02-18 (주)녹십자웰빙 진세노사이드 성분이 증가된 가공인삼분말 또는 가공인삼추출물을 함유하는 암 관련 피로의 예방 및 치료용 조성물
KR101771486B1 (ko) * 2015-06-25 2017-08-25 서울대학교산학협력단 특정 다마란 계열의 성분이 증가된 인삼추출물의 제조방법 및 이를 이용한 근육감소증 관련 질환 치료용 조성물
CN105769891A (zh) * 2016-04-12 2016-07-20 深圳以诺生物制药有限公司 低极性稀有人参皂苷混合物及其用途

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
孟思进: "《骨骼肌细胞分子生物学研究进展》", 31 December 2010 *
程慧，等: "人参皂苷Rg3与Rh2的研究进展", 《药物评价研究》 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114796295A (zh) * 2021-01-18 2022-07-29 福美来堂股份有限公司 包含人参提取物的用于促进肌肉分化及预防肌肉损伤的组合物、食品组合物及药学组合物
WO2024179269A1 (zh) * 2023-03-02 2024-09-06 河北以岭医药研究院有限公司 一种治疗肌萎缩侧索硬化症的中药组合物及其应用

Also Published As

Publication number Publication date
EP3804738A4 (en) 2022-01-26
KR101966117B1 (ko) 2019-04-05
JP2021524506A (ja) 2021-09-13
WO2019226015A1 (ko) 2019-11-28
JP7214851B2 (ja) 2023-01-30
US20210205387A1 (en) 2021-07-08
EP3804738A1 (en) 2021-04-14

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN112236156A (zh) 包含经加工的人参提取物的用于促进肌肉分化的组合物
KR102206628B1 (ko) 비만의 예방 또는 치료 효과를 가지는 신규 락토바실러스 람노서스 균주 및 이의 용도
KR20170001037A (ko) 특정 다마란 계열의 성분이 증가된 인삼추출물의 제조방법 및 이를 이용한 근육감소증 관련 질환 치료용 조성물
KR20170010303A (ko) 해당화 꽃 추출물을 유효성분으로 포함하는 il-6 매개성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물
JP2022110113A (ja) エンテロコッカス・フェカーリス、その培養液またはその死菌体を有効成分として含有する筋肉の減退、低下及び筋萎縮の予防、改善または治療用の薬学組成物、食品組成物及び食品添加剤
KR102017282B1 (ko) 가공인삼추출물을 포함하는 근육 분화 촉진용 조성물
US11096981B2 (en) Composition for preventing or treating muscle atrophy comprising lycii radicis cortex
JP6533294B2 (ja) 茯苓皮抽出物を含有する退行性神経疾患の予防、改善または治療用組成物
KR20200145716A (ko) 근육질환 예방 또는 치료용 조성물
KR20210096904A (ko) 천마 추출물을 유효성분으로 포함하는 여성 갱년기 증상의 완화 및 예방용 조성물
JP2021031472A (ja) Ａｐｅｈ産生促進剤
KR20200043562A (ko) 지노스테마 론기페스 vk1 추출물 또는 이로부터 분리한 화합물을 유효성분으로 포함하는 ampk 관련 질환 예방 또는 치료용 조성물
KR20190118961A (ko) 구꼬아민 a 및 구꼬아민 b를 유효성분으로 함유하는 골격근 위축 예방 또는 개선용 조성물
KR102673861B1 (ko) 근육 감소 억제 및 근육량 증가 활성을 갖는 신규 펩타이드 및 이의 용도
KR102346511B1 (ko) 타라곤(Tarragon, Little Dragon, Mugwort, Estragon) 추출물을 함유하는 근육질환 예방 또는 치료용 조성물
KR102009219B1 (ko) 젠티오피크로사이드를 포함하는 비만의 예방 또는 개선용 조성물
CN105663109A (zh) 甘油三酯类化合物在制备治疗神经退行性疾病药物中的应用
WO2024080435A1 (ko) 파르네솔을 포함하는 근육 줄기세포 증식 및 분화 촉진용 조성물.
US20160151439A1 (en) Pharmaceutical composition for preventing and treating obesity, containing green-tea see husk extract as active ingredient
KR101799793B1 (ko) 신규한 이소나이트라민 화합물 및 이를 포함하는 대사성 질환 예방 또는 치료용 조성물
KR20110092595A (ko) 펜톡시필린을 유효성분으로 함유하는 타우 단백질 과인산화 억제제
KR20220136128A (ko) 진세노사이드 혼합물을 유효성분으로 포함하는 퇴행성 뇌질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물
CN114641281A (zh) 用于预防和治疗tau蛋白病的组合物
KR20220058412A (ko) 차즈기 추출물을 유효성분으로 하는 근 위축증 또는 근 감소증 예방 또는 치료용 조성물
KR20240032222A (ko) 참당귀 추출물 및 타라곤 추출물을 함유하는 근육 질환 예방 또는 치료용 조성물

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
REG Reference to a national code

Ref country code: HK

Ref legal event code: DE

Ref document number: 40045573

Country of ref document: HK