CN112074326B - 基于多咖啡酰基奎宁酸的组合物、其化妆品用途和包含其的化妆品组合物 - Google Patents

Abstract

披露了一种组合物(C₁)，每100％其质量包含：a)‑从按质量计60.0％至按质量计75.0％的有机溶剂(OS₁)，该有机溶剂选自1，2‑丙二醇、1，3‑丙二醇、1，4‑丁二醇、1，3‑丁二醇、1，2‑丁二醇、2‑甲基‑2，4‑戊二醇、1，6‑己二醇、1，8‑辛二醇、或这些化合物的混合物；b)‑从按质量计0.1％至按质量计2.0％的组合物(ES)，该组合物包含表示为1‑O‑(2‑咖啡酰基)苹果酰基‑3，5‑二‑O‑咖啡酰基奎宁酸的质量当量的、大于或等于200mg/g的按质量计的量x₁的至少一种具有通式(I)的化合物：其中Q₁、Q₂、Q₃、Q₄和Q₅彼此独立地表示羟基或其盐或选自以下的基团：咖啡酰基、苹果酰基、咖啡酰苹果酰基和苹果酰咖啡酰基，应理解，这些基团Q₁、Q₂、Q₃、Q₄和Q₅中的至少一个既不表示‑OH基团也不表示其盐；以及c)‑从按质量计20.0％至按质量计35.0％水。还披露了组合物(C₁)作为保湿化妆品活性剂的用途。

Description

基于多咖啡酰基奎宁酸的组合物、其化妆品用途和包含其的 化妆品组合物

本发明涉及一种包含多取代的奎宁酸衍生物的组合物、并且更特别地涉及一种包含所述衍生物的植物牛蒡(Arctium lappa)的提取物，一种制备该组合物的方法，以及该包含多取代的奎宁酸衍生物的组合物用于制备旨在用于保湿皮肤、并且更特别地是人或动物皮肤的表皮的局部用配制品的用途。

本发明主要适用于化妆品和皮肤药物领域，而且还适用于纺织工业领域，例如用于处理编织或针织的合成或天然纺织品纤维，或者适用于造纸工业领域，例如用于制造卫生或家用纸。

皮肤是人体的非典型器官，就其程度而言非常薄，但也是个体最重的器官。皮肤的特征之一在于以下事实：它是界面器官、边界器官，在内部介质(人体)和外部环境之间。出于这个原因，并且在覆盖它并且栖息于它的菌群的情况下，皮肤是人体的第一道保护屏障。

由于其与外部环境交界的位置，皮肤经受多种日常应激，例如与服装接触、温度变化、湿度水平变化、压力变化，或者甚至经受攻击因素，例如与某些具有或可能具有非常酸性、或非常碱性或刺激性性质的化学品接触，与被认为是污染剂的化学品接触。

皮肤由多层的不同组织组成：

-表皮，该表皮由角质形成细胞组成，是皮肤最外面的部分，然后是

-真皮，该真皮是结缔组织，该结缔组织主要由成纤维细胞和细胞外基质组成，以及

-下皮，该下皮由脂肪细胞组成，是最深的部分和最远离外部环境的部分。

皮肤为了它庇护的整个系统的利益而执行不同功能，其中包括以下各项：

-机械屏障功能，以确保身体内部介质的完整性，

-针对分泌基于水、盐和酸性废物的汗液的排泄功能，

-调节体温的功能，并且含有许多其他调节机制，例如其适应和保护免受紫外线辐射的机制(通过产生黑色素而进行适应性色素着色)，例如通过巨噬细胞或树突细胞的存在进行免疫监测的系统。

人皮肤还构成了其他人看到的第一印象。

因此，改进皮肤的外观是人们持续关注的主题。皮肤是通常与年轻相关的健康状态的反映，并且相反地，是疲劳和/或老化状态的反映。因此，保持和改善皮肤的最外层(即表皮)的状态是化妆品工业进行的研究的主要焦点。

在表皮的外围是上角质层，称为角化层(stratum corneum)，它是表皮的第一层以经受外部来源的应激，如外部气候条件(温度、压力、湿度)或机械应激的变化。

角化层更特别地与皮肤微生物群接触。

出于本专利申请的目的，术语“皮肤微生物群”指示生活在皮肤表面上的专门性或机会性微生物群体，例如细菌、真菌、酵母等。

不能以特定和普遍的方式定义针对所有个体的皮肤微生物群。自2007年启动美国国立卫生研究院(National Institute of Health)的“人类微生物组计划(HumanMicrobiome Project，HMP)”以来，研究人员已经能够观察到人类微生物群的大的地形变化以及个体之间的巨大差异。

至少鉴定出十九个门，其中四个主要门是放线菌门(Actinobacteria)(51.8％)、厚壁菌门(Firmicutes)(24.4％)、变形菌门(Proteobacteria)(16.5％)和拟杆菌门(Bacteroidetes)(6.3％)。主要鉴定的属是棒状杆菌属(Corynebacterium)、丙酸杆菌属(Propionibacterium)和葡萄球菌属(Staphylococcus)。每个组的丰度强烈取决于不同的地点。从皮肤上分离的真菌生物属于马拉色氏霉菌属物种(Malassezia spp)。此外，蠕形螨属(Demodex)的螨也存在并驻留在毛囊皮脂单位中，最通常是面部表面的毛囊皮脂单位中。

这种微生物群既以皮肤排泄的分子(脂质、蛋白质等)为食，又以微生物群落分泌的化合物为食，这表明这种微生物群内存在真正的相互作用。此外，与宿主的这种关系构成了真正的共生关系。

当细菌与宿主的皮肤粘膜覆盖层(covering)接触而没有引起损害时，它们可能是共生的。然后在皮肤和粘膜的单个与多种共生菌群之间建立平衡，但是这种平衡不断受到角化层所经受的物理或化学攻击(例如污染、温度变化、紫外线辐射、洗涤剂表面活性剂的密集使用、应激等)的威胁。除了这些共生细菌之外，还有不想要的和/或致病性暂居机会性细菌。

表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis/S.epidermidis)构成超过90％的角化层中存在的、需氧条件下的常驻菌群。常驻菌群也由属于放线菌门划分的厌氧细菌如痤疮丙酸杆菌(Propionibacterium acnes/P.acnes)组成，该痤疮丙酸杆菌经常在皮脂区(例如背部、面部和头皮)中发现。

然而，正常的皮肤菌群为宿主构成了防御，细菌组成的增加或减少(生态失调)可能导致生理失衡，例如，通过减慢表皮中所含的角质形成细胞的分化，这导致皮肤屏障功能的弱化，并且因此，致使角化层更容易脱水和干燥。

这是改善人皮肤的外观或维持令人满意的外观特别地在于维持或增强表皮的屏障功能以维持或获得处于最佳且令人满意水平的角化层的保湿状态的原因。这也使可能避免与皮肤的干燥相关的关学和生理学的缺陷。

已经提供了很多方案来解决由角化层的脱水引起的皮肤干燥的问题，特别地是通过开发保湿组合物。

可以通过使皮肤与具有“保湿作用”的化合物接触，来设想皮肤、并且更特别地是角化层的保湿的改善或保持。

术语“保湿作用”意指由于化学物质或化学组合物局部施用至待处理皮肤的表面上而导致的角化层的保湿度的增加。

以下是皮肤用保湿剂，并且更特别地用于非常干燥和结构破坏的皮肤：

-闭塞剂，其特征在于它们在皮肤的表面形成不透性膜，并且因此大大降低在表皮表面的水蒸发的能力。此类试剂的实例包括矿物油(例如凡士林或液体石蜡)、甘油、乳木果油(牛油果油)、蜂蜡(白蜂蜡)、某些植物油(如小麦胚芽油、椰子油、可可油)、羊毛脂和硅酮衍生物；

-软化剂，其特征在于它们填充存在于角质细胞(表皮的角质层的细胞)之间的胞间隙的能力；它们还限制水从表皮蒸发，但是程度低于闭塞剂。此类试剂的实例包括脑酰胺、亚油酸和某些植物油(如甜杏仁油或荷荷芭油)；

-成膜剂，其特征在于它们与水结合，以形成半透性水凝胶的能力；它们因此参与调节水从角化层蒸发。此类试剂的实例包括胶原、弹性蛋白、DNA、果胶、明胶、壳聚糖、或糖胺聚糖(如透明质酸)；

-保湿剂，它们是亲水物质，其特征在于它们的高吸湿能力，即它们保留水的能力。因此它们有助于使角化层能够保留它含有的水，并且保留由化妆品配方提供的水。此类试剂的实例包括尿素、甘油、乳酸、氨基酸、乳酸钠、丙二醇、聚乙二醇、α-羟基酸或山梨醇。甘油、尿素和乳酸是在保湿化妆品组合物中最频繁使用的保湿剂，最特别地是甘油，因为其极具竞争性的价格。

然而，某些保湿剂如甘油，也具有即时闭塞效果，这是正常皮肤不希望的，正常皮肤的屏障功能不是不足的。此外，在特别敏感的人的情况下，它们中的一些，如甘油，引起某些皮肤和粘膜刺激。

在因其对人类微生物群起作用而可被使用的植物提取物中，可以提及牛蒡(burdock)(或牛蒡(Arctium lappa))叶的冻干提取物，已经证明该冻干提取物具有抗细菌活性，并且更特别是对口腔微生物的活性，该活性表现出对与牙髓病原体相关的细菌(如枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、白色念珠菌(Candida albicans)、嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)、和铜绿假单胞菌(Lactobacillus acidophilus))是更有效的(1)。

公开号为CN 104304955 A的中国专利申请披露了一种复杂组合物，其通过混合各种植物部位(其中有牛蒡根)、随后离心以获得此植物部位的复杂混合物汁来获得。该专利申请还披露了长期使用的草药，如牛蒡根，因为它们对肾脏、皮肤保湿和延缓衰老具有有益作用。

公开号为CN 105232438 A的中国专利申请披露了用于保湿皮肤的面膜，该面膜包含复杂混合物，该复杂混合物中有许多根提取物，其中有牛蒡根提取物。

公开号为CN 107157800 A的中国专利申请披露了包含来源于牛蒡根的多糖的复杂配制品，其具有保湿、抗细菌、抗炎、抗衰老以及抗疲劳作用。

公开号为CN 106074663 A的中国专利申请披露了一种植物提取物的组合物，其包含米洛木(milo wood)提取物、牛蒡根提取物和金银花提取物，并且更特别地描述了牛蒡根提取物通过抑制不同原因(外部应激或遗传因素)诱导的炎症因子、改善皮肤的免疫活性和抗氧化活性、舒缓并修复皮肤来治疗皮肤干燥、急性瘙痒、炎症、疤痕以及其他症状。

在他们关于改善皮肤保湿的研究的上下文中，诸位发明人专注于开发一种新型组合物，其包含对人皮肤的保湿具有积极作用的多取代的奎宁酸(或PSQ)。

根据第一方面，本发明的主题是组合物(C₁)，该组合物每100％其质量包含：

a)-从按质量计60.0％至按质量计75.0％的有机溶剂(OS1)，该有机溶剂选自1，2-丙二醇、1，3-丙二醇、1，4-丁二醇、1，3-丁二醇、1，2-丁二醇、2-甲基-2，4-戊二醇、1，6-己二醇、1，8-辛二醇、或这些化合物的混合物；

b)-从按质量计0.1％至按质量计2.0％的组合物(ES)，该组合物包含表示为1-O-(2-咖啡酰基)苹果酰基-3，5-二-O-咖啡酰基奎宁酸的质量当量的、大于或等于200mg/g的按质量计的量x₁的至少一种具有通式(I)的化合物：

其中Q₁、Q₂、Q₃、Q₄和Q₅彼此独立地表示羟基或其盐或选自以下的基团：

(i)-式(II)的咖啡酰基：

(ii)-式(IIIa)或(IIIb)的苹果酰基：

(iii)-式(IVa)或(IVb)的咖啡酰苹果酰基(caffeoyl maloyl radical)：

(iv)-式(Va)、(Vb)、(Vc)或(Vd)的苹果酰咖啡酰基(maloyl caffeoyl radical)，

应理解，这些基团Q₁、Q₂、Q₃、Q₄和Q₅中的至少一个既不表示-OH基团也不表示其盐；以及

c)-从按质量计20.0％至按质量计35.0％的水。

出于本发明的目的，术语“表示为1-O-(2-咖啡酰基)苹果酰基-3，5-二-O-咖啡酰基奎宁酸的质量当量的所述按质量计的量x₁”意指按质量计的量x₁是通过进行定量分析方法，如UHPLC-MS(超高效液相色谱-质谱法)、使用预先分离并纯化至大于或等于99％的含量的1-O-(2-咖啡酰基)苹果酰基-3，5-二-O-咖啡酰基奎宁酸标准品作为参比标准品来确定的。

这种UHPLC-MS型的定量分析是用配备有二极管阵列检测器并调节至330纳米波长的UHPLC-MS Shimadzu_Nexera_LCMS 2020型设备，用Kinetex 2.6u XB-C18 100A，100x2.1型的柱，并使用由水和按质量计0.1％的甲酸构成的流动相A和由乙腈组成的流动相B来进行。

在存在于组合物(ES)中的具有通式(I)的化合物之中，可以提及：

-二咖啡酰基奎宁酸(DCQ)家族的化合物，如下表1中所述：

表1

-三咖啡酰基奎宁酸(TCQ)家族的化合物，如下表2中所述：

表2

-苹果酰基三咖啡酰基奎宁酸(m-TCQ)家族的化合物，如下表3中所述：

表3

-苹果酰基二咖啡酰基奎宁酸(m-DCQ)家族的化合物，如下表4中所述：

表4

-咖啡酰苹果酰基三咖啡酰基奎宁酸(cm-TCQ)家族的化合物，如下表5中所述：

表5

-咖啡酰苹果酰基二咖啡酰基奎宁酸(cm-DCQ)家族的化合物，如下表6中所述：

表6

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根据本发明的更具体方面，在如先前所定义的组合物(ES)中，具有式(Ia)的化合物，对应于如先前所定义的式(I)，并且其中Q₁表示式(IIIb)的苹果酰基，Q₃和Q₄和Q₅是相同的并且表示式(II)的咖啡酰基。

根据本发明的更具体方面，在如先前所定义的组合物(ES)中，具有式(Ib)的化合物，对应于如先前所定义的式(I)，并且其中Q₁表示式(IVa)的咖啡酰苹果酰基，Q₃和Q₅是相同的并且表示式(II)的咖啡酰基，并且Q₄表示-OH基团。

根据本发明的更特定方面，在如先前所定义的组合物(ES)中，具有式(Ib)的化合物，对应于如先前所定义的式(I)，并且其中Q₁表示式(IVb)的咖啡酰苹果酰基，Q₃和Q₅是相同的并且表示式(II)的咖啡酰基，并且Q₄表示-OH基团。

根据本发明的更具体方面，在如先前所定义的组合物(ES)中，具有式(Ic)的化合物是具有式(Ic₁)的化合物，对应于如先前所定义的式(I)，并且其中Q₁和Q₅是相同的并且表示式(II)的咖啡酰基，Q₃表示-OH基团，并且Q₄表示式(IVa)的咖啡酰苹果酰基。

根据本发明的更具体方面，在如先前所定义的组合物(ES)中，具有式(Ic)的化合物是具有式(Ic₁)的化合物，对应于如先前所定义的式(I)，并且其中Q₁和Q₅是相同的并且表示式(II)的咖啡酰基，Q₃表示-OH基团，并且Q₄表示式(IVb)的咖啡酰苹果酰基。

根据本发明的更具体方面，在如先前所定义的组合物(ES)中，具有式(Ic)的化合物是具有式(Ic₂)的化合物，对应于如先前所定义的式(I)，并且其中Q₁和Q₄是相同的并且表示式(II)的咖啡酰基，Q₃表示-OH基团，并且Q₅表示式(IVa)的咖啡酰苹果酰基。

根据本发明的更具体方面，在如先前所定义的组合物(ES)中，具有式(Ic)的化合物是具有式(Ic₂)的化合物，对应于如先前所定义的式(I)，并且其中Q₁和Q₄是相同的并且表示式(II)的咖啡酰基，Q₃表示-OH基团，并且Q₅表示式(IVb)的咖啡酰苹果酰基。

根据本发明的更具体方面，如先前所定义的组合物(C₁)的特征在于，所述组合物(ES)包含：

-至少一种具有式(Ia)的化合物，对应于式(I)，其中Q₁表示式(IIIa)或式(IIIb)的苹果酰基，并且Q₃和Q₄和Q₅是相同的并各自表示式(II)的咖啡酰基；

-具有式(Ib)的化合物，对应于式(I)，其中Q₁表示式(IVa)或式(IVb)的咖啡酰苹果酰基，Q₃和Q₅各自表示式(II)的咖啡酰基，并且Q₄表示羟基，以及

-至少一种具有式(Ic)的化合物，其选自：

-具有式(Ic₁)的化合物，对应于式(I)，其中Q₁和Q₅各自表示式(II)的咖啡酰基，Q₃表示羟基，并且Q₄表示式(IVa)或式(IVb)的咖啡酰苹果酰基；以及

-具有式(Ic₂)的化合物，对应于式(I)，其中Q₁和Q₄表示式(II)的咖啡酰基，Q₃表示羟基，并且Q₅表示式(IVa)或式(IVb)的咖啡酰苹果酰基。

根据本发明的另一个具体方面，存在于如先前所定义的组合物(C₁)中的有机溶剂(OS₁)选自1，2-丁二醇、1，3-丁二醇和2-甲基-2，4-戊二醇；该有机溶剂更特别地是1，2-丁二醇。

作为本发明的主题的组合物(C₁)可以通过在20℃与60℃之间、更特别地在20℃与40℃之间并且甚至更特别地在20℃与30℃之间的温度下，并且以50转/分钟与150转/分钟之间的速度以锚式机械搅拌，将其成分简单混合来制备。

根据第二方面，本发明的主题是一种用于制备如权利要求1至3中任一项所述的组合物(C₁)的方法，该方法包括以下连续的步骤：

-步骤a)，在无土条件下栽培植物牛蒡，用培养液施肥，以获得生物质(BM₁)；

-步骤b)，将先前步骤a)获得的所述生物质(BM₁)的根浸入培养基(S₁)中，使得该生物质(BM₁)/混合物(S₁)的比率在0.5kg/l与1.5kg/l之间，所述培养基(S₁)每100％其自身质量包含按质量计从20％至35％的水，以及按质量计从65％至80％的选自以下的有机溶剂(OS₁)：1，2-丙二醇、1，3-丙二醇、1，4-丁二醇、1，3-丁二醇、1，2-丁二醇、2-甲基-2，4-戊二醇、1，6-己二醇、1，8-辛二醇或这些二醇的混合物，通过添加选自硫酸、磷酸和盐酸的质子酸将该培养基的pH调节至在1.5与3.5之间的值；

-步骤c)，分离步骤b)中所定义的处理结束时的生物质的根，以分离出液相(L₁)；

-步骤d)，将从步骤c)得到的所述生物质(BM₂)的根浸入所述培养基(S₁)中；其中生物质(BM₂)/混合物(S₁)的比率在0.1kg/l与1.5kg/l之间；

-步骤e)，分离在步骤d)所定义的处理结束时的所述生物质(BM₂)，以分离出液相(L₂)；

-步骤f)，过滤步骤d)中获得的所述液相(L₃)，以分离出液相(L₃)；

-步骤g)，将所述液相(L₁)与(L₃)混合，然后，如果需要，添加水和/或所述有机溶剂(OS₁)，以获得预期的组合物(C₁)。

在无土(或气培)条件下栽培植物牛蒡的步骤a)是根据本领域技术人员已知的标准条件、并且更特别地根据涉及培养基中存在的氮含量(2)(3)(4)(5)(6)以及磷和钾含量的影响的条件进行的。因此，在无土条件下栽培的步骤a)是通过优化营养培养基中存在的氮/磷/钾比率，以及通过优化此种营养培养基的电导率参数来进行。

步骤a)通常是在20℃与40℃之间的温度下进行4到10周的时间段，以得到大量生物质(BM₁)，特别是在根处；当不再观察到生物质(BM₁)生长时，停止步骤a)。

根据另一个具体方面，在如先前所定义的方法的步骤b)期间，混合物(S₁)每100％其自身质量包含从按质量计23％至按质量计32％并且甚至更特别地从按质量计26％至按质量计32％的水，以及从按质量计68％至按质量计77％并且甚至更特别地从按质量计68％至按质量计74％的选自由以下组成的组的元素的有机溶剂(OS₁)：1，2-丙二醇、1，3-丙二醇、1-4-丁二醇、1，3-丁二醇、2-甲基-2，4-戊二醇、1，6-己二醇和1，8-辛二醇。

在用于制备如先前所定义的组合物(C₁)的方法的步骤b)中，通过添加选自由硫酸、磷酸和盐酸组成的组的元素的质子酸，将存在于混合物(S₁)中的水的pH调节至在1.5与3.5之间的值。

根据一个更具体的方面，在如先前所定义的方法的步骤b)中，通过添加选自由硫酸、磷酸和盐酸组成的组的元素的质子酸使存在于混合物(S₁)中的水的pH达到在1.5与3.0之间并且甚至更特别地在1.5与2.5之间的值。

根据一个甚至更具体的方面，在如先前所定义的方法的步骤b)中，通过添加盐酸使存在于混合物(S₁)中的水的pH达到在1.5与2.5之间的值。

在如先前所定义的用于制备组合物(C₁)的方法的步骤b)中，在20℃与30℃之间的温度下使在步骤a)结束时获得的生物质(BM₁)的根与如先前所述的混合物(S₁)接触，持续10分钟与60分钟之间的时间，其中生物质(BM₁)/混合物(S1)的比率在0.5kg/L与1.5kg/L之间。

根据一个更具体的方面，在如先前所定义的方法的步骤b)中，在20℃与30℃之间的温度下使在步骤a)结束时获得的生物质(BM₁)的根与如先前所述的混合物(S₁)接触(更特别地通过浸入)，持续10分钟与45分钟之间、更特别地10分钟与30分钟之间的时间，其中生物质(BM₁)/混合物(S1)的比率在0.5kg/L与1.5kg/L之间、更特别地在0.5kg/L与1.0kg/L之间。

在如先前所定义的用于制备组合物(C₁)的方法的步骤d)中，在20℃与30℃之间的温度下使在步骤c)结束时获得的生物质(BM₂)与如先前所述的混合物(S₁)接触，持续24小时与72小时之间的时间，其中生物质(BM₂)/混合物(S₁)的比率在0.1kg/L与1.5kg/L之间。

根据一个更具体的方面，在如先前所定义的方法的步骤d)中，在20℃与30℃之间的温度下使在步骤c)结束时获得的生物质(BM₂)的根与如先前所述的混合物(S₁)接触(更特别地通过浸入)，持续24小时与60小时之间、更特别地24小时与48小时之间的时间，其中生物质(BM₂)/混合物(S₁)的比率在0.1kg/L与1.0kg/L之间、并且更特别地在0.3kg/L与1.0kg/L之间。

在如先前所定义的用于制备组合物(C₁)的方法的步骤f)中，用本领域技术人员已知的用于高效分离固体和液体的装置和设备进行在步骤d)结束时获得的液体(L₂)的过滤(被进行以回收液体(L₃))。

在如先前所定义的用于制备组合物(C₁)的方法的步骤g)中，在20℃与30℃之间的温度下以50转/分钟与150转/分钟之间的速度以锚式机械搅拌进行步骤c)结束时获得的液体(L₁)与步骤f)结束时获得的液体(L₃)的混合。如果需要，任选地进行水或有机溶剂(OS₁)的添加，以获得期望的组合物(C₁)。

根据一个具体方面，在如先前所定义的方法的步骤g)中，更特别地通过添加水和/或有机溶剂(OS₁)，将有机溶剂(OS₁)的含量调节至在按质量计65％与75％之间，并且将水含量调节至按质量计25％至35％。

根据本发明的另一个具体方面，有机溶剂(OS₁)选自由以下组成的组的元素：1，2-丙二醇、1，3-丙二醇和2-甲基-2，4-戊二醇。

根据本发明的另一个更具体方面，用于制备所述组合物(C₁)的方法的步骤b)和步 骤d)中使用的混合物(S₁)的水中存在的质子酸为磷酸。

根据另一方面，本发明的主题是如先前所定义的组合物(C₁)作为保湿化妆品活性剂的用途。

本发明的主题还是一种局部用化妆品配制品，其包含至少一种化妆品上可接受的赋形剂和有效量的如先前所定义的组合物(C₁)。

在作为本发明的主题的美容方法中使用的化妆品配制品的定义中所用的表述“局部用”意指所述配制品是通过施用到皮肤上使用的，无论其是直接施用(在化妆品配制品的情况下)或间接施用(当根据本发明的化妆品配制品被浸渍在旨在与皮肤接触的支撑物(纸、擦拭物、纺织品、经皮肤的装置等)上时)。

所述组合物(C₂)通常铺展在待处理的皮肤的表面上，并且然后将皮肤按摩一会儿。

在作为本发明的主题的美容方法中使用的局部用化妆品配制品的定义中所用的表述“化妆品上可接受的”意指，根据通过1993年6月14日的指令号93/35/EEC修订的1976年7月27日的欧洲经济共同体理事会指令号76/768/EEC，所述配制品包括旨在与人体的各部分(表皮、体毛和头发系统、指甲、嘴唇和生殖器)或者与牙齿和口腔粘膜接触(为了专有且主要地清洗它们、使它们变香、改变它们的外观和/或矫正其体臭和/或保护它们或保持它们处于良好状态的目的)的任何物质或制剂。

术语“有效量的如先前所定义的且在作为本发明的主题的方法中使用的局部用化妆品配制品中存在的组合物(C₁)”意指，对于100％质量的所述局部用化妆品配制品，按质量计在0.01％与5％之间、更特别地在按质量计0.01％与3％之间、甚至更特别地在按质量计0.1％与3％之间并且甚至更特别地在按质量计0.5％与2％之间的比例的组合物(C₁)。

在作为本发明的主题的美容方法中使用的局部用化妆品配制品总体上是呈水溶液或水-醇溶液或水-二醇溶液的形式，呈悬浮液、乳液、微乳液或纳米乳液的形式(无论它们是油包水、水包油、水包油包水还是油包水包油的类型)，或者呈粉末的形式。

在作为本发明的主题的美容方法中使用的局部用化妆品配制品可以被包装在瓶中、泵动瓶类型的装置中、气溶胶装置中(以加压形式)、配备有穿孔壁(如格栅)的装置中或配备有球涂抹器的装置(“滚抹”装置)中。

总体上，将在作为本发明的主题的美容方法中使用的局部用化妆品配制品中存在的组合物(C₁)与通常用于局部用配制品领域中的化学添加剂组合，这些化学添加剂如发泡和/或洗涤剂表面活性剂、增稠和/或胶凝表面活性剂、增稠剂和/或胶凝剂、稳定剂、成膜化合物、溶剂和共溶剂、水溶助剂、泉水或矿泉水、增塑剂、乳化剂和助乳化剂、乳浊剂、珠光剂、富脂剂(superfatting agents)、螯合剂(sequestrants)、螯合剂(chelating agents)、油、蜡、抗氧化剂、香料、精油、防腐剂、调节剂、除臭剂、旨在提供对皮肤或毛发的处理和/或保护作用的有效成分、防晒剂、矿物填充剂或颜料、提供视觉效果或旨在用于包封活性剂的颗粒、去角质颗粒、质地剂、光学增白剂和驱虫剂。

作为可以与所述组合物(C₁)组合的发泡和/或洗涤剂表面活性剂的实例，可以提及阴离子、阳离子、两性或非离子的发泡和/或洗涤剂表面活性剂；

-在发泡和/或洗涤剂阴离子表面活性剂中，例如是，碱金属盐、碱土金属盐、铵盐、胺盐、或氨基醇盐、烷基醚硫酸盐、烷基硫酸盐、烷基酰胺基醚硫酸盐、烷基芳基聚醚硫酸盐、单甘油酯硫酸盐、α-烯烃磺酸盐、石蜡磺酸盐、烷基磷酸盐、烷基醚磷酸盐、烷基磺酸盐、烷基酰胺磺酸盐、烷基芳基磺酸盐、烷基羧酸盐、烷基磺基琥珀酸盐、烷基醚磺基琥珀酸盐、烷基酰胺磺基琥珀酸盐、烷基磺基乙酸盐、烷基肌氨酸盐、酰基羟乙磺酸盐、N-酰基牛磺酸盐、酰基乳酰乳酸盐、氨基酸的N-酰基衍生物、肽的N-酰基衍生物、蛋白质的N-酰基衍生物、或脂肪酸的N-酰基衍生物。

-在发泡和/或洗涤剂两性表面活性剂中，例如是，烷基甜菜碱、烷基酰胺基甜菜碱、磺基甜菜碱、烷基酰胺基烷基磺基甜菜碱、咪唑啉衍生物、磷酸甜菜碱、两性聚乙酸盐和两性丙酸盐。

-在发泡和/或洗涤剂阳离子表面活性剂中，例如是，季铵衍生物。

-在发泡和/或洗涤剂非离子表面活性剂中，例如是，包括直链或支链的、饱和或不饱和的脂肪族基团并且包括从8至16个碳原子的烷基聚糖苷，例如辛基聚葡萄糖苷、癸基聚葡萄糖苷、十一烷基聚葡萄糖苷、十二烷基葡萄糖苷、十四烷基聚葡萄糖苷、十六烷基聚葡萄糖苷、1，12-十二烷二基聚葡萄糖苷；乙氧基化的氢化蓖麻油衍生物，例如以INCI名称PEG-40氢化蓖麻油出售的产品；聚山梨醇酯，例如聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯40、聚山梨醇酯60、聚山梨醇酯70、聚山梨醇酯80和聚山梨醇酯85；椰仁酰胺；N-烷基胺。

可以与所述组合物(C₁)组合的增稠和/或胶凝表面活性剂的实例任选地包括烷氧基化的烷基聚糖苷脂肪酯，例如乙氧基化的甲基聚葡萄糖苷酯，如分别以名称Glutamate^TMLT和Glutamate^TM DOE120出售的PEG 120甲基葡萄糖三油酸酯和PEG 120甲基葡萄糖二油酸酯；烷氧基化的脂肪酯，如以名称Crothix^TM DS53出售的PEG 150季戊四醇四硬脂酸酯，以名称AntilT^M 141出售的PEG 55丙二醇油酸酯；脂肪链聚亚烷基二醇氨基甲酸酯，例如以名称Elfacos^TM T211出售的PPG-14月桂醇聚醚异佛尔基二氨基甲酸酯，以名称Elfacos^TMGT2125出售的PPG-14棕榈油醇聚醚-60己基二氨基甲酸酯。

可以与所述组合物(C₁)组合的增稠剂和/或胶凝剂的实例包括直链或支链或交联的聚电解质类型的聚合物，如部分或完全成盐的丙烯酸均聚物，部分或完全成盐的甲基丙烯酸均聚物，部分或完全成盐的2-甲基[(1-氧代-2-丙烯基)氨基]-1-丙磺酸(AMPS)均聚物，丙烯酸和AMPS的共聚物，丙烯酰胺和AMPS的共聚物，乙烯基吡咯烷酮和AMPS的共聚物，AMPS和(2-羟乙基)丙烯酸酯的共聚物，AMPS和(2-羟乙基)甲基丙烯酸酯的共聚物，AMPS和羟乙基丙烯酰胺的共聚物，AMPS和N，N-二甲基丙烯酰胺的共聚物，AMPS和三(羟甲基)丙烯酰胺基甲烷(THAM)的共聚物，丙烯酸或甲基丙烯酸和(2-羟乙基)丙烯酸酯的共聚物，丙烯酸或甲基丙烯酸和(2-羟乙基)甲基丙烯酸酯的共聚物，丙烯酸或甲基丙烯酸和羟乙基丙烯酰胺的共聚物，丙烯酸或甲基丙烯酸和THAM的共聚物，丙烯酸或甲基丙烯酸和N，N-二甲基丙烯酰胺的共聚物，丙烯酸或甲基丙烯酸、AMPS和(2-羟乙基)丙烯酸酯的三元共聚物，丙烯酸或甲基丙烯酸、AMPS和(2-羟乙基)甲基丙烯酸酯的三元共聚物，丙烯酸或甲基丙烯酸、AMPS和THAM的三元共聚物，丙烯酸或甲基丙烯酸、AMPS和N，N-二甲基丙烯酰胺的三元共聚物，丙烯酸或甲基丙烯酸、AMPS和丙烯酰胺的三元共聚物，丙烯酸或甲基丙烯酸和丙烯酸烷基酯的共聚物(其碳链包含在4与30个之间的碳原子并且更具体地在10与30个之间的碳原子)，AMPS和丙烯酸烷基酯的共聚物(其碳链包含在4与30个之间的碳原子并且更具体地在10与30个之间的碳原子)，至少一种带有游离的部分成盐或完全成盐的强酸官能团的单体与至少一种中性单体和至少一种具有式(VIII)的单体的直链、支链或交联的三元共聚物：

CH₂＝C(R₃)-C(＝O)-[CH₂-CH₂-O]_n-R₄ (VIII)

其中R₃表示氢原子或甲基，R4表示包含8至30个碳原子的直链或支链烷基，并且n表示大于或等于1且小于或等于50的数。

所述聚合物可以呈溶液、水性悬浮液、油包水乳液、水包油乳液或粉末的形式。商业聚合物的实例包括以以下名称出售的那些：Simulgel^TM EG、Simulgel^TM EPG、Sepigel^TM305、Simulgel^TM 600、Simulgel^TM NS、Simulgel^TM INS100、Simulgel^TM FL、Simulgel^TM A、Simulgel^TM SMS 88、Sepinov^TM EMT10、Sepiplus^TM 400、Sepiplus^TM 265、Sepiplus^TM S、Sepimax^TM ZEN、Aristoflex^TM AVC、Aristoflex^TM AVS、Novemer^TM EC-1、Novemer^TM EC2、Aristoflex^TM HMB、Cosmedia^TM SP、Flocare^TM ET25、Flocare^TM ET75、Flocare^TM ET26、Flocare^TM ET30、Flocare^TM ET58、Flocare^TM PSD30、Viscolam^TM AT64和Viscolam^TM AT100。

可与所述组合物(C₁)组合的增稠剂和/或胶凝剂的其他实例包括：

-仅由单糖构成的多糖，例如葡聚糖或葡萄糖均聚物、葡甘露聚糖葡聚糖、木聚糖(xyloglycan)、半乳甘露聚糖(其中D-甘露糖主链上的D-半乳糖单元的取代度(DS)是在0与1之间、并且更特别地在1与0.25之间)，如来源于肉桂胶(DS＝1/5)、刺槐豆胶(DS＝1/4)、塔拉胶(DS＝1/3)、瓜尔豆胶(DS＝1/2)、或葫芦巴胶(DS＝1)的半乳甘露聚糖；

-由单糖衍生物组成的多糖，如硫酸化的半乳聚糖并且更特别是角叉菜胶和琼脂，乌龙糖(uronans)并且更特别是褐藻胶、海藻酸盐和果胶，单糖和糖醛酸的杂聚物并且更特别是黄原胶、结冷胶、阿拉伯树胶渗出物和刺梧桐树胶渗出物、葡萄糖胺聚糖；

-纤维素及其衍生物，甲基纤维素、乙基纤维素、羟丙基纤维素、硅酸盐、淀粉、亲水淀粉衍生物、和聚氨酯。

可以与所述组合物(C₁)组合的稳定剂的实例包括单晶蜡，并且更特别是地蜡，矿物盐如氯化钠或氯化镁，和硅酮聚合物如聚硅氧烷聚烷基聚醚共聚物。

可以与所述组合物(C₁)组合的泉水或矿泉水的实例包括具有至少300mg/I的矿化的泉水或矿泉水，特别地是雅漾(Avene)水、维泰尔(Vittel)水、维希盆地(Vichy basin)水、依泉(Uriage)水、理肤泉(La Roche Posay)水、拉布尔布尔(La Bourboule)水、安亘湖(Enghien-les-Bains)水、圣泉薇莱班(Saint-Gervais-les-Bains)水、内里莱班(Néris-les-Bains)水、阿勒瓦尔莱班(Allevard-les-Bains)水、迪涅(Digne)水、迈济耶尔(Maizieres)水、Neyrac-les-bains水、隆勒索涅(Lons le Saunier)水、罗什福尔(Rochefort)水、Saint Christau水、Fumades水和Tercis-les-bains水。

可以与所述组合物(C₁)组合的水溶助剂的实例包括二甲苯磺酸盐、枯烯磺酸盐、己基聚葡萄糖苷、(2-乙基己基)聚葡萄糖苷以及正庚基聚葡萄糖苷。

可以与所述组合物(C₁)组合的除臭剂的实例包括碱金属硅酸盐，锌盐，如硫酸锌、葡萄糖酸锌、氯化锌或乳酸锌；季铵盐，如鲸蜡基三甲基铵盐或鲸蜡基吡啶盐；甘油衍生物，如甘油癸酸酯、甘油辛酸酯或聚甘油癸酸酯；1，2-癸二醇、1，3-丙二醇、水杨酸、碳酸氢钠、环糊精、金属沸石、Triclosan^TM、水合溴化铝、水合氯化铝、氯化铝、硫酸铝、水合氯化铝锆、水合三氯化铝锆、水合四氯化铝锆、水合五氯化铝锆、水合八氯化铝锆、硫酸铝、乳酸钠铝、或水合氯化铝和二醇的络合物，如水合氯化铝和丙二醇的络合物、水合二氯化铝和丙二醇的络合物、倍半氯化羟基铝和丙二醇的络合物、水合氯化铝和聚乙二醇的络合物、水合二氯化铝和聚乙二醇的络合物、或倍半氯化羟基铝和聚乙二醇的络合物。

可以与所述组合物(C₁)组合的溶剂和助溶剂的实例包括水，乙二醇，丙二醇，丁二醇，己二醇，二甘醇，水溶性醇如乙醇、异丙醇或丁醇，以及水和所述溶剂的混合物。

可以与所述组合物(C₁)组合的油的实例包括矿物油，如液体石蜡、液体凡士林、异链烷烃或白色矿物油；动物来源的油，如角鲨烯或角鲨烷；植物油，如角鲨烷、甜杏仁油、椰仁油、蓖麻油、霍霍巴油、橄榄油、菜籽油、花生油、向日葵油、小麦胚芽油、玉米胚芽油、大豆油、棉籽油、苜蓿油、罂粟油、南瓜油、月见草油、小米油、大麦油、黑麦油、红花油、桐树油、西番莲油、榛子油、棕榈油、乳木果油、杏仁油、横经席叶油、大蒜芥油、鳄梨油、金盏花油，衍生自花或蔬菜的油，乙氧基化的植物油；合成油，例如脂肪酸酯，如肉豆蔻酸丁酯，肉豆蔻酸丙酯，肉豆蔻酸鲸蜡酯，棕榈酸异丙酯，硬脂酸丁酯，硬脂酸十六烷基酯，硬脂酸异丙酯，硬脂酸辛酯，硬脂酸异鲸蜡酯，油酸十二烷基酯，月桂酸己酯，二辛酸丙二醇酯，衍生自羊毛脂酸的酯类(如羊毛脂酸异丙酯、羊毛脂酸异鲸蜡酯)，脂肪酸单甘油酯、二甘油酯和三甘油酯(例如三庚酸甘油酯)，苯甲酸烷基酯，氢化油，聚(α-烯烃)，聚烯烃(如聚(异丁烷))，合成的异烷烃(例如异十六烷、异十二烷)，全氟化油；硅酮油，例如二甲基聚硅氧烷、甲基苯基聚硅氧烷、用胺改性的硅酮、用脂肪酸改性的硅酮、用醇改性的硅酮、用醇和脂肪酸改性的硅酮、用聚醚基团改性的硅酮、环氧基改性的硅酮、用氟基团改性的硅酮、环状硅酮以及用烷基改性的硅酮。在本专利申请中，术语“油”是指水不溶性的并且在25℃的温度下具有液体外观的化合物和/或化合物的混合物。

可以与所述组合物(C₁)组合的蜡的实例包括蜂蜡、巴西棕榈蜡、小烛树蜡、小冠巴西棕蜡、日本蜡、软木纤维蜡、甘蔗蜡、石蜡、褐煤蜡、微晶蜡、羊毛脂蜡；地蜡；聚乙烯蜡；硅酮蜡；植物蜡；在室温下是固体的脂肪醇和脂肪酸；在室温下是固体的甘油酯。在本专利申请中，术语“蜡”是指水不溶性的并且在大于或等于45℃的温度下具有固体外观的化合物和/或化合物的混合物。

可以与所述组合物(C₁)组合的脂肪物质的实例包括包含从8至36个碳原子的饱和或不饱和、直链或支链的脂肪醇，或包含从8至36个碳原子的饱和或不饱和、直链或支链的脂肪酸。

可以与所述组合物(C₁)组合的防晒剂的实例包括在修改的化妆品指令76/768/EEC，附件VII中列出的所有那些：特别地是以下化合物：

-2-苯基-5-甲基苯并噁唑、2，2’-羟基-5-甲基苯基苯并三唑、2-(2’-羟基-5’-叔-辛基苯基)苯并三唑、2-(2’-羟基-5’-甲基苯基)苯并三唑；二苯并吖嗪(dibenzazine)；二对甲氧苯甲酰基甲烷、4-甲氧基-4”-叔丁基苯甲酰基甲烷；5-(3，3-二甲基-2-降冰片烯)-3-戊-2-酮；或聚硅氧烷家族，如亚苄基硅氧烷丙二酸酯；或以下化合物家族中的那些：

-苯甲酸衍生物家族，如对-氨基苯甲酸(PABA)，特别是PABA的单甘油酯、N，N-丙氧基PABA的乙基酯、N，N-二乙氧基PABA的乙基酯、N，N-二甲基PABA的乙基酯、N，N-二甲基PABA的甲基酯、N，N-二甲基PABA的丁基酯；

-邻氨基苯甲酸衍生物家族，如N-乙酰基邻氨基苯甲酸三甲环己酯(homomenthyl-N-acetyl anthranilate)；

-水杨酸衍生物家族，如水杨酸戊酯、水杨酸三甲环己酯、水杨酸乙基己酯、水杨酸苯酯、水杨酸苄酯、水杨酸对异丙基苯基酯；

-肉桂酸衍生物家族，如肉桂酸乙基己酯、肉桂酸乙基-4-异丙酯、肉桂酸甲基-2，5-二异丙酯、肉桂酸对-甲氧基丙酯、肉桂酸对-甲氧基异丙酯、肉桂酸对-甲氧基异戊酯、肉桂酸对-甲氧基辛酯(肉桂酸对-甲氧基2-乙基己酯)、肉桂酸对-甲氧基-2-乙氧基乙酯、肉桂酸对-甲氧基环己酯、肉桂酸乙基-α-氰基-β-苯酯、肉桂酸2-乙基己基-α-氰基-β-苯酯、肉桂酸甘油基二-对-甲氧基-单-2-乙基己酰酯；

-二苯甲酮衍生物家族，如2，4-二羟基二苯甲酮、2，2’-二羟基-4-甲氧基二苯甲酮、2，2’，4，4’-四羟基二苯甲酮、2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮、2-羟基-4-甲氧基-4’-甲基二苯甲酮、2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮5-磺酸酯、4-苯基二苯甲酮、2-乙基己基-4’-苯基二苯甲酮-2-甲酸酯、2-羟基-4-(辛氧基)二苯甲酮、4-羟基-3-羧基二苯甲酮；3-(4’-甲基亚苄基)-d，l-樟脑、3-(亚苄基)-d，1-樟脑、樟脑苯扎铵甲基硫酸盐；

-尿刊酸衍生物家族，如此酸或尿刊酸乙酯；

-磺酸衍生物家族，如2-苯基苯并咪唑-5-磺酸及其盐；

-三嗪衍生物家族，如羟基苯基三嗪、(乙基己氧基)(羟基)苯基-4-甲氧基苯基三嗪、2，4，6-三苯胺基(对-羰基(carbo)-2’-乙基己基-1’-氧基)-1，3，5-三嗪、苯甲酸的4，4-((6-(((1，1-二甲基乙基)氨基)羰基)苯基)氨基)-1，3，5-三嗪-2，4-二基二亚氨基)双-(2-乙基己基)酯；

-二苯基丙烯酸酯衍生物家族，如2-乙基己基2-氰基-3，3-二苯基-2-丙烯酸酯或2-氰基-3，3-二苯基-2-丙烯酸乙酯。

在可以与所述组合物(C₁)组合的矿物防晒剂(mineral sunscreen)(也称为“矿物防晒剂(mineral sunblock)”)中，有氧化钛，氧化锌，氧化铈，氧化锆，黄色、红色或黑色的氧化铁，和氧化铬。这些矿物防晒剂可以进行或可以不进行微粉化，可以经历或可以不经历表面处理并且可以任选地呈水性或油性预分散体的形式。

本发明的主题还是用于改善人皮肤表皮的保湿状态，其特征在于，该方法包括至少一个步骤a₁)：向待处理的皮肤表面上施用有效量的如先前所定义的局部用组合物(C₂)。

出于本专利申请的目的，术语“改善人皮肤表皮的保湿状态”意指，相对于在将所述局部用组合物(C₂)施用到待处理的人皮肤表皮的所述角化层的表面上之前测量并观察到的保湿度，在将如先前所定义的所述局部用组合物(C₂)施用到人皮肤表皮的所述角化层的表面上之后，在7天到21天的时间段内测量并观察到的人皮肤表皮的角化层的保湿度增加了大于或等于25％。

在如上所定义的方法的定义中，术语“有效量”指示这样的量，该量使得相对于在将如先前所定义的局部组合物(C₂)施用到待处理的皮肤表皮的表面上之前测量的保湿度，在将所述组合物(C₂)施用到待处理的表皮的所述表面上之后在7天到21天的时间段之后，在施用到待处理的皮肤表皮上之后获得的人类皮肤表皮的角化层的保湿状态表明，经处理的人皮肤表皮的角化层的保湿度增加了大于25％。

本发明的主题还是如先前所定义的组合物(C₁)，其用于治疗性处理，该治疗性处理用于减少和/或消除和/或防止皮肤或粘膜的皲裂和/或干斑和/或破裂和/或特异性皮炎和/或鱼鳞癣和/或干燥，伴随皮肤的和/或粘膜的病症，如湿疹。

如先前所定义的用于治疗性处理的组合物(C₁)可以与药物活性成分、特别地皮肤病学活性成分组合。

文献目录：

(1)：Chan等人，“A review of the pharmacological effects of Arctiumlappa[牛蒡的药理作用综述]”，Inflammopharmacol.[炎症药理学]，2011，19，245-254)。

(2)：Rasmussen，S.，Parsons，A.J.，Fraser，K.，Xue，H.，和Newman，J.A.(2008)：“Metabolic profile of lolium flowers and burdock roots using a standardizedLC-DAD-ESI/MS profiling method[使用标准化LC-DAD-ESI/MS分析方法的黑麦草花和牛蒡根的代谢图谱]”，Journal of Agricultural and Food Chemistry[农业和食品化学杂志]56，10105-10114。

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以下实例阐明本发明，然而不限制本发明。

A₁)-制备根据本发明的组合物(C_1A)

牛蒡(burdock或Arctium lappa)植物是通过以下预先获得的：在标准条件下在60天的时间段内使种子萌发，以达到约10至15em的大小，然后将它们从其盆中移出并置于气培栽培条件下，包括将牛蒡植物浸入营养液中，该营养液的特征在于电导率在1.0mS(毫西门子)与1.2mS之间，并且肥料提供的N/P/K(氮/磷/钾)的质量比为约15/10/30；在调节到20℃的温度下持续6周。因此获得754g/平方米的根产量。

收集如此获得的生物质的新鲜根并在25℃下以1.0kg生物质/升的速率将其浸入浴中持续15分钟，该浴每100％其质量包含按质量计70％的1，2-丙二醇和按质量计30％的蒸馏水，该浴的pH通过添加含有按质量计75％的磷酸的溶液而被预先调节至2.0±0.2。

然后将植物从其渗出浴(L₁)中取出，将根沥干并且然后切碎，并且然后在25℃下以0.5kg生物质/升的速率将将剩余的生物质再次在包含混合物的新浴中浸软持续48小时，该混合物每100％其质量包含按质量计70％的1，2-丙二醇和按质量计30％的蒸馏水，该新浴的pH通过添加含有按质量计75％的磷酸的溶液而被预先调节至2.0±0.2。

在这一浸软阶段结束时，将生物质与浸软液(L₂)分离，并且用50微米过滤袋过滤所述液体(L₂)。

将液体(L₁)和(L₂)合并并且然后将获得的混合物补充1，2-丙二醇，以将其质量含量调节至70％。通过1微米膜过滤如此获得的液体(L₃)，以使之澄清，并且然后通过0.2微米膜过滤以获得预期的组合物(C_1A)。

A₂)-制备对比组合物(C_对比)的实例

将从与用于获得随后气培栽培的小植株所使用的种子(实例A₁)批次相同的种子产生的小植株用于在土中持续六周的时间段栽培所述小植株。

在这一时间段结束时，将植物从盆中取出，清洗新鲜根，切碎并研磨，并且然后根据常规的液/固提取方法(浸软、搅拌、过滤)使用70/30的1，2-丙二醇/蒸馏水的溶剂混合物在25℃的温度下将获得的所述研磨材料进行提取，其中，新鲜根/溶剂介质的质量比为0.5kg生物质/1升的1，2-丙二醇和水的混合物；已经通过添加含有按质量计75％的磷酸的溶液将蒸馏水的pH值预先调节至2.0±0.2。

在这一提取阶段结束时，将生物质与液体分离，随后将其使用50微米过滤袋进行过滤，然后使用1微米膜过滤使之澄清，并且最后使用0.2微米膜灭菌过滤以产生组合物(C_对比)。

A₃)根据本发明的组合物(C_1A)和对比组合物(C_对比)的分析表征

组合物(C₁)、(C_对比)的特征整理在下表11中：

表11

*UPLC-MS：机器：Shimadzu Nexera X2；柱：Waters Xterra RP C18；250x4.6mm；流 动相(具有梯度)：水+甲酸/乙腈；UV检测器(330nm)

B)证明根据本发明的组合物(C_1A)和对比组合物(C_对比)的保湿特性。

B₁)在重建的人表皮样品上证明保护皮肤屏障功能免受损害。

B1.1.方法原理

分别在BHI(脑心浸液)和NB(营养肉汤)培养基中，在37℃下，将菌株表皮葡萄球菌和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)培养24小时。将在37℃和5％CO₂下培养的、表面积为0.5em²的重建的人表皮样品首先用菌株表皮葡萄球菌定殖持续6小时的时间段，并且然后用菌株金黄色葡萄球菌定殖持续24小时。

将根据本发明的组合物(C_1A)(1％v/v)与菌株表皮葡萄球菌同时添加至重建的人表皮样品，并且然后将其与菌株金黄色葡萄球菌再次同时添加。

通过以下评估如此处理的重建的人表皮样品的屏障功能：

-测量重建的人表皮样品的跨上皮电阻(TEER)，以及

-对所述重建的人表皮样品进行组织学评估，并且更特别地用苏木精和伊红染色，以及对所述染色进行“评分”。

在组织学评估的上下文中，通过对苏木精和伊红染色进行组织学评分来评估对重建的人表皮样品的屏障功能的影响，该评分归结如下：

-0＝标准：参比形态，无显著改变

-1＝轻度：角化层显著改变

-2＝中度：角化层和颗粒细胞层显著改变，角质透明蛋白减少以及一些坏死细胞

-3＝重度：基底层显著改变，具有坏死细胞和细胞间小孔以及水肿

-4＝严重：细胞间连接丧失，组织与聚碳酸酯滤膜脱离，坏死细胞，缺乏特异性标记。

如果组织学评分分级为“标准”(评分0)或“轻度”(评分1)，则判断产品对人表皮的屏障功能具有保护性。

通过利用SEM研究超微结构(如菌落和生物膜)的形成来评估在施加或不施加组合物(C_1A)的情况下重建的人表皮的微生物群的平衡。

B.1.2.结果

B.1.2.1通过测量跨上皮电阻(TEER)获得的有关保护重建的人表皮样品的屏障功能的结果

表7整理了根据相关处理对重建的人表皮样品进行的TEER测量。跨上皮电阻(TEER)的降低证明表皮的屏障功能下降，并且因此，构成皮肤脱水以及这种脱水可能引起的不美观效果的因素之一。还计算了在定殖后和定殖前重建的人表皮表面的跨上皮电阻之间的差(Δ)。还根据以下公式计算保护百分比：

％保护＝R_{[用表皮葡萄球菌+金黄色葡萄球菌定殖且用(C1A)1％(v/v)处理的重建的人表皮]}-R_{[在不添加(C1A)的情况下用表皮葡萄球菌+金黄色葡萄球菌定殖的重建的人表皮]}/R_{[未处理的重建的人表皮(对照)]}-R_{[在不添加(C1A)的情况下用表皮葡萄球菌+金黄色葡萄球菌定殖的重建的人表皮]}

表7

当重建的人表皮样品用表皮葡萄球菌和金黄色葡萄球菌定殖时，在所述定殖开始之前和之后测量的TEER差为-3368.33Ohm.cm²，并且相对于未定殖且未处理的重建的人表皮样品(-1173.33Ohm.cm²)，示出187％的增加。

当重建的人表皮样品与组合物(C_1A)接触，同时它们用表皮葡萄球菌和金黄色葡萄球菌定殖时，在所述定殖之前和之后测量的TEER值之间的差为-2001.66Ohm.cm²，这表示相对于未定殖且未处理的重建的人表皮(-1173.33Ohm.cm²)，具有71％的增加，以及相对于用表皮葡萄球菌和金黄色葡萄球菌定殖的重建的人表皮样品，具有42％的保护。

因此，在皮肤经受细菌作用(已知这些细菌对所述皮肤表皮的屏障功能具有降低作用)之前，向皮肤施用包含组合物(C_1A)的组合物使得能够防止皮肤表皮的屏障功能降低。

B.1.2.2通过用苏木精和伊红染色、通过织学评估所述重建的人表皮样品获得的有关保护所述重建的人表皮样品的屏障功能的结果。

通过归于如先前所述的“评分”来评估表皮样品的苏木精和伊红染色，并且结果整理在下表8中：

表8

当重建的人表皮样品与组合物(C_1A)接触，同时它们用表皮葡萄球菌和金黄色葡萄球菌定殖时，评估组织学评分在1的水平，这证明损伤减少，特别是在基底水平和角化层中，其中观察到更多紧凑的层状结构。

因此，向皮肤施加包含组合物(C_1A)的组合物使得能够防止组织内聚力降低并且因此防止在面对瞬时菌群入侵时表皮的屏障功能降低。

此外，通过扫描电子显微术(SEM，蔡司西格玛电子显微镜(Zeiss Sigma ElectronMicroscope))评估用两种细菌(表皮葡萄球菌和金黄色葡萄球菌)定殖的特征。

当重建的人表皮样品仅用表皮葡萄球菌定殖时，重建的人表皮表面上均匀地存在该细菌，形成大的聚集体并且发展成生物膜，该生物膜的特征在于在电子显微镜的×10000的放大倍数下观察到的丝状多糖结构。

当重建的人表皮样品用表皮葡萄球菌和金黄色葡萄球菌定殖时，在重建的人表皮表面上观察到出现若干金黄色葡萄球菌的球形聚集体，然而表皮葡萄球菌膜在所述表皮表面上仍然可见。

在电子显微镜的×10000放大倍数下，还观察到存在金黄色葡萄球菌的大的聚集体，形成三维结构，因此表明表皮表面上生物膜形成的早期阶段。

向皮肤施用包含组合物(C_1A)的组合物后，金黄色葡萄球菌的球形聚集体不再存在，因此意味着组合物(C_1A)的添加使得能够防止细菌粘附在表皮表面上并且防止金黄色葡萄球菌生物膜的形成。表皮葡萄球菌生物膜在表皮表面上仍然可见。

这些观察结果示出，组合物(C_1A)使得能够减少粘附，并且因此减少致病性机会性细菌(例如金黄色葡萄球菌)的生物膜的形成，而不损害共生细菌如表皮葡萄球菌的存在。

B.1.3.结论

在用皮肤菌群的共生细菌、并且然后用致病性细菌定殖之前，重建的人表皮样品的跨上皮电阻测量和组织学评估的组合构成以下模型，该模型用于研究所述表皮的屏障功能和微生物群平衡的损害，以及使用组合物或提取物或复合配制品进行的先前处理的发病率。

B.1.2.1节和B.1.2.2节中汇总的结果和观察结果的集合示出，组合物(C_1A)使得能够防止人皮肤表皮的屏障功能降低，并且因此防止模型中人皮肤表皮的脱水，在该模型中，人皮肤表皮用皮肤菌群的共生细菌、并且然后用致病性细菌定殖；以及防止与之相关的不美观结果，例如干燥、粗糙的皮肤，当与致病性细菌的存在相关时，可能伴有炎症和痒。

B₂)通过增加角质形成细胞分化来证明皮肤屏障功能的改善

B.2.1方法原理

表皮角质形成细胞分化的演变构成了一种手段，用于显示所述表皮的处理对人皮肤表皮的屏障功能的演变的作用，并且因此对人皮肤表皮的保湿状态的演变的作用。

为此，将正常人角质形成细胞在37℃和5％CO₂下培养。4天的时间段后，用需要评估其作用的产品对所述细胞进行处理。

在37℃和5％CO₂下用测试产品培养另外72小时后，冲洗细胞菌苔，干燥，并且然后用冰甲醇固定。通过使用抗丝聚蛋白一抗和用于显示前者的荧光二抗进行荧光免疫标记，来检测并定量角质形成细胞分化标记物丝聚蛋白。通过用Hoechst标记来检测和定量细胞核，Hoechst是一种与DNA结合并因此标记细胞核的荧光染料。进行这最后一次标记以标准化先前对丝聚蛋白获得的结果。

B.2.2结果

表9整理了在不同条件下培养的角质形成细胞的丝聚蛋白测量结果，并且特别地在根据本发明的组合物(C_1A)存在下和对比组合物(C_1对比)存在下。

丝聚蛋白(标记区域)/细胞核(标记区域)比率的增加证明表皮角质形成细胞分化的增加，并因此增强了表皮的屏障作用，这构成了增强皮肤的保湿状态的因素之一。角质形成细胞分化的增加使得能够增强人表皮的屏障作用，并因此减少可能由人皮肤脱水引起的不美观效果。

表9：

B.2.3.结论

根据本发明的组合物(C_1A)的施用使得能够达到0.0254的丝聚蛋白/细胞核比值，与当组合物(C_1A)替换为组合物(C_1对比)时的0.0144相对。因此，根据本发明的组合物(C_1A)的施用使得能够相对于对照(未处理的角质形成细胞)使丝聚蛋白的产量增加648％，而对比组合物(C_1对比)仅使丝聚蛋白的产量增加323％。

根据本发明的组合物(C_1A)使得能够增加角质形成细胞的分化，并且因此增强表皮的屏障作用，并因此促进所述人表皮的保湿状态。

B₃)根据本发明的组合物(C_1A)对皮肤保湿度的作用

B.3.1.方法原理

通过评估皮肤的电特性，例如阻抗、电阻和电容，来确定皮肤保湿度，这是因为这些在皮肤表面测量的介电参数随着角化层中所含水的量而变化。

在本专利申请的上下文中采取和使用的原理是基于测量皮肤表面的介质电容的变化。具体地，就像任何材料或任何生物基质一样，角化层的特征可在于其平均电容值；这一介电特性随着其含有的水的量而变化。

B.3.2设备

使用由Courage&Khasaka公司出售的CM825^TM型皮肤水分测试仪(corneometer)(其装备有由两个金属电极制成的传感器)测量皮肤保湿度。当给该皮肤水分测试仪供电时，它能够使电场施加在角化层上并且测量对应于已经施加电场的皮肤的状态的电容。

B.3.3实验方案

对一组21名志愿者进行了测试组合物的保湿效果的研究，并且该研究包括每天两次施用待评估的组合物，即安慰剂(在本文中称为PLAC)或测试组合物(在本文中称为COMP)，或将未处理的区域(在本文中称为NT)放置21天。在施用组合物之前(D0)、在将测试组合物施用于皮肤后七天的时间段(D7)之后以及在将测试组合物施用于皮肤后21天的时间段(D21)之后，使用皮肤水分测试仪进行所测量的皮肤保湿度的测量。

志愿者组的特征如下：

-从18至48岁的女性，

-平均年龄为35岁，

-以及属于感光型II至IV

-以及腿部皮肤非常干燥(纳入研究时，通过皮肤水分测试法，≤30(au))。

B.3.4表达结果

以任意单位(au)表示保湿度的测量结果。

值的增加(以au表示)表示角化层的含水量的增加，因此表征了保湿作用。

记录在每个测量时间用皮肤水分测试仪测量的值，并且对于要评估的每种组合物，将D0与D7之间以及然后D0与D21之间的变化表示为相对于D0处测量值的百分比。

因此对以下加以定义：

T_(D0)：在将测试组合物施用于待处理区域和未处理区域上之前测量的保湿度的平均值，以任意单位(au)表示；

T_(D7)：在将测试组合物施用于经处理区域和未处理区域上七天后测量的保湿度的平均值，以任意单位(au)表示；

T_(D21)：在将测试组合物施用于经处理区域和未处理区域上21天后测量的保湿度的平均值，以任意单位(au)表示；

如此计算Δ₇，其为在处理七天后保湿度的增加百分比：

对于安慰剂：

Δ₇＝100x[(T_(D7)-T_(D0))_PLAC-(T_(D7)-T_(D0))_NT]/[(T_(D0))_PLAC-(T_(D7)-T_(D0))_NT]

对于测试组合物：

Δ₇＝100x[T_(D7)-T_(D0))_COMP-(T_(D7)-T_(D0))_NT]/[(T_(D0))_COMP-(T_(D7)-T_(D0))_NT]

还计算了Δ₂₁，其为在处理21天后保湿度的增加百分比：

对于安慰剂：

Δ₂₁＝100x[(T_(D21)-T_(D0))_PLAC-(T_(D21)-T_(D0))_NT]/[(T_(D0))_PLAC-(T_(D21)-T_(D0))_NT]

对于测试组合物：

Δ₂₁＝100x[(T_(D21)-T_(D0))_COMP-(T_(D21)-T_(D0))_NT]/[(T_(D0))_COMP-(T_(D21)-T_(D0))_NT]

还计算了产品之间的影响：

在D₇时相对于安慰剂的％＝

100x(T_(D7)-T_(D0))_COMP-(T_(D7)-T_(D0))_PLAC]/[(T_(D7)-T_(D0))_PLAC-(T_(D7)-T_(D0))_NT]

在D₂₁时相对于安慰剂的％＝

100x[(T_(D21)-T_(D0))_COMP-(T_(D21)-T_(D0))_PLAC]/[(T_(D21)-T_(D0))_PLAC-(T_(D21)-T_(D0))_NT]

B.3.5所得结果

针对施用测试组合物获得的保湿度的平均测量结果显示在下表10中：

表10

产品	Δ7	Δ21
			安慰剂	+18.3％	+22.2％
含有按质量计1％的组合物(C1A)的配方	+28.8％	+37.9％

下表11中显示了在D7和D21时，在安慰剂与测试组合物之间获得的保湿度的比较：

表11

B.3.6结果分析

施用测试组合物7天后，测量的保湿度的平均值的演变Δ₇表明，根据本发明的组合物(C_1A)的保湿度增加了28.8％，与安慰剂组合物的18.8％相对。相对于安慰剂，根据本发明的组合物(C_1A)的保湿度增加了58％。

施用测试组合物21天后，测量的保湿度的平均值的演变Δ₂₁表明，根据本发明的组合物(C_1A)的保湿度增加了37.9％，与安慰剂组合物的22.2％相对。相对于安慰剂，根据本发明的组合物(C_1A)的保湿度增加了56％。

因此，根据本发明的组合物(C_1A)使得能够改善人表皮的保湿度。

B.4分析

在本专利申请的B.3节中获得的结果的集合证明，根据本发明的组合物(C_1A)同时通过其增强表皮的屏障作用(防止降解，并增加)的作用以及通过其增加人皮肤表皮保湿度的作用来提供对人皮肤表皮的保湿作用。

C)配制品

在以下配方中，用配制品的重量表达百分比。

C.1)-用于面部的卸妆液

配方

程序：在磁力搅拌下，按所示顺序，在水中混合各种成分，并且将pH调节至约7。

C.2)-婴儿头发和体用香波

配方

/>

程序：将组合物(E₄)与Proteol^TM APL和Sepicide^TM HB混合(相A)。将Capigel^TM 98稀释在一部分水中，并将其添加到先前获得的相A中(相B)。将剩余的水添加至相B，随后是Sepicide^TM CI和着色剂。用氢氧化钠将混合物的pH调节至约7.2。

C.3)-用于眼部的卸妆擦拭物

配方

程序：将相B的成分以及相C的那些成分在相A中混合，直至溶液澄清。添加相D。

C.4)-温和的发泡凝胶

配方

程序：将香水和防腐剂Euxyl^TM PE9010溶解在由组合物E₄和Proteol^TM APL组成的混合物(相A)中。添加水并用乳酸将pH调节至约6.0。

C.5)-常用香波

配方

程序：混合相A的所有成分，并在均质化后添加Montaline^TM C40，并用乳酸将pH调节至约6.0。

C.6超温和婴儿香波

配方

程序：按所示顺序混合相A的所有成分，直至获得澄清的相A。分别地，将Capigel^TM98添加至水，并且然后将由此制备的此相B添加至相A，并且使用氨丁三醇将pH调节至7.2。

C.7定定清洁乳

配方

/>

程序：分别加热通过混合各种成分构成的相A和相B。将相C添加到热脂肪相中，并且通过倒入水相中制成乳液；在剧烈搅拌下，均质化持续数分钟(借助转子/定子涡轮式混合器)。接下来，将相D添加至热乳液中，并在适当搅拌下将乳液冷却至室温。在40℃下添加相E。

C.8敏感性皮肤的清洁粉洗液

配方

程序：在80℃下，将相A的成分溶解在水中。分别地，将香料溶解在组合物(E₄)中以制备相B。将冷却的相A添加到相B中，然后引入Sepicalm^TM S和剩余的水。检查最终的pH，并在必要时调节至约5.2。接下来，添加Micropearl^TM M310。

C.9婴儿沐浴凝胶

配方

程序：将Sepimax^TM ZEN分散在水中，并使用配备有反絮凝剂、反向旋转的叶轮和锚定桨的机械搅拌器进行搅拌，直至获得完全光滑的凝胶。添加Sepiplus^TM S，并且然后搅拌直至混合物均匀。接下来，添加相B的成分，均质化并单独添加相C的添加剂。将pH调节至6.0-6.5。

C.10BB霜

配方

程序：通过使用配备有转子-定子系统的混合器，在4500rpm的旋转速度下持续6分钟的时间段，混合不同成分并且均质化，来制备相B。通过添加Sepinov^TM EMT10至水和甘油的混合物中，并且使用配备有转子-定子系统的混合器，在4000rpm的旋转速度下持续4分钟均质化，来制备相C。将相A和B添加到相C中，并使用配备有锚定桨的机械搅拌器在30rpm的速度下持续2分钟，然后在50rpm的速度下持续20分钟，来搅拌所得混合物。逐一地添加相5的组分，并在50rpm的速度下搅拌25分钟。

C.11SPF大于30的高防护防晒喷雾

配方

Sepicalm^TM S：N-椰油酰基氨基酸、肌氨酸、天冬氨酸钾和天冬氨酸镁的混合物，如WO 98/09611中所述；

Proteol^TM APL：N-椰油酰基氨基酸的钠盐的混合物，通过苹果汁的特征氨基酸的酰化获得；

Sepicide^TM HB：苯氧乙醇、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯和对羟基苯甲酸丁酯的混合物，其是防腐剂；

Capigel^TM 98：丙烯酸酯共聚物；

Sepicide^TM CI：咪唑啉脲，其是防腐剂；

Sepicide^TM HB：苯氧乙醇、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯和对羟基苯甲酸异丁酯的混合物，其是防腐剂；

Sepicalm^TM VG：钠盐形式的N-棕榈酰脯氨酸与白睡莲(Nymphea alba)花提取物的混合物；

Euxyl^TM PE9010：苯氧乙醇和乙基己基甘油的混合物；

Proteol^TM OAT：通过燕麦蛋白质的完全水解获得的N-月桂基氨基酸的混合物，如WO 94/26694中所述；

Montaline^TM C40：单乙醇胺椰油酰胺基丙基甜菜碱的氯化物盐；

Amisoft^TM CS-11：N-椰油酰基谷氨酸钠盐；

Simulsol^TM 165：PEG-100硬脂酸脂和硬脂酸甘油酯的混合物；

Montanov^TM 202(花生醇、山萮基醇和花生基葡萄糖苷)，为自乳化组合物，如在EP0977626中描述的那些；

Lanol^TM99：异壬酸异壬酯；

Sepiplus^TM 400：聚丙烯酸酯在聚异丁烯中，并且包含聚山梨酯20的自身可逆反相胶乳，如WO 2005/040230所述；

Lipacide^TM C8G：由法国赛比克公司(SEPPIC)出售的辛酰基甘氨酸；

Micropearl^TM M310：粉末形式的用作质地修饰剂的交联聚甲基丙烯酸甲酯聚合物；

Sepimax^TM Zen(INCI名称：聚丙烯酸酯交联聚合物-6)：粉末形式的增稠聚合物；

Sepiplus^TM S(INCI名称：丙烯酸羟基乙酯/丙烯酰基二甲基牛磺酸钠共聚物和聚异丁烯和PEG-7三羟甲基丙烷椰子醚)：自可逆反相胶乳；

Amonyl^TM 265 BA(INCI名称：椰油基甜菜碱)：发泡两性表面活性剂；

Sepinov^TM EMT10(INCI名称：丙烯酸羟乙酯/丙烯酰基二甲基牛磺酸钠共聚物)：粉末形式的增稠共聚物；

Easynov^TM(INCI名称：辛基十二烷醇和辛基十二烷基木糖苷和PEG-30二聚羟基硬脂酸酯)：亲脂倾向的乳化剂；

Sepimat^TM H10 FW(INCI名称：甲基丙烯酸甲酯交联聚合物和角鲨烷)：用作质地剂的聚合物；

Sepitonic^TM M3(INCI名称：天冬氨酸镁、葡萄糖酸锌和葡萄糖酸铜)：用作自由基清除剂和细胞强化剂的混合物；

Montanov^TM L(INCI名称：C14-22醇和C12-20烷基葡糖苷)：乳化剂；

Montanov^TM 82(INCI名称：鲸蜡硬脂醇和椰油基葡糖苷)：乳化剂；

Simulgel^TM INS100(INCI名称：丙烯酸羟基乙酯/丙烯酰基二甲基牛磺酸钠共聚物和异十六烷以及聚山梨酯60)：聚合增稠剂。

Claims (3)

1.一种用于制备组合物C₁的方法，该组合物每100％其质量包含：

a)-从按质量计60.0％至按质量计75.0％的有机溶剂OS₁，该有机溶剂选自1,2-丙二醇、1,3-丙二醇、1,4-丁二醇、1,3-丁二醇、1,2-丁二醇、2-甲基-2,4-戊二醇、1,6-己二醇、1,8-辛二醇、或这些化合物的混合物；

b)-从按质量计0.1％至按质量计2.0％的组合物ES，该组合物包含表示为1-O-(2-咖啡酰基)苹果酰基-3,5-二-O-咖啡酰基奎宁酸的质量当量的、大于或等于200mg/g的按质量计的量x₁的至少一种具有通式(I)的化合物：

其中Q₁、Q₃、Q₄和Q₅彼此独立地表示羟基或其盐或选自以下的基团：

(i)-式(II)的咖啡酰基：

(ii)-式(IIIa)或(IIIb)的苹果酰基：

(iii)-式(IVa)或(IVb)的咖啡酰苹果酰基：

(iv)-式(Va)、(Vb)、(Vc)或(Vd)的苹果酰咖啡酰基，

其中，这些基团Q₁、Q₃、Q₄和Q₅中的至少一个既不表示-OH基团也不表示其盐；以及

c)-从按质量计20.0％至按质量计35.0％的水，

该方法包括以下连续的步骤：

-步骤a)，在无土条件下栽培植物牛蒡，用培养液施肥，以获得生物质BM₁；

步骤b)，将先前步骤a)获得的所述生物质BM₁的根浸入培养基S₁中，使得该生物质BM₁/培养基S₁的比率在0.5kg/l与1.5kg/l之间，所述培养基S₁每100％其自身质量包含按质量计从20％至35％的水，以及按质量计从65％至80％的选自以下的有机溶剂OS₁：1,2-丙二醇、1,3-丙二醇、1,4-丁二醇、1,3-丁二醇、1,2-丁二醇、2-甲基-2,4-戊二醇、1,6-己二醇、1,8-辛二醇或这些二醇的混合物，通过添加选自硫酸、磷酸和盐酸的质子酸将该培养基的pH调节至在1.5与3.5之间的值；

-步骤c)，分离步骤b)中所定义的处理结束时的生物质的根，以分离出液相L₁；

-步骤d)，将从步骤c)得到的所述生物质BM₂的根浸入所述培养基S₁中；其中生物质BM₂/培养基S₁的比率在0.1kg/l与1.5kg/l之间；

-步骤e)，分离在步骤d)所定义的处理结束时的所述生物质BM₂，以分离出液相L₂；

-步骤f)，过滤步骤e)中获得的所述液相L₂，以分离出液相L₃；

-步骤g)，将所述液相L₁与L₃混合，然后，如果需要，添加水和/或所述有机溶剂OS₁，以获得预期的组合物C₁。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述组合物ES包含：

-至少一种具有式(Ia)的化合物，对应于式(I)，其中Q₁表示式(IIIa)或式(IIIb)的苹果酰基，并且Q₃和Q₄和Q₅是相同的并各自表示式(II)的咖啡酰基；

-具有式(Ib)的化合物，对应于式(I)，其中Q₁表示式(IVa)或式(IVb)的咖啡酰苹果酰基，Q₃和Q₅各自表示式(II)的咖啡酰基，并且Q₄表示羟基，以及

-至少一种具有式(Ic)的化合物，其选自：

-具有式(Ic₁)的化合物，对应于式(I)，其中Q₁和Q₅各自表示式(II)的咖啡酰基，Q₃表示羟基，并且Q₄表示式(IVa)或式(IVb)的咖啡酰苹果酰基；以及

-具有式(Ic₂)的化合物，对应于式(I)，其中Q₁和Q₄表示式(II)的咖啡酰基，Q₃表示羟基，并且Q₅表示式(IVa)或式(IVb)的咖啡酰苹果酰基。

3.如权利要求1和2中任一项所述的方法，其特征在于，该有机溶剂OS₁是1,2-丙二醇。