CN111789822A - 一种β-烟酰胺单核苷酸胶囊 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种β‑烟酰胺单核苷酸胶囊，以β‑烟酰胺单核苷酸为原料药，以淀粉、羧甲基淀粉钠、二氧化硅、乳糖、硬脂酸镁为辅料，采用预混杂化‑总混‑胶囊填充工艺制备而成。本发明β‑烟酰胺单核苷酸胶囊溶出度好、稳定性佳。

Description

一种β-烟酰胺单核苷酸胶囊

技术领域

本发明涉及以特殊物理形状为特征的医药配制品，尤其涉及一种胶囊制剂。

背景技术

NMN（β-烟酰胺单核苷酸），是人体内长寿蛋白的辅因子NAD+的前体物质。

NAD+又称辅酶Ⅰ，全称烟酰胺腺嘌呤二核苷酸，又称二磷酸烟苷，存在每一个细胞中参与上千项反应。NAD+是三羧酸循环的重要辅酶，促进糖、脂肪、氨基酸的代谢，参与能量的合成；NAD+又是辅酶I消耗酶的唯一底物（DNA 修复酶 PARP 的唯一底物、长寿蛋白Sirtuins的唯一底物、环ADP核糖合成酶 CD38/157 的唯一底物）。因此，NAD+对人体来说非常重要，在人体抗衰老中起到重要作用。但是随着年龄的增长，人体内的NAD+水平是在逐渐下降的，导致线粒体活性降低，加速线粒体、细胞乃至整个机体的衰老，并且逐渐进入恶性循环，人体逐渐衰老。 补充 NAD+三个代谢循环的四类前体可以有烟酸、色氨酸、烟酰胺和NMN/NR。相较NAD+的其他补充方式，NMN绕过了NAMPT限速酶的瓶颈，可以迅速补充体内NAD+，是最佳的理想补充方法。NAD+分子比较大，外部直接补充的NAD+很难透过细胞膜，进入细胞内部，但NMN分子则很容易就穿过细胞膜，进入到细胞内部。一旦进入到细胞内部，2个NMN分子会结合在一起，形成一个NAD+分子。 所以，定期摄入NMN，可以有效地增加其在体内NAD+的含量，有助于人类自身修复DNA的损伤，而达到延缓衰老的目的。

β-烟酰胺单核苷酸作为NAD+补救途径中的中间体，具有抗氧化、减少氧化应激的作用，在一些具体疾病的治疗，如脑卒中、心脏缺血再灌注、阿尔茨海默氏病、帕金森病、急性肾损伤、视网膜退行性疾病、II 型糖尿病等中也有良好表现。特别是在抗衰老方面，NMN可以减缓生物体的生理衰退，增强能量代谢，延长寿命。鉴于NMN是人体内源性物质，安全性较高，将其作为活性物质在功能食品领域开发中具有广阔前景。

但β-烟酰胺单核苷酸化学性质不稳定，对光、氧、湿非常敏感，常常需要现用现配。如果采用常规辅料制成普通剂型，存在稳定性差、货架期短等诸多缺点。

为了解决NMN化学性质不稳定的问题，中国专利文献CN109364091A披露了一种方法，即先将NMN与生物高分子载体制成生物高分子纳米球，然后利用该高分子纳米球制成药学上可接受的剂型；中国专利文献CN110812365A披露了另一种方法，即首先利用离子交换树脂对NMN进行吸附制成载药树脂颗粒，然后利用包衣材料、增塑剂对载药树脂进行吸附。上述两种方法不仅工艺复杂且均使用了一些不常见的药用辅料，使用新的药用辅料存在一定的安全性风险。另外，上述两种方法无一例外的选择了将原料药与载体进行复合制成载药颗粒的设计思路，虽然可以解决NMN的化学稳定性问题，但因为活性成分需要从载药颗粒及制剂中两次释放，所以此类方法一般被应用在缓控释制剂的制备中，无法满足普通制剂的应用需求。

综上所述，如何利用普通药用辅料和普通剂型解决NMN化学性质不稳定的问题，是亟待解决的技术难题。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种新的β-烟酰胺单核苷酸胶囊，利用普通药用辅料和普通剂型增强原料药在制剂中的化学稳定性。

为了解决上述技术问题，本发明采用如下技术方案：

一种β-烟酰胺单核苷酸胶囊，其特征在于所述胶囊是以β-烟酰胺单核苷酸为原料药，以淀粉、羧甲基淀粉钠、二氧化硅、乳糖、硬脂酸镁为辅料制备而成。

优选的，所述原料药和辅料的质量比如下：β-烟酰胺单核苷酸150份，淀粉80-100份、羧甲基淀粉钠8-12份、二氧化硅8-12份、乳糖80-100份、硬脂酸镁2-4份。

优选的，所述原料药和辅料的质量比如下：β-烟酰胺单核苷酸150份，淀粉90份、羧甲基淀粉钠10份、二氧化硅10份、乳糖90份、硬脂酸镁3份。

优选的，所述的制备采用如下方法：

（1）预混杂化复合辅料的制备

取处方量的淀粉，置于研磨筒中，以氧化锆球作为磨介质，40-45℃条件下研磨20-40分钟，收集粉末，得预胶化淀粉，备用；取处方量的羧甲基淀粉钠，加入去离子水溶解，搅拌均匀，置于高速剪切均质机中，加入处方量的经超微粉碎的二氧化硅粉末，高速剪切1-2小时，静置12小时，然后高速剪切20-40分钟，得胶体溶液，再加入预胶化淀粉，继续高速剪切0.5-1.5小时，喷雾干燥，即得预混杂化复合辅料；

（2）总混

取处方量的β-烟酰胺单核苷酸、乳糖，加入前步所得预混杂化复合辅料，置于混合机中，混合均匀，再加入硬脂酸镁，混合均匀；

（3）胶囊填充

根据含量测定结果，计算装量，填充胶囊，即得。

优选的，所述的预混杂化复合辅料的制备采用如下方法：

取处方量的淀粉，置于研磨筒中，以氧化锆球作为磨介质，40-45℃条件下研磨30分钟，收集粉末，得预胶化淀粉，备用；取处方量的羧甲基淀粉钠，加入去离子水溶解，搅拌均匀，置于高速剪切均质机中，加入处方量的经超微粉碎的二氧化硅粉末，高速剪切1.5小时，静置12小时，然后高速剪切30分钟，得胶体溶液，再加入预胶化淀粉，继续高速剪切1小时，喷雾干燥，即得。

本发明的有益技术效果主要体现在如下几个方面：

1.本发明β-烟酰胺单核苷酸胶囊溶出度好、稳定性佳。

2.本发明采用杂化复合法对辅料进行预混，能有效克服β-烟酰胺单核苷酸化学稳定性差的弊端，显著增加制剂的稳定性。

3.本发明所使用的各种辅料均属于常用品种，来源易得、安全性风险低。

本发明的技术效果可以通过下述试验进行证明。

试验例1 溶出度测试

1 材料与方法

1.1.1 材料

本发明β-烟酰胺单核苷酸胶囊， 按实施例1、2、3、4自制。

对比β-烟酰胺单核苷酸胶囊-1，按对比例1自制。

测试方法

取各样品，照溶出度与释放度测定法（中国药典2015版四部通则0931 第一法），以水900mL为溶出介质，转速为每分钟50转，依法操作，45分钟时，取溶液10mL，滤过，弃去初滤液2mL，精密量取续滤液适量，用水定量稀释制成每1mL中约含烟酰胺单核苷酸0.04mg的溶液，照紫外-可见分光光度法（中国药典2015版四部通则0401），在265nm的波长处测定吸光度；另取烟酰胺单核苷酸对照品适量，用水稀释制成每1mL中约含0.04mg的溶液，同法测定，计算每粒的溶出量。

结果

溶出度测试结果见表1。结果显示，本发明β-烟酰胺单核苷酸胶囊在45分钟内能完全溶出，符合制剂通则的相关规定。结果还表明，本发明β-烟酰胺单核苷酸胶囊的溶出度明显高于对比例1，表明前者比载药颗粒更容易释放出活性成分。

表1 溶出度测试结果

样品	实施例1	实施例2	实施例3	实施例4	对比例1
						溶出度（%）	99.79	97.74	98.87	98.82	69.82

试验例2 加速稳定性试验

2.1 材料与方法

2.1.1 材料

本发明β-烟酰胺单核苷酸胶囊， 按实施例1、2、3、4自制。

对比β-烟酰胺单核苷酸胶囊-2，按对比例2自制。

对比β-烟酰胺单核苷酸胶囊-3，按对比例3自制。

测试方法

取各样品，以塑料瓶密封包装，置于40±2℃、RH75±5%的环境中，分别于放置后的第1/2/3月取样检测，检测项目为性状、有关物质和含量。

性状检测方法：取胶囊内容物，检测颜色、形态和气味。

有关物质检测方法：精密称取样品内容物适量，加流动相制成每1mL含 1mg的溶液，作为供试品溶液。用硅胶柱为填充剂，乙腈-水（含磷酸二氢钠 20mmol/L，磷酸调节pH2.8）（955:45）为流动相，检测波长为263nm，柱温 40℃，照高效液相色谱法（中国药典2015 版四部通则 0512）测定。精密量取供试品溶液10μL，注入高效液相色谱仪，记录色谱图至主峰保留时间的2 倍。供试品溶液中主峰与相邻峰的分离度应不小于1.5；供试品溶液中如有杂质峰，按面积归一化法计算。

含量测定方法：取样品5粒内容物，混匀，称取适量，加水制成每1mL含烟酰胺单核苷酸为0.04mg/mL的溶液；另取对照品适量，加水制成每1mL含0.04mg/mL的溶液。照紫外-可见分光光度法（中国药典2015版四部通则0401），在265nm的波长处测定吸光度，按外标法计算。

结果

稳定性加速试验结果见表2。结果表明，采用预混杂化复合辅料制备的本发明β-烟酰胺单核苷酸胶囊（即实施例1、2、3）在加速条件下，3个月均比较稳定。

结果还显示，采用常规混合工艺制备的β-烟酰胺单核苷酸胶囊（即实施例4），加速1个月产品比较稳定，加速2个月开始，胶囊出现酸奶样臭味，含量有所下降，有关物质有所增加。试验结果表明，与常规制剂工艺相比，对辅料进行杂化预混，能显著增加成品的稳定性。

结果还显示，对比例2制备的β-烟酰胺单核苷酸胶囊，加速1个月开始，胶囊出现酸奶样臭味，含量有所下降，有关物质有所增加。试验结果表明，中国专利文献CN107582540A披露的制剂处方及辅料处理方法并不适合用来增加β-烟酰胺单核苷酸的化学稳定性。其原因可能与两者的技术原理不一致有关。文献CN107582540A披露的制剂处方里包括如下药用辅料：预胶化淀粉、乳糖、交联羧甲基淀粉钠、低取代羟丙基纤维素、硬脂酸镁等；该文献还披露了淀粉的预胶化方法以及交联羧甲基淀粉钠的制备方法。虽然如此，该文献披露的技术原理依然是各辅料之间简单的物理混合。而本发明制备预混辅料的技术原理是杂化，具体来说是利用二氧化硅对预胶化淀粉与羧甲基淀粉钠表面进行硅化改性，因此采用的制备方法属于溶胶/凝胶法。另外，尽管对比文献CN107582540A披露的淀粉预胶化方法中也用到了二氧化硅，但后者的用量很小，仅仅作为助流剂使用；而本发明制备预混杂化辅料中使用的二氧化硅是经过超微粉碎的，且用量较大，其主要目的是利用机械剪切法制备硅溶胶（易言之，在本发明中，对二氧化硅进行超微粉碎的程度以能形成硅溶胶为度，此处不予赘述）。

结果还显示，按对比例3制备的β-烟酰胺单核苷酸胶囊，加速1个月产品比较稳定，加速2个月开始，胶囊出现酸奶样臭味，含量有所下降，有关物质有所增加。试验结果表明，按文献方法预胶化的淀粉并不适用于本发明中预混杂化复合辅料的制备，申言之，淀粉的预胶化方法及程度对本发明技术效果有着重大影响，并非所有的预胶化淀粉均适合本发明的技术构思。

结果还显示，按对比例4制备的β-烟酰胺单核苷酸胶囊，加速1个月产品比较稳定，加速2个月开始，胶囊出现酸奶样臭味，含量有所下降，有关物质有所增加。试验结果表明，羧甲基淀粉钠加入到预混杂化体系中对于本发明技术方案取得相应的技术效果来说至关重要。

表2 稳定性加速试验结果

具体实施方式

下面结合实施例对本发明的技术方案做进一步的说明。

实施例1 β-烟酰胺单核苷酸胶囊的制备

制剂处方：β-烟酰胺单核苷酸150份，淀粉80份、羧甲基淀粉钠8份、二氧化硅8份、乳糖80份、硬脂酸镁2份。

制备工艺：

（1）预混杂化复合辅料的制备

取处方量的淀粉，置于研磨筒中，以氧化锆球作为磨介质，40-45℃条件下研磨40分钟，收集粉末，得预胶化淀粉，备用；取处方量的羧甲基淀粉钠，加入去离子水溶解，搅拌均匀，置于高速剪切均质机中，加入处方量的经超微粉碎的二氧化硅粉末，高速剪切2小时，静置12小时，然后高速剪切40分钟，得胶体溶液，再加入预胶化淀粉，继续高速剪切1.5小时，喷雾干燥，即得预混杂化复合辅料；

（2）总混

取处方量的β-烟酰胺单核苷酸、乳糖，加入前步所得预混杂化复合辅料，置于混合机中，混合均匀，再加入硬脂酸镁，混合均匀；

（3）胶囊填充

根据含量测定结果，计算装量，填充胶囊，即得。

实施例2 β-烟酰胺单核苷酸胶囊的制备

制剂处方：β-烟酰胺单核苷酸150份，淀粉100份、羧甲基淀粉钠12份、二氧化硅12份、乳糖100份、硬脂酸镁4份。

制备工艺：

（1）预混杂化复合辅料的制备

取处方量的淀粉，置于研磨筒中，以氧化锆球作为磨介质，40-45℃条件下研磨20分钟，收集粉末，得预胶化淀粉，备用；取处方量的羧甲基淀粉钠，加入去离子水溶解，搅拌均匀，置于高速剪切均质机中，加入处方量的经超微粉碎的二氧化硅粉末，高速剪切1小时，静置12小时，然后高速剪切20分钟，得胶体溶液，再加入预胶化淀粉，继续高速剪切0.5小时，喷雾干燥，即得预混杂化复合辅料；

（2）总混

取处方量的β-烟酰胺单核苷酸、乳糖，加入前步所得预混杂化复合辅料，置于混合机中，混合均匀，再加入硬脂酸镁，混合均匀；

（3）胶囊填充

根据含量测定结果，计算装量，填充胶囊，即得。

实施例3 β-烟酰胺单核苷酸胶囊的制备

制剂处方：β-烟酰胺单核苷酸150份，淀粉90份、羧甲基淀粉钠10份、二氧化硅10份、乳糖90份、硬脂酸镁3份。

制备工艺：

（1）预混杂化复合辅料的制备

取处方量的淀粉，置于研磨筒中，以氧化锆球作为磨介质，40-45℃条件下研磨30分钟，收集粉末，得预胶化淀粉，备用；取处方量的羧甲基淀粉钠，加入去离子水溶解，搅拌均匀，置于高速剪切均质机中，加入处方量的经超微粉碎的二氧化硅粉末，高速剪切1.5小时，静置12小时，然后高速剪切30分钟，得胶体溶液，再加入预胶化淀粉，继续高速剪切1小时，喷雾干燥，即得预混杂化复合辅料；

（2）总混

取处方量的β-烟酰胺单核苷酸、乳糖，加入前步所得预混杂化复合辅料，置于混合机中，混合均匀，再加入硬脂酸镁，混合均匀；

（3）胶囊填充

根据含量测定结果，计算装量，填充胶囊，即得。

实施例4 β-烟酰胺单核苷酸胶囊的制备

制剂处方：同实施例3。

制备工艺：

（1）混合

取处方量的β-烟酰胺单核苷酸、淀粉、羧甲基淀粉钠、二氧化硅、乳糖，置于混合机中，混合均匀，再加入硬脂酸镁，混合均匀；

（3）胶囊填充

根据含量测定结果，计算装量，填充胶囊，即得。

对比例1 对比β-烟酰胺单核苷酸胶囊-1的制备

制剂处方：β-烟酰胺单核苷酸载药树脂颗粒150份，淀粉90份、羧甲基淀粉钠10份、二氧化硅10份、乳糖90份、硬脂酸镁3份。

制备工艺：

（1）混合

取处方量的β-烟酰胺单核苷酸载药树脂颗粒、淀粉、羧甲基淀粉钠、二氧化硅、乳糖，置于混合机中，混合均匀，再加入硬脂酸镁，混合均匀；

（2）胶囊填充

根据含量测定结果，计算装量，填充胶囊，即得。

β-烟酰胺单核苷酸载药树脂颗粒的制备方法：参照中国专利文献CN110812365A制备，即将聚克立林钾加入至装有100mL去离子水的容器中，在搅拌状态下加入烟酰胺单核苷酸（NMN与聚克立林钾的质量比为1:10），500rpm持续搅拌4h，至吸附平衡后静置、使用钛棒进行过滤，弃滤液收集滤饼，50℃鼓风干燥箱中干燥，过60目筛，即得载药树脂颗粒。

对比例2对比β-烟酰胺单核苷酸胶囊-2的制备

制剂处方：β-烟酰胺单核苷酸50份、预胶化淀粉65份、乳糖76份、低取代羟丙纤维素38份、交联羧甲基淀粉钠10份、50％乙醇103份和硬脂酸镁2份。

制备工艺：参照中国专利文献CN107582540A制备，即：

（1）预胶化淀粉的制备

1）向100g淀粉中加入1-3mL体积浓度为25％的柠檬酸水溶液，搅拌均匀，搅拌20min，使得淀粉中的水分为5％，冷冻干燥，得活化淀粉；

2）向高速混合机中加入步骤1)所得活化淀粉、1g微粉硅胶和0 .5g醋酸酐，高速混合，得混合料；

3）将步骤2）所得混合料加入至装有磨介质氧化锆球的球磨筒中，恒温水浴温度为50℃，活化15min，即得。

（2）交联羧甲基淀粉钠的制备

1）将10g羧甲基淀粉钠溶于50mL无水乙醇中，搅拌至完全溶解，再搅拌加入质量浓度为20-30％氢氧化钠调节体系pH值为9-12，室温反应30-50min，得羧甲基淀粉钠溶液；

2）向步骤(1)所得羧甲基淀粉钠溶液中加入1-5g质量浓度为15-25％的三氧六环乙醇溶液交联剂，于45-75℃下反应6-10h，乙醇洗涤，过滤，105℃下烘干，即得。

（3）制剂的制备

湿法制粒，喷雾干燥，整粒，混合，灌胶囊，即得。

对比例3 对比β-烟酰胺单核苷酸胶囊-3的制备

制剂处方：β-烟酰胺单核苷酸150份，预胶化淀粉90份、羧甲基淀粉钠10份、二氧化硅10份、乳糖90份、硬脂酸镁3份。

制备工艺：

（1）预混杂化复合辅料的制备

取处方量的羧甲基淀粉钠，加入去离子水溶解，搅拌均匀，置于高速剪切均质机中，加入处方量的经超微粉碎的二氧化硅粉末，高速剪切1.5小时，静置12小时，然后高速剪切30分钟，得胶体溶液，再加入预胶化淀粉，继续高速剪切1小时，喷雾干燥，即得预混杂化复合辅料；

预胶化淀粉的制备方法：同对比例2。

（2）总混

取处方量的β-烟酰胺单核苷酸、乳糖，加入前步所得预混杂化复合辅料，置于混合机中，混合均匀，再加入硬脂酸镁，混合均匀；

（3）胶囊填充

根据含量测定结果，计算装量，填充胶囊，即得。

对比例4 对比β-烟酰胺单核苷酸胶囊-4的制备

制剂处方：除处方中不含羧甲基淀粉钠外，余同实施例3。

制备工艺：

（1）预混杂化复合辅料的制备

取处方量的淀粉，置于研磨筒中，以氧化锆球作为磨介质，40-45℃条件下研磨30分钟，收集粉末，得预胶化淀粉，备用；取去离子水，置于高速剪切均质机中，加入处方量的经超微粉碎的二氧化硅粉末，高速剪切1.5小时，静置12小时，然后高速剪切30分钟，得胶体溶液，再加入预胶化淀粉，继续高速剪切1小时，喷雾干燥，即得预混杂化复合辅料；

余同实施例3。

显然，上述实施例仅仅是为清楚地说明技术方案而作的举例，并非对本发明实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明权利要求的保护范围之内。

Claims (5)

1.一种β-烟酰胺单核苷酸胶囊，其特征在于所述胶囊是以β-烟酰胺单核苷酸为原料药，以淀粉、羧甲基淀粉钠、二氧化硅、乳糖、硬脂酸镁为辅料制备而成。

2.根据权利要求1所述一种β-烟酰胺单核苷酸胶囊，其特征在于所述原料药和辅料的质量比如下：β-烟酰胺单核苷酸150份，淀粉80-100份、羧甲基淀粉钠8-12份、二氧化硅8-12份、乳糖80-100份、硬脂酸镁2-4份。

3.根据权利要求2所述一种β-烟酰胺单核苷酸胶囊，其特征在于所述原料药和辅料的质量比如下：β-烟酰胺单核苷酸150份，淀粉90份、羧甲基淀粉钠10份、二氧化硅10份、乳糖90份、硬脂酸镁3份。

4.根据权利要求1-3任一项所述一种β-烟酰胺单核苷酸胶囊，其特征在于所述的制备采用如下方法：

（1）预混杂化复合辅料的制备

取处方量的淀粉，置于研磨筒中，以氧化锆球作为磨介质，40-45℃条件下研磨20-40分钟，收集粉末，得预胶化淀粉，备用；取处方量的羧甲基淀粉钠，加入去离子水溶解，搅拌均匀，置于高速剪切均质机中，加入处方量的经超微粉碎的二氧化硅粉末，高速剪切1-2小时，静置12小时，然后高速剪切20-40分钟，得胶体溶液，再加入预胶化淀粉，继续高速剪切0.5-1.5小时，喷雾干燥，即得预混杂化复合辅料；

（2）总混

取处方量的β-烟酰胺单核苷酸、乳糖，加入前步所得预混杂化复合辅料，置于混合机中，混合均匀，再加入硬脂酸镁，混合均匀；

（3）胶囊填充

根据含量测定结果，计算装量，填充胶囊，即得。

5.根据权利要求4所述一种β-烟酰胺单核苷酸胶囊，其特征在于所述的预混杂化复合辅料的制备采用如下方法：

取处方量的淀粉，置于研磨筒中，以氧化锆球作为磨介质，40-45℃条件下研磨30分钟，收集粉末，得预胶化淀粉，备用；取处方量的羧甲基淀粉钠，加入去离子水溶解，搅拌均匀，置于高速剪切均质机中，加入处方量的经超微粉碎的二氧化硅粉末，高速剪切1.5小时，静置12小时，然后高速剪切30分钟，得胶体溶液，再加入预胶化淀粉，继续高速剪切1小时，喷雾干燥，即得。