CN103347528A

CN103347528A - 富含多酚的鳄梨果肉和/或果皮提取物及含有它的美容用、皮肤病用和营养品用组合物

Info

Publication number: CN103347528A
Application number: CN2011800622964A
Authority: CN
Inventors: 亚历克斯·索努瓦; 卡罗琳·博杜安; 苏菲·勒克莱尔-比安费; 塞巴斯蒂安·加尼耶; 菲利普·姆西卡
Original assignee: Laboratoires Expanscience SA
Current assignee: Laboratoires Expanscience SA
Priority date: 2010-12-22
Filing date: 2011-12-22
Publication date: 2013-10-09
Anticipated expiration: 2031-12-22
Also published as: KR20130132548A; BR112013015593A2; CN103347528B; WO2012085224A1; US20180369193A1; FR2969496B1; US20130183255A1; KR20180125612A; KR20230117253A; EP2654766B1; EP2654766A1; FR2969496A1; CA2821876A1; KR20190099356A; KR20210095741A; ES2704665T3; US11026441B2

Abstract

本发明涉及一种富含多酚的鳄梨果实提取物，含有的多酚重量以没食子酸当量计，为获得的干燥提取物重量的至少10％，其中所述多酚优选含有前花青素、咖啡酸及咖啡酸衍生物，其重量以没食子酸当量计，特别为多酚总重量的至少70％。本发明还涉及一种组合物，含有作为活性剂的发明所述提取物及适宜的赋形剂。本发明还涉及一种这样的组合物或提取物用于预防或治疗皮肤、粘膜或体表生长物(superficial body growths)的紊乱或病理状况。最后，本发明涉及一种包括施予该组合物或提取物的美容护理方法，用于改善皮肤、体表生长物或粘膜的状态或外观。

Description

富含多酚的鳄梨果肉和/或果皮提取物及含有它的美容用、皮肤病用和营养品用组合物

本发明涉及一种富含多酚的鳄梨果实，特别是鳄梨果肉和/或果皮，的提取物，以及含有该提取物和任选适宜载体的美容用、皮肤病用和营养品用组合物。

本发明的目的还在于提供一种提取富含多酚的鳄梨提取物的提取方法，以及所述方法得到的提取物。

本发明还涉及使用这种组合物或这种提取物以预防或治疗皮肤、粘膜或附属器的紊乱或病变。最后，本发明涉及一种包括施予该组合物或提取物的美容护理方法，用于改善皮肤、体表生长物或粘膜的状态或外观。

鳄梨树(Persea americana或Persea gratissim)属于樟科。

鳄梨的品种多样。在分布最广的品种中，可提及的有哈斯(Hass)、福尔特(Fuerte)、额廷格(Ettinger)培根(Bacon)、呐巴尔(Nabal)、阿纳海姆(Anaheim)、卢呐(Lula)、瑞德(Reed)、奏呔喽(Zutano)、奎恩(Queen)、科勒斯尔菲(Criol Selva)、墨西哥凯特(Mexicana Canta)、瑞吉恩德尚(Region Dschang)、霍尔(Hall)、布斯(Booth)、彼得斯(Peterson)和科林森若德(Collinson Redn)品种。特别选择哈斯、福尔特、额廷格和培根品种，且更优选哈斯和福尔特品种。果实的重量从50g可变化至超过１kg。果实含有10至20％的种子，7至15％的外皮和65至80％的果肉。果皮的厚度、结构和颜色可变，从光滑的到粗糙的，通常是绿色的，但可变为棕色、微紫色至黑色。

果肉的香味和颜色可变，且其平均组成为：

表1：鳄梨果肉的组成；*Wei Wang，食品化学，122：1193-1198(2010)(Composition of avocado flesh；*Wei Wang，Food Chemistry，122：1193-1198(2010))

南美人普遍使用鳄梨果肉为头发增光。在皮肤局部涂抹鳄梨果肉也非常普遍，这由于它的抗氧化性和营养性的活性，与其含有的脂类(脂肪酸和非皂化物成分-维他命E)的性质有关。

果实，特别是它的果肉通常在热带家庭治疗中使用。果实尤其富含维他命A、B、C、D、E和K，并推荐用于糖尿病患者。果肉还可杀螨(及杀虫)、壮阳、滋补。在南美敷用以治疗疖和疔。

已被证实大量使用鳄梨对胆固醇水平具有影响。特别是食用7天富含鳄梨的饮食之后，高胆固醇血症患者可见其总胆固醇水平降低17％。这一实验还证实LDL胆固醇水平(坏)和甘油三酯减低了22％，且HDL胆固醇(好)增加了11％。它的单不饱和脂肪酸对心血管卫生保健极好并血液胆固醇(HDL)有好处。此外鳄梨是非常好的纤维(可溶的和不可溶的)和抗氧化剂的来源。

术语“多酚”是指在植物领域普遍存在的一类分子，特征是存在一个或多个酚核，特别含有下述亚类：

■酚酸(肉桂酸和苯甲酸)；

■黄酮类，几乎所有的植物色素，决定了花、果实且有时为叶子的颜色。花青素属于这类成分(颜色为蓝色至紫色，经由红色)；

■醌和蒽醌类及某种衍生缩合形式；和

■更复杂的聚合形式：没食子酸和鞣花酸衍生的水解单宁；茶素酸、OPC或前花青素醇类(proanthocyanidols)衍生的缩合单宁。

已知这些分子有多种生物活性(抗氧化、抗炎、抗菌)且在药物、美容和营养/食品补充剂领域中用作某些特定的功能性结构。

多酚广泛分布于很多科的高等植物中，因为它通常为这些植物生存之必须，即对抗多种外在伤害(紫外线、干旱、微生物等)。

在分布最广、使用最多的多酚中，可提及的多酚来自茶(山茶Camelliasinensis)、葡萄(Vitis vinifera)、可可(Theobroma cacao)。申请FR2 928 263描述了一种含有植物多酚(特别描述了苹果多酚)和植物糖类的组合物。得到的多酚为聚合多酚，特别是前花青素和原飞燕草素(prodelphinidins)。鳄梨未作为糖类的来源而被引证。

发明者发现富含多酚的鳄梨(Persea gratissima或americana)提取物具有美容用、皮肤病用、药物用和营养品用的特性，特别是美容用和皮肤病用的特性在以前从未被描述。特别是第一次将富含多酚的鳄梨提取物因由其具体的特性而被用于此处。

本发明的目的特别在于：

-富含多酚的鳄梨果实提取物，含有的多酚重量以没食子酸当量计，为获得的干燥提取物重量的至少10％，所述多酚优选为前花青素、咖啡酸及咖啡酸衍生物，其重量以没食子酸当量计，特别为多酚总重量的至少70％。特别是该提取物含有的多酚重量以没食子酸当量计为获得的干燥提取物重量的10至30％。在所述多酚中的前花青素、咖啡酸或咖啡酸的衍生物的重量以没食子酸当量计，为多酚总重量的至少80％。

前花青素优选自B-型前花青素二聚体、A-和B-型前花青素三聚体和A-和B-型前花青素四聚体组成的组。

在提取物中含有的多酚含有以没食子酸当量计为多酚总重量至少30％的前花青素。

在该提取物中含有的多酚优选含有咖啡酸及其衍生物，其重量比以没食子酸当量计特别为多酚总重量的至少30％。

该提取物优选进一步含有以重量比计，至少为干燥提取物总重量10％，优选10至60％的鳄梨糖，所述糖至少含有D-甘露庚酮糖和/或鳄梨糖醇。

该提取物最好得自鳄梨果实提取物，优选在温和条件下干燥并脱脂的鳄梨果实提取物。

在一个优选方式中，其由部分鳄梨果肉在水和/或醇和/或二元醇的和/或丙三醇的溶剂中由固液提取法获得。溶剂优选自水、乙醇、丙三醇或二醇类例如丙二醇，及其混合物例如二元混合物组成的组，相对于其它溶剂有0至100％比例的水。

-一种组合物含有本发明提取物作用活性剂以及，优选一种适宜的载体。特别是，该组合物为美容用、药物用、皮肤病学用或营养保健品用组合物。

该组合物进一步包含另一活性剂，特别选自润肤剂、保湿的活性剂、角化调节剂、角质软化剂、愈合剂和/或重组皮肤屏障剂、PPAR、RXR或LXR激动剂、皮脂调节剂、抗刺激和/或抗炎和/或润肤剂、抗氧化剂、抗老化剂、脱色或美白祛斑剂、着色剂、脂肪分解或脂肪生成抑制剂或抗蜂窝组织炎或减肥剂、有机或无机的防晒剂或(色素或微粒)过滤剂、抗真菌化合物、防腐剂、抗菌剂、益生元、益生菌、抗生素和免疫调节剂组成的组。

该组合物优选含有用于治疗粉刺的活性剂作为另一活性剂，特别选自含有5-α还原酶抑制剂、锌(以及葡糖酸锌、水杨酸锌盐和焦谷氨酸锌)、螺内酯、亚油酸、抗生素、过氧化苯甲酰、壬二酸、维生素PP、维生素B3、细胞周期蛋白、南瓜子的提取物、南瓜籽油和棕榈。

-本发明的提取物或组合物用作药物用、皮肤病学用或美容用组合物或作为功能性食品。特别用于预防和/或治疗皮肤和/或粘膜和/或附属器紊乱或病变，更特别用于预防和/或治疗过敏、炎症、刺激性反应或病变，或皮肤屏障或动态平衡的紊乱，或血管病，或用作脱色或愈合剂。

-一种包括施予本发明的组合物或提取物，以期改善皮肤和/或附属器和/或粘膜状况或外观的美容护理方法。

措辞“富含多酚的鳄梨提取物”是指通过能富集在鳄梨中潜在的多酚的方法获得的提取物，在此方法中，提取物含有的多酚重量以没食子酸当量计为干燥提取物重量的至少10％。本发明另一优选变化方式中，提取物含有的多酚重量以没食子酸当量计为获得的干燥提取物重量的10至30％，多酚的重量更优选10至20％。

在本发明提取物中干燥提取物的比例以重量计，在提取物总重量0.01至90％之间变化，优选0.5至50％，更优选0.5至15％，甚至更优选0.5至5％。

在提取物中含有的多酚含有前花青素、咖啡酸和咖啡酸衍生物，特别是酯化衍生物的重量比例以没食子酸当量计为多酚总重量的至少70％，优选至少80％，更优选至少90％，甚至更优选至少95％。

前花青素是儿茶素/表儿茶素的低聚物。儿茶素和表儿茶素分别是下述分子式(I)的(+)和(-)光学异构体。

前花青素优选B-型前花青素二聚物。B-1、B-2、B-3和B-4型前花青素是由(+)儿茶素和(-)表儿茶素两个单元通过C₄-C₈相连组成。B-5、B-6、B-7和B-8型前花青素是由(+)儿茶素和(-)表儿茶素两个单元通过C₄-C₆相连组成。

前花青素更优选A和B型前花青素三聚物。

前花青素更优选A和B型前花青素四聚物。

前花青素更优选前花青素的低聚体或多聚体(儿茶素和表儿茶素的单元数量＞4)。

提取物中含有的多酚以没食子酸当量计优选含有多酚总重量至少30％，更优选至少50％重量的前花青素。

提取物中含有的多酚还优选含有咖啡酸及其衍生物的重量比以没食子酸当量计为多酚总重量中的至少20％，更优选至少30％重量比。

咖啡酸具有下述结构式(II)

咖啡酸及其衍生物，苯乙基咖啡酸酯(咖啡酸和2-苯乙基醇的酯)存在于多种植物中，特别在咖啡中大量存在，并因此得名。咖啡酸可以酯的形式存在，例如与奎尼酸形成绿原酸。在其它酯化形式中，可提及的是与酒石酸形成咖啡酰酒石酸(或咖啡酸)、咖啡酰莽草酸(与莽草酸形成)、咖啡酰苹果酸(与苹果酸形成)，或与葡萄糖成酯(咖啡酰葡萄糖)或与腐胺形成酰胺(咖啡酰腐胺)。

其它多酚也可存在于本发明提取物中，但是其含量不多。它们的重量含量以没食子酸当量计优选少于多酚总重量的30％，更优选少于20％，甚至更优选少于10％，甚至更优选少于5％，甚至更优选少于2％。

本发明另一优选变化方式中，提取物含有至少10％，优选10至60％，更优选10至30％的鳄梨糖，特别是所述糖至少含有D-甘露庚酮糖和/或鳄梨糖醇(百分数以其重量占干燥提取物的重量计)。

在本发明的上下文中，术语“D-甘露庚酮糖”和“鳄梨糖醇”均包括其化学衍生物。

鳄梨糖主要是D-甘露庚酮糖、甘露庚酮糖、蔗糖、葡萄糖和果糖。也可发现其它的糖的痕迹，但是其重量含量少于鳄梨糖总重量的5％，优选少于2％。

在发明提取物中，鳄梨糖中D-甘露庚酮糖和/或鳄梨糖醇总的重量比优选为总糖重量含量的至少50％。更优选鳄梨糖中D-甘露庚酮糖和/或鳄梨糖醇总的重量比为总糖重量含量的50至98％，更优选55至95％，甚至更优选60至90％。

D-甘露庚酮糖与鳄梨糖醇的重量比优选在1∶10至10∶1变化。

本发明提取物优选含有以重量百分比计为干燥提取物总重量0至50％，更优选0至20％，甚至更优选0至10％重量的鳄梨脂类。

本发明提取物优选含有以重量百分含量计为干燥提取物总重量，0至60％，更优选1至30％，甚至更优选5至15％重量的鳄梨蛋白质类(Bradford含量测定)。

本发明提取物通过提取部分鳄梨果实，优选果肉和/或果皮而获得。更特别的是使用源自压榨干燥鳄梨果肉的残余油饼。更优选的是，所述果肉在液体提取之前进行干燥。

特别优选使用鳄梨果实(果肉和/或果皮)，首先在温和条件下进行干燥，并再脱脂。已注意到在这样条件下通过多酚酶在干燥过程中失活，可确保选择性保护多酚(甚至得到的提取物中不含有多酚酶)。

优选，提取物是部分鳄梨果肉在水和/或醇和/或二元醇的(glycolic)和/或丙三醇的(glycerolic)溶剂中通过固-液提取法获得。果实部分优选自干燥和/或脱脂果肉(油饼)和/或果皮，更优选在温和条件下干燥之后脱脂的果肉。

溶剂优选自由水、乙醇、丙三醇或二元醇(glycol)例如丙二醇，及其混合物例如二元混合物组成的组，相对于其它溶剂中有0至100％比例的水。

基本上，使用的溶剂二元混合物是水和选自乙醇、丙三醇或丙二醇组成的组。

更优选将按重量0.1至50％(以鳄梨+溶剂总重量计)的鳄梨干燥部分放入提取溶剂中，且重量更优选10％。

在乙醇存在时，优选水中的乙醇比为30至70％，且优选含醇量为50至60％(百分比以在水和乙醇总重量中的乙醇重量计)。

在丙三醇存在时，优选丙三醇的浓度为40至90％，且优选为60至80％(百分比以在水和丙三醇总重量中的丙三醇重量计)。

在二元醇存在下，更优选丙二醇，优选水中的丙二醇比为40至80％，且优选含醇量为50至60％(百分比以在水和丙二醇总重量中的丙二醇重量计)。

提取温度优选在4至100℃，且优选在10至60℃，且更优选在15至30℃。

提取时间优选在30分钟至4小时内变化，更优选为30分钟至2小时。

这些不同的提取物可随后用超滤(例如截留10kDa)、透析过滤和/或纳米过滤(例如截留200Da)进行纯化，除去糖(具体包括C₇鳄梨糖、甘露庚酮糖和鳄梨糖醇)以富集多酚。

由这些纯化步骤得到的提取物含有的多酚重量以没食子酸当量计，优选为干燥提取物重量的10至30％，多酚重量甚至更优选为10至20％。

由这些纯化步骤得到的提取物中的糖的重量含量优选为干燥提取物重量的5至20％。

在提取物中存在的糖重量优选含有以糖总重量计为20至60％的D-甘露庚酮糖和/或鳄梨糖醇，更优选30至60％的D-甘露庚酮糖和/或鳄梨糖醇。

获得的提取物可以液体形式提供，也可以用本领域技术人员已知的方法例如喷雾或冷冻干燥法来干燥，加入或不加入助剂例如糊精。

本发明目的还在于一种包括下述连续步骤的制备富含多酚提取物的方法：

(a)将鳄梨果实(优选果肉和/或果皮)，更优选干燥脱脂果肉(油饼)在适宜溶剂中液相分散。

(b)接着将步骤(a)中获得的混合物在水和/或醇和/或二元醇的和/或丙三醇的溶剂中搅拌，更优选水和选自乙醇、丙三醇、二元醇(优选丙二醇)及其混合物组成的组的溶剂，优选水中这些溶剂比为60％。

(c)接着将步骤(b)中获得的提取物浓缩并随后过滤，或直接过滤。

(d)如果需要，将步骤(c)获得的提取物进行超滤和/或透析过滤和/或纳米过滤的步骤；

(e)步骤(c)或(d)之后，回收获得富含多酚的提取物；且

(f)选择性干燥步骤(e)中获得的提取物，加入助剂或不加。

提取物优选用作含有一种或多种适宜载体的美容用、药物用、皮肤病学用或营养保健品用组合物的活性剂。该组合物除了富含多酚的提取物之外还可进一步含有至少一种其它的活性物质。这种其它的物质可选自所有的物质及其下述功能等效物质。

其它的物质可特别选自典型用于皮肤病用、药物用、美容用或营养保健品用的活性剂，以及本领域技术人员公知的那些，例如润肤剂、保湿的活性剂、角化调节剂、角质软化剂、愈合剂和/或重组皮肤屏障剂、PPAR、RXR或LXR激动剂、皮脂调节剂、抗刺激和/或抗炎和/或润肤剂、抗氧化剂、抗老化剂、脱色或美白祛斑剂(hypopigmenting)、着色剂、脂肪分解或脂肪生成抑制剂或抗蜂窝组织炎或减肥剂、有机或无机的防晒剂或(色素或微粒)过滤剂、抗真菌化合物、防腐剂、抗菌剂、益生元、益生菌、抗生素和免疫调节剂。

更特别的是，可组合使用的愈合剂和/或重组皮肤屏障剂优选为泛醇(维生素B5)、阿拉伯半乳聚糖、氧化锌、神经酰胺、角鲨烷、胆固醇和磷脂。

可组合使用的皮脂调节剂，优选自5-α还原酶抑制剂，如锌和锌衍生物(其葡糖酸盐、水杨酸盐和焦谷氨酸)组成的组。

抗炎和/或抗刺激和/或润肤剂可以是阿拉伯半乳聚糖。

美白祛斑剂或脱色剂中，特别可提及N-十一碳烯-L-苯丙氨酸

可以组合使用的防晒活性剂优选UVB和/或UVA过滤剂或防晒剂，例如本领域技术人员已知的矿物和/或有机屏障或过滤剂，本领域技术人员可根据需要的保护程度进行选择并调整浓度。

可组合使用的防腐剂，例如为通常用于化妆品或保健食品中，具有抗菌活性的分子(类防腐剂)如辛酸衍生物等，例如，辛酰基甘氨酸和甘油辛酸酯，己二醇，乙酰丙酸钠和铜和锌的衍生物(葡糖酸盐和PCA)。

与本发明提取物组合使用的推荐活性剂中，可提及的是植物提取物，特别是：

-植物油，例如大豆油和/或菜籽油，鳄梨油(WO2004/012496，WO2004/012752，WO2004/016106，WO2007/057439)，羽扇豆油，或这些油的混合物优选白甜羽扇豆油(WO98/47479)；

-油馏出液或动物或植物油的浓缩物，特别是向日葵，更优选葵花亚油酸浓缩物，例如葵花油浓缩的非皂化物

(参见国际申请WO01/21150)，由Laboratoires Expanscience出售，油浓缩的非皂化物，如鳄梨油、菜籽油，玉米油或棕榈油，有显著的保湿和/或润肤、愈合和/或皮肤屏障重组、抗炎和/或抗刺激和/或舒缓活性；

-植物或植物油的非皂化物，优选是可通过国际申请WO01/21605所述方法获得的鳄梨呋喃类

鳄梨和/或大豆的非皂化物，更优选鳄梨呋喃非皂化物和大豆非皂化物的混合物，优选其各自比例约1/3-2/3(例如

大豆非皂化物(例如据国际申请WO01/51596所述方法获得)、甾醇类非皂化物(典型的非皂化物，其中甾醇类、甲基甾醇类和三萜醇的重量比为非皂化物总重的20至95％，优选45-65％)，植物甾醇类，甾醇类酯和维生素衍生物，有显著的愈合和/或皮肤屏障重建、抗老化或抗炎活性；

-植物氨基酸的肽类或混合物，特别是鳄梨肽(如在国际申请WO2005/105123所述的)，羽扇豆肽(如根据申请WO2005/102259中所述方法获得的)，藜麦肽(如在国际申请WO2008/080974中所述的)，玛卡(maca)肽(如在国际申请中WO2004/112742所述的)，发酵或非发酵的大豆肽，大米肽(如在国际申请WO2008/009709中所述的)，有显著的保湿和/或润肤活性(牛油果)，美白祛斑活性(羽扇豆，藜麦)，愈合和/或的皮肤屏障重组活性(玛卡、藜麦，大豆)，抗炎和/或抗刺激和/或舒缓活性(羽扇豆，藜麦)，抗氧化活性(牛油果)，抗老化活性(羽扇豆，玛卡)和着色活性(大米)；

-植物糖，特别是鳄梨糖(如申请WO2005/115421中所述的)，具有显著的美白祛斑、愈合和/或皮肤屏障重组，抗炎和/或抗刺激和/或舒缓的特性；

-鳄梨油酸丁酯(5alpha 5-α还原酶抑制剂(见WO01/52837和WO02/06205)通常调节被发现能增加痤疮、头皮屑的脂溢性分泌物；

-富含多酚提取物，更优选白花菜(Gynandropsis gynandra)(FR1 061 051)地上部分的提取物和玛卡叶的提取物(FR1061051)。

-羽扇豆醇(FR2 8228212，FR857596)显著用于促进愈合；

-羽扇豆总提取物(如在国际申请WO2005/102259中所描述的)，特别适用于刺激的治疗；

-大叶金合欢(Acacia macrostachya)种子(FR0958525)、玛卡叶(FR1061047)、五味子(Schisandra sphenanthera)种子(FR250955343和0955344FR)和豇豆(Vigna unguiculata)种子(FR0958529)的提取物。

在这些与本发明提取物推荐合用的活性剂中，可提及的是噁唑啉，特别是选自2-十一烷基-4-羟甲基-4-甲基-1，3-噁唑啉，2-十一烷基-4，4-二甲基-1，3-噁唑啉，(E)-4，4二甲基-2-十七碳基-8-烯基-1，3-噁唑啉，4-羟甲基-4-甲基-2-十七烷基-1，3-噁唑啉，(E)-4-羟甲基-4-甲基-2-十七碳基-8-烯基-1，3-噁唑啉，2-十一烷基-4-乙基-4-羟甲基-1，3-噁唑啉组成的组，优选2-十一烷基-4，4-二甲基-1，3-噁唑啉(OX-100或

WO2004050052，WO2004050079，WO2004112741)。特别用其消炎和/或抗刺激和/或舒缓、抗氧化、脱色、免疫调节的活性。

在与本发明提取物推荐合用的活性剂中，可提及的是5-α还原酶抑制剂，例如鳄梨油酸丁酯

所有这些组合物中除了富含多酚的鳄梨提取物之外含有至少一种其它的活性物质，且可包括两种、三种、四种或多种的上述活性物质。

本发明组合物可配制成多种形式适用于局部给药，适用于口服、直肠、阴道、鼻、耳或支气管给药，以及用于肠胃外给药。

有关第一个的变化方式，适于局部给药的多种制剂特别包括霜剂、乳液、乳、润发油、洗液、油、水或水-醇或二元醇的溶液、粉剂、贴剂、喷雾剂、洗发水、涂剂(varnishes)或任何其它的外用产品。

有关第二个的变化方式，适于口服给药的多种制剂中，富含多酚的鳄梨提取物与营养补充剂或者营养组合物混合。在本发明的上下文中，营养补充剂可以富含多酚的鳄梨提取物的形式，或硬或软的植物胶囊或胶囊的形式提供。可以含有以富含多酚的鳄梨提取物计为10～100％的所述营养补充剂

本发明组合物可直接且未经其它的修饰，通过例如搅拌、灌输、注入、混合、吸收、捏合和喷涂技术，混入到营养制品、减肥产品，特别是超蛋白(hyper-protein)制品或饮料中。

本发明混合物或组合物的给药方式、剂量和植物制剂形式可根据在药物治疗，特别是皮肤病用、美容用或兽用治疗中确立的适于患者或动物的，通常考虑的标准，例如患者或动物的年龄或体重、患者或动物总体状态的严重性、治疗耐受量、需注意的副作用和皮肤类型等而确定。根据所期望的给药类型，本发明的活性组合物和/或混合物可进一步含有至少一种药学上可接受的载体，特别是皮肤病学可接受的载体或美容用或营养品用可接受载体。有关第一种的变化方式，使用适于体外局部给药的载体。本发明组合物还可进一步含有至少一种药用或美容用的本领域技术人员已知的助剂，选自增稠剂、防腐剂、香料、着色剂、化学或矿物过滤剂、保湿剂、热水等。

具有所述特征含有富含多酚的鳄梨提取物的组合物特别用于美容、药用或皮肤病。组合物优选配制成适于局部给药的形式。

本发明的目的还在于使用富含多酚的鳄梨提取物制备美容用、药用、皮肤病用或营养用组合物或功能性食品。

优选本发明的组合物或提取物用于预防和/或治疗皮肤、粘膜或附属器的紊乱或病变。

特别是，本发明的组合物或提取物旨在预防和/或治疗过敏、炎症、刺激性反应或病变，或皮肤、附属器(头发和指甲)和/或粘膜(牙龈、牙周、生殖器粘膜)屏障或动态平衡的紊乱，不论是否不成熟的、正常的或成熟的/老化的。

措辞“皮肤、附属器和/或粘膜屏障的紊乱”是指介入皮肤外层水平的紊乱。

措辞“皮肤、附属器和/或粘膜动态平衡的紊乱”是指由细胞更新或平衡过程引起的紊乱，例如银屑病、过敏性皮炎、尿布疹、皮肤干燥(干燥症)、皮肤脱水和光敏性皮肤病。

优选本发明的组合物或提取物用于预防和/或治疗如下的反应、紊乱或病变：

-皮肤、如酒渣鼻或红斑(erythrocouperosis)、银屑病、血管病、尿布疹、特应性皮炎、湿疹、接触性皮炎、刺激性皮炎、遗传过敏性皮炎、脂溢性皮炎(乳乙痂)、敏感性皮肤、反应性皮肤、瘙痒、皮肤干燥(干燥症)、皮肤脱水、皮肤发红、皮肤红斑、老化或光老化皮肤、光敏性皮肤病、色素沉着性皮肤(黄褐斑、炎症后的色素沉着)、皮肤蜂窝组织炎、皮肤松弛、妊娠纹、皮屑、皲裂、咬伤、破裂(特别是乳房的)、晒伤、由所有类型的射线、受到化学、物理(例如孕妇的张应力)、细菌、真菌或病毒、寄生虫(虱、疥疮、癣、螨虫、皮肤癣菌)或放射性物质或先天免疫(抗菌肽)或获得性免疫(细胞、体液、细胞因子)缺陷的刺激所引起的炎症，和/或

-粘膜如牙龈和牙周的牙龈炎(牙龈敏感的新生儿，卫生问题，由于使用烟草或其他产品引起)，齿槽病或男性或女性生殖器的生殖器粘膜呈现外部或内部的刺激，和/或

-上皮附属器，例如指甲(易断、脆性指甲等)和头发(脱发、头皮屑、多毛症、脂溢性皮炎、毛囊炎)，无论是不成熟的、正常的或成熟，特别是出现的头皮紊乱，例如雄激素、急性的、局部的、瘢痕和先天性的、婴儿枕部和簇状的脱发(或斑秃)、由于化疗/放疗或静止期引起的脱发、再生期脱发、毛囊萎缩、拔毛发癣、癣或油性或干性的头屑。

本发明的组合物或提取物还优选用于预防和/或治疗血管病，且优选通过减少黑素和/或抑制酪氨酸酶用于色素沉着不足，或作为愈合剂。

本发明还涉及一种为了改善皮肤、体表性生长或粘膜状态或外观的美容护理方法，包括施予本发明美容用组合物或提取物。

本发明美容方法的实施例中，所述皮肤和/或附属器和/或粘膜优选那些敏感的，被环境(紫外线、污染)刺激或损伤的，特别是敏感性皮肤。

本发明的美容方法，其特征还在于该组合物或提取物用作保湿性产品，或作为时间或光诱导的抗老化产品，预防衰老和光诱导的老化，或作为减肥和/或抗蜂窝织炎的产品，或作为抗老化或抗老祛斑的产品。

措辞“保湿性产品”是指能预防和/或治疗皮肤、附属器和/粘膜的屏障或动态平衡的紊乱的产品。

措辞“抗老祛斑产品”是指能减少皮肤和/或附属器和/或粘膜的色素沉着斑的产品。

措辞“减肥和/或抗蜂窝织炎的产品”是指能改善皮肤的紧致度、弹性或张性，和/或对抗脂肪组织的堆积和皮肤蜂窝织炎的产品。

实施例1

将干燥并脱脂的鳄梨果肉(油饼)在室温下，搅拌分散于浓度为10％、乙醇/水为60/40(w/w)的混合液中1个小时。通过过滤、沉降或离心法将残余的干物质与液相分离，并且为了得到透明溶液，使用适宜孔径的过滤器过滤获得液相。获得的提取物具有下述特性：

■干燥提取物：2.56％

■总糖(葡萄糖、果糖、甘露庚酮糖、鳄梨糖醇；HPLC)：19.5％/干燥物

■总多酚(Folin-Ciocalteu；没食子酸当量)：14％/干燥物

■蛋白质(Bradford分析法)：6.25％/干燥物

该提取物具有抗辐射活性，“管内”(in tubo)抗-DPPH活性，可测定其最大半数抑制浓度(IC₅₀)且为干燥提取物的111μg，这代表10.6μg的多酚在反应介质中。

实施例2

将干燥并脱脂的鳄梨果肉(油饼)在室温下，搅拌分散于浓度为10％、丙三醇/水为60/40(w/w)的混合液中1个小时。通过过滤、沉降或离心法将残余的干物质与液相分离，并且为了得到透明溶液，使用适宜孔径的过滤器过滤获得液相。获得的提取物具有下述特性：

■干燥提取物：3.45％

■总糖(葡萄糖、果糖、甘露庚酮糖、鳄梨糖醇；HPLC)：19％/干燥物

■总多酚(Folin-Ciocalteu；没食子酸当量)：12％/干燥物

■蛋白质(Bradford分析法)：9％/干燥物。

该提取物具有抗辐射活性，“管内”抗-DPPH活性，可测定其最大半数抑制浓度(IC₅₀)且为干燥提取物的84μg，这代表有11.85μg的多酚在反应介质中。

实施例3

将干燥并脱脂的鳄梨果肉(油饼)在室温下，搅拌分散于浓度为10％、丙二醇/水为60/40(w/w)的混合液中1个小时。通过过滤、沉降或离心法将残余的干物质与液相分离，并且为了得到透明溶液，使用适宜孔径的过滤器过滤获得液相。获得的提取物具有下述特性：

■干燥提取物：2.74％

■总糖(葡萄糖、果糖、甘露庚酮糖、鳄梨糖醇；HPLC)：22％/干燥物

■总多酚(Folin-Ciocalteu；没食子酸当量)：16％/干燥物

■蛋白质(Bradford分析法)：7％/干燥物。

该提取物具有抗辐射活性，“管内”抗-DPPH活性，可测定其最大半数抑制浓度(IC₅₀)且为干燥提取物的119.5μg，这代表18.5μg的多酚在反应介质中。

实施例4：局部给药组合物

本发明存在下述多种用于局部给药的组合物。鳄梨(Persea gratissima和americana)富含多酚的提取物可与多种美容用产品，例如清洁水、水包油乳剂、油包水乳剂、油类、乳、乳液、洗发水、泡腾产品和喷雾剂混合，其组成如下：

敏感性皮肤的清洁水

商品或INCl名称	％
		辛酰甘氨酸	0-1％
钠碱液	0-1％
		螯合剂	0-1％
丁二醇	1-5％
		β-胡萝卜素	0-2％
富含多酚的鳄梨提取物	0.01-10％
		防腐剂	0-1％
PEG-32	1-5％
		PEG-7棕榈椰油酸	1-5％
葡萄糖酸锌	0-1％
		柠檬酸	0-1％
纯水	适量至100％
		香精	0-1％
泊洛沙姆(Poloxamer)184	1-5％

抗老化乳液

商品或INCl名称	％
		液状异链烷烃	5-20％
硬脂酸异鲸蜡醇	5-20％
		Al-Mg羟基硬脂酸	5-20％
Abil WE09	1-5％
		甘油	1-5％
凡士林油	1-5％
		微粉化氧化锌	1-5％
丁二醇	1-5％
		维生素A	0-1％
维生素C	0-5％
		富含多酚的鳄梨提取物	0.01-10％
异壬酸异壬酯	1-5％
		蜂蜡	1-5％
酒石酸钠	1-5％
		氯化钠	0-5％
甘氨酸	1-5％
		防腐剂	0-1％
胆固醇	0-1％
		植物鞘氨醇(Phytosphingosin)	0-1％
酒石酸	0-1％
		纯水	适量至100％

干燥、特应性皮肤乳

原料/商品或INCl名称	％
		甜扁桃仁油	1-5％
玉米油	1-5％
		硬脂酸	1-5％
C₁₆～C₁₈鲸蜡醇	0-1％
		消泡剂70414	0-1％
月桂醇110E	1-5％
		PEG300单月桂酸酯	0-1％
甘油单油酸酯	0-1％
		单硬脂酸甘油酯	1-5％
维生素B12	0-5％
		富含多酚的鳄梨提取物	0.1-10％
防腐剂	0-1％
		柠檬酸	0-1％
柠檬酸三钠	0-1％
		纯水	适量至100％
香料	0-1％
		花生油	1-5％
氢化棕榈油	1-5％

清洁霜

原料/商品或INCl名称	％
		纯水	适量至100％
Arlatone	10-30％
		椰油基-糖苷(Cocoglucoside)	5-20％
羟丙基瓜尔胶	1-5％
		辛酰甘氨酸	0-2％
防腐剂	0-2％
		香料	0-1％
柠檬酸	0-1％
		PCA锌	0-1％
富含多酚的鳄梨提取物	0.01-10％

去屑洗发水

原料/商品或INCl名称	％
		纯水	适量至100％
月桂酰两性基乙酸(Lauroamphoacetate)	5-20％
		椰油基-糖苷	5-20％
PEG6000二硬脂酸酯	1-5％
		防腐剂	0-2％
维生素F	0-5％
		吡罗克酮乙醇胺(Piroctone olamine)	0-2％
富含多酚的鳄梨提取物	0.01-10％
		吡啶硫酮锌	0-1％
pH调节剂	0-1％
		螯合剂	0-1％
香料	0-1％

实施例5：口服给药组合物

将鳄梨提取物加入口服组合物中，在组合物中能够每日施予50至200mg的富含多酚的鳄梨提取物。

1、软胶囊形式的抗妊娠纹组合物

该组合物每天以4至6粒500mg的胶囊施予。

2、抗脱发片剂

该组合物每天以5至8片的片剂施予。

3、减肥药粉棒的实施例

该组合物每天施予两次。

实施例6：生物活性

1.抗炎作用

a、对角蛋白细胞的抗炎作用

皮肤中，角蛋白细胞是首先参与应答环境攻击的炎性反应的细胞之一。

该“被攻击的”角蛋白细胞随后释放细胞因子，引起包括免疫系统在内的级联反应。

材料和方法：

将人角化细胞(NCTC-2544细胞系)与经富集多酚的鳄梨提取物(AV)在浓度0.005％和0.01％(活性物质的W/V)或抗炎剂参照分子(10^-7M地塞米松、10^-6M吲哚美辛)预培养或不预培养(对照)24小时。随后始终在AV或参照品存在下将细胞用0.1μg/ml的十四酰佛波乙酸酯(PMA)处理24小时。

处理后，在培养液的上清液通过EL1SA测定分泌的白细胞介素8(IL8)和前列腺素E2(PGE2)量。

该结果用学生氏T-检验(Student’s t-test)统计分析。

结果和结论：

AV强烈并显著抑制了角蛋白细胞中PMA刺激的炎性介质IL8和PGE2的产生。

AV提取物因此具有抗炎活性。

表1角蛋白细胞产生的IL8和PGE2

b.对中性白细胞生成白三烯B4的抑制

白三烯B4(LTB4)是花生四烯酸通路引起的脂质炎性介质。

LTB4通过人类嗜中性粒细胞由5-脂氧合酶催化而被大量产生并释放，它在皮肤炎症反应的发展中扮演重要角色。

材料和方法：

人类中性白细胞在经富集多酚的鳄梨提取物(AV)浓度为0.005％、0.01％和0.1％(活性物质的W/V)的条件下预培养15分钟。

随后加入1mg/ml酵母多糖刺激细胞。

培养10分钟后，用ELISA法测定细胞上清液中细胞释放的白三烯B4(LTB4)。

结果用学生氏T检验进行统计分析。

结果和结论：

AV显著抑制了中性白细胞由酵母多糖诱导的LTB4的产生(表2)。

因此，AV提取物可调节嗜中性粒细胞和LTB4诱导的炎症。

表2中性白细胞产生的白三烯B4

C对组胺释放的抑制

肥大细胞在过敏和炎症反应中扮演了重要角色。在人体内，其广泛分布在结缔组织、例如皮肤中。血清肥大细胞是局部炎症应答的前哨细胞。物质P，一种神经肽，通过诱导储存颗粒中形成的组胺的快速释放而作用于肥大细胞；这种神经源性炎症的机制包含于多种皮肤病理中。

材料和方法：

肥大细胞在经富集多酚的鳄梨提取物(AV)浓度为0.01％(活性物质的W/V)或10mM钙(组胺释放抑制剂的参照组)的条件下预培养30分钟。

肥大细胞随后用10μM物质P刺激15分钟。培养后，用ELISA法测定组胺的释放。

结果用学生氏T检验进行统计分析。

结果和结论：

AV显著抑制了物质P刺激的肥大细胞的组胺的释放(表3)。

该AV提取物可显著调节组胺相关的神经源性炎症。

表3肥大细胞释放的组胺

2.脱色作用

AV提取物的脱色作用在两个不同的模型中进行研究：评价黑素细胞中黑素的产生以及评价参与黑素形成的关键酶——酪氨酸酶的酶的活性。

a、黑素生成的抑制

材料和方法：

将正常人类表皮的黑素细胞在10^-7M NDP-MSH(α-MSH黑素生成的类诱导剂)和经富集多酚的鳄梨提取物(AV)浓度为0.001％和0.005％(活性物质的W/V)或0.25mM曲酸(参照)的存在下培养。

培养240小时后，从细胞提取和色素并用分光光度法测定。

结果用学生氏T检验进行统计分析。

结果和结论：

AV显著抑制了NDP-MSH刺激黑素细胞而产生的黑素(表4)。

因此AV具有脱色作用。

表4黑素细胞产生的黑素

b、酪氨酸酶活性的抑制

材料和方法：

经富集多酚的鳄梨提取物(AV)和多种浓度的曲酸(参照)在低温下，在提取自人黑素细胞的酪氨酸酶的存在下，预培养10分钟。

随后加入酶底物——2mM L-DOPA

在37℃培养1小时后，通过分光光度法评价酶的活性

结果用学生氏T检验进行统计分析。

结果和结论：

AV显著抑制了酪氨酸酶的酶活性(表5)。该结果证实了该提取物的脱色作用。

表5人酪氨酸酶活性

3.愈合作用：刺激表皮细胞再生的标志物

创伤诱导的瘢痕形成机制包括表皮修复再生的过程。

皮肤表皮细胞再生包括有组织的角蛋白细胞的再生、帕维曼托斯(pavimentous)、分层和角化覆盖伤口的上皮细胞以及保护屏障的重建。

表皮细胞再生机制通过三个步骤进行：角蛋白细胞的迁移、增生和表皮的成熟。

研究AV提取物对表皮细胞再生过程中参与角蛋白细胞迁移步骤的标志物、层粘连蛋白5和基质金属蛋白酶9(MMP9)的基因表达。

材料和方法：

正常人类角蛋白细胞在经富集多酚的鳄梨提取物(AV)浓度为0.001％和0.005％(活性物质的w/v)或5ng/ml TGFp(参照)的存在下培养48小时。

通过实时RT-PCR研究MMP9和层粘连蛋白5(亚基γ2)的基因表达。

结果用单因素方差分析法并用邓奈特检验(Dunnett’s test)进行统计分析：ns(不显著)p＞0.05；*p＜0.05；***p＜0.001.

结果和结论：

AV显著增加了角蛋白细胞迁移标志物的表达(表6)

该提取物因而具有激发表皮再生的作用，促进修复、提前愈合的作用。

表6角蛋白细胞迁移标志物的基因表达(相对量)

Claims

1.一种富含多酚的鳄梨果实提取物，含有相对于获得的干燥提取物、以没食子酸当量计至少10％优选10至30％重量的多酚，所述多酚优选含有相对于多酚的总重量、以没食子酸当量计特别地为至少70％重量的前花青素、咖啡酸及咖啡酸衍生物。

2.如权利要求1的提取物，其特征在于所述多酚含有相对于多酚的总重量、以没食子酸当量计至少80％重量的前花青素、咖啡酸或咖啡酸衍生物，所述前花青素优选自B-型前花青素二聚体、A-和B-型前花青素三聚体和A-和B-型前花青素四聚体组成的组。

3.如权利要求1或2的提取物，其特征在于在该提取物中含有的多酚含有相对于多酚的总重量、以没食子酸当量计至少30％的前花青素。

4.如上述任一权利要求的提取物，其特征在于在该提取物中含有的多酚含有相对于多酚的总重量、以没食子酸当量计至少30％重量的咖啡酸及其衍生物。

5.如上述任一权利要求的提取物，其特征在于该提取物进一步含有相对于干燥提取物的重量，重量百分比为至少10％，优选10至60％的鳄梨糖，所述鳄梨糖至少含有D-甘露庚酮糖和/或鳄梨糖醇

6.如上述任一权利要求的提取物，其特征在于该提取物通过提取鳄梨果实而获得，优选通过提取首先在温和条件下被干燥，随后经脱脂的鳄梨果实。

7.如权利要求1～6任一提取物，其特征在于在水和/或醇和/或二元醇的和/或丙三醇的溶剂中通过固液提取法提取部分鳄梨果实从而获得该提取物。

8.如权利要求7的提取物，其特征在于溶剂选自水、乙醇、丙三醇或例如丙二醇的二元醇或其混合物组成的组，优选二元混合物，其中在该混合物中，相对于其它溶剂，水的比例为0至100％。

9.一种组合物，含有作为活性剂的权利要求1至8任一所述提取物和合适的载体，其特征在于该组合物为美容用、药物用、皮肤病用或营养品用组合物。

10.如权利要求9的组合物，进一步含有另一活性剂，特别选自由润肤剂、保湿的活性剂、角化调节剂、角质软化剂、愈合剂和/或重组皮肤屏障剂、PPAR、RXR或LXR激动剂、皮脂调节剂、抗刺激和/或抗炎和/或润肤剂、抗氧化剂、抗老化剂、脱色或美白祛斑剂、着色剂、脂肪分解或脂肪生成抑制剂或抗蜂窝组织炎或减肥剂、有机或无机的防晒剂或(色素或微粒)过滤剂、抗真菌化合物、防腐剂、抗菌剂、益生元、益生菌、抗生素和免疫调节剂组成的组。

11.如权利要求9或权利要求10的组合物，其特征在于另一活性剂选自：

愈合剂和/或和/或重组皮肤屏障剂，优选为泛醇、阿拉伯半乳聚糖、氧化锌、神经酰胺、胆固醇、角鲨烷和磷脂；

皮脂调节剂，优选自5-α还原酶抑制剂和锌衍生物；

抗炎和/或抗刺激和/或润肤剂，优选阿拉伯半乳聚糖；

美白祛斑或脱色剂，优选N-十一碳烯-L-苯丙氨酸；

有机或无机的防晒剂或过滤剂，优选UVB和/或UVA防晒剂和过滤剂；以及

防腐剂，优选自辛酰基甘氨酸、甘油辛酸酯和己二醇。

12.如权利要求9至11任一的组合物，进一步含有至少一种其它活性剂，选自：

植物油，优选大豆油、菜籽油、鳄梨油、羽扇豆油或这些油的混合物，优选白甜羽扇豆油；

油馏出液或动物或植物油的浓缩物，优选向日葵、鳄梨、油菜籽、大米或棕榈的，且优选在非皂化物中浓缩的浓缩物；

植物或植物油的非皂化物，优选鳄梨非皂化物、大豆非皂化物或其混合物，优选鳄梨呋喃类，且优选鳄梨呋喃非皂化物和大豆非皂化物各自配比约为1/3-2/3的混合物、甾醇类非皂化物、植物甾醇类、甾醇的酯及维生素衍生物；

植物氨基酸的肽类或混合物，优选是鳄梨肽、羽扇豆肽、藜麦肽、玛卡肽、发酵或非发酵的大豆肽、大米肽；

植物糖类，优选鳄梨糖；

鳄梨油酸丁酯；

富含多酚的提取物，优选白花菜地上部分的提取物和玛卡叶的提取物；

羽扇豆醇；

羽扇豆总提取物；

大叶金合欢种子提取物、玛卡叶提取物、五味子种子提取物和豇豆种子的提取物；

噁唑啉类，优选2-十一烷基-4-羟甲基-4-甲基-1，3-噁唑啉、2-十一烷基-4，4-二甲基-1，3-噁唑啉、(E)-4，4-二甲基-2-十七碳基-8-烯基-1，3-噁唑啉、4-羟甲基-4-甲基-2-十七烷基-1，3-噁唑啉、(E)-4-羟甲基-4-甲基-2-十七碳基-8-烯基-1，3-噁唑啉、2-十一烷基-4-乙基-4-羟甲基-1，3-噁唑啉和2-十一烷基-4，4-二甲基-1，3-噁唑啉及其混合物。

13.权利要求9至12任一的组合物，其特征在于将该组合物配制成经局部或口服途径给药。

14.如权利要求9至13任一的组合物或权利要求1至8任一定义的提取物，被用于预防和/或治疗皮肤和/或粘膜和/或附属器的紊乱或病变，优选过敏、炎症或刺激反应或皮肤屏障或角化的病变或紊乱或血管病，或用作脱色和愈合剂。

15.一种美容护理方法，包括施予如权利要求9至13任一所述的美容用组合物或权利要求1至8任一定义的提取物，用于皮肤、附属器和/或粘膜，特别是敏感皮肤，以期改善其状态或外观，特别是为了促进其水合，或改善皮肤的紧致度、弹性或张性并防止脂肪组织的堆积及皮肤的蜂窝织炎，或减少色斑，或预防和/或治疗老化。