CN112043619B

CN112043619B - 一种具有修复作用的肽类组合物及其制备方法和应用

Info

Publication number: CN112043619B
Application number: CN202010841617.1A
Authority: CN
Inventors: 李占鸿
Original assignee: Guangzhou Unes Biotechnology Co ltd
Current assignee: Guangzhou Unes Biotechnology Co ltd
Priority date: 2020-08-20
Filing date: 2020-08-20
Publication date: 2023-01-24
Anticipated expiration: 2040-08-20
Also published as: CN112043619A

Abstract

本发明公开了一种具有修复作用的肽类组合物及其制备方法和应用，所述具有修复作用的肽类组合物，其制备原料包括十肽‑4、精氨酸/赖氨酸多肽、三肽‑1铜、寡肽‑1、寡肽‑3、六肽‑3。本发明通过将十肽‑4、精氨酸/赖氨酸多肽、三肽‑1铜、寡肽‑1、寡肽‑3、六肽‑3进行组合，充分发挥各组分优势，具有延缓肌肤衰老、加快肌肤自我修复的功效。

Description

一种具有修复作用的肽类组合物及其制备方法和应用

技术领域

本发明属于医药化妆品技术领域，尤其涉及一种具有修复作用的肽类组合物及其制备方法和应用。

背景技术

现代人的皮肤经常暴露于多种外源性刺激，如紫外线、微粒、辐射等，这些刺激可能导致角质层完整性的破坏，最终导致皮肤屏障受损，出现一系列皮肤症状，比如痘肌、红血丝等。

此外人类皮肤的衰老、褶皱、暗淡也是由内外多种因素引起的。除了阳光(紫外线)照射外，表皮更新、真皮对外来化学物清除力、真皮厚度、免疫反应温度调节等多方面功能的降低，均能引起皮肤衰老。眼部肌肤，作为人体面部最薄的肌肤，其活动却是最频繁的，最易生长出皱纹，再加上现代人生活压力大、睡眠不充足、用眼过度，进一步加速了眼部皱纹、眼袋等肌肤问题的出现。

很多研究表明小分子活性肽具有清除自由基、抗氧化、抗衰老等多种生物活性，不仅能够促进皮肤细胞的增殖，还可以为皮肤提供营养，延缓皮肤老化，促进皮肤屏障修复，因此被广泛应用于皮肤修复化妆品和抗衰老化妆品。

但目前市面上常见的肽类皮肤修复抗衰产品存在一定的不足，对皮肤修复和抗衰作用有限。

发明内容

本发明的目的在于提供一种具有修复作用的肽类组合物及其制备方法和应用，所述肽类组合物具有延缓肌肤衰老、加快肌肤自我修复的功效。

本方案采取的技术方案如下：

一种具有修复作用的肽类组合物，其制备原料包括十肽-4、精氨酸/赖氨酸多肽、三肽-1铜、寡肽-1、寡肽-3、六肽-3。

其中，十肽-4可以穿透增加胶原蛋白，通过从内至外的重建来逆转皮肤老化的过程；刺激胶原蛋白、弹力纤维和透明质酸增生，提高肌肤的含水量和锁水度，修复皮肤屏障，同时增加皮肤厚度以及减少细纹。

精氨酸/赖氨酸多肽，别名芋螺毒素，芋螺肽，能通过作用于配体门控离子通道调控神经肌肉收缩，具有舒缓作用同时能紧致肌肤。

三肽-1铜，又名三胜铜肽，蓝铜胜肽。铜肽及其铜复合物可以作为组织重塑的激活剂和抗氧化剂，其也是一个信号肽，促进皮肤正常胶原蛋白的合成、弹力蛋白、蛋白聚糖和葡萄胺聚糖的生成，不同细胞类型的生长速度和迁移、抗炎、抗氧化反应，从而促进皮肤自我修复。

寡肽-1能促进细胞生长和提高细胞活性，快速修复受损肌肤；作为一种信号肽，寡肽-1能促进纤维细胞生成天然保湿因子，改善干松粗糙、无光泽，使皮肤更加光滑、湿润、细嫩。

寡肽-3可诱导干细胞分化，促进组织修复；通过与皮肤细胞受体结合，强化生长因子信号传递，促进表皮细胞增殖分化，增加角质细胞、纤维母细胞、玻尿酸及弹力蛋白合成等，达到皮肤更新以及抗老化的效果。寡肽-3可达到抗皱、祛痘的效果，能改善肤质，紧致皮肤，具有面部、眼周抗衰老护理效果。

六肽-3能缓肌肉收缩的力量，让肌肉放松，减少动态纹的发生与消除细纹；有效重新组织胶原弹力，可以增加弹力蛋白的活性，使脸部线条放松，皱纹抚平改善松弛。

本发明通过将十肽-4、精氨酸/赖氨酸多肽、三肽-1铜、寡肽-1、寡肽-3、六肽-3进行组合，充分发挥各组分优势，协同提高皮肤修复作用。

所述具有修复作用的肽类组合物包括以下重量份的制备原料：

0.05～1份十肽-4；

0.05～1份精氨酸/赖氨酸多肽；

0.01～1份三肽-1铜；

0.05～1份寡肽-1；

0.05～1份寡肽-3；

0.01～1份六肽-3。

0.05～0.1份十肽-4；

0.05～0.1份精氨酸/赖氨酸多肽；

0.01～0.1份三肽-1铜；

0.05～0.1份寡肽-1；

0.05～0.1份寡肽-3；

0.01～0.1份六肽-3。

所述具有修复作用的肽类组合物的制备原料还包括水、透明质酸钠、甘草酸二钾和甘油。

0.05～1份十肽-4；

0.05～1份精氨酸/赖氨酸多肽；

0.01～1份三肽-1铜；

0.05～1份寡肽-1；

0.05～1份寡肽-3；

0.01～1份六肽-3；

80～100份水；

0.05～1份透明质酸钠；

0.05～0.2份甘草酸二钾；

0.1～5份甘油。

0.05～0.1份十肽-4；

0.05～0.1份精氨酸/赖氨酸多肽；

0.01～0.1份三肽-1铜；

0.05～0.1份寡肽-1；

0.05～0.1份寡肽-3；

0.01～0.1份六肽-3；

90～100份水；

0.05～0.2份透明质酸钠；

0.05～0.15份甘草酸二钾；

2～5份甘油。

优选地，所述具有修复作用的肽类组合物包括以下重量份的制备原料：

0.05份十肽-4；

0.1份精氨酸/赖氨酸多肽；

0.05份三肽-1铜；

0.1份寡肽-1；

0.05份寡肽-3；

0.1份六肽-3；

90份水；

0.2份透明质酸钠；

0.15份甘草酸二钾；

4份甘油。

所述具有修复作用的肽类组合物的制备原料还可以添加可进一步添加另外一种以上市面上常规辅料，包括增溶剂、润肤剂、增稠剂、防腐剂、保湿剂、香精等，敷料用量为0.01～50份。

一种具有修复作用的肽类组合物的制备方法，包括如下步骤：

1)将透明质酸钠、甘油和水混合，加热得到基料；

2)向基料中加入甘草酸二钾、十肽-4、精氨酸/赖氨酸多肽、三肽-1铜、寡肽-1、寡肽-3、六肽-3，溶解后得到具有修复作用的肽类组合物。

步骤1)中，所述加热温度为70～85℃，优选70℃。

步骤2)中，甘草酸二钾、十肽-4、精氨酸/赖氨酸多肽、三肽-1铜、寡肽-1、寡肽-3、六肽-3的加入温度为30～45℃，优选40℃。

本发明还提供所述具有修复作用的肽类组合物在医药化妆品中的应用，包括在制备修复原液、眼部精华、冻干粉、修复保湿面膜、医用敷料等中的应用。

相对于现有技术，本发明具有如下有益效果：

(1)本发明的肽类组合物能够有效延缓肌肤衰老、加快肌肤自我修复。

(2)本发明的肽类组合物制备工艺简单，应用广泛。

附图说明

图1为肽类组合物对UV诱导的人角质形成细胞活率的影响。

具体实施方式

以下通过具体实施例进一步描述本发明，本发明不仅仅限于以下实施例。在本发明的范围内或者在不脱离本发明的内容、精神和范围内，对本发明进行的变更、组合或替换，对于本领域的技术人员来说是显而易见的，且包含在本发明的范围之内。

以下实施例中，如无特殊说明，其中的化妆品成分为常规的市售成分。

一种具有修复作用的肽类组合物，其原料配方如下表1所示：

表1.实施例1～4修复保湿组合物原料配方

作为比较，以下还提供了如表2所述原料配比的对比例1～4。对比例1～4相较实施例4分别省去了十肽-4、精氨酸/赖氨酸多肽、三肽-1铜和寡肽-1。

表2.对比例1～4修复保湿组合物原料配方

上述修复保湿组合物的制备方法包括如下步骤：

1)称取透明质酸钠、甘油和水放入加热锅中进行混合，升温至80℃搅拌均匀，冷却至40℃；

2)随后加入甘草酸二钾、十肽-4、精氨酸/赖氨酸多肽、三肽-1铜、寡肽-1、寡肽-3、六肽-3，均匀搅拌至完全溶解，过滤后出料；出料后静置，分装。

性能测试

对上述实施例1～4和对比例1～4的肽类组合物进行性能测试，具体如下：

一、修复能力测试(成纤维细胞增殖实验)

1、试验材料：

实施例1～4和对比例1～4制得的肽类组合物，并用0.22μm滤膜过滤，以10％(V/V，体积分数)的浓度进行细胞实验。

2、试验方法：

取对数生长期的人成纤维细胞，以细胞密度为4×10³每孔/100μL接种于96孔板，培养24h待细胞完全贴壁，饥饿处理12h，达到细胞同步化。同时设置调零孔(培养基)，实验加样孔(细胞、实施例1～4和对比例1～4制得的肽类组合物溶液、培养基)，空白对照孔(细胞、培养基)，每组设5个平行孔。加样后置于CO₂培养箱孵育48h，每孔加入10μL CCK8继续培养2h后，采用酶联免疫检测仪其450nm的吸光值。取每组5个平行孔的平均值，比较各组之间的吸光值大小，以判断待测样品的促成纤维细胞增殖能力，结果如下表3。

表1.成纤维细胞增殖实验结果

CCK8能够检测活细胞数目，活细胞越多，吸光值越高；反之越低。由表可知，对比不添加任何样品的空白对照孔，各实验加样孔吸光系数明显更高，表示加样孔细胞活性远超空白对照孔。且与各对比例相比，各实施例的吸光值明显更高。

其中实施例4制备得到的肽类组合物溶液吸光值最高，表明实施例4制备得到的修复肽类组合物溶液有最好的促成纤维细胞增殖能力，具有很好的肌肤修复能力。从实施例1～4的配方可以看出，在活性成分上，实施例4相较实施例3仅增加了寡肽-1，结果了实施例4的吸光值增加了57％左右；而实施例2虽然较实施例3增加了三肽-1铜，其结果未发生明显变化；而实施例1与实施例4的活性成分用量相同，二者的结果相差极大。该结果表明，各活性成分之间的配比对组合物的性能具有重要影响，只有在特定的配比下才具有最有效的协同促进作用，促进细胞增殖，对肌肤进行有效的修复。

二、抗衰修复实验(UVB诱导的人角质形成细胞损伤模型)

1、试验材料：

2、试验方法：

取状态良好处于指数生长期的HaCaT细胞，消化，计数，将细胞接种于96孔板，接种浓度为4×10³个/孔，接种体积为200μL/孔，置37℃，5％CO₂培养箱中培养，待贴壁细胞长至70％～80％后，分为空白组、UV照射组、给药组。其中空白组：给予不含样品DMEM完全培养基，培养48h；UV模型组：给予不含样品DMEM完全培养基，培养24h后，弃去原培养基并用PBS清洗2遍后改换为不含样品DMEM完全培养基，60mJ/cm² UV照射，继续培养24h；给药组：给予含样品DMEM完全培养基，培养24h后，弃去原培养基并用PBS清洗2遍后改换为不含样品DMEM完全培养基，60mJ/cm² UV照射，继续培养24h；MTT法测定细胞存活率。

结果示于图1，其中，与空白组相比，***表示P<0.001；与UV模型组相比，###表示P<0.001。

如图1所示，UV模型组细胞活率仅约为空白组的25％，表明UV对细胞损伤较严重，造模成功。而实施例1～4各组的细胞活率均明显高于对比例1～4，其中实施例4处理的细胞活率约为空白组的90％，表明实施例4制得的肽类组合物溶液能显著提高细胞存活率，表明其对UV诱导的损伤型角质形成细胞有很好的修复功能，一定程度上可以对抗UV诱导的皮肤损伤和衰老。

Claims

1.一种具有修复作用的肽类组合物，其特征在于：所述具有修复作用的肽类组合物包括以下重量份的制备原料：

0.05份十肽-4；

0.1份精氨酸/赖氨酸多肽；

0.05份三肽-1铜；

0.1份寡肽-1；

0.05份寡肽-3；

0.1份六肽-3；

90份水；

0.2份透明质酸钠；

0.15份甘草酸二钾；

4份甘油。

2.根据权利要求1所述具有修复作用的肽类组合物，其特征在于：所述具有修复作用的肽类组合物由以下重量份的制备原料得到：

0.05份十肽-4；

0.1份精氨酸/赖氨酸多肽；

0.05份三肽-1铜；

0.1份寡肽-1；

0.05份寡肽-3；

0.1份六肽-3；

90份水；

0.2份透明质酸钠；

0.15份甘草酸二钾；

4份甘油；

0.01份香精。

3.权利要求1所述具有修复作用的肽类组合物的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：

1）将透明质酸钠、甘油和水混合，加热得到基料；

2）向基料中加入甘草酸二钾、十肽-4、精氨酸/赖氨酸多肽、三肽-1铜、寡肽-1、寡肽-3、六肽-3，溶解后得到具有修复作用的肽类组合物。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于：步骤1）中，所述加热温度为70～85℃。