CN109328874A - 一种生物酵素组合物及其提升冬虫夏草发酵水平的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一种生物酵素组合物及其提升冬虫夏草发酵水平的方法，属于生物医药技术领域。生物酵素组合物由菠萝酵素70～130份、木瓜酵素100～200份、硫酸镁1～5份、氯化钙1～3份组成。利用该生物酵素组合物提升冬虫夏草发酵水平的方法：按常规方法配制的培养基，经121℃灭菌20～30min，按培养基重量的8～12％加入生物酵素组合物于培养基中，加水至固液比1:8～12，混合均匀，温度45～65℃，水解3～7h后，煮沸保持10min，移入不锈钢发酵罐，冷却后接入种子罐培养的冬虫夏草种子进行发酵培养，培养温度12～29℃，周期2～18d，发酵完成后发酵液离心去上清液，干燥即得冬虫夏草菌丝体。

Description

一种生物酵素组合物及其提升冬虫夏草发酵水平的方法
技术领域
本发明涉及生物医药技术领域，具体而言，涉及一种生物酵素组合物及其提升冬虫夏草发酵水平的方法。
背景技术
据世界卫生组织的一项调查结果表明，全世界真正健康的人仅占 5％，经医生检查、诊断有病的人也只占20％，75％的人处于亚健康状态。可见，亚健康问题已经严重困扰着人们的工作和生活。据专家分析，85％以上的疾病和亚健康状态都与人体免疫力下降有关，同时认为有目的、适当的服用具有调节免疫机能的保健食品，对消除或避免亚健康状态是十分有益的。
冬虫夏草又名虫草，冬虫草，夏草冬虫等，是我国独有的珍贵特产。根据分类系统，冬虫夏草属真菌门(Eumycota)、子囊菌亚门 (Ascomycotina)、核菌纲(Pyrenomycrees)、麦角菌科 (Clavicipitaceae)、虫草属(Cordyceps)，为一种寄生于鳞翅目昆虫蝙蝠蛾幼虫中所形成的虫生真菌，也是一种名贵的药用真菌。冬虫夏草作为药用资源，在我国由来已久。对于虫草的认识，我国可追溯到公元前11世纪西周至秦朝。从出土的文物中就发现有以虫草作图案的玉雕饰品。1578年成书的《本草纲目》中记载有雪蚕，根据其生活史、性味功效、形态、环境及产地判断，应当是冬虫夏草的古名。在1694年清朝汪昂的《本草备要》中也有关于冬虫夏草的论述，该书记载：“冬虫夏草，甘平，保肺益肾，止血化痰，止劳咳。四川嘉定府所产者佳。冬在土中形如老蚕，有毛能动，至夏则毛出土上，连身俱化成草”，这是冬虫夏草的最早文字记载。吴仪洛(1757)在《本草从新》中第一次详尽地记载了冬虫夏草及其药用。赵学敏(1765)著的《本草纲目拾遗》把它的药用归之为“能治诸虚百损”。在中华医药百味中，虫草正是以“治诸虚百损”、“阴阳平衡”、“保肺益肾、补精益气、专补命门”的神奇功效被认为是一种不可多得的中药之宝而蜚声华夏，饮誉海外，与人参、鹿茸齐名，共称为中国的三大补品。当前由于野生资源的枯竭，人工栽培冬虫夏草的技术尚未突破，故多采用蝉花虫草、蛹虫草或人工发酵虫草菌丝体替代冬虫夏草生药。冬虫夏草除含有甘露醇、腺苷、麦角甾醇、氨基酸、脂肪酸、维生素、微量元素等外，虫草中还富含一些特有的活性成分，如虫草腺苷、虫草酸、虫草素以及虫草多糖。现代大量的药理研究表明虫草菌丝体、生药、醇和水或乙酸乙酯等提取物具有广泛药理活性，其活性涉及到对免疫系统、心血管系统、神经系统、呼吸系统、内分泌系统、肝脏和肾脏功能、机体代谢等各个方面，具有调节免疫、降血脂、保护肝脏肾脏和心脑组织、抗衰老、抗疲劳、抗肿瘤、降血糖、抗茵、抗氧化、抗炎、镇静和抗辐射等多方面作用。冬虫夏草在医药、农业等行业上具有广阔的开发利用前景。
酵素是十多年来风靡于欧美国家、日本、东南亚等国家和地区，深受人们追捧的具有较好保健效果的发酵制品。酵素又称为酶 (enzyme)，是生物体中所产生的具有催化作用的活性大分子。生物体内的各种生理生化反应，几乎都要在酵素的催化作用下进行，人体的新陈代谢、能量摄取、成长和繁殖等生命现象都必须通过酵素的帮助才能完成。
利用酵素结合现代生物技术进行冬虫夏草产品的开发提升冬虫夏草产品的品质，以顺应追求健康、品质生活的人们的需求，存在巨大的市场价值。
鉴于此，本发明提供一种生物酵素组合物及其提升冬虫夏草发酵水平的方法。
发明内容
本发明的目的在于提供一种生物酵素组合物及其提升冬虫夏草发酵水平的方法。
为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：
第一方面，本发明提供一种生物酵素组合物，生物酵素组合物包括菠萝酵素、木瓜酵素。
进一步地，生物酵素组合物还含有硫酸镁和/或氯化钙。
进一步地，按重量份数计，菠萝酵素为70～130份、木瓜酵素为100～ 200份、硫酸镁为1～5份、氯化钙为1～3份。
优选地，在本发明较佳的实施例中，按重量份数计，菠萝酵素为 100份、木瓜酵素为150份、硫酸镁为3份、氯化钙为2份。
第二方面，本发明提供一种利用上述生物酵素组合物提升冬虫夏草发酵水平的方法，所述方法通过以下步骤实现：按常规方法配制葡萄糖、豆粕粉、酵母膏、蛋白胨粉、腺嘌呤培养基，经121℃灭菌20～30min，按培养基重量的8～12％加入权利要求2所述的生物酵素组合物于培养基中，加水至固液比1:8～12，混合均匀，温度45～65℃，水解3～7h后，煮沸保持10min，移入不锈钢发酵罐，冷却后接入种子罐培养的冬虫夏草种子进行发酵培养，培养温度12～29℃，周期2～18d，发酵完成后发酵液离心去上清液后，干燥即得冬虫夏草菌丝体。
优选地，上述生物酵素组合物为水溶液，通过生物酵素组合物加水至固液比1:8～12，离心去沉淀后滤过除菌制得。
优选地，上述培养基中葡萄糖为800份、豆粕粉为200份、酵母膏为 30份、蛋白胨粉为50份、腺嘌呤5份。
优选地，上述发酵液离心是指发酵完成后菌液3000～5000r/min离心 5～20min。
优选地，上述冬虫夏草菌种为中华被毛孢菌。
与现有技术相比，本发明的有益效果包括：
本发明生物酵素组合物在提升冬虫夏草发酵水平方面，特别是提升冬虫夏草菌丝体产出率方面，与现有技术相比有显著提高。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限制本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步详细描述：
实施例1
将菠萝酵素70g、木瓜酵素200g、硫酸镁1g、氯化钙3g混合均匀，加2000ml水充分溶解，离心去沉淀后滤过除菌即得生物酵素组合物溶液。
冬虫夏草发酵流程：取葡萄糖800g、豆粕粉200g、酵母膏30g、蛋白胨粉50g、腺嘌呤5g，按常规方法配制培养基，经121℃灭菌20min，加入生物酵素组合物溶液于培养基中，加水至11000ml，混合均匀，温度65℃，水解3h后，煮沸保持10min，移入不锈钢发酵罐，冷却后接入种子罐培养的冬虫夏草种子进行发酵培养，培养温度29℃，周期2d，发酵完成后发酵液离心3000r/min离心20min，去上清液后，60℃干燥即得冬虫夏草菌丝体。
实施例2
将菠萝酵素70g、木瓜酵素200g、硫酸镁5g、氯化钙1g混合均匀，加2200ml水充分溶解，离心去沉淀后滤过除菌即得生物酵素组合物溶液。
冬虫夏草发酵流程：取葡萄糖800g、豆粕粉200g、酵母膏30g、蛋白胨粉50g、腺嘌呤5g，按常规方法配制培养基，经121℃灭菌20min，加入生物酵素组合物溶液于培养基中，加水至16000ml，混合均匀，温度65℃，水解3h后，煮沸保持10min，移入不锈钢发酵罐，冷却后接入种子罐培养的冬虫夏草种子进行发酵培养，培养温度12℃，周期18d，发酵完成后发酵液离心5000r/min离心5min，去上清液后，沉淀加1100ml水溶解后喷雾干燥即得冬虫夏草菌丝体。
实施例3
将菠萝酵素100g、木瓜酵素150g、硫酸镁3g、氯化钙2g混合均匀，加2500ml水充分溶解，离心去沉淀后滤过除菌即得生物酵素组合物溶液。
冬虫夏草发酵流程：取葡萄糖800g、豆粕粉200g、酵母膏30g、蛋白胨粉50g、腺嘌呤5g，按常规方法配制培养基，经121℃灭菌20min，加入生物酵素组合物溶液于培养基中，加水至13500ml，混合均匀，温度55℃，水解5h后，煮沸保持10min，移入不锈钢发酵罐，冷却后接入种子罐培养的冬虫夏草种子进行发酵培养，培养温度16℃，周期5d，发酵完成后发酵液离心4000r/min离心10min，去上清液后，70℃干燥即得冬虫夏草菌丝体。
对比例1～5组样品制备：
参照实施例3的工艺流程、参数、原辅料用量分别制得对比例1～ 5组和对照组样品，其中对照组样品为按照现有工艺制备。
实施例3与对比例1～5工艺区别见表1。
表1工艺区别
实验例1表2有益效果
组别 菌丝体产率(％) 总氨基酸含量(％) 甘露醇含量(％) 腺苷含量(％)
实施例1组 1.38％ 33.79％ 10.31％ 0.21％
实施例2组 1.26％ 35.16％ 9.07％ 0.18％
实施例3组 1.69％ 38.01％ 10.25％ 0.21％
对比例1组 1.17％ 32.69％ 9.39％ 0.17％
对比例2组 1.08％ 33.22％ 9.01％ 0.18％
对比例3组 0.85％ 32.75％ 8.66％ 0.12％
对比例4组 0.99％ 32.28％ 9.21％ 0.16％
对比例5组 0.71％ 32.19％ 8.04％ 0.13％
对照组 0.56％ 31.59％ 7.51％ 0.12％
由表2可见，实施例1～3组和对比例1～5组均能提升菌丝体产量和活性成分含量，与对照组比较差异有显著性，实施例1～3组优势更明显。
本发明中未详细说明的环节均为本领域普通技术人员可自行选择的公知常识。虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域普通技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

Claims (9)

1.一种生物酵素组合物，其特征在于，所述生物酵素组合物包括菠萝酵素、木瓜酵素。
2.根据权利要求1所述的生物酵素组合物，其特征在于，所述组合物还含有硫酸镁和/或氯化钙。
3.根据权利要求2所述的生物酵素组合物，其特征在于，按重量份数计，所述菠萝酵素为70～130份、木瓜酵素为100～200份、硫酸镁为1～5份、氯化钙为1～3份。
4.根据权利要求3所述的生物酵素组合物，其特征在于，按重量份数计，所述菠萝酵素为100份、木瓜酵素为150份、硫酸镁为3份、氯化钙为2份。
5.一种利用权利要求2所述的生物酵素组合物提升冬虫夏草发酵水平的方法，其特征在于，所述方法通过以下步骤实现：按常规方法配制葡萄糖、豆粕粉、酵母膏、蛋白胨粉、腺嘌呤培养基，经121℃灭菌20～30mi n，按培养基重量的8～12％加入权利要求2所述的生物酵素组合物于培养基中，加水至固液比1:8～12，混合均匀，温度45～65℃，水解3～7h后，煮沸保持10mi n，移入不锈钢发酵罐，冷却后接入种子罐培养的冬虫夏草种子进行发酵培养，培养温度12～29℃，周期2～18d，发酵完成后发酵液离心去上清液后，干燥即得冬虫夏草菌丝体。
6.根据权利要求5所述的提升冬虫夏草发酵水平的方法，其特征在于，所述生物酵素组合物为水溶液，通过生物酵素组合物加水至固液比1:8～12，离心去沉淀后滤过除菌制得。
7.根据权利要求5所述的提升冬虫夏草发酵水平的方法，其特征在于，按重量份数计，所述培养基中葡萄糖为800份、豆粕粉为200份、酵母膏为30份、蛋白胨粉为50份、腺嘌呤5份。
8.根据权利要求5所述的提升冬虫夏草发酵水平的方法，其特征在于，所述发酵液离心是指发酵完成后菌液3000～5000r/mi n离心5～20mi n。
9.根据权利要求5所述的提升冬虫夏草发酵水平的方法，其特征在于，所述冬虫夏草菌种为中华被毛孢菌。
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