KR20200104749A - 살비아(세이지) 추출물을 함유하는 근육질환의 예방 또는 치료용 조성물 - Google Patents

살비아(세이지) 추출물을 함유하는 근육질환의 예방 또는 치료용 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 살비아(세이지)(Salvia officinalis) 추출물을 함유하는 근감소증, 근위축증, 근이영양증, 근육퇴화 등을 포함하는 근육질환 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것으로, 보다 구체적으로는 본 발명의 살비아 추출물은 근육 단백질을 생성하는 유전자 발현량을 증가시키고, 근육 단백질을 파괴하는 유전자 발현량을 감소시킬 뿐만 아니라, 항산화 및 항염증 효과를 나타내므로, 본 발명의 살비아 추출물은 부작용이 없는 천연물 유래 근육질환 치료제로 유용하게 사용될 수 있다.

Description

살비아(세이지) 추출물을 함유하는 근육질환의 예방 또는 치료용 조성물{Composition for preventing or treating muscular disease containing Salvia officinalis extract}
본 발명은 살비아(세이지)(Salvia officinalis) 추출물을 함유하는 근감소증, 근위축증, 근이영양증, 근육퇴화 등을 포함하는 근육질환 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.
근육(Muscle)은 인체에서 40% 정도를 담당하며 인체의 기능적 능력을 유지하고 대사성 질환을 예방하기 위해서는 적정 근육량의 확보가 필수적으로 요구된다. 크게 평활근(smooth muscle), 심장근(cardiac muscle), 골격근(skeletal muscle)으로 나누어지고, 골격근은 우리 몸 전체에서 상당한 부분을 차지하면서 골격의 움직임을 촉진한다.
근육질환은 골격근의 약화로 인해 점차 보행 및 이동기능의 장애가 오고 일상생활 동작(activities of daily living, ADL)이 어려워지면서 독립적인 생활이 불가능해지는 경과를 거친다. 더불어 심폐기능 장애를 초래하고 다른 합병증들을 병발하므로 각각의 근육질환의 특성을 정확히 이해하고 접근을 하는 것이 중요하다.
근감소증(sarcopenia)은 골격근의 수축을 유도하는 운동신경이 퇴행하여 골격근의 수축이 진행되지 않거나 골격근 내에서 근육의 수축에 관여하는 단백질의 발현이 감소 혹은 변형되어 정상적인 골격근의 수축이 진행되지 않으며, 장기적으로는 상기 운동신경 또는 골격근이 섬유성 조직으로 변형되는 것으로 알려져 있다. 또한 노화, 호르몬 이상, 영양 부족, 신체 활동 부족, 염증 및 퇴행성 질환 등 다양한 원인에 의해 발생하는 것으로 알려져 있다.
근감소증에는 운동, 단백질 및 칼로리 보충이 도움이 된다고 알려져 있으나, 근감소증 환자의 대부분을 차지하는 노인들에서는 크게 도움이 되지 않아 근감소증 치료제가 절실히 요구되고 있다. 다만, 현재 근감소증에 사용되는 치료제들은 근육감소 개선 및 근육량 증진에 직접적인 효과를 나타내는 약물은 아직까지는 임상시험 수준의 단계이며, 현재 최종적으로 FDA 승인을 받은 약제는 없는 상황이다.
염증성 근육병은 근육과 주변 조직에 염증이 발생하고 상기 염증이 근육조직을 파괴하여 근육이 약화되어 힘이 빠지고 근육통이 발생하며, 장기적으로는 근육량이 줄어 근육 위축이 나타날 수 있는 것으로 알려져 있다. 근육에 염증이 생기기 때문에 근육염이라고 부르기도 하며 크게 다발성 근육염과 피부근육염으로 분류된다. 몸의 면역체계에 이상이 발생하여 발생하는 자가면역성 질환으로 바이러스나 일부 약물(페니실라민, 알파 인터페론, 시메티딘, 페니토인, B형 간염백신 등)에 의해서 발생 될 수 있다고 알려져 있다.
다발성 근육염이나 피부근육염을 치료하기 위한 약물로는 스테로이드가 주로 사용되며, 70 ~ 80%의 환자에서 호전되는 반응을 보인다. 고농도 경구 요법으로 사용되거나 주사제로 사용되며, 근력이 현저하게 호전될 수 있으나 부작용(체중 증가, 골다공증, 당뇨 악화, 속쓰림, 소화불량, 위궤양 악화 등)이 발생하여 이를 줄이기 위해 다른 면역억제제(이뮤란 등)를 병용한다. 또한, 다양한 면역억제제에 대해 치료 효과가 떨어지거나 부작용으로 사용할 수 없을 때는 정맥 면역글로불린이 사용되기도 한다. 한편, 최근 들어 새롭게 개발된 면역억제제 등도 다발성 근육염에 일부 효과가 있음이 알려져 있으나, 부작용이 없는 치료제 개발이 꾸준히 요구되고 있다.
또한, 근위축증(muscular atrophy)은 사지의 근육이 위축되는 질환으로 MuRF-1과 Atrogin-1의 발현이 증가하여 근육의 미오신 헤비체인(Myosin heavy chain)을 분해시킴으로써 근육의 크기가 줄어드는 근육위축증이 발생하게 되는 것으로 알려져 있다.
한편, 관련선행기술로 한국등록특허 1,921,085호는 글루카곤 유사 펩타이드-1(GLP-1), GLP-1 유래 펩타이드, 또는 GLP-1 분해 억제제를 포함하는 근감소증 또는 근위축증 치료용 약학 조성물에 관한 것으로, 체중증가, 골격근 중량 증가, 근육 단백질을 생성하는 유전자의 발현 증가, 근육 단백질을 파괴하는 유전자의 발현 억제, 및 이들의 조합으로 구성된 군으로부터 선택되는 효과를 나타내는 조성물에 대해 개시하고 있다.
또한, 한국등록특허 1,809,156호는 퓨코스테롤을 포함하는 근육질환 예방, 개선 또는 치료용 또는 근 기능 개선용 조성물에 관한 것으로, 퓨코스테롤, 모자반, 모자반 분쇄물, 모자반 추출물, 톳, 톳 분쇄물 또는 톳 추출물은 근단백질 합성에 관여하는 주요 유전자 p-mTOR의 단백질 발현 증가, 근단백질 분해에 관여하는 MuRF-1과 Atrogin-1의 mRNA 발현 억제, 근육 분화에 관여하는 MyoD와 Myogenin의 mRNA 발현을 증가시킴에 따라, 근 기능을 탁월하게 증강하는 효과가 있고 천연물이므로 부작용 없이 안전하게 사용될 수 있음을 개시하고 있다.
그러나 상기 문헌들은 근육 단백질의 생성 및 분해하는 유전자에 대해서만 개시되어 있을 뿐이며 살비아(세이지)(Salvia officinalis) 추출물의 항산화 및 항염증 효과, 근육 단백질을 생성하는 MyoD 및 Myogenin 유전자의 발현량 증가 및 근육 단백질을 파괴하는 Atrogin-1 및 MuRF-1 유전자의 발현량 감소, 근육 단백질을 재생하는 AKT 단백질 및 단백질 합성을 촉진시키는 mTOR 단백질의 발현량 증가 효능에 대해서는 개시되어 있지 않다.
이에 본 발명의 발명자는 근감소 개선효과를 갖는 천연물을 개발하기 위해 노력한 결과, 살비아 추출물이 항산화 및 항염증 효능이 있으며, 근육 단백질을 생성하는 MyoD 및 Myogenin 유전자의 발현량을 증가시키고, 근육 단백질을 파괴하는 Atrogin-1 및 MuRF-1 유전자의 발현량을 감소시키며, 근육 단백질을 재생하는 AKT 단백질과 단백질 합성을 촉진시키는 mTOR 단백질 발현량을 증가시킬 수 있다는 점을 새로이 규명하고, 상기 살비아 추출물을 근육질환 치료에 사용될 수 있음을 밝힘으로써, 본 발명을 완성하였다.
한국등록특허 1,921,085호 한국등록특허 1,809,156호
본 발명은 살비아(세이지)(Salvia officinalis) 추출물을 유효성분으로 함유하는 근육질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물, 및 건강식품을 제공하기 위한 것이다.
본 발명은 살비아(세이지)(Salvia officinalis) 추출물을 유효성분으로 함유하는 근육질환 예방 및 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 살비아 추출물을 유효성분으로 함유하는 근육질환 예방 또는 개선용 건강식품을 제공한다.
본 발명의 살비아(세이지)(Salvia officinalis) 추출물은 항산화 및 항염증 효능뿐만 아니라, 근육 단백질을 생성하는 유전자 발현량의 증가, 근육 단백질을 파괴하는 유전자 발현량의 감소, 근육 단백질을 재생하는 단백질 발현량을 증가시키므로, 다양한 근육질환 치료에 유용하게 사용될 수 있다.
도 1은 용매에 따른 살비아 추출물 제조공정의 모식도이다.
도 2는 살비아 추출물의 세포 독성을 확인한 도이다.
도 3은 살비아 추출물의 ROS 생성량 측정 결과를 나타낸 도이다.
도 4는 살비아 열수 추출물의 IL-1β 생성량 측정 결과를 나타낸 도이다.
도 5는 살비아 열수 추출물의 IL-6 생성량 측정 결과를 나타낸 도이다.
도 6은 C2C12 세포에 대한 살비아 추출물의 세포 독성을 확인한 도이다.
도 7은 살비아 추출물의 MyoD 유전자 발현량 측정 결과를 나타낸 도이다.
도 8은 살비아 추출물의 Atrogin-1 dbwjswk 발현량 측정 결과를 나타낸 도이다.
도 9는 살비아 추출물의 MuRF-1 유전자 발현량 측정 결과를 나타낸 도이다.
도 10은 살비아 에탄올 추출물의 근관넓이 변화를 광학현미경으로 촬영한 사진을 나타낸 도이다.
도 11은 살비아 열수 추출물의 근관넓이 변화를 광학현미경으로 촬영한 사진을 나타낸 도이다.
도 12는 살비아 추출물의 근관넓이 변화 측정 결과를 나타낸 도이다.
도 13은 C2C12 세포에 살비아 열수 추출물을 처리한 후, AKT 단백질 발현량을 확인한 도이다.
도 14는 C2C12 세포에 살비아 열수 추출물을 처러힌 후, AKT 단백질 발현량 측정 결과를 나타낸 도이다.
이하, 본 발명을 보다 상세히 설명한다.
본 발명은 살비아(세이지)(Salvia officinalis) 추출물을 유효성분으로 함유하는 근육질환 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
상기 살비아 추출물은 하기의 단계들을 포함하는 제조 방법에 의해 제조되는 것이 바람직하나, 이에 한정되지 않는다;
1) 살비아의 추출용매를 가하여 추출하는 단계;
2) 단계 1)의 추출물을 여과하는 단계; 및
3) 단계 2)의 여과한 추출물을 감압농축한 후 건조하는 단계.
상기 방법에 있어서, 단계 1)의 상기 추출용매는 물, C1 내지 C2의 저급알코올 또는 이들의 혼합물을 용매로 하여 추출한 것을 특징으로 하는 것이 바람직하나, 이에 한정되지 않는다.
상기 방법에 있어서, 단계 1)의 저급알코올은 에탄올 또는 메탄올인 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다.
상기 방법에 있어서, 단계 3)의 감압농축은 진공감압농축기 또는 진공회전증발기를 이용하는 것이 바람직하나, 이에 한정하지 않는다. 또한, 건조는 감압건조, 진공건조, 비등건조, 분무 건조 또는 동결건조하는 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다.
상기 살비아 추출물은 항산화 및 항염증 효능이 있으며, 근육 단백질을 생성하는 유전자 발현량의 증가, 근육 단백질을 파괴하는 유전자 발현량의 감소, 근육 단백질을 재생하는 단백질 발현량을 증가시키는 효과를 통해 근육질환 예방 또는 치료 효과를 갖는 것이 바람직하나 이로 한정되지 않는다.
상기 근육질환은 근감소증(sarcopenia), 근위축증(muscular atrophy), 근무력증(myasthenia), 근이영양증(muscular dystrophy), 근육긴장증(myotonia), 근긴장 저하(hypotonia), 근력 약화(muscular weakness), 근육퇴행위축(muscular dystrophy), 근위축성 측삭경화증(amyotrophic lateral sclerosis) 및 염증성 근육병(inflammatory myopathy)으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 질환인 것이 바람직하다.
본 발명의 구체적인 실시예에서, 본 발명자들은 살비아 열수 또는 에탄올 추출물을 제조하였다(도 1 참조).
또한, 살비아 추출물의 세포 독성을 확인하기 위해, 상기 추출물을 RAW 264.7 세포에 처리하여 450 ㎚ 에서 흡광도를 측정한 결과, 살비아 추출물은 세포 독성이 나타나지 않음을 확인하였다(도 2, 표 5 및 표 6 참조).
또한, 살비아 추출물의 항산화 효과를 확인하기 위해, 상기 추출물을 RAW 264.7 세포에 처리하여 유세포 분석기로 형광강도의 세기에 따른 변화를 측정한 결과, 살비아 추출물은 ROS(Reactive oxygen species) 생성량을 감소시키므로, 항산화 효과가 있음을 확인하였다(도 3, 표 7 참조).
또한, 살비아 추출물의 항염증 효과를 확인하기 위해, 상기 추출물을 RAW 264.7 세포에 처리하여 Luminex로 측정한 결과, 살비아 추출물은 IL-1β 및 IL-6 생성량을 감소시키므로, 항염증 효과가 있음을 확인하였다(도 4, 도 5, 도 6, 표 8, 표 9 및 표 10 참조).
또한, 살비아 추출물의 근육질환 치료 효과를 확인하기 위해, 상기 추출물을 C2C12 세포에 처리하여 450 ㎚ 에서 흡광도를 측정한 결과, 살비아 추출물은 근육세포에 독성이 나타나지 않음을 확인하였다(도7, 표 11 및 표 12 참조).
또한, 살비아 추출물의 근육질환 치료 효과를 확인하기 위해, 상기 추출물을 C2C12 세포에 처리하여 근육 단백질 합성 또는 분해에 관여하는 유전자 발현 효과를 확인한 결과, 살비아 추출물은 근육 합성에 관여하는 MyoD 유전자 발현을 증가시키고, 근육 분해에 관여하는 Atrogin-1 유전자 및 MuRF-1 유전자 발현을 감소시키므로, 근육질환 치료 효과가 있음을 확인하였다(도 8, 도 9, 도 10, 도 11, 표 14, 표 15, 표 16 및 표 17 참조).
또한, 살비아 추출물의 근육질환 치료 효과를 확인하기 위해, 상기 추출물을 C2C12 세포에 처리하여 근관 넓이를 측정한 결과, 살비아 추출물은 근관 넓이를 증가시키므로, 근육질환 치료 효과가 있음을 확인하였다(도 12, 도 13, 도 14 및 표 18 참조).
또한, 살비아 추출물의 근육질환 치료 효과를 확인하기 위해, 상기 추출물을 C2C12 세포에 처리하여 근육 단백질 합성에 관여하는 단백질 발현 효과를 확인한 결과, 살비아 추출물은 단백질 합성에 관여하는 AKT 단백질의 발현을 증가시키므로, 근육질환 치료 효과가 있음을 확인하였다(도 15, 도 16, 도 17, 도 18, 표 19 및 표 20 참조).
따라서, 본 발명의 살비아 추출물은 항산화 또는 항염증 효과를 나타내고, 근육 단백질 합성에 관여하는 유전자 발현 증가 및 분해에 관여하는 유전자 발현 감소 효과를 나타내며, 근관 넓이를 증가시키고, 근육 단백질 합성에 관여하는 단백질 발현 증가 효과를 나타냄으로써, 상기 살비아 추출물은 근육질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물에 유용하게 사용될 수 있다.
본 발명의 살비아 추출물을 함유하는 조성물은 상기 성분에 추가로 동일 또는 유사한 기능을 나타내는 유효성분을 1종 이상 함유할 수 있다.
본 발명의 조성물은 약제학적으로 허용 가능한 첨가제를 더 포함할 수 있으며, 이때 약제학적으로 허용 가능한 첨가제로는 전분, 젤라틴화 전분, 미결정셀룰로오스, 유당, 포비돈, 콜로이달실리콘디옥사이드, 인산수소칼슘, 락토스, 만니톨, 엿, 아라비아고무, 전호화전분, 옥수수전분, 분말셀룰로오스, 히드록시프로필셀룰로오스, 오파드라이, 전분글리콜산나트륨, 카르나우바 납, 합성규산알루미늄, 스테아린산, 스테아린산마그네슘, 스테아린산알루미늄, 스테아린산칼슘, 백당, 덱스트로스, 소르비톨 및 탈크 등이 사용될 수 있다. 본 발명에 따른 약제학적으로 허용 가능한 첨가제는 상기 조성물에 대해 0.1 ~ 90 중량부 포함되는 것이 바람직하나 이에 한정되는 것은 아니다.
즉, 본 발명의 조성물은 실제 임상 투여 시에 경구 및 비경구의 여러 가지 제형으로 투여될 수 있는데, 제제화 할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제될 수 있다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형 제제는 살비아 추출물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트(Calcium carbonate), 수크로스(Sucrose), 락토오스(Lactose) 또는 젤라틴 등을 섞어 조제될 수 있다. 또한, 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스티레이트 탈크 같은 윤활제들도 사용될 수 있다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제 및 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제, 좌제가 포함될 수 있다. 비수성용제, 현탁용제로는 프로필렌글리콜(Propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명의 조성물은 목적하는 방법에 따라 경구 투여하거나 비경구 투여할 수 있으며, 비경구 투여시 피부 외용 또는 복강내주사, 직장내주사, 피하주사, 정맥주사, 근육내 주사 또는 흉부내 주사 주입방식을 선택하는 것이 바람직하다. 투여량은 환자의 체중, 연령, 성별, 건강상태, 식이, 투여시간, 투여방법, 배설률 및 질환의 중증도 등에 따라 그 범위가 다양하다.
본 발명에 따른 조성물은 약제학적으로 유효한 양으로 투여한다. 본 발명에 있어서, "약제학적으로 유효한 양"은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분한 양을 의미하며, 유효용량 수준은 환자의 질환의 종류, 중증도, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료기간, 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. 본 발명의 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고 종래의 치료제와는 순차적 또는 동시에 투여될 수 있으며, 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기한 요소들을 모두 고려하여 부작용없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 이는 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.
구체적으로, 본 발명에 따른 조성물의 유효량은 환자의 나이, 성별, 체중에 따라 달라질 수 있으며, 일반적으로는 체중 1 kg 당 0.1 mg 내지 100 mg, 바람직하게는 0.5 mg 내지 10 mg을 매일 또는 격일 투여하거나 1 일 1 내지 3 회로 나누어 투여할 수 있다. 그러나 투여 경로, 비만의 중증도, 성별, 체중, 연령 등에 따라서 증감될 수 있으므로 상기 투여량이 어떠한 방법으로도 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.
또한, 본 발명의 살비아 추출물을 유효성분으로 함유하는 근육질환 예방 또는 개선용 건강식품을 제공한다.
상기 살비아 추출물은 근육질환 예방 또는 개선 활성을 가지는 것이 바람직하나 한정하지 않는다.
본 발명의 살비아 추출물은 유의적으로 근육질환 예방 또는 치료 효과를 나타내므로, 상기 살비아 추출물은 근육질환 예방 또는 개선용 건강식품 조성물로 유용하게 사용될 수 있다.
상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 물질을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 과자류, 빵류, 면류 등과 같은 각종 식품류, 물, 청량음료, 과실음료 등의 드링크류, 껌, 차, 비타민 복합제, 조미료류, 건강기능 식품류 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강기능식품을 모두 포함한다.
본 발명의 살비아 추출물은 식품에 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효 성분의 혼합량은 그의 사용 목적(예방 또는 개선용)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 건강식품 중의 상기 화합물의 양은 전체 식품 중량의 0.01 내지 15 중량%, 바람직하게는 0.1 내지 5 중량%로 가할 수 있으며 건강음료 조성물에는 100 을 기준으로 0.01 내지 5.0 g, 바람직하게는 0.01 내지 1.0 g의 비율로 첨가할 수 있다. 그러나 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며, 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 유효성분은 상기 범위 이상의 양으로도 사용될 수 있다.
본 발명의 건강 기능성 음료 조성물은 지시된 비율로 필수 성분으로서 상기 화합물을 함유하는 외에는 다른 성분에는 특별한 제한이 없으며 통상의 음료와 같이 여러가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어, 말토스, 수크로즈 등 및 폴리사카라이드, 예를 들어, 덱스트린, 사이클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리스리톨 등의 당알코올이다. 상술한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제(타우마킨, 스테비아 추출물 등), 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탄 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 당 일반적으로 약 0.1 내지 2.0 g, 바람직하게는 약 0.1 내지 1.0 g이다.
본 발명의 건강기능식품은 식품의 제조공정 중에 상술한 본 발명의 추출물을 첨가하는 공정을 가함으로써 또는 식품의 제조 후에 상술한 본 발명의 추출물을 첨가하는 공정을 가함으로써 용이하게 얻을 수 있다. 이때 필요에 따라 맛과 냄새 교정제를 첨가하여도 좋다.
상기 외에 본 발명의 살비아 추출물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 중점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그밖에 본 발명의 살비아 추출물은 천연 과일 주스 및 과일 주스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 그렇게 중요하진 않지만 본 발명의 살비아 추출물 100 중량부 당 약 20 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.
이하, 본 발명을 실시예 및 실험예에 의해서 상세히 설명한다.
단, 하기 실시예 및 실험예는 본 발명을 구체적으로 예시하는 것이며, 본 발명의 내용이 실시예 및 실험예에 의해 한정되는 것은 아니다.
<실시예 1> 살비아 추출물의 제조
<1-1> 살비아 에탄올 추출물의 제조
살비아(세이지)(Salvia officinalis) 시료의 16배 양의 70% 에탄올을 사용하여 45 내지 75℃에서 8 내지 14시간 추출하였고, 감압여과하여(Whatman filter paper #2) 농축하였으며 이 후 -20℃에서 보관하였다. 또한, 추출온도 및 추출시간에 따른 추출수율은 하기 [표 1] 및 [표 2]에 나타내었다.
한편, 하기 실험예는 살비아를 70% 에탄올을 사용하여 75℃에서 12시간 추출한 살비아 에탄올 추출물을 이용하여 실험을 수행한 것이다.
Samples 수율(％)
8 hr 10 hr 12 hr 14 hr
살비아 에탄올 추출물 14.2 17.3 20.8 20.9
Samples 수율(％)
45℃ 55℃ 65℃ 75℃
살비아 에탄올 추출물 10.1 12.7 16.5 20.8
<1-2> 살비아 열수 추출물의 제조
살비아 시료의 16배 양의 증류수를 사용하여 65 내지 95℃에서 8 내지 14시간 추출하였고, 상온으로 냉각한 후, 여과 및 농축하여 살비아 열수 추출물을 제조하였다.
또한, 추출온도 및 추출시간에 따른 추출수율은 하기 [표 3] 및 [표 4]에 나타내었다.
한편, 하기 실험예는 살비아를 증류수를 사용하여 95℃에서 12시간 추출한 살비아 열수 추출물을 이용하여 실험을 수행하였다.
Samples 수율(％)
8 hr 10 hr 12 hr 14 hr
살비아 열수 추출물 14.2 17.3 20.8 20.9
Samples 수율(％)
65 75 85 95
살비아 열수 추출물 21.3 25.4 27.8 30.1
<실험예 1> 세포 독성 확인
<1-1> RAW 264.7 세포 계대배양
동결된 RAW 264.7 세포를 50 ㎖ 튜브에 옮기고 PBS 9 ㎖을 넣어 세포를 부유시킨 뒤 1,200 rpm에서 5 분간 원심분리 하여 상층액을 제거하였다. 세포는 10 ％ FBS(fetal bovine serum)와 1 ％ penicillin/streptomycin으로 조성된 DMEM(Dulbecco's modified Eagle's medium) 배지 1 ㎖을 넣어 부유시켜 세포 배양기(37℃, 5％ CO2)에서 배양하였다. 계대배양 횟수는 5 회 이상으로 하였고, 시료들을 처리하기 전에 24 시간을 적응시켰다.
<1-2> 세포 독성 측정
살비아 추출물의 세포 독성을 측정하기 위해 상기 실험예 <1-1>에서 배양한 RAW 264.7 세포를 이용하였다. RAW 264.7 세포를 96 well plate에 1.5×105 cells/well로 분주하여 세포 배양기(37℃, 5％ CO2)에서 24 시간 동안 배양하였다. 배양 후 새로운 배양액으로 교체하고 살비아 추출물을 25, 50 및 100 ㎍/㎖의 농도로 처리한 후, 다시 24시간 동안 세포 배양기에서 배양하였다. 배양 후 10 ㎕의 WST solution을 첨가하여 세포 배양기(37℃, 5％ CO2)에서 30분간 반응시켰다. 반응 후 450 ㎚에서 흡광도를 측정하여 살비아 추출물 처리를 하지 않은 대조군에 대한 세포 생존율을 백분율로 표시하였다.
그 결과, [도 2], [표 5] 및 [표 6]에 나타낸 바와 같이, RAW 264.7 세포를 통해 세포 독성을 측정한 결과는 대조군을 100.0±1.0 ％로 나타냈을 때, 살비아 추출물 모든 처리 농도에서 대조군 대비 95 ％ 이상의 생존율이 나타나 안전한 것을 확인하였다(도 2).
Unit : ％
Sample Name Control 25 ㎍/㎖ 50 ㎍/㎖ 100 ㎍/㎖
살비아 에탄올 추출물 100.0±1.0 132.2±4.2 129.3±1.8 95.6±5.5
Unit : ％
Sample Name Control 25 ㎍/㎖ 50 ㎍/㎖ 100 ㎍/㎖
살비아 열수 추출물 100.0±1.0 118.6±3.9 106.3±2.7 100.1±1.3
하기 실험은 세포 독성이 확인되지 않은 농도 중 50 ㎍/㎖ 농도로 진행하였다.
<실험예 2> 항산화 효과 확인
살비아 추출물의 항산화 효과를 확인하기 위해서 상기 실험예 <1-1>에서 제조한 RAW 264.7 세포를 이용하여 ROS(Reactive oxygen species) 생성량을 측정하였다.
RAW 264.7 세포를 12 well plate에 2×105 cells/well로 분주하여 세포 배양기(37℃, 5％ CO2)에서 24 시간 동안 배양하였다. 배양 후 새로운 배양액으로 교체하였으며, 살비아 추출물 50 ㎍/㎖의 농도에 LPS를 1 ㎍/㎖의 농도로 처리한 후, 다시 24 시간 동안 세포 배양기에서 배양하였다. 배양 후 4℃, 1,200 rpm에서 5 분간 원심분리하여 모은 세포를 PBS로 2 회 세척하고 DCFH-DA(2',7'-dichlorodihydrofluorescein diacetate)를 20 μM이 되도록 첨가하여 15 분 동안 세포 배양기에서 염색시켰다. 염색 후 다시 4℃, 1,200 rpm에서 5 분간 원심분리 한 다음 상청액을 제거하고 다시 PBS 400 ㎕를 부유시켜 유세포 분석기를 이용하여 형광강도의 세기에 따른 변화를 측정하여 LPS만을 처리한 대조군에 대한 ROS 생성량을 백분율로 나타내었다.
그 결과, [도 3] 및 [표 7]에 나타낸 바와 같이, LPS만을 처리한 대조군의 ROS 생성량을 100.0±1.0 ％로 나타냈을 때, 살비아 추출물은 ROS 생성을 유의적으로 감소시키는 것을 확인하였다(도 3).
Unit : pg/㎖
Sample
Name		 Nor Con 50 ㎍/㎖ Sample
Name		 Nor Con 50 ㎍/㎖
살비아
에탄올
추출물		 25.9±4.3 100.0±1.0 61.8±4.3 살비아
열수
추출물		 19.0±4.4 100.0±1.0 77.2±3.5
<실험예 3> 항염증 효과 확인
살비아 추출물의 항염증 효과를 확인하기 위해서 상기 실험예 <1-1>에서 제조한 RAW 264.7 세포를 이용하여 Cytokine 생성량을 측정하였다.
RAW 264.7 세포를 12 well plate에 2×105 cells/well로 분주하여 세포 배양기(37℃, 5％ CO2)에서 24 시간 동안 배양하였다. 배양 후 새로운 배양액으로 교체하고 살비아 추출물 50 ㎍/㎖의 농도에 LPS를 1 ㎍/㎖의 농도로 처리한 후, 다시 24 시간 동안 세포 배양기에서 배양하였다. 배양 후 1,200 rpm에서 5 분간 원심분리하여 상층액을 획득하여 Milliplex map mouse cytokine/chemokine magnetic bead panel-immunology multiplex assay kit의 구성된 물품을 이용하여 다음과 같이 측정하였다. 96 well plate에 상층액 25 ㎕씩 분주하고 assay buffer 및 matrix buffer, antibody-immobilized beads를 각 25 ㎕씩 가하여 혼합한 후 2 시간 동안 실온에서 반응시키고 washing 완충 용액을 이용하여 2 회 세척하였다. 세척 후 25 ㎕의 detection antibody을 가하여 1 시간 동안 실온에서 암소 반응시키고 추가로 25 ㎕의 Streptavidin-Phycoerythrin을 가하여 30 분 동안 실온에서 반응시킨 후 washing 완충 용액을 이용하여 2 회 세척하였다. 세척 후 PBS를 150 ㎕ 넣고 5 분간 shaking한 후 Luminex를 이용하여 측정하였다.
그 결과, [도 4] 및 [표 8]에 나타낸 바와 같이, LPS만을 처리한 대조군의 IL-1β 생성량이 109.8±11.0 pg/㎖로 나타났을 때, 본 발명의 살비아 열수 추출물은 상기 IL-1β 생성을 유의적으로 감소시키는 것을 확인하였다(도 4).
Unit : pg/㎖
Sample Name Nor Con 50 ㎍/㎖
살비아 열수 추출물 38.7±3.9 109.8±11.0 89.2±5.1
또한, [도 5] 및 [표 9]에 나타낸 바와 같이, LPS만을 처리한 대조군의 IL-6 생성량이 145561.7±18836.0 pg/㎖로 나타났을 때, 본 발명의 살비아 열수 추출물은 IL-6 생성을 현저히 감소시키는 것을 확인하였다(도 5).
Unit : pg/㎖
Sample Name Nor Con 50 ㎍/㎖
살비아 열수 추출물 118.3±12.7 145561.7±18836.0 115342.2±130779.5
따라서 본 발명의 살비아 추출물은 염증성 Cytokine인 IL-1β 및 IL-6 생성을 감소시키므로, 유의적인 항염증 효과를 나타냄을 확인하였다.
<실험예 4> 살비아 추출물의 근육질환 치료 효과 확인
<4-1> 시약
시약은 Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM; Gibco BRL, U.S.A.), fetal bovine serum (FBS; Gibco BRL, U.S.A.), trypsin-EDTA (Thermofisher, U.S.A.), trypan blue (Sigma Co., U.S.A), EZ-Cytox (Daeilab, Korea), dulbecco's phosphate buffered saline (Welgene, Korea), RIPA buffer (Thermo Co., U.S.A.), sample loading buffer (BIO-RAD Co., Japan), 30 ％ Acrylamide/Bis Solution 29:1(3.3％C) (BIO-RAD Co., Japan), Skim Milk (BD Co., France), Pierce BCA Proein Assay Kit (Thermo Co., U.S.A.), TEMED (BIO-RAD Co., Japan), phosphorylation-AKT (p-AKT), AKT, phosphorylation-mTOR (p-mTOR), mTOR antibody (Danvers., U.S.A), Protease inhibitor cocktail, phosphatase inhibitor cocktail (Sigma Co., U.S.A), Total RNA prep kit (Intronbio, Korea), AccuPower CycleScript RT PreMix (Bioneer, Korea), SYBR Green (Qiagen, Germany) 등을 사용하였다.
<4-2> 기기
기기는 centrifuge (Sigma Co., U.S.A.), deep-freezer (Sanyo Co., Japan), vortex mixer (Vision scientific Co., Korea), plate shaker (Lab-Line Co., U.S.A.), ELISA reader (Molecular Devices Co., U.S.A.), optical microscope (Carl ZEISS Co., Germany), Light Microscope (Carl Zeiss, Co., Germany), Mini-Protean tetra Cell (BIO-RAD Co., Japan), Nanodrop (Thermo fisher, U.S.A.), Alpha Cycler 1 PCRmax (PCRmax, U.K.) real time PCR (Qiagen, Germany) 등을 사용하였다.
<4-3> C2C12 세포 계대배양
C2C12 세포를 American Type Culture Collection (ATCC, U.S.A.)에서 구매하였으며, 10 ％ FBS가 첨가된 DMEM 배지를 사용하여 세포 배양기(37℃, 5％ CO2)에서 배양하였다.
<4-4> 세포 독성 측정
살비아 추출물의 근육세포에 대한 세포 독성을 측정하기 위해서 상기 실험예 <4-3>에서 배양한 C2C12 세포를 이용하였다. C2C12 세포를 96 well plate에 1×104 cells/well 씩 분주하여 24시간 동안 배양하였다. 새로운 배양액으로 교체하고 살비아 추출물을 25, 50 및 100 ㎍/㎖의 농도로 처리하여 다시 48 시간 동안 배양하였다. 배양 후 10 ㎕의 EZ-Cytox 용액을 첨가하여 세포 배양기에서 30 분간 반응시켰다. 반응 후 450 ㎚에서 흡광도의 변화를 측정하여 살비아 추출물 처리를 하지 않은 대조군에 대한 세포 생존율을 백분율로 표시하였다.
그 결과, [도 6], [표 10] 및 [표 11]에 나타낸 바와 같이, C2C12 cell을 통해 세포 독성을 측정한 결과는 대조군을 100.00±2.25 ％로 나타냈을 때, 살비아 추출물 모든 처리 농도에서 대조군 대비 90 ％ 이상의 생존율이 나타나 안전한 것을 확인하였다(도 6).
Unit : ％
Sample Name Control 25 ㎍/㎖ 50 ㎍/㎖ 100 ㎍/㎖
살비아 에탄올 추출물 100.0±1.0 128.17±15.01 149.89±18.94 173.58±32.53
Unit : ％
Sample Name Control 25 ㎍/㎖ 50 ㎍/㎖ 100 ㎍/㎖
살비아 열수 추출물 100.0±1.0 116.78±4.91 132.63±6.49 175.76±10.49
하기 실험은 세포 독성이 확인되지 않은 농도 중 50 ㎍/㎖ 농도를 선택하여 진행하였다.
<4-5> 근육 단백질 합성 또는 분해에 관여하는 유전자 발현 효과 확인
살비아 추출물의 근육 단백질 합성 또는 분해에 관여하는 유전자 발현 효과를 확인하기 위해 상기 실험예 <4-3>에서 제조한 C2C12 세포를 이용하였다.
C2C12 세포를 6 well plate에 6×105 cells/well씩 분주하여 24 시간 동안 배양하였다. 24 시간 후에 세포 분화를 시키기 위해 분화배지로 교체하였고, 6 일 동안 이틀에 한 번씩 배지 교환해줬다. 6 일 후 50 ㎍/㎖ + TNF-α를 처리하여 다시 48 시간 동안 반응하였다. Cell lysis buffer를 1 ㎖씩 넣어 혼합 후 chloroform을 200 ㎕씩 첨가하여 다시 혼합하였다. 이를 13,000 rpm에서 10분간 원심분리 후 400 ㎕의 상층액을 회수하여 binding buffer를 400 ㎕씩 넣어 혼합하여 column에 주입하고 원심분리 하였다. column에 washing buffer A를 700 ㎕씩 넣어 원심분리 하고 washing buffer B를 700 ㎕씩 넣어 원심분리 후 elution buffer 50 ㎕을 넣고 원심분리 하여 RNA를 추출하였다.
역전사 (reverse transcription) 반응은 RT premix (reverse transcriptase, reaction buffer, dNTPs, dT20 primer, stabilizer)에 total RNA를 1 ㎍ 첨가하고 DEPC(diethyl pyrocarbonate)처리된 증류수를 최종 부피가 20 ㎕가 되도록 하여 첨가하였다. 이 혼합액을 섞은 후 2,000 rpm에서 5 초간 원심 침강하고 45℃ heating block에서 60 분 동안 반응시켜 first-strand cDNA를 합성하였다. 이를 다시 95℃에서 5 분 동안 반응시켜 M-MLV RT를 불활성화시킨 후 합성이 완료된 cDNA를 PCR에 사용하였다.
합성이 완료된 cDNA를 증폭시키기 위하여 real-time PCR을 진행하였으며, real-time 전용 tube에 cDNA 1 ㎕, 각 primer 2 ㎕, SYBR Green 10 ㎕, DEPC-DW 5 ㎕씩 넣어 다음과 같이 진행하였다. 94℃에서 5 분 동안 반응한 다음 94℃에서 15 초, 각 primer의 annealing 온도에서 30 초, 72℃에서 30 초를 진행하였고 94℃에서 1 분 동안 반응시킨 후 55℃에서 1 분 동안 반응시켰다. 마지막으로 primer의 annealing에서 94℃까지 0.5℃씩 상승시켜 94℃에 이를 때까지의 형광 접합 물질인 SYBR Green이 발생하는 마지막 과정을 수행하였다. 사용된 primer의 sequence와 annealing 온도는 [표 12]과 같다.
<실시간 PCR의 프라이머 서열>
Primer Forward(F) /
Reverse(R)		 Sequences 서열번호 Size
(bp)		 Annealing Temp. (℃)
MyoD F ATGATGACCCGTGTTTCGACT 1 119 65
R CACCGCAGTAGGGAAGTGT 2
Myogenin F GCAGGCTCAAGAAAGTGAATGA 3 122 65
R TAGGCGCTCAATGTACTGGAT 4
Atrogin-1 F TCAAAGGCCTCACGCGATCACC 5 215 65
R CCTCAATGACGTATCCCCCG 6
MuRF-1 F GAGGGGCTACCTTCCTCTCA 7 210 65
R TTTACCCTCTGTGGTCACGC 8
GAPDH F TGCTGCATACGAGCATCCAT 9 167 59
R TGTCCTCAAAGTGAACCGCA 10
그 결과, [도 7] 및 [표 13]에 나타낸 바와 같이, TNF-α만 처리한 대조군의 MyoD 유전자 발현량을 1.00±0.00%로 나타냈을 때, 본 발명의 살비아 추출물은 MyoD 유전자 발현을 현저히 증가시키는 것을 확인하였다(도 7).
Unit : ％
Sample
Name		 Nor Con 50 ㎍/㎖ Sample
Name		 Nor Con 50 ㎍/㎖
살비아
에탄올
추출물		 3.10±0.59 1.00±0.00 3.50±0.14 살비아
열수
추출물		 3.20±0.49 1.00±0.00 2.70±0.23
또한, [도 8] 및 [표 14]에 나타낸 바와 같이, TNF-α만 처리한 대조군의 Atrogin-1 유전자 발현량을 1.00±0.00 ％로 나타냈을 때, 본 발명의 살비아 추출물은 Atrogin-1 유전자 발현을 현저히 감소시키는 것을 확인하였다(도 8).
Unit : ％
Sample Name Nor Con 50 ㎍/㎖
살비아 에탄올 추출물 0.80±0.03 1.00±0.00 0.50±0.12
또한, [도 9] 및 [표 15]에 나타낸 바와 같이, TNF-α만 처리한 대조군의 MuRF-1 유전자 발현량을 1.00±0.00 ％로 나타냈을 때, 본 발명의 살비아 추출물은 MuRF-1 유전자 발현을 현저히 감소시키는 것을 확인하였다(도 9).
Unit : ％
Sample
Name		 Nor Con 50 ㎍/㎖ Sample
Name		 Nor Con 50 ㎍/㎖
살비아
에탄올
추출물		 0.40±0.12 1.00±0.00 0.00±0.00 살비아
열수
추출물		 0.60±0.07 1.00±0.00 0.30±0.12
따라서 본 발명의 살비아 추출물은 근육 합성에 관여하는 MyoD 유전자 유전자 발현을 증가시키고 근육 분해에 관여하는 Atrogin-1 유전자 및 MuRF-1 유전자 발현을 감소시키므로, 살비아 추출물을 근감소증 치료에 사용할 수 있음을 확인하였다.
<4-6> 근관 넓이 측정
살비아 추출물의 근관 넓이 증가 효과를 확인하기 위해 상기 실험예 <4-3>에서 제조한 C2C12 세포를 이용하였다.
C2C12 세포를 6 well plate에 6×105 cells/well씩 분주하여 24 시간 동안 배양하였다. 24 시간 후에 세포 분화를 시키기 위해 분화 배지로 교체하였고, 6 일 동안 이틀에 한 번씩 배지 교환해줬다. 6 일 후 50 ㎍/㎖ + TNF-α를 처리하여 다시 48 시간 동안 반응하였다. 48 시간 반응 후에 디지털카메라가 장착된 광학현미경으로 세포 근관넓이를 확인하였다.
그 결과, [도 10], [도 11], [도 12] 및 [표 16]에 나타낸 바와 같이 TNF-α만 처리한 대조군의 경우, 근관 넓이가 13.8±1.38 cm였으며, 살비아 열수 추출물 처리군에서는 28.00±4.84 cm인 것으로 나타나 넓이가 증가하는 것을 확인하였다(도 10, 도 11 및 도 12).
Unit : ㎝
Sample Name Nor Con 50 ㎍/㎖
살비아 열수 추출물 31.2±2.06 13.8±1.38 28.00±4.84
<4-7> 근육 단백질 합성에 관여하여 단백질 발현 확인
살비아 추출물의 근육 단백질 합성에 관여하는 단백질 발현 효과를 확인하기 위해 상기 실험예 <4-3>에서 제조한 C2C12 세포를 이용하였다.
C2C12 세포를 6 well plate에 6×105 cells/well씩 분주하여 24 시간 동안 배양하였다. 24 시간 후에 세포분화를 시키기 위해 분화배지로 교체하였고, 6 일 동안 이틀에 한 번씩 배지를 교환해줬다. 6 일 후 살비아 추출물 50 ㎍/㎖ + TNF-α 20 ng/㎖ 를 처리하여 다시 48 시간 동안 반응시켰다. 반응이 끝난 후 RIPA buffer와 100X PI ⅠⅡⅢ를 넣어서 Lysis를 진행하여 단백질 추출을 진행하였다. 10 ％ gel에 SDS-PAGE 진행 후 PVDF membrane에 transfer를 진행하였고, 그 후 First antibody 1:500, 4℃ overnight 시켰다. 상온에서 secondary antibody 1:10000, chemiluminescence (ECL) detection reagent로 항원항체 반응을 확인하였다.
그 결과, [도 13], [도 14] 및 [표 17]에 나타낸 바와 같이, TNF-α만 처리한 대조군의 AKT 단백질 발현량을 0.90±0.05 ％로 나타냈을 때, 살비아 열수 추출물은 AKT 단백질 발현을 대조군 대비 2배 이상 증가시키는 것을 확인하였다(도 13 도 14).
Unit : ％
Sample Name Nor Con 50 ㎍/㎖
살비아 열수 추출물 1.64±0.13 0.90±0.05 2.87±0.20
따라서 본 발명의 살비아 추출물은 근육 단백질 합성에 관여하는 AKT 단백질의 발현을 증가시키므로, 근감소증 치료에 사용될 수 있음을 확인하였다.

Claims (10)

  1. 살비아(세이지)(Salvia officinalis) 추출물을 유효성분으로 함유하는 근육질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  2. 제1항에 있어서, 상기 추출물은 물, C1 내지 C2 저급알코올 또는 이들의 혼합물을 용매로 추출되는 것을 특징으로 하는 근육질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  3. 제2항에 있어서, 상기 저급알코올은 에탄올 또는 메탄올인 것을 특징으로 하는 근육질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  4. 제1항에 있어서, 상기 근육질환은 근감소증(sarcopenia), 근위축증(muscular atrophy), 근무력증(myasthenia), 근이영양증(muscular dystrophy), 근육긴장증(myotonia), 근긴장 저하(hypotonia), 근력 약화(muscular weakness), 근육퇴행위축(muscular dystrophy), 근위축성 측삭경화증(amyotrophic lateral sclerosis) 및 염증성 근육병(inflammatory myopathy)으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 질환인 것을 특징으로 하는 근육질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  5. 제1항에 있어서, 상기 조성물은 항산화 또는 항염증 효과를 나타내는 것을 특징으로 하는 근육질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  6. 제1항에 있어서, 상기 조성물은 MyoD의 발현을 증가시키는 것을 특징으로 하는 근육질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  7. 제1항에 있어서, 상기 조성물은 Atrogin-1 또는 MuRF-1의 발현을 감소시키는 것을 특징으로 하는 근육질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  8. 제1항에 있어서, 상기 조성물은 근육 단백질 합성에 관여하는 AKT 단백질의 발현을 증가시키는 것을 특징으로 하는 근육질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  9. 살비아(세이지)(Salvia officinalis) 추출물을 유효성분으로 함유하는 근육질환 예방 또는 개선용 건강식품.
  10. 제9항에 있어서, 상기 근육질환은 근감소증(sarcopenia), 근위축증(muscular atrophy), 근무력증(myasthenia), 근이영양증(muscular dystrophy), 근육긴장증(myotonia), 근긴장 저하(hypotonia), 근력 약화(muscular weakness), 근육퇴행위축(muscular dystrophy), 근위축성 측삭경화증(amyotrophic lateral sclerosis) 및 염증성 근육병(inflammatory myopathy)으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 질환인 것을 특징으로 하는 근육질환 예방 또는 개선용 건강식품.
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KR101921085B1 (ko) 2018-05-21 2018-11-22 이뮤노포지 주식회사 글루카곤 유사 펩타이드-1(glp-1), glp-1 유래 펩타이드, 또는 glp-1 분해 억제제를 포함하는 근감소증 또는 근위축증 치료용 약학 조성물

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