KR102017282B1 - 가공인삼추출물을 포함하는 근육 분화 촉진용 조성물 - Google Patents
가공인삼추출물을 포함하는 근육 분화 촉진용 조성물 Download PDFInfo
- Publication number
- KR102017282B1 KR102017282B1 KR1020190010337A KR20190010337A KR102017282B1 KR 102017282 B1 KR102017282 B1 KR 102017282B1 KR 1020190010337 A KR1020190010337 A KR 1020190010337A KR 20190010337 A KR20190010337 A KR 20190010337A KR 102017282 B1 KR102017282 B1 KR 102017282B1
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- muscle
- ginseng
- composition
- ginseng extract
- powder
- Prior art date
Links
- 235000005035 Panax pseudoginseng ssp. pseudoginseng Nutrition 0.000 title claims abstract description 68
- 235000003140 Panax quinquefolius Nutrition 0.000 title claims abstract description 68
- 235000008434 ginseng Nutrition 0.000 title claims abstract description 68
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 46
- 239000000284 extract Substances 0.000 title claims abstract description 12
- 241000208340 Araliaceae Species 0.000 title claims abstract 6
- 230000022379 skeletal muscle tissue development Effects 0.000 title description 3
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 title 1
- 235000020710 ginseng extract Nutrition 0.000 claims abstract description 81
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 claims abstract description 69
- 108010056852 Myostatin Proteins 0.000 claims abstract description 61
- 229930182494 ginsenoside Natural products 0.000 claims abstract description 32
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 claims abstract description 30
- 208000029578 Muscle disease Diseases 0.000 claims abstract description 29
- 201000000585 muscular atrophy Diseases 0.000 claims abstract description 28
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims abstract description 19
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims abstract description 16
- 208000021642 Muscular disease Diseases 0.000 claims abstract description 7
- 102000004472 Myostatin Human genes 0.000 claims abstract 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 92
- 235000002789 Panax ginseng Nutrition 0.000 claims description 58
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 claims description 47
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 34
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 34
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 25
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 21
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 21
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 20
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 15
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims description 14
- 201000006938 muscular dystrophy Diseases 0.000 claims description 13
- 241000228245 Aspergillus niger Species 0.000 claims description 12
- 206010028289 Muscle atrophy Diseases 0.000 claims description 12
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 12
- 230000020763 muscle atrophy Effects 0.000 claims description 11
- 206010002026 amyotrophic lateral sclerosis Diseases 0.000 claims description 10
- 230000003412 degenerative effect Effects 0.000 claims description 8
- 235000013376 functional food Nutrition 0.000 claims description 8
- 230000036541 health Effects 0.000 claims description 8
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 claims description 8
- 235000011054 acetic acid Nutrition 0.000 claims description 7
- 235000015165 citric acid Nutrition 0.000 claims description 7
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 6
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 6
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 5
- BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N (S)-malic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 4
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims description 4
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 claims description 4
- 208000032131 Diabetic Neuropathies Diseases 0.000 claims description 4
- 206010012643 Diabetic amyotrophy Diseases 0.000 claims description 4
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Natural products [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000000654 additive Substances 0.000 claims description 4
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 claims description 4
- BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N alpha-hydroxysuccinic acid Natural products OC(=O)C(O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 4
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 claims description 4
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 4
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims description 4
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims description 4
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 claims description 4
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 claims description 4
- 239000001630 malic acid Substances 0.000 claims description 4
- 235000011090 malic acid Nutrition 0.000 claims description 4
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 claims description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 4
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 claims description 4
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 claims description 4
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 claims description 2
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 claims 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 abstract description 91
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 abstract description 26
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 21
- 210000003098 myoblast Anatomy 0.000 abstract description 19
- 229940089161 ginsenoside Drugs 0.000 abstract description 10
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 abstract description 5
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 66
- 240000005373 Panax quinquefolius Species 0.000 description 62
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 60
- 102100039939 Growth/differentiation factor 8 Human genes 0.000 description 59
- 235000008504 concentrate Nutrition 0.000 description 45
- RWXIFXNRCLMQCD-JBVRGBGGSA-N (20S)-ginsenoside Rg3 Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@H]1CC[C@]2(C)[C@H]3C[C@@H](O)[C@H]4[C@@]([C@@]3(CC[C@H]2C1(C)C)C)(C)CC[C@@H]4[C@@](C)(O)CCC=C(C)C)[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O RWXIFXNRCLMQCD-JBVRGBGGSA-N 0.000 description 33
- 210000004262 dental pulp cavity Anatomy 0.000 description 32
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 23
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 19
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 18
- 206010006895 Cachexia Diseases 0.000 description 16
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 16
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 14
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 14
- 210000000663 muscle cell Anatomy 0.000 description 13
- 230000008569 process Effects 0.000 description 12
- 208000030507 AIDS Diseases 0.000 description 11
- 102100040669 F-box only protein 32 Human genes 0.000 description 9
- 101710191029 F-box only protein 32 Proteins 0.000 description 9
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 description 9
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 description 9
- 235000017709 saponins Nutrition 0.000 description 9
- 208000001076 sarcopenia Diseases 0.000 description 9
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 9
- CKUVNOCSBYYHIS-IRFFNABBSA-N (20S)-ginsenoside Rh2 Chemical compound O([C@H]1CC[C@]2(C)[C@H]3C[C@@H](O)[C@H]4[C@@]([C@@]3(CC[C@H]2C1(C)C)C)(C)CC[C@@H]4[C@@](C)(O)CCC=C(C)C)[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O CKUVNOCSBYYHIS-IRFFNABBSA-N 0.000 description 8
- 102000005604 Myosin Heavy Chains Human genes 0.000 description 8
- 108010084498 Myosin Heavy Chains Proteins 0.000 description 8
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 8
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 8
- 239000001397 quillaja saponaria molina bark Substances 0.000 description 8
- 210000001057 smooth muscle myoblast Anatomy 0.000 description 8
- CKUVNOCSBYYHIS-UHFFFAOYSA-N (20R)-ginsenoside Rg3 Natural products CC(C)=CCCC(C)(O)C1CCC(C2(CCC3C4(C)C)C)(C)C1C(O)CC2C3(C)CCC4OC1OC(CO)C(O)C(O)C1O CKUVNOCSBYYHIS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- CKUVNOCSBYYHIS-LGYUXIIVSA-N 20(R)-Ginsenoside Rh2 Natural products O([C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)[C@@H]1C(C)(C)[C@H]2[C@@](C)([C@H]3[C@](C)([C@@]4(C)[C@H]([C@H](O)C3)[C@@H]([C@](O)(CC/C=C(\C)/C)C)CC4)CC2)CC1 CKUVNOCSBYYHIS-LGYUXIIVSA-N 0.000 description 7
- 206010007558 Cardiac failure chronic Diseases 0.000 description 7
- 102100025751 Mothers against decapentaplegic homolog 2 Human genes 0.000 description 7
- 101710143123 Mothers against decapentaplegic homolog 2 Proteins 0.000 description 7
- 101001023030 Toxoplasma gondii Myosin-D Proteins 0.000 description 7
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 7
- 230000000593 degrading effect Effects 0.000 description 7
- 208000006545 Chronic Obstructive Pulmonary Disease Diseases 0.000 description 6
- 108010056785 Myogenin Proteins 0.000 description 6
- 102000004364 Myogenin Human genes 0.000 description 6
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 6
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 6
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 6
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 6
- 210000001087 myotubule Anatomy 0.000 description 6
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 6
- 239000008213 purified water Substances 0.000 description 6
- 239000007974 sodium acetate buffer Substances 0.000 description 6
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 6
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 6
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 6
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 5
- YURJSTAIMNSZAE-HHNZYBFYSA-N ginsenoside Rg1 Chemical compound O([C@@](C)(CCC=C(C)C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@]([C@@]3(C[C@@H]([C@H]4C(C)(C)[C@@H](O)CC[C@]4(C)[C@H]3C[C@H]2O)O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)C)(C)CC1)[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O YURJSTAIMNSZAE-HHNZYBFYSA-N 0.000 description 5
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 5
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 5
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 5
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 5
- 210000002027 skeletal muscle Anatomy 0.000 description 5
- 230000006663 ubiquitin-proteasome pathway Effects 0.000 description 5
- 206010003694 Atrophy Diseases 0.000 description 4
- 208000037157 Azotemia Diseases 0.000 description 4
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 4
- XIRZPICFRDZXPF-UHFFFAOYSA-N Ginsenoside Rg3 Natural products CC(C)=CCCC(C)(O)C1CCC(C2(CC(O)C3C4(C)C)C)(C)C1C(O)CC2C3(C)CCC4OC1OC(CO)C(O)C(O)C1OC1OC(CO)C(O)C(O)C1O XIRZPICFRDZXPF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108010059343 MM Form Creatine Kinase Proteins 0.000 description 4
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 4
- 230000037444 atrophy Effects 0.000 description 4
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 4
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 4
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 4
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 4
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 description 4
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 4
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 4
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 4
- 208000009852 uremia Diseases 0.000 description 4
- JQMFQLVAJGZSQS-UHFFFAOYSA-N 2-[4-[2-(2,3-dihydro-1H-inden-2-ylamino)pyrimidin-5-yl]piperazin-1-yl]-N-(2-oxo-3H-1,3-benzoxazol-6-yl)acetamide Chemical compound C1C(CC2=CC=CC=C12)NC1=NC=C(C=N1)N1CCN(CC1)CC(=O)NC1=CC2=C(NC(O2)=O)C=C1 JQMFQLVAJGZSQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- YJLUBHOZZTYQIP-UHFFFAOYSA-N 2-[5-[2-(2,3-dihydro-1H-inden-2-ylamino)pyrimidin-5-yl]-1,3,4-oxadiazol-2-yl]-1-(2,4,6,7-tetrahydrotriazolo[4,5-c]pyridin-5-yl)ethanone Chemical compound C1C(CC2=CC=CC=C12)NC1=NC=C(C=N1)C1=NN=C(O1)CC(=O)N1CC2=C(CC1)NN=N2 YJLUBHOZZTYQIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010059616 Activins Proteins 0.000 description 3
- 208000000103 Anorexia Nervosa Diseases 0.000 description 3
- 208000015943 Coeliac disease Diseases 0.000 description 3
- 208000011231 Crohn disease Diseases 0.000 description 3
- 102100031181 Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Human genes 0.000 description 3
- 206010019280 Heart failures Diseases 0.000 description 3
- 102100026818 Inhibin beta E chain Human genes 0.000 description 3
- 208000029549 Muscle injury Diseases 0.000 description 3
- 201000009623 Myopathy Diseases 0.000 description 3
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 208000028389 Nerve injury Diseases 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 3
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 3
- 206010067584 Type 1 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 3
- YURJSTAIMNSZAE-UHFFFAOYSA-N UNPD89172 Natural products C1CC(C2(CC(C3C(C)(C)C(O)CCC3(C)C2CC2O)OC3C(C(O)C(O)C(CO)O3)O)C)(C)C2C1C(C)(CCC=C(C)C)OC1OC(CO)C(O)C(O)C1O YURJSTAIMNSZAE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000000488 activin Substances 0.000 description 3
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 3
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 3
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 3
- 230000008859 change Effects 0.000 description 3
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 3
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 3
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 3
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 3
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 3
- 230000006870 function Effects 0.000 description 3
- 108020004445 glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Proteins 0.000 description 3
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 3
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 description 3
- 230000008764 nerve damage Effects 0.000 description 3
- 210000004940 nucleus Anatomy 0.000 description 3
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 3
- 102000037983 regulatory factors Human genes 0.000 description 3
- 108091008025 regulatory factors Proteins 0.000 description 3
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 3
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 3
- 208000016261 weight loss Diseases 0.000 description 3
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 description 3
- KZEVSDGEBAJOTK-UHFFFAOYSA-N 1-(2,4,6,7-tetrahydrotriazolo[4,5-c]pyridin-5-yl)-2-[5-[2-[[3-(trifluoromethoxy)phenyl]methylamino]pyrimidin-5-yl]-1,3,4-oxadiazol-2-yl]ethanone Chemical compound N1N=NC=2CN(CCC=21)C(CC=1OC(=NN=1)C=1C=NC(=NC=1)NCC1=CC(=CC=C1)OC(F)(F)F)=O KZEVSDGEBAJOTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CONKBQPVFMXDOV-QHCPKHFHSA-N 6-[(5S)-5-[[4-[2-(2,3-dihydro-1H-inden-2-ylamino)pyrimidin-5-yl]piperazin-1-yl]methyl]-2-oxo-1,3-oxazolidin-3-yl]-3H-1,3-benzoxazol-2-one Chemical compound C1C(CC2=CC=CC=C12)NC1=NC=C(C=N1)N1CCN(CC1)C[C@H]1CN(C(O1)=O)C1=CC2=C(NC(O2)=O)C=C1 CONKBQPVFMXDOV-QHCPKHFHSA-N 0.000 description 2
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 2
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 2
- 102000004889 Interleukin-6 Human genes 0.000 description 2
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 2
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- 206010028372 Muscular weakness Diseases 0.000 description 2
- 108010020197 Myogenic Regulatory Factor 5 Proteins 0.000 description 2
- 102000009741 Myogenic Regulatory Factor 5 Human genes 0.000 description 2
- 102100038380 Myogenic factor 5 Human genes 0.000 description 2
- 101710099061 Myogenic factor 5 Proteins 0.000 description 2
- 108060008487 Myosin Proteins 0.000 description 2
- 102000003505 Myosin Human genes 0.000 description 2
- 239000002033 PVDF binder Substances 0.000 description 2
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 2
- 102000004887 Transforming Growth Factor beta Human genes 0.000 description 2
- 108090001012 Transforming Growth Factor beta Proteins 0.000 description 2
- 102000006275 Ubiquitin-Protein Ligases Human genes 0.000 description 2
- 108010083111 Ubiquitin-Protein Ligases Proteins 0.000 description 2
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 2
- 210000000577 adipose tissue Anatomy 0.000 description 2
- 208000022531 anorexia Diseases 0.000 description 2
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 2
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 2
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 description 2
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 2
- 235000014121 butter Nutrition 0.000 description 2
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 2
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 2
- 206010061428 decreased appetite Diseases 0.000 description 2
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 2
- 201000001981 dermatomyositis Diseases 0.000 description 2
- 238000001378 electrochemiluminescence detection Methods 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 2
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 2
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 2
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 2
- CBEHEBUBNAGGKC-UHFFFAOYSA-N ginsenoside Rg1 Natural products CC(=CCCC(C)(OC1OC(CO)C(O)C(O)C1O)C2CCC3(C)C2C(O)CC4C5(C)CCC(O)C(C)(C)C5CC(OC6OC(CO)C(O)C(O)C6O)C34C)C CBEHEBUBNAGGKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 2
- 238000007602 hot air drying Methods 0.000 description 2
- 238000003125 immunofluorescent labeling Methods 0.000 description 2
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 2
- 229940100601 interleukin-6 Drugs 0.000 description 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 2
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 2
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 2
- 230000036473 myasthenia Effects 0.000 description 2
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 2
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 2
- 229920002981 polyvinylidene fluoride Polymers 0.000 description 2
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 2
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 2
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 2
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 2
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 2
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 2
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 2
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 2
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000012222 talc Nutrition 0.000 description 2
- ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N tgfbeta Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCSC)C(C)C)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 2
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 2
- WMGBQZAELMGYNO-YMWSGFAJSA-N (2r,3s,4s,5r,6r)-2-(hydroxymethyl)-6-[[(3s,5r,8r,9r,10r,12r,13r,14r,17s)-12-hydroxy-4,4,8,10,14-pentamethyl-17-(6-methylhepta-1,5-dien-2-yl)-2,3,5,6,7,9,11,12,13,15,16,17-dodecahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-3-yl]oxy]oxane-3,4,5-triol Chemical compound O([C@H]1CC[C@]2(C)[C@H]3C[C@@H](O)[C@H]4[C@@]([C@@]3(CC[C@H]2C1(C)C)C)(C)CC[C@@H]4C(=C)CCC=C(C)C)[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O WMGBQZAELMGYNO-YMWSGFAJSA-N 0.000 description 1
- FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 6-{[2-carboxy-4,5-dihydroxy-6-(phosphanyloxy)oxan-3-yl]oxy}-4,5-dihydroxy-3-phosphanyloxane-2-carboxylic acid Chemical compound O1C(C(O)=O)C(P)C(O)C(O)C1OC1C(C(O)=O)OC(OP)C(O)C1O FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 206010007559 Cardiac failure congestive Diseases 0.000 description 1
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 238000003734 CellTiter-Glo Luminescent Cell Viability Assay Methods 0.000 description 1
- PTHCMJGKKRQCBF-UHFFFAOYSA-N Cellulose, microcrystalline Chemical compound OC1C(O)C(OC)OC(CO)C1OC1C(O)C(O)C(OC)C(CO)O1 PTHCMJGKKRQCBF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000017667 Chronic Disease Diseases 0.000 description 1
- 208000034656 Contusions Diseases 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- SNRUBQQJIBEYMU-UHFFFAOYSA-N Dodecane Natural products CCCCCCCCCCCC SNRUBQQJIBEYMU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010013801 Duchenne Muscular Dystrophy Diseases 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N Elaidinsaeure-aethylester Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 102100034239 Emerin Human genes 0.000 description 1
- 201000009344 Emery-Dreifuss muscular dystrophy Diseases 0.000 description 1
- 239000004386 Erythritol Substances 0.000 description 1
- UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N Erythritol Natural products OCC(O)C(O)CO UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000037149 Facioscapulohumeral dystrophy Diseases 0.000 description 1
- 102100026535 Fibronectin type III domain-containing protein 5 Human genes 0.000 description 1
- 239000004606 Fillers/Extenders Substances 0.000 description 1
- 208000001034 Frostbite Diseases 0.000 description 1
- UFNDONGOJKNAES-UHFFFAOYSA-N Ginsenoside Rb1 Natural products CC(=CCCC(C)(OC1OC(COC2OC(CO)C(O)C(O)C2O)C(O)C(O)C1O)C3CCC4(C)C3C(O)CC5C6(C)CCC(OC7OC(CO)C(O)C(O)C7OC8OC(CO)C(O)C(O)C8O)C(C)(C)C6CC(O)C45C)C UFNDONGOJKNAES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PHLXREOMFNVWOH-YAGNRYSRSA-N Ginsenoside Rh3 Chemical compound O([C@H]1CC[C@]2(C)[C@H]3C[C@@H](O)[C@H]4[C@@]([C@@]3(CC[C@H]2C1(C)C)C)(C)CC[C@@H]4C(\C)=C/CC=C(C)C)[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O PHLXREOMFNVWOH-YAGNRYSRSA-N 0.000 description 1
- PHLXREOMFNVWOH-DNQFHFKUSA-N Ginsenoside Rh3 Natural products O([C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)[C@@H]1C(C)(C)[C@H]2[C@@](C)([C@@H]3[C@](C)([C@@]4(C)[C@H]([C@H](O)C3)[C@@H](/C(=C/C/C=C(\C)/C)/C)CC4)CC2)CC1 PHLXREOMFNVWOH-DNQFHFKUSA-N 0.000 description 1
- UZRSSXUIXNCYLP-UHFFFAOYSA-N Ginsenoside Rk2 Natural products CC(=CCCC(=C)C1CCC2(C)C1C(O)CC3C4(C)CCC(OC5CC(O)C(O)C(CO)O5)C(C)(C)C4CCC23C)C UZRSSXUIXNCYLP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 208000031220 Hemophilia Diseases 0.000 description 1
- 208000009292 Hemophilia A Diseases 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 206010022489 Insulin Resistance Diseases 0.000 description 1
- 101800001026 Irisin Proteins 0.000 description 1
- 235000010643 Leucaena leucocephala Nutrition 0.000 description 1
- 240000007472 Leucaena leucocephala Species 0.000 description 1
- 201000009342 Limb-girdle muscular dystrophy Diseases 0.000 description 1
- 206010067125 Liver injury Diseases 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 229920000168 Microcrystalline cellulose Polymers 0.000 description 1
- 206010028311 Muscle hypertrophy Diseases 0.000 description 1
- 206010068871 Myotonic dystrophy Diseases 0.000 description 1
- 229930040373 Paraformaldehyde Natural products 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 101100437153 Rattus norvegicus Acvr2b gene Proteins 0.000 description 1
- 208000001647 Renal Insufficiency Diseases 0.000 description 1
- 208000010040 Sprains and Strains Diseases 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 244000299461 Theobroma cacao Species 0.000 description 1
- 235000005764 Theobroma cacao ssp. cacao Nutrition 0.000 description 1
- 235000005767 Theobroma cacao ssp. sphaerocarpum Nutrition 0.000 description 1
- 239000013504 Triton X-100 Substances 0.000 description 1
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 1
- 208000010399 Wasting Syndrome Diseases 0.000 description 1
- TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N Xylitol Natural products OCCC(O)C(O)C(O)CCO TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005903 acid hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 1
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 1
- 229940072056 alginate Drugs 0.000 description 1
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 1
- 230000000202 analgesic effect Effects 0.000 description 1
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000003712 anti-aging effect Effects 0.000 description 1
- 230000003266 anti-allergic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003178 anti-diabetic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000002180 anti-stress Effects 0.000 description 1
- -1 anti-stress Substances 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 239000003472 antidiabetic agent Substances 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 230000003305 autocrine Effects 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 235000001046 cacaotero Nutrition 0.000 description 1
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 239000000378 calcium silicate Substances 0.000 description 1
- 229910052918 calcium silicate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000012241 calcium silicate Nutrition 0.000 description 1
- OYACROKNLOSFPA-UHFFFAOYSA-N calcium;dioxido(oxo)silane Chemical compound [Ca+2].[O-][Si]([O-])=O OYACROKNLOSFPA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 230000006652 catabolic pathway Effects 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 210000003855 cell nucleus Anatomy 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010980 cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L cisplatin Chemical compound N[Pt](N)(Cl)Cl DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229960004316 cisplatin Drugs 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- 201000009338 distal myopathy Diseases 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 description 1
- 229920001971 elastomer Polymers 0.000 description 1
- 230000002124 endocrine Effects 0.000 description 1
- UNXHWFMMPAWVPI-ZXZARUISSA-N erythritol Chemical compound OC[C@H](O)[C@H](O)CO UNXHWFMMPAWVPI-ZXZARUISSA-N 0.000 description 1
- 235000019414 erythritol Nutrition 0.000 description 1
- 229940009714 erythritol Drugs 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N ethyl oleate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N 0.000 description 1
- 229940093471 ethyl oleate Drugs 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 208000008570 facioscapulohumeral muscular dystrophy Diseases 0.000 description 1
- 206010016256 fatigue Diseases 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 1
- 230000002431 foraging effect Effects 0.000 description 1
- 239000003205 fragrance Substances 0.000 description 1
- 230000009760 functional impairment Effects 0.000 description 1
- 238000003197 gene knockdown Methods 0.000 description 1
- 238000003209 gene knockout Methods 0.000 description 1
- GZYPWOGIYAIIPV-JBDTYSNRSA-N ginsenoside Rb1 Chemical compound C([C@H]1O[C@H]([C@@H]([C@@H](O)[C@@H]1O)O)O[C@@](C)(CCC=C(C)C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@]([C@@]3(CC[C@H]4C(C)(C)[C@@H](O[C@H]5[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O5)O[C@H]5[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O5)O)CC[C@]4(C)[C@H]3C[C@H]2O)C)(C)CC1)O[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GZYPWOGIYAIIPV-JBDTYSNRSA-N 0.000 description 1
- TXEWRVNOAJOINC-UHFFFAOYSA-N ginsenoside Rb2 Natural products CC(=CCCC(OC1OC(COC2OCC(O)C(O)C2O)C(O)C(O)C1O)C3CCC4(C)C3C(O)CC5C6(C)CCC(OC7OC(CO)C(O)C(O)C7OC8OC(CO)C(O)C(O)C8O)C(C)(C)C6CCC45C)C TXEWRVNOAJOINC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 231100000753 hepatic injury Toxicity 0.000 description 1
- 230000003832 immune regulation Effects 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- LNQCUTNLHUQZLR-OZJWLQQPSA-N iridin Chemical compound OC1=C(OC)C(OC)=CC(C=2C(C3=C(O)C(OC)=C(O[C@H]4[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O4)O)C=C3OC=2)=O)=C1 LNQCUTNLHUQZLR-OZJWLQQPSA-N 0.000 description 1
- 201000006370 kidney failure Diseases 0.000 description 1
- VMPHSYLJUKZBJJ-UHFFFAOYSA-N lauric acid triglyceride Natural products CCCCCCCCCCCC(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCCCCCC)COC(=O)CCCCCCCCCCC VMPHSYLJUKZBJJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 229940057995 liquid paraffin Drugs 0.000 description 1
- 244000144972 livestock Species 0.000 description 1
- 230000033001 locomotion Effects 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 239000012139 lysis buffer Substances 0.000 description 1
- 229960003511 macrogol Drugs 0.000 description 1
- 239000000845 maltitol Substances 0.000 description 1
- 235000010449 maltitol Nutrition 0.000 description 1
- VQHSOMBJVWLPSR-WUJBLJFYSA-N maltitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]([C@H](O)CO)O[C@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O VQHSOMBJVWLPSR-WUJBLJFYSA-N 0.000 description 1
- 229940035436 maltitol Drugs 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 1
- 230000006993 memory improvement Effects 0.000 description 1
- 230000003340 mental effect Effects 0.000 description 1
- HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N meso ribitol Natural products OCC(O)C(O)C(O)CO HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010981 methylcellulose Nutrition 0.000 description 1
- LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N methylparaben Chemical compound COC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008108 microcrystalline cellulose Substances 0.000 description 1
- 229940016286 microcrystalline cellulose Drugs 0.000 description 1
- 235000019813 microcrystalline cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 description 1
- 235000010446 mineral oil Nutrition 0.000 description 1
- 230000037023 motor activity Effects 0.000 description 1
- 230000004118 muscle contraction Effects 0.000 description 1
- 230000012042 muscle hypertrophy Effects 0.000 description 1
- 230000017186 myoblast division Effects 0.000 description 1
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 description 1
- 210000004165 myocardium Anatomy 0.000 description 1
- 230000001114 myogenic effect Effects 0.000 description 1
- 108010084677 myogenic factor 6 Proteins 0.000 description 1
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 230000003076 paracrine Effects 0.000 description 1
- 229920002866 paraformaldehyde Polymers 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002264 polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 230000009596 postnatal growth Effects 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 1
- QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N propylparaben Chemical compound CCCOC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003415 propylparaben Drugs 0.000 description 1
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001172 regenerating effect Effects 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 210000002460 smooth muscle Anatomy 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 235000010356 sorbitol Nutrition 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 1
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 235000013616 tea Nutrition 0.000 description 1
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 201000008827 tuberculosis Diseases 0.000 description 1
- 208000001072 type 2 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 230000034512 ubiquitination Effects 0.000 description 1
- 238000010798 ubiquitination Methods 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000000811 xylitol Substances 0.000 description 1
- 235000010447 xylitol Nutrition 0.000 description 1
- HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N xylitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N 0.000 description 1
- 229960002675 xylitol Drugs 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/25—Araliaceae (Ginseng family), e.g. ivy, aralia, schefflera or tetrapanax
- A61K36/258—Panax (ginseng)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/105—Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7028—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages
- A61K31/7034—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages attached to a carbocyclic compound, e.g. phloridzin
- A61K31/704—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages attached to a carbocyclic compound, e.g. phloridzin attached to a condensed carbocyclic ring system, e.g. sennosides, thiocolchicosides, escin, daunorubicin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2200/00—Function of food ingredients
- A23V2200/30—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
- A23V2200/316—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health having an effect on regeneration or building of ligaments or muscles
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2250/00—Food ingredients
- A23V2250/20—Natural extracts
- A23V2250/21—Plant extracts
- A23V2250/2124—Ginseng
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Mycology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Botany (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Neurology (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Alternative & Traditional Medicine (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
본 발명은 미량의 진세노사이드 성분이 증가된 가공인삼추출물을 유효성분으로 포함하는 근육 분화 촉진용 조성물에 관한 것으로, 상기 가공인삼추출물이 근아세포에서 근육으로의 분화를 촉진하고, 근육 분화 억제인자인 미오스타틴에 의한 근위축 현상을 억제하는 것을 확인함으로써 효과가 우수한 근육 장애 관련 질환의 예방 및 치료용 조성물을 개발할 수 있을 것으로 기대된다.
Description
본 발명은 가공인삼추출물을 포함하는 근육 분화 촉진용 조성물에 관한 것으로, 보다 자세하게는 근육 분화 촉진 효과가 있는 미량의 진세노사이드 성분이 증가된 가공인삼추출물을 유효성분으로 포함하는 근육 질환의 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.
근육(muscle)은 인체에서 가장 큰 구성을 차지하는 조직이다. 인체의 적정 근육량을 확보하는 것은 인체의 구조를 유지하고, 인체의 각 기관이 각각의 기능을 수행하게 하고, 각종 질환을 예방하는데 필수적이다.
근육은 크게 평활근(smooth muscle), 심장근(cardiac muscle), 골격근(skeletal muscle)으로 나뉜다. 골격근은 우리 몸 전체에서 상당한 부분을 차지하면서, 골격의 움직임을 촉진시킨다. 이러한 골격근은 분열하지 않고, 다핵체인 근섬유로 이루어져 있으며, 배 형성 과정에서 만들어진다. 배 형성 과정이 끝난 후에는, 출생 후 생장 또는 근육 분화(myogenesis) 과정에 의해 근육이 형성된다. 또한, 근육 분화는 동상이나 염좌, 타박상 등에 의해 근육이 손상될 때에도 일어난다.
근육 분화(myogenesis) 과정은, 먼저 위성세포(satellite cell)가 활성화되고, 활성화 된 위성세포가 근아세포(myoblast)로 분화된다(Morgan, J.E., et al., 2003). 분화된 근아세포는 분열이 일어나고, 근아세포들의 융합(fusion)이 일어나 근관세포(myotube)로 발달하고, 이러한 근관세포들이 모여 근섬유(muscle fiber)를 형성하며, 근섬유는 다발을 이루어 최종적으로 근육을 형성하게 된다.
근육 분화 과정은 미오디(MyoD), Myf5(myogenic factor 5), 미오게닌(myogenin), MRF4(myogenic regulator factor 4)와 같은 다양한 근육 조절 인자(muscle regulatory factors)에 의해 조절되며, 그 중 미오디(MyoD)는 미오신 H 사슬(myosin heavy chain, MHC), 근크레아틴인산화효소(muscle creatine kinase, MCK)와 같은 근육 특이 유전자의 발현을 개시하게 하고 위성세포가 근아세포로 분화하는 것을 유도하며, 미오디의 활성에 의한 미오게닌(myogenin) 발현의 유도는 근아세포의 융합에 가장 중요한 요소로, 근관세포의 형성에 관여한다(Zanou, N., et al., 2013).
한편, 미오카인(myokine)은 근육 수축의 반응에서 골격근으로부터 발현되거나 합성되는 활성물질로, 자가 분비(autocrine), 주변 분비(paracrine) 또는 내분비(endocrine) 방식으로 역할을 하게 되며, 근육뿐만 아니라 다른 조직의 기능도 조절하는 것으로 알려져 있다(Pedersen, B.K., et al., 2008). 대표적인 미오카인으로는 미오스타틴(myostatin, MSTN), 인터루킨-6(interleukin-6, IL-6), 이리신(irisin) 등이 있다.
미오스타틴은 형질전환성장인자 β(transforming growth factor-β, TGF-β)군에 속하는 유전자로, 근육세포에 직접적으로 작용하여 근육 분화 및 근육세포 분화(differentiation)를 억제하는 단백질이다(Groussard, C., et al., 2000; Huh, J.Y., et al., 2014). 여러 선행연구에서 미오스타틴 유전자가 넉다운(knock-down) 또는 넉아웃(knock-out)된 경우에는 근육의 비대 및 인슐린 저항성이 감소되고(Groussard, C., et al., 2000; Huh, J.Y., et al., 2014), 운동 시 미오스타틴의 발현량이 감소함에 따라 근육의 크기가 증가한다고 알려져 있다(Huh, J.Y., et al., 2012).
또한, 근육 분화에 중요한 근원섬유 단백질 발현에 핵심적인 전사인자인 미오디(MyoD)의 분해 과정은 미오스타틴(MSTN) 액티빈 타입 II 수용체(activin type II receptor, ActRIIB)-Smad2 경로에 의해 활성화되는 UPP(ubiquitin proteasome pathway) 과정에 의해 매개 단백질 분해를 증가시켜 근위축을 유도하는 것으로 알려져 있다.
한편, 노화된 세포나 위성세포에서 근아세포로의 분화, 근아세포의 분열 등과 같은 근육 분화 과정 동안에 문제가 발생하면, 근위축증(muscle atrophy), 근질환(myopathy), 근육 손상(muscle injury), 근이영양증(muscle dystrophy), 근육감소증(sarcopenia), 근신경 전도성 질병(myoneural conductive disease) 및 신경 손상(nerve injury) 등과 같은 여러 가지 근육 장애 및 질환이 발생할 수 있다(Bonaldo, P., et al., 2013; Wagatsuma, A., et al., 2014)
또한, 상기 근육 분화 과정 동안에 문제가 발생되어 생기는 근육 질환 중 하나인 근육감소증은 악액질(cachexia)로 인해 나타나기도 한다. 악액질은 만성 소모성 복합증후군의 일종이며 암, 결핵, 혈우병 등의 말기에서 볼 수 있는 고도의 전신쇠약 증세를 의미한다. 특히, 악성종양, 만성폐쇄성 폐질환, 만성심부전 등의 만성질환을 동반하여 발생하고, 식욕부진을 동반한 체중감소, 근육량 및 체지방 감소, 염증반응 등이 나타난다.
이러한 악액질로 인한 근육감소는 골격근량의 지속적인 감소와 기능손상에 의한 복합증후군으로 나타나는 것으로, 점진적이고 서서히 진행되는 근육량 소실이 나타나는 노화 및 근육 분화 장애에 의한 근육 감소 질환과 달리 급성적인 근육감소 증상이 나타난다. 이러한 생리적 특성의 차이는 예방 및 치료에 있어서도 차이를 보인다. 따라서, 근육감소라는 징후가 발생되더라도 그 발생 원인에 따라 악액질, 노화 및 근육 분화 장애 각각의 특성에 맞추어진 치료가 필요하다(류승완, 2017).
한편, 근육 분화 장애 및 질환을 극복하기 위한 방법으로, 근육세포를 재생하는 방법이 최근에 보고되고 있으며, 이러한 근육세포의 재생은 근육세포 바깥부분에 존재하는 위성세포를 자극하여 위성세포가 분열을 일으켜 근육 조직을 형성하는 것으로 알려져 있다. 근육세포의 재생은 손상된 근육의 수리뿐만 아니라 노화에 의한 자연적인 근육 손실에도 적용이 가능한 것으로 보고되기도 하였다(Conboy, I.M., et al., 2003).
또한, 암 악액질 진행과정에서 근육분화 과정에 중요한 근육 조절 인자인 미오디 및 미오게닌의 발현이 감소된다는 연구결과가 보고되고 있고(Blackwell, T.A., et al., 2016), 암 또는 에이즈에 의한 근육소모(악액질) 마우스 모델에서, 근육 분화 과정에 중요한 근육 조절 인자인 미오게닌, 미오신(myosin) 등의 발현이 감소된다는 연구결과도 보고되었다(Ramamoorthy, S., et al., 2009). 또한, 암 악액질이 유발된 마우스 모델에서 미오스타틴의 억제가 근육의 부피와 기능에 영향을 미친다는 연구 결과도 보고되면서(Smith, R.C., et al., 2013), 근육 분화 촉진을 통해 악액질 치료도 가능할 것으로 기대하고 있다.
인삼의 주된 기능성 성분인 진세노사이드(ginsenoside)는 식물계의 여러 사포닌 중 인삼 사포닌만을 특별하게 구분하여 명명하는 것으로, 현재까지 총 150종류 이상의 진세노사이드가 발굴되었다(Christensen, L.P., 2009). 진세노사이드는 항암, 항알레르기, 항염증 외에 중추신경 억제 및 정신안정, 진통, 기억력 개선, 간 상해보고, 단백질 및 지질합성 촉진, 항당뇨, 항스트레스, 항산화 활성물질 생성 촉진, 면역조절, 혈소판 응집억제, 항노화 작용 등의 약리 효능이 있음이 밝혀져 있고, 이는 진세노사이드 종류에 따라 각기 다른 효능을 나타낸다.
진세노사이드 Rg1 및 Rb1은 중추신경계 활동을 향상시키고, 진세노사이드 Re, Rg1 및 파낙산(panaxan) A 및 B는 당뇨병에 좋으며, 진세노사이드 Re 및 Rg1은 혈관 신생을 촉진하고, 진세노사이드 Rg3 및 Rh2는 항암 효능을 보인다고 알려져 있다(Chen, C.F., et al., 2008; Kim, H.S., et al., 2004). 최근 연구에서는 몇몇 인삼 추출물이 악액질, 피로 또는 근육 위축에 효능을 보이는 것으로 밝혀졌다. 0.9~1.4%의 진세노사이드 Rg1와 1.7~3.0%의 진세노사이드 Rb1을 함유하고 있는 GINSELECT®는 항종양제인 시스플라틴(cisplatin)을 처리한 쥐의 체중 감소와 운동 능력 감소를 예방하였고(Lobina, C., et al., 2014), 진세노사이드 Rg1은 단백질 분해 경로를 억제하여 기근으로 인한 근위축을 예방하는 것으로 나타났다(Li, F., et al., 2017).
이에, 본 발명자는 인삼의 진세노사이드 성분을 이용하여 근육분화 촉진 효과를 확인하는 과정에서, 미량의 진세노사이드 성분이 증가된 가공인삼추출물이 근육분화 억제제인 미오스타틴을 억제하고, 근육 분화를 촉진한다는 것을 확인함으로써 본 발명을 완성할 수 있었다.
종래선행기술인 한국등록특허 제1771486호는 20(R)(S)-진세노사이드 Rh2, 진세노사이드 Rk2 및 진세노사이드 Rh3로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 화합물을 함유하는 근육세포 증식 활성화를 통한 근육감소증(sarcopenia), 심근경색 및 심혈관계 질환의 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것으로, 본 발명의 조성물 구성과 작용기전 및 적용 질병의 범위와 차이가 있다. 또한, 한국등록특허 제1595426호에는 진세노사이드 Rh2 및 Rg3의 함량이 증가 된 가공인삼추출물을 포함하는 근육감소증 치료용 조성물이 기재되어 있으나, 본 발명의 미오스타틴 억제 및 근육 분화 촉진 효과는 기재 및 암시되어 있지 않다. 한국공개특허 제2017-0094292호에는 미오스타틴 길항제를 포함하는 근육감소증 치료용 조성물이 기재되어 있으나, 본 발명의 진세노사이드 Rh2 및 Rg3의 함량이 증가된 가공인삼추출물의 미오스타틴 억제 효과는 기재 및 암시되어 있지 않다.
류승완, 근감소증과 악액질의 임상적 특성, J. Clin. Nutr., 9(1), 2-6, 2017.
Blackwell, T.A., et al., Myogenic and atrophic signaling in the progression of cancer-cachexia, International Journal of Exercise Science: Conference Proceedings, 11(4), Article 6, 2016.
Bonaldo, P., et al., Cellular and molecular mechanism of muscle atrophy, Disease Models & Mechani는, 6, 25-39, 2013.
Chen, C.F., et al., Comparison of the pharmacological effects of Panax ginseng and Panax quinquefolium, Acta. Pharmacol. Sin., 29(9), 1103-1108, 2008.
Christensen, L.P., Ginsenosides chemistry, biosynthesis, analysis, and potential health effects, Adv. Food Nutr. Res., 55, 1-99, 2009.
Conboy, I.M., et al., Notch-mediated restoration of regenerative potential to aged muscle. Science, 302(5650), 1575-1577, 2003.
Groussard, C., et al., Free radical scavenging and antioxidant effects of lactate ion: an in vitro study, Journal of Applied Physiology, 89(1), 169-175.
Huh, J.Y., et al., FNDC5 and irisin in humans: I. Predictors of circulating concentrations in serum and plasma and II. mRNA expression and circulating concentrations in response to weight loss and exercise, Metabolism, 61(12), 1725-1738, 2012.
Huh, J.Y., et al., Exercise-induced irisin secretion in independent of age or fitness level and increased irisin may directly modulate muscle metabolism through AMPK activation, The Journal of Clinical Endocrinology and Metabolism, 99(11), E2154-2161, 2014.
Kim, H.S., et al., Effects of ginsenosides Rg3 and Rh2 on the proliferation of prostate cancer cells, Arch, Pharm. Res., 27(4), 429-435, 2004.
Li, F., et al., Ginsenoside Rg1 prevents starvation-induced muscle protein degradation via regulation of AKT/mTOR/FoxO signaling in C2C12 myotubes, Exp. Ther. Med., 14(2), 1241-1247, 2017.
Lobina, C., et al., Protective effect of Panax ginseng in cisplatin-induced cachexia in rats, Future Oncol., 10(7), 1203-1214, 2014.
Morgan, J.E., et al., Muscle satellite cells. Int. J. Biochem. Cell Biol., 35(8), 1151-1156, 2003.
Pedersen, B.K., et al., Muscle as an endocrine organ: focus on muscle-derived interleukin-6, Rhysiol. Rev., 88, 1379-1406, 2008.
Ramamoorthy, S., et al., Decresed Jun-D and myogenin expression in muscle wasting of human cachexia, Am. J. Physiol. Enodcrinol. Metab. 297(2), E239-E401, 2009.
Smith, R.C., et al., Myostatin inhibitors as therapies for muscle wasting associated with cancer and other disorders, Curr. Opin. Support Palliat. Care, 7, 352-360, 2013.
Wagatsuma, A., et al., Vitamin D signlaing in Myogenesis: Potential for Treatment of Sarcopenia, BioMed Research International, 2014, 121254, 2014.
Zanou, N., et al., Skeletal muscle hypertrophy and regeneration: interplay between the myogenic regulatory factors(MRFs) and insulin-like growth factors(IGFs) pathways. Cell. Mol. Life Sci., 70(21), 4117-4130, 2013.
본 발명의 목적은 가공인삼추출물을 포함하는 근육 분화 촉진용 조성물을 제공하는 데 있다.
또한, 본 발명의 목적은 상기 근육 분화 촉진용 조성물을 포함하는 근육 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물 및 개선용 건강기능식품을 제공하는 데 있다.
본 발명은 가공인삼추출물을 유효성분으로 포함하는 근육 분화 촉진용 조성물에 관한 것이다.
상기 가공인삼추출물은 (a) 아스퍼질러스 나이거(Aspergillus niger)를 인삼 분말 및 밀기울로 구성된 배지에 접종하는 단계; (b) 상기 단계 (a)의 균을 배양하는 단계; (c) 상기 단계 (b)배양물을 한외여과막(ultrafilteration)으로 정제하는 단계; (d) 상기 단계 (c)정제물로부터 효소를 분리하는 단계; (e) 인삼 분말, 홍삼 분말, 인삼추출물 또는 홍삼추출물에 상기 단계 (d)효소를 첨가하는 단계; (f) 상기 단계 (e)첨가물을 발효하는 단계; (g) 상기 단계 (f)발효물을 분리하는 단계; (h) 상기 단계 (g)상등액을 농축하는 단계; (i) 상기 단계 (h)농축물을 아세트산, 젖산, 구연산, 사과산 및 주석산으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 유기산으로 반응하는 단계; 및 (j) 상기 단계 (i)반응물을 중화 및 여과, 정제, 농축, 건조하는 단계; 로 제조된 것일 수 있다.
상기 조성물은 진세노사이드 Rh2 및 Rg3를 각각 0.5~30중량%를 함유할 수 있다.
상기 조성물은 근관세포(myotube) 분화를 촉진할 수 있다.
상기 조성물은 미오스타틴(myostatin)을 억제할 수 있다.
또한, 본 발명은 상기 근육 분화 촉진용 조성물 및 약학적으로 허용 가능한 담체를 포함하는 근육 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물에 관한 것이다.
본 발명은 또한, 상기 근육 분화 촉진용 조성물 및 식품학적으로 허용 가능한 식품보조 첨가제를 포함하는 근육 질환의 개선용 건강기능식품에 관한 것이다.
상기 근육 질환은 근위축증(muscular atrophy), 근질환(myopathy), 근육 손상(muscular injury), 근이영양증(muscular dystrophy), 근무력증(myasthenia), 근육감소증(sarcopenia), 근신경 전도성 질병(myoneural conductive disease), 피부근육염(dermatomyositis), 당뇨병성 근위축증(diabetic amyotrophy), 신경 손상(nerve injury), 근위축성 측삭 경화증(amyotrophic lateral sclerosis, ALS), 악액질(cachexia) 및 퇴행성 근육질환(degenerative muscle diseases)으로 이루어진 군에서 선택될 수 있다.
상기 악액질은 에이즈(acquired immune deficiency syndrome, AIDS), 복강질환(celiac disease), 만성폐쇄성 폐질환(chronic obstructive pulmonary disease, COPD), 다발성경화증(multiple sclerosis), 류마티스성 관절염(rhematoide arthritis), 만성심부전증(chronic heart failure), 선천성 심부전증(congestive heart heart failure), 요독증(uremia), 결핵(tuberculous), 크론병(crohn's disease), 치료되지 않거나 심각한 제1형 당뇨, 신경성 식욕부진 및 호르몬 부족에 의한 악액질일 수 있다.
이하 본 발명을 상세하게 설명한다.
본 발명은 가공인삼추출물을 유효성분으로 포함하는 근육 분화 촉진용 조성물에 관한 것이다.
상기 가공인삼추출물은 한국등록특허 제0992800호 및 제1595426호의 제조방법으로 제조된 사포닌 분해효소를 제조한 후 제조된 사포닌 분해효소와 유기산에 의한 가수분해를 이용하여 미량의 진세노사이드 성분이 증가된 가공인삼분말 또는 가공인삼추출물이다.
상기 가공인삼추출물은 (a) 아스퍼질러스 나이거(Aspergillus niger)를 인삼 분말 및 밀기울로 구성된 배지에 접종하는 단계; (b) 상기 단계 (a)의 균을 배양하는 단계; (c) 상기 단계 (b)배양물을 한외여과막(ultrafilteration)으로 정제하는 단계; (d) 상기 단계 (c)정제물로부터 효소를 분리하는 단계; (e) 인삼 분말, 홍삼 분말, 인삼추출물 또는 홍삼추출물에 상기 단계 (d)효소를 첨가하는 단계; (f) 상기 단계 (e)첨가물을 발효하는 단계; (g) 상기 단계 (f)발효물을 분리하는 단계; (h) 상기 단계 (g)상등액을 농축하는 단계; (i) 상기 단계 (h)농축물을 아세트산, 젖산, 구연산, 사과산 및 주석산으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 유기산으로 반응하는 단계; 및 (j) 상기 단계 (i)반응물을 중화 및 여과, 정제, 농축, 건조하는 단계; 로 제조된 미량의 진세노사이드 성분이 증가된 가공인삼분말 또는 가공인삼추출물이다.
상기 미량의 진세노사이드는 근육 분화 촉진 효과가 있는 진세노사이드일 수 있으며, 바람직하게는 진세노사이드 Rh2 및 Rg3이다.
상기 근육 분화 촉진용 조성물은 진세노사이드 Rh2 및 Rg3를 함유하는 것으로, 진세노사이드 Rh2 또는 Rg3가 단독으로 함유된 조성물보다 진세노사이드 Rh2 및 Rg3의 혼합 조성물이 근육 분화 촉진 효과가 우수하다.
상기 진세노사이드 Rh2 및 Rg3의 함량은 각각 0.2~30중량%일 수 있으며, 바람직하게는 0.5~30중량%이고, 더 바람직하게는 1~20중량%이다.
상기 "근육 분화"는 위성세포(satellite cell)가 활성화되어 근아세포(myoblast)로 분화하고, 근아세포들의 융합이 일어나 근관세포(myotube)가 형성된 후, 근관세포가 근섬유(muscle fiber)를 이루고, 근섬유가 다발을 이루어 근육을 형성하는 것으로, 미오디(MyoD), Myf5(myogenic factor 5), 미오게닌(mygenin), MRF4(muscle regulatory factor 4)와 같은 다양한 근육 조절 인자들과 미오신 H 사슬(myosin heavy chain, MHC), 근크레아틴인산화효소(muscle creatine kinase, MCK)와 같은 근육 특이성 인자들이 관여하고 있다.
상기 근육 분화 촉진용 조성물은 근아세포로부터 근관세포로의 분화를 촉진시킬 수 있으며, 근관세포의 너비를 증가시킬 수 있다.
상기 근육 분화 촉진용 조성물은 근관세포의 위축을 억제할 수 있다.
상기 근육 분화 촉진용 조성물은 미오디와 같은 근육 조절 인자의 발현을 증가시킬 수 있다.
상기 근육 분화 촉진용 조성물은 미오스타틴을 억제할 수 있다.
상기 "미오스타틴(myostatin)"은 근육세포에 직접적으로 작용하여 근육 분화 및 근육세포 분화(differentiation)를 억제하는 단백질이다. 미오스타틴은 노화, 근이영양증, 근위축성 측삭 경화증, 만성폐쇄성 폐질환, 만성심부전증(chronic heart failure), 에이즈, 암악액질, 신부전(renal failure), 요독증(uremia), 류마티스성 관절염(rheumatoid arthritis) 등과 같은 다양한 질병에서 과발현되는 것으로 알려져 있다.
또한, 본 발명은 상기 근육 분화 촉진용 조성물을 유효성분으로 포함하는 근육 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물에 관한 것이다.
상기 약학적 조성물은 근육세포로의 분화를 촉진시킴으로써 근육 질환을 예방 또는 치료하는 데 사용될 수 있다. 또한, 본 발명의 약학적 조성물은 미오스타틴을 억제함으로써 근육 질환을 예방 또는 치료할 수 있다.
상기 근육 질환은 근육세포의 결핍, 비정상적인 감소 또는 근육 세포의 기능 장애로 인해 발생할 수 있는 질병이다. 바람직하게는 근육세포의 결핍 또는 비정상적인 감소로 인한 것이다.
상기 근육 질환은 근위축증(muscular atrophy), 근질환(myopathy), 근육 손상(muscular injury), 근이영양증(muscular dystrophy), 근무력증(myasthenia), 근육감소증(sarcopenia), 근신경 전도성 질병(myoneural conductive disease), 피부근육염(dermatomyositis), 당뇨병성 근위축증(diabetic amyotrophy), 신경 손상(nerve injury), 근위축성 측삭 경화증(amyotrophic lateral sclerosis, ALS), 악액질(cachexia), 퇴행성 근육질환(degenerative muscle diseases) 등 일 수 있으며, 이에 한정되지 않는다.
상기 악액질은 소모증후군(wasting syndrome)이라고도 하며, 식욕부진을 동반한 체중감소, 근육량 및 체지방 감소, 염증반응 등을 특징으로 한다. 이러한 악액질은 암, 에이즈(acquired immune deficiency syndrome, AIDS), 복강질환(celiac disease), 만성폐쇄성 폐질환(chronic obstructive pulmonary disease, COPD), 다발성경화증(multiple sclerosis), 류마티스성 관절염(rhematoide arthritis), 만성심부전증(chronic heart failure), 선천성 심부전증(congestive heart heart failure), 요독증(uremia), 결핵(tuberculous), 크론병(crohn's disease), 치료되지 않거나 심각한 제1형 당뇨, 신경성 식욕부진, 호르몬 부족 등에 의해 나타날 수 있으나, 이에 한정되지 않는다. 바람직하게는 에이즈(acquired immune deficiency syndrome, AIDS), 복강질환(celiac disease), 만성폐쇄성 폐질환(chronic obstructive pulmonary disease, COPD), 다발성경화증(multiple sclerosis), 류마티스성 관절염(rhematoide arthritis), 만성심부전증(chronic heart failure), 선천성 심부전증(congestive heart failure), 요독증(uremia), 결핵(tuberculous), 크론병(crohn's disease), 치료되지 않거나 심각한 제1형 당뇨, 신경성 식욕부진 및 호르몬 부족에 의한 악액질이고, 더 바람직하게는 에이즈(acquired immune deficiency syndrome, AIDS) 및 만성폐쇄성 폐질환(chronic obstructive pulmonary disease, COPD)에 의한 악액질이다.
상기 퇴행성 근육질환은 근육이 지속적으로 파괴되는 것으로, 뒤시엔느 근위축증(Duchenne muscular dystrophy), 베이커 근위축증(Becker's muscular dystrophy), 지대형 근위축증(Limb-girdle muscular dystrophy), 선천성 근위축증(congential muscular dystrophy), 얼굴어깨윗판 근위축증(facioscapulohumeral muscular dystrophy), 근긴장성 위축증(myotonic dystrophy), 안구인두근위축증(oculopharyngeal muscular atrophy), 말단 근위축증(distal muscular dystrophy), 애머리-드레이푸스 근위축증(emery-dreifuss muscular dystrophy) 등 일 수 있다.
상기 약학적 조성물은 상기 근육 분화 촉진용 조성물 및 부형제를 포함하는 근육 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
상기 약학적 조성물은, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다. 상기 약학적 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 본 발명의 근육 분화 촉진용 조성물에 적어도 하나 이상의 부형제, 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로스 또는 락토즈, 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween)-61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물의 투여량은 치료받을 대상의 연령, 성별, 체중, 치료할 특정 질환 또는 병리 상태, 질환 또는 병리 상태의 심각도, 투여 경로 및 처방자의 판단에 따라 달라질 것이다. 이러한 인자에 기초한 투여량 결정은 당업자의 수준 내에 있으며, 일반적으로 투여량은 0.01㎎/㎏/일 내지 대략 2000㎎/㎏/일의 범위이다. 더 바람직한 투여량은 1㎎/㎏/일 내지 500㎎/㎏/일이다. 투여는 하루에 한번 투여할 수도 있고, 수회 나누어 투여할 수도 있다. 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.
본 발명의 약학적 조성물은 쥐, 가축, 인간 등의 포유동물에 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여의 모든 방식은 예상될 수 있는데, 예를 들면, 경구, 직장 또는 정맥, 근육, 피하, 자궁 내 경막 또는 뇌혈관 내 주사 및 피부 도포에 의해 투여될 수 있다.
또한, 본 발명은 상기 근육 분화 촉진용 조성물을 유효성분으로 포함하는 근육 질환의 개선용 건강기능식품에 관한 것이다.
상기 건강기능식품은 상기 근육 분화 촉진용 조성물 및 식품학적으로 허용 가능한 식품보조 첨가제를 포함하는 근육 질환의 개선용 건강기능식품이다.
상기 건강기능식품은 정제, 캡슐제, 환제 또는 액제 등의 형태를 포함하며, 본 발명의 추출물을 첨가할 수 있는 식품으로는, 예를 들어, 각종 식품류, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 건강기능성식품류 등이 있다.
본 발명은 사포닌 분해효소를 제조한 후 제조된 사포닌 분해효소와 유기산에 의한 가수분해물을 이용한 미량의 진세노사이드 성분이 증가 된 가공인삼추출물을 유효성분으로 포함하는 근육 분화 촉진용 조성물에 관한 것으로, 상기 가공인삼추출물이 근아세포의 근육으로의 분화를 촉진하고, 근육 분화 억제인자인 미오스타틴을 억제하는 것을 확인하였다.
이를 통해, 본 발명의 가공인삼추출물을 이용하여 효과가 우수한 근육 질환의 예방 및 치료용 조성물을 개발할 수 있을 것으로 기대된다.
도 1은 근아세포인 C2C12 세포의 근관세포로의 분화 여부를 확인한 결과를 보여주고 있다.
도 2는 본 발명의 가공인삼추출물의 세포 독성을 확인한 결과를 보여주고 있다.
도 3은 본 발명의 가공인삼추출물 처리 농도 및 시간에 따른 근관세포 분화 효과를 확인한 결과로, (A)는 근관세포의 세포 이미지를, (B)는 분화된 근관세포의 수를, (C)는 분화된 근관세포의 세포핵 수를 확인한 결과를 보여주고 있다.
도 4는 본 발명의 가공인삼추출물 처리 농도에 따른 근관세포의 너비 증가를 확인한 결과로, (A)는 근관세포의 이미지를, (B)는 근관세포의 너비를 측정하여 수치화한 결과를 보여주고 있다.
도 5는 미오스타틴(MSTN) 처리 농도에 따른 근관세포의 위축 정도를 확인한 결과를 보여주고 있다.
도 6은 본 발명의 가공인삼추출물의 미오스타틴에 의한 근관세포 위축을 억제하는 효과를 확인한 결과로, (A)는 근관세포의 이미지를, (B)는 근관세포의 너비를 측정하여 수치화한 결과를 보여주고 있다.
도 7은 본 발명의 가공인삼추출물의 미오스타틴에 의한 근관세포 위축 관련 신호전달 인자인 Smad2의 인산화 억제 효과를 확인한 결과로, (A)는 인산화 된 Smad2(pSmad2)의 발현을 확인한 밴드를, (B)는 발현 밴드의 밀도를 수치화한 결과를 보여주고 있다.
도 8은 본 발명의 가공인삼추출물의 근원섬유 단백질 발현에 핵심적인 전사인자인 미오디(MyoD) 및 이를 분해하는 효소인 MAFbx의 발현 조절 효과를 확인한 결과로, (A)는 미오디, MAFbx, 및 GAPDH의 단백질 발현을 확인한 밴드를, (B)는 미오스타틴 및 본 발명의 가공인삼추출물의 유무 조건에서 GAPDH 대비 MAFbx의 발현을 수치화한 결과이며, (C)는 미오스타틴 및 본 발명의 가공인삼추출물의 유무 조건에서 GAPDH 대비 미오디의 발현을 수치화한 결과를 보여주고 있다.
도 2는 본 발명의 가공인삼추출물의 세포 독성을 확인한 결과를 보여주고 있다.
도 3은 본 발명의 가공인삼추출물 처리 농도 및 시간에 따른 근관세포 분화 효과를 확인한 결과로, (A)는 근관세포의 세포 이미지를, (B)는 분화된 근관세포의 수를, (C)는 분화된 근관세포의 세포핵 수를 확인한 결과를 보여주고 있다.
도 4는 본 발명의 가공인삼추출물 처리 농도에 따른 근관세포의 너비 증가를 확인한 결과로, (A)는 근관세포의 이미지를, (B)는 근관세포의 너비를 측정하여 수치화한 결과를 보여주고 있다.
도 5는 미오스타틴(MSTN) 처리 농도에 따른 근관세포의 위축 정도를 확인한 결과를 보여주고 있다.
도 6은 본 발명의 가공인삼추출물의 미오스타틴에 의한 근관세포 위축을 억제하는 효과를 확인한 결과로, (A)는 근관세포의 이미지를, (B)는 근관세포의 너비를 측정하여 수치화한 결과를 보여주고 있다.
도 7은 본 발명의 가공인삼추출물의 미오스타틴에 의한 근관세포 위축 관련 신호전달 인자인 Smad2의 인산화 억제 효과를 확인한 결과로, (A)는 인산화 된 Smad2(pSmad2)의 발현을 확인한 밴드를, (B)는 발현 밴드의 밀도를 수치화한 결과를 보여주고 있다.
도 8은 본 발명의 가공인삼추출물의 근원섬유 단백질 발현에 핵심적인 전사인자인 미오디(MyoD) 및 이를 분해하는 효소인 MAFbx의 발현 조절 효과를 확인한 결과로, (A)는 미오디, MAFbx, 및 GAPDH의 단백질 발현을 확인한 밴드를, (B)는 미오스타틴 및 본 발명의 가공인삼추출물의 유무 조건에서 GAPDH 대비 MAFbx의 발현을 수치화한 결과이며, (C)는 미오스타틴 및 본 발명의 가공인삼추출물의 유무 조건에서 GAPDH 대비 미오디의 발현을 수치화한 결과를 보여주고 있다.
이하 본 발명의 바람직한 실시예를 상세히 설명하기로 한다. 그러나 본 발명은 여기서 설명되는 실시예에 한정되지 않고 다른 형태로 구체화될 수도 있다. 오히려, 여기서 소개되는 내용이 철저하고 완전해지고, 당업자에게 본 발명의 사상을 충분히 전달하기 위해 제공하는 것이다.
본 발명의 가공인삼추출물은 한국등록특허 제0992800호 및 제1595426호에 개시된 방법으로 제조하였다.
<비교예 1. 인삼 분말의 제조>
6년근 인삼 200g을 열풍건조 한 후 분쇄하여 60g의 인삼분말을 얻었다.
<비교예 2. 인삼농축액의 제조>
6년근 인삼 200g을 열풍건조 한 후 1L의 70% 주정을 첨가하여 70℃에서 8시간 교반한 후 추출, 여과, 및 농축하여 50g의 인삼농축액을 얻었다.
<비교예 3. 인삼농축액분말의 제조>
6년근 인삼 200g을 열풍건조 한 후 1L의 70% 주정을 첨가하여 70℃에서 8시간 교반한 후 추출, 여과, 농축, 및 건조하여 30g의 인삼농축액분말을 얻었다.
<비교예 4. 홍삼 분말의 제조>
6년근 인삼 200g을 98℃에서 1시간 증기로 쪄서 말린 후 분쇄하여 40g의 홍삼분말을 얻었다.
<비교예 5. 홍삼농축액의 제조>
6년근 인삼 200g을 98℃에서 1시간 증기로 쪄서 말린 후 1L의 70% 주정을 첨가하여 70℃에서 8시간 교반한 후 추출, 여과, 및 농축하여 30g의 홍삼농축액을 얻었다.
<비교예 6. 홍삼농축액분말의 제조>
6년근 인삼 200g을 98℃에서 1시간 증기로 쪄서 말린 후 1L의 70% 주정을 첨가하여 70℃에서 8시간 교반한 후 추출, 여과, 농축, 및 건조하여 25g의 홍삼농축액분말을 얻었다.
<비교예 7. 인삼 분말 + Rh2 0.3% + Rg3 0.3% 제조>
비교예 1의 인삼 분말 99.4g에 진세노사이드 Rh2 0.3g과 Rg3 0.3g을 혼합하였다.
<비교예 8. 홍삼 분말 + Rh2 0.3% + Rg3 0.3% 제조>
비교예 4의 홍삼 분말 99.4g에 진세노사이드 Rh2 0.3g과 Rg3 0.3g을 혼합하였다.
<비교예 9. 홍삼 분말 + Rh2 1% 제조>
비교예 4의 홍삼 분말 99g에 진세노사이드 Rh2 1g을 혼합하였다.
<비교예 10. 홍삼 분말 + Rg3 1% 제조>
비교예 4의 홍삼 분말 99g에 진세노사이드 Rg3 1g을 혼합하였다.
<비교예 11. 홍삼 분말 + Rh2 0.5% + Rg3 0.5% 제조>
비교예 4의 홍삼 분말 99g에 진세노사이드 Rh2 0.5g과 Rg3 0.5g을 혼합하였다.
<실시예 1. 인삼 분말을 이용한 가공인삼분말의 제조>
인삼 분말 250g, 밀기울 750g을 넣고 121℃, 1.5기압 하에서 고압증기 멸균기로 멸균한다. 멸균된 배지에 멸균수 2L을 넣고 혼합한 다음 아스퍼질러스 나이거(Aspergillus niger) 현탁액(5×105 포자/배지무게 g)을 28℃에서 7일간 배양한다. 배양이 완료되면, 0.02M 초산나트륨 완충용액을 첨가하고 혼합한 후 배지를 여과한다. 여과된 배양액을 한외여과막(100kDa 이상)을 사용 여과 및 농축하여 효소액 60g을 얻는다. 비교예 1의 인삼 분말 200g에 효소액 30g을 첨가하여 28℃에서 18시간 배양한 후 주정을 첨가하여 효소를 침전, 상등액을 농축한다. 상기 농축물 200g에 2L의 정제수를 가한 후 구연산 250g을 첨가하고 50℃에서 18시간 동안 교반 하였다. 반응이 완료되면 70% 주정을 첨가하고 여과, 농축하여 200g의 가공인삼분말을 얻었다.
<실시예 2. 인삼농축액을 이용한 가공인삼농축액의 제조>
인삼 분말 250g, 밀기울 750g을 넣고 121℃, 1.5기압 하에서 고압증기 멸균기로 멸균한다. 멸균된 배지에 멸균수 2L을 넣고 혼합한 다음 아스퍼질러스 나이거(Aspergillus niger) 현탁액(5×105 포자/배지무게 g)을 접종하고 28℃에서 7일간 배양한다. 배양이 완료되면, 0.02M 초산나트륨 완충용액을 첨가하고 혼합한 후 배지를 여과한다. 여과된 배양액을 한외여과막(100kDa 이상)을 사용하여 여과 농축하여 효소액 60g을 얻는다. 비교예 2의 인삼농축액 200g에 효소액 30g을 첨가하여 28℃에서 18시간 배양한 후 주정을 첨가하여 효소를 침전, 상등액을 농축한다. 상기 농축물 200g에 2L의 정제수 첨가 후 구연산 250g을 첨가하고 50℃에서 18시간 동안 교반하였다. 반응이 완료되면 70% 주정을 첨가하고 여과, 농축하여 190g의 가공인삼농축액을 얻었다.
<실시예 3. 인삼농축액분말을 이용한 가공인삼농축액분말의 제조>
인삼 분말 250g, 밀기울 750g을 넣고 121℃, 1.5기압 하에서 고압증기 멸균기로 멸균한다. 멸균된 배지에 멸균수 2L을 넣고 혼합한 다음 아스퍼질러스 나이거(Aspergillus niger) 현탁액(5×105 포자/배지무게 g)을 접종하고 28℃에서 7일간 배양한다. 배양이 완료되면, 0.02M 초산나트륨 완충용액을 첨가하고 혼합한 후 배지를 여과한다. 여과된 배양액을 한외여과막(100kDa 이상)을 사용하여 여과 농축하여 효소액 60g을 얻는다. 비교예 3의 인삼농축액분말 200g에 효소액 30g을 첨가하여 28℃에서 18시간 배양한 후 주정을 첨가하여 효소를 침전, 상등액을 농축한다. 상기 농축물 200g에 정제수 2L를 첨가하고 초산 250g을 첨가하고 50℃에서 8시간 동안 교반하였다. 반응이 완료되면 70% 주정을 첨가하고 여과, 농축, 건조하여 195g의 가공인삼농축액분말을 얻었다.
<실시예 4. 홍삼 분말을 이용한 가공홍삼분말의 제조>
인삼 분말 250g, 밀기울 750g을 넣고 121℃, 1.5기압 하에서 고압증기 멸균기로 멸균한다. 멸균된 배지에 멸균수 2L을 넣고 혼합한 다음 아스퍼질러스 나이거(Aspergillus niger) 현탁액(5×105 포자/배지무게 g)을 접종하고 28℃에서 7일간 배양한다. 배양이 완료되면, 0.02M 초산나트륨 완충용액을 첨가하고 혼합한 후 배지를 여과한다. 여과된 배양액을 한외여과막(100kDa 이상)을 사용하여 여과 농축하여 효소액 60g을 얻는다. 비교예 4의 홍삼 분말 200g에 효소액 30g을 첨가하여 28℃에서 18시간 배양한 후 주정을 첨가하여 효소를 침전, 상등액을 농축한다. 상기 농축물 200g에 정제수 2L를 가하고 초산 250g을 첨가하고 50℃에서 8시간 동안 교반하였다. 반응이 완료되면 70% 주정을 첨가하고 여과, 농축, 건조하여 195g의 가공홍삼분말을 얻었다.
<실시예 5. 홍삼농축액을 이용한 가공홍삼농축액의 제조>
인삼 분말 250g, 밀기울 750g을 넣고 121℃, 1.5기압 하에서 고압증기 멸균기로 멸균한다. 멸균된 배지에 멸균수 2L을 넣고 혼합한 다음 아스퍼질러스 나이거(Aspergillus niger) 현탁액(5×105 포자/배지무게 g)을 접종하고 28℃에서 7일간 배양한다. 배양이 완료되면, 0.02M 초산나트륨 완충용액을 첨가하고 혼합한 후 배지를 여과한다. 여과된 배양액을 한외여과막(100kDa 이상)을 사용하여 여과 농축하여 효소액 60g을 얻는다. 비교예 5의 홍삼농축액 200g에 효소액 30g을 첨가하여 28℃에서 18시간 배양한 후 주정을 첨가하여 효소를 침전, 상등액을 농축한다. 상기 농축물 200g에 정제수 2L를 가하고 구연산 250g을 첨가하고 50℃에서 18시간 동안 교반 하였다. 반응이 완료되면 70% 주정을 첨가하고 여과, 농축하여 190g의 가공홍삼농축액을 얻었다.
<실시예 6. 홍삼농축액분말을 이용한 가공홍삼농축액분말의 제조>
인삼 분말 250g, 밀기울 750g을 넣고 121℃, 1.5기압하에서 고압증기 멸균기로 멸균한다. 멸균된 배지에 멸균수 2L을 넣고 혼합한 다음 아스퍼질러스 나이거(Aspergillus niger) 현탁액 (5×105 포자/배지무게 g)을 접종하고 28℃에서 7일간 배양한다. 배양이 완료되면, 0.02M 초산나트륨 완충용액을 첨가하고 혼합한 후 배지를 여과한다. 여과된 배양액을 한외여과막(100kDa 이상)을 사용 여과농축하여 효소액 60g을 얻는다. 비교예 6의 홍삼농축액분말 200g에 효소액 30g을 첨가하여 28℃에서 18시간 배양한 후 주정을 첨가하여 효소를 침전, 상등액을 농축한다. 상기 농축물 200g에 정제수 2L를 가하고 초산 250g을 첨가하고 50℃에서 8시간 동안 교반 하였다. 반응이 완료되면 70% 주정을 첨가하고 여과, 농축, 건조하여 195g의 가공홍삼농축액분말을 얻었다.
하기 표 1은 한국등록특허 제992800호의 개시된 방법으로 분석하여 본 발명의 실시예 및 비교예 제조물에 함유된 진세노사이드 Rh2와 Rg3 함량을 나타낸 것이다. 본 발명의 실시예 1 내지 실시예 6에 해당되는 인삼 분말 및 홍삼 분말에 대한 사포닌 분해효소를 제조한 후 제조된 사포닌 분해효소와 유기산에 의한 가수분해를 이용하여 미량의 진세노사이드 성분이 증가된 가공인삼분말 또는 가공인삼추출물이 이들의 반응 대상물질인 인삼 분말 및 홍삼 분말에 비해 진세노사이드 Rh2 및 Rg3가 증가되어 다량 함유되는 것을 확인하였다. 비교예 7 내지 비교예 11은 본 발명의 실시예와 같이 사포닌 분해효소와 유기산 가수분해 처리를 하지 않은 인삼 분말과 홍삼 분말에 단순히 진세노사이드 Rh2와 Rg3를 첨가하여 본 발명의 실시예와 같은 진세노사이드 Rh2와 Rg3 함량이 되도록 하여 이로부터 근육 분화 촉진 효과를 비교하기 위해 제조하였다.
| 진세노사이드 Rg3 및 Rh2함량 | ||
| 분류 | 함량(중량%) | |
| Rh2 | Rg3 | |
| 실시예 1(가공인삼분말) | 0.2 | 0.3 |
| 실시예 2(가공인삼농축액) | 3 | 3 |
| 실시예 3(가공인삼농축액분말) | 12 | 18 |
| 실시예 4(가공홍삼분말) | 0.6 | 0.8 |
| 실시예 5(가공홍삼농축액) | 1 | 3 |
| 실시예 6(가공홍삼농축액분말) | 5 | 10 |
| 비교예 1(인삼분말) | <0.01 | <0.01 |
| 비교예 2(인삼농축액) | <0.5 | <0.5 |
| 비교예 3(인삼농축액분말) | <0.5 | <0.01 |
| 비교예 4(홍삼분말) | <0.01 | <0.01 |
| 비교예 5(홍삼농축액) | <0.5 | <0.5 |
| 비교예 6(홍삼농축액분말) | <0.01 | <0.01 |
| 비교예 7(인삼분말 99.5g+Rh20.2g+Rg3 0.3g) | 0.2 | 0.3 |
| 비교예 8(홍삼분말 99.5g+Rh2 0.2g+Rg3 0.3g) | 0.2 | 0.3 |
| 비교예 9(홍삼분말 99g+Rh2 1g) | 1 | <0.01 |
| 비교예 10(홍삼분말 99g+Rg3 1g) | <0.01 | 1 |
| 비교예 11(홍삼분말 99g+Rh2 0.5g+Rg3 0.5g) | 0.5 | 0.5 |
<
실험예
1. 동물세포 배양 및
근관세포
분화 유도>
근육 분화 과정에서 근아세포의 분열이 일어나고, 근아세포들 간의 융합이 일어나 근관세포로 발달하여 최종적으로 근육을 형성한다. 따라서, 본 발명의 조성물의 근육 분화에의 영향을 확인하기 위해 근관세포로의 분화 활성을 확인하였다.
근관세포로의 분화 촉진 활성을 확인하기 위해 마우스 근아세포(myoblast)인 C2C12(C2C12 ATCC ® CRL-1772) 세포를 이용하였다. C2C12 세포는 10% FBS(fetal bovine serum), 100U/㎖의 페니실린(penicillin) 및 100U/㎖의 스트렙토마이신(streptomycin)이 포함되어 있는 DMEM(Dulbecco's Modified Eagle's Medium, Gibco) 배지를 넣고 37℃, 5% CO2 배양기에서 배양하였다.
상기에서 배양한 C2C12 세포를 플레이트에 분주하고 세포가 80~90% 정도 찰 때까지 배양하였다. 배양액을 제거하고 2% 말 혈청(horse serum, Gibco)이 포함된 DMEM 배지를 첨가하여 배양하여 근관세포로의 분화를 유도시킨 후, 형성된 근관세포를 현미경을 통해 확인하였고, 그 결과를 도 1에 나타내었다.
도 1에서 보여주듯이, (A)의 분화 전과 달리, (B)의 분화를 유도한 후에는 여러 개의 근아세포들이 융합되어 관 형태의 근관세포를 형성하는 것을 확인하였다.
이를 통해, C2C12 세포에 말 혈청을 처리함으로서 근육 분화를 유도할 수 있음을 알 수 있었다.
<실험예 2. 가공인삼추출물의 세포 독성 확인>
본 발명의 가공인삼추출물의 세포 독성 여부를 확인하기 위해, 상기 실험예 1에서 분화시킨 근관세포를 이용하였다.
상기 실험예 1의 근관세포를 96웰 플레이트에 분주하여 24시간 동안 배양 한 후, 상기 본 발명의 가공인삼추출물을 0~100㎍/㎖이 되도록 처리하고 다시 24시간 동안 배양하였다. 배양 후 Promega사의 CellTiter-Glo Luminescent cell viability assay 키트 및 제조사에서 제공하는 매뉴얼을 이용하여 세포 내 ATP 농도를 측정하여 세포 생존율을 측정하였고, 그 결과를 도 2에 나타내었다.
도 2에서 보여주듯이, 상기 조성물 중 실시예 2의 가공인삼추출물 농도 30㎍/㎖까지의 세포 생존율의 감소는 미미하나, 50㎍/㎖ 및 100㎍/㎖에서 가공인삼추출물을 처리하지 않은 정상 세포 대비 세포 생존율이 7~12% 정도 감소하였다. 즉, 실시예 2의 가공인삼추출물 농도가 50㎍/㎖ 이상일 경우에는 세포 독성이 나타날 수 있음을 예측할 수 있었다.
이러한 결과는 다른 실시예의 가공인삼추출물을 처리한 경우에도 유사한 결과를 얻을 수 있었다.
이를 통해, 본 발명의 가공인삼추출물의 최고 처리 농도가 30㎍/㎖ 임을 알 수 있었다.
<실험예 3. 가공인삼추출물의 근관세포 형성 촉진 확인>
근육 분화 과정에서 근아세포의 분열이 일어나고, 근아세포들 간의 융합이 일어나 근관세포로 발달하여 최종적으로 근육을 형성한다. 따라서, 본 발명의 가공인삼추출물의 근육 분화에의 영향을 확인하기 위해 근관세포 형성 유도 활성을 확인하였다.
상기 실험예 1의 근관세포 형성 유도 실험 방법과 동일하게 실험을 진행하였다. 이때, 말 혈청 처리 후, 상기 실시예 2의 가공인삼추출물을 0, 10, 30㎍/㎖이 되도록 처리한 후, 6일 동안 배양하였다. 배양 0일, 2일, 4일, 6일차에 해당되는 세포를 고정(fixing)하고, Diff Quick kit(시스맥스, ZS0003, 일본) 및 제조사에서 제공하는 매뉴얼에 따라 세포핵 및 세포질을 염색한 한 후, 현미경을 이용하여 이미지를 촬영하였고, 근관세포의 수 및 세포핵의 수를 분석하였고, 그 결과를 도 3에 나타내었다.
도 3에서 보여주듯이, 실시예 2의 가공인삼추출물을 처리한 경우, 처리 시간 및 농도에 따라 근관세포가 늘어나는 것을 세포 이미지(A), 근관세포의 수(B) 및 세포핵 수(C)를 통해 확인하였다.
또한, 상기 실험방법과 동일한 방법으로 상기 실시예 1 내지 실시예 6 및 비교예 1 내지 비교예 11의 가공인삼추출물을 10㎍/㎖이 되도록 처리한 후 4일 동안 배양하고, 근관세포의 수를 분석하였고, 그 결과를 하기 표 2에 나타내었다.
| 분류 | 시야 당 근관세포 수 |
| 대조군(말 혈청만 처리) | 25 |
| 실시예 1(가공인삼분말) | 31 |
| 실시예 2(가공인삼농축액) | 37 |
| 실시예 3(가공인삼농축액분말) | 41 |
| 실시예 4(가공홍삼분말) | 33 |
| 실시예 5(가공홍삼농축액) | 34 |
| 실시예 6(가공홍삼농축액분말) | 40 |
| 비교예 1(인삼분말) | 25 |
| 비교예 2(인삼농축액) | 26 |
| 비교예 3(인삼농축액분말) | 27 |
| 비교예 4(홍삼분말) | 26 |
| 비교예 5(홍삼농축액) | 26 |
| 비교예 6(홍삼농축액분말) | 26 |
| 비교예 7(인삼분말 99.5g+Rh2 0.3g+Rg3 0.3g) | 30 |
| 비교예 8(홍삼분말 99.5g+Rh2 0.3g+Rg3 0.3g) | 31 |
| 비교예 9(홍삼분말 99g+Rh2 1g) | 29 |
| 비교예 10(홍삼분말 99g+Rg3 1g) | 29 |
| 비교예 11(홍삼분말 99g+Rh2 0.5g+Rg3 0.5g) | 32 |
상기 표 2를 통해 알 수 있듯이, 비교예 1 내지 비교예 6의 가공인삼추출물을 처리한 경우의 근관세포 수는 말 혈청만 처리한 대조군과 유사하게 나타나는 반면에, 실시예 1 내지 실시예 6의 가공인삼추출물을 처리한 경우에 근관세포 수가 증가하는 것을 확인하였다. 또한, 비교예 1 및 비교예 4의 인삼분말 또는 홍삼분말에 진세노사이드 Rh2, Rg3를 각각 추가하거나 모두 추가한 비교예 7 내지 비교예 11의 가공인삼추출물을 처리한 경우에는 비교예 1 및 비교예 4의 가공인삼추출물에 비해 근관세포의 수가 증가하였고, 특히나, 진세노사이드 Rh2 또는 Rg3를 각각 추가한 비교예 9 및 비교예 10의 가공인삼추출물을 처리한 경우에 비해 두 개의 진세노사이드를 같이 추가한 비교예 7, 비교예 8, 비교예 10 및 비교예 11의 가공인삼추출물을 처리한 경우에 근관세포 수가 많은 것을 확인하였다.
이를 통해, 본 발명의 가공인삼추출물과 같이 진세노사이드 Rh2 및 Rg3를 함께 투여한 경우에 근육 분화 촉진 효과가 증가한다는 것을 알 수 있었다.
<실험예 4. 가공인삼추출물의 근관세포 너비 증가 효과 확인>
근육 분화 과정 중에서 생성된 근관세포는 그 길이 및 너비가 증가하면서 주변 근관세포들과 융합되어 근섬유를 형성한다. 따라서, 본 발명의 가공인삼추출물의 근육 분화에의 영향을 확인하기 위해 근관세포의 너비 증가 효과를 확인하였다.
상기 실험예 1의 방법으로 C2C12 세포를 근관세포로 분화시킨 후, 상기 실시예 2의 가공인삼추출물을 0, 1, 10, 30㎍/㎖이 되도록 처리하고, 24시간 동안 배양하였다. 배양한 세포를 4% 파라포름알데하이드(paraformaldehyde)로 15분간 고정시키고 0.2% 트리톤 X-100(triton X-100)을 15분간 처리한 후, 5% BSA(bovine serum albumin)로 6시간 동안 블로킹(blocking)시켰다. 블로킹 후 세포 형태를 관찰하기 위해 세포에 근관 형성 유지 단백질인 MHC(myosin heavy chain)에 대한 항체를 넣고 4℃에서 12시간 반응시킨 다음에 Alexa Fluor 488 형광물질이 결합된 2차 항체를 실온에서 4시간 동안 반응시켜 면역형광염색 한 후, 형광현미경을 통해 MHC에 붙어 있는 형광물질을 이용해 근관세포 이미지를 관찰하고, Image J 프로그램을 이용하여 근관세포의 너비를 측정하였다. 그 결과를 도 4에 나타내었다. 이때, 근관세포의 너비는 무작위로 5개의 지역에서 총 100개 이상의 근관세포의 너비를 측정하여 정량화 하였다.
도 4(A)의 근관세포의 이미지 및 4(B)의 근관세포 너비를 측정한 결과를 통해 알 수 있듯이, C2C12로부터 분화된 근관세포의 너비가 실시예 2의 가공인삼추출물 처리농도에 따라 증가하는 것을 확인하였다.
또한, 본 명세서에서는 보여주지 않았으나, 본 발명의 실시예 1 내지 실시예 5의 가공인삼추출물을 처리한 경우에도, 상기 실시예 2의 가공인삼추출물을 처리한 경우와 마찬가지로 근관세포의 너비가 증가하는 것을 확인하였다.
이를 통해, 본 발명의 가공인삼추출물이 근관세포의 너비 증가를 통해 근육 분화를 촉진하는 효과가 있음을 알 수 있었다.
<실험예 5. 가공인삼추출물의 근위축 억제 효과 확인>
실험예 5-1. 근위축 동물세포 모델 제조
본 발명의 가공인삼추출물의 근위축 억제 효과를 확인하기 위해, 근위축 동물 세포 모델을 제조하였다. 이때, 근위축이 일어나면 근관세포의 너비 및 길이가 감소되는 것을 바탕으로 동물세포 모델을 제조하였다.
상기 실험예 1의 근관세포 분화 유도와 동일한 방법으로 근관세포를 분화시킨 후, FBS가 포함하되 않은 DMEM 배지를 넣고 3시간 동안 배양하였다. 배양 후, 각 세포에 근육분화 억제 물질인 미오스타틴(myostatin, MSTN)을 농도별로 24시간 동안 처리하고, 근위축이 유도되었는지 확인하기 위해 근관세포의 너비 변화를 측정하였다. 근관세포의 너비 변화 측정은 상기 실험예 4와 동일한 방법을 수행하여 측정하였고, 면역형광염색 한 후, 형광현미경을 통해 MHC에 붙어 있는 형광물질을 이용해 근관세포 이미지를 관찰하고, Image J 프로그램을 이용하여 근관세포의 너비를 측정하여, 그 결과를 도 5에 나타내었다.
도 5에서 보여주듯이, 미오스타틴을 처리하지 않은 근관세포에 비해 미오스타틴을 처리한 경우, 처리 농도가 증가함에 따라 근관세포의 너비가 감소하는 것을 확인하였고, 0.4㎍/㎖의 미오스타틴을 처리한 경우에 근관세포의 너비가 가장 크게 감소하였다.
이를 통해, 본 발명의 가공인삼추출물의 근위축 억제 효과를 확인하기 위한 근위축 동물세포 모델 제조시 미오스타틴 0.4㎍/㎖을 처리하기로 결정하였다.
실험예 5-2. 가공인삼추출물의 근위축 억제 효과 확인
본 발명의 가공인삼추출물의 근위축 억제 효과를 확인하기 위해 상기 실험예 5-1의 근위축 동물세포 모델 제조 방법과 동일한 방법으로 근위축을 유도한 후, 근관세포의 너비 변화를 관찰하였고, 그 결과를 도 6에 나타내었다. 이때, 미오스타틴(MSTN) 0.4㎍/㎖과 상기 실시예 2의 가공인삼추출물 30㎍/㎖을 24시간 동안 단독 처리하거나 병용 처리하였고, 미오스타틴 및 실시예 2의 가공인삼추출물을 처리하지 않은 근관세포를 대조군으로 이용하였다.
도 6(A)의 근관세포의 이미지 및 6(B)의 근관세포 너비를 측정한 결과를 통해 알 수 있듯이, 대조군에 실시예 2의 가공인삼추출물을 처리한 경우에는 근관세포의 너비가 증가하는 반면에, 미오스타틴(MSTN)을 처리하면 근관세포의 너비가 감소되는 것을 확인하였다. 또한, 미오스타틴과 실시예 2의 가공인삼추출물을 함께 처리한 경우에는 미오스타틴에 의해 감소된 근관세포의 너비가 증가하는 것을 확인하였다.
이를 통해, 본 발명의 가공인삼추출물이 근육 분화 과정 중에 근관세포의 너비를 증가시킬 뿐만 아니라 미오스타틴에 의한 근위축을 억제한다는 것을 알 수 있었다.
<실험예 6. 가공인삼추출물의 미오스타틴 관련 신호전달 억제 효과 확인>
실험예 6-1. Smad 2 인산화 억제 효과 확인
미오스타틴(MSTN)은 액티빈 타입 II 수용체(activin type II receptor, ActRIIB)-Smad2 신호전달 경로의 활성화를 통해 유비퀴틴 프로테아좀 경로(ubiquitin proteasome pathway, UPP) 매개 단백질 분해를 증가시켜 근위축을 유도하는 것으로 알려져 있다. 이에, 본 발명의 가공인삼추출물의 미오스타틴에 의한 근위축 억제 효과를 확인하기 위해 ActRIIB-Smad2 신호전달 경로 중 Smad2의 인산화 억제 여부를 확인하였다.
상기 실험예 5-2와 동일한 방법으로 분화시킨 근관세포에 미오스타틴 및 상기 실시예 2의 가공인삼추출물을 처리하여 세포를 확보하였고, 이를 이용해 웨스턴 블롯(Western blot)을 수행하였다. 이때, 실시예 2의 가공인삼추출물의 경우 처리 농도가 0, 10, 30, 100㎍/㎖이 되도록 처리하였다. 확보한 세포에 용해 완충용액(lysis buffer)을 넣고 세포를 용해시킨 후 원심 분리하여 상등액의 단백질을 확보하였다. 확보한 상등액의 단백질을 SDS-PAGE(sodium dodecyl polyacrylamide gel electrophoresis)를 통해 분리하고 PVDF(polyvinylidenefluoride) 멤브레인으로 옮겼다. 멤브레인을 블로킹 용액으로 블로킹 시킨 다음, Smad2 및 인산화 된 Smad2(pSmad2)의 양을 확인하기 위해 각각의 1차 항체를 처리한 후, 1차 항체에 대한 2차 항체를 처리하고, ECL(enhanced chemiluminescence)(Amersham 사)를 이용하여 단백질 발현을 확인하였다. 이때, 단백질 밴드 밀도를 측정하여 수치화하였고, 그 결과를 도 7에 나타내었다.
도 7(A)의 단백질 발현 밴드 결과 및 7(B)의 발현량을 수치화한 결과에서 보여주듯이, 근관세포에 미오스타틴(MSTN)을 처리한 경우에는 Smad2의 인산화(pSmad2)가 증가한 반면에, 실시예 2의 가공인삼추출물을 처리한 경우에는, 처리 농도가 증가함에 따라 Smad2의 인산화(pSmad2)가 감소되는 것을 확인하였다.
실험예 6-2. MyoD 분해 경로 억제 효과 확인
근육 분화에 중요한 근원섬유 단백질 발현에 핵심적인 전사인자인 미오디(MyoD)의 분해 과정은 미오스타틴(MSTN)-ActRIIB-Smad2 경로에 의해 활성화되는 UPP 과정에 의해 주도되는 것으로 알려져 있다. UPP 과정은 대상 단백질에 특화된 유비퀴틴화 E3 리가아제(ligase)들에 의해 조절되는데, 이 과정에 핵심적인 미오디의 E3 리가아제는 MAFbx로 알려져 있다. 이에, 본 발명의 가공인삼추출물에 의한 미오스타틴에 의한 근위축 억제 효과를 확인하기 위해 미오디와 MAFbx 함량 변화를 확인하였다.
상기 실험예 5-2와 동일한 방법으로 분화시킨 근관세포에 미오스타틴 및 상기 실시예 2의 가공인삼추출물을 처리하여 세포를 확보하였다. 이때, 실시예 2의 가공인삼추출물의 경우, 처리 농도가 30㎍/㎖이 되도록 처리하였다. 확보한 세포를 이용해 상기 실시예 6-1과 동일한 방법으로 미오디와 MAFbx에 해당되는 항체를 이용하여 웨스턴 블롯을 수행하였고, 그 결과를 도 8에 나타내었다.
도 8(A)의 MAFbx 및 미오디 단백질 발현 밴드 결과와 8(B)의 MAFbx 및 8(C)의 미오디 발현량을 수치화한 결과에서 보여주듯이, 근관세포에 미오스타틴(MSTN)을 처리한 경우에는 MAFbx의 발현이 증가하고, 미오디의 발현은 감소하는 반면에, 실시예 2의 가공인삼추출물을 처리한 경우에는, MSTN에 의해 증가된 MAFbx가 감소되고, MSTN에 의해 감소된 미오디의 발현이 증가하는 것을 확인하였다.
상기 실험예 6-1 및 실험예 6-2의 결과를 통해, 본 발명의 가공인삼추출물이 근육 분화 억제제인 미오스타틴의 신호전달 과정을 억제함으로써 근육 분화를 촉진한다는 것을 알 수 있었다.
Claims (6)
- (a) 아스퍼질러스 나이거(Aspergillus niger)를 인삼 분말 및 밀기울로 구성된 배지에 접종하는 단계;
(b) 상기 단계 (a)의 균을 배양하는 단계;
(c) 상기 단계 (b)배양물을 한외여과막(ultrafilteration)으로 정제하는 단계;
(d) 상기 단계 (c)정제물로부터 효소를 분리하는 단계;
(e) 인삼 분말, 홍삼 분말, 인삼추출물 또는 홍삼추출물에 상기 단계 (d)효소를 첨가하는 단계;
(f) 상기 단계 (e)첨가물을 발효하는 단계;
(g) 상기 단계 (f)발효물을 분리하는 단계;
(h) 상기 단계 (g)상등액을 농축하는 단계;
(i) 상기 단계 (h)농축물을 아세트산, 젖산, 구연산, 사과산 및 주석산으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 유기산으로 반응하는 단계; 및
(j) 상기 단계 (i)반응물을 중화 및 여과, 정제, 농축, 건조하는 단계;
로 제조된 가공인삼추출물을 유효성분으로 포함하는 근위축을 억제하는 것을 특징으로 하는 근위축증(muscular atrophy), 근이영양증(muscular dystrophy), 근신경 전도성 질병(myoneural conductive disease), 당뇨병성 근위축증(diabetic amyotrophy), 근위축성 측삭 경화증(amyotrophic lateral sclerosis, ALS) 및 퇴행성 근육질환(degenerative muscle diseases)으로 이루어진 군에서 선택되는 근육 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물. - 제1항에 있어서,
상기 조성물은 진세노사이드 Rh2 및 Rg3를 각각 0.5~30중량%를 함유하는 것을 특징으로 하는 근위축증, 근이영양증, 근신경 전도성 질병, 당뇨병성 근위축증, 근위축성 측삭 경화증 및 퇴행성 근육질환으로 이루어진 군에서 선택되는 근육 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물. - 제1항에 있어서,
상기 조성물은 근관세포(myotube) 분화를 촉진하는 것을 특징으로 하는 근위축증, 근이영양증, 근신경 전도성 질병, 당뇨병성 근위축증, 근위축성 측삭 경화증 및 퇴행성 근육질환으로 이루어진 군에서 선택되는 근육 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물. - 제1항에 있어서,
상기 조성물은 미오스타틴(myostatin)에 의한 근위축 현상을 억제하는 것을 특징으로 하는 근위축증, 근이영양증, 근신경 전도성 질병, 당뇨병성 근위축증, 근위축성 측삭 경화증 및 퇴행성 근육질환으로 이루어진 군에서 선택되는 근육 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물. - 삭제
- (a) 아스퍼질러스 나이거(Aspergillus niger)를 인삼 분말 및 밀기울로 구성된 배지에 접종하는 단계;
(b) 상기 단계 (a)의 균을 배양하는 단계;
(c) 상기 단계 (b)배양물을 한외여과막(ultrafilteration)으로 정제하는 단계;
(d) 상기 단계 (c)정제물로부터 효소를 분리하는 단계;
(e) 인삼 분말, 홍삼 분말, 인삼추출물 또는 홍삼추출물에 상기 단계 (d)효소를 첨가하는 단계;
(f) 상기 단계 (e)첨가물을 발효하는 단계;
(g) 상기 단계 (f)발효물을 분리하는 단계;
(h) 상기 단계 (g)상등액을 농축하는 단계;
(i) 상기 단계 (h)농축물을 아세트산, 젖산, 구연산, 사과산 및 주석산으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 유기산으로 반응하는 단계; 및
(j) 상기 단계 (i)반응물을 중화 및 여과, 정제, 농축, 건조하는 단계;
로 제조된 가공인삼추출물을 유효성분으로 포함하는 근위축을 억제하는 것을 특징으로 하는 근위축증(muscular atrophy), 근이영양증(muscular dystrophy), 근신경 전도성 질병(myoneural conductive disease), 당뇨병성 근위축증(diabetic amyotrophy), 근위축성 측삭 경화증(amyotrophic lateral sclerosis, ALS) 및 퇴행성 근육질환(degenerative muscle diseases)으로 이루어진 군에서 선택되는 근육 질환의 개선용 건강기능식품.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020190010337A KR102017282B1 (ko) | 2019-01-28 | 2019-01-28 | 가공인삼추출물을 포함하는 근육 분화 촉진용 조성물 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020190010337A KR102017282B1 (ko) | 2019-01-28 | 2019-01-28 | 가공인삼추출물을 포함하는 근육 분화 촉진용 조성물 |
Related Parent Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020180059749A Division KR101966117B1 (ko) | 2018-05-25 | 2018-05-25 | 가공인삼추출물을 포함하는 근육 분화 촉진용 조성물 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR102017282B1 true KR102017282B1 (ko) | 2019-09-02 |
Family
ID=67951321
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020190010337A KR102017282B1 (ko) | 2019-01-28 | 2019-01-28 | 가공인삼추출물을 포함하는 근육 분화 촉진용 조성물 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| KR (1) | KR102017282B1 (ko) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114796295A (zh) * | 2021-01-18 | 2022-07-29 | 福美来堂股份有限公司 | 包含人参提取物的用于促进肌肉分化及预防肌肉损伤的组合物、食品组合物及药学组合物 |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20070011715A (ko) * | 2005-07-21 | 2007-01-25 | 삼성전자주식회사 | 화상형성장치 및 그의 제어방법 |
| KR20140006214A (ko) * | 2012-06-27 | 2014-01-16 | 주식회사 녹십자에이치에스 | 진세노사이드 알지3 및 알에이치2를 유효성분으로 하는 인삼 또는 홍삼의 가공물을 함유하는 간섬유증 또는 간경화증의 치료 또는 예방용 조성물 |
| KR101595426B1 (ko) | 2013-08-30 | 2016-02-18 | (주)녹십자웰빙 | 진세노사이드 성분이 증가된 가공인삼분말 또는 가공인삼추출물을 함유하는 암 관련 피로의 예방 및 치료용 조성물 |
| KR20170094292A (ko) | 2014-12-08 | 2017-08-17 | 노파르티스 아게 | 근육감소증의 치료를 위한 미오스타틴 또는 액티빈 길항제 |
| KR101771486B1 (ko) | 2015-06-25 | 2017-08-25 | 서울대학교산학협력단 | 특정 다마란 계열의 성분이 증가된 인삼추출물의 제조방법 및 이를 이용한 근육감소증 관련 질환 치료용 조성물 |
-
2019
- 2019-01-28 KR KR1020190010337A patent/KR102017282B1/ko active IP Right Grant
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20070011715A (ko) * | 2005-07-21 | 2007-01-25 | 삼성전자주식회사 | 화상형성장치 및 그의 제어방법 |
| KR20140006214A (ko) * | 2012-06-27 | 2014-01-16 | 주식회사 녹십자에이치에스 | 진세노사이드 알지3 및 알에이치2를 유효성분으로 하는 인삼 또는 홍삼의 가공물을 함유하는 간섬유증 또는 간경화증의 치료 또는 예방용 조성물 |
| KR101595426B1 (ko) | 2013-08-30 | 2016-02-18 | (주)녹십자웰빙 | 진세노사이드 성분이 증가된 가공인삼분말 또는 가공인삼추출물을 함유하는 암 관련 피로의 예방 및 치료용 조성물 |
| KR20170094292A (ko) | 2014-12-08 | 2017-08-17 | 노파르티스 아게 | 근육감소증의 치료를 위한 미오스타틴 또는 액티빈 길항제 |
| KR101771486B1 (ko) | 2015-06-25 | 2017-08-25 | 서울대학교산학협력단 | 특정 다마란 계열의 성분이 증가된 인삼추출물의 제조방법 및 이를 이용한 근육감소증 관련 질환 치료용 조성물 |
Non-Patent Citations (19)
| Title |
|---|
| Blackwell, T.A., et al., Myogenic and atrophic signaling in the progression of cancer-cachexia, International Journal of Exercise Science: Conference Proceedings, 11(4), Article 6, 2016. |
| Bonaldo, P., et al., Cellular and molecular mechanism of muscle atrophy, Disease Models & Mechani는, 6, 25-39, 2013. |
| Chen, C.F., et al., Comparison of the pharmacological effects of Panax ginseng and Panax quinquefolium, Acta. Pharmacol. Sin., 29(9), 1103-1108, 2008. |
| Christensen, L.P., Ginsenosides chemistry, biosynthesis, analysis, and potential health effects, Adv. Food Nutr. Res., 55, 1-99, 2009. |
| Conboy, I.M., et al., Notch-mediated restoration of regenerative potential to aged muscle. Science, 302(5650), 1575-1577, 2003. |
| Groussard, C., et al., Free radical scavenging and antioxidant effects of lactate ion: an in vitro study, Journal of Applied Physiology, 89(1), 169-175. |
| Huh, J.Y., et al., Exercise-induced irisin secretion in independent of age or fitness level and increased irisin may directly modulate muscle metabolism through AMPK activation, The Journal of Clinical Endocrinology and Metabolism, 99(11), E2154-2161, 2014. |
| Huh, J.Y., et al., FNDC5 and irisin in humans: I. Predictors of circulating concentrations in serum and plasma and II. mRNA expression and circulating concentrations in response to weight loss and exercise, Metabolism, 61(12), 1725-1738, 2012. |
| Kim, H.S., et al., Effects of ginsenosides Rg3 and Rh2 on the proliferation of prostate cancer cells, Arch, Pharm. Res., 27(4), 429-435, 2004. |
| Li, F., et al., Ginsenoside Rg1 prevents starvation-induced muscle protein degradation via regulation of AKT/mTOR/FoxO signaling in C2C12 myotubes, Exp. Ther. Med., 14(2), 1241-1247, 2017. |
| Lobina, C., et al., Protective effect of Panax ginseng in cisplatin-induced cachexia in rats, Future Oncol., 10(7), 1203-1214, 2014. |
| Morgan, J.E., et al., Muscle satellite cells. Int. J. Biochem. Cell Biol., 35(8), 1151-1156, 2003. |
| Pedersen, B.K., et al., Muscle as an endocrine organ: focus on muscle-derived interleukin-6, Rhysiol. Rev., 88, 1379-1406, 2008. |
| Ramamoorthy, S., et al., Decresed Jun-D and myogenin expression in muscle wasting of human cachexia, Am. J. Physiol. Enodcrinol. Metab. 297(2), E239-E401, 2009. |
| Smith, R.C., et al., Myostatin inhibitors as therapies for muscle wasting associated with cancer and other disorders, Curr. Opin. Support Palliat. Care, 7, 352-360, 2013. |
| Soo-Yeon Lee 외. Black ginseng activates Akt signaling, thereby enhancing myoblast differentiation and myotube growth. J Ginseng Res. Vol. 42, 2018년 1월, pp. 116-121 * |
| Wagatsuma, A., et al., Vitamin D signlaing in Myogenesis: Potential for Treatment of Sarcopenia, BioMed Research International, 2014, 121254, 2014. |
| Zanou, N., et al., Skeletal muscle hypertrophy and regeneration: interplay between the myogenic regulatory factors(MRFs) and insulin-like growth factors(IGFs) pathways. Cell. Mol. Life Sci., 70(21), 4117-4130, 2013. |
| 류승완, 근감소증과 악액질의 임상적 특성, J. Clin. Nutr., 9(1), 2-6, 2017. |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114796295A (zh) * | 2021-01-18 | 2022-07-29 | 福美来堂股份有限公司 | 包含人参提取物的用于促进肌肉分化及预防肌肉损伤的组合物、食品组合物及药学组合物 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR101966117B1 (ko) | 가공인삼추출물을 포함하는 근육 분화 촉진용 조성물 | |
| KR102206628B1 (ko) | 비만의 예방 또는 치료 효과를 가지는 신규 락토바실러스 람노서스 균주 및 이의 용도 | |
| KR101771486B1 (ko) | 특정 다마란 계열의 성분이 증가된 인삼추출물의 제조방법 및 이를 이용한 근육감소증 관련 질환 치료용 조성물 | |
| KR101292741B1 (ko) | 유파틸린의 신규 용도 | |
| KR102017282B1 (ko) | 가공인삼추출물을 포함하는 근육 분화 촉진용 조성물 | |
| US11096981B2 (en) | Composition for preventing or treating muscle atrophy comprising lycii radicis cortex | |
| KR20140114801A (ko) | 제주조릿대 잎 추출물 또는 그로부터 분리된 파라-쿠마르산을 이용한 비만 및 지방간 개선제 조성물 | |
| KR20200104749A (ko) | 살비아(세이지) 추출물을 함유하는 근육질환의 예방 또는 치료용 조성물 | |
| KR102246349B1 (ko) | 홍경천 추출물을 함유하는 근육질환 예방 또는 치료용 조성물 | |
| KR101237428B1 (ko) | 가공된 홍삼 추출물을 포함하는 폐암 치료용 약학적 조성물 | |
| JP2022110113A (ja) | エンテロコッカス・フェカーリス、その培養液またはその死菌体を有効成分として含有する筋肉の減退、低下及び筋萎縮の予防、改善または治療用の薬学組成物、食品組成物及び食品添加剤 | |
| CN113244222B (zh) | 鼠尾草酚类化合物在制备治疗恶病质疾病的药物中的应用 | |
| KR20210020818A (ko) | 초과 추출물을 함유하는 근육 감소 관련 질병의 예방, 개선, 또는 치료용 조성물 | |
| KR20140039809A (ko) | 소야사포닌 Ａａ를 포함하는 비만 또는 지질 관련 대사성 질환 예방 또는 치료용 조성물 | |
| KR102009219B1 (ko) | 젠티오피크로사이드를 포함하는 비만의 예방 또는 개선용 조성물 | |
| KR20200043562A (ko) | 지노스테마 론기페스 vk1 추출물 또는 이로부터 분리한 화합물을 유효성분으로 포함하는 ampk 관련 질환 예방 또는 치료용 조성물 | |
| KR101448116B1 (ko) | Ｄｄｍｐ군 소야사포닌을 포함하는 비만 또는 지질 관련 대사성 질환 예방 또는 치료용 조성물 | |
| KR102129707B1 (ko) | Emodin 유도체를 주성분으로 하는 대사질환 치료 및 항 비만용 약학조성물 및 이의 제조방법 | |
| US20160151439A1 (en) | Pharmaceutical composition for preventing and treating obesity, containing green-tea see husk extract as active ingredient | |
| KR20220136128A (ko) | 진세노사이드 혼합물을 유효성분으로 포함하는 퇴행성 뇌질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물 | |
| KR102194345B1 (ko) | 참당귀 추출물을 함유하는 근육질환 예방 또는 치료용 조성물 | |
| KR102335928B1 (ko) | 비만의 예방, 치료 또는 개선용 조성물 | |
| CN113244221B (zh) | 双甲基鼠尾草酚在制备治疗恶病质疾病的药物中的应用 | |
| KR101799793B1 (ko) | 신규한 이소나이트라민 화합물 및 이를 포함하는 대사성 질환 예방 또는 치료용 조성물 | |
| KR20200139114A (ko) | 타라곤(Tarragon, Little Dragon, Mugwort, Estragon) 추출물을 함유하는 근육질환 예방 또는 치료용 조성물 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| E701 | Decision to grant or registration of patent right | ||
| GRNT | Written decision to grant |