CN111870568A

CN111870568A - 一种抗敏止痒植物组合物及其制备方法与用途

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Publication number: CN111870568A
Application number: CN202010670408.5A
Authority: CN
Inventors: 陈勇
Original assignee: Beijing Underproved Medical Technology Co ltd
Current assignee: Beijing Underproved Medical Technology Co ltd
Priority date: 2020-07-13
Filing date: 2020-07-13
Publication date: 2020-11-03
Anticipated expiration: 2040-07-13
Also published as: CN111870568B

Abstract

本发明涉及一种抗敏止痒植物组合物及其制备方法与用途。本发明的组合物含有以下植物原料成分：粉防己、铁冬青、黄芩、虎杖、光果甘草、绿茶、七星剑、互叶白千层、母菊、积雪草、迷迭香，本发明还提供了以前述植物为原料制备抗敏止痒植物组合物的方法。本发明提供的植物组合物原料来自植物，无毒副作用，抗敏效果好，可快速止痒，并具有广谱抗菌性，对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌的抑制率可达100％，对于细菌或真菌引起的皮肤敏感问题具有很好的缓解和治疗疗效，可作为主药配合辅料用于天然抗敏型医用敷料和抗敏型日用化妆品的制备，具有良好的市场应用前景。

Description

一种抗敏止痒植物组合物及其制备方法与用途

技术领域

本发明属于中药、医用敷料、化妆品制备技术领域，涉及一种抗敏止痒植物组合物及其制备方法与用途。

背景技术

皮肤敏感是指皮肤在受到外界刺激时，易出现红斑、丘疹、毛细血管扩张等客观症状伴随瘙痒、刺痛、灼烧、紧绷感等主观症状。这些症状中，瘙痒是最难以抑制和忍受的症状之一。瘙痒通常是指皮肤对于刺激所导致搔抓反应的欲望。很多系统疾病和皮肤疾病均可导致皮肤瘙痒，此外过度清洁、外用化妆品的使用不当、气候和环境的改变等会引起皮肤敏感或过敏，从而导致瘙痒。

瘙痒的产生主要局部介质释放和表皮生理功能异常。引起皮肤瘙痒的主要局部介质包括组胺、P物质、蛋白激酶、白三烯B4、缓激肽、乙酰胆碱、前列腺素E2、5羟色胺和白细胞介素31(IL-31)等。这些皮肤局部介质主要来源于角质形成细胞和炎症细胞。如T细胞可产生IL-31在银屑病、特应性皮炎和结节性痒疹等瘙痒性皮肤病中的表达明显升高；肥大细胞等可产生白三烯B4，特应性皮炎患者皮肤中白三烯B4的表达明显升高；嗜碱性粒细胞和肥大细胞可合成组胺和蛋白激酶。角质形成细胞可以产生组胺、前列腺素E2和缓激肽。此外，C神经纤维末稍受刺激后可释放P物质。表皮功能的异常(包括表皮通透屏障功能、角质层含水量和表皮酸碱度异常)，导致皮肤感觉神经纤维密度增加，致痒介质及其受体表达增多可加重瘙痒。

在治疗瘙痒过程中，瘙痒患者往往反复搔抓，加剧瘙痒；严重的瘙痒患者多在医院就诊，临床上常采用口服抗组胺药、外用糖皮质激素的方法，但使用糖皮质激素过程中，容易出现使用不当带来的不良反应。

天然植物的抗敏功效研究大多基于过敏介质理论，即有效的抑制过敏反应发生机制各个环节中过敏性介质的产生和释放，中草药与苯海拉明等西药相比，其作用机制呈现多层次、多靶点的特点。植物中的黄酮类物质、多糖、生物碱、α-亚麻酸、萜类及挥发油类等成分具有抗炎、抗过敏作用。另外，天然植物抗敏活性成分毒副作用小，一般不会产生药物依赖性，易被患者接受和认可。但天然植物抗敏存在止痒机制不明确，止痒效果起效慢，效果不稳定，有些成分易被氧化而失效、易复发等问题。

发明内容

本发明的目的是提供一种纯天然、无毒副作用具有抗敏止痒的植物组合物及其制备方法。本发明的另一个目的是提供所述植物组合物的抗敏止痒、抑制细菌的用途和制备医用敷料或抗敏型化妆品的用途。

第一方面，本发明提供了一种抗敏止痒植物组合物，含有以下原料制得的成分：粉防己、铁冬青、黄芩、虎杖、光果甘草、绿茶、七星剑、互叶白千层、母菊、积雪草、迷迭香。

本发明提供的抗敏止痒植物组合物的成分均来自于中药，原料来源广易获得，且毒副作用小。其中，粉防己：粉防己是防己科粉防己Stephania tetrandra S.Moore的干燥根，防己味苦、性寒，归膀胱、肺经，具有利水消肿，祛风止痛之功效。还可用于水肿脚气、小便不利、风湿痹痛、湿疹疮毒、高血压等症的治疗。粉防己含有生物碱、黄酮等有效成分，现代药理学研究具有抗肿瘤、抗自由基损伤、抗菌抗病毒等药理作用。

铁冬青：冬青科植物铁冬青(Ilex rotunda Thunb)的树皮，性寒，味苦，归肺、胃、大肠、肝经。具有清热解毒、消肿止痛，利湿等功效，外用还可以治疗湿疹、脓疱疮、牙痛、烧烫伤、跌打损伤、外伤出血、毒蛇咬伤等。铁冬青含有脂肪酸、酚类、萜类、皂苷类和甾类等有效成分。现代药理学研究具有保护心血管、抗肿瘤、抑菌抗炎及护肝等药理作用。

黄芩：唇形科多年生草本植物黄芩(Scutellaria baicalensis Georgi)的干燥根。味苦、性寒，有清热燥湿、泻火解毒、止血、安胎等功效。主治温热病、上呼吸道感染、肺热咳嗽、湿热黄胆、肺炎、痢疾、咳血、目赤、胎动不安、高血压、痈肿疖疮等症。黄芩主要含有黄酮类成分黄芩苷，现代药理学研究显示黄芩具有抗菌抗病毒、抗过敏、解热镇痛抗炎、清除自由基抗氧化、抗肿瘤、提高免疫力等药理活性。

虎杖：蓼科(Polygonaceae)蓼属Polgohum L.多年生灌木状草本植物虎杖Polygonum cuspidatum Sieb.et Zucc.的干燥根茎和根。其味微苦、性微寒，归肝、胆、肺经，具有利胆退黄、清热解毒、散瘀止痛、止咳化痰之功效。虎杖中主要含有蒽醌类、黄酮类、类、酚类以及一些单糖类的化合物，有多种药理作用，包括抗炎、抗病毒、抗菌、调血脂、抗血栓、改变血流变、扩张血管、保护心肌、抗氧化、抗肿瘤，改善阿尔茨海默病及预防艾滋病等。

光果甘草：豆科植物光果甘草(Glycyrrhiza glabra L.)的干燥根及根茎。气微，味甜而特殊。主治清热解毒、祛痰止咳、脘腹等症。干草主要含有甘草酸、甘草黄酮等有效成分，现代药理研究显示光果甘草具有抗炎、抗菌抗病毒、抗衰老、抗自由基、与皮质激素受体结合呈现出糖皮质激素、盐皮质激素样作用、抗肿瘤等药理作用。

绿茶：绿茶含有茶多酚、茶碱等有效成分，具有抗癌、抗氧化、抗辐射等药理作用。

七星剑：水龙骨科蕨类植物江南星蕨[Microsorium fortunei(Moore)Ching]的全草及根状茎。具有清热利湿、凉血止血、消肿止痛功效,可治疗黄疸、痢疾、尿路感染、白带、风湿关节痛、吐血、便血、跌打损伤、毒蛇咬伤等症。

互叶白千层：桃金娘科(Myrtaceae)白千层属(Melaleuca)互叶白千层(Melaleucaalternifolia)。精油具有抗菌、抗病毒、抗炎、抗肿瘤等药理活性。

母菊：菊科母菊属Matricaria recutita L.的干燥花序。现代药理研究证实，母菊具有镇静、缓解胃肠道痉挛作用，还能够抗炎抗菌、降糖降脂、缓解关节疼痛等。

积雪草：伞形科积雪草属植物积雪草(Centella asiaticaL.Urban)的干燥全草。积雪草性寒，味苦、辛，具有清热利湿、解毒消肿之功效。临床上用于跌打损伤、传染性肝炎、流行性脑脊髓膜炎等,所含的积雪草苷(asiaticoside)用于皮肤病和创伤、肾衰竭等的治疗。现代药理学研究显示积雪草具有抑制瘢痕增生、抗肿瘤、抗溃疡、抗炎、抗氧化等作用。

迷迭香：唇形科迷迭香属植物迷迭香Rosmarinus officinalis L。现代研究显示迷迭香挥发油具有抗菌、镇痛抗炎、抗氧化、防腐、抗肿瘤、抗艾滋病等活性。

本发明将上述11种植物来源的原料的粉末混合提取其生物有效物质，意外地发现，将粉防己、铁冬青、黄芩、虎杖、光果甘草研磨混合后，进行乙醇浸渍提取，可增加有效成分的溶出量，避免了前述5种植物成分单独乙醇提取后再将提取物复配引起的沉淀或排斥反应。本发明发现将前述5种成分的粉末混合后提取，粉防己总碱提取率由单独提取的1.26％上升至 2.08％，虎杖总蒽醌由单独提取的0.89％上升至1.22％，黄芩苷由单独提取的112mg/g上升至164 mg/g。本发明还发现将粉防己、黄芩、虎杖、光果甘草四种植物粉末混合后进行乙醇提取，粉防己总碱、虎杖总蒽醌、黄芩苷的提取量与前述5种成分粉末混合后提取量近似，差异不显著，这说明粉防己、黄芩、虎杖、光果甘草这4种植物粉末在进行乙醇提取有效成分时，对有效成分的溶出量(提取率)具有明显的协同增效作用，促进有效成分的溶出并增加有效成分的提取量。而引入铁冬青，一方面是希望组合物中引入铁冬青所含有的脂肪酸、酚类、萜类、皂苷类和甾类等有效成分，获得抑菌抗炎的药理作用，另一方面是本发明发现铁冬青的引入并不会给粉防己、黄芩、虎杖、光果甘草四种植物成分的提取带来负面拮抗作用，即它的存在对前述4种植物混合后醇提有效成分的协同增效作用不拮抗，还能发挥组合物抑菌抗炎的作用，因此本申请优选制备提取物A的原料来自粉防己、铁冬青、黄芩、虎杖、光果甘草这5种中药原料。

本发明还发现，将绿茶、七星剑、互叶白千层、母菊、积雪草、迷迭香各原料研磨混合后进行挥发油的提取，能够增加挥发油的提取率，实验发现，单独提取时，均为100g的绿茶、七星剑、互叶白千层、母菊、积雪草、迷迭香的出油量分别为0.1、0.3、1.8、0.3、0.2、1.4mL，总和为4.1mL，即每种成分单独提取挥发油提取率分别为0.1％、0.3％、1.8％、0.3％、0.2％、 1.4％；当各组分(均为100g，6种成分共600g)按照等质量混合提取时，出油量为5.8mL，远高于六种成分单独提取挥发油的总和4.1mL，计算可得前述六种成分混合后挥发油的提取率为1.0％，优于各组分单独提取后合并的油量。并且进一步的实验发现，即使在非等质量混合的前提下，例如绿茶、七星剑、互叶白千层、母菊、积雪草、迷迭香的用量份数比为1-6份、七星剑0-6份、互叶白千层1-6份、母菊1-6份、积雪草1-6份、迷迭香1-6份，其混合粉末的挥发油提取量仍然远高于单独提取后合并的油量。这说明绿茶、七星剑、互叶白千层、母菊、积雪草、迷迭香这六种植物成分在进行挥发油提取时，将它们混合后再提取，所获得的挥发油的量显著比单独提取的量高，具有显著的协同增效作用。

具体来说，本发明所述的抗敏止痒植物组合物通过以下方法制备得到：

(1)将以下重量份原料的粉末混合：粉防己1-8份、铁冬青0-6份、黄芩1-6份、虎杖1-6份、光果甘草1-6份，进行醇提取，滤液减压浓缩干燥得提取物A；

(2)将以下重量份原料的粉末混合：绿茶0.5-6份、七星剑0-6份、互叶白千层0-6份、母菊0.5-6份、积雪草0.5-6份、迷迭香0.5-6份，置于挥发油提取器中，按照与混合粉末的质量体积比10-15加入水，提取精油，得提取物B；

(3)在步骤(2)提取精油后，在所述挥发油提取器中加入乙醇使提取液中乙醇终浓度为45％-55％，回流提取，过滤，滤液减压浓缩干燥得提取物C；

(4)用溶剂将提取物A、B、C溶解。溶剂用量原则以溶解提取物A、B、C为宜。

优选地，步骤(1)将以下重量份原料的粉末混合：粉防己3-8份、铁冬青0-5份、黄芩1-5份、虎杖1-5份、光果甘草1-5份，按照与混合粉末的质量体积比10-15加入40％-80％的乙醇提取，滤液减压浓缩干燥得提取物A；或

步骤(2)将以下重量份原料的粉末混合：绿茶0.6-4份、七星剑0-4份、互叶白千层0-4 份、母菊0.6-4份、积雪草0.6-4份、迷迭香0.6-4份，置于挥发油提取器中。

更优选地，步骤(2)将以下重量份原料的粉末混合：绿茶0.6-3份、七星剑0.6-3份、互叶白千层0.6-3份、母菊0.6-3份、积雪草0.6-3份、迷迭香0.6-3份，置于挥发油提取器中。

最优选地，步骤(2)将以下重量份原料的粉末混合：绿茶0.8-2份、七星剑0.8-2份、互叶白千层0.8-2份、母菊0.8-2份、积雪草0.8-2份、迷迭香0.8-2份，置于挥发油提取器中。

第二方面，本发明提供了一种抗敏止痒植物组合物的制备方法，通过以下方法制备得到：

(2)将以下重量份原料的粉末混合：绿茶0.5-6份、七星剑0-6份、互叶白千层0.5-6份、母菊0.5-6份、积雪草0.5-6份、迷迭香0.5-6份，置于挥发油提取器中，按照与混合粉末的质量体积比10-15加入水，提取精油，得提取物B；

(4)用溶剂将提取物A、B、C溶解。

本发明提供的抗敏止痒植物组合物的制备方法中，优选地，步骤(1)将以下重量份原料的粉末混合：粉防己3-8份、铁冬青0-5份、黄芩1-5份、虎杖1-5份、光果甘草1-5份，按照与混合粉末的质量体积比10-15加入40％-80％的乙醇提取，滤液减压浓缩干燥得提取物A；和/或

更优选地，步骤(1)将以下重量份原料的粉末混合：粉防己3-8份、铁冬青1-3份、黄芩1-3份、虎杖1-3份、光果甘草1-3份，按照与混合粉末的质量体积比10-15加入40％-80％的乙醇提取，滤液减压浓缩干燥得提取物A；和/或

步骤(2)将以下重量份原料的粉末混合：绿茶0.6-3份、七星剑0.6-3份、互叶白千层 0.6-3份、母菊0.6-3份、积雪草0.6-3份、迷迭香0.6-3份，置于挥发油提取器中。

最优选地，步骤(2)将以下重量份原料的粉末混合：绿茶0.8-2份、七星剑0.8-2份、互叶白千层0.8-2份、母菊0.8-2份、积雪草0.8-2份、迷迭香0.8-2份。

步骤(3)在步骤(2)提取精油后，在所述挥发油提取器中加入乙醇使提取液中乙醇终浓度为50％，回流提取1小时，过滤，滤液减压浓缩干燥得提取物C；

(4)用溶剂将提取物A、B、C混合。

步骤(4)所述溶剂为水、乙醇、甘油、丁二醇、丙二醇、吐温-80、吐温-60、吐温40、吐温-20、司盘-20、司盘60、司盘-80中的一种或多种。

在本发明的实施例中，步骤(1)粉防己3份、铁冬青1份、黄芩1份、虎杖1份、光果甘草1份，混合，粉碎，过20目筛，按照与混合粉末的质量体积比12加入60％的乙醇回流提取3次，每次40分钟，合并滤液，滤液减压浓缩真空干燥得提取物A；

步骤(2)绿茶1份、七星剑1份、互叶白千层1份、母菊1份、积雪草1份、迷迭香1 份，混合，粉碎，过20目筛，置于挥发油提取器中，加15倍水，提取3小时，放出精油，得提取物B。

提取精油后，在绿茶、七星剑、互叶白千层、母菊、积雪草、迷迭香提取器中加入乙醇使提取液的乙醇浓度为50％，继续回流提取1h，过滤，滤液减压浓缩并真空干燥得提取物C；

用吐温80-水(v/v＝5：95)溶解A、B、C，得一种抗敏止痒的植物组合物。

本发明的另一个实施例中，步骤(1)粉防己8份、铁冬青1份、黄芩1份、虎杖2份、光果甘草2份，混合，粉碎，过20目筛，按照与混合粉末的质量体积比12加入50％的乙醇回流提取3次，每次40分钟，合并滤液，滤液减压浓缩真空干燥得提取物A；

步骤(2)绿茶0.8份、七星剑1份、互叶白千层1.2份、母菊1份、积雪草1.2份、迷迭香1份，混合，粉碎，过20目筛，置于挥发油提取器中，加15倍水，提取3小时，放出精油，得提取物B。

本发明的再一个实施例中，步骤(1)粉防己4份、黄芩1份、虎杖1份、光果甘草1份，混合，粉碎，过20目筛，按照与混合粉末的质量体积比12加入60％的乙醇回流提取3次，每次40分钟，合并滤液，滤液减压浓缩真空干燥得提取物A；

步骤(2)绿茶0.5份、母菊1份、积雪草1份、迷迭香0.5份，混合，粉碎，过20目筛，置于挥发油提取器中，加15倍水，提取3小时，放出精油，得提取物B。

提取精油后，在绿茶、母菊、积雪草、迷迭香提取器中加入乙醇使提取液的乙醇浓度为 50％，继续回流提取1h，过滤，滤液减压浓缩并真空干燥得提取物C；

第三方面，本发明提供了所述的抗敏止痒植物组合物或所述制备方法制得的抗敏止痒植物组合物在制备缓解、修复或治疗皮肤敏感瘙痒或抑制皮肤表面细菌、真菌的外用药物中的应用。

本发明提供了所述的抗敏止痒植物组合物或所述制备方法制得的抗敏止痒植物组合物在制备缓解、修复或治疗皮肤敏感瘙痒的化妆品中的应用。

含有本发明所述的抗敏止痒植物组合物的产品属于本发明的保护范围，所述产品为药用敷料或化妆品。

本发明提供了一种皮肤敏感修复化妆品，其为敏感修复化妆水、敏感修复精华液、敏感炎症治疗修复乳或修复霜；

(1)所述敏感修复化妆水的配方见表1，配制方法为：将表1中原料依次加入水相锅，搅拌升温至80-85℃，均质至分散均匀，保温8-12分钟；搅拌均匀，将水相锅降温至40℃，合格后过滤出料；

表1

(2)所述敏感修复精华液的配方见表2，配制方法为：将A相原料依次加入水相锅，搅拌升温至80-85℃，均质至分散均匀；将C相原料混合，加热到70-80℃，搅拌均匀作为预混 G；将预混G边搅拌边加入到80-85℃的A相，搅拌参数1000-3000rpm；获得的混合液在70-80℃ 下继续8000rpm搅拌15分钟后，搅拌降温至40℃，将预先增溶好的B相，加入前述混合液中搅拌均匀；合格后过滤出料；

表2

(3)所述敏感修复乳的配方见表3，配制方法为：将A相原料依次加入油相锅，搅拌升温至75-80℃，搅拌保温至完全熔化；将B项原料依次加入乳化锅搅拌升温至80-85℃均质至分散均匀，保温8-12分钟；抽取乳化锅真空，将油相锅全部料体抽入乳化锅，搅拌均质至乳化完全，保温8-12分钟；乳化锅搅拌降温至40℃，将预先熔好的C项原料加入乳化，搅拌至分散均匀；调pH值：5.5-6.5；

表3

(4)所述炎症治疗修复霜的配方见表4，配制方法为：将B相原料依次加入水相锅搅拌升温至80-85℃均质至分散均匀，保温8-12分钟，将A相原料依次加入油相锅，搅拌升温至75-80℃至分散均匀；将水相锅原料一半抽入乳化锅，再将油相锅原料抽入乳化锅，再将剩余水相锅料体全部抽入乳化锅，搅拌均质至乳化完全，保温8-10分钟；乳化锅搅拌降温至55-60℃，将C相原料加入，搅拌均质至乳化完全，保温3-7分钟；继续搅拌降温至40℃，搅拌至分散均匀，pH值5.5-6.5；合格后过滤出料；

表4

本发明提供的植物组合物原料来自植物，无毒副作用，抗敏效果好，可快速止痒，并可减少搔抓次数从而减少复发；并具有广谱抗菌性，5％浓度的植物组合物与菌株作用10min 后，可对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌的抑制率可达到100％，对于细菌或真菌引起的皮肤问题具有很好的缓解和治疗效果，可作为主药配合辅料用于天然抗敏型医用敷料和抗敏型日用化妆品的制备，如抗敏化妆水、抗敏修复精华液等，具有良好的市场应用前景。

附图说明

图1A-图1C分别为实施例1-4对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌的抑菌情况，图中a吐温80-水溶液对照组，b实施例1处理组，c实施例2处理组，d实施例3处理组， e实施例4处理组。

图2为实施例1制得组合物的抑菌效果图，a为大肠杆菌阳性组，b为大肠杆菌实施例处理组，c为金黄色葡萄球菌阳性组，d为金黄色葡萄球菌实施例1处理组，e为白色念珠菌阳性组，f为白色念珠菌实施例处理组。

图3为各处理组背部皮肤表象观察结果。

图4为各处理组皮肤角质层厚度比较(低倍)，a：空白组；b：空白+抗敏水；c：Tape组；d：Tape+抗敏水。

图5各处理组皮肤角质层厚度比较(高倍)，a：空白组；b：空白+抗敏水；c：Tape组；d：Tape+抗敏水。

图6各处理组小鼠舔体行为比较。

图7各处理组小鼠抓挠行为比较。

图8各处理组中IL-2、IL-31的测定结果。

图9各处理组中TRPA1的测定结果。

图10各处理组Sprr2b，Serpinb12，S100A8的测定结果。

图11各处理组小鼠耳部比较图。

图12对照组与实施例4处理组小鼠耳部厚度。

图13DNFB处理组和DNFB+实施例4处理组小鼠耳厚度比较。

图14各处理组IL-1α，IL-1β及趋化因子的测定结果。

图15各处理组Sprr2b，Serpinb12，S1008测定结果。

具体实施方式

以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。若未特别说明，本发明实施例所用的原料、试剂均为市售可得。

实施例1抗敏止痒植物组合物的制备

称取粉防己300g、铁冬青100g、黄芩100g、虎杖100g、光果甘草100g，混合，粉碎，过20目筛；加入12倍量的60％的乙醇回流提取3次，每次40min，合并滤液，减压浓缩并真空干燥得提取物A；

称取绿茶50g、七星剑50g、互叶白千层50g、母菊50g、积雪草50g、迷迭香50g，混合，粉碎，过20目筛，置于挥发油提取器中，加15倍水，常规方法提取3小时，放出精油，得提取物B；

实施例2抗敏止痒植物组合物的制备

称取粉防己400g、铁冬青50g、黄芩50g、虎杖100g、光果甘草100g，混合，粉碎，过20目筛；加入12倍量的50％的乙醇回流提取3次，每次40min，合并滤液，减压浓缩并真空干燥得提取物A；

称取绿茶40g、七星剑50g、互叶白千层60g、母菊50g、积雪草60g、迷迭香50g，混合，粉碎，过20目筛，置于挥发油提取器中，加15倍水，常规方法提取3小时，放出精油，得提取物B；

实施例3抗敏止痒植物组合物的制备

称取粉防己400g、黄芩100g、虎杖100g、光果甘草100g，混合，粉碎，过20目筛；加入12倍量的60％的乙醇回流提取3次，每次40min，合并滤液，减压浓缩并真空干燥得提取物A；

称取绿茶50g、母菊100g、积雪草100g、迷迭香50g，混合，粉碎，过20目筛，置于挥发油提取器中，加15倍水，常规方法提取3小时，放出精油，得提取物B；

提取精油后，在绿茶、母菊、积雪草、迷迭香提取器中加入乙醇使提取液的乙醇浓度为50％，继续回流提取1h，过滤，滤液减压浓缩并真空干燥得提取物C；

对比例1提取物A的提取率对比试验

取粉防己、铁冬青、黄芩、虎杖、光果甘草各20g，分别粉碎，过20目筛，分别用50％乙醇回流提取3次，每次40min，料液比1：10，合并滤液，减压浓缩并真空干燥并各自称重，得各植物提取物。

混合提取：取粉防己、铁冬青、黄芩、虎杖、光果甘草各20g，混合，粉碎，过20 目筛；加入10倍量的50％的乙醇回流提取3次，每次40min，合并滤液，减压浓缩并真空干燥称重得提取物。

实施例1-3方法各自制得的提取物A。

以粉防己碱为标准品，依照药典中紫外分光光度法测定粉防己总碱的含量。以大黄素为标准品，依照药典中紫外分光光度法测定虎杖总蒽醌含量。以黄芩苷为标准品，依照药典中高校液相色谱法测定黄芩苷的含量。

表5各植物提取物中有效成分的提取率结果

由表可见，粉防己、虎杖和黄芩苷单独提取时，从提取物的重量加和以及有效成分的含量上都少于混合提取，说明粉防己、铁冬青、黄芩、虎杖、光果甘草(或缺少铁冬青的实施例3的混合物)共同提取后，均有助于植物中有效成分的溶出，显著增加了有效成分的提取率，上述多种中药成分的混合提取，各成分对提取率起到了协同增效的作用。

对比例2提取物B植物精油提取结果对比

称取绿茶50g、七星剑50g、互叶白千层50g、母菊50g、积雪草50g、迷迭香50g，分别粉碎，过20目筛，分别置于挥发油提取器中提取，加15倍水，提取3小时，记录出油量。

混合提取：称取绿茶50g、七星剑50g、互叶白千层50g、母菊50g、积雪草50g、迷迭香50g，混合，粉碎，过20目筛，置于挥发油提取器中，加15倍水，常规方法提取3小时，记录出油量，得提取物B。

实施例1-3方法各自制得的提取物B。

表6提取物B植物精油提取结果对比

可见，植物单独提取时，出油量的加和为2.05mL，要显著小于混合提取的2.9mL，说明绿茶、七星剑、互叶白千层、母菊、积雪草、迷迭香混合提取时(或缺少七星剑、互叶白千层的上述组分，)，植物之间有协同作用，有助于精油的提出。实施例3中缺少七星剑、互叶白千层，前述单独提取实验已知七星剑和互叶白千层的出油量分别为0.15和0.9，从实施例3的提取物B的结果来看，出油量为1.8mL，远高于单独提取的绿茶、母菊、积雪草、迷迭香的出油量总和1.0mL，从另一方面证实了绿茶、母菊、积雪草、迷迭香四种成分混合后在提取挥发油的效果方面，具有显著的协同增效作用，并且七星剑、互叶白千层的引入并不会拮抗它们的协同增效作用。

实施例4敏感修复化妆水

配方见前文的表1，将原料依次加入水相锅，搅拌升温至80-85℃，均质至分散均匀，保温8-12分钟；搅拌均匀，将水相锅降温至40℃，合格后过滤出料。本实施例采用表1的配方，所述的抗敏止痒植物组合物为实施例1的组合物。

实施例5敏感修复精华液

配方见前文表2，将A相原料依次加入水相锅，搅拌升温至80-85℃，均质至分散均匀；将 C相原料混合，加热到70-80℃，搅拌均匀作为预混G；将预混G边搅拌边加入到80-85℃的A相，搅拌参数1000-3000rpm；获得的混合液在70-80℃下继续8000rpm搅拌15分钟后，搅拌降温至 40℃，将预先增溶好的B相，加入前述混合液中搅拌均匀；合格后过滤出料。本实施例采用表2的配方，所述的抗敏止痒植物组合物为实施例1的组合物。

实施例6敏感修复乳

配方见前文表3，将A相原料依次加入油相锅，搅拌升温至75-80℃，搅拌保温至完全熔化；将B项原料依次加入乳化锅搅拌升温至80-85℃均质至分散均匀，保温8-12分钟；抽取乳化锅真空，将油相锅全部料体抽入乳化锅，搅拌均质至乳化完全，保温8-12分钟；乳化锅搅拌降温至40℃，将预先熔好的C项原料加入乳化，搅拌至分散均匀；调pH值：5.5-6.5。本实施例采用表3的配方，所述的抗敏止痒植物组合物为实施例2的组合物。

实施例7炎症治疗修复霜

配方见前文表4。将B相原料依次加入水相锅搅拌升温至80-85℃均质至分散均匀，保温 8-12分钟，将A相原料依次加入油相锅，搅拌升温至75-80℃至分散均匀；将水相锅原料一半抽入乳化锅，再将油相锅原料抽入乳化锅，再将剩余水相锅料体全部抽入乳化锅，搅拌均质至乳化完全，保温8-10分钟；乳化锅搅拌降温至55-60℃，将C相原料加入，搅拌均质至乳化完全，保温3-7分钟；继续搅拌降温至40℃，搅拌至分散均匀，pH值5.5-6.5；合格后过滤出料。本实施例采用表4的配方，所述的抗敏止痒植物组合物为实施例3的组合物。

实施例8抗菌性试验

实验菌株：大肠杆菌(8099)、金黄色葡萄球菌(ATCC 6538)、白色念珠菌(ATCC10231)。

样品：实施例1-3制得的组合物，用水和吐温80溶解配成组合物浓度为5％的溶液。实施例4的敏感修复化妆水直接应用。5％吐温的水溶液为阴性对照，标记为a，用打孔器将滤纸打成直径6mm的滤纸片若干，分别置于阴性对照，及各实施例组中。实施例1-4的终产物分别标记为b、c、d、e，观察抑菌圈的出现情况。培养基：金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的培养使用营养琼脂培养基，白色念珠菌的培养使用沙氏琼脂培养基。

由图1A、图1B、图1C可知，实施例1-4的终产物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌都有抑菌作用，都出现抑菌圈，而阴性对照组即吐温80-水处理组没有抑菌圈出现，实施例5-7的产品也进行了相同的实验，效果与实施例4类似，说明本发明的组合物及含有本发明组合物的化妆品具有广谱抑菌性。

实施例9抑菌性试验

试验菌株：金黄色葡萄球菌(ATCC 6538)、大肠杆菌(8099)、白色念珠菌(ATCC10231)。

样品：实施例1所述组合物，吐温80-水稀释，组合物终浓度5％。稀释液：0.03mol/L磷酸盐缓冲液(PBS)(pH7.2～7.4)，培养基：金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的培养使用营养琼脂培养基，白色念珠菌的培养使用沙氏琼脂培养基。

取试验菌24h新鲜斜面培养物用PBS洗下，用PBS稀释至约5.0×10⁵CFU/mL～4.5×10⁶ CFU/mL菌悬液备用。取无菌试管，先加入5.0mL样品(实施例1所述组合物，吐温80- 水稀释，组合物终浓度5％。)，置20℃±1℃水浴中5min后，再加入0.1mL试验用菌悬液，迅速混匀并立即计时。待试验菌与样品相互作用至5min，分别吸取1.0mL试验菌与样品混合液接种2个平皿，倾注培养基。菌量无法计数时，以PBS做10倍系列稀释，选适宜稀释度分别吸取1.0mL接种2个平皿，做活菌培养计数。同时用PBS代替样品，进行平行试验，作为阳性对照。阳性对照回收菌落数在1.0×10⁴CFU/mL～9.0×10 ⁴CFU/mL之间。取同批次PBS、培养基作阴性对照。所有试验样本和对照样本均在36℃±1℃培养，细菌繁殖体培养 48h观察最终结果；白色念珠菌培养72h观察最终结果。试验重复3次，计算抑菌率。抑菌率计算：

式中：X—抑菌率，％；A₀—阳性对照组回收菌量，单位为CFU/mL；

A₁—试验组回收菌量，单位为CFU/mL。

实验结果见图2，显示实施例1处理后，大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌均不生长，抑菌率均达到100％。实施例2-3的组合物采用相同的试验方法进行，结果发现均对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌抑菌率均达到100％。

实施例10抗敏止痒效果初步筛选实验

1、实验动物及分组选用8周雌性C57小鼠，随机分组，每组5只。瘙痒模型选用皮肤机械屏障功能障碍(TS)模型，来自天津医科大学。小鼠颈背部剃毛后，持续实验5天。

空白组：小鼠颈背部剃毛，不做任何处理。

空白+样品组：小鼠颈背部剃毛，每天涂抹实施例样品，其中实施例1-3，用吐温-水(5:95v/v)配制成75mg/mL的溶液后进行涂抹；实施4-7直接涂抹。

模型组：小鼠颈背部剃毛，每天强力胶带反复粘贴毛处皮肤4-5次，制备皮肤机械屏障功能障碍(TS)模型。

模型+样品组：小鼠颈背部剃毛，每天强力胶带反复粘贴剃毛处皮肤4-5次。30min后涂抹样品。其中实施例1-3，用吐温-水(5:95v/v)配制成75mg/mL的溶液后进行涂抹；实施4-7直接涂抹。

2、各处理组品搔抓行为记录将小鼠单只放于玻璃盒子中并置于适宜的安静环境中适应至少30min，然后用摄像机记录小鼠在1h内对颈背部的抓挠状况。通过回放录像，统计小鼠对颈背部的抓挠次数。记录标准为小鼠抬起后爪抓挠颈背部处理区域，然后将后爪放回盒子底部或者置于嘴边舔记为一次。后爪对于其他部位的抓挠不记。

3、实验结果由表7，表8可知实施例1-7都可以使瘙痒模型组小鼠的舔体次数和抓挠次数降低，表现出抗敏止痒的效果。

表7各实验组小鼠的舔体次数

表8各实验组小鼠的挠抓次数

实施例11抗瘙痒实验

1.瘙痒模型的制备及实验设计

瘙痒模型选用皮肤机械屏障功能障碍(TS)模型，选用8周雌性C57小鼠，随机分组，每组5只，第1-5天，每天均拍照，其中第3、5天拍照同时，取皮肤组织记录搔抓行为。实验设计见下表：

表9 TS瘙痒模型实验设计

注：处理时间为每天上午9点和下午5点。对照产品为实施例4的组方基础上，不添加本发明的抗敏止痒植物组合物。

注：TS模型组亦简称为Tape，实施例4亦简称为抗敏水(anti-allergic water)

2.实验方法：

(1)病理观察：通过HE染色检测表皮厚度变化。

(2)搔抓行为：将小鼠单只放于玻璃盒子中并置于适宜的安静环境中适应至少30min，然后用摄像机记录小鼠在1h内对颈背部的抓挠状况。通过回放录像，统计小鼠对颈背部的抓挠次数。记录标准为小鼠抬起后爪抓挠颈背部处理区域，然后将后爪放回盒子底部或者置于嘴边舔记为一次。后爪对于其他部位的抓挠不记。

(3)qRT-PCR定量检测以下因子的表达量：

根据realtime qPCR操作说明，检测小鼠的瘙痒因子IL-2,IL-31,TRPA1，的表达量，以及皮肤屏障因子mRNA表达量Sprr2b,Serpinb12，S100A8,使用管家基因β-actin作为实验的内参基因。

3.实验结果

(1)背部皮肤情况观察

结果发现TS模型组和TS模型组+对照产品组的皮肤表面相似，无明显差别。由图3可知，与对照组相比，实施例4产品处理后小鼠背部皮肤未见显著差异，TS模型组和TS模型组+对照产品组的皮肤表面损伤严重，第5天时，TS+实施例4处理组比较TS模型组和 TS模型组+对照产品组，皮肤损伤减轻。

(2)角质层厚度比较

由图4、图5可见，各处理组的角质层厚度没有显著差异。

(3)各处理组舔体行为和抓挠行为比较

由图6和图7可知，空白组与实施例4产品处理组相比较，舔体行为和抓挠行为没有显著性差异，而TS模型组、TS模型组+对照产品组与空白组相比，前两者的舔体行为和抓挠行为都显著增多，TS+实施例4处理组与TS模型组、TS模型组+对照产品组比较，舔体行为和抓挠行为都明显比后两者减少，说明实施例4产品具有止痒效果，而不含本发明抗敏止痒植物组合物的对照产品不具有止痒效果，进一步证实了本发明的抗敏止痒植物组合物具有止痒效果。

(4)各处理组细胞因子的测定结果

细胞因子在瘙痒的发病机制中具有重要意义。IL-2皮内注射会引起严重瘙痒和红斑。 IL-13是一种AD激活剂且部分激活TRPA1。表皮过表达IL-13的转基因小鼠会引起瘙痒。IL-31在许多瘙痒性疾病中表达升高，包括AD、过敏性接触性皮炎。研究表明IL-31引起迟发性瘙痒，这提示IL-31通过间接机制发挥瘙痒作用。TRP超家族是感觉的主要组成部分，介导包括瘙痒在内的感觉方式。TRPV1在皮肤感觉神经、角质形成细胞中表达,其活化导致促进炎症和瘙痒的分子释放。TRPA1参与不同的感觉方式的传递，传导途径介导瘙痒。TRPA1是皮肤屏障损伤的主要传感器，皮肤屏障破坏引发炎症。

本研究中TS模型组经实施例4产品治疗后，IL-2，IL-31mRNA表达水平显著下调，但TS模型组和TS模型组+对照产品组中未表现出显著的抑制作用，这说明实施例4产品中含有的本发明抗敏止痒植物组合物可抑制瘙痒因子表达，具有预防瘙痒的潜力。根据文献报道Serpinb分子，作为丝氨酸蛋白酶抑制剂，在特应性皮炎和银屑病患者的病变皮肤组织中表达量升高，S100A8可参与固有免疫系统调节。本研究中，实施例4的产品处理后Serpinb12表达量显著增高，同时伴随S100A8表达量的升高，提示抗敏水可提升固有免疫反应活性。富含脯氨酸小蛋白(SPRRs)是角质化包膜形成过程中的重要分子，同时也参与氧化应激过程的防御。实施例4产品处理后皮肤中Sprr2b表达量的上调提示角质化包膜合成过程活性增强。测定结果见图8，图9，图10。

综上，本发明的研究结果提示皮肤外用实施例4产品处理能通过抑制瘙痒刺激因子，瘙痒受体表达，促进角质化包膜合成实现抑制瘙痒，促进皮肤屏障修复，而不含本发明抗敏止痒植物组合物的对照产品(对照于实施例4产品)不具有上述功能。实施例5-7的产品也进行了相同的实验研究，结果证实实施例5-7的产品具有能通过抑制瘙痒刺激因子，瘙痒受体表达，促进角质化包膜合成实现抑制瘙痒，促进皮肤屏障修复的效果。

实施例12特应性皮炎(atopic dermatitis，AD)治疗的效果观察

特应性皮炎(atopic dermatitis，AD)是以T细胞、嗜酸性粒细胞和肥大细胞浸润皮肤为特征的常见慢性炎性皮肤病。AD常表现为强烈的瘙痒、皮肤炎症和其他特应性症状。对其发病机制的研究表明，AD与皮肤屏障功能异常和免疫系统的调节紊乱有关。

1.实验方法(与抗瘙痒实验相似)

表10 AD瘙痒模型实验设计

注：DNFB配置：将DNFB溶于丙酮/橄榄油4:1的混合液，实施例4亦称为抗敏水(anti-allergic water)。

2.实验结果

(1)小鼠耳部形态观察

由图可见，实施例4产品与空白组相比，耳部厚度没有显著性差异，DNFB处理组的小鼠耳部明显增厚，出现肿胀；DNFB+实施例4处理组与DNFB处理组相比较，小鼠的耳部肿胀明显减轻，说明实施例4产品具有治疗特应性皮炎的潜力。而对DNFB处理组进一步施用对照产品(为实施例4的组方基础上，不添加本发明的抗敏止痒植物组合物，施用方法、时间均同DNFB+实施例4处理组)后，发现小鼠耳部肿胀没有明显缓解。见图11。

(2)小鼠耳厚度比较

由图12、图13可知，与对照组相比，实施例4产品处理后未造成小鼠耳厚增加。随着时间的增加，DNFB处理组小鼠的耳厚度增加明显，DNFB+实施例4处理组小鼠的耳厚度与DNFB组相比有显著性差异，说明实施例4产品处理后，可减轻DNFB诱导的耳部肿胀。

(3)各细胞因子的测定结果

由图14可知，DNFB诱导特应性皮炎后，炎性因子IL-1α，IL-1β及趋化因子CXCL2,CCL4 显著上调，表明炎症水平显著增加。在AD模型小鼠右耳涂抹抗敏水后，显著降低右耳IL-1α， IL-1β，及趋化因子表达，同时左耳炎性因子及趋化因子也显著下调。而对AD模型小鼠进一步施用对照产品(为实施例4的组方基础上，不添加本发明的抗敏止痒植物组合物，施用方法、时间均同DNFB+实施例4处理组)后，未发现右耳IL-1α，IL-1β，及趋化因子表达降低，未发现左耳炎性因子及趋化因子显著下调。表明在特应性皮炎模型中局部使用实施例4的抗敏水显著抑制炎症水平，同时提示抗敏水对整体炎症水平也具有抑制作用。而对照产品无此作用。本发明还对实施例5-7的产品也进行了相同的实验研究，结果证实实施例5-7的产品能够显著抑制炎症水平。

由图15可知，实施例4产品处理后Serpinb12表达量显著增高，同时伴随S100A8表达量的升高，提示抗敏水可提升固有免疫反应活性。富含脯氨酸小蛋白(SPRRs)是角质化包膜形成过程中的重要分子，同时也参与氧化应激过程的防御。实施例4产品处理后皮肤中 Sprr2b表达量的上调提示角质化包膜合成过程活性增强。说明实施例4产品可以促进皮肤屏障的修复。对照产品(为实施例4的组方基础上，不添加本发明的抗敏止痒植物组合物) 进行了相同实验，发现其不能促进皮肤屏障修复。本发明还对实施例5-7的产品也进行了相同的实验研究，结果证实实施例5-7的产品可以促进皮肤屏障的修复。

虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

Claims

1.一种抗敏止痒植物组合物，其特征在于，含有以下原料制得的成分：粉防己、铁冬青、黄芩、虎杖、光果甘草、绿茶、七星剑、互叶白千层、母菊、积雪草、迷迭香。

2.根据权利要求1所述的抗敏止痒植物组合物，其特征在于，通过以下方法制备得到：

(4)用溶剂将提取物A、B、C溶解。

3.根据权利要求2所述的抗敏止痒植物组合物，其特征在于，步骤(1)将以下重量份原料的粉末混合：粉防己3-8份、铁冬青0-5份、黄芩1-5份、虎杖1-5份、光果甘草1-5份，按照与混合粉末的质量体积比10-15加入40％-80％的乙醇提取，滤液减压浓缩干燥得提取物A；或

步骤(2)将以下重量份原料的粉末混合：绿茶0.6-4份、七星剑0-4份、互叶白千层0-4份、母菊0.6-4份、积雪草0.6-4份、迷迭香0.6-4份，置于挥发油提取器中。

4.一种抗敏止痒植物组合物的制备方法，其特征在于，通过以下方法制备得到：

(4)用溶剂将提取物A、B、C混合。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)将以下重量份原料的粉末混合：粉防己3-8份、铁冬青0-5份、黄芩1-5份、虎杖1-5份、光果甘草1-5份，按照与混合粉末的质量体积比10-15加入40％-80％的乙醇提取，滤液减压浓缩干燥得提取物A；和/或

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)将以下重量份原料的粉末混合：粉防己3-8份、铁冬青1-3份、黄芩1-3份、虎杖1-3份、光果甘草1-3份，按照与混合粉末的质量体积比10-15加入40％-80％的乙醇提取，滤液减压浓缩干燥得提取物A；和/或

步骤(2)将以下重量份原料的粉末混合：绿茶0.6-3份、七星剑0-3份、互叶白千层0-3份、母菊0.6-3份、积雪草0.6-3份、迷迭香0.6-3份，置于挥发油提取器中。

7.根据权利要求4-6任一所述的制备方法，其特征在于，步骤(4)所述溶剂为水、乙醇、甘油、丁二醇、丙二醇、吐温-80、吐温-60、吐温40、吐温-20、司盘-20、司盘60、司盘-80中的一种或多种。

8.权利要求1-3任一所述的抗敏止痒植物组合物或权利要求4-7任一所述制备方法制得的抗敏止痒植物组合物在制备缓解、修复或治疗皮肤敏感瘙痒或抑制皮肤表面细菌、真菌的外用药物或在制备缓解、修复或治疗皮肤敏感瘙痒的化妆品中的应用。

9.含有权利要求1-3任一所述的抗敏止痒植物组合物或含有权利要求4-7任一所述制备方法制得的抗敏止痒植物组合物的产品，其特征在于，其为药用敷料、化妆品。

10.一种皮肤敏感修复化妆品，其特征在于，其为敏感修复化妆水、敏感修复精华液、敏感炎症治疗修复乳或修复霜；

(1)所述敏感修复化妆水的配方为以下：将原料依次加入水相锅，搅拌升温至80-85℃，均质至分散均匀，保温8-12分钟；搅拌均匀，将水相锅降温至40℃，合格后过滤出料；

(2)所述敏感修复精华液的配方为以下：将A相原料依次加入水相锅，搅拌升温至80-85℃，均质至分散均匀；将C相原料混合，加热到70-80℃，搅拌均匀作为预混G；将预混G边搅拌边加入到80-85℃的A相，搅拌参数1000-3000rpm；获得的混合液在70-80℃下继续8000rpm搅拌15分钟后，搅拌降温至40℃，将预先增溶好的B相，加入前述混合液中搅拌均匀；合格后过滤出料；

(3)所述敏感修复乳的配方为以下：将A相原料依次加入油相锅，搅拌升温至75-80℃，搅拌保温至完全熔化；将B项原料依次加入乳化锅搅拌升温至80-85℃均质至分散均匀，保温8-12分钟；抽取乳化锅真空，将油相锅全部料体抽入乳化锅，搅拌均质至乳化完全，保温8-12分钟；乳化锅搅拌降温至40℃，将预先熔好的C项原料加入乳化，搅拌至分散均匀；调pH值：5.5-6.5；

(4)所述炎症治疗修复霜的配方为以下：将B相原料依次加入水相锅搅拌升温至80-85℃均质至分散均匀，保温8-12分钟，将A相原料依次加入油相锅，搅拌升温至75-80℃至分散均匀；将水相锅原料一半抽入乳化锅，再将油相锅原料抽入乳化锅，再将剩余水相锅料体全部抽入乳化锅，搅拌均质至乳化完全，保温8-10分钟；乳化锅搅拌降温至55-60℃，将C相原料加入，搅拌均质至乳化完全，保温3-7分钟；继续搅拌降温至40℃，搅拌至分散均匀，pH值5.5-6.5；合格后过滤出料；