CN112143556A - 一种无苦味黑老虎籽及籽油的制备方法 - Google Patents
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Abstract
一种无苦味黑老虎籽及籽油的制备方法，是取黑老虎种籽，去外种皮后加入水淹没种籽，于80‑100℃加热15‑20分钟，然后取出种籽，将种籽轻轻搓揉，棕色内种皮脱落，露出乳白色种仁，该种仁香脆可口，完全不具有苦味。将该种仁按现有植物油脂提取方法进行提取即得籽油，该油脂不饱和脂肪酸含量高，杂质少，能用于食用。
Description
技术领域
本发明涉及黑老虎种籽的利用，具体涉及无苦味黑老虎籽的制备，同时涉及可用于食用的无苦味黑老虎籽油的制备方法。
背景技术
黑老虎(KadsuracoccineaLem.)为多年生常绿攀援藤本。根茎俗称大血藤，有较高的药用价值，能行气活血，消肿止痛，治胃病，风湿骨痛，跌打瘀痛，并为妇科常用药；果实为聚合浆果，味酸甜，含有丰富的氨基酸和矿物质元素，可食用。目前，对于黑老虎根茎的研究较多，但对于果实，尤其是果实中的果核(种子)的报道较少。
黑老虎果实中种子较多，约占鲜果重的7-3％，经检测，种子中含有粗多糖、总黄酮、总皂苷、维生素、矿物质、脂肪酸、氨基酸等物质，认为黑老虎种子有较高的药用价值，在医疗健康、保健食品等方面具有较高的开发潜力。黑老虎种子由外种皮、内种皮及种仁组成，外种皮木质、薄，用力一压即可破碎剥离，内种皮为棕色膜状，很薄，紧贴于种仁上，手刮、搓或是采用机械等方法也无法剥离。有人曾尝试将黑老虎种子去外种皮后用作食材，但发现味道极苦，不可下咽；也有人将黑老虎籽采用压榨法或浸提法进行油提取，但因味极苦，不适用于人食用。CN107254351A，则是采用水酶法利用黑老虎籽高效制油，其对黑老虎籽的处理为：籽仁研磨后加水，调节pH值后加酶酶解。本申请人多次依此方法实验后，发现制得的籽油仍旧极苦，无法下咽。因此，目前，黑老虎种籽除生产种苗之外，剩余的大量种子只能丢弃，对于食品行业来说，实为一大憾事。
发明内容
本发明的目的在于，针对上述现有技术的不足，提供一种无苦味黑老虎籽的制备方法，同时提供无苦味黑老虎籽油的制备方法，使其作为食品具有可行性。
为达上述目的，本发明所采用的技术方案是：一种无苦味黑老虎籽的制备方法，该方法步骤如下：
A.取黑老虎种籽，去外种皮；对于黑老虎种籽原料的选择，新鲜或干燥的皆可，种籽去外种皮后呈棕色(为内种皮颜色)；
B.于去外种皮的种籽中加入水，水以淹没种籽为宜，于80-100℃加热15-20分钟；
C.取出种籽，将种籽轻轻搓揉，棕色内种皮脱落，露出乳白色种仁，即得无苦味黑老虎籽。经检测，该籽香脆可口，完全不具有苦味。
本发明同时提供一种无苦味黑老虎籽油的制备方法，是将上述黑老虎籽按现有植物油脂提取方法(如压榨法、浸出法等)进行提取。采用压榨法提取时，黑老虎籽需先烘干至含水重量低于6％，再送入榨油机进行压榨，烘干温度较好为40-60℃。
本发明将黑老虎种籽水煮后轻揉，内种皮即可轻易脱落，所得种仁香脆可口，完全不具有苦味；且该种仁所制得的籽油不饱和脂肪酸含量很高，占油脂质量的67.83％，并不含有害脂肪酸芥酸；同时，亚油酸含量高达油脂质量的59.70％。由于亚油酸是一种必需脂肪酸，能降低血液胆固醇，具有防治动脉粥样硬化及心脑血管疾病的保健效果。由此可见，黑老虎籽油具有良好的品质，作为天然保健食用油具有良好的发展前景。
附图说明
图1是黑老虎种子去除内外种皮图。
其中：a-干燥种籽，b-去外种皮种籽，c-去内种皮种籽(种仁)。
图2是1号油脂甲醇溶液的HPLC图。
图3是2号油脂甲醇溶液的HPLC图。
图4是3号油脂甲醇溶液的HPLC图。
图5是黑老虎内种皮甲醇提取液的HPLC图。
图6是黑老虎外种皮甲醇提取液的HPLC图。
图7是37种脂肪酸甲酯GC色谱图。
其中：1:丁酸甲酯、2:己酸甲酯、3:辛酸甲酯、4:葵酸甲酯、5:十一碳酸甲酯、6:月桂酸甲酯、7:十三酸甲酯、8:肉豆蔻酸甲酯、9:顺-9-十四碳一烯酸甲酯、10:十五碳酸甲酯、11:顺-10-十五碳一烯酸甲酯、12:棕榈酸甲酯、13:棕榈油酸甲酯、14:十七碳酸甲酯、15:顺-10-十七碳一烯酸甲酯、16:硬脂酸甲酯、17:油酸甲酯、18:反油酸甲酯、19:亚油酸甲酯、20:反亚油酸甲酯、21:γ-亚麻酸甲酯、22:亚麻酸甲酯、23:花生酸甲酯、24:顺-11-二十碳烯酸甲酯、25:顺-11,14-二十碳二烯酸甲酯、26:顺-8,11,14-二十碳三烯酸甲酯、27:二十一酸甲酯、28:顺-11,14,17-二十碳三烯酸甲酯、29:花生四烯酸甲酯、30:顺-5,8,11,14,17-二十碳五烯酸甲酯、31:二十二碳酸甲酯、32:芥酸甲酯、33:顺-13,16-二十二碳二烯酸甲酯、34:二十三碳酸酯、35:二十四碳酸甲酯、36:顺-4,7,10,13,16,19-二十碳六烯酸甲酯、37:顺-15-二十四碳酸一烯酸甲酯。
图8是1号油脂肪酸测定GC色谱图。
图9是2号油脂肪酸测定GC色谱图。
图10是3号油脂肪酸测定GC色谱图。
具体实施方式
实施例1无苦味黑老虎种籽的制备
将黑老虎种子(新鲜或干燥的)用手或外力破粹，除去外种皮后，将带棕色内种皮的种籽放入水中(水要至少能淹没种籽)，于80-100℃水煮加热15-20分钟，取出种籽，将种籽轻轻搓揉，棕色内种皮脱落，露出乳白色种仁，即得去苦味黑老虎籽。
去内种皮时间的确定：不同水煮加热时间内种皮的脱皮率见下表1，由下表1显示，当加热时间达到21分钟时种籽开始出现煮烂，因此，最佳水煮加热时间取15-20min。去除内种皮后的种仁呈乳白色，见图1。
表1去外种皮的黑老虎籽水煮时间与去皮率
| 水煮时间min | 5 | 10 | 15 | 20 | 21 | 25 | 30 |
| 去皮率％ | 60 | 80 | 100 | 100 | 100(开始出现煮烂) | 100(部分煮烂) | 100(部分煮烂) |
实施例2黑老虎种籽急性毒性实验
(1)黑老虎种仁处理
将干燥的种子剥去外种皮，取带内种皮的种仁15g，磨碎，加入60ml蒸馏水均浆，配制成0.25g/mL的药液(简称药液1)。
取实施例1制备的去除内外种皮的白色的干燥种仁15g，磨碎，加入60ml蒸馏水均浆，配制成0.25g/mL的药液(简称药液2)。
(2)试验方法
选用体重在26.1～37.3g区间，等级为ICR的雄性小鼠60只，随机分成20只一组的3个小组：黑老虎种仁带内种皮(无外种皮)组、黑老虎种仁无内种皮组和空白对照组，实验前的16个小时之内所有小鼠禁止进食，然后每个小组分别通过口灌胃给予40mL/kg体积相应的药液(黑老虎种仁带内种皮组灌胃药液1、黑老虎种仁无内种皮组灌胃药液2)，空白对照组给予相等量的纯水，在用药当天以及用药后的0～4小时之内紧密观察并且及时记录各组样本出现的毒性反应和恢复的时间、中毒特征及表现、体重发生的变化和其死亡情况等，每天下午观察一次样本，并且进行连续14天的观察，每组样本在用药前和用药后的第4天、第7天、第10天和第14天进行称重，记录样品体重发生的变化以及死亡情况。
(3)实验结果
自主活动：样品用药停止后的0～4小时内，空白对照组和黑老虎种仁无内种皮组、种仁带内种皮组的小鼠自主活动未见明显异常。
异常和死亡：用药后连续观察14天，空白对照组和黑老虎种仁无内种皮组、种仁带内种皮组的小鼠未见明显异常和死亡。
体重：与空白对照组比较，黑老虎种仁无内种皮组和种仁带内种皮组的小鼠第4-14天体重均无统计学差异。动物变化在ICR小鼠正常体重增长范围内。
大体解剖检查：试验结束后通过颈椎脱臼的方法处死所有的样品，没有发现积液和肿瘤等不正常的变化，检查结果显示脏器没有显著的不正常情况。
在本试验条件下，ICR小鼠经口灌服黑老虎种仁无内种皮组、种仁带内种皮组均未见明显毒性反应，剂量为10g/kg、10g/kg(0.25g/mL、0.25g/kg)。
实施例3黑老虎籽去外、内种皮后的感官分析
分别取去内种皮的种仁和已去外种皮但未去内种皮的干燥种仁若干粒，请20位年龄在18-60岁之间的人员取一粒咀嚼(事先并未告诉其滋味)，先尝试去内皮种种仁，大家均反映味道香脆，口感很好；然后再试吃不去内种皮种仁，均是咀嚼一次，旋即吐出，反映其味极苦，且在口中久久不散去。
由上可知，黑老虎籽去外种皮和内种皮后的种仁香脆可口，完全不具苦味。
实施例4无苦味黑老虎籽油的制备
将实施例1制备的去内种皮的黑老虎籽在40-60℃下烘干，入榨油机，在榨膛温度140℃-200℃下进行压榨，得粗油，然后将粗油于4℃冰箱静置12-24h，弃下层，取上清液，得精制油。
分别以带外种皮的黑老虎种籽(整粒种子)、去外种皮带内种皮的黑老虎种籽、去内种皮的黑老虎种籽为原料，按上述压榨法进行榨油提取，三种原料制备的油脂出油率及感官评价见下表2。由表2可知，去内种皮的黑老虎种籽的出油率高、油脂口尝无苦味，而其余2种原料压榨的油均具有极苦味，且有一种特殊气味。
表2三种不同原料制备的黑老虎油脂出油率及感官评价
实施例5黑老虎籽油苦味来源分析
分别精密称取实施例4所得的1-3号油脂各0.5g、黑老虎种籽的外种皮1.0g及黑老虎种籽的内种皮1.0g，加入甲醇100ml，超声提取40min，过0.45μm有机膜，按下列色谱条件进行分析。
色谱条件：色谱柱Welch Ultimate XB-C18柱(4.6×250mm,5μm)，流动相B：乙腈；C：0.2％磷酸水，梯度洗脱：0→70min，10→90％B；70→85min，90→90％B；流速1.0ml/min；进样量20ul，柱温30℃，波长214nm。
通过DAD检测器发现，三种油脂各色谱峰在低紫外区214nm波长下有最大吸收，见图2-图4。由图可见，1号油脂(无苦味油脂)在90min的运行时间内，仅有35-75min时间段有多个非常小的色谱峰，而2号、3号油脂(苦味油脂)在该时间段内色谱峰显著高于1号油脂，推测这些成分为苦味物质。同时，黑老虎种籽的内种皮、外种皮的提取物的HPLC见图5和图6，由图可见，该2种提取物在该段时间内的色谱峰与2号和3号油脂基本相同，进一步表明，2号和3号油脂中的苦味成分来源于内外种皮，除去内外种是获得无苦味油脂的关键。
实施例6黑老虎籽油脂肪酸含量测定
按GB 5009.168-2016《食品中脂肪酸的测定》方法进行。
在GB 5009.168-2016《食品中脂肪酸的测定》方法确定的色谱条件下，37种脂肪酸甲酯色谱图见图7。实施例4中3种不同原料分别制备的1-3号油脂测定的GC图见图8-图10。根据检测结果(请结合参见表3)，得到以下结论：
A.三种油脂中均检测到13种脂肪酸，脂肪酸总量有一定的差异，1号油脂(无苦味油脂)中脂肪酸含量最高，为82.64％，另外的两种有苦味油脂即2号和3号油脂分别为69.41％和62.56％；由于脂肪酸是以甘油三酯的形式在油中存在，换算成甘油三酯后，1号油脂甘油三酯的总量86.419％，2号和3号油脂分别为72.490％、65.420％，表明油酯中还分别含有约14％、28％、35％的其他成分，1号油脂(无苦味油脂)杂质最少。
B.三种油脂中均检测到5种相同的不饱和脂肪酸，1号油脂中不饱和脂肪酸含量最高，为67.83％，2号和3号油脂为56.62％和51.56％，分别占脂肪酸总量的82.07％、81.57％和82.41％；
C.脂肪酸中以亚油酸含量最高，1号油脂中最高，占油脂质量的59.70％，2号和3号油脂分别为49.93％和43.57％。
表3 1-3号油脂中脂肪酸含量(单位：g/100g)
注：*为不饱和脂肪酸。
将黑老虎籽油与传统食用油如茶油、菜籽油、混合芝麻油中脂肪酸的含量与组成进行比较，如表4，由表可见，黑老虎籽油中脂肪酸总量高于三种常见油脂，13种不饱和脂肪酸均是茶油中含有的，但不含有害成分芥酸，且亚油酸含量高达油脂质量的59.696％。远远高于其他三种油脂，由于亚油酸是一种必需脂肪酸，能降低血液胆固醇，具有防治动脉粥样硬化及心脑血管疾病的保健效果，由此可见，黑老虎籽油具有非常高的品质，能用于食用。
表4黑老虎籽油与茶油、菜籽油、混合芝麻油的比较(单位：％)
注：“-”表示在该方法下未能检测到。
综上结果可知，黑老虎种子苦味成分源于内外种皮，去除内外种皮后的种仁无苦味，可食用，能榨得无苦味油脂，该油脂不饱和脂肪酸含量高，杂质少，能用于食用。
Claims (4)
1.一种无苦味黑老虎籽的制备方法，其特征在于，该方法步骤如下：
A.取黑老虎种籽，去外种皮；
B.于去外种皮的种籽中加入水，水以淹没种籽为宜，于80-100℃加热15-20分钟；
C.取出种籽，搓揉以去除内种皮，即可。
2.一种无苦味黑老虎籽油的制备方法，其特征在于，该方法是将权利要求1所制得的黑老虎籽按现有植物油脂提取方法进行提取。
3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，采用压榨法提取时，黑老虎籽先烘至含水重量低于6%。
4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述烘干温度为40-60℃。
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