CN111905111A - 一种评价复方谷氨酰胺组方对腹泻型肠易激综合征疗效的方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种评价复方谷氨酰胺组方对腹泻型肠易激综合征疗效的方法，主要包括以下流程：一、建立腹泻型肠易激综合征动物模型；二、给药；三、指标检测和评分(包括一般临床观察、粪便检测、观察肠道动力影响、内脏敏感性评价、结肠组织病理检查)；四、统计和评价。通过上述方案，本发明可以对不同剂型和不同使用剂量的复方谷氨酰胺组方在治疗腹泻型肠易激综合征方面进行准确的评价，为后续不断优化复方谷氨酰胺组方的剂型合理性和剂量使用、进而更好地为腹泻型肠易激综合症在临床上的深入治疗、研究和不断明确IBS疗效提供前置基础和有价值的指导。

Description

一种评价复方谷氨酰胺组方对腹泻型肠易激综合征疗效的 方法

技术领域

本发明涉及医药领域，具体涉及的是一种评价复方谷氨酰胺组方对腹泻型肠易激综合征疗效的方法。

背景技术

肠易激综合征(IBS)是一种常见的慢性肠功能紊乱性疾病，其临床表现为腹痛、腹胀以及排便习惯和形状的改变，多为间歇性发作，无器质性病变。临床上常将IBS进一步分为腹泻型为主型IBS和便秘为主型IBS。由于IBS病因不明确、发病机制复杂，虽然治疗方法较多，但疗效均不确切。

复方谷氨酰胺肠溶胶囊乃申请人(地奥集团成都药业股份有限公司)所研制，是一种用于治疗各种原因所致的急、慢性肠道疾病和肠道功能紊乱(如肠易激综合征、非感染性腹泻、肿瘤治疗引起的肠道功能紊乱)和放疗性肠炎的药物，具有临床治疗效果好的优点，例如文献：《复方谷氨酰胺肠溶胶囊对腹泻为主型肠易激综合征的临床疗效观察》(苏惠等，胃肠病学，2006年第11卷第10期)中就以复方谷氨酰胺肠溶胶囊(500mg，3次/天)和美常安(500mg，3次/天)进行了临床治疗上的比较，得出的试验结果是复方谷氨酰胺肠溶胶囊对腹泻型IBS的总有效率为85％，美常安的总有效率为72.5％，这显示出了复方谷氨酰胺肠溶胶囊相比其它药物在腹泻型肠易激综合征治疗上的优势。

然而，上述方法是临床上的观察和定量试验，并没有对不同的复方谷氨酰胺组方制剂(包括复方谷氨酰胺肠溶胶囊和复方谷氨酰胺胃溶胶囊)和剂量用法进行分析，不能准确评价复方谷氨酰胺组方对腹泻型肠易激综合征的疗效和优势，只能提供一种治疗选择，无法为优化复方谷氨酰胺组方对腹泻型肠易激综合症治疗情况和研究提供进一步的指导。

发明内容

本发明提供了一种评价复方谷氨酰胺组方对腹泻型肠易激综合征疗效的方法，可有效评价复方谷氨酰胺组方对腹泻型肠易激综合征的疗效，从而为优化复方谷氨酰胺组方对腹泻型肠易激综合症治疗情况和研究提供进一步的指导。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：

一种评价复方谷氨酰胺组方对腹泻型肠易激综合征疗效的方法，包括以下步骤：

一、建立腹泻型肠易激综合征动物模型，并分为正常对照组和模型组；

二、给药

(1)将模型组分为模型对照组和复方谷氨酰胺组方组；

(2)复方谷氨酰胺组方组按动物体重给予不同剂型和剂量的复方谷氨酰胺组方，每日至少1次，连续14天；正常对照组和模型对照组分别按动物体重给予空心肠溶胶囊和空白辅料，每日至少1次，连续14天；

三、指标检测和评分，包括一般临床观察、粪便检测、观察肠道动力影响、内脏敏感性评价、结肠组织病理检查，其中：

一般临床观察：每天观察各组动物精神状态、自主活动以及摄食情况；

粪便检测：分别于给药前、给药第7及14天观察动物排便情况，并对粪便性状评分，评分标准：泻稀便计0分，软便无定形计1分，软便定形计2分，固体定形计3分，累积记录各组动物粪便的评分；

观察尝到动力影响：各组动物末次给药后禁食不禁水16h以上，于次日灌胃给予浓度为3％以上的CMC-Na伊文思蓝糊状物，然后观察各组动物出现蓝便潜伏期；

内脏敏感性评价：末次给药后1h对各组动物进行CRD行为反应测试，然后以CRD的压力反应值进行AWR评分；AWR评分标准：对CRD无行为反应，计0分；由不动变为短暂的头部活动，计1分；腹壁肌肉收缩，计2分；腹部抬起，计3分；身体呈弓形，骨盆结构抬高，计4分；

结肠阻值病理检查：取盲肠末端结肠组织，沿肠系膜纵向剪开，生理盐水清洗干净，滤纸吸干水分，于浓度为12％以上的中性福尔马林固定，HE染色，光学显微镜下观察结肠组织结构的病理变化；

四、统计和评价

对步骤三的指标检查结果和评分进行统计，对比正常对照组、模型对照组和复方谷氨酰胺组方组的情况，评价复方谷氨酰胺组方对腹泻型肠易激综合征的疗效。

具体地，所述步骤四中，采用SPSS16.0进行数据统计，计量资料采用均数±标准差表示；用Leven’s test方法检验方差齐性；用单因素方差分析进行统计分析，用参数法进行两两比较分析。

作为优选，所述步骤一包括以下步骤：

(a)取检疫合格Beagle犬若干只，雌雄各半，按性别及体重随机分为正常对照组和模型组，雌雄各半；

(b)为模型组灌服番泻叶煎剂，并用犬固定架束缚Beagle犬至少2h，1次/天，连续21天；

(c)第21天各组随机选取若干只Beagle犬进行结直肠扩张刺激，并观察腹部撤回反射情况，以确认模型成功与否。

作为优选，所述步骤(a)中，采用辐照方式对Beagle犬进行检疫处理。

具体地，所述的辐照处理采用的动物模具包括动物放置盒和上盖；所述动物放置盒为内外夹层结构，内腔用于放置待检疫处理动物，同时，动物放置盒的内腔和外壁在相同位置开设有大小相同的辐射窗口，并且动物放置盒的夹层填充有铅板，所述的辐射窗口大小由填充的铅板大小进行调节；所述上盖内部也填充有铅板。

进一步地，所述辐射窗口的内外均设有加强框。

再进一步地，填充的铅板厚度为5-10cm。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

(1)本发明通过建立动物模型、给药、指标检测和评分、统计和评价的手段，对不同剂型(例如复方谷氨酰胺肠溶胶囊和复方谷氨酰胺胃溶胶囊)和不同使用剂量的复方谷氨酰胺组方在治疗腹泻型肠易激综合征方面进行了准确的评价，为后续不断优化复方谷氨酰胺组方的剂型合理性和剂量使用、进而更好地为腹泻型肠易激综合症在临床上的深入治疗、研究和不断明确IBS疗效提供前置基础和有价值的指导。

(2)本发明不仅操作简单、成本低廉，而且所设计的指标检测和评分方式，新颖独特，能充分反映和评价动物模型的建立以及制剂的疗效情况，在结合统计手段后，最终能够根据实际情况真实、有效地验证和评价出复方谷氨酰胺组方的疗效特点。

(3)本发明以Beagle犬建立动物模型，并采用辐照方式对Beagle犬进行检疫处理，动物来源广泛、检疫方法成熟、简单、可靠性强，并且本发明在辐照处理中采用了自行设计的动物模具，该模具主要由动物放置盒、辐射窗口和上盖构成，相比现有的动物辐照模具来说，该模具具有如下特性和优点：

a、动物放置盒采用内外夹层结构，且夹层中填充有5-10cm厚的铅板，并且上盖也填充有5-10cm厚的铅板，如此一来，不仅可以在动物辐照处理中屏蔽掉95％以上的γ射线，确保了辐照的正常处理；而且结构设计简单，成本更加低廉；

b、采用填充铅板的方式调节辐射窗口的大小，能灵活匹配试验动物的位置，在满足辐照处理需求的同时，具有操作方便、使用灵活性更强、处理效率更高的特点。

附图说明

图1为本发明的流程示意图。

图2为本发明-实施例中动物模具的主视图。

图3为本发明-实施例中动物模具的侧视图。

图4为图2中A-A面的剖视图。

图5为图3中B-B面的剖视图。

图6为本发明-实施例中Beagle犬的CDR测试图谱。

图7为本发明-实施例中Beagle犬结肠组织病理切片(HE染色×40)示意图。

其中，附图标记对应的零部件名称为：

1-动物放置盒，2-内腔，3-辐射窗口，4-加强框，5-铅板，6-上盖。

具体实施方式

本发明提供了一种评价复方谷氨酰胺组方对腹泻型肠易激综合征疗效的方法，主要包括建立腹泻型肠易激综合征动物模型、给药、指标检测和评分、统计和评价四大流程，如图1所示。下面结合附图说明和实施例对本发明的流程作进一步说明，本发明的方式包括但不仅限于以下实施例。

材料如下：

1、药物与试剂

复方谷氨酰胺肠溶胶囊，规格：0.2g内容物/粒，含0.12g的L-谷氨酰胺和0.08g的四君子汤，批号：190407。

复方谷氨酰胺胃溶胶囊，规格：0.2g内容物/粒，含0.12g的L-谷氨酰胺和0.08g的四君子汤，批号：20190401(S)。

L-谷氨酰胺肠溶胶囊，规格：0.12g内容物/粒，批号：Y032-180589；四君子汤肠溶胶囊，规格：0.101g内容物/粒，批号：20190401(S)。

番泻叶，规格：250g/袋，批号：181101，生产单位：长沙市浩昇中药饮片有限公司，生产日期：2018.11.27。

2、实验仪器

BL-420S型生物机能实验系统(成都泰盟科技有限公司)、BL-420SAUY220型分析天平(日本岛津)、Defender5000型电子台秤(奥豪斯仪器常州有限公司)、YD-A140/B140型陶瓷煎药壶。

3、动物

Beagle犬64只，普通级，雌雄各半，体重6～8kg，动物合格证号：No.1103431911000024，购于北京日新科技有限公司，实验动物生产许可证号：SCXK(京)2016-0004；在湖南省药物安全评价研究中心犬猴实验区饲养，实验动物使用许可证号：SYXK(湘)2015-0016。

一、建立腹泻型肠易激综合征动物模型

取检疫合格Beagle犬64只，雌雄各半，体重6～8kg，按性别及体重随机分为正常对照组和模型组，分别为8只和56只Beagle犬，雌雄各半。模型组按10mL·kg^-1灌胃给予4.0g生药/kg(0.40g生药/mL)番泻叶煎剂，灌服完番泻叶煎剂后用犬固定架束缚Beagle犬2h，1次/天，连续21天。

造模第21天各组随机选取3只动物进行结直肠扩张刺激(CDR)，并观察腹部撤回反射(AWR)情况，以确认模型成功与否。

本实施例采用辐照方式对Beagle犬进行检疫处理。辐照处理采用的动物模具结构如图2～5所示，主要包括动物放置盒1和上盖6。所述的动物放置盒1为内外不锈钢夹层结构，其内腔2用于放置待检疫的Beagle犬，同时，动物放置盒1的内腔和外壁在相同位置开设有大小相同的辐射窗口3，并且动物放置盒的夹层填充有铅板5，辐射窗口大小由填充的铅板大小进行调节，并且辐射窗口的内外均设有加强框4。所述上盖6内部也填充有铅板。

对Beagle犬进行辐照处理前，先盖好上盖，做好屏蔽，然后测试辐射窗口内的吸收剂量率。而后，移开上盖，将麻醉后的Beagle犬放入内腔中，并根据Beagle犬的位置调整辐射窗口的大小。

最后，盖好上盖，进行不同剂量的辐照。辐照好后，移开上盖，取出合格的Beagle犬。本实施例中，铅板起到了屏蔽的作用，其厚度优选为5-10cm，可以在动物辐照处理中屏蔽掉95％以上的γ射线(其中，5cm厚的铅板可以屏蔽掉95％的γ射线；10cm厚的铅板可以屏蔽掉99％以上的γ射线)。

二、给药

模型建立成功后取模型组Beagle犬56只，体重6～8kg，按性别及体重随机分为7组，分别为模型对照组、L-谷氨酰胺肠溶胶囊组(57.6mg·kg^-1)、四君子汤肠溶胶囊组(38.4mg·kg^-1)、复方谷氨酰胺胃溶胶囊(96mg·kg^-1)、复方谷氨酰胺肠溶胶囊低、中、高剂量组(48、96、192mg·kg^-1)，每组8只Beagle。各组Beagle犬经口灌服给予相应剂量的受试物，正常对照组和模型对照组分别给予与高剂量组同等剂量的空心肠溶胶囊和空白辅料，每日1次，连续14天。

三、指标检测和评分

1、一般临床观察：每天观察各组动物精神状态、自主活动以及摄食情况。

2、排便情况：分别于给药前、给药第7及14天观察Beagle犬排便情况，并对粪便形状评分。评分标准：泻稀便计0分，软便无定形计1分，软便定形计2分，固体定形计3分，累积记录各组动物粪便的评分。

3、观察肠道动力影响：各组动物末次给药后禁食不禁水16h以上，于次日按10mL·kg^-1灌胃给予浓度为3％CMC-Na伊文思蓝糊状物后，观察各组动物出现蓝便潜伏期。

4、内脏敏感性评价：末次给药后1h对各组Beagle犬进行CRD行为反应测试。Beagle犬按17mg·kg^-1静脉注射丙泊酚乳状注射液麻醉后，将12Fr导尿管(涂抹凡士林)连接球囊后经肛门缓慢插入至结肠中段时(约20cm)固定，经三通阀与BL-420S型生物机能实验系统压力换能器连通；待Beagle犬苏醒后，向球囊内注入60mL的0.9％氯化钠注射液CRD加压，观察CRD的压力反应值和AWR评分。AWR评分标准：对CRD无行为反应，计0分；由不动变为短暂的头部活动，计1分；腹壁肌肉收缩，计2分；腹部抬起，计3分；身体呈弓形，骨盆结构抬高，计4分。

5、结肠组织病理检查：取距盲肠末端5cm处结肠组织，沿肠系膜纵向剪开，生理盐水清洗干净，滤纸吸干水分，于浓度为12％的中性福尔马林固定，HE染色，光学显微镜下观察结肠组织结构的病理变化。

四、统计

采用SPSS16.0进行数据统计，计量资料采用均数±标准差(x±s)表示。用Leven’stest方法检验方差齐性。用单因素方差分析(One-Way ANOVA)进行统计分析，用LSD test(参数法)进行两两比较分析。

评价结果：

1、造模期CDR测试

如表1所示，与正常组比较，模型组动物压力反应显著增强，且AWR评分显著增加，提示模型成功。

表1Beagle犬肠易激综合征模型建立

2、试验期一般临床观察

在造模期间，正常对照组动物饮食饮水，自主活动未见异常，粪便固定成型；模型组动物造模后精神略显萎靡，体重下降，自主活动减少，轻微弓背，粪便呈水样便或稀便。给药后模型对照组动物体重略增加，但自主活动依然减少，8/8例粪便呈水样便、稀便或软便不成形；L-谷氨酰胺肠溶胶囊组、四君子汤肠溶胶囊组及复方谷氨酰胺胃溶胶囊组动物自主活动有明显好转，6/8例粪便呈糊状便或软便不成形，2/8例粪便呈水样便；复方谷氨酰胺肠溶胶囊低、中及高剂量组动物自主活动均恢复正常，分别4/8、2/8及2/8例粪便呈水样便，分别4/8、6/8及6/8例粪便呈糊状便或软便。

3、对粪便的影响

如表2所示，模型对照组粪便评分明显低于空白对照组(P≤0.01)；与模型对照组比较，复方谷氨酰胺肠溶胶囊中、高剂量组(96mg·kg^-1、192mg·kg^-1)给药D7、D14粪便评分明显增加(P≤0.05或P≤0.01)，L-谷氨酰胺肠溶胶囊组和四君子汤肠溶胶囊组给药D14粪便评分明显增加(P≤0.05或P≤0.01)。

给药D7，与L-谷氨酰胺肠溶胶囊组比较，复方谷氨酰胺肠溶胶囊高剂量组(192mg·kg^-1)粪便评分明显(P≤0.05)；与四君子汤肠溶胶囊组比较，复方谷氨酰胺肠溶胶囊各剂量组粪便评分无统计学差异。

给药D14，与L-谷氨酰胺肠溶胶囊和四君子汤肠溶胶囊组比较，复方谷氨酰胺肠溶胶囊各剂量组粪便评分无统计学差异；与复方谷氨酰胺胃溶胶囊组比较，复方谷氨酰胺肠溶胶囊中、高剂量组(96mg·kg^-1、192mg·kg^-1)粪便评分明显增加(P≤0.05)。

表2复方谷氨酰胺肠溶胶囊对Beagle犬粪便评分的影响(

n＝8)

注：与正常对照组比较^*P≤0.05，^**P≤0.01；与模型对照组比较⁺P≤0.05，⁺⁺P≤0.01；与L-谷氨酰胺肠溶胶囊比较●P≤0.05；与复方谷氨酰胺胃溶胶囊比较^#P≤0.05。

4、对摄食量的影响

如表3所示，与正常对照组比较，模型对照组给药D14摄食量显著降低(P≤0.01)；与模型对照组比较，复方谷氨酰胺肠溶胶囊各剂量组D14摄食量显著降低(P≤0.01)，四君子汤肠溶胶囊组及复方谷氨酰胺胃溶胶囊D14摄食量显著降低(P≤0.01)。

表3复方谷氨酰胺肠溶胶囊对Beagle犬摄食量的影响(

n＝8)

注：与正常对照组比较^**P≤0.01；与模型对照组比较⁺⁺P≤0.01。

5、对肠道动力的影响

如表4所示，与正常对照组比较，模型对照组蓝便潜伏期明显缩短(P≤0.01)；与模型对照组比较，复方谷氨酰胺肠溶胶囊各剂量组蓝便潜伏期明显延长(P≤0.05或P≤0.01)，L-谷氨酰胺肠溶胶囊组和四君子汤肠溶胶囊组蓝便潜伏期明显延长(P≤0.05或P≤0.01)，复方谷氨酰胺胃溶胶囊组蓝便潜伏期明显延长(P≤0.05)。

与L-谷氨酰胺肠溶胶囊组比较，复方谷氨酰胺肠溶胶囊中、高剂量组(96mg·kg^-1、192mg·kg^-1)蓝便潜伏期明显延长(P≤0.05或P≤0.01)；与四君子汤肠溶胶囊组比较，复方谷氨酰胺肠溶胶囊各剂量组粪便评分虽无统计学差异，但中、高剂量组蓝便潜伏期明显延长；与复方谷氨酰胺胃溶胶囊组比较，复方谷氨酰胺肠溶胶囊高剂量组(192mg·kg^-1)粪便评分明显增加(P≤0.05)。

表4复方谷氨酰胺肠溶胶囊对Beagle犬肠道动力的影响(

n＝8)

注：与空白对照组比较^*P≤0.05，^**P≤0.01；与模型对照组比较⁺P≤0.05，⁺⁺P≤0.01；与L-谷氨酰胺肠溶胶囊^ΔP≤0.05，^ΔΔP≤0.01；与复方谷氨酰胺胃溶胶囊比较^#P≤0.05。

6、对肠道敏感性的影响

如表5及图6所示，与正常对照组比较，模型对照组肠道压力反应明显增强(P≤0.01)，AWR评分显著增加(P≤0.01)；与模型对照组比较，复方谷氨酰胺肠溶胶囊各剂量组肠道压力反应均明显降低(P≤0.05或P≤0.01)，AWR评分均显著减少(P≤0.01)；与模型对照组比较，四君子汤肠溶胶囊组AWR评分明显减少(P≤0.05)。

与L-谷氨酰胺肠溶胶囊组比较，复方谷氨酰胺肠溶胶囊中、高剂量组(96mg·kg^-1、192mg·kg^-1)肠道压力反应明显减弱(P≤0.05或P≤0.01)，AWR评分显著减少(P≤0.05或P≤0.01)；与四君子汤肠溶胶囊组比较，复方谷氨酰胺肠溶胶囊中、高剂量组(96mg·kg^-1、192mg·kg^-1)肠道压力反应明显降低(P≤0.05或P≤0.01)，AWR评分明显减少(P≤0.05或P≤0.01)；与复方谷氨酰胺胃溶胶囊组比较，复方谷氨酰胺肠溶胶囊中、高剂量组(96mg·kg^-1、192mg·kg^-1)肠道压力反应明显降低(P≤0.05或P≤0.01)，复方谷氨酰胺肠溶胶囊低、中及高剂量组(48mg·kg^-1、96mg·kg^-1及192mg·kg^-1)AWR评分明显减少(P≤0.05或P≤0.01)。

注：图6中，A为正常对照组；B为模型对照组；C为L-谷氨酰胺肠溶胶囊组；D为四君子汤肠溶胶囊组；E为复方谷氨酰胺胃溶胶囊组；F为复方谷氨酰胺肠溶胶囊低剂量组；G为复方谷氨酰胺肠溶胶囊中剂量组；H为复方谷氨酰胺肠溶胶囊高剂量组。

表5复方谷氨酰胺肠溶胶囊对Beagle犬肠道敏感性的影响(

n＝8)

注：与正常对照组比较^*P≤0.05，^**P≤0.01；与模型对照组比较⁺P≤0.05，⁺⁺P≤0.01与L-谷氨酰胺肠溶胶囊、四君子汤肠溶胶囊比较^ΔP≤0.05，^ΔΔP≤0.01；与复方谷氨酰胺胃溶胶囊比较^#P≤0.05，^##P≤0.01。

7、对结肠组织病理变化的影响

如图7所示，各组Beagle犬结肠组织结构正常，结肠黏膜上皮呈单层柱状，固有层可见黏膜肌层，疏松的黏膜下层外可见肌层。黏膜上皮完整,均无充血、水肿、溃疡，无炎性细胞浸润等病理组织学改变。

注：图7中，A为正常对照组，B为模型对照组，C为L-谷氨酰胺肠溶胶囊组，D为四君子汤肠溶胶囊组，E为复方谷氨酰胺胃溶胶囊组，F为复方谷氨酰胺肠溶胶囊低剂量组，G为复方谷氨酰胺肠溶胶囊中剂量组，H为复方谷氨酰胺肠溶胶囊高剂量组。

本实施例结果表明，复方谷氨酰胺肠溶胶囊中、高剂量组与单方L-谷氨酰胺、四君子汤以及复方谷氨酰胺胃溶胶囊比较粪便评分明显增加，蓝便潜伏期明显延长，肠道反应和AWR评分明显降低，提示复方谷氨酰胺肠溶胶囊的药效作用较其单方更佳，提示L-谷氨酰胺，四君子汤组成复方有明显药效优势，且复方谷氨酰胺肠溶胶囊的药效作用较其胃溶胶囊更佳，提示在本次验证中，肠溶胶囊作为复方谷氨酰胺的制剂相比其它制剂具有明显的疗效优势。

同时，本实施例结果亦表明，复方谷氨酰胺肠溶胶囊、单方肠溶胶囊及复方谷氨酰胺胃溶胶囊对Beagle犬腹泻型肠易激综合症均具有显著治疗作用，其中复方谷氨酰胺肠溶胶囊中剂量(96mg·kg^-1)对肠易激综合征的治疗效果优于等剂量L-谷氨酰胺肠溶胶囊(57.6mg·kg^-1)、四君子汤肠溶胶囊(38.4mg·kg^-1)及复方谷氨酰胺胃溶胶囊(96mg·kg^-1)。

本领域技术人员亦可根据实际情况，采用本发明方案建立不同的动物模型，并采用其它剂型和不同剂量的复方谷氨酰胺组方对腹泻型肠易激综合征的疗效进行验证和评价，获得相关结论，进而应用于相应的治疗和研究中。

综上可见，本发明可以对不同剂型和不同使用剂量的复方谷氨酰胺组方在治疗腹泻型肠易激综合征方面进行准确的评价，为后续不断优化复方谷氨酰胺组方的剂型合理性和剂量使用、进而更好地为腹泻型肠易激综合症在临床上的深入治疗、研究和不断明确IBS疗效提供前置基础和有价值的指导。

上述实施例仅为本发明的优选实施方式之一，不应当用于限制本发明的保护范围，凡在本发明的主体设计思想和精神上作出的毫无实质意义的改动或润色，其所解决的技术问题仍然与本发明一致的，均应当包含在本发明的保护范围之内。

Claims (7)

1.一种评价复方谷氨酰胺组方对腹泻型肠易激综合征疗效的方法，其特征在于，包括以下步骤：

一、建立腹泻型肠易激综合征动物模型，并分为正常对照组和模型组；

二、给药

(1)将模型组分为模型对照组和复方谷氨酰胺组方组；

(2)复方谷氨酰胺组方组按动物体重给予不同剂型和剂量的复方谷氨酰胺组方，每日至少1次，连续14天；正常对照组和模型对照组分别按动物体重给予空心肠溶胶囊和空白辅料，每日至少1次，连续14天；

三、指标检测和评分，包括一般临床观察、粪便检测、观察肠道动力影响、内脏敏感性评价、结肠组织病理检查，其中：

一般临床观察：每天观察各组动物精神状态、自主活动以及摄食情况；

粪便检测：分别于给药前、给药第7及14天观察动物排便情况，并对粪便性状评分，评分标准：泻稀便计0分，软便无定形计1分，软便定形计2分，固体定形计3分，累积记录各组动物粪便的评分；

观察尝到动力影响：各组动物末次给药后禁食不禁水16h以上，于次日灌胃给予浓度为3％以上的CMC-Na伊文思蓝糊状物，然后观察各组动物出现蓝便潜伏期；

内脏敏感性评价：末次给药后1h对各组动物进行CRD行为反应测试，然后以CRD的压力反应值进行AWR评分；AWR评分标准：对CRD无行为反应，计0分；由不动变为短暂的头部活动，计1分；腹壁肌肉收缩，计2分；腹部抬起，计3分；身体呈弓形，骨盆结构抬高，计4分；

结肠阻值病理检查：取盲肠末端结肠组织，沿肠系膜纵向剪开，生理盐水清洗干净，滤纸吸干水分，于浓度为12％以上的中性福尔马林固定，HE染色，光学显微镜下观察结肠组织结构的病理变化；

四、统计和评价

对步骤三的指标检查结果和评分进行统计，对比正常对照组、模型对照组和复方谷氨酰胺组方组的情况，评价复方谷氨酰胺组方对腹泻型肠易激综合征的疗效。

2.根据权利要求1所述的一种评价复方谷氨酰胺组方对腹泻型肠易激综合征疗效的方法，其特征在于，所述步骤四中，采用SPSS16.0进行数据统计，计量资料采用均数±标准差表示；用Leven’s test方法检验方差齐性；用单因素方差分析进行统计分析，用参数法进行两两比较分析。

3.根据权利要求1或2所述的一种评价复方谷氨酰胺组方对腹泻型肠易激综合征疗效的方法，其特征在于，所述步骤一包括以下步骤：

(a)取检疫合格Beagle犬若干只，雌雄各半，按性别及体重随机分为正常对照组和模型组，雌雄各半；

(b)为模型组灌服番泻叶煎剂，并用犬固定架束缚Beagle犬至少2h，1次/天，连续21天；

(c)第21天各组随机选取若干只Beagle犬进行结直肠扩张刺激，并观察腹部撤回反射情况，以确认模型成功与否。

4.根据权利要求3所述的一种评价复方谷氨酰胺组方对腹泻型肠易激综合征疗效的方法，其特征在于，所述步骤(a)中，采用辐照方式对Beagle犬进行检疫处理。

5.根据权利要求4所述的一种评价复方谷氨酰胺组方对腹泻型肠易激综合征疗效的方法，其特征在于，所述的辐照处理采用的动物模具包括动物放置盒和上盖；所述动物放置盒为内外夹层结构，内腔用于放置待检疫处理动物，同时，动物放置盒的内腔和外壁在相同位置开设有大小相同的辐射窗口，并且动物放置盒的夹层填充有铅板，所述的辐射窗口大小由填充的铅板大小进行调节；所述上盖内部也填充有铅板。

6.根据权利要求5所述的一种评价复方谷氨酰胺组方对腹泻型肠易激综合征疗效的方法，其特征在于，所述辐射窗口的内外均设有加强框。

7.根据权利要求5或6所述的一种评价复方谷氨酰胺组方对腹泻型肠易激综合征疗效的方法，其特征在于，填充的铅板厚度为5-10cm。

Images