CN111973563A - 一种鼠李糖脂冻干粉制剂及其制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种鼠李糖脂冻干粉制剂及其制备方法和应用，涉及医药技术领域。本发明鼠李糖脂冻干粉制剂的组成为：5％‑10％鼠李糖脂、5％‑10％二硬脂酰基磷脂酰胆碱(DSPC)、10％‑30％卵磷脂、40％无水乙醇和10％‑40％生理盐水。本发明选用天然来源的鼠李糖脂作为主要成分，成本低廉，毒性小，能有效治疗新生儿呼吸窘迫综合征；具有良好的化学稳定性、药效佳。

Description

一种鼠李糖脂冻干粉制剂及其制备方法和应用

技术领域

本发明属于医药技术领域，特别是涉及一种以鼠李糖脂为主要成分的 抗新生儿呼吸窘迫综合征的药物，具体是一种鼠李糖脂冻干粉制剂及其制 备方法和应用。

背景技术

新生儿呼吸窘迫综合征，又称新生儿肺透明膜病。指新生儿出生后不 久即出现进行性呼吸困难和呼吸衰竭等症状，主要是由于缺乏肺泡表面活 性物质所引起，导致肺泡进行性萎陷，肺部不能正常扩张，肺呼吸顺应性 下降，患儿于生后4～12小时内出现进行性呼吸困难、呻吟、发绀、吸气三 凹征，严重者发生呼吸衰竭。发病率与胎龄有关，胎龄越小，发病率越高， 体重越轻病死率越高。产前单疗程应用激素对新生儿呼吸窘迫综合征有预 防作用，表面活性物质替代治疗在新生儿呼吸窘迫综合征管理中至关重要； 表面活性剂类药物目前市场上上市的药物主要是动物肺部表面活性剂的提 取物(如固尔苏，珂立苏或者博拉坦等)，这些药物使用后能立刻纠正新 生儿肺部表面活性剂缺乏，使患者症状立刻得到改善。尽管这些药物的疗 效确切，使用安全，然而这些药物使用起来有一定的隐患，动物来源的表 面活性剂类药物容易引起过敏反应且其生产也受到动物疫情的影响，另外， 所有这些药物都比较昂贵，动辄几千，使这些药物的推广和使用受到很大 限制。

天然表面活性剂是一种来源自然界生物或者植物的表面活性剂，这些 物质不仅有很好的表面活性特性且具有成本低廉，生物体内可降解等特点。 从药物作用机理来讲，使用天然来源的表面活性剂治疗新生儿表面活性剂 是完全可行的。鼠李糖脂是由假单胞菌或伯克氏菌类产生的一种生物代谢 性质的生物表面活性剂。同时也是一种研究时间最长、应用技术最为成熟 的一种生物表面活性剂。它在土壤、水体和植物中都自然存在。它属于一 种糖脂类的阴离子表面活性剂。自1947年被发现以来，其在医药领域的研 究就一直未停止过，目前它比较广泛的应用于石油工业、绿色农业和生态 环境方面，此外在食品行业、化妆品、医疗方面也有较大的应用潜力。尤 其在医药领域，它在治疗皮肤灼伤和牛皮癣的应用的专利已经在国外提交。

前期的体内研究结果表明，鼠李糖脂能有效治疗新生儿呼吸窘迫综合 征，且降解完全，体内无残留。鼠李糖脂作为一种成本低廉，毒性小，获 取容易的化合物，将之制成冻干粉治疗新生儿呼吸窘迫综合征是一种新颖 治疗方式。

发明内容

本发明的目的在于提供一种鼠李糖脂冻干粉制剂及其制备方法和应 用，通过将鼠李糖脂、二硬脂酰基磷脂酰胆碱、卵磷脂等加热，均质，混 匀，冷冻干燥成粉制剂，为治疗新生儿呼吸窘迫综合征提供了一种新颖的 治疗方式，解决了现有的动物来源的表面活性剂类药物在治疗新生儿呼吸 窘迫综合征过程中容易引起新生儿过敏反应，且动物来源的表面活性剂类 药物生产也受到动物疫情影响的问题。

为解决上述技术问题，本发明是通过以下技术方案实现的：

本发明为一种鼠李糖脂冻干粉制剂，该鼠李糖脂冻干粉制剂的组成为： 5％-10％鼠李糖脂、5％-10％二硬脂酰基磷脂酰胆碱(DSPC)、10％-30％卵磷 脂、40％无水乙醇和10％-40％生理盐水，以上百分比为该成分在药物组合 物中的质量百分比。

进一步地，所述鼠李糖脂的含量为8％。

进一步地，其制备方法包括如下步骤：

(1)40％无水乙醇中加入5％-10％鼠李糖脂、5％-10％二硬脂酰基磷脂 酰胆碱、10％-30％卵磷脂，加热均质，混匀制成混合溶液A；

(2)将(1)中制备的混合溶液A加入至10％-40％生理盐水中，混合 均匀，冷冻干燥获得该药物组合物，以上百分比为该成分在该药物组合物 中的质量百分比所述。

进一步地，其应用于新生儿呼吸窘迫综合征的治疗。

本发明的鼠李糖脂冻干粉制剂主要是应用于新生儿呼吸窘迫综合征的 治疗。本发明的发明人团队前期利用动物模型针对鼠李糖脂冻干粉治疗新 生儿呼吸窘迫综合征的药理作用开展了相关的研究(选用呼吸窘迫综合征 黄金指标-肺呼吸顺应值为研究对象)，也对鼠李糖脂冻干粉的稳定性进行 了考察。

结果表明：鼠李糖脂冻干粉制剂能有效治疗新生儿呼吸窘迫综合征， 且其稳定性良好。

实验过程如下：

1实验材料

1.1动物

雌性新西兰孕兔4只(孕期为27天)，体重3-5kg，安徽医科大学实 验动物中心。饲养于温度22～24℃、湿度40％～60％的屏障环境，饲养期 间动物自由摄食饮水，照明条件为12小时明/12小时暗。

1.2药物

盐酸甲苯噻嗪(上海升德医药科技有限公司)；舒泰50(法国维克)； 水合氯醛(上海升德医药科技有限公司)；

1.3主要试剂与仪器

呼吸机(北京普朗新技术有限公司)；自制小动物呼吸顺应值测试系 统；电子天平(梅特勒托利多)；

2实验方法

2.1动物分组

母兔：选用怀孕27天且体重于3-5kg范围内的健康母兔。动物手术前， 须无流产现象。

幼兔：选用孕期为27天且体重超过23克的幼兔进行实验，实验分阴 性对照组(给予空气)、阳性对照组(给予珂立苏)，受试品组(给予鼠 李糖脂冻干粉制剂)。动物数量：至少6只幼兔/组。

分组方法：检疫适应期结束后对合格母兔进行称重。从母体中取出的 幼兔按照滚动顺序和实验所需数量进行分组。

2.2动物模型建立与干预

实验前一天备齐实验所需的所有物品(试剂，手术器材和耗材)，实 验当天检查实验所需的各项仪器的运行状态，开启数据采集系统的硬件和 软件，逐一检测呼吸测量仪器上的压力和流量通道。实验当天确认动物的 状态，选用状态良好的动物用于实验，弃用出现流产或者其它异常状况的 动物。

实验当天，配制盐酸甲苯噻嗪(5％)，双侧后肢肌肉内以0.75ml/kg 的剂量给予母兔以使之镇定。麻醉前，记录动物的实际编号和体重。将动 物放于手术台上，通过耳缘静脉埋置24G留置针，并在留置针内注入少量 生理盐水，确认管路通畅后，使用注射器通过留置针于动物静脉内注入适 量的舒泰50(理论总量为0.5ml/kg)，根据动物的状态判断麻醉效果，如 果动物尚未被完全麻醉，通过耳缘静脉补充余下的药液。对母兔进行气管 切开术后，将气管连接于呼吸机上，并对动物通以氧气，确认动物的生理 状态平稳和合适后方可实验。

在母兔的腹中线位置，做一个4-6厘米纵向的切口，在腹部找到子宫， 并在子宫上撕出一个2-3厘米的开口，注意不要伤到胎兔，快速从母兔子宫 切口中取出幼兔，记录取出时的时间。同时，每只幼兔腹腔注射给予0.6ml 的2％水合氯醛溶液。最后，撕去羊水膜及包裹在幼兔周围的胎衣(尤其是 动物口鼻部周围)。其它幼兔依此步骤接生。

天平称取胎兔的体重，记录每只动物的体重和出生时间后，将动物快 速地转移至温床，体重小于26g的幼兔不能用于实验。将体重适合的幼兔， 快速转移到温床上，仰面朝上，颈部垫高约0.5cm,在气管附近位置做一切 口，用眼科镊子钝性分离，将几毫米长的气管暴露。沿气管环用眼科剪剪 出切口，在切口上插入气管插管(深度为4-5毫米)，并用4-0号线固定。

用1-cc注射器抽取一定体积上述准备好的阳性药物，经气管注射给予 幼兔，记录给药时间。阴性组动物通过注射器给予一定体积的空气(5.8 ml/kg)后，重复三次以相同体积对气管通气。

给药后，迅速将动物放置于预热后的体积描记仪中的隔间，上述从动 物接生到接至呼吸机的所有步骤须在10分钟内完成。

幼兔接呼吸机后，进行实验数据记录，初次实验记录的时间定为“0” 时。呼吸机中气流流动20秒后，按照2分钟的间隔，记录动物肺顺应及动 物体温，直至30分钟。

3数据处理和统计学方法

软件记录每只动物0-30分钟内的呼吸参数(流量，压力和顺应值)。 根据实验记录(原始图谱和通气记录)和可用数据判断标准取舍数据，记 录于Excel表中，计算每只动物的呼吸顺应值/体重(kg)值，计算每组动 物的平均值和标准差，组组之间进行t检验，根据p值大小判断组间差异性 (p<0.05表示组间具有显著差异)。

呼吸顺应值＝ΔV/ΔP。其中：

ΔV＝潮气量变化量

ΔP＝呼吸压力差

4结果

4.1肺呼吸顺应值

给药后阳性组动物的呼吸顺应值为0.25±0.06，受试品组的值为0.30 ±0.06，均比阴性组高很多，差异具有统计学显著性(P<0.01)。

4.2鼠李糖脂冻干粉冻干粉的稳定性(鼠李糖脂的含量)

鼠李糖脂冻干粉中鼠李糖脂含量放置60天后仅下降0.07％。

本发明涉及的鼠李糖脂冻干粉制剂是基于上述实验进行开发，相对于 现有技术，本发明具有如下有益效果：

1、本发明选用天然来源的鼠李糖脂作为主要成分，成本低廉，毒性小， 能有效治疗新生儿呼吸窘迫综合征。

2、本发明的鼠李糖脂冻干粉制剂由于采用了特定的组分或特定制备方 法，获得的药物为冻干粉，具有良好的化学稳定性、药效佳。

当然，实施本发明的任一产品并不一定需要同时达到以上所述的所有 优点。

附图说明：

图1为鼠李糖脂冻干粉对幼兔肺呼吸顺应值的影响的统计图；

图2为鼠李糖脂冻干粉稳定性情况的统计图。

具体实施方式

下面通过实施例对本发明做进一步详细说明，这些实施例仅用来说明本 发明，并不限制本发明的范围。

实施例1：

5％鼠李糖脂，10％二硬脂酰基磷脂酰胆碱(DSPC)，10％卵磷脂，40％无水 乙醇和35％生理盐水，以上百分比为该成分在药物组合物中的质量百分比。

(1)40％无水乙醇中加入5％鼠李糖脂、10％二硬脂酰基磷脂酰胆碱、10％ 卵磷脂，加热均质，混匀制成混合溶液A；

(2)将(1)中制备的混合溶液A加入至35％生理盐水中，混合均匀， 冷冻干燥获得该药物组合物，以上百分比为该成分在该药物组合物中的质 量百分比。

实施例2：

5％鼠李糖脂，5％二硬脂酰基磷脂酰胆碱(DSPC)，10％卵磷脂，40％无水 乙醇和40％生理盐水，以上百分比为该成分在药物组合物中的质量百分比。

(1)40％无水乙醇中加入5％鼠李糖脂、5％二硬脂酰基磷脂酰胆碱、10％ 卵磷脂，加热均质，混匀制成混合溶液A；

(2)将(1)中制备的混合溶液A加入至40％生理盐水中，混合均匀， 冷冻干燥获得该药物组合物，以上百分比为该成分在该药物组合物中的质 量百分比。

实施例3：

10％鼠李糖脂，5％二硬脂酰基磷脂酰胆碱(DSPC)，15％卵磷脂，40％无水 乙醇和30％生理盐水，以上百分比为该成分在药物组合物中的质量百分比。

(1)40％无水乙醇中加入10％鼠李糖脂、5％二硬脂酰基磷脂酰胆碱、15％ 卵磷脂，加热均质，混匀制成混合溶液A；

(2)将(1)中制备的混合溶液A加入至30％生理盐水中，混合均匀， 冷冻干燥获得该药物组合物，以上百分比为该成分在该药物组合物中的质 量百分比。

实施例4：

10％鼠李糖脂，10％二硬脂酰基磷脂酰胆碱(DSPC)，10％卵磷脂，40％无 水乙醇和30％生理盐水，以上百分比为该成分在药物组合物中的质量百分 比。

(1)40％无水乙醇中加入10％鼠李糖脂、10％二硬脂酰基磷脂酰胆碱、 10％卵磷脂，加热均质，混匀制成混合溶液A；

(2)将(1)中制备的混合溶液A加入至30％生理盐水中，混合均匀， 冷冻干燥获得该药物组合物，以上百分比为该成分在该药物组合物中的质 量百分比。

实施例5：

8％鼠李糖脂，10％二硬脂酰基磷脂酰胆碱(DSPC)，12％卵磷脂，40％无水 乙醇和30％生理盐水，以上百分比为该成分在药物组合物中的质量百分比。

(1)40％无水乙醇中加入8％鼠李糖脂、10％二硬脂酰基磷脂酰胆碱、12％ 卵磷脂，加热均质，混匀制成混合溶液A；

(2)将(1)中制备的混合溶液A加入至30％生理盐水中，混合均匀， 冷冻干燥获得该药物组合物，以上百分比为该成分在该药物组合物中的质 量百分比。

在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“示例”、“具体 示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或 者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述 术语的示意性表述不一定指的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体 特征、结构、材料或者特点可以在任何的一个或多个实施例或示例中以合 适的方式结合。

以上公开的本发明优选实施例只是用于帮助阐述本发明。优选实施例 并没有详尽叙述所有的细节，也不限制该发明仅为所述的具体实施方式。 显然，根据本说明书的内容，可作很多的修改和变化。本说明书选取并具 体描述这些实施例，是为了更好地解释本发明的原理和实际应用，从而使 所属技术领域技术人员能很好地理解和利用本发明。本发明仅受权利要求 书及其全部范围和等效物的限制。

Claims (4)

1.一种鼠李糖脂冻干粉制剂，其特征在于，该鼠李糖脂冻干粉制剂的组成为：5％-10％鼠李糖脂、5％-10％二硬脂酰基磷脂酰胆碱(DSPC)、10％-30％卵磷脂、40％无水乙醇和10％-40％生理盐水，以上百分比为该成分在药物组合物中的质量百分比。

2.根据权利要求1所述的一种鼠李糖脂冻干粉制剂，其特征在于，所述鼠李糖脂的含量为8％。

3.根据权利要求1所述的一种鼠李糖脂冻干粉制剂，其特征在于，其制备方法包括如下步骤：

(1)40％无水乙醇中加入5％-10％鼠李糖脂、5％-10％二硬脂酰基磷脂酰胆碱、10％-30％卵磷脂，加热均质，混匀制成混合溶液A；

(2)将(1)中制备的混合溶液A加入至10％-40％生理盐水中，混合均匀，冷冻干燥获得该药物组合物，以上百分比为该成分在该药物组合物中的质量百分比所述。

4.根据权利要求1所述的一种鼠李糖脂冻干粉制剂，其特征在于，其应用于新生儿呼吸窘迫综合征的治疗。

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