CN111728200A - 一种虫草酵素及其制备方法与应用 - Google Patents

一种虫草酵素及其制备方法与应用 Download PDF

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Abstract

本发明提供了一种虫草酵素及其制备方法与应用，属于生物技术领域。第一方面，本发明提供一种虫草酵素，虫草酵素由虫草、葡萄糖、人参药渣、益生菌、硫酸镁等组分制得；第二方面，本发明提供上述虫草酵素的制备方法；第三方面，本发明还提供虫草酵素的应用。利用本发明进行发酵得到的虫草酵素水平与现有技术相比，均有显著提高。

Description

一种虫草酵素及其制备方法与应用
技术领域
本发明涉及生物技术领域，具体而言，涉及一种虫草酵素及其制备方法与应用。
背景技术
冬虫夏草是麦角菌科(Clavicipitaceae)真菌冬虫夏草菌Cordycepssinensis(BerK.)Sacc.寄生在蝙蝠蛾科昆虫幼虫上的子座及幼虫尸体的干燥复合体。冬虫夏草由虫体与从虫头部长出的真菌子座相连而成。虫体似蚕，长3-5cm，直径0.3-0.8cm；表面深黄色至黄棕色，有环纹20-30个，近头部的环纹较细；头部红棕色；足8对，中部4对较明显；质脆，易折断，断面略平坦，淡黄白色。子座细长圆柱形，长4-7cm，直径约0.3cm；表面深棕色至棕褐色，有细纵皱纹，上部稍膨大；质柔韧，断面类白色。气微腥，味微苦。
冬虫夏草味甘性平，归肺、肾经，补肾益肺，止血化痰。冬虫夏草含粗蛋白25％-30％，D-甘露醇(即虫草酸)7％-29％，脂肪8.4％，尚含腺苷、麦角甾醇、维生素B12、虫草多糖、多种氨基酸等。《中国药典》(2015年版)，本品含腺苷不得少于0.010％。置阴凉干燥处，防蛀。
冬虫夏草除含有常见的甘露醇、腺苷、氨基酸、脂肪酸、维生素、微量元素等外，虫草中还富含一些特有的活性成分，如虫草腺苷、虫草酸、虫草素以及虫草多糖。现代大量的药理研究表明虫草菌丝体、生药、醇和水或乙酸乙酯等提取物具有广泛药理活性，其活性涉及到对免疫系统、心血管系统、神经系统、呼吸系统、内分泌系统、肝脏和肾脏功能、机体代谢等各个方面,具有调节免疫、降血脂、保护肝脏肾脏和心脑组织、抗衰老、抗疲劳、抗肿瘤、降血糖、抗菌、抗氧化、抗炎、镇静和抗辐射等多方面作用。
酵素是日文的叫法，是具有生物本身自然生成的具有催化功能的生物大分子—生物催化剂。据史书记载，我国3000多年前的就已经开始应用酶了，如酒曲。酵素存在于所有活的动植物体内，是维持机体正常功能，消化食物，修复组织等生命活动的一种必需物质。生物体内含有千百种酵素，它们支配着生物的新陈代谢、营养和能量转换等许多催化过程，与生命过程关系密切的反应大多是酵素催化反应。酵素能促进新陈代谢，使人精力充沛，心情愉悦；促进血液循环，同时净化血液，排除毒素；增强胃肠道的消化吸收功能，增强体质；调节人体酸碱平衡。
鉴于此，本发明提供一种利用虫草菌丝体发酵制备虫草酵素的方法。
发明内容
本发明的目的在于提供一种虫草酵素及其制备方法与应用。
为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：
第一方面，本发明提供一种虫草酵素产品，由虫草、葡萄糖、人参药渣、益生菌、硫酸镁经发酵制得。
在本发明较佳的实施例中，按重量份数计，虫草为0.2～1份、葡萄糖10～18份、人参药渣为5～12份、益生菌0.2～0.4份、硫酸镁为0.01～0.03份。
进一步地，在本发明较佳的实施例中，按重量份数计，虫草为0.4～0.8份、葡萄糖12～16份、人参药渣为6～10份、益生菌0.2～0.4份、硫酸镁为0.01～0.03份和马铃薯冻干超微粉为5～8份。
进一步地，在本发明较佳的实施例中，按重量份数计，虫草为0.6份、葡萄糖15份、人参药渣为8份、益生菌0.3份、硫酸镁为0.02份、马铃薯冻干超微粉为7份。
本发明中发酵所用虫草为菌丝体冻干后经超微粉碎获得的粉体，马铃薯冻干超微粉为马铃薯粉碎后冻干后再经超微粉碎获得的粉体，人参药渣为人参经65％的酒精常规回流提取得到，其他组分在市场上购得。
第二方面，本发明提供上述虫草酵素的制备方法，其包括：
虫草0.2～1份、葡萄糖10～18份、人参药渣为5～12份、益生菌0.2～0.4份、硫酸镁为0.01～0.03份，加水量为上述物质重量份数总和的7～12倍，混匀后121℃灭菌15～30min后冷却。
进一步地，所述虫草为0.4～0.8份、葡萄糖12～16份、人参药渣为6～10份、益生菌0.2～0.4份、硫酸镁为0.01～0.03份和马铃薯冻干超微粉为5～8份，加水量为上述物质重量份数总和的7～12倍，混匀后121℃灭菌15～30min后冷却。
进一步地，在本发明较佳的实施例中，所述虫草为0.6份、葡萄糖15份、人参药渣为20份、益生菌0.3份、硫酸镁为0.02份和马铃薯冻干超微粉为7份，加水量为上述物质重量份数总和的7～12倍，混匀后121℃灭菌15～30min后冷却。
第三方面，本发明还提供虫草酵素及其制备方法与应用，其包括：将益生菌接种至上述的发酵基质中，温度25～33℃，通气搅拌，发酵时间5～9d，将培养好的发酵液过滤或离心2000～10000rpm处理，上清液经40～50℃真空浓缩，即得虫草酵素。
进一步地，在本发明较佳的实施例中，将益生菌接种至上述的发酵基质中，温度29℃，通气搅拌，发酵时间7d，将培养好的发酵液离心4000rpm处理，上清液经40～50℃真空浓缩，即得虫草酵素。
该虫草酵素与食品、特殊食品或药学上可接受的载体或辅料可以制成口服制剂。
该制剂可以是散剂、片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液。
该虫草酵素在制备对胃黏膜损伤有保护作用的食品、特殊食品或药物中的应用。
与现有技术相比，本发明的有益效果包括：
虫草的菌丝体干重和量与现有技术相比，均有显著提高。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限制本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述：
实施例1
虫草2g、葡萄糖100g、人参药渣120g、硫酸镁0.3g，加水量为上述物质重量份数总和的7～12倍，混匀后121℃灭菌30min后冷却。
将乳杆菌2g接种至上述的发酵基质中，温度33℃，通气搅拌，发酵时间5d，将培养好的发酵液离心10000rpm处理，上清液经40～50℃真空浓缩，即得虫草酵素。
实施例2
虫草10g、葡萄糖180g、人参药渣为50g、硫酸镁为0.1g，加水量为上述物质重量份数总和的7～12倍，混匀后121℃灭菌15min后冷却。
将酿酒酵母4g接种至上述的发酵基质中，温度25℃，通气搅拌，发酵时间5d，将培养好的发酵液过滤，上清液经40～50℃真空浓缩，即得虫草酵素。
实施例3
虫草为4g、葡萄糖160g、人参药渣为60g、硫酸镁为0.3g和马铃薯冻干超微粉为50g，加水量为上述物质重量份数总和的7～12倍，混匀后121℃灭菌20min后冷却。
将乳杆菌2g接种至上述的发酵基质中，温度25℃，通气搅拌，发酵时间9d，将培养好的发酵液离心2000rpm处理，上清液经40～50℃真空浓缩，即得虫草酵素。
实施例4
虫草为8g、葡萄糖120g、人参药渣为100g、硫酸镁为0.1g和马铃薯冻干超微粉为80g，加水量为上述物质重量份数总和的7～12倍，混匀后121℃灭菌20min后冷却。
将酿酒酵母4g接种至上述的发酵基质中，温度29℃，通气搅拌，发酵时间7d，将培养好的发酵液离心3000rpm处理，上清液经40～50℃真空浓缩，即得虫草酵素。
实施例5
虫草为6g、葡萄糖150g、人参药渣为80g、硫酸镁为0.2g和马铃薯冻干超微粉为70g，加水量为上述物质重量份数总和的7～12倍，混匀后121℃灭菌25min后冷却。
将酿酒酵母3g接种至上述的发酵基质中，温度29℃，通气搅拌，发酵时间7d，将培养好的发酵液离心4000rpm处理，上清液经40～50℃真空浓缩，即得虫草酵素。
实施例6
本实施例提供一种胶囊剂，该片剂的制备方法包括：
上述实施例5虫草酵素加入适量淀粉、糊精，混合均匀，制成颗粒，压片，包薄膜衣，即得片剂。
实施例7
本实施例提供一种胶囊剂，该胶囊剂的制备方法包括：
上述实施例5虫草酵素加入适量淀粉、糊精，混匀，制成颗粒，装入硬胶囊，即得胶囊。
实施例8
本实施例提供一种颗粒剂，该颗粒剂的制备方法包括：
上述实施例5虫草酵素加入适量淀粉、糊精，混匀，湿法制粒，干燥后整粒，包装，即得颗粒剂。
对比例1
虫草为6g、葡萄糖为300g和硫酸镁为0.2g，加水量为上述物质重量份数总和的7～12倍，混匀后121℃灭菌25min后冷却。
将酿酒酵母3g接种至上述的发酵基质中，温度29℃，通气搅拌，发酵时间7d，将培养好的发酵液离心4000rpm处理，上清液经40～50℃真空浓缩，即得虫草酵素。
对比例2
虫草为6g、人参药渣为300g和硫酸镁为0.2g，加水量为上述物质重量份数总和的7～12倍，混匀后121℃灭菌25min后冷却。
将酿酒酵母3g接种至上述的发酵基质中，温度29℃，通气搅拌，发酵时间7d，将培养好的发酵液离心4000rpm处理，上清液经40～50℃真空浓缩，即得虫草酵素。
对比例3
虫草为6g、马铃薯冻干超微粉为300g、硫酸镁为0.2g，加水量为上述物质重量份数总和的7～12倍，混匀后121℃灭菌25min后冷却。
将酿酒酵母3g接种至上述的发酵基质中，温度29℃，通气搅拌，发酵时间7d，将培养好的发酵液离心4000rpm处理，上清液经40～50℃真空浓缩，即得虫草酵素。
对比例4
未经冻干的虫草菌丝体超微粉为6g、葡萄糖150g、人参药渣为80g、酿酒酵母3g、硫酸镁为0.2g和马铃薯冻干超微粉为70g，加水量为上述物质重量份数总和的7～12倍，混匀后121℃灭菌25min后冷却。
将益生菌接种至上述的发酵基质中，温度29℃，通气搅拌，发酵时间7d，将培养好的发酵液离心4000rpm处理，上清液经40～50℃真空浓缩，即得虫草酵素。
本发明的有益效果：
实验例1
表1活性成分检测结果
Figure BDA0002567994540000081
由表1可知，实施例1～8组与对比例1～4组相比，实施例1～8组特别是实施例5～8组活性成分检测结果具有明显优势。
实验例2
对乙醇致大鼠胃黏膜损伤的保护作用选取健康SD大鼠，雌雄各半，体质量180～220g，随机份为对照组、实施例1～8组、对比例1～5组，共13组，每组10只动物。每日灌胃给药1次，剂量均为2g/kg，连续7d，对照组给予等量淀粉。实验前，大鼠先禁食48h，自由饮水，于末次给药后1h每只大鼠灌胃无水乙醇1mL/只，再过1h脱颈椎处死动物，用夹子夹闭贲门，自幽门注入1％甲醛5mL，再夹闭幽门，放入1％甲醛溶液固定10min，沿胃大弯剪开胃壁，测量损伤长度，以损伤长度(宽度大于1mm加倍)总和作为胃黏膜损伤指数，并计算抑制率。
抑制率(％)＝(对照组溃疡指数－给药组溃疡指数)/对照组溃疡指数×100％
表2对乙醇所致大鼠急性胃黏膜损伤的影响实验结果(
Figure BDA0002567994540000091
n＝10)
序号 组别 溃疡指数(mm)
1 对照组 102.1±29.5
2 实施例1组 55.2±25.6
3 实施例2组 50.5±21.8
4 实施例3组 48.0±20.1
5 实施例4组 37.5±21.0
6 实施例5组 30.2±16.3
7 实施例6组 29.3±15.1
8 实施例7组 32.0±17.7
9 实施例8组 31.3±17.5
10 对比例1组 69.6±20.8
11 对比例2组 66.1±19.0
12 对比例3组 65.5±21.6
13 对比例4组 59.3±20.5
由表2可知，实施例1～8组与对照组及对比例1～4组相比，实施例1～8组特别是实施例5～8组对乙醇所致大鼠急性胃黏膜损伤的恢复程度具有明显优势。
本发明中未详细说明的环节均为本领域普通技术人员可自行选择的公知常识。虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域普通技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

Claims (9)

1.一种虫草酵素，其特征在于，所述虫草酵素由以下重量份数的成分制成：所述虫草为0.4～0.8份、所述葡萄糖12～16份、所述人参药渣为6～10份、所述益生菌0.2～0.4份、所述硫酸镁为0.01～0.03份和所述马铃薯冻干超微粉为5～8份。
2.根据权利要求1所述的虫草酵素，其特征在于，按重量份数计，所述虫草为0.6份、所述葡萄糖15份、所述人参药渣为8份、所述益生菌0.3份、所述硫酸镁为0.02份和所述马铃薯冻干超微粉为7份。
3.根据权利要求1所述的虫草酵素，其特征在于，所述虫草为菌丝体冻干后经超微粉碎获得的粉体。
4.根据权利要求1所述的虫草酵素，其特征在于，所述马铃薯冻干超微粉为马铃薯粉碎后冻干后再经超微粉碎获得的粉体。
5.根据权利要求1所述的虫草酵素，其特征在于，所述益生菌为活菌数≥1.0×108CFU/mL的乳杆菌或≥1.0×107CFU/mL的酿酒酵母。
6.一种虫草酵素的制备方法，其特征在于，将所述虫草、葡萄糖、人参药渣、硫酸镁和马铃薯冻干超微粉，加水量为上述物质重量份数总和的7～12倍，混匀后121℃灭菌15～30min后冷却，即为酵素的发酵基质；然后将益生菌接种至发酵基质中，温度25～33℃，通气搅拌，发酵时间5～9d，将培养好的发酵液过滤或离心2000～10000rpm处理，上清液经40～50℃真空浓缩，即得虫草酵素。
7.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述发酵温度为29℃；所述发酵时间为7d；所述发酵液离心速度为4000rpm。
8.根据权利要求6所述的虫草酵素，其特征在于，所述虫草酵素制成散剂、片剂、胶囊剂、颗粒剂或口服液。
9.一种如权利要求1～6所述的虫草酵素在制备对胃黏膜损伤有保护作用的特殊食品或药物中的应用。
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