CN111735900B - 五灵胶囊中有效成分的检测方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一种五灵胶囊中有效成分的检测方法。该检测方法包括：配制柴胡待测样品溶液、柴胡对照药材溶液、不含有柴胡的第一阴性对照溶液，以按特定重量比的三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇及水的混合液作为第一展开液，采用薄层色谱法分别测试上述三种溶液，并进行比对；同样地，以特定重量比的甲苯与乙酸乙酯的混合液作为第二展开液，采用薄层色谱法分别测试含五味子的各溶液，以特定重量比的甲苯与乙酸乙酯的混合液作为第三展开液，采用薄层色谱法分别测试含丹参的各溶液。选用特定组成的展开剂分别对五灵胶囊中的柴胡、五味子和丹参药材进行展开，能够大大提高目标组分的分离度，阴性对照样无干扰，因而能够大大提高检测结果的准确性。

Description

五灵胶囊中有效成分的检测方法
技术领域
本发明涉及中药成分检测领域，具体而言，涉及一种五灵胶囊中有效成分的检测方法。
背景技术
五灵胶囊是由柴胡、灵芝、丹参和五味子四味药材组成。用于疏肝健脾活血，慢性乙型肝炎肝郁脾虚挟瘀症，症见纳呆、腹胀暖气、胁肋胀痛、疲乏无力等。
国家食品药品监督管理局公开了五灵胶囊中柴胡的薄层色谱鉴别方法，该方法采用前处理制备得到供试品溶液，然后以三氯甲烷-正丁醇-甲醇-水(5:3:2:1)下层溶液为展开剂展开。该方法取得的实验结果阴性对照无干扰，但供试品色谱与柴胡对照药材色谱相应位置上斑点不甚清晰，且部分斑点分离不好，进而导致对药品检测结果不准确。
鉴于上述问题的存在，有必要提供一种适用于五灵胶囊的更加准确的检测方法。
发明内容
本发明的主要目的在于提供一种五灵胶囊中有效成分的检测方法，以解决现有的适用于五灵胶囊的检测方法不准确的问题。
为了实现上述目的，本发明提供了一种五灵胶囊中有效成分的检测方法，五灵胶囊包括柴胡、五味子和丹参，该检测方法包括：提取五灵胶囊中的有效成分，并制成柴胡待测样品溶液、五味子待测样品溶液及丹参待测样品溶液；分别配制柴胡对照药材溶液、五味子对照药材溶液和丹参对照药材溶液；分别配制不含有柴胡的五灵胶囊阴性的第一阴性对照溶液、不含有五味子的五灵胶囊的第二阴性对照溶液、不含有丹参的五灵胶囊的第三阴性对照溶液；以三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇及水按重量比(15～25)：(25～35)：(10～20)：(3～8)形成的混合液作为第一展开液，采用薄层色谱法分别对柴胡待测样品溶液、柴胡对照药材溶液及第一阴性对照溶液中柴胡进行测试，并进行比对；以甲苯与乙酸乙酯按重量比(5～15)：(0.5～2)形成的混合液作为第二展开液，采用薄层色谱法分别对五味子待测样品溶液、五味子对照药材溶液及第二阴性对照溶液中五味子进行测试，并进行比对；以甲苯与乙酸乙酯按重量比(15～25)：(0.5～2)形成的混合液作为第三展开液，采用薄层色谱法分别对丹参待测样品溶液、丹参对照药材溶液及第三阴性对照溶液中丹参进行测试，并进行比对。
进一步地，第一展开液中，三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇及水的重量比为(18～22)：(27～32)：(14～18)：(4～7)。
进一步地，第二展开液中，甲苯与乙酸乙酯的重量比为(8～12)：(0.8～1.5)。
进一步地，第三展开液中，甲苯与乙酸乙酯的重量比为(18～21)：(0.8～1.5)。
进一步地，柴胡待测样品溶液的制备过程包括：将五灵胶囊与水混合，过滤，得到第一滤液；将第一滤液依次用第一萃取剂和第二萃取剂进行萃取，得到萃取液；洗涤萃取液，然后蒸干，得到第一固渣；采用第一有机溶剂溶解第一固渣，得到柴胡待测样品溶液；其中，第一萃取剂为正丁醇的饱和水溶液；第二萃取剂选自加氨试液；第一有机溶剂为甲醇。
进一步地，采用薄层色谱法分别对柴胡待测样品溶液、柴胡对照药材溶液及第一阴性对照溶液中柴胡进行测试的步骤包括：分别吸取相同体积的柴胡待测样品溶液、柴胡对照药材溶液及第一阴性对照溶液，并分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以第一展开液为展开剂进行展开，晾干后，喷以2％对二甲氨基苯甲醛的40％硫酸溶液，热风吹至显色清晰，然后置于波长为365nm的紫外灯下进行检视。
进一步地，五味子待测样品溶液的制备过程包括：在超声条件下，将五灵胶囊与第二有机溶剂进行混合，过滤后，得到第二滤液；使第二滤液蒸干后，得到第二固渣；采用第三有机溶剂使第二固渣溶解，得到五味子待测样品溶液；优选地，第二有机溶剂和第三有机溶剂为环己烷。
进一步地，采用薄层色谱法分别对五味子待测样品溶液、五味子对照药材溶液及第二阴性对照溶液中五味子进行测试的步骤包括：分别吸取相同体积的五味子待测样品溶液、五味子对照药材溶液及第二阴性对照溶液，并分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以第二展开液为展开剂进行展开，晾干后，置于波长为254nm的紫外灯下进行检视。
进一步地，丹参待测样品溶液的步骤包括：在超声条件下，将五灵胶囊与第四有机溶剂混合，过滤，得到第三滤液；使第三滤液蒸干后，得到第三固渣；采用第五有机溶剂使第三固渣溶解，得到五味子待测样品溶液；其中，第四有机溶剂选自乙醚，第五有机溶剂选自乙酸乙酯。
进一步地，采用薄层色谱法分别对丹参待测样品溶液、丹参对照药材溶液及第三阴性对照溶液中丹参进行测试的步骤包括：分别吸取相同体积的丹参待测样品溶液、丹参对照药材溶液及第三阴性对照溶液，并分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以第三展开液为展开剂进行展开，晾干后，在日光灯下进行检视。
应用本发明的技术方案，在薄层色谱测试过程中，本申请选用特定组成的展开剂分别对五灵胶囊中的柴胡、五味子和丹参药材进行展开，能够大大提高目标组分的分离度，阴性对照样无干扰，因而能够大大提高检测结果的准确性。同时上述检测方法还具有灵敏度高和重复性好等优点。上述检测方法的提出有利于提高五灵胶囊的品质标准，保证其品质的稳定性和安全性，使五灵胶囊的生产工艺更加严谨规范。
附图说明
构成本申请的一部分的说明书附图用来提供对本发明的进一步理解，本发明的示意性实施例及其说明用于解释本发明，并不构成对本发明的不当限定。在附图中：
图1示出了本发明实施例1中采用薄层色谱法分别测试柴胡待测样品溶液、柴胡对照药材溶液及第一阴性对照溶液中柴胡的测试结果；
图2示出了本发明实施例2中采用薄层色谱法分别测试五味子待测样品溶液、五味子对照药材溶液及第二阴性对照溶液中五味子的测试结果；
图3示出了本发明实施例3中采用薄层色谱法分别测试柴胡待测样品溶液、柴胡对照药材溶液及第三阴性对照溶液中柴胡的测试结果；
图4示出了本发明对比例1中采用薄层色谱法分别测试柴胡待测样品溶液、柴胡对照药材溶液及阴性对照溶液中柴胡的测试结果。
具体实施方式
需要说明的是，在不冲突的情况下，本申请中的实施例及实施例中的特征可以相互组合。下面将结合实施例来详细说明本发明。
正如背景技术所描述的，采用现有方法对五灵胶囊的供试品色谱与柴胡对照药材色谱进行检测时，存在目标区域的斑点不甚清晰，且部分斑点分离不好，进而导致对药品检测结果不准确。为了解决上述技术问题，本申请提供了一种五灵胶囊中有效成分的检测方法，五灵胶囊包括柴胡、五味子和丹参，该检测方法包括：提取五灵胶囊中的有效成分，并制成柴胡待测样品溶液、五味子待测样品溶液及丹参待测样品溶液；分别配制柴胡对照药材溶液、五味子对照药材溶液和丹参对照药材溶液；分别配制不含有柴胡的五灵胶囊阴性的第一阴性对照溶液、不含有五味子的五灵胶囊的第二阴性对照溶液、不含有丹参的五灵胶囊的第三阴性对照溶液；以三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇及水按重量比(15～25)：(25～35)：(10～20)：(3～8)形成的混合液作为第一展开液，采用薄层色谱法分别对柴胡待测样品溶液、所述柴胡对照药材溶液及所述第一阴性对照溶液中柴胡进行测试，并进行比对；以甲苯与乙酸乙酯按重量比(5～15)：(0.5～2)形成的混合液作为第二展开液，采用薄层色谱法分别对五味子待测样品溶液、五味子对照药材溶液及第二阴性对照溶液中五味子进行测试，并进行比对；以甲苯与乙酸乙酯按重量比(15～25)：(0.5～2)形成的混合液作为第三展开液，采用薄层色谱法分别对丹参待测样品溶液、丹参对照药材溶液及第三阴性对照溶液中丹参进行测试，并进行比对，并进行比对。
在薄层色谱测试过程中，本申请选用特定组成的展开剂分别对五灵胶囊中的柴胡、五味子和丹参药材进行展开，能够大大提高目标组分的分离度，阴性对照样无干扰，因而能够大大提高检测结果的准确性。同时上述检测方法还具有灵敏度高和重复性好等优点。上述检测方法的提出有利于提高五灵胶囊的品质标准，保证其品质的稳定性和安全性，使五灵胶囊的生产工艺更加严谨规范。
在一种优选的实施例中，第一展开液中，三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇及水的重量比为(18～22)：(27～32)：(14～18)：(4～7)。将第一展开液的组成限定在上述范围内，能够使第一展开液的极性与柴胡中有效成分的极性更加接近，从而有利于进一步提高其分离度，使其形成的显色斑点更加清晰，进一步提高检测结果的准确性。
在一种优选的实施例中，第二展开液中，甲苯与乙酸乙酯的重量比为(8～12)：(0.8～1.5)。甲苯与乙酸乙酯的重量比包括但不限于上述范围，而将其限定在上述范围内能够使第二展开液的极性更加接近五味子中有效成分的极性，从而有利于进一步提高其分离度，使其形成的显色斑点更加清晰，进一步提高检测结果的准确性。
在一种优选的实施例中，第三展开液中，甲苯与乙酸乙酯的重量比为(8～12)：(0.8～1.5)。甲苯与乙酸乙酯的重量比包括但不限于上述范围，而将其限定在上述范围内能够使第三展开液的极性更加接近丹参中有效成分的极性，从而有利于进一步提高其分离度，使其形成的显色斑点更加清晰，进一步提高检测结果的准确性。
柴胡待测样品溶液的制备过程可以采用本领域常用的方法。在一种优选的实施例中，柴胡待测样品溶液的制备过程包括：将五灵胶囊与水混合，过滤，得到第一滤液；将第一滤液依次用第一萃取剂和第二萃取剂进行萃取，得到萃取液；洗涤萃取液，然后蒸干，得到第一固渣；采用第一有机溶剂溶解第一固渣，得到柴胡待测样品溶液；第一萃取剂包括但不限于正丁醇的饱和水溶液；第二萃取剂包括但不限于加氨试液；第一有机溶剂包括但不限于甲醇。由于五灵胶囊中各组分均具有较好的水溶性，因而现将其转移至水溶液中，然后再根据上述几种成分在有机萃取剂中溶解度的差异，选用对柴胡中的有效成分萃取率较高的第一萃取剂和第二萃取剂，这大大降低了其它组分的干扰，从而有利于进一步提高了检测结果的准确性。
更优选地，上述柴胡待测样品溶液的制备过程包括：将1.5～3g五灵胶囊内容物与25～35ml水混合并溶解，振摇25～45min后，过滤，得到滤液。滤液用水饱和正丁醇液提取2～4次，每次15～25ml，合并正丁醇，得到第一提取液。采用氨试液(浓氨水与水按体积比400:600制得的混合液)对第一提取液提取2～4次，每次15～25ml，去除氨试液，得到第二提取液。然后再用正丁醇饱和水溶液对上述第二提取液洗涤2～4次，每次15～25ml，弃去洗液，蒸干正丁醇液，在残渣中加入甲醇1～3ml溶解，作为供试品溶液。采用上述方法配制柴胡待测样品溶液有利于进一步提高柴胡中有效成分的提取率，并降低其它组分进行测试，降低其它组分对测试结果的干扰，从而使柴胡的测试结果更加准确。
采用薄层色谱法分别对柴胡待测样品溶液、柴胡对照药材溶液及第一阴性对照溶液中柴胡进行测试的步骤可以采用本领域常用的方法。可选地，上述测试方法包括：分别吸取相同体积的柴胡待测样品溶液、柴胡对照药材溶液及第一阴性对照溶液，并分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以第一展开液为展开剂进行展开，晾干后，喷以2％对二甲氨基苯甲醛的40％硫酸溶液，热风吹至显色清晰，然后置于波长为365nm的紫外灯下进行检视。
五味子待测样品溶液的制备过程可以采用本领域常用的方法。在一种优选的实施例中，五味子待测样品溶液的制备过程包括：在超声条件下，将五灵胶囊与第二有机溶剂进行混合，过滤后，得到第二滤液；使第二滤液蒸干后，得到第二固渣；采用第三有机溶剂使第二固渣溶解，得到五味子待测样品溶液；第二有机溶剂和第三有机溶剂包括但不限于环己烷。上述第二有机溶剂和第三有机溶剂对五味子中有效成分具有较好的溶解度，而对其他组分的溶解度较小，因而采用上述制备方法能够使目标组分转移至液态溶液中，而其它组分仍以固态存在，从而能够大大减低杂质对目标组分的干扰，进一步提高检测结果的准确性。
更优选地，上述五味子待测样品溶液的制备过程包括：取五灵胶囊内容物1g研细，然后将其与环己烷25～35mL混合，超声处理25～45min，过滤，得到滤液；将上述滤液蒸干后，得到第二固渣；采用1～4mL环己烷使上述第二固渣溶解，作为五味子待测样品溶液。将制备过程中使用的各试剂的用量和种类限定在上述范围内有利于进一步降低杂质组分对目标组分的干扰，从而有利于进一步提高五味子的检测结果的准确性。
采用薄层色谱法分别对五味子待测样品溶液、五味子对照药材溶液及第二阴性对照溶液中五味子进行测试的步骤可以采用本领域常用的方法。可选地，上述测试的步骤包括：分别吸取相同体积的五味子待测样品溶液、五味子对照药材溶液及第二阴性对照溶液，并分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以第二展开液为展开剂进行展开，晾干后，置于波长为254nm的紫外灯下进行检视。
丹参待测样品溶液的制备过程可以采用本领域常用的方法。在一种优选的实施例中，丹参待测样品溶液的步骤包括：在超声条件下，将五灵胶囊与第四有机溶剂混合，过滤，得到第三滤液；使第三滤液蒸干后，得到第三固渣；采用第五有机溶剂使第三固渣溶解，得到五味子待测样品溶液；第四有机溶剂包括但不限于乙醚，第五有机溶剂包括但不限于乙酸乙酯。第四有机溶剂和第五有机溶剂与丹参的有效成分具有较好的相溶性，而其它组分的溶解度较小，因而采用上述制备方法有利于提高杂质元素的去除率，减低杂质对目标组分的干扰，从而有利于进一步提高检测结果的准确性。
更优选地，上述丹参待测样品溶液的步骤包括：将五灵胶囊内容物研细，称取2g，然后将其与乙醚15～25mL混合，超声处理8～15min，过滤，得到滤液；将上述滤液蒸干后，得到第三固渣；采用0.5～1.5mL乙酸乙酯使第三固渣溶解，作为丹参待测样品溶液。将制备过程中使用的各试剂的用量和种类限定在上述范围内有利于进一步降低杂质组分对目标组分的干扰，从而有利于进一步提高丹参中有效成分的检测结果的准确性。
采用薄层色谱法分别对丹参待测样品溶液、丹参对照药材溶液及第三阴性对照溶液中丹参进行测试的步骤可以采用本领域常用的方法。可选地，采用薄层色谱法测试丹参对照药材溶液中丹参进行测试的步骤包括：分别吸取相同体积的丹参待测样品溶液、丹参对照药材溶液及第三阴性对照溶液，并分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以第三展开液为展开剂进行展开，晾干后，在日光灯下进行检视。
以下结合具体实施例对本申请作进一步详细描述，这些实施例不能理解为限制本申请所要求保护的范围。
五灵胶囊的制备：
取柴胡粉碎，过筛，留171g细粉，粗粉和灵芝加75％乙醇回流提取2次，每次1小时，滤过，合并滤液，回收乙醇并减压浓缩至稠膏相对密度1.36～1.38(60～70℃)。另取五味子和丹参加乙醇回流提取3次，每次1小时，滤过，合并滤液，回收乙醇并减压浓缩至稠膏相对密度1.36～1.38(60～70℃)，两膏合并同时掺入细粉，混匀，烘干，粉碎，分装，制成胶囊1000粒，即得。
阴性对照品1：与五灵胶囊的制备方法的区别在于不加入柴胡粉。
阴性对照品2：与五灵胶囊的制备方法的区别在于不加入五味子。
阴性对照品3：与五灵胶囊的制备方法的区别在于不加入丹参。
实施例1
待测样品溶液的制备：
取五灵胶囊内容物2g，加水30mL溶解，振摇30min,滤过，滤液用水饱和正丁醇液提取2次，每次20mL，合并正丁醇，加氨试液提取2次，每次20mL，弃去氨试液，再用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次20mL，弃去洗液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1mL使溶解，作为供试品溶液。
对照药材溶液的制备：取柴胡对照药材1g，以待测样品溶液相同的制备方法配制对照药材溶液。
阴性对照溶液的制备：
取阴性对照品2g，同供试品溶液的制法制成阴性对照溶液。
照薄层色谱法(通则0502)试验：
(1)吸取上述供试品溶液30ul，制成待测样品溶液1至3(每个样品10ul)，并吸取阴性对照溶液10ul和对照药材溶液5ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水(20：30：16：6)下层溶液为展开剂展开，晾干，喷以2％对二甲氨基苯甲醛的40％硫酸溶液，热风吹至显色清晰。并将上述样品板置紫外灯(365nm)下检视。测试环境的温度为19℃，湿度为38％。
测试结果见图1，其中1号图谱为待测样品溶液1的测试结果，2号图谱为待测样品溶液2的测试结果，3号图谱为待测样品溶液3的测试结果，4号图谱为阴性对照品的测试结果，5号图谱为对照药材溶液。由图1可看出，该展开系统下样品斑点明显，分离度较好，且阴性无干扰。
(2)五味子薄层色谱鉴别(新增)
待测样品溶液的制备：取五灵胶囊内容物1g，研细，加环己烷30mL，超声处理30min，滤过，滤液蒸干，残渣加环己烷1mL使溶解，作为供试品溶液。
对照药材溶液的制备：取五味子对照药材1g同法制成对照药材溶液。
阴性对照溶液的制备：取阴性对照1g，同供试品溶液的制法制成阴性对照溶液。
取照薄层色谱法(通则0502)试验，吸取上述三种溶液各5ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶GF254薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯(9：1)第一次展至约17cm，取出晾干，再以甲苯-乙酸乙酯(9：1)展至约18cm取出晾干，置紫外灯(254nm)下检视。供试品色谱与对照品色谱相应位置显相同颜色斑点，与对照药材相应位置显相同颜色的主斑点。测试环境的温度为22℃，湿度为44％。
测试结果见图2，其中1号图谱为待测样品溶液1的测试结果，2号图谱为待测样品溶液2的测试结果，3号图谱为待测样品溶液3的测试结果，4号图谱为对照药材溶液，5号图谱为阴性对照品的测试结果。由图2可看出，该展开系统下样品斑点明显，分离度较好，且阴性无干扰。
(3)丹参薄层色谱鉴别(新增)
待测样品溶液的制备：取五灵胶囊内容物研细，称取2g，加乙醚20mL，超声处理10min，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯0.5mL使溶解，作为供试品溶液。
对照药材溶液的制备：取丹参对照药材0.5g,同法制成对照药材溶液。
阴性对照溶液的制备：取阴性对照0.5g，同供试品溶液的制法制成阴性对照溶液。
照薄层色谱法(通则0502)试验，吸取上述三种溶液各5ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯(19：1)为展开剂以甲苯-乙酸乙酯(19：1)，展开，取出，晾干，在日光下检视。供试品色谱与对照品色谱相应位置显相同颜色斑点，与对照药材相应位置显相同颜色的主斑点。测试环境的温度为25℃，湿度为54％。
测试结果见图3，其中1号图谱为待测样品溶液1的测试结果，2号图谱为待测样品溶液2的测试结果，3号图谱为待测样品溶液3的测试结果，4号图谱为对照药材溶液，5号图谱为阴性对照品的测试结果。由图3可看出，该展开系统下样品斑点明显，分离度较好，且阴性无干扰。
对比例1
待测样品溶液的制备：取五灵胶囊内容物1.5g，加甲醇25ml，回流提取30分钟，滤过，滤液挥干，残渣加水10ml使溶散，先用乙醚20ml振摇提取，弃去乙醚液，水液加水饱和正丁醇振摇提取2次，每次15ml，合并正丁醇，加水15ml洗涤，弃去水液，正丁醇置水浴上蒸干，残渣加水10ml使溶散，加乙酸乙酯振摇提取2次，每次10ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品液。
对照药材溶液的制备：另取柴胡对照药材1.5g，同法制成对照药材溶液。
阴性对照溶液的制备：取阴性对照药材1.5g，同供试品溶液的制法制成阴性对照溶液。
照薄层色谱法(《中国药典》2015年版四部通则0502)试验，吸取上述待测样品溶液制成待测样品1至3(各5μl)，并吸取对照药材溶液2μl及阴性对照溶液2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-正丁醇-甲醇-水(5:3:2:1)下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干。喷以2％对二甲氨基苯甲醛的40％硫酸溶液，热风吹至斑点显色清晰，置紫外光灯(365nm)下检视。
测试结果见图4，其中1号图谱为待测样品溶液1的测试结果，2号图谱为待测样品溶液2的测试结果，3号图谱为待测样品溶液3的测试结果，4号图谱为阴性对照品的测试结果，5号图谱为对照药材溶液,。由图4可看出，阴性对照无干扰，但供试品色谱在与柴胡对照药材色谱相应位置上斑点不甚清晰，且部分斑点分离不好。
从以上的描述中，可以看出，本发明上述的实施例实现了如下技术效果：
在薄层色谱测试过程中，本申请选用特定组成的展开剂分别对五灵胶囊中的柴胡、五味子和丹参药材进行展开，能够大大提高目标组分的分离度，阴性对照样无干扰，因而能够大大提高检测结果的准确性。同时上述检测方法还具有灵敏度高和重复性好等优点。上述检测方法的提出有利于提高五灵胶囊的品质标准，保证其品质的稳定性和安全性，使五灵胶囊的生产工艺更加严谨规范。
需要说明的是，本申请的说明书和权利要求书中的术语“第一”、“第二”等是用于区别类似的对象，而不必用于描述特定的顺序或先后次序。应该理解这样使用的术语在适当情况下可以互换，以便这里描述的本申请的实施方式例如能够以除了在这里描述的那些以外的顺序实施。
以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (1)

1.一种五灵胶囊中有效成分的检测方法，其特征在于，所述五灵胶囊包括柴胡、五味子和丹参，所述检测方法包括：
提取所述五灵胶囊中的有效成分，并制成柴胡待测样品溶液、五味子待测样品溶液及丹参待测样品溶液；
分别配制柴胡对照药材溶液、五味子对照药材溶液和丹参对照药材溶液；
分别配制不含有柴胡的五灵胶囊的第一阴性对照溶液、不含有五味子的五灵胶囊的第二阴性对照溶液、不含有丹参的五灵胶囊的第三阴性对照溶液；
以三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇及水按重量比20：30：16：6形成的混合液的下层溶液作为第一展开液，采用薄膜色谱法分别对所述柴胡待测样品溶液、所述柴胡对照药材溶液及所述第一阴性对照溶液中柴胡进行测试，并进行比对；测试环境的温度为19℃，湿度为38%；
以甲苯与乙酸乙酯按重量比9：1形成的混合液作为第二展开液，采用薄膜色谱法分别对所述五味子待测样品溶液、所述五味子对照药材溶液及所述第二阴性对照溶液中五味子进行测试，并进行比对；测试环境的温度为22℃，湿度为44%；
以甲苯与乙酸乙酯按重量比19：1形成的混合液作为第三展开液，采用薄膜色谱法分别对所述丹参待测样品溶液、所述丹参对照药材溶液及所述第三阴性对照溶液中丹参进行测试，并进行比对；测试环境的温度为25℃，湿度为54%；
所述柴胡待测样品溶液的制备过程包括：
将五灵胶囊内容物与水混合并溶解，振摇后，过滤，得到滤液；滤液用水饱和正丁醇液提取，得到第一提取液；采用氨试液对第一提取液提取，去除氨试液，得到第二提取液；然后再用正丁醇饱和水溶液对第二提取液洗涤，弃去洗液，蒸干正丁醇液，在残渣中加入甲醇溶解，作为供试品溶液；
所述采用薄膜色谱法分别对所述柴胡待测样品溶液、所述柴胡对照药材溶液及所述第一阴性对照溶液中柴胡进行测试的步骤包括：
分别吸取相同体积的所述柴胡待测样品溶液、所述柴胡对照药材溶液及所述第一阴性对照溶液，并分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以所述第一展开液为展开剂进行展开，晾干后，喷以2%对二甲氨基苯甲醛的40%硫酸溶液，热风吹至显色清晰，然后置于波长为365nm的紫外灯下进行检视；
所述五味子待测样品溶液的制备过程包括：
在超声条件下，将所述五灵胶囊与第二有机溶剂进行混合，过滤后，得到第二滤液；
使所述第二滤液蒸干后，得到第二固渣；
采用第三有机溶剂使所述第二固渣溶解，得到所述五味子待测样品溶液；
所述第二有机溶剂和所述第三有机溶剂为环己烷；
所述采用薄膜色谱法分别对所述五味子待测样品溶液、所述五味子对照药材溶液及所述第二阴性对照溶液中五味子进行测试的步骤包括：
分别吸取相同体积的所述五味子待测样品溶液、所述五味子对照药材溶液及所述第二阴性对照溶液，并分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以所述第二展开液为展开剂进行展开，晾干后，置于波长为254nm的紫外灯下进行检视；
所述丹参待测样品溶液的步骤包括：
在超声条件下，将所述五灵胶囊与第四有机溶剂混合，过滤，得到第三滤液；使所述第三滤液蒸干后，得到第三固渣；
采用第五有机溶剂使所述第三固渣溶解，得到所述丹参待测样品溶液；
其中，所述第四有机溶剂选自乙醚，所述第五有机溶剂选自乙酸乙酯；
所述采用薄膜色谱法分别对所述丹参待测样品溶液、所述丹参对照药材溶液及所述第三阴性对照溶液中丹参进行测试的步骤包括：
分别吸取相同体积的所述丹参待测样品溶液、所述丹参对照药材溶液及所述第三阴性对照溶液，并分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以所述第三展开液为展开剂进行展开，晾干后，在日光灯下进行检视。
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