CN111758964A - 生长因子组合物及其在食品中抗衰老的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种生长因子组合物及其在食品中抗衰老应用，所述生长因子包括酸性成纤维细胞生长因子、内皮细胞生长因子、胰岛素样生长因子、神经生长因子中的两种以上。本发明所述食品内包含两种以上中药抗衰老活性成分，及在其基础上添加生长因子，为抗衰老新方的开发提供借鉴，为其以后发挥作用和缓、副作小、适应多样性等优势铺平道路。本发明能够有效抑制了器官衰老与细胞凋亡，起到了延缓衰老的效果。
Description
技术领域
本发明属于食品领域，具体涉及生长因子组合物及其在食品中抗衰老的应用。
背景技术
延长寿命、延缓衰老一直是人类追求的愿景。近年来，国内外对衰老机理的研究以及抗衰老高效食品的研究成为了热点问题。大多数进化生物学家将衰老定义为一种年龄相关的内在生理功能渐进性下降，从而导致年龄别死亡率增加，年龄别增殖率降低。在个人层面上，衰老表现为内外界因素作用下的，人体分子，细胞，组织以及器官的改变，在群体水平，可转化为特定年龄死亡率和生育率。年龄与衰老并不是同一概念，衰老是一种生理状态，与增龄相关的老年慢性疾病实际上属于衰老综合征群，因此抗衰老研究对于防治增龄相关的老年病有重大意义。
随着社会经济的发展和人们对自身的健康日渐重视，人们也越来越追求科学膳食和合理的营养保健，越来越多的百姓倾向选择保健食品作为日常养生保健的药品替代补充。
生长因子是一类通过与特异的、高亲和的细胞膜受体结合，调节细胞生长与其他细胞功能等多效应的多肽类物质，存在于血小板和各种成体与胚胎组织及大多数培养细胞中，对不同种类的细胞具有一定的专一性。生长因子的生物学效应主要表现在促进细胞生长、分化、促进个体发育等方面。同一生长因子对不同细胞的作用有所不同，一种细胞也可受不同生长因子调节。大多数生长因子具有促进靶细胞生长的功能，少数具有负调节功能，还有一些具有正、负双重调节作用。成纤维细胞生长因子(FGF)是第一个被发现的促微血管生成因子。目前已发现有23种FGF，包括酸性成纤维细胞生长因子(aFGF/FGFl)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF/FGF2)及角化细胞生长因子(KGF/FGF7)等，它们均对细胞有促有丝分裂、促迁移作用，同时参与细胞分化、组织修复及血管生成等。胰岛素样生长因子(insulin-like growth factors，IGFs)是一类多功能细胞增殖调控因子，包括IGF-I和IGF-Ⅱ。在细胞的分化、增殖、个体的生长发育中具有重要的促进作用。肿瘤细胞可通过自分泌和旁分泌IGF-I使IGF-I R激活。再通过激活P13K，导致AKT磷酸化，使Bad凋亡蛋白1 12位及136位的丝氨酸磷酸化，而磷酸化的Bad与14-3-3蛋白结合。阻止其与凋亡抑制因子Bcl-xL和Bcl-2结合，诱导Bax同源二聚体的形成，最终抑制细胞凋亡。不同生长因子组合后进一步抑制了器官衰老与细胞凋亡，起到了延缓衰老的效果。
发明内容
鉴于现有技术的上述缺陷，本发明所要解决的技术问题：在保健抗衰老食品的组成上，大部分是以中药材原料为主，其抗衰老的效果不明显，本发明在中药抗衰老的基础上添加生长因子，为抗衰老新方的开发提供借鉴，为其以后发挥作用和缓、副作小、适应多样性等优势铺平道路。
本发明的目的在于提供一种富含生长因子的食品。
为了实现此目的，本发明采用了以下技术方案：
本发明公开了一种生长因子组合物，所述生长因子组合物包含酸性成纤维细胞生长因子、内皮细胞生长因子、胰岛素样生长因子、神经生长因子中的两种以上。
优选地，所述生长因子组合物为酸性成纤维细胞生长因子和胰岛素样生长因子的混合物，其中酸性成纤维细胞生长因子和胰岛素样生长因子的质量比为(1-3)：(1-3)，更优选为1：1。
本发明还公开了一种食品，包括上述生长因子组合物，所述生长因子组合物在食品中的含量为3-8wt％。
所述食品包括以下原料：生长因子组合物3-8wt％、沙苑子提取物0.3-3wt％、茯苓1-5wt％、天麻提取物6-20wt％、山楂4-10wt％、黑米2-3wt％、黑桑葚0.1-2wt％、红枣3-7wt％、番薯8-15wt％、山药0.4-2wt％、菟丝子0.1-0.3wt％、山梨糖醇0.01-0.05wt％、余量为水。
所述沙苑子提取物的制备过程为：
称取8-12g沙苑子于60-70℃干燥4-8小时后，粉碎过20-40目筛，得到沙苑子粉末；将沙苑子粉末加入500-1500mL提取剂中，加入0.01-0.02mol/L、50-150mL柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液，加入0.1-0.2g酶，50-60℃下反应2-4h，然后90-100℃煮沸5-10min灭酶；在进行超声提取60-80min，于2-5℃、10000-20000r/min离心10-20min，取上清液；将上清液于40-60℃、真空度-0.08～-0.07MPa的条件下干燥20-40小时，得到所述沙苑子提取物。
所述提取剂为甲醇、乙醇、丙酮中一种。
所述酶为果胶酶和/或木瓜蛋白酶。
沙苑子主要含有黄酮类、三萜类、氨基酸、微量元素等化学成分，具有抗氧化、抗肿瘤、保肝、调节血脂、抑制血小板聚集、降血压、抗纤维化和抗衰老、抗疲劳等功效。
所述天麻提取物的制备过程为：
称取8-12g天麻60-70℃干燥4-8小时后，粉碎过20-40目筛，得到天麻粉末，加入0.01-0.02mol/L、500-1500mL柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液，加入0.1-0.2g酶，40-60℃下反应2-4h，然后90-100℃煮沸5-10min灭酶；待冷却至室温后，于2-5℃、10000-20000r/min离心10-20min，将上清液过滤，合并滤液并浓缩，再向浓缩后的滤液中缓慢加入50-150mL质量分数95％的乙醇，置于2-5℃沉淀10-15h，离心得沉淀，经-50～-40℃冷冻干燥后，得到所述天麻提取物。
所述酶为纤维素酶和/或碱性蛋白酶。
天麻又称赤箭、赤箭芝、独摇芝、离母、定风草、合离草，是由兰科真菌多年生草本植物天麻的块茎干制而成。这是一种真正的云南药材，具有甜味和肝经络入口。具有镇静肝阳、清风、解痉、祛风通络的作用。被誉为“治风神药”，是一种药食同源的中草药。《本草纲目》记载天麻能“掌握各种风痹，久服补气，长时间减肥”。现代医学研究表明，天麻具有提高智力、健脑、抗衰老、抗心血管疾病、抗惊厥、止痛、安神等作用。化学成分包括酚类及其糖苷、多糖、有机酸和甾醇，其中天麻素和天麻多糖是天麻的主要活性成分，具有抗衰老作用。
所述食品制作方法包括以下步骤：
(1)山楂洗净去蒂祛核，分切成3-8mm方块备用；番薯洗净去皮，分切成3-5mm方块备用；将红枣洗净去核，分切成两半；山药去皮，分切成3-5mm方块备用；
(2)将茯苓、山楂、黑米、黑桑葚、红枣、番薯、山药、菟丝子加入水中，水煮加热20-30分钟，自然冷却至室温；
(3)加入生长因子组合物、沙苑子提取物、天麻提取物、山梨糖醇，搅拌均匀；
(4)杀菌包装，得所述食品。
本发明的有益效果：
1、本发明食品中含有酸性成纤维细胞生长因子和胰岛素样生长因子。酸性成纤维细胞生长因子对细胞有促有丝分裂、促迁移作用，同时参与细胞分化、组织修复及血管生成等。胰岛素样生长因子在细胞的分化、增殖、个体的生长发育中具有重要的促进作用。将上述两种组合后进一步抑制了器官衰老与细胞凋亡，起到了延缓衰老的效果。
2、本发明食品中含有沙苑子提取物。沙苑子主要含有黄酮类、三萜类、氨基酸、微量元素等化学成分，具有抗氧化、抗肿瘤、保肝、调节血脂、抑制血小板聚集、降血压、抗纤维化和抗衰老、抗疲劳等功效。
3、本发明食品中含有天麻提取物。天麻具有提高智力、健脑、抗衰老、抗心血管疾病、抗惊厥、止痛、安神等作用。化学成分包括酚类及其糖苷、多糖、有机酸和甾醇，其中天麻素和天麻多糖是天麻的主要活性成分，具有抗衰老作用。
具体实施方式
实施例中各原料来源：
酸性成纤维细胞生长因子，购于赛业(苏州)生物科技有限公司。
胰岛素样生长因子，购于赛业(苏州)生物科技有限公司。
纤维素酶，酶活力10000u/g，购于南宁东恒华道生物科技有限责任公司。
碱性蛋白酶，酶活力240000u/g，购于南宁东恒华道生物科技有限责任公司。
果胶酶，20000u/g，购于南宁东恒华道生物科技有限责任公司。
木瓜蛋白酶，100000u/g，购于南宁东恒华道生物科技有限责任公司。
山梨糖醇，食品级，CAS：50-70-4，购于石家庄瑞雪制药有限公司。
沙苑子，购于陕西大荔县。
天麻，购于湖北省宜昌市五峰县。
菟丝子，购于内蒙古巴彦淖尔市临河区。
实施例1
食品包括以下原料：生长因子组合物3wt％、沙苑子提取物1wt％、茯苓2wt％、天麻提取物10wt％、山楂5wt％、黑米2wt％、黑桑葚1wt％、红枣5wt％、番薯10wt％、山药1wt％、菟丝子0.2wt％、山梨糖醇0.01wt％、余量为水。
所述生长因子组合物为酸性成纤维细胞生长因子。
所述沙苑子提取物的制备过程为：
称取10g沙苑子于65℃干燥6小时后，粉碎过30目筛，得到沙苑子粉末；将沙苑子粉末加入1000mL质量分数95％的乙醇中，加入0.01mol/L、100mL柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液，加入0.1g酶，55℃下反应3h，然后100℃煮沸5min灭酶；在进行超声提取60min，于4℃、10000r/min离心15min，取上清液；将上清液于40-60℃、真空度-0.08～-0.07MPa的条件下干燥30小时，得到所述沙苑子提取物。
所述酶由果胶酶和木瓜蛋白酶按质量比1：1组成。
所述天麻提取物的制备过程为：
称取10g天麻65℃干燥6小时后，粉碎过30目筛，得到天麻粉末，加入0.01mol/L、1000mL柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液，加入0.2g酶，50℃下反应3h，然后100℃煮沸5min灭酶；待冷却至室温后，于4℃、10000r/min离心10min，将上清液过滤，合并滤液并浓缩，再向浓缩后的滤液中缓慢加入100mL质量分数95％的乙醇，置于4℃沉淀12h，离心得沉淀，经-50℃冷冻干燥后，得到所述天麻提取物。
所述酶由纤维素酶和碱性蛋白酶按质量比1：1组成。
所述食品制作方法包括以下步骤：
(1)山楂洗净去蒂祛核，分切成4mm方块备用；番薯洗净去皮，分切成4mm方块备用；将红枣洗净去核，分切成两半；山药去皮，分切成4mm方块备用；
(2)将茯苓、山楂、黑米、黑桑葚、红枣、番薯、山药、菟丝子加入水中，水煮加热30分钟，自然冷却至室温；
(3)加入生长因子组合物、沙苑子提取物、天麻提取物、山梨糖醇，搅拌均匀；
(4)杀菌包装，得所述食品。
实施例2
食品包括以下原料：生长因子组合物3wt％、沙苑子提取物1wt％、茯苓2wt％、天麻提取物10wt％、山楂5wt％、黑米2wt％、黑桑葚1wt％、红枣5wt％、番薯10wt％、山药1wt％、菟丝子0.2wt％、山梨糖醇0.01wt％、余量为水。
所述生长因子组合物为胰岛素样生长因子。
所述沙苑子提取物的制备过程为：
称取10g沙苑子于65℃干燥6小时后，粉碎过30目筛，得到沙苑子粉末；将沙苑子粉末加入1000mL质量分数95％的乙醇中，加入0.01mol/L、100mL柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液，加入0.1g酶，55℃下反应3h，然后100℃煮沸5min灭酶；在进行超声提取60min，于4℃、10000r/min离心15min，取上清液；将上清液于40-60℃、真空度-0.08～-0.07MPa的条件下干燥30小时，得到所述沙苑子提取物。
所述酶由果胶酶和木瓜蛋白酶按质量比1：1组成。
所述天麻提取物的制备过程为：
称取10g天麻65℃干燥6小时后，粉碎过30目筛，得到天麻粉末，加入0.01mol/L、1000mL柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液，加入0.2g酶，50℃下反应3h，然后100℃煮沸5min灭酶；待冷却至室温后，于4℃、10000r/min离心10min，将上清液过滤，合并滤液并浓缩，再向浓缩后的滤液中缓慢加入100mL质量分数95％的乙醇，置于4℃沉淀12h，离心得沉淀，经-50℃冷冻干燥后，得到所述天麻提取物。
所述酶由纤维素酶和碱性蛋白酶按质量比1：1组成。
所述食品制作方法包括以下步骤：
(1)山楂洗净去蒂祛核，分切成4mm方块备用；番薯洗净去皮，分切成4mm方块备用；将红枣洗净去核，分切成两半；山药去皮，分切成4mm方块备用；
(2)将茯苓、山楂、黑米、黑桑葚、红枣、番薯、山药、菟丝子加入水中，水煮加热30分钟，自然冷却至室温；
(3)加入生长因子组合物、沙苑子提取物、天麻提取物、山梨糖醇，搅拌均匀；
(4)杀菌包装，得所述食品。
实施例3
食品包括以下原料：生长因子组合物3wt％、沙苑子提取物1wt％、茯苓2wt％、天麻提取物10wt％、山楂5wt％、黑米2wt％、黑桑葚1wt％、红枣5wt％、番薯10wt％、山药1wt％、菟丝子0.2wt％、山梨糖醇0.01wt％、余量为水。
所述生长因子组合物由酸性成纤维细胞生长因子和胰岛素样生长因子按质量1：1组成。
所述沙苑子提取物的制备过程为：
称取10g沙苑子于65℃干燥6小时后，粉碎过30目筛，得到沙苑子粉末；将沙苑子粉末加入1000mL质量分数95％的乙醇中，加入0.01mol/L、100mL柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液，加入0.1g酶，55℃下反应3h，然后100℃煮沸5min灭酶；在进行超声提取60min，于4℃、10000r/min离心15min，取上清液；将上清液于40-60℃、真空度-0.08～-0.07MPa的条件下干燥30小时，得到所述沙苑子提取物。
所述酶由果胶酶和木瓜蛋白酶按质量比1：1组成。
所述天麻提取物的制备过程为：
称取10g天麻65℃干燥6小时后，粉碎过30目筛，得到天麻粉末，加入0.01mol/L、1000mL柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液，加入0.2g酶，50℃下反应3h，然后100℃煮沸5min灭酶；待冷却至室温后，于4℃、10000r/min离心10min，将上清液过滤，合并滤液并浓缩，再向浓缩后的滤液中缓慢加入100mL质量分数95％的乙醇，置于4℃沉淀12h，离心得沉淀，经-50℃冷冻干燥后，得到所述天麻提取物。
所述酶由纤维素酶和碱性蛋白酶按质量比1：1组成。
所述食品制作方法包括以下步骤：
(1)山楂洗净去蒂祛核，分切成4mm方块备用；番薯洗净去皮，分切成4mm方块备用；将红枣洗净去核，分切成两半；山药去皮，分切成4mm方块备用；
(2)将茯苓、山楂、黑米、黑桑葚、红枣、番薯、山药、菟丝子加入水中，水煮加热30分钟，自然冷却至室温；
(3)加入生长因子组合物、沙苑子提取物、天麻提取物、山梨糖醇，搅拌均匀；
(4)杀菌包装，得所述食品。
实施例4
食品包括以下原料：生长因子组合物3wt％、沙苑子提取物1wt％、茯苓2wt％、天麻提取物10wt％、山楂5wt％、黑米2wt％、黑桑葚1wt％、红枣5wt％、番薯10wt％、山药1wt％、菟丝子0.2wt％、山梨糖醇0.01wt％、余量为水。
所述生长因子组合物由酸性成纤维细胞生长因子和胰岛素样生长因子按质量1：1组成。
所述沙苑子提取物的制备过程为：
称取10g沙苑子于65℃干燥6小时后，粉碎过30目筛，得到沙苑子粉末；将沙苑子粉末加入1000mL质量分数95％的乙醇中，加入0.01mol/L、100mL柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液，加入0.1g酶，55℃下反应3h，然后100℃煮沸5min灭酶；在进行超声提取60min，于4℃、10000r/min离心15min，取上清液；将上清液于40-60℃、真空度-0.08～-0.07MPa的条件下干燥30小时，得到所述沙苑子提取物。
所述酶为果胶酶。
所述天麻提取物的制备过程为：
称取10g天麻65℃干燥6小时后，粉碎过30目筛，得到天麻粉末，加入0.01mol/L、1000mL柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液，加入0.2g酶，50℃下反应3h，然后100℃煮沸5min灭酶；待冷却至室温后，于4℃、10000r/min离心10min，将上清液过滤，合并滤液并浓缩，再向浓缩后的滤液中缓慢加入100mL质量分数95％的乙醇，置于4℃沉淀12h，离心得沉淀，经-50℃冷冻干燥后，得到所述天麻提取物。
所述酶由纤维素酶和碱性蛋白酶按质量比1：1组成。
所述食品制作方法包括以下步骤：
(1)山楂洗净去蒂祛核，分切成4mm方块备用；番薯洗净去皮，分切成4mm方块备用；将红枣洗净去核，分切成两半；山药去皮，分切成4mm方块备用；
(2)将茯苓、山楂、黑米、黑桑葚、红枣、番薯、山药、菟丝子加入水中，水煮加热30分钟，自然冷却至室温；
(3)加入生长因子组合物、沙苑子提取物、天麻提取物、山梨糖醇，搅拌均匀；
(4)杀菌包装，得所述食品。
实施例5
食品包括以下原料：生长因子组合物3wt％、沙苑子提取物1wt％、茯苓2wt％、天麻提取物10wt％、山楂5wt％、黑米2wt％、黑桑葚1wt％、红枣5wt％、番薯10wt％、山药1wt％、菟丝子0.2wt％、山梨糖醇0.01wt％、余量为水。
所述生长因子组合物由酸性成纤维细胞生长因子和胰岛素样生长因子按质量1：1组成。
所述沙苑子提取物的制备过程为：
称取10g沙苑子于65℃干燥6小时后，粉碎过30目筛，得到沙苑子粉末；将沙苑子粉末加入1000mL质量分数95％的乙醇中，加入0.01mol/L、100mL柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液，加入0.1g酶，55℃下反应3h，然后100℃煮沸5min灭酶；在进行超声提取60min，于4℃、10000r/min离心15min，取上清液；将上清液于40-60℃、真空度-0.08～-0.07MPa的条件下干燥30小时，得到所述沙苑子提取物。
所述酶为木瓜蛋白酶。
所述天麻提取物的制备过程为：
称取10g天麻65℃干燥6小时后，粉碎过30目筛，得到天麻粉末，加入0.01mol/L、1000mL柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液，加入0.2g酶，50℃下反应3h，然后100℃煮沸5min灭酶；待冷却至室温后，于4℃、10000r/min离心10min，将上清液过滤，合并滤液并浓缩，再向浓缩后的滤液中缓慢加入100mL质量分数95％的乙醇，置于4℃沉淀12h，离心得沉淀，经-50℃冷冻干燥后，得到所述天麻提取物。
所述酶由纤维素酶和碱性蛋白酶按质量比1：1组成。
所述食品制作方法包括以下步骤：
(1)山楂洗净去蒂祛核，分切成4mm方块备用；番薯洗净去皮，分切成4mm方块备用；将红枣洗净去核，分切成两半；山药去皮，分切成4mm方块备用；
(2)将茯苓、山楂、黑米、黑桑葚、红枣、番薯、山药、菟丝子加入水中，水煮加热30分钟，自然冷却至室温；
(3)加入生长因子组合物、沙苑子提取物、天麻提取物、山梨糖醇，搅拌均匀；
(4)杀菌包装，得所述食品。
实施例6
食品包括以下原料：生长因子组合物3wt％、沙苑子提取物1wt％、茯苓2wt％、天麻提取物10wt％、山楂5wt％、黑米2wt％、黑桑葚1wt％、红枣5wt％、番薯10wt％、山药1wt％、菟丝子0.2wt％、山梨糖醇0.01wt％、余量为水。
所述生长因子组合物由酸性成纤维细胞生长因子和胰岛素样生长因子按质量1：1组成。
所述沙苑子提取物的制备过程为：
称取10g沙苑子于65℃干燥6小时后，粉碎过30目筛，得到沙苑子粉末；将沙苑子粉末加入1000mL质量分数95％的乙醇中，加入0.01mol/L、100mL柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液，加入0.1g酶，55℃下反应3h，然后100℃煮沸5min灭酶；在进行超声提取60min，于4℃、10000r/min离心15min，取上清液；将上清液于40-60℃、真空度-0.08～-0.07MPa的条件下干燥30小时，得到所述沙苑子提取物。
所述酶由果胶酶和木瓜蛋白酶按质量比1：1组成。
所述天麻提取物的制备过程为：
称取10g天麻65℃干燥6小时后，粉碎过30目筛，得到天麻粉末，加入0.01mol/L、1000mL柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液，加入0.2g酶，50℃下反应3h，然后100℃煮沸5min灭酶；待冷却至室温后，于4℃、10000r/min离心10min，将上清液过滤，合并滤液并浓缩，再向浓缩后的滤液中缓慢加入100mL质量分数95％的乙醇，置于4℃沉淀12h，离心得沉淀，经-50℃冷冻干燥后，得到所述天麻提取物。
所述酶为纤维素酶。
所述食品制作方法包括以下步骤：
(1)山楂洗净去蒂祛核，分切成4mm方块备用；番薯洗净去皮，分切成4mm方块备用；将红枣洗净去核，分切成两半；山药去皮，分切成4mm方块备用；
(2)将茯苓、山楂、黑米、黑桑葚、红枣、番薯、山药、菟丝子加入水中，水煮加热30分钟，自然冷却至室温；
(3)加入生长因子组合物、沙苑子提取物、天麻提取物、山梨糖醇，搅拌均匀；
(4)杀菌包装，得所述食品。
实施例7
食品包括以下原料：生长因子组合物3wt％、沙苑子提取物1wt％、茯苓2wt％、天麻提取物10wt％、山楂5wt％、黑米2wt％、黑桑葚1wt％、红枣5wt％、番薯10wt％、山药1wt％、菟丝子0.2wt％、山梨糖醇0.01wt％、余量为水。
所述生长因子组合物由酸性成纤维细胞生长因子和胰岛素样生长因子按质量1：1组成。
所述沙苑子提取物的制备过程为：
称取10g沙苑子于65℃干燥6小时后，粉碎过30目筛，得到沙苑子粉末；将沙苑子粉末加入1000mL质量分数95％的乙醇中，加入0.01mol/L、100mL柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液，加入0.1g酶，55℃下反应3h，然后100℃煮沸5min灭酶；在进行超声提取60min，于4℃、10000r/min离心15min，取上清液；将上清液于40-60℃、真空度-0.08～-0.07MPa的条件下干燥30小时，得到所述沙苑子提取物。
所述酶由果胶酶和木瓜蛋白酶按质量比1：1组成。
所述天麻提取物的制备过程为：
称取10g天麻65℃干燥6小时后，粉碎过30目筛，得到天麻粉末，加入0.01mol/L、1000mL柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液，加入0.2g酶，50℃下反应3h，然后100℃煮沸5min灭酶；待冷却至室温后，于4℃、10000r/min离心10min，将上清液过滤，合并滤液并浓缩，再向浓缩后的滤液中缓慢加入100mL质量分数95％的乙醇，置于4℃沉淀12h，离心得沉淀，经-50℃冷冻干燥后，得到所述天麻提取物。
所述酶为碱性蛋白酶。
所述食品制作方法包括以下步骤：
(1)山楂洗净去蒂祛核，分切成4mm方块备用；番薯洗净去皮，分切成4mm方块备用；将红枣洗净去核，分切成两半；山药去皮，分切成4mm方块备用；
(2)将茯苓、山楂、黑米、黑桑葚、红枣、番薯、山药、菟丝子加入水中，水煮加热30分钟，自然冷却至室温；
(3)加入生长因子组合物、沙苑子提取物、天麻提取物、山梨糖醇，搅拌均匀；
(4)杀菌包装，得所述食品。
对比例1
食品包括以下原料：沙苑子提取物1wt％、茯苓2wt％、天麻提取物10wt％、山楂5wt％、黑米2wt％、黑桑葚1wt％、红枣5wt％、番薯10wt％、山药1wt％、菟丝子0.2wt％、山梨糖醇0.01wt％、余量为水。
所述沙苑子提取物的制备过程为：
称取10g沙苑子于65℃干燥6小时后，粉碎过30目筛，得到沙苑子粉末；将沙苑子粉末加入1000mL质量分数95％的乙醇中，加入0.01mol/L、100mL柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液，加入0.1g酶，55℃下反应3h，然后100℃煮沸5min灭酶；在进行超声提取60min，于4℃、10000r/min离心15min，取上清液；将上清液于40-60℃、真空度-0.08～-0.07MPa的条件下干燥30小时，得到所述沙苑子提取物。
所述酶由果胶酶和木瓜蛋白酶按质量比1：1组成。
所述天麻提取物的制备过程为：
称取10g天麻65℃干燥6小时后，粉碎过30目筛，得到天麻粉末，加入0.01mol/L、1000mL柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液，加入0.2g酶，50℃下反应3h，然后100℃煮沸5min灭酶；待冷却至室温后，于4℃、10000r/min离心10min，将上清液过滤，合并滤液并浓缩，再向浓缩后的滤液中缓慢加入100mL质量分数95％的乙醇，置于4℃沉淀12h，离心得沉淀，经-50℃冷冻干燥后，得到所述天麻提取物。
所述酶由纤维素酶和碱性蛋白酶按质量比1：1组成。
所述食品制作方法包括以下步骤：
(1)山楂洗净去蒂祛核，分切成4mm方块备用；番薯洗净去皮，分切成4mm方块备用；将红枣洗净去核，分切成两半；山药去皮，分切成4mm方块备用；
(2)将茯苓、山楂、黑米、黑桑葚、红枣、番薯、山药、菟丝子加入水中，水煮加热30分钟，自然冷却至室温；
(3)加入沙苑子提取物、天麻提取物、山梨糖醇，搅拌均匀；
(4)杀菌包装，得所述食品。
对比例2
食品包括以下原料：生长因子组合物3wt％、茯苓2wt％、天麻提取物10wt％、山楂5wt％、黑米2wt％、黑桑葚1wt％、红枣5wt％、番薯10wt％、山药1wt％、菟丝子0.2wt％、山梨糖醇0.01wt％、余量为水。
所述生长因子组合物由酸性成纤维细胞生长因子和胰岛素样生长因子按质量1：1组成。
所述酶由果胶酶和木瓜蛋白酶按质量比1：1组成。
所述天麻提取物的制备过程为：
称取10g天麻65℃干燥6小时后，粉碎过30目筛，得到天麻粉末，加入0.01mol/L、1000mL柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液，加入0.2g酶，50℃下反应3h，然后100℃煮沸5min灭酶；待冷却至室温后，于4℃、10000r/min离心10min，将上清液过滤，合并滤液并浓缩，再向浓缩后的滤液中缓慢加入100mL质量分数95％的乙醇，置于4℃沉淀12h，离心得沉淀，经-50℃冷冻干燥后，得到所述天麻提取物。
所述酶由纤维素酶和碱性蛋白酶按质量比1：1组成。
所述食品制作方法包括以下步骤：
(1)山楂洗净去蒂祛核，分切成4mm方块备用；番薯洗净去皮，分切成4mm方块备用；将红枣洗净去核，分切成两半；山药去皮，分切成4mm方块备用；
(2)将茯苓、山楂、黑米、黑桑葚、红枣、番薯、山药、菟丝子加入水中，水煮加热30分钟，自然冷却至室温；
(3)加入生长因子组合物、天麻提取物、山梨糖醇，搅拌均匀；
(4)杀菌包装，得所述食品。
对比例3
食品包括以下原料：生长因子组合物3wt％、沙苑子提取物1wt％、茯苓2wt％、山楂5wt％、黑米2wt％、黑桑葚1wt％、红枣5wt％、番薯10wt％、山药1wt％、菟丝子0.2wt％、山梨糖醇0.01wt％、余量为水。
所述生长因子组合物由酸性成纤维细胞生长因子和胰岛素样生长因子按质量1：1组成。
所述沙苑子提取物的制备过程为：
称取10g沙苑子于65℃干燥6小时后，粉碎过30目筛，得到沙苑子粉末；将沙苑子粉末加入1000mL质量分数95％的乙醇中，加入0.01mol/L、100mL柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液，加入0.1g酶，55℃下反应3h，然后100℃煮沸5min灭酶；在进行超声提取60min，于4℃、10000r/min离心15min，取上清液；将上清液于40-60℃、真空度-0.08～-0.07MPa的条件下干燥30小时，得到所述沙苑子提取物。
所述酶由果胶酶和木瓜蛋白酶按质量比1：1组成。
所述酶由纤维素酶和碱性蛋白酶按质量比1：1组成。
所述食品制作方法包括以下步骤：
(1)山楂洗净去蒂祛核，分切成4mm方块备用；番薯洗净去皮，分切成4mm方块备用；将红枣洗净去核，分切成两半；山药去皮，分切成4mm方块备用；
(2)将茯苓、山楂、黑米、黑桑葚、红枣、番薯、山药、菟丝子加入水中，水煮加热30分钟，自然冷却至室温；
(3)加入生长因子组合物、沙苑子提取物、山梨糖醇，搅拌均匀；
(4)杀菌包装，得所述食品。
测试例1
食品抗衰老研究
1.实验材料
试剂：D-半乳糖粉剂，购于上海国药集团化学试剂有限公司；VC粉剂，购于济南汇锦川化工有限公司；生理盐水，购于江苏苏中药业集团股份有限公司；甲醇分析纯，购于天津市大茂化学公司；SOD测试盒、CAT测试盒、GSH-Px测试盒、MDA测试盒、HYP测试盒，购于南京建成生物工程研究所；苏木素-伊红染料，购于沈阳万类生物有限公司；二甲苯，购于济南汇丰达化工有限公司。
小鼠，雌雄各半，6～7月龄，体重20～25g。由成都中医药大学实验动物研究中心提供。
2.实验方法
选择健康小鼠60只，适应性饲养7d，随机分为6组：空白组、D-半乳糖模型组、VC阳性组、食品组，每组10只。于每日下午2时，空白组颈背部注射生理盐水，其余各组注射D-半乳糖400mg/kg；空白组和模型组灌胃双蒸水，VC阳性组灌胃VC溶液100mg/kg，食品喂食含量为500mg/kg体重。每天进行注射及灌胃给药，持续8周。每周称量体重一次，调节注射及灌胃剂量。
3.检测样品的采集
末次给药，禁食24h，自由饮水，并用10％Na2S涂于各组小鼠背部两肩胛处皮肤褪毛。第二天摘眼球取血(斜面放置20min，于4℃、3000r/min，离心10min，取上清，即为血清)，断颈处死，剪下脱毛皮肤，铺平用打孔器取4块直径为1.4cm左右的皮肤(去除结缔组织和皮下脂肪)，并取心脏、肝脏、肾脏、胸腺和脾脏组织，剔去结缔组织。
4.器官指数的测定
将胸腺、脾脏、肝脏和肾脏组织于4℃生理盐水中洗去浮血，滤纸吸干水分，称重。
计算器官指数：器官指数(mg/g)＝器官质量(mg)/小鼠体重(g)
5.生化指标的测定
血清按照试剂盒测定SOD、CAT、GSH-PX水平及MDA含量。
6.数据处理
测定结果采用SPSS17.0进行统计分析，结果用x±SD表示。组间比较采用单因素方差分析(One-Way ANOVA)。
表1食品对衰老小鼠器官指数的影响
注：a表示与模型比较差异显著(p＜0.05)，b表示与阳性对照组差异显著(p＜0.05)，c表示与空白组比较差异显著(p＜0.05)。
通过表1可见，与空白对照组相比，模型组的胸腺指数、脾脏指数、肝脏指数和肾脏指数显著降低(p＜0.05)，模型组小鼠胸腺和脾脏萎缩，说明造模成功。脾脏和胸腺作为生命体重要的免疫器官，随着生命体的衰老，胸腺和脾脏、肝脏和肾脏都出现体积缩小、功能减退，生命质量下降。与模型组相比，实施例1-7和对比例1-3组胸腺和脾脏指数、肝脏指数和肾脏指数都有所提高。其中实施例3的组胸腺和脾脏指数、肝脏指数和肾脏指数提高幅度最大。其原因在于，食品中含有酸性成纤维细胞生长因子和胰岛素样生长因子组成的生长因子组合物，进一步抑制了器官衰老与细胞凋亡，起到了延缓衰老的效果，并且含有中含有沙苑子提取物和天麻提取物相互促进起到的抗衰老作用。
表2食品对衰老小鼠对衰老小鼠血清SOD、CAT、GSH-Px活力和MDA含量影响
注：a表示与模型比较差异显著(p＜0.05)，b表示与阳性对照组差异显著(p＜0.05)，c表示与空白组比较差异显著(p＜0.05)。
通过表2可见，与模型组相比，实施例1-7和对比例1-3组的小鼠血清SOD、CAT、GSH-Px活力显著提高，MDA含量显著降低。说明食用本发明食品，具有良好的延缓衰老的效果。
以上详细描述了本发明的较佳具体实施例。应当理解，本领域的普通技术人员无需创造性劳动就可以根据本发明的构思作出诸多修改和变化。因此，凡本技术领域中技术人员依本发明的构思在现有技术的基础上通过逻辑分析、推理或者有限的实验可以得到的技术方案，皆应在由权利要求书所确定的保护范围内。
Claims (9)
1.一种生长因子组合物，所述生长因子组合物包含酸性成纤维细胞生长因子、内皮细胞生长因子、胰岛素样生长因子、神经生长因子中的两种以上。
2.一种食品，其特征在于，包括权利要求1所述的生长因子组合物，所述生长因子组合物在食品中的含量为3-8wt％。
3.根据权利要求2所述的食品，其特征在于，所述食品包括以下原料：生长因子组合物3-8wt％、沙苑子提取物0.3-3wt％、茯苓1-5wt％、天麻提取物6-20wt％、山楂4-10wt％、黑米2-3wt％、黑桑葚0.1-2wt％、红枣3-7wt％、番薯8-15wt％、山药0.4-2wt％、菟丝子0.1-0.3wt％、山梨糖醇0.01-0.05wt％、余量为水。
4.根据权利要求3所述的食品，其特征在于，所述沙苑子提取物的制备过程为：
称取8-12g沙苑子于60-70℃干燥4-8小时后，粉碎过20-40目筛，得到沙苑子粉末；将沙苑子粉末加入500-1500mL提取剂中，加入0.01-0.02mol/L、50-150mL柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液，加入0.1-0.2g酶，50-60℃下反应2-4h，然后90-100℃煮沸5-10min灭酶；在进行超声提取60-80min，于2-5℃、10000-20000r/min离心10-20min，取上清液；将上清液于40-60℃、真空度-0.08～-0.07MPa的条件下干燥20-40小时，得到所述沙苑子提取物。
5.根据权利要求4所述的食品，其特征在于，所述提取剂为甲醇、乙醇、丙酮中一种。
6.根据权利要求4所述的食品，其特征在于，所述酶为果胶酶和/或木瓜蛋白酶。
7.根据权利要求3所述的食品，其特征在于，所述天麻提取物的制备过程为：
称取8-12g天麻60-70℃干燥4-8小时后，粉碎过20-40目筛，得到天麻粉末，加入0.01-0.02mol/L、500-1500mL柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液，加入0.1-0.2g酶，40-60℃下反应2-4h，然后90-100℃煮沸5-10min灭酶；待冷却至室温后，于2-5℃、10000-20000r/min离心10-20min，将上清液过滤，合并滤液并浓缩，再向浓缩后的滤液中缓慢加入50-150mL质量分数95％的乙醇，置于2-5℃沉淀10-15h，离心得沉淀，经-50～-40℃冷冻干燥后，得到所述天麻提取物。
8.根据权利要求7所述的食品，其特征在于，所述酶为纤维素酶和/或碱性蛋白酶。
9.权利要求3-8任一项所述的食品在抗衰老方面的用途。
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