CN112107530B - 一种抗衰老组合物 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种抗衰老组合物，属于化妆品技术领域，本发明所述抗衰老组合物，包括以下组分：3′‑羟基染料木黄酮、虾脊兰提取物和印度獐芽菜提取物。所述组分中3′‑羟基染料木黄酮可有效抑制皮肤中黑色素的生成；虾脊兰提取物和印度獐芽菜提取物可促进细胞间的信号交流，从而达到成纤维细胞和角质细胞的有效增殖及生长，而两者本身含有的有效成分也具有修复衰老的功效。通过三者的协同作用，可使皮肤达到自我修复，提高其紧致性，恢复光泽和弹性以及减少皱纹的功效。本发明还提供了所述抗衰老组合物的制备方法，所述制备方法操作简单，可实现工业化生产。本发明还提供了所述抗衰老组合物在化妆品制备中的应用。

Description

一种抗衰老组合物
技术领域
本发明涉及化妆品技术领域，具体涉及一种抗衰老组合物。
背景技术
衰老是生命过程中不可避免的自然规律，皮肤为于身体最表面，是机体衰老过程中表现最显著的器官之一。人体皮肤衰老的主要特征表现在：皱纹变多、弹性变低、色素积累以及含水量下降等。现有技术中人们开始使用诸如透明质酸混合物(玻尿酸)等化学合成药剂来缓解皮肤出现的衰老现象，然而这些药剂持续功效短且容易造成身体诸如激素失调等副作用的产生；日常使用普通化妆品虽或多或少添加一些植物成分对皮肤进行美白滋润，但大多只是提高皮肤细胞的含水量，无法真正起到抗衰老的作用。
CN109825518B公开了一种3′-羟基染料木黄酮的制备方法及其用途，所述3’-羟基染料木黄酮可作为抗氧化剂使用，抑制诱导型人基质金属蛋白酶-1以及起到抑制细胞脱颗粒的功效。
虾脊兰(CALANTHE DISCOLOR)是一种分布于中国和日本的稀有兰花品种，其含有丰富的吲哚类生物碱成分，常用于中药治疗并可起到活血舒筋的作用。
印度獐芽菜(SWERTIA CHIRATA)是一种常见的传统印度中草药，其有效成分獐芽菜苦苷属于环烯醚萜类，现有技术中被认为具有丰富的医疗特性，常用于辅助伤口的愈合。
发明内容
基于现有技术的不足，本发明的目的在于提供了一种抗衰老组合物，该组合物具有令皮肤紧致、补水以及再生的作用，从而起到皮肤的抗衰老效果。
为了达到上述目的，本发明采取的技术方案为：
一种抗衰老组合物，包括以下组分：3′-羟基染料木黄酮、虾脊兰提取物和印度獐芽菜提取物。
本发明所述虾脊兰提取物经过发明人多次实验后发现，其可激活脂肪干细胞和成纤维细胞间的信号交流，诱导脂肪干细胞分泌富含生长因子的分泌蛋白质组，修复并促使成纤维细胞的焕活功能，使其可以更有效地增殖、迁移和生成胶原蛋白和弹性蛋白；进而提升皮肤的紧致度、弹性和抗皱性；所述印度獐芽菜提取物经过发明人实验发现其含有的獐芽菜苦苷同样可激活脂肪干细胞，其分泌的生长因子可促使角质细胞增殖，提高表皮新生的能力。此外，虾脊兰提取物本身也具有丰富的生长因子和营养物质，其单独作用与成纤维细胞也本身具有修复抗衰的功能；印度獐芽菜其有效成分獐芽菜苦苷也同样具备抗衰老作用。
本发明所提供的组合物中，3′-羟基染料木黄酮可有效抑制皮肤中黑色素的生成；虾脊兰提取物和印度獐芽菜提取物均可促进细胞间的信号交流，诱导脂肪干细胞分泌生长因子，从而达到成纤维细胞和角质细胞的有效增殖及生长。此外，二者自身含有的有效物质也可单独作用于成纤维细胞上。通过三者的协同作用，可使皮肤达到自我修复，提高其紧致性，恢复光泽和弹性以及减少皱纹的功效。
优选地，所述3′-羟基染料木黄酮、虾脊兰提取物和印度獐芽菜提取物的质量比为0.2～0.6:2～6:0.5～1.5。所述各组分若含量较高则存在细胞抑制作用，过低则可能导致组分的功能效果不显著。根据所述比例制备的抗衰老组合物其有效组分可共同协调诱导人体成纤维细胞和角质细胞的增殖，恢复皮肤各项性能。
优选地，所述3′-羟基染料木黄酮、虾脊兰提取物和印度獐芽菜提取物的质量比为0.3～0.5:3～5:0.8～1.2；更优选地，所述3′-羟基染料木黄酮、虾脊兰提取物和印度獐芽菜提取物的质量比为0.4:4:1。当三种组分的添加比例为上述比例时，其协同作用效果最佳，抗皮肤衰老作用较强。
优选地，所述抗衰老组合物的组分还包括水、甘油、黄原胶、苯甲酸钠、葡糖酸内脂和葡糖酸钙。所述虾脊兰提取物可使用虾脊兰混合物代替，所述虾脊兰混合物包括以下组分：虾脊兰提取物、水、甘油、黄原胶、苯甲酸钠、葡糖酸内脂、和葡糖酸钙。所述虾脊兰混合物经过与其他组分配比混合后，其化学性能更加稳定，活性较高且作用效果较为明显。
优选地，所述抗衰老组合物的组分还包括棕榈酸异丙酯、卵磷脂和水。所述印度獐芽菜提取物可使用印度獐芽菜混合物代替，所述印度獐芽菜混合物包括以下组分：印度獐芽菜提取物、棕榈酸异丙酯、卵磷脂和水。所述印度獐芽菜混合物经过与其他组分配比混合后，其化学性能更加稳定，活性较高且作用效果较为明显。
本发明的另一目的还在于提供了所述抗衰老组合物的制备方法。
本发明所述抗衰老组合物的制备方法为将3′-羟基染料木黄酮和虾脊兰提取物混合均匀后，加入印度獐芽菜提取物溶解并搅拌混合均匀，即得所述抗衰老组合物。
本发明所提供的抗衰老组合物的制备方法操作简单，可工业化大规模生产。
本发明的再一目的还在于提供了所述抗衰老组合物在化妆品制备中的应用，所述化妆品包括面膜液、精华液、护肤凝露、面霜和乳液中的至少一种。
本发明的再一目的还在于提供了包含所述抗衰老组合物的化妆品。
优选地，所述抗衰老组合物在所述制备的化妆品的质量浓度为0.02～0.3％。
本发明的有益效果在于：本发明提供了一种抗衰老组合物，所述组分中3′-羟基染料木黄酮可有效抑制皮肤中黑色素的生成；虾脊兰提取物和印度獐芽菜提取物可促进细胞间的信号交流，从而达到成纤维细胞和角质细胞的有效增殖及生长，而其两者自身含有的活性物质也具备修复衰老的功能。通过三者的协同作用，可使皮肤达到自我修复，提高其紧致性，恢复光泽和弹性以及减少皱纹的功效。本发明还提供了所述抗衰老组合物的制备方法，所述制备方法操作简单，可实现工业化生产。本发明还提供了所述抗衰老组合物在化妆品制备中的应用。本发明还提供了包含所述抗衰老组合物的化妆品。
附图说明
图1实施例1细胞迁移测试结果图(上左图为对照组，上右图为实施例1产品处理组，下图为上图拟合图)。
具体实施方式
为了更好地说明本发明的目的、技术方案和优点，下面将结合具体实施例对本发明作进一步说明，其目的在于详细地理解本发明的内容，而不是对本发明的限制。
若无特别说明，下述具体实施例所用原料均为市购的普通商品，所述3′-羟基染料木黄酮通过专利CN109825518B所述方法制得；虾脊兰提取物型号是74200-ORCHISTEMTM，生产商是西班牙Provital Group；印度獐牙菜提取物的型号是SWT-7TM H，生产商是LUCASMEYER COSMETICS。
实施例1
本发明所述抗衰老组合物的一种实施例，所述抗衰老组合物包括以下组分：3′-羟基染料木黄酮、虾脊兰提取物和印度獐芽菜提取物，所述3′-羟基染料木黄酮、虾脊兰提取物和印度獐芽菜提取物的质量比为0.4:4:1。
所述抗衰老组合物的制备方法为将3′-羟基染料木黄酮和虾脊兰提取物混合均匀后，加入印度獐芽菜提取物溶解并搅拌混合均匀，即得所述抗衰老组合物。
为验证本发明所述抗衰老组合物的抗衰老效果，将实施例1所制备的产品作为待测样品，以双氧水诱导人皮肤成纤维细胞的体外早衰模型，通过检测细胞外基质中I型胶原蛋白前体(Procollagen-1)、基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、弹性蛋白(Elastin)的含量，评估待测样品的抗衰老作用。
1.实验材料
1.1细胞系：人皮肤成纤维细胞(human dermal fibroblast)；
1.2培养液：含10％FBS的DMEM培养基；
1.3维持培养液：含1％FBS的DMEM培养基；
1.4培养条件：37℃，5％CO2，饱和湿度条件下培养；
1.5实验对照及实验试剂：
1.5.1实验对照
表1
Figure BDA0002713489120000051
1.5.2实验试剂
MTT溶液：5mg/ml；
Procollagen type I C-peptide(PIP)试剂盒，购自Takara(Lot：AJ42039A)；
MMP-1试剂盒，购自R&D(Lot：P234218)；
Human Elastin(ELN)试剂盒，购自CUSABIO(Lot：28036805)。
2.实验步骤
2.1细胞活性测试
2.1.1细胞常规培养。制备密度为3.0～3.5×104个/mL的细胞悬液，将细胞悬液接种于96孔细胞培养板，每孔100μL，培养20h。
2.1.2弃去孔中原培养液，每孔加入100μL不同浓度的实施例1待测样品，返回培养箱孵育72±1h。
2.1.3取出培养板，每孔加入20μL MTT溶液，培养箱孵育3～4h。去除孔中液体，每孔加入100μL DMSO，置于振荡器振荡10～15min后，在酶标仪570nm波长处测定吸光度。
2.2 Procollagen-1含量测定、MMP-1含量测定和Elastin含量测定
2.2.1将正常人皮肤成纤维细胞以3.0～3.5×103/孔的密度接种到96孔板，培养20h。
2.2.2阴性对照组、模型对照组更换为维持培养液，其余各组加入含样本或阳性对照的维持培养液孵育24h。弃去原培养基，使用PBS清洗1次，阴性对照组加入无血清的DMEM培养基，其余各组分别加入含400μM H2O2无血清DMEM培养基，孵育2h。使用PBS清洗2次，阴性对照组、模型对照组更换为维持培养液，其余各组加入含样本或阳性对照的维持培养液，孵育48h；
2.2.3收集细胞上清液，根据试剂盒说明书检测Procollagen-1、MMP-1、Elastin含量。
3.实验数据分析
数据采用SPSS进行分析，并以均值±标准差表示，如果p<0.05考虑差异具有统计学意义。
3.1细胞活性以阴性对照组(NC)细胞活性为100％，计算各组相对细胞活性(Viability)：
Figure BDA0002713489120000061
3.2 Procollagen-1、MMP-1、Elastin水平以阴性对照组为100％，计算各组的相对含量。
4.实验结果
4.1细胞活性分析
表2
Figure BDA0002713489120000062
根据表2可知，当待测样品的质量浓度为在0.01～0.3％时，细胞活性较高，因此在Procollagen-1、MMP-1和Elastin含量测试中使用0.02％、0.1％和0.3％三个浓度的待测样品进行测试。
4.2 Procollagen-1含量测定
表3
Figure BDA0002713489120000071
#表示与阴性对照组(NC)进行对比，差异具有统计学意义(p<0.05)
*表示与模型对照组(M)进行对比，差异具有统计学意义(p<0.05)
4.3 MMP-1含量测定
表4
Figure BDA0002713489120000072
#表示与阴性对照组(NC)进行对比，差异具有统计学意义(p<0.05)
*表示与模型对照组(M)进行对比，差异具有统计学意义(p<0.05)
5.4 Elastin含量测定
表5
Figure BDA0002713489120000081
#表示与阴性对照组(NC)进行对比，差异具有统计学意义(p<0.05)
*表示与模型对照组(M)进行对比，差异具有统计学意义(p<0.05)
根据表3可知，模型对照组(M)与阴性对照组(NC)相比，Procollagen-1相对含量明显降低(P<0.05)；阳性对照组与模型对照组相比，Procollagen-1相对含量明显升高(P<0.05)，说明本实验造模成功；浓度为0.30％的实施例待测组与模型对照组相比Procollagen-1相对含量显著升高14.66％(P<0.05)。
根据表4可知，模型对照组(M)与阴性对照组(NC)相比，MMP-1相对含量明显升高(P<0.05)；阳性对照组与模型对照组相比，MMP-1相对含量明显降低(P<0.05)，说明本实验造模成功；浓度为0.10％和0.30％的实施例待测组与模型对照组相比MMP-1相对含量分别显著降低11.35％和20.14％(P<0.05)。
根据表5可知，模型对照组(M)与阴性对照组(NC)相比，Elastin相对含量明显降低(P<0.05)；阳性对照组与模型对照组相比，Elastin相对含量明显升高(P<0.05)，说明本实验造模成功；浓度为0.30％的实施例待测组与模型对照组相比Elastin相对含量显著升高26.08％(P<0.05)。
综上所述，实施例1所制备的抗衰老组合物在双氧水诱导的模型中能够显著提高Procollagen-1相对含量，降低MMP-1相对含量，并上调Elastin的表达，说明其有显著的抗衰老作用。
为验证本实施例所制备的抗衰老组合对于的脂肪干细胞诱导作用及对成纤维细胞的生长迁移促进作用，将实施例1制备的抗衰老组合物进行实验。
6.实验材料
6.1细胞系：人皮肤成纤维细胞(human dermal fibroblasts)；人脂肪干细胞(ADSCs，Lonza K3PT-5006)；
6.2培养液：含10％FBS的DMEM培养基；
6.3维持培养液：A：含10％FBS的DMEM培养基；B：无FBS的DMEM/F12培养基；
6.4培养条件：37℃，5％CO2，饱和湿度条件下培养；
Oris细胞迁移检测试剂盒，购自Platypus Technologies，USA。
7.实验步骤
7.1细胞迁移活性测试
7.1.1成纤维细胞常规培养。制备密度为3.0～3.5×104个/mL的细胞悬液，将人皮成纤维细胞悬液接种于96孔细胞培养板，每孔100μL，培养24h。
7.1.2脂肪干细胞常规培养。制备密度为3.0～3.5×104个/mL的细胞悬液，将脂肪细胞悬液接种于96孔细胞培养板，每孔100μL，培养24h。
7.1.3将培养后的脂肪干细胞弃去孔中原培养液，以培养液B每孔加入质量含量为0.5％的实施例1产品，返回培养箱孵育48±2h；同时设置物不添加实施例1产品的空白对照组；
7.1.4将培育后的脂肪干细胞培养基以2000rpm，4℃的条件离心15min后收集离心液，以0.2μm的筛孔过筛。
7.1.5将培育好的成纤维细胞弃去孔中原培养液，以培养液A接种并将试剂盒接种塞置于接种孔上，使其形成一个直径为2mm的检测区域，返回培养箱孵育24±1h后，以0.5％总质量含量的添加量加入实施例1产品处理组以及空白对照组的脂肪干细胞过筛离心液，培养48h后，以德国莱卡DMi1显微镜对样品进行细胞捕捉拍摄，并以ImageJ(NIH,USA)软件对拍摄图片进行量化拟合，拟合图片如图1所示。
根据图1及拟合结果可知，本发明所述抗衰老组合物培养的脂肪干细胞，将含有其分泌物的离心液用于培养成纤维细胞时，相比于对照产品其成纤维细胞的迁移数高达近400(对照组迁移数仅为150)，两组差距达到144％，说明脂肪干细胞的分泌物富含营养物质，可有效促进成纤维细胞的生长活性，而本发明所提供的抗衰老组合物可进一步促进这种增益效果，从而起到抗衰老的功效。
实施例2
本实施例与实施例1的差别仅在于，所述3′-羟基染料木黄酮、虾脊兰提取物和印度獐芽菜提取物的质量比为0.3:3:1.2。
将实施例2制备的产品同样进行实施例1所述的抗衰老测试，本实施例所述实验结果与实施例1的差别仅在于：
在Procollagen-1相对含量测试结果中，浓度为0.30％的实施例2待测组与模型对照组相比Procollagen-1相对含量显著升高13.52％；在MMP-1相对含量测试结果中，浓度为0.30％的实施例2待测组与模型对照组相比MMP-1相对含量显著降低19.27％；在Elastin相对含量测试结果中，浓度为0.30％的实施例2待测组与模型对照组相比Elastin相对含量显著升高25.12％。
实施例3
本实施例与实施例1的差别仅在于，所述3′-羟基染料木黄酮、虾脊兰提取物和印度獐芽菜提取物的质量比为0.5:5:0.8。
将实施例3制备的产品同样进行实施例1所述的抗衰老测试，本实施例所述实验结果与实施例1的差别仅在于：
在Procollagen-1相对含量测试结果中，浓度为0.30％的实施例3待测组与模型对照组相比Procollagen-1相对含量显著升高13.43％；在MMP-1相对含量测试结果中，浓度为0.30％的实施例3待测组与模型对照组相比MMP-1相对含量显著降低19.52％；在Elastin相对含量测试结果中，浓度为0.30％的实施例3待测组与模型对照组相比Elastin相对含量显著升高25.36％。
实施例4
本实施例与实施例1的差别仅在于，所述3′-羟基染料木黄酮、虾脊兰提取物和印度獐芽菜提取物的质量比为0.2:2:1.5。
将实施例4制备的产品同样进行实施例1所述的抗衰老测试，本实施例所述实验结果与实施例1的差别仅在于：
在Procollagen-1相对含量测试结果中，浓度为0.30％的实施例4待测组与模型对照组相比Procollagen-1相对含量显著升高13.02％；在MMP-1相对含量测试结果中，浓度为0.30％的实施例4待测组与模型对照组相比MMP-1相对含量显著降低19.12％；在Elastin相对含量测试结果中，浓度为0.30％的实施例4待测组与模型对照组相比Elastin相对含量显著升高24.94％。
实施例5
本实施例与实施例1的差别仅在于，所述3′-羟基染料木黄酮、虾脊兰提取物和印度獐芽菜提取物的质量比为0.6:6:0.5。
将实施例5制备的产品同样进行实施例1所述的抗衰老测试，本实施例所述实验结果与实施例1的差别仅在于：
在Procollagen-1相对含量测试结果中，浓度为0.30％的实施例5待测组与模型对照组相比Procollagen-1相对含量显著升高12.50％；在MMP-1相对含量测试结果中，浓度为0.30％的实施例5待测组与模型对照组相比MMP-1相对含量显著降低18.64％；在Elastin相对含量测试结果中，浓度为0.30％的实施例5待测组与模型对照组相比Elastin相对含量显著升高24.37％。
实施例6
本实施例与实施例1的差别仅在于，所述3′-羟基染料木黄酮、虾脊兰提取物和印度獐芽菜提取物的质量比为0.1:1:1.6。
将实施例6制备的产品同样进行实施例1所述的抗衰老测试，本实施例所述实验结果与实施例1的差别仅在于：
在Procollagen-1相对含量测试结果中，浓度为0.30％的实施例6待测组与模型对照组相比Procollagen-1相对含量升高12.21％；在MMP-1相对含量测试结果中，浓度为0.30％的实施例6待测组与模型对照组相比MMP-1相对含量降低18.35％；在Elastin相对含量测试结果中，浓度为0.30％的实施例6待测组与模型对照组相比Elastin相对含量升高23.96％。
对比例1
本对比例与实施例1的差别仅在于，所述组合物包括以下组分：3′-羟基染料木黄酮和虾脊兰提取物，所述3′-羟基染料木黄酮和虾脊兰提取物的质量比为0.4:4。
将对比例1制备的产品同样进行实施例1所述的抗衰老测试，本实施例所述实验结果与实施例1的差别仅在于：
在Procollagen-1相对含量测试结果中，浓度为0.30％的对比例1待测组与模型对照组相比Procollagen-1相对含量升高7.47％；在MMP-1相对含量测试结果中，浓度为0.30％的对比例1待测组与模型对照组相比MMP-1相对含量降低10.53％；在Elastin相对含量测试结果中，浓度为0.30％的对比例1待测组与模型对照组相比Elastin相对含量升高12.30％。
对比例2
本对比例与实施例1的差别仅在于，所述组合物包括以下组分：3′-羟基染料木黄酮和印度獐芽菜提取物，所述3′-羟基染料木黄酮和印度獐芽菜提取物的质量比为0.4:1。
将对比例2制备的产品同样进行实施例1所述的抗衰老测试，本实施例所述实验结果与实施例1的差别仅在于：
在Procollagen-1相对含量测试结果中，浓度为0.30％的对比例2待测组与模型对照组相比Procollagen-1相对含量升高4.59％；在MMP-1相对含量测试结果中，浓度为0.30％的对比例2待测组与模型对照组相比MMP-1相对含量降低8.60％；在Elastin相对含量测试结果中，浓度为0.30％的对比例2待测组与模型对照组相比Elastin相对含量升高9.71％。
最后所应当说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对本发明保护范围的限制，尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。

Claims (8)

1.一种抗衰老组合物在制备化妆品中的应用，其特征在于，所述抗衰老组合物包括以下组分：3′-羟基染料木黄酮、虾脊兰提取物和印度獐芽菜提取物，所述3′-羟基染料木黄酮、虾脊兰提取物和印度獐芽菜提取物的质量比为0.2~0.6:2~6:0.5~1.5，所述虾脊兰提取物为74200-ORCHISTEMTM，所述印度獐芽菜提取物为SWT-7™ H，所述抗衰老组合物在化妆品中的质量浓度为0.1~0.3%。
2.如权利要求1所述的抗衰老组合物在制备化妆品中的应用，其特征在于，所述3′-羟基染料木黄酮、虾脊兰提取物和印度獐芽菜提取物的质量比为0.3~0.5:3~5:0.8~1.2。
3.如权利要求2所述的抗衰老组合物在制备化妆品中的应用，其特征在于，所述3′-羟基染料木黄酮、虾脊兰提取物和印度獐芽菜提取物的质量比为0.4:4:1。
4.如权利要求1所述的抗衰老组合物在制备化妆品中的应用，其特征在于，所述抗衰老组合物还包括以下组分：水、甘油、黄原胶、苯甲酸钠、葡糖酸内脂和葡糖酸钙。
5.如权利要求1所述的抗衰老组合物在制备化妆品中的应用，其特征在于，所述抗衰老组合物还包括以下组分：棕榈酸异丙酯、卵磷脂和水。
6.如权利要求1所述的抗衰老组合物在制备化妆品中的应用，其特征在于，所述化妆品包括面膜液、精华液、护肤凝露、面霜和乳液中的至少一种。
7.如权利要求1所述的抗衰老组合物在制备化妆品中的应用，其特征在于，所述抗衰老组合物的制备方法包括将3′-羟基染料木黄酮和虾脊兰提取物混合均匀后，加入印度獐芽菜提取物溶解并搅拌混合均匀，即得所述抗衰老组合物。
8.一种化妆品，其特征在于，所述化妆品包含了如权利要求1~7任一项所述抗衰老组合物，所述抗衰老组合物在化妆品中的质量浓度为0.1~0.3%。
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