CN104887542B - 一种化妆品组合物 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种化妆品组合物，该组合物含有由甘氨酸‑脯氨酸‑羟脯氨酸(Gly‑Pro‑Hyp)组成的三肽、低分子量透明质酸、矿物质成分和维生素作为有效成分。根据本发明模仿细胞外基质的化妆品组合物在三肽、低分子量透明质酸、矿物质成分及维生素等围绕细胞的空间形成网络，从而保持和支撑组织形态，并调节细胞间的信号传达及细胞的成长及分化而抑制皮肤的老化，即抑制皮肤弹力的减少或皱纹的形成，并由可透过皮肤的低分子成分有效进行通过皮肤的传递，从而促进皮肤细胞的再生并恢复受损皮肤的功能。

Description

一种化妆品组合物
本申请是申请号为201010575568.8、申请日为2010年11月30日、名称为“一种化妆品组合物”的中国发明专利申请的分案申请。
技术领域
本发明涉及一种模仿细胞外基质而有助于皮肤细胞再生的化妆品组合物，尤其涉及为了有效透过皮肤，以与细胞外基质类似的组成比，含有低分子物质的化妆品组合物。本发明的化妆品组合物有助于皮肤的恢复，保持恒定性并有效于皮肤细胞的再生。
背景技术
与所有生命体因岁月的流失而老化相同，皮肤也经过老化的过程。人们为了迟缓这种老化而不懈努力，由此不断提出对老化的本质、老化的起因的疑问。皮肤老化的因素大致可分为两种。一种是皮肤构造和生理功能因岁月的流失而持续退化的内因性老化(intrinsic aging)；另一种是太阳光线等累积的外部刺激而发生的外因性老化(Extrinsic aging)。内因性老化和外因性老化都会伴随皮肤内的结构性变化，其结果皮肤变得干燥、失去皮肤弹性并形成皱纹。
首先，进一步仔细观察由于老化的皮肤的结构性变化，就会发现表皮、真皮及皮下组织等皮肤组成成分的厚度变薄。并且保持皮肤弹性和韧性的真皮组织的细胞外基质(extracellular matrix，ECM)成分也发生变化。细胞外基质是三维支撑体，包括无机盐类、养分、废物等的水溶液和巨大的多糖类分子。这在围绕细胞的空间形成网络而维持和支撑组织形态，并发挥调节细胞间的信号传达及细胞的成长及分化的重要作用。
至今模仿的ECM成分大部分都源于动物。但是源于动物的成分存在病原体感染等安全隐患，因此越来越不使用于化妆品中。
胶原蛋白是占细胞外基质的70-80％的主要成分，其作为长度较长的纤维结构蛋白质之一调节皮肤强度和弹性，与皮肤老化，即，减少弹性和形成皱纹有着密切关联。但是目前使用的大部分胶原蛋白是源于动物的原料，并且是分子量约30万Da左右的高分子，因此，通过皮肤传输无法充分吸收胶原蛋白。
作为ECM成分之一的透明质酸(hyaluronic acid)结合皮肤内真皮组织的细胞，传输营养素并使皮肤保持适当的水分。但是，由于透明质酸是分子量为几十万到几百万的高分子，因此粘度较高，用于化妆品时，其用量受到限制，很难通过直接涂覆于皮肤的方式透过皮肤。
发明内容
由此，本发明人发现：源于植物或通过合成而不是源于动物得到的三肽、低分子量透明质酸、矿物质和维生素等按照与细胞外基质类似的组合比构成的可透过皮肤的低分子物质组合物，也可以促进皮肤细胞的再生，从而完成本发明。
由此，本发明的目的在于，提供一种化妆品组合物，该化妆品组合物模仿细胞外基质促进皮肤细胞的再生并恢复受损皮肤的功能。
为了实现上述目的，本发明提供一种化妆品组合物，该组合物含有由甘氨酸-脯氨酸-羟脯氨酸(Gly-Pro-Hyp)组成的三肽、低分子量透明质酸、矿物质成分和维生素作为有效成分。
根据本发明模仿细胞外基质的化妆品组合物在三肽、低分子量透明质酸、矿物质成分及维生素等围绕细胞的空间形成网络，从而保持和支撑组织形态，并调节细胞间的信号传达及细胞的成长及分化而抑制皮肤的老化，即抑制皮肤弹力的减少或皱纹的形成，并由可透过皮肤的低分子成分有效进行通过皮肤的传递，从而促进皮肤细胞的再生并恢复受损皮肤的功能。
附图说明
图1是说明本发明的组合物的伤口恢复能力的显微镜照片。
图2是不同浓度的本发明的组合物的伤口恢复能力的定量分析图表。
图3是本发明的组合物的皮肤纤维母细胞增殖效果的图表。
图4是本发明的组合物的皮肤弹力改善效果的云纹图像。
具体实施方式
本发明提供一种化妆品组合物，该组合物含有由甘氨酸-脯氨酸-羟脯氨酸(Gly-Pro-Hyp)组成的三肽、低分子量透明质酸、矿物质成分及维生素作为有效成分。
下面进一步详细说明本发明。
作为本发明的有效成分而使用的三肽(tripeptide)由3个氨基酸甘氨酸-脯氨酸-羟脯氨酸(Gly-Pro-Hyp)组成，其促进胶原蛋白的生成并且分子量低，因此皮肤透过性高。并且，所述三肽的优点在于，由于其以合成方式制造，所以纯度高，并且不是源于动物的成分，因此不存在病原体感染等安全问题。
如果利用酸对氨基酸进行水解就会产生多种多样的断片，很难切出三肽；如果利用酶进行分解就会在将分子量变小方面受到限制。由此，本发明利用以氨基酸为基础，逆向合成的方式而获取均质的三肽。本发明的三肽可以通过本领域通用的氨基酸合成方法制造，其方法不受特别限制。
根据本发明的组合物，其中，以组合物的总重量为基准，三肽的含量为0.001-3重量％。如果小于0.001重量％其效果会较弱，而超过3重量％时，比起含量的增加，其效果增加不明显，并且丧失价格竞争力。
作为本发明的有效成分使用的低分子量透明质酸(hyaluronic acid)比起高分子量透明质酸皮肤吸收容易，并体现出优异的皮肤保湿、改善皱纹、治愈伤口及消炎等效果。本发明的低分子量透明质酸具有500-10000道尔顿的分子量。这是由于500道尔顿以下的透明质酸其制造及分离较难，而超过10000道尔顿时难以透过皮肤，无法显示其效果，并且由于粘度增加，剂型稳定性较差。
本发明的低分子量透明质酸可以通过本领域通用的方法制造，其方法不受特别限制。具体如通过高温加热及利用超声波的方法、通过酸或碱催化剂的方法、利用过硫酸氨等分解催化剂的方法或使用透明质酸酶的方法等将高分子量的透明质酸低分子化。
本发明的组合物中，以组合物的总重量为基准，低分子量透明质酸的含量可以为0.001-50重量％，优选为0.01-10重量％。
根据本发明的组合物，作为本发明的有效成分使用的矿物质成分可以选自由氯化镁(magnesium chloride)、氯化钙(calcium chloride)、氯化钾(potassium chloride)、氟化镁(Magnesium fluoride)、氟化锰(Manganese fluoride)、硫酸锰(Manganesesulfate)、硫酸锌(zinc sulfate)、硫酸镁(magnesium sulfate)及硫酸铜(coppersulfate)组成的组中的一种或多种。
已知所述氯化镁、氯化钙及氯化钾参与表皮分化(J Clin Invest.1992February；89(2):530–538.)，并已确认氟化镁、氟化锰、硫酸锰、硫酸锌、硫酸锰及硫酸铜等矿物质成分是在细胞恒定性和皮肤保护中所必需的。
根据本发明的组合物，其中，以组合物总重量为基准，矿物质成分的含量可以为0.001-3重量％。如果小于0.001重量％其效果会微弱，而超过3重量％时会有害于皮肤的恒定性。
作为本发明的有效成分使用的维生素是细胞代谢所必需的成分，其提高表皮障壁功能并在胶原蛋白合成中起重要作用。可在本发明中使用的维生素可以选自由肌醇、抗坏血酸、泛酸、烟酸、叶酸、硫胺素、核黄素及其衍生物组成的组中的一种或多种。
根据本发明的组合物，其中，以组合物总重量为基准，维生素的含量为0.001-3重量％。如果小于0.001重量％其效果会微弱，而超过3重量％时会引起变色、发臭等现象，阻碍组合物的稳定性。
下面通过实施例及测试例进一步具体说明本发明，但本发明不限于此。
实施例1
按下述表1的组成制备模仿细胞外基质的组合物。肌醇和抗坏血酸分别用作维生素B和维生素C；烟酰胺作为维生素B3的烟酸的衍生物使用。硫酸锌、氯化钾、氯化钙、硫酸锰及硫酸铜作为矿物质成分使用。寡糖透明质酸从BIOLAND股份有限公司购买使用，三肽从A&PEP股份有限公司购买使用。
表1
Figure BDA0000706448720000051
Figure BDA0000706448720000061
实验例1
细胞的伤痕恢复实验
将从人体皮肤分离的纤维母细胞在12孔板中每个孔接种105个，并在含有1体积％胎牛血清(FBS)的DMEM(Dubelcco's Modified Eagle Medium；BRL,USA)培养基中将其培养至长到90连接度％左右。利用细的小器件刮去一定宽度的底部除去细胞后添加含有不同浓度的实施例1的组合物的培养液之后，过了14个小时之后用显微镜观察细胞成长的状态，并在图1表示其结果。并且，利用图像J(Image J)软件分别测量1小时后和14小时后的细胞空缺的宽度(细胞损伤面积)后，利用下述数学公式1计算根据不同浓度的相对的伤口恢复能力(％)，并将其结果在图2中表示。
数学公式1
相对的伤口恢复能力(％)＝(1h损伤面积-14h损伤面积)/1h损伤面积×100
根据图1可知，比起只用DMEM培养基处理的对照组，使用所述实施例1的实验组中细胞损伤面积显著减少。并且，如图2所示，可以确认实施例1的相对的伤口恢复能力要比对照组优秀，并且，伤痕恢复能力与浓度呈正比。
由此，本发明的模仿细胞外基质的化妆品组合物可以促进细胞再生，并且快速恢复皮肤损伤。
实验例2
细胞增殖实验
将从40岁的人体皮肤中分离的纤维母细胞在96孔板中每个孔中接种3×103个，并在M106培养基中培养24小时。阴性对照组使用含有1体积％胎牛血清(FBS)的M106培养基，阳性对照组使用含有10体积％FBS的M106培养基，实验组加入了1体积％的实施例1的组合物的含有1体积％的FBS培养基，分别培养细胞48个小时、72个小时之后，利用罗氏(Roche)公司的试剂盒(Cell proliferation Elisa，BrdU)实施BrdU分析(assay)并通过ELISA进行观察，并将其结果表示在图3。
参照图3，可以确认实验组在48小时之后显示出与阳性对照组几乎类似的增殖效果，72小时之后显示出远高于阳性对照组的增殖效果。由此，本发明的模仿细胞外基质的化妆品组合物可以显示出优异的皮肤的纤维母细胞增殖效果。
实验例3
皮肤安全性实验
以40名健康的成人(平均年龄39.6岁，皮肤病变患者除外)为对象，在正常人的的背上用IQ室(chamber)固定提取物20μl，进行斑贴检查，以观察是否引起对实施例1中制造的组合物的过敏性及原发性接触性皮肤炎。贴布涂覆24小时，在除去贴布后显示实验部位，在30分钟、24小时后分别观察实验部位，依据CTFA指南(1981)和Frosch&Kligman(1979)检查基准中修改的检查基准，即，下述表2中提示的基准检查是否刺激皮肤。
表2
分数 特性
0 无反应
1 轻微的红斑，斑疹或扩散
2 中间程度的均匀的红斑
3 伴随浮肿的强红斑
4 伴随浮肿和水疱的强红斑
等级I(无刺激范围):小于1
等级II(轻刺激范围):小于3
等级III(中刺激范围):小于5
等级IV(强刺激范围):大于5
实施如上所述的贴布检查后，本发明的组合物在所有被检人员中其判定分数为0，可以得知这是非常安全的化妆品组合物。
实验例4
人体皮肤上的弹力效果实验
按下述表3表示的组成根据通用制造方法制造含所述实施例1的组合物的霜剂型(实施例2)及不含实施例1的霜剂型(比较例1)。
表3
Figure BDA0000706448720000081
为了测量将制造的实施例2的霜涂覆在脸面时增加皮肤弹力的效果，将35-45岁女性22人为对象，分成2个组，一个组早晚各涂覆一次实施例2的霜，另一个组早晚各涂覆一次比较例1的霜。然后在3周、6周之后利用可测量皮肤弹力的云纹图像测量涂覆前后的颜面倾斜角。云纹图像表示在图4，颜面倾斜角的测量值如下表4所示。下述表4的数值是各组被实验者的平均值。
表4
角度(°) 0周 3周 6周
实施例2 35.42 34.93 33.59
比较例1 36.21 35.97 35.52
如图4及表4所示，使用6周后比较例1显示出减少1.91％的颜面倾斜角，实施例2显示出减少5.17％的颜面倾斜角。由此可知实施例1对倾斜角的改善更有效，并由此可以确认本发明的组合物具有增加皮肤弹力的效果。
实验例5肤色改善实验
只要皮肤细胞的功能恢复并促进再生，则不均匀的肤色改善成均匀。为了确认肤色的改善，将35～45岁女性22人为对象，分成2个组，一个组早晚各涂覆一次实施例2的霜，另一个组早晚各涂覆一次比较例1的霜。3周、6周之后利用面部阶段(Facial Stage)DM-3(Moritex,Japan)设备来评价肤色改善程度。测量针对皮肤亮度的不均匀度，将其结果显示在表5。
表5
肤色不均匀度(％) 0周 3周 6周
实施例2 8.14 8.07 7.81
比较例1 8.12 8.10 8.03
如所述表5所示，肤色不均匀度在6周后的评价中，实施例2减少4.05％，而比较例1减少1.11％。由此，可以确认根据本发明的组合物有效于使肤色均匀。
剂型例1
柔软化妆水
按下述表6中表示的组合，并根据通用的制造方法来制造含所述实施例1的组合物的柔软化妆水剂型。
表6
成分 含量(重量百分比)
甜莱碱 3.0
纳托胶 3.0
纤维素胶 0.005
乙醇 10.0
聚氧乙烯氢化蓖麻油 0.2
醋酸生育酚 2.0
实施例1的组合物 10
防腐剂 微量
色素 微量
香料 微量
纯净水 余量
剂型例2营养化妆水
按下述表7中表示的组合，并根据通用的制造方法来制造含所述实施例1的组合物的营养化妆水剂型。
表7
成分 含量(重量百分比)
鲸蜡硬脂醇辛酸酯 4.0
十八醇十六醇 1.0
亲脂性单硬脂酸酯 1.0
角鲨烷 0.5
实施例1的组合物 5.0
聚山梨酯60 1.5
失水山梨醇倍半油酸酯 0.5
甘油 5.0
三乙醇胺 0.5
羧基乙烯聚合物 0.2
防腐剂 微量
色素 微量
香料 微量
纯净水 余量
剂型例3
霜
按下述表8中表示的组合，并根据通用的制造方法来制造含所述实施例1的组合物的霜剂型。
表8
成分 含量(重量百分比)
甘油硬脂酸酯 3.0
聚山梨酯60 1.0
鲸蜡硬脂醇 2.5
蜜蜡 1.0
角鲨烷 2.0
失水山梨醇倍半油酸酯 0.5
鲸蜡硬脂醇辛酸酯 0.5
液体石蜡 5.0
有效成分混合物 5.0
甘油 3.0
丙二醇 3.0
实施例1的组合物 5.0
防腐剂 微量
色素 微量
香料 微量
纯净水 余量

Claims (9)

1.一种化妆品组合物，该组合物含有三肽、低分子量透明质酸、矿物质成分和维生素的混合物作为唯一有效成分，该化妆品组合物模拟细胞外基质，其中，所述低分子量透明质酸具有500-5000Da的分子量，其中，该化妆品组合物仅含有一种具有甘氨酸-脯氨酸-羟脯氨酸(Gly-Pro-Hyp)序列的三肽，
所述三肽源于植物或通过合成，
以组合物的总重量为基准，三肽的含量为0.001-3重量％，
以组合物的总重量为基准，低分子量透明质酸的含量为0.001-50重量％，
以组合物的总重量为基准，矿物质成分的含量为0.001-3重量％，以及
以组合物的总重量为基准，维生素的含量为0.001-3重量％。
2.根据权利要求1所述的化妆品组合物，其中，以组合物的总重量为基准，低分子量透明质酸的含量为0.001-10重量％。
3.根据权利要求1所述的化妆品组合物，其中，所述矿物质成分选自由氯化镁、氯化钙、氯化钾、氟化镁、氟化锰、硫酸锰、硫酸锌、硫酸镁和硫酸铜组成的组中的一种或多种。
4.根据权利要求1所述的化妆品组合物，其中，所述维生素选自肌醇、抗坏血酸、泛酸、烟酸、叶酸、硫胺素、核黄素中的一种或多种。
5.一种模拟细胞外基质的由三肽、低分子量透明质酸、矿物质成分和维生素组成的混合物在制备用于促进皮肤细胞的再生的化妆品组合物中的用途，
所述低分子量透明质酸具有500-5000Da的分子量，以化妆品组合物的总重量为基准，低分子量透明质酸的含量为0.001-50重量％，
所述三肽源于植物或通过合成，并具有甘氨酸-脯氨酸-羟脯氨酸(Gly-Pro-Hyp)序列，以化妆品组合物的总重量为基准，三肽的含量为0.001-3重量％，
所述矿物质成分选自由氯化镁、氯化钙、氯化钾、氟化镁、氟化锰、硫酸锰、硫酸锌、硫酸镁和硫酸铜组成的组中的一种或多种，以化妆品组合物的总重量为基准，矿物质成分的含量为0.001-3重量％，以及
所述维生素选自肌醇、抗坏血酸、泛酸、烟酸、叶酸、硫胺素、核黄素中的一种或多种，以化妆品组合物的总重量为基准，维生素的含量为0.001-3重量％。
6.一种模拟细胞外基质的由三肽、低分子量透明质酸、矿物质成分和维生素组成的混合物在制备用于恢复损伤的皮肤的化妆品组合物中的用途，
所述低分子量透明质酸具有500-5000Da的分子量，以化妆品组合物的总重量为基准，低分子量透明质酸的含量为0.001-50重量％，
所述三肽源于植物或通过合成，并具有甘氨酸-脯氨酸-羟脯氨酸(Gly-Pro-Hyp)序列，以化妆品组合物的总重量为基准，三肽的含量为0.001-3重量％，
所述矿物质成分选自由氯化镁、氯化钙、氯化钾、氟化镁、氟化锰、硫酸锰、硫酸锌、硫酸镁和硫酸铜组成的组中的一种或多种，以化妆品组合物的总重量为基准，矿物质成分的含量为0.001-3重量％，以及
所述维生素选自肌醇、抗坏血酸、泛酸、烟酸、叶酸、硫胺素、核黄素中的一种或多种，以化妆品组合物的总重量为基准，维生素的含量为0.001-3重量％。
7.一种模拟细胞外基质的由三肽、低分子量透明质酸、矿物质成分和维生素组成的混合物在制备用于抑制皮肤老化的化妆品组合物中的用途，
所述低分子量透明质酸具有500-5000Da的分子量，以化妆品组合物的总重量为基准，低分子量透明质酸的含量为0.001-50重量％，
所述三肽源于植物或通过合成，并具有甘氨酸-脯氨酸-羟脯氨酸(Gly-Pro-Hyp)序列，以化妆品组合物的总重量为基准，三肽的含量为0.001-3重量％，
所述矿物质成分选自由氯化镁、氯化钙、氯化钾、氟化镁、氟化锰、硫酸锰、硫酸锌、硫酸镁和硫酸铜组成的组中的一种或多种，以化妆品组合物的总重量为基准，矿物质成分的含量为0.001-3重量％，以及
所述维生素选自肌醇、抗坏血酸、泛酸、烟酸、叶酸、硫胺素、核黄素中的一种或多种，以化妆品组合物的总重量为基准，维生素的含量为0.001-3重量％。
8.一种模拟细胞外基质的由三肽、低分子量透明质酸、矿物质成分和维生素组成的混合物在制备用于增加皮肤弹力的化妆品组合物中的用途，
所述低分子量透明质酸具有500-5000Da的分子量，以化妆品组合物的总重量为基准，低分子量透明质酸的含量为0.001-50重量％，
所述三肽源于植物或通过合成，并具有甘氨酸-脯氨酸-羟脯氨酸(Gly-Pro-Hyp)序列，以化妆品组合物的总重量为基准，三肽的含量为0.001-3重量％，
所述矿物质成分选自由氯化镁、氯化钙、氯化钾、氟化镁、氟化锰、硫酸锰、硫酸锌、硫酸镁和硫酸铜组成的组中的一种或多种，以化妆品组合物的总重量为基准，矿物质成分的含量为0.001-3重量％，以及
所述维生素选自肌醇、抗坏血酸、泛酸、烟酸、叶酸、硫胺素、核黄素中的一种或多种，以化妆品组合物的总重量为基准，维生素的含量为0.001-3重量％。
9.一种模拟细胞外基质的由三肽、低分子量透明质酸、矿物质成分和维生素组成的混合物在制备用于改善肤色的化妆品组合物中的用途，
所述低分子量透明质酸具有500-5000Da的分子量，以化妆品组合物的总重量为基准，低分子量透明质酸的含量为0.001-50重量％，
所述三肽源于植物或通过合成，并具有甘氨酸-脯氨酸-羟脯氨酸(Gly-Pro-Hyp)序列，以化妆品组合物的总重量为基准，三肽的含量为0.001-3重量％，
所述矿物质成分选自由氯化镁、氯化钙、氯化钾、氟化镁、氟化锰、硫酸锰、硫酸锌、硫酸镁和硫酸铜组成的组中的一种或多种，以化妆品组合物的总重量为基准，矿物质成分的含量为0.001-3重量％，以及
所述维生素选自肌醇、抗坏血酸、泛酸、烟酸、叶酸、硫胺素、核黄素中的一种或多种，以化妆品组合物的总重量为基准，维生素的含量为0.001-3重量％。
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