CN112089741B - 一种刺五加提取物组合物、提取方法及其注射液 - Google Patents

一种刺五加提取物组合物、提取方法及其注射液 Download PDF

Info

Publication number
CN112089741B
CN112089741B CN202011068640.8A CN202011068640A CN112089741B CN 112089741 B CN112089741 B CN 112089741B CN 202011068640 A CN202011068640 A CN 202011068640A CN 112089741 B CN112089741 B CN 112089741B
Authority
CN
China
Prior art keywords
acanthopanax senticosus
injection
acanthopanax
ethanol
extract composition
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN202011068640.8A
Other languages
English (en)
Other versions
CN112089741A (zh
Inventor
方同华
闫久江
陈玉梅
葛一蒙
康宁
姚洪艳
韩冰
佟美鸿
王博
董丽丽
赵涛
夏迎迎
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
HEILONGJIANG ZBD PHARMACEUTICAL CO Ltd
Harbin Zhenbao Pharmaceutical Co ltd
Original Assignee
HEILONGJIANG ZBD PHARMACEUTICAL CO Ltd
Harbin Zhenbao Pharmaceutical Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by HEILONGJIANG ZBD PHARMACEUTICAL CO Ltd, Harbin Zhenbao Pharmaceutical Co ltd filed Critical HEILONGJIANG ZBD PHARMACEUTICAL CO Ltd
Priority to CN202011068640.8A priority Critical patent/CN112089741B/zh
Publication of CN112089741A publication Critical patent/CN112089741A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN112089741B publication Critical patent/CN112089741B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/25—Araliaceae (Ginseng family), e.g. ivy, aralia, schefflera or tetrapanax
    • A61K36/254—Acanthopanax or Eleutherococcus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/02—Inorganic compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/08—Solutions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/10—Preparation or pretreatment of starting material
    • A61K2236/15—Preparation or pretreatment of starting material involving mechanical treatment, e.g. chopping up, cutting or grinding
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/30—Extraction of the material
    • A61K2236/33—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones
    • A61K2236/331—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones using water, e.g. cold water, infusion, tea, steam distillation, decoction
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/50—Methods involving additional extraction steps
    • A61K2236/55—Liquid-liquid separation; Phase separation

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)

Abstract

本发明属于中药领域，具体涉及一种刺五加提取物组合物及其提取方法，以及刺五加注射液的制备方法，其组分包括果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、绿原酸、隐绿原酸、新绿原酸、刺五加苷B和刺五加苷E，其制备方法为将刺五加药材经水提醇沉后，用大孔吸附树脂吸附，再用一定浓度的乙醇洗脱所得，所述刺五加组合物用于治疗心血管系统疾病。

Description

一种刺五加提取物组合物、提取方法及其注射液
技术领域
本发明涉及一种刺五加提取物，具体涉及刺五加提取物组合物、提取方法以及其注射液的制备方法。
背景技术
刺五加为五加科植物刺五加[Acanthopanax senticosus(Rupr.et Maxim.)Harms]的干燥根和根茎或茎，主要分布于黑龙江、吉林、辽宁、河北和山西，其味辛、微苦、性温，归脾、肾、心经，具有益气健脾、补肾安神的功效。
现代药理学研究表明，刺五加具有保护中枢神经系统和心脑血管系统、抗肿瘤、抗衰老、抗辐射、增强机体免疫力等作用，尤其在治疗缺血性中风方面疗效显著。刺五加含有的活性成分较多，主要包括三萜、多糖、黄酮、木脂素、香豆素，以及多种微量元素。刺五加苷为刺五加主要的活性物质，其酚苷类化合物主要包括刺五加苷A，刺五加苷B，刺五加苷B1，刺五加苷C，刺五加皆D和刺五加苷E，其糖类组分包括葡萄糖、果糖和阿拉伯糖等。剌五加苷B具有抗疲劳、增强免疫力、护肝和释放乙酰胆碱，增加胰岛素分泌等作用；剌五加苷E具有缓解压力、抗焦虑、抗应激、抗溃疡和抗疲劳等作用；异秦皮啶是刺五加苷B1的苷元，具有明显的抗炎和抗菌作用；刺五加总苷还具有明显的抗疲劳及抑制肿瘤细胞生长的作用。
中药由许多不同化学成分组成，而这些不同成分的有机组合不同于单独各成分的简单加和，因此对中药多种活性成分的提取工艺研究就显得尤为重要。中国专利CN1285344C公开了将刺五加药材先用乙醇回流提取，提取液用大孔吸附树脂吸附，用水洗脱去杂质后，再用20％-70％的乙醇洗脱，收集20％-70％的乙醇洗脱部位，减压回收乙醇至干，得刺五加总苷类组分；将醇提后的刺五加药渣，用水加热提取三次，水提液合并，浓缩，减压回收乙醇至干，得刺五加总苷类组分；将醇提后的刺五加药渣，用水加热提取三次，水提液合并，浓缩，反复醇沉三次，沉淀加水使溶解，配成1％的溶液，过截留分子量介于6000-20万的中空纤维柱超滤，截留浓缩液真空低温干燥或冷冻干燥，得到多糖有效组分。该方法是分开提取刺五加苷类和多糖类成分，步骤较多，工艺较繁琐，提取周期长。中国专利CN201610648413公开了一种刺五加组合物的提取方法，先是水提醇沉，然后采用乙醇/盐双水相萃取方法对浓缩滤液进行萃取，收集乙醇相，减压蒸馏，真空干燥，即得。该方法制得的提取物组合物不含糖类、新绿原酸、隐绿原酸等有效成分。研究表明刺五加糖类具有免疫调节作用，绿原酸类具有抗菌解热、抗血栓、抗炎、抑制血小板聚集等作用。中药药效物质是一个复杂的化学成分体系，具有多成分多靶点的中药提取物组合物是中医药治病的主要形式，所以在刺五加提取时，兼顾糖类与绿原酸类成分是非常必要的。
发明内容
本发明的目的是提供一种工艺简单、能解决上述不足的刺五加提取物组合物、提取方法及其注射液的制备方法，该药物在治疗缺血性再灌注损伤方面效果好。
本发明的目的通过以下技术方案予以实现的：
一种用于治疗心脑血管疾病的刺五加提取物组合物，所述组合物含有的成分有果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、绿原酸、隐绿原酸、新绿原酸、刺五加苷B和刺五加苷E。
优选地，所述组合物中的果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、刺五加苷B、刺五加苷E、新绿原酸、绿原酸和隐绿原酸的含量比为0.50-5.00：0.50-5.00：0.40-5.00：0.50-5.00：0.05-1.00：0.10-1.00：0.05-0.50：0.05-0.50：0.05-0.50。
再优选地，所述组合物中的果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、刺五加苷B、刺五加苷E、新绿原酸、绿原酸和隐绿原酸的含量比为0.56-4.85：0.78-4.71：0.45-4.69：0.78-4.71：0.12-0.95：0.15-0.85：0.05-0.45：0.08-0.45：0.15-0.45。
本发明还涉及上述刺五加提取物组合物的提取方法，是按照以下步骤制备：
(1)前处理：将刺五加的根和茎进行粉碎，制成粉碎料；
(2)水提：将(1)中加水回流提取，过滤，减压浓缩得浓缩膏；
(3)醇沉：将(2)中的浓缩膏加乙醇，静置，过滤收集滤液，减压回收乙醇，得醇沉膏；
(4)纯化：将(3)中的醇沉膏调节pH值5-7，用大孔树脂柱进行吸附，然后用50％-70％乙醇洗脱，收集洗脱液，减压浓缩，即得。
优选地，所述水提将(1)中粉碎料加入8-12倍量的水回流提取三次，每次1-2小时，过滤合并滤液，60℃减压浓缩至相对密度为1.10，得浓缩膏；所述醇沉将(2)中的浓缩膏加乙醇至含醇量85％，静置12小时，过滤收集滤液，减压回收乙醇，得醇沉膏；所述步骤纯化将(3)中的醇沉膏调节pH值5-7，用大孔树脂柱进行吸附，上液量流速为2BV/h吸附，收集尾液，然后用60％乙醇洗脱，收集洗脱液，减压浓缩，即得。
本发明还涉及一种刺五加注射液，所述注射液由上述刺五加提取物组合物和药学上可接受的辅料制成。
本发明还涉及一种刺五加注射液，所述注射液由上述提取方法提取得到的刺五加提取液和药学上可接受的辅料制成。
优选地，所述的药学上可接受的辅料为氯化钠和注射用水。
本发明还涉及上述刺五加注射液的制备方法，所述的刺五加提取物组合物加入氯化钠煮沸，然后加入供注射用活性炭继续煮沸，最后药液通过钛棒过滤器过滤，加注射用水灌装、灭菌即得；其中，加入活性炭与刺五加提取物组合物的质量体积比为0.003g/ml。
优选地，所述的制备方法中，所加入的供注射用活性炭在98～100℃下继续煮沸30分钟，药液冷却至30～40℃后，通过钛棒过滤器，过滤，加注射用水稀释，灌装，灭菌。
更优选地，灌装后对所述的刺五加注射液在115℃下灭菌30分钟。
本发明的有益效果：
本发明具有工艺步骤少、简单易操作、纯化技术简捷等优点，通过大孔树脂进行吸附，洗脱纯化，去除提取液中鞣质及多糖类大分子等过敏性物质，最大限度的保留有效成分。所得的提取物组合物中含有果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、绿原酸、隐绿原酸、新绿原酸、刺五加苷B和刺五加苷E等多种有效成分。本发明刺五加注射液对脑缺血性再灌注模型大鼠具有治疗作用，能够明显抑制血小板聚集，并抑制炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α，减轻大鼠脑动脉缺血再灌注后出现的脑水肿。
具体实施方式
还可进一步通过实施例来理解本发明，其中所述实施例说明了一些制备或使用方法。然而，要理解的是，这些实施例不限制本发明。现在已知的或进一步开发的本发明的变化被认为落入本文中描述的和以下要求保护的本发明范围之内。
实施例1
刺五加提取物组合物的制备：
(1)粉碎：将刺五加的根和茎进行粉碎，制成粉碎料；
(2)将刺五加粉碎料5kg，加12倍量的水回流提取三次，每次1小时，过滤，合并滤液，60℃下减压浓缩至相对密度为1.10的浓缩膏；
(3)加乙醇至含醇量至85％，静置12小时，过滤收集滤液，减压回收乙醇，得醇沉膏；
(4)将醇沉膏调节pH值至5.0，用大孔树脂柱进行吸附，上液量流速为2BV/h吸附，收集尾液，然后用60％乙醇洗脱，洗脱液用量为2BV，流速为1.5BV/h，收集洗脱液，减压浓缩，即得刺五加提取物组合物。
刺五加注射液的制备：
将上述制得的刺五加提取物组合物加入氯化钠煮沸30分钟，加入与刺五加提取物组合物质量体积比为0.003g/ml的供注射用活性炭，在100℃下继续煮沸30分钟，药液冷却至30℃，通过钛棒过滤器，过滤，加注射用水稀释至10L，灌装，115℃灭菌30分钟，其中加入的氯化钠与注射液的质量体积比为0.7％g/ml。
实施例2
刺五加提取物组合物的制备：
(1)粉碎：将刺五加的根和茎进行粉碎，制成粉碎料；
(2)将刺五加粉碎料5kg加入11倍量的水回流提取三次，每次1.5小时，过滤，合并滤液，60℃下减压浓缩至相对密度为1.10的浓缩膏；
(3)加乙醇至含醇量至85％，静置12小时，过滤收集滤液，减压回收乙醇，得醇沉膏；
(4)将醇沉膏调节pH值5.5，用大孔树脂柱进行吸附，上液量流速为2BV/h吸附，收集尾液；然后用50％的乙醇洗脱，洗脱液用量为2BV，流速为1.5BV/h，收集洗脱液，减压浓缩，即得。
刺五加注射液的制备：
将上述制得的刺五加提取物组合物加入氯化钠煮沸30分钟，加入与刺五加提取物组合物质量体积比为0.003g/ml的供注射用活性炭，在100℃下继续煮沸30分钟，药液冷却至35℃，通过钛棒过滤器过滤，加注射用水稀释至10L，灌装，在115℃下灭菌30分钟，其中加入的氯化钠与注射液的质量体积比为0.7％g/ml。
实施例3
刺五加提取物组合物的制备：
(1)粉碎：将刺五加的根和茎进行粉碎，制成粉碎料；
(2)将刺五加粉碎料5kg加入10倍量的水回流提取三次，每次2小时，过滤合并滤液，60℃下减压浓缩至相对密度为1.10的浓缩膏；
(3)加乙醇至含醇量至85％，静置12小时，过滤收集滤液，减压回收乙醇，得醇沉膏；
(4)将醇沉膏调节pH值6.0，用大孔树脂柱进行吸附，上液量流速为2BV/h吸附，收集尾液；然后用65％的乙醇洗脱，洗脱液用量为2BV，流速为1.5BV/h，收集洗脱液，减压浓缩，即得。
刺五加注射液的制备：
将上述制得的刺五加提取物组合物加入氯化钠煮沸30分钟，加入与刺五加提取物组合物质量体积比为0.003g/ml的供注射用活性炭，在100℃下继续煮沸30分钟，药液冷却至40℃，通过钛棒过滤器过滤，加注射用水稀释至10L，灌装，在115℃下灭菌30分钟，其中加入的氯化钠与注射液的质量体积比为0.7％g/ml。
实施例4
刺五加提取物组合物的制备：
(1)粉碎：将刺五加的根和茎进行粉碎，制成粉碎料；
(2)将刺五加粉碎料5kg加入10倍量的水回流提取三次，每次2小时，过滤合并滤液，60℃下减压浓缩至相对密度为1.10的浓缩膏；
(3)加乙醇至含醇量至85％，静置12小时，过滤收集滤液，减压回收乙醇，得醇沉膏；
(4)将醇沉膏调节pH值7.0，用大孔树脂柱进行吸附，上液量流速为2BV/h吸附，收集尾液；然后用70％的乙醇洗脱，洗脱液用量为2BV，流速为1.5BV/h，收集洗脱液，减压浓缩，即得。
刺五加注射液的制备：
将上述制得的刺五加提取物组合物加入氯化钠煮沸30分钟，加入与刺五加提取物组合物质量体积比为0.003g/ml的供注射用活性炭，在100℃下继续煮沸30分钟，药液冷却至35℃，通过钛棒过滤器过滤，加注射用水稀释至10L，灌装，在115℃下灭菌30分钟，其中加入的氯化钠与注射液的质量体积比为0.7％g/ml。
测试例1
采用高效液相色谱法(中国药典2015年版四部通则0512)测定实施例1-4刺五加注射液中的有效成分的含量。
色谱条件与系统适用性试验应用ACQUITY UPLC HSS T3(2.1×100mm,1.8μm)色谱柱；以0.5﹪甲酸-40﹪乙腈溶液(V/V)为流动相A，以0.5﹪甲酸溶液(V/V)为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；柱温为35℃；流速为每分钟0.25ml；检测波长：胞苷、尿苷、腺苷、鸟苷、5-羟甲基糠醛、原儿茶酸、刺五加苷B、刺五加苷E为270nm，绿原酸、隐绿原酸、新绿原酸、异嗪皮啶为325nm。
表1流动相梯度
Figure BDA0002711342830000051
Figure BDA0002711342830000061
对照品溶液的制备取胞苷、尿苷、腺苷、鸟苷、5-羟甲基糠醛、原儿茶酸、绿原酸、隐绿原酸、新绿原酸、异嗪皮啶、刺五加苷B、刺五加苷E对照品适量，精密称定，分别加10﹪甲醇溶液超声溶解定容，必要时适当加热助溶，制成胞苷20μg、尿苷44μg、腺苷14μg、鸟苷24μg、5-羟甲基糠醛40μg、原儿茶酸40μg、绿原酸100μg、隐绿原酸100μg、新绿原酸110μg、异嗪皮啶40μg、刺五加苷B 300μg、刺五加苷E 90μg的混合溶液，即得。
供试品溶液的制备精密量取实施例1～4中刺五加注射液2.5ml，置5ml量瓶中，加20﹪甲醇溶液稀释至刻度，摇匀，用0.22μm的微孔滤膜滤过，取续滤液即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各3μl，注入超高压液相色谱仪，测定，即得。
表2测试刺五加注射液有效成分的含量
Figure BDA0002711342830000062
测试例2
研究刺五加注射液对脑缺血性再灌注模型大鼠的治疗作用
模型制备：SD大鼠，禁食过夜，自由饮水。实验当天用异氟烷气体麻醉并维持。仰卧位固定，沿颈正中线切开皮肤，暴露右侧颈总动脉，小心分离颈总动脉分叉至颅底部的血管周围的神经及筋膜，分离颈外动脉分支枕动脉、甲状腺上动脉、舌动脉和上颚上颌动脉，结扎，剪断。从颈外动脉游离端插入3#丝线(直径0.260mm)，从颈外动脉远心端将尼龙线导入到颈内动脉，插至Willis环大脑中动脉处，以有效阻断大脑中动脉，插入的尼龙线长度距颈总动脉分叉处18～20mm。然后将颈外动脉游离端连同腔内尼龙线一并结扎，以防出血。逐层缝合皮下筋膜和皮肤，肌肉注射青霉素防止感染。假手术组动物仅分离出颈内动脉。
MCAO后2h小心抽出颈内动脉血管腔内的尼龙线使颈内动脉再灌注，10min后进行神经缺陷评分，有明显神经功能缺陷者(>8分)为造型成功。
表3大鼠神经功能缺陷评分标准
Figure BDA0002711342830000071
分组及给药：组1为假手术组，组2为模型对照组，分别给予生理盐水；组3为受试药组给予CN106038580A，组4为受试药组给予本发明实施例3的刺五加注射液45mg/kg，相当于临床给药等效剂量。
给药方式：采用尾静脉输注给药的方式给药，给药体积以最大给药体积计算，即均定容成2.25ml/100g，输注时间120min，每天一次，连续3天。
一、血小板聚集功能和凝血参数测定
末次给药后30min腹腔注射戊巴比妥钠60mg/kg麻醉，腹主动脉取血，3.2％枸橼酸钠抗凝，全血与抗凝剂体积之比9:1。800rpm离心10min制备富血小板血浆(PRP)，3000rpm离心10min制备贫血小板血浆(PPP)。以PPP调PRP，使其血小板计数保持在3.5～4.0×108个/mL。按比浊法测定血小板聚集性。取250μL PRP加入比色杯中，置血小板聚集仪预温孔中，37℃温孵10min，然后进行实验。以PPP调100％聚集率，PRP调0％聚集率，在连续搅拌下加入诱导剂二磷酸腺苷(ADP)，其终浓度分别约为5μM，测定血小板最大聚集功能。结果表明，组3及组4治疗后血小板聚集功能得到不同程度抑制，同等剂量下，组4较组3作用效果强，二者差异P<0.05，具有统计学意义。具体结果见表4。
表4本发明药物对血小板聚集功能和凝血参数的影响
Figure BDA0002711342830000081
注：1.与假手术组比较：P>0.05；2.与模型对照组比较：*P<0.05；3.组4与组3比较：△P<0.05。
二、炎性因子检测
大鼠经腹主动脉取血，4℃，3000rpm×10min离心，取上层血清酶联免疫法测定IL-1β、IL-6、TNFα。
模型对照组缺血再灌注3d后IL-1β、IL-6、TNFα水平均明显升高。组3、组4治疗3d后能明显抑制炎症因子IL-1β，组4还可抑制IL-6、TNFα。具体见表5。
表5本发明药物对炎性因子的影响
Figure BDA0002711342830000082
注：1.与假手术组比较：△P<0.05，△△P<0.01，△△△P<0.001；2.与模型对照组比较：*P<0.05。
三、脑水肿测量
脑片称重后，置于50℃烘箱中烤至恒重，称量其干重，计算脑含水量。
大鼠大脑中动脉缺血再灌注后出现明显脑水肿。实验表明，组3及组4可减轻脑水肿，相同剂量下，组4较组3作用稍强。具体见表6。
表6本发明药物对脑水肿的影响
Figure BDA0002711342830000091
注：1.与假手术组比较：△P<0.05；2.与模型对照组比较：*P<0.05；3.等剂量组3与组4比较：P>0.05。

Claims (5)

1.一种用于治疗心脑血管疾病的刺五加提取物组合物，所述刺五加提取物组合物中的果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、刺五加苷B、刺五加苷E、新绿原酸、绿原酸和隐绿原酸为1.76、0.78、0.45、4.71、0.45、0.64、0.45、0.44、0.38mg/ml；
所述的刺五加提取物组合物的方法，包括如下步骤：
(1)粉碎：将刺五加的根和茎进行粉碎，制成粉碎料；
(2)将刺五加粉碎料加入10倍量的水回流提取三次，每次2小时，过滤合并滤液，60℃下减压浓缩至相对密度为1.10的浓缩膏；
(3)加乙醇至含醇量至85％，静置12小时，过滤收集滤液，减压回收乙醇，得醇沉膏；
(4)将醇沉膏调节pH值6.0，用大孔树脂柱进行吸附，上液量流速为2BV/h吸附，收集尾液；然后用65％的乙醇洗脱，洗脱液用量为2BV，流速为1.5BV/h，收集洗脱液，减压浓缩，即得。
2.一种制备权利要求1所述的刺五加提取物组合物的方法，包括如下步骤：
(1)粉碎：将刺五加的根和茎进行粉碎，制成粉碎料；
(2)将刺五加粉碎料加入10倍量的水回流提取三次，每次2小时，过滤合并滤液，60℃下减压浓缩至相对密度为1.10的浓缩膏；
(3)加乙醇至含醇量至85％，静置12小时，过滤收集滤液，减压回收乙醇，得醇沉膏；
(4)将醇沉膏调节pH值6.0，用大孔树脂柱进行吸附，上液量流速为2BV/h吸附，收集尾液；然后用65％的乙醇洗脱，洗脱液用量为2BV，流速为1.5BV/h，收集洗脱液，减压浓缩，即得。
3.一种刺五加注射液，其特征在于，所述注射液由权利要求1所述刺五加提取物组合物或权利要求2所述的刺五加提取物组合物的制备方法制备得到的刺五加提取物组合物和药学上可接受的辅料制成。
4.根据权利要求3所述的刺五加注射液，其特征在于，所述的辅料为氯化钠和注射用水。
5.一种如权利要求3或4所述的刺五加注射液的制备方法，其特征在于，将所述刺五加提取物组合物加入氯化钠煮沸30分钟，加入与刺五加提取物组合物质量体积比为0.003g/ml的供注射用活性炭，在100℃下继续煮沸30分钟，药液冷却至40℃，通过钛棒过滤器过滤，加注射用水稀释至10L，灌装，在115℃下灭菌30分钟。
CN202011068640.8A 2020-09-30 2020-09-30 一种刺五加提取物组合物、提取方法及其注射液 Active CN112089741B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202011068640.8A CN112089741B (zh) 2020-09-30 2020-09-30 一种刺五加提取物组合物、提取方法及其注射液

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202011068640.8A CN112089741B (zh) 2020-09-30 2020-09-30 一种刺五加提取物组合物、提取方法及其注射液

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN112089741A CN112089741A (zh) 2020-12-18
CN112089741B true CN112089741B (zh) 2022-04-12

Family

ID=73783074

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202011068640.8A Active CN112089741B (zh) 2020-09-30 2020-09-30 一种刺五加提取物组合物、提取方法及其注射液

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN112089741B (zh)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN115627268A (zh) * 2022-10-31 2023-01-20 东北农业大学 一种固定化酶联合高压提取刺五加苷b的方法

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1285344C (zh) * 2003-12-27 2006-11-22 天津天士力之骄药业有限公司 一种制备刺五加注射制剂的方法
CN104739908A (zh) * 2013-12-30 2015-07-01 哈尔滨珍宝制药有限公司 一种刺五加提取物及其制备方法
CN106038580B (zh) * 2016-08-09 2019-02-26 哈尔滨珍宝制药有限公司 刺五加组合物及其相关应用
CN106124682B (zh) * 2016-08-23 2017-09-19 哈尔滨珍宝制药有限公司 一种刺五加注射液的成分检验方法
CN106727797B (zh) * 2016-11-11 2020-04-17 哈尔滨珍宝制药有限公司 一种提取刺五加的方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN112089741A (zh) 2020-12-18

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN102600219B (zh) 黄蜀葵花总黄酮提取物及其制备方法
CN104435034B (zh) 一种三七总皂苷及其制备方法
CN112089741B (zh) 一种刺五加提取物组合物、提取方法及其注射液
CN100584348C (zh) 一种抗肝炎的药物组合物
CN107349244B (zh) 丙二酰基人参皂苷的提取方法
CN100496527C (zh) 一种灯盏细辛注射制剂的制备方法及其应用
Koo et al. Extraction of hypotensive principles from seeds of Cassia tora
CN101293009A (zh) 药物组合物
CN112250655B (zh) 两种新的环状二苯基庚烷类化合物及其制备方法和用途
CN101564423B (zh) 一种治疗心脑血管疾病的药物及其制备方法
CN100563682C (zh) 一种由山楂叶与红景天制成的药物组合物及其制备方法
CN101049355B (zh) 一种由红花与山楂叶制成的药物组合物
CN1977886B (zh) 一种由苦参素、灵芝和黄芪制成的药物组合物
CN116098970A (zh) 一种脉络舒通提取物的制备方法
CN108014152B (zh) 一种舒张子宫平滑肌的药物组合物及其制备方法
CN100418534C (zh) 一种治疗心脑血管疾病的中药有效部位复方制剂及其制备方法
CN101357213B (zh) 复方斑蝥液体制剂及其制备方法
CN106822228B (zh) 一种山豆根多糖有效部位及其制备方法
CN101721468B (zh) 一种丹参总酚酸制备方法
CN106420850B (zh) 银杏叶组合物及其在制备舒血宁注射液中的应用
CN114588187B (zh) 一种治疗白内障的中药总黄酮提取物及其组合物、制备方法和医药用途
CN104586925B (zh) 红背叶根提取物及制备方法和在制备治疗乙肝药物的应用
CN101085226B (zh) 一种脉络宁注射用粉针剂及其制备方法
CN115192645B (zh) 一种中药组合物及其制备方法和应用
CN116570637A (zh) 一种改善微循环的刺五加注射液及其制备工艺

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant