CN111719008B

CN111719008B - 一种与小麦白粉病抗病基因Pm5e共分离的SNP及其应用

Info

Publication number: CN111719008B
Application number: CN201910206693.2A
Authority: CN
Inventors: 刘志勇; 郭广昊; 谢菁忠; 王勇; 吴秋红; 陆平; 陈永兴; 董玲丽
Original assignee: Institute of Genetics and Developmental Biology of CAS
Current assignee: Institute of Genetics and Developmental Biology of CAS
Priority date: 2019-03-19
Filing date: 2019-03-19
Publication date: 2021-11-09
Anticipated expiration: 2039-03-19
Also published as: CN111719008A

Abstract

本发明公开了一种与小麦白粉病抗性相关的SNP及其应用，具体涉及一种与小麦白粉病抗病基因Pm5e共分离的SNP及其应用，更具体涉及一种检测小麦抗白粉病基因的KASP标记及其应用。本发明提供的鉴定待测小麦白粉病抗病性的方法：检测待测小麦基于特异SNP的基因型；AA基因型小麦的白粉病抗病性高于GG基因型小麦。本发明提供的鉴定待测小麦是否携带Pm5e抗病基因的方法：检测待测小麦基于特异SNP的基因型；基因型为AA的小麦为携带Pm5e抗病基因的小麦，基因型为GG的小麦为不携带Pm5e抗病基因的小麦。本发明可以对白粉病抗病材料进行高通量精准的鉴定，操作简便，可在短时间内完成大规模材料的表型鉴定和筛选，提高分子辅助育种的效率。

Description

一种与小麦白粉病抗病基因Pm5e共分离的SNP及其应用

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及一种与小麦白粉病抗性相关的SNP及其应用，具体涉及一种与小麦白粉病抗病基因Pm5e共分离的SNP及其应用，更具体涉及一种检测小麦抗白粉病基因的KASP标记及其应用。

背景技术

小麦是世界上种植面积最大、总产量最高的粮食作物，全世界约35％的人口以小麦为主要粮食。小麦白粉病是由专性寄生菌禾本科布氏白粉菌(Blumeria graminisf.sp.tritici，Bgt)引起的真菌性病害，严重影响小麦的产量和品质。小麦白粉病的发病面积广、范围大，曾先后于1981年和1990年在全国大部分地区流行，招致重大损失，成为影响小麦丰产的重要病害之一。虽然农药等化学手段可以起到一定的防治作用，但大面积的使用不但会增加人力、财力和物力，更重要的是会给环境造成破坏，所以推广抗性品种成为目前最为经济和有效的措施。

分子标记辅助育种是利用与目的基因紧密连锁的分子标记来检测目的基因的存在，已经成为小麦现代育种的一种重要辅助手段。功能分子标记是根据目的基因的多态性序列开发的分子标记，具有针对性强、鉴定准确的特点，功能分子标记的利用可以使基础研究的结果成功运用到育种实际，对小麦抗病育种工作具有重要意义。

发明内容

本发明的目的是提供一种与小麦白粉病抗性相关的SNP及其应用，具体涉及一种与小麦白粉病抗病基因Pm5e共分离的SNP及其应用，更具体涉及一种检测小麦抗白粉病基因的KASP标记及其应用。

本发明要求保护一种鉴定待测小麦白粉病抗病性的方法，包括如下步骤：检测待测小麦基于特异SNP的基因型；AA基因型小麦的白粉病抗病性高于GG基因型小麦。

本发明还保护一种鉴定待测小麦白粉病抗病性的方法，包括如下步骤：检测待测小麦基于特异SNP的基因型；AA基因型小麦为候选的白粉病抗病小麦。

本发明还保护一种鉴定待测小麦白粉病抗病性的方法，包括如下步骤：检测待测小麦基于特异SNP的基因型；GG基因型小麦为候选的白粉病感病小麦。

本发明还保护一种鉴定待测小麦是否携带Pm5e抗病基因的方法，包括如下步骤：检测待测小麦基于特异SNP的基因型；基因型为AA的小麦为携带Pm5e抗病基因的小麦，基因型为GG的小麦为不携带Pm5e抗病基因的小麦。

本发明还保护特异SNP作为检测靶标在鉴定待测小麦白粉病抗病性中的应用。

本发明还保护特异SNP作为检测靶标在鉴定待测小麦是否携带Pm5e抗病基因中的应用。

本发明还保护用于检测特异SNP的物质的应用，为如下(e1)或(e2)或(e3)或(e4)或(e5)或(e6)或(e7)或(e8)：

(e1)鉴定或辅助鉴定小麦的白粉病抗病性；

(e2)筛选或辅助筛选白粉病抗病小麦；

(e3)筛选或辅助筛选白粉病感病小麦；

(e4)制备用于鉴定或辅助鉴定小麦的白粉病抗病性的试剂盒；

(e5)制备用于筛选或辅助筛选白粉病抗病小麦的试剂盒；

(e6)制备用于筛选或辅助筛选白粉病感病小麦的试剂盒；

(e7)鉴定或辅助鉴定待测小麦是否携带Pm5e抗病基因；

(e8)制备鉴定或辅助鉴定待测小麦是否携带Pm5e抗病基因的试剂盒。

本发明还保护一种特异引物组，由引物1、引物2和引物3组成；

引物1为如下(b1)或(b2)：

(b1)序列表的序列5所示的单链DNA分子；

(b2)将序列5经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列5具有相同功能的DNA分子；

引物2为如下(c1)或(c2)：

(c1)序列表的序列6所示的单链DNA分子；

(c2)将序列6经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列6具有相同功能的DNA分子；

引物3为如下(d1)或(d2)：

(d1)序列表的序列7所示的单链DNA分子；

(d2)将序列7经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列7具有相同功能的DNA分子。

本发明还保护所述特异引物组的应用，为如下(e1)或(e2)或(e3)或(e4)或(e5)或(e6)或(e7)或(e8)：

(e1)鉴定或辅助鉴定小麦的白粉病抗病性；

(e2)筛选或辅助筛选白粉病抗病小麦；

(e3)筛选或辅助筛选白粉病感病小麦；

(e4)制备用于鉴定或辅助鉴定小麦的白粉病抗病性的试剂盒；

(e5)制备用于筛选或辅助筛选白粉病抗病小麦的试剂盒；

(e6)制备用于筛选或辅助筛选白粉病感病小麦的试剂盒；

(e7)鉴定或辅助鉴定待测小麦是否携带Pm5e抗病基因；

本发明还保护以上任一所述的方法或以上任一所述特异引物组在小麦育种中的应用；所述小麦育种为抗白粉病小麦育种。

以上任一所述特异SNP为如下(a1)或(a2)：

(a1)位于小麦cDNA中的序列表的序列2所示DNA分子的第3033位核苷酸；

(a2)位于小麦基因组中的序列表的序列3所示DNA分子的第6235位核苷酸；

(a3)位于小麦基因组中的序列表的序列4所示DNA分子的第36位核苷酸。

以上任一所述Pm5e抗病基因为如下(f1)或(f2)或(f3)：

(f1)小麦基因组中编码序列表的序列1所示的蛋白质的基因；

(f2)小麦基因组中表达特异RNA的基因；所述特异RNA为与序列表的序列2所示的DNA分子对应的RNA；

(f3)小麦基因组中序列表的序列3所示的DNA分子。

以上任一所述检测待测小麦基于特异SNP的基因型的方法具体可为：以待测小麦的基因组DNA为模板，采用所述特异引物对进行竞争性等位基因特异性PCR，然后输出基因型分型结果。

竞争性等位基因特异性PCR的反应体系中，引物1的浓度具体可为0.168μM，引物2的浓度具体可为0.168μM，引物3的浓度具体可为0.42μM。

竞争性等位基因特异性PCR的反应体系具体可为(10μL)：1μL模板(DNA含量约100ng)、5μL KASP Master mix、1.4μL引物混合液、0.08μL 50mM氯化镁水溶液、2.52μL水。

竞争性等位基因特异性PCR采用的仪器具体可为Roche LightCycler480II(配套软件为LightCycler)。

竞争性等位基因特异性PCR的反应程序具体可为：95℃15分钟；95℃20秒、退火60秒(第一个循环的退火温度为65℃，每个循环比前一个循环降低1℃)，10个循环；94℃20秒、57℃60秒，30个循环；37℃60秒。

以上任一所述用于检测特异SNP的物质具体可为所述特异引物组。

以上任一所述白粉病抗病小麦为免疫、近免疫、高度抗病或中度抗病的小麦。

以上任一所述白粉病抗病小麦为接种白粉病致病菌后表型为0-2的小麦。

以上任一所述白粉病感病小麦为中度感病或高度感病的小麦。

以上任一所述白粉病感病小麦为接种白粉病致病菌后表型为3-4的小麦。

本发明在对小麦抗白粉病基因Pm5e克隆的基础上，利用抗病基因Pm5e的基因序列关键SNP位点开发了功能标记，并利用现有多种小麦材料进行了验证。结果证明，本发明提供的功能分子标记可以对白粉病抗病材料进行高通量、精准的鉴定，操作简便，可在短时间内完成大规模材料的表型鉴定和筛选，提高分子辅助育种的效率，既可免除育种群体大量的田间接种鉴定工作，又可对育种材料进行早代选择并对目的基因进行精准的鉴定，从而有效服务于小麦抗白粉病育种工作。

附图说明

图1为实施例3的步骤一中部分样本的结果。

具体实施方式

以下的实施例便于更好地理解本发明，但并不限定本发明。下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均为自常规生化试剂商店购买得到的。以下实施例中的定量试验，均设置三次重复实验，结果取平均值。

实施例1、SNP的发现

利用混池转录组测序(BSR-Seq)方法开发分子标记，以小麦复壮30和小麦农大015杂交后代的3705个F_2：3家系为作图群体，进行精细定位，最终将Pm5e定位在染色体7BL分子标记WGGB2和WGGB3之间，标记之间的物理区间约为13.5kb。利用诺唯赞高保真DNA聚合酶，通过PCR扩增小麦复壮30及小麦农大015定位区间的物理序列。

最终从小麦复壮30中发现一个新蛋白，如序列表的序列1所示，将该蛋白命名为Pm5e蛋白。复壮30的cDNA中编码Pm5e蛋白的开放阅读框如序列表的序列2所示。复壮30的基因组DNA中，编码Pm5e蛋白的基因如序列表的序列3所示(具有4个外显子)。

将小麦复壮30基因组中编码Pm5e蛋白的基因与其它小麦品种中的同源基因进行比较，挖掘SNP，并验证各个SNP与小麦抗白粉病性状的相关性。发现一个SNP，该SNP与Pm5e抗病基因共分离，从而与小麦白粉病抗病性具有紧密相关性。该SNP即序列表的序列2的第3033位核苷酸(相应的，为序列表的序列3的第6235位核苷酸)，多态形式为A/G多态，将该SNP又称为3033-SNP。经测序验证，小麦品种复壮30(简称小麦复壮30)基于3033-SNP的基因型为AA型，小麦品种农大015(简称小麦农大015)基于3033-SNP的基因型为GG型。基于3033-SNP，如果基因型为AA、小麦为携带Pm5e抗病基因的小麦，如果基因型为GG、小麦为不携带Pm5e抗病基因的小麦。基于3033-SNP，如果基因型为AA、小麦为白粉病抗病小麦，如果基因型为GG、小麦为白粉病感病小麦。

示例性的与小麦白粉病抗病性无显著相关性的4个SNP分别为：序列表的序列2的第246位核苷酸(相应的，为序列表的序列3的第2704位核苷酸)，多态形式为T/C多态，将该SNP又称为246-SNP；序列表的序列2的第2071位核苷酸(相应的，为序列表的序列3的第4915位核苷酸)，多态形式为G/A多态，将该SNP又称为2071-SNP；序列表的序列2的第2784位核苷酸(相应的，为序列表的序列3的第5628位核苷酸)，多态形式为C/T多态，将该SNP又称为2784-SNP；序列表的序列2的第3022位核苷酸(相应的，为序列表的序列3的第6224位核苷酸)，多态形式为G/C多态，将该SNP又称为3022-SNP。

实施例2、检测多个小麦品种基于SNP的基因型以及对白粉病的抗病性

供试小麦见表2。均为现有小麦品种。

一、检测多个小麦品种基于3033-SNP的基因型

提取供试小麦的基因组DNA。以基因组DNA为模板，采用引物1、引物2和引物3组成的引物组进行KASP(竞争性等位基因特异性PCR)，然后输出基因型分型结果。如果分型结果与小麦复壮30一致，该小麦品种基于3033-SNP的基因型为AA型，如果分型结果与小麦农大015一致，该小麦品种基于3033-SNP的基因型为GG型。

引物1、引物2和引物3是基于KASP原理设计的。引物组的靶序列如序列表的序列4所示，其中SNP位点位于序列4的第36位。序列表的序列4中，R代表A或G。

引物1(序列5)：5’-GAAGGTGACCAAGTTCATGCT GCTAGCATTTACAGCTTTGCTT-3’；

引物2(序列6)：5’-GAAGGTCGGAGTCAACGGATT GCTAGCATTTACAGCTTTGCTC-3’；

引物3(序列7)：5’-GCAGTGGGAGCGTCATCAAA-3’。

反应体系(10μL)：1μL模板(DNA含量约100ng)、5μL KASP Master mix、1.4μL引物混合液、0.08μL 50mM氯化镁水溶液、2.52μL水。KASP Master mix：英国LGC公司，货号为KBS-1016-001。引物混合液提供的有效成分为引物1、引物2和引物3。反应体系中，引物1的浓度为0.168μM，引物2的浓度为0.168μM，引物3的浓度为0.42μM。

采用的仪器为Roche LightCycler480II(配套软件为LightCycler)。

反应程序：95℃15分钟；95℃20秒、退火60秒(第一个循环的退火温度为65℃，每个循环比前一个循环降低1℃)，10个循环；94℃20秒、57℃60秒，30个循环；37℃60秒。

结果见表2。

二、检测多个小麦品种基于各个其他SNP的基因型

通过测序检测供试小麦基于246-SNP的基因型。

通过测序检测供试小麦基于2071-SNP的基因型。

通过测序检测供试小麦基于2784-SNP的基因型。

通过测序检测供试小麦基于3022-SNP的基因型。

结果见表2。

三、检测多个小麦品种对白粉病的抗病性

供试小麦培养至一叶一心期，然后接种白粉病致病菌，接种10天后，观察植株的第一片叶片。接种方式：将感染白粉病致病菌并充分发病(充分发病的表型：菌丝层厚、菌丝致密且病斑多，产孢量大，菌丝连成片)的小麦薛早植株在供试植株上方进行人工拂掸。采用的白粉病致病菌为白粉病菌(Blumeriagraminis,sp.tritici，Bgt)E20生理小种。

根据表型，植株的白粉病抗病性采用0-4级的分级标准。0为免疫。0；为近免疫。1为高度抗病。2为中度抗病。3为中度感病。4为高度感病。按大分类来说，0-2为抗病表型，3-4为感病表型。各个分级标准相应的表型见表1。

表1

级别	表型
		0	植株无白粉病相关症状
0；	出现过敏性坏死反应，失绿反应
		1	菌丝层较稀薄且病斑少，可透绿
2	菌丝层较厚，不透绿，能产生一定量的孢子
		3	菌丝层比较厚且病斑多，产孢量大，但菌丝不会连成片
4	菌丝层厚、菌丝致密且病斑多，产孢量大，菌丝连成片

结果见表2。表2中，R代表抗病表型，S代表感病表型。

表2

实施例3、检测多个小麦品种基于3033-SNP的基因型以及对白粉病的抗病性供试小麦见表3。均为现有小麦品种。

一、检测多个小麦品种基于3033-SNP的基因型

方法同实施例2的步骤一。

结果见图1和表3。

二、检测多个小麦品种对白粉病的抗病性

方法同实施例2的步骤三。

结果见表3。表3中，R代表抗病表型，S代表感病表型。

表3

SEQUENCE LISTING

<110> 中国科学院遗传与发育生物学研究所

<120> 一种与小麦白粉病抗病基因Pm5e共分离的SNP及其应用

<130> GNCYX190683

<160> 7

<170> PatentIn version 3.5

<210> 1

<211> 1067

<212> PRT

<213> Triticum aestivum L.

<400> 1

Met Ala Gln Met Glu Asp Val Asp Ala Ala Ser Pro Leu Pro Ala Met

1 5 10 15

Ala Leu Asp Pro Asp Leu His Ala Ala Ile Arg Ala Pro Val Thr Val

20 25 30

Met Leu Gly Pro Ser Ala Leu Leu Leu Arg Glu Leu Asp Ser Ser Gly

35 40 45

Gln Ser Leu Leu Gly Ala Glu Glu Leu Arg Leu Leu Arg Asp Ala Leu

50 55 60

Arg Glu Val Cys Ile Pro Leu Lys Ser Met Ser Glu Asp Asp Gly Ala

65 70 75 80

Ser Phe Met Ala Arg Trp Trp Met Lys Ile Val Arg Glu Leu Cys Tyr

85 90 95

Asp Thr Gln Asp Tyr Leu Asn Phe Val Gln Ser Ala Arg Asp Arg Pro

100 105 110

Glu Phe Ser Glu Leu Pro Asp Arg Ala Lys Ala Val Tyr Ser Gly Leu

115 120 125

Leu Ala Arg Ala Ile Asp Ala Arg Glu Arg Arg Arg Gly Phe Lys Trp

130 135 140

Ser Pro Lys Thr Thr Arg Ser Asp Thr Trp Glu Ala Phe Asn Arg Arg

145 150 155 160

Phe Ser Lys Lys Leu Val Gln Leu Leu Gly Ser Phe Gly Val His Thr

165 170 175

Thr Pro Gly Ala Val Val Val Glu Ala Pro Asn Lys Leu Val Gln Leu

180 185 190

Leu Ala Leu Asp Asp Asp Val Asn Asp Lys Thr Leu Lys Val Ile Pro

195 200 205

Ile Ile Gly Cys Ala Gly Val Gly Lys Thr Thr Ala Ala Arg Thr Leu

210 215 220

Tyr His Lys His Gly Gly Lys Phe Gln Cys Arg Ala Phe Val Ser Val

225 230 235 240

Ser Gln Asn Pro Asp Met Arg Gly Ile Leu Thr Ser Met Leu Ala Gln

245 250 255

Leu Lys Ala Pro Arg Pro Pro Gly Phe Pro Asp Val Leu Asp Leu Ile

260 265 270

Gly Ala Ile Ser Arg His Leu Gln Gly Lys Gly Tyr Leu Ile Val Leu

275 280 285

Asp Asp Leu Trp Thr Ala Ser Val Trp His Ile Val Ser Arg Ala Phe

290 295 300

Pro Arg Gly Asp His Arg Ser Arg Ile Ile Thr Thr Thr Gln Val His

305 310 315 320

Asp Val Ala Leu Ala Cys Ser Gly Tyr His Pro Val Arg Ile Tyr Lys

325 330 335

Met Glu Leu Leu Asp Glu Tyr Glu Ser Arg Lys Leu Phe Phe Arg Arg

340 345 350

Val Phe Ser Ser Ala Pro Gly Asp Gly Cys Ser Pro Ala Thr Lys Glu

355 360 365

Val Ser Tyr Glu Ile Ile Arg Lys Cys Glu Gly Leu Pro Leu Ala Ile

370 375 380

Val Ser Ile Ala Gly Leu Leu Ala Ser Glu Leu Ser Ile Val Met Glu

385 390 395 400

Asp Trp Arg His Ile Gln Asn Ser Phe Ser Ser Thr Ser Glu Gly Met

405 410 415

Lys Asp Ile Leu Asn Leu Ile Tyr Asn Ser Leu Pro Pro Gly Leu Arg

420 425 430

Thr Cys Leu Leu Tyr Leu Ser Met Tyr Pro Gln Gly Tyr Val Met Lys

435 440 445

Lys Ala Glu Leu Val Lys His Trp Val Ala Glu Gly Phe Ile Gly Val

450 455 460

Val Glu Gly Thr Val Ala Met Lys Ile Ala Glu Arg Tyr Phe Asp Glu

465 470 475 480

Leu Val Ser Arg Ala Met Val Gln Ala Val Asp Thr Asp Tyr Thr Gly

485 490 495

Lys Val Leu Ser Cys Thr Val His His Leu Val Leu Asp Phe Ile Arg

500 505 510

Ser Lys Ser Leu Asp Glu Asn Phe Val Thr Thr Val Asp Tyr Ser Glu

515 520 525

Ser Thr Leu Ala His Pro Asp Lys Val Arg Arg Leu Ser Ile Gln Phe

530 535 540

Gly Gly Val Lys Ser Ala Tyr Ile Pro Glu Thr Ile Val Thr Ser Lys

545 550 555 560

Val Arg Ser Leu Val Phe Trp Gly Phe Phe Lys Cys Ala Pro Pro Ser

565 570 575

Ile Met Asp Tyr Gly Phe Leu Arg Ile Leu Asn Leu His Ile Trp Ala

580 585 590

Asp Glu Asp Asn Glu Ile Phe Asp Leu Ile Gly Ile Gly Asn Leu Phe

595 600 605

Leu Leu Lys Tyr Leu Thr Val Glu Cys Asn Ile Thr Val Lys Leu Pro

610 615 620

Glu Lys Ile Gly Met Leu Arg Tyr Leu Glu Thr Leu Glu Val Asp Ala

625 630 635 640

Arg Leu Phe Ala Val Pro Ser Asp Met Asp Asn Leu Glu Arg Leu Leu

645 650 655

His Leu Arg Leu Pro Ser Glu Ser Ile Leu Pro Gln Gly Val Ala His

660 665 670

Met Thr Ser Leu Arg Thr Leu Gly Asn Phe Asp Leu Ser Arg Arg Tyr

675 680 685

Ser Ile Glu Asn Val Leu Gln Leu Gly Gly Leu Ser Asn Leu Gln Asp

690 695 700

Leu Gln Leu Thr Cys Ala Met Ala Gln Gln Ala Glu Asn Leu Glu Lys

705 710 715 720

Asn Val Leu Leu Leu Gly Trp Ile Val Glu Arg Leu Ser Phe Leu Gln

725 730 735

Thr Ile Thr Leu Val Pro Ala Ser Val Ser Ser His Gln Asp Asp Gly

740 745 750

Gln Ala Ala Ala Pro Thr Ser Ile Ile Ile Pro Pro Asp Gly Phe Asn

755 760 765

Met Glu Pro Pro Pro Asp Leu Leu Leu Gln Arg Ile Glu Met Ser Arg

770 775 780

His Cys Cys Ile Phe Phe Cys Ile Pro Lys Cys Phe Gly Glu Leu Arg

785 790 795 800

Lys Leu Cys Ile Leu Lys Ile Ala Ile Arg Ser Leu Ser Arg Ser Asp

805 810 815

Ile Glu Ile Leu Glu Arg Met Pro Ala Leu Ala Ala Leu Ala Leu Tyr

820 825 830

Asn Gln Thr Thr Pro Thr Glu Lys Met Ile Met Thr Asp Gly Gly Phe

835 840 845

Tyr Arg Leu Thr Tyr Phe Lys Phe Leu Cys Ala Ala Pro Cys Leu Ser

850 855 860

Phe Glu Gln Gly Ala Met Pro Lys Leu Gln Asn Leu Asn Leu Gly Phe

865 870 875 880

Asn Ser Asp Gln Trp Arg Ser Asp Thr Phe Glu Thr Leu Gly Leu Ser

885 890 895

His Leu Arg Gly Leu Thr Asp Val Cys Val Arg Leu Gly Thr Gly Ala

900 905 910

Ala Asp Asn Phe Asn Val Lys Val Ala Glu Ser Ala Leu Glu Ala Val

915 920 925

Val Arg Asn His Pro Asn Ser Pro Arg Ile Arg Ile Lys Phe Val Asp

930 935 940

Leu Ile Phe Asp Gly Lys Glu Asp Asp Ser Thr Ala Thr His Gln Tyr

945 950 955 960

Gln Glu Gly Lys Glu Ser Arg Ser Ala Arg Gly Gln Asp Gly Lys Gln

965 970 975

Asp Ala Thr Arg Gly Glu Arg Gln Gln Gln Gly Pro Pro Met Ser Lys

980 985 990

Gln Asp Ala Arg Arg Ser Lys Ala Val Gly Ala Ser Ser Lys Ala Val

995 1000 1005

Pro Pro Ile Ser Lys Ala Val Asn Ala Ser Lys Ser Arg Ala Ala

1010 1015 1020

Val Pro Pro Pro Thr Ser Ser Ser Pro Ser Lys Pro Met Pro Ser

1025 1030 1035

Ser Ser Leu Thr Ser Pro Pro Lys Pro Arg Arg Arg Gly Ser Arg

1040 1045 1050

Thr Ser Pro Pro Arg Pro Thr Ser Pro Pro Gln Pro Lys Arg

1055 1060 1065

<210> 2

<211> 3204

<212> DNA

<213> Triticum aestivum L.

<400> 2

atggcgcaga tggaggatgt agatgccgcg tcccctctgc cagcgatggc gttggaccct 60

gatctccacg cagcgattcg agctcctgtt actgttatgc tgggtccgtc ggccctcctc 120

ctccgggaac tcgattcttc cggacagagt cttctcggtg cggaggagct tcgtcttctt 180

agagatgctc tcagggaagt atgcatcccc ctgaagagta tgtccgaaga cgacggtgct 240

agctttatgg cccggtggtg gatgaagata gttcgggagc tttgttatga tacgcaggat 300

tacctcaact tcgtccaaag tgctcgagat cgtcctgaat tttcagagtt acctgatcgt 360

gccaaggctg tttattcagg cttacttgct cgcgccattg atgcgaggga aagacgcaga 420

ggtttcaagt ggtctcccaa gaccacccgg tctgacacgt gggaagcctt caaccgccgc 480

ttctccaaaa aacttgtcca gctgctgggt tccttcggtg tccataccac acccggtgcc 540

gtggtcgtgg aggccccaaa caagcttgtc cagctgctag ctttagatga tgatgtcaac 600

gacaagacac tcaaggtgat acctataatt ggatgtgcag gtgttggaaa gacaacagct 660

gccagaacct tgtatcacaa gcatggaggg aaatttcagt gccgggcttt tgtaagtgtg 720

tctcagaatc cagatatgag gggaatcctc accagcatgc tagcacaact taaggcacca 780

cggccccctg gctttcctga tgtgctggac cttattggcg ctatcagcag gcatctccaa 840

ggcaaagggt acttgatcgt acttgatgat ttatggactg catcggtatg gcatattgtt 900

agccgcgctt ttcctcgtgg tgatcaccgc agcagaataa taacaactac acaagtgcat 960

gacgtagcat tggcatgctc tggttatcac ccggtccgta tatataagat ggaacttctt 1020

gatgaatatg aatctcgaaa gttattcttc cgtagggtgt ttagctctgc ccctggagat 1080

ggttgttctc cagctaccaa agaagtctca tacgagatta tcagaaaatg tgaaggtttg 1140

ccgttagcaa ttgtaagtat agcaggtctg ttagcaagcg aattaagcat cgtcatggaa 1200

gattggaggc acatacaaaa ttctttttcc tccacttccg aagggatgaa agatatttta 1260

aaccttatct acaatagtct tccacctggt ttgaggacat gcttgctata tctgagtatg 1320

tatccacagg gctacgtgat gaagaaggct gagttggtga agcactgggt agccgaaggt 1380

tttatcggtg ttgtggaagg gacagtcgca atgaaaattg ctgagcgtta ttttgatgag 1440

cttgtcagca gagcaatggt ccaggccgtg gacaccgatt atactggcaa ggtgttgtca 1500

tgtacggttc accatttggt actggatttt attaggtcca aatctttgga tgagaatttt 1560

gtcaccactg tggactattc tgaatcaact ctagcacacc ctgacaaagt tcgtcggtta 1620

tccatccagt ttggaggggt aaaaagcgca tacattccag aaaccatcgt aacatcgaaa 1680

gttcggtcac ttgtattttg gggtttcttc aagtgtgcgc ctccttccat tatggattat 1740

ggatttcttc gtattctgaa tcttcatatt tgggctgatg aagacaatga gatttttgac 1800

ctcattggaa ttgggaactt atttcttctg aagtatctca cggttgaatg taatatcacc 1860

gtcaaacttc cagagaagat tggaatgctc cgatacttgg agacactgga agtagatgca 1920

agattgtttg ctgttccatc agatatggat aatctggaga ggttactgca cctccgtctt 1980

ccgagcgaat ctatcctgcc tcaaggagta gcccacatga catctcttcg cactttgggg 2040

aattttgatc tcagccgccg ttactcaata gagaatgtat tacaacttgg agggctgtct 2100

aatctccagg atctccagct cacctgtgct atggcacagc aagcagaaaa cctggaaaag 2160

aatgtgctac tccttggctg gattgttgag aggcttagtt tcttgcagac cataactttg 2220

gtacctgctt cagtgtcctc tcatcaggat gatggtcagg ctgcagcacc tacaagcata 2280

attattcccc ctgatggatt taacatggag cctcctccag acctgcttct acagaggatc 2340

gaaatgtcgc ggcactgctg catcttcttc tgcataccta agtgctttgg agagctaagg 2400

aaactctgca tcctaaagat tgcaattagg agtctgtcga ggagtgatat tgaaatcctg 2460

gaaagaatgc cggccctcgc tgctctcgcc ctgtataatc agacaactcc cacagaaaag 2520

atgatcatga ctgacggggg attctataga ctcacgtact tcaagttctt gtgtgctgca 2580

ccatgcctgt cctttgaaca aggagcgatg cccaaactcc aaaacctcaa cctaggattc 2640

aactcagacc aatggagatc ggataccttt gaaactcttg gcttgagtca cttgagaggc 2700

cttacggatg tatgtgtaag acttggtact ggggctgctg acaacttcaa cgtaaaagtt 2760

gccgagtcgg cattggaggc tgtcgtcagg aatcacccca actctcctag gatcagaata 2820

aaatttgtgg atctgatttt tgatggtaag gaggatgata gcaccgcaac tcaccagtat 2880

caagaaggca aggaaagcag gtctgccaga ggccaagatg gcaaacaaga tgcaacaagg 2940

ggcgaacgtc aacaacaggg gccaccaatg agcaaacaag atgcacggag gagcaaagca 3000

gtgggagcgt catcaaaggc agtaccaccg ataagcaaag ctgtaaatgc tagcaagtca 3060

agggcagcag tacctcctcc caccagctct agcccatcaa agccgatgcc atcttcctcc 3120

cttaccagtc caccaaaacc gaggcgacgt ggctcccgca ccagccctcc ccgacccacg 3180

agcccgcccc aacccaagcg ctaa 3204

<210> 3

<211> 7747

<212> DNA

<213> Triticum aestivum L.

<400> 3

acattctgag cttccacttc cactcaggtc gagtgtctct agctgattca gcttccagat 60

ttcccttgga agcctatcaa tgatgcccga tttgatgctc aggtatttca tcagcaccag 120

gctgtagata gcctgaatat ggcccgcact aaggtgagca cactctttca ggtccaacac 180

tcgcagcagt ttatacttgg taaaatctaa aacagcttca taactatcta gagttgccgc 240

cgcgccagtg gagaatactg ccagggtccg gagaagagat aaactctgag gcaaattcag 300

atgggcgttt gcacaagcat gcacagatag cctgcggagg tgttcgttct gcaattcggc 360

cacatcgtga gataaccata tgaaattctc cgacatggac cgttgggtga tgtactgccg 420

aatcgcatcg ccggtaggct ggcatctctt caccttccca ttgctgcttc tctgggtgga 480

cctgatgata ctggaaccaa caagcatgcc caaattgctg gctgcgcctt gttctcctgg 540

tacaagtcct tcagccgtcc atctcctttc taggggctta gtcctgacat gatgttcatg 600

agggaacaag cgcagatata gcaagcagtt gtggtaatca ccattaagat tacctcccct 660

catcaggaaa tgaaaattct gaatctccgc ggggacagca gcagccgccg cttgtgctgc 720

agccccttgt acaggaaagc caaacctctt tatccgttca gtcgttgcag ttgatctctc 780

cttgagttgg gcaattttgt cggcaaattc atcatcggtc gtcatcttgg cgttgaagct 840

gtctatacag tcttggatgt cataagccaa ggccctcagt tgtgcaaaat attctgcctg 900

caagaaactc atcggctcga cactggaagc atgatccttc atggcagctt cgatccactt 960

gagttcttca ctgatgatgg tagcatcagt atttagcttc cccttcacgc tgcagagctt 1020

cgacaaggcg acgccagcta ccgtgctaaa tgccgctaca gcaaactcca tcggtctctc 1080

tttccttgtc tccacagatc actcctcctc cctagatctg catgcacggc aaagagcggt 1140

tagtgttgct tcaaatggaa gagagaggga gagggaaggg gccgggagac agagcttctc 1200

tacctcggtg gagggagctt cagagttccc ctcctcggct gcagtgactt gatagagtca 1260

caagtcacaa gtcacaattc acaagtggca aggaggactg ggctaacata tactccctcc 1320

gttccaaaat agatgactca actttgtact aactttgtac taaagttagt acaaagttga 1380

gtcatctatt ttggaacgga gggagtactc tgctagtgtt tactatgaac ttgtttggga 1440

aactttttct ccagaacggt tttggatcta acgggactca gttttttttt catacatatc 1500

taattagagg tttgatttaa atttcagata attttgcaat agttggaatc atcttgtacg 1560

atcgatgatc agagaactaa ttaaatttgt atcatctcag acactcagag gtgctcgtag 1620

ctagtgataa gatatgtgtg cgtgtgttaa taggggtata tgtgatgatt gtcttcattt 1680

ataccgtgtt tacaaaaagg tctattctat atatattttt cattatttaa atgtgttaag 1740

atgcttcctc ttgctccctc tgtaaagaaa tataagagtg ttcaaatgct cttatagttt 1800

ttttacggag ggagcatctc ccaaggagta ttggacgtgt tatgtactta tattagcttc 1860

ctatataggt aagagtaatg gtagccgggt caatcaaagg ttcggcttgc ttctccccca 1920

tcctctctta tgaaatggat aacccaatgg atggttcacg ttacttttca cactgtctct 1980

ttttctaacc tgtaaccgtc actactataa aatcgttttc caagtaagaa aaatggacta 2040

agaggatcca tttgttttct atgttgatgt caattaatct aacccagatg gcagattcgt 2100

tccagatgtt aaccaccagt ggttgttgat agaataggca gcaatcacag tttttctttg 2160

gaggaggggc ggttccgtgg ggcggaggct tggccggttc ttccagtcac aggtcaggtc 2220

ttctaagcac cctccccttc cccatgttcc atgtacgtat agggggctgt tgagttgtgg 2280

tgttccactt tgtccacgca ctactttttc gcccatctga tagcttcgtc caaatcgaga 2340

tttccctggt agtgtctccc ctcccgagct ttctttgtcg ttcattcata caattacaaa 2400

tcatctggtt gtctatgagg gatcaatagt aatcatctgt ttcttgcttc aggtgaagat 2460

ggcgcagatg gaggatgtag atgccgcgtc ccctctgcca gcgatggcgt tggaccctga 2520

tctccacgca gcgattcgag ctcctgttac tgttatgctg ggtccgtcgg ccctcctcct 2580

ccgggaactc gattcttccg gacagagtct tctcggtgcg gaggagcttc gtcttcttag 2640

agatgctctc agggaagtat gcatccccct gaagagtatg tccgaagacg acggtgctag 2700

ctttatggcc cggtggtgga tgaagatagt tcgggagctt tgttatgata cgcaggatta 2760

cctcaacttc gtccaaagtg ctcgagatcg tcctgaattt tcagagttac ctgatcgtgc 2820

caaggctgtt tattcaggct tacttgctcg cgccattgat gcgagggaaa gacgcagagg 2880

tttcaagtgg tctcccaaga ccacccggtc tgacacgtgg gaagccttca accgccgctt 2940

ctccaaaaaa cttgtccagc tgctgggttc cttcggtgtc cataccacac ccggtgccgt 3000

ggtcgtggag gccccaaaca agcttgtcca gctgctagct ttagatgatg atgtcaacga 3060

caagacactc aaggtgatac ctataattgg atgtgcaggt acagtaataa tctatcctca 3120

acttgaatat ctctagtctt tttctgcccg gcccattaat gctagctgga acatatgcca 3180

agtttctttc atcttctttc aggtgttgga aagacaacag ctgccagaac cttgtatcac 3240

aagcatggag ggaaatttca gtgccgggct tttgtaagtg tgtctcagaa tccagatatg 3300

aggggaatcc tcaccagcat gctagcacaa cttaaggcac cacggccccc tggctttcct 3360

gatgtgctgg accttattgg cgctatcagc aggcatctcc aaggcaaagg gtgattgatc 3420

tcaactatac tgtctaaata agcaaattcc gtgttctctt ctcataaata aatcataggc 3480

ataattttat tttatgaggt tccagttatg gcgtgtcagg cattgccata gcattttgag 3540

aaattatgaa tattattaat gggtgttgac cctcaaaaaa aaattatagc acatgctcag 3600

gtgaacctag gcaaattaat atatatgctg ccgcttgagc aaggtatata ttaattttta 3660

ttttttctga cctaacatac aaaattatgc aggtacttga tcgtacttga tgatttatgg 3720

actgcatcgg tatggcatat tgttagccgc gcttttcctc gtggtgatca ccgcagcaga 3780

ataataacaa ctacacaagt gcatgacgta gcattggcat gctctggtta tcacccggtc 3840

cgtatatata agatggaact tcttgatgaa tatgaatctc gaaagttatt cttccgtagg 3900

gtgtttagct ctgcccctgg agatggttgt tctccagcta ccaaagaagt ctcatacgag 3960

attatcagaa aatgtgaagg tttgccgtta gcaattgtaa gtatagcagg tctgttagca 4020

agcgaattaa gcatcgtcat ggaagattgg aggcacatac aaaattcttt ttcctccact 4080

tccgaaggga tgaaagatat tttaaacctt atctacaata gtcttccacc tggtttgagg 4140

acatgcttgc tatatctgag tatgtatcca cagggctacg tgatgaagaa ggctgagttg 4200

gtgaagcact gggtagccga aggttttatc ggtgttgtgg aagggacagt cgcaatgaaa 4260

attgctgagc gttattttga tgagcttgtc agcagagcaa tggtccaggc cgtggacacc 4320

gattatactg gcaaggtgtt gtcatgtacg gttcaccatt tggtactgga ttttattagg 4380

tccaaatctt tggatgagaa ttttgtcacc actgtggact attctgaatc aactctagca 4440

caccctgaca aagttcgtcg gttatccatc cagtttggag gggtaaaaag cgcatacatt 4500

ccagaaacca tcgtaacatc gaaagttcgg tcacttgtat tttggggttt cttcaagtgt 4560

gcgcctcctt ccattatgga ttatggattt cttcgtattc tgaatcttca tatttgggct 4620

gatgaagaca atgagatttt tgacctcatt ggaattggga acttatttct tctgaagtat 4680

ctcacggttg aatgtaatat caccgtcaaa cttccagaga agattggaat gctccgatac 4740

ttggagacac tggaagtaga tgcaagattg tttgctgttc catcagatat ggataatctg 4800

gagaggttac tgcacctccg tcttccgagc gaatctatcc tgcctcaagg agtagcccac 4860

atgacatctc ttcgcacttt ggggaatttt gatctcagcc gccgttactc aatagagaat 4920

gtattacaac ttggagggct gtctaatctc caggatctcc agctcacctg tgctatggca 4980

cagcaagcag aaaacctgga aaagaatgtg ctactccttg gctggattgt tgagaggctt 5040

agtttcttgc agaccataac tttggtacct gcttcagtgt cctctcatca ggatgatggt 5100

caggctgcag cacctacaag cataattatt ccccctgatg gatttaacat ggagcctcct 5160

ccagacctgc ttctacagag gatcgaaatg tcgcggcact gctgcatctt cttctgcata 5220

cctaagtgct ttggagagct aaggaaactc tgcatcctaa agattgcaat taggagtctg 5280

tcgaggagtg atattgaaat cctggaaaga atgccggccc tcgctgctct cgccctgtat 5340

aatcagacaa ctcccacaga aaagatgatc atgactgacg ggggattcta tagactcacg 5400

tacttcaagt tcttgtgtgc tgcaccatgc ctgtcctttg aacaaggagc gatgcccaaa 5460

ctccaaaacc tcaacctagg attcaactca gaccaatgga gatcggatac ctttgaaact 5520

cttggcttga gtcacttgag aggccttacg gatgtatgtg taagacttgg tactggggct 5580

gctgacaact tcaacgtaaa agttgccgag tcggcattgg aggctgtcgt caggaatcac 5640

cccaactctc ctaggatcag aataaaattt gtggatctga tttttgatgg taaggaggat 5700

gatagcaccg caactcacca gtatcaagaa ggcaaggaaa gcaggtacgg ctttttcttc 5760

cgtttacaag aattttgtag ggggtttaaa ggataggaat tttataaaag gatttctttg 5820

gaacccagtg atttgtagga atagaatctc attcctgtcc agcatagaaa ccaatccttt 5880

ctatttcaaa ggggggaaaa agcattagcc tagacccaaa cccaatgaaa aaaacaatca 5940

tatcctgtga atcagatgaa atgacatact tgtcacctca cttcatatga ttttccaatt 6000

ttgatgatat gcctattcaa tgaaccaaaa gagaccttaa cagggcattc gtccaatctt 6060

gcactgctaa tttgttcgtc atttttcctt caatcgcgac aggtctgcca gaggccaaga 6120

tggcaaacaa gatgcaacaa ggggcgaacg tcaacaacag gggccaccaa tgagcaaaca 6180

agatgcacgg aggagcaaag cagtgggagc gtcatcaaag gcagtaccac cgataagcaa 6240

agctgtaaat gctagcaagt caagggcagc agtacctcct cccaccagct ctagcccatc 6300

aaagccgatg ccatcttcct cccttaccag tccaccaaaa ccgaggcgac gtggctcccg 6360

caccagccct ccccgaccca cgagcccgcc ccaacccaag cgctaagctt ttggtacgat 6420

tatttcttct tcgtgcacca aaaatagaaa acgcttctaa tgtaccattt acagctttgc 6480

tcaagttttc caagctcttg gtatgatttt cccaaggaca taacagagtg tcgacctttt 6540

ctttcatgtc atgaagtcca tctgctacct actttcttcc ctctagaaac tctcttgtgc 6600

tggaaagtaa cttattcaaa gccagaactg ggctaggtgc ttattttcat tcatccctga 6660

cccaggccag gggttgagcg catcatcccg cttattagcg ccagggacat ccgacagaca 6720

gacggacgat gcaccaagcg gtgaaccatg cggcgggaag aacgagcatc cgaggagcag 6780

tccccaccct gatgccatcc aaactgatca gctctctaaa tattacagca tctattctac 6840

atccgtatgt acacatgtct gcttttcttg tgcactaagt tctgtactgt gttttcttat 6900

aggctggcac ttttcaaaaa aaattcaaaa tgaggatgta cccctcagcc tctgagtgat 6960

gcacacagcc ttataggctg gcattatacc atttgatact tctgtgacca tgccgtgagc 7020

tgcgggatcg acatgttctc gtttgaaatg gggaagacat aaacatatat gtcatacgaa 7080

gaaagcaaaa aaaatgtttc tgttgtaaat aatgagagaa ttcaagtgct atgagtgact 7140

tacttaggtt ttaaaacaaa acaaataggg cttgtgtagc ataggagtca tgagcacagc 7200

accagaacag cacccaagca cagcctccaa accccaaaac aatatcaacg aaaatttgaa 7260

attcaacacg tgaattctac caacatcacc agagcagaac tcaggaatca gtattaaaaa 7320

tctcgggatt gacaaatccc acaaacctaa atttaccact catcatgagt agtacatcaa 7380

acaatgcaaa tttattgaac actcacaaaa cactaccagg ttcaaacagg tgacactata 7440

attaggctta catctatgtc aataactatt tcgaaacaga aaaaaggagt ctcgccaaga 7500

gacatcaagg gtatatccaa acaaagagca tcacaaaaca cttccagctt attgaggcaa 7560

atttattgag ccacaaatct cattcgaaat cacattctac tcaccacaca ccaggcgtat 7620

atcaaacaag tcaaatttat tgggccacaa atctcattcg gaatcacata ctattcacca 7680

cataccatgg cgtatatcaa acaaggcaaa tttattgagc atcacaaaac acttcaggtt 7740

tcaggtc 7747

<210> 4

<211> 57

<212> DNA

<213> Triticum aestivum L.

<400> 4

gcagtgggag cgtcatcaaa ggcagtacca ccgatragca aagctgtaaa tgctagc 57

<210> 5

<211> 43

<212> DNA

<213> Artificial sequence

<400> 5

gaaggtgacc aagttcatgc tgctagcatt tacagctttg ctt 43

<210> 6

<211> 43

<212> DNA

<213> Artificial sequence

<400> 6

gaaggtcgga gtcaacggat tgctagcatt tacagctttg ctc 43

<210> 7

<211> 20

<212> DNA

<213> Artificial sequence

<400> 7

gcagtgggag cgtcatcaaa 20

Claims

1.一种鉴定待测小麦白粉病抗病性的方法，包括如下步骤：检测待测小麦基于特异SNP的基因型；AA基因型小麦的白粉病抗病性高于GG基因型小麦；

所述特异SNP为如下（a1）或（a2）：

（a1）位于小麦cDNA 中的序列表的序列2所示DNA分子的第3033位核苷酸；

（a2）位于小麦基因组中的序列表的序列3所示DNA分子的第6235位核苷酸。

2.一种鉴定待测小麦白粉病抗病性的方法，包括如下步骤：检测待测小麦基于特异SNP的基因型；AA基因型小麦为候选的白粉病抗病小麦；

所述特异SNP为如下（a1）或（a2）：

3.一种鉴定待测小麦白粉病抗病性的方法，包括如下步骤：检测待测小麦基于特异SNP的基因型；GG基因型小麦为候选的白粉病感病小麦；

所述特异SNP为如下（a1）或（a2）：

4.一种鉴定待测小麦是否携带Pm5e抗病基因的方法，包括如下步骤：检测待测小麦基于特异SNP的基因型；基因型为AA的小麦为携带Pm5e抗病基因的小麦，基因型为GG的小麦为不携带Pm5e抗病基因的小麦；

所述特异SNP为如下（a1）或（a2）：

（a2）位于小麦基因组中的序列表的序列3所示DNA分子的第6235位核苷酸；

所述Pm5e抗病基因为如下（f1）或（f2）或（f3）：

（f1）小麦基因组中编码序列表的序列1所示的蛋白质的基因；

（f2）小麦基因组中表达特异RNA的基因；所述特异RNA为与序列表的序列2所示的DNA分子对应的RNA；

（f3）小麦基因组中序列表的序列3所示的DNA分子。

5.特异SNP作为检测靶标在鉴定待测小麦白粉病抗病性中的应用；

所述特异SNP为如下（a1）或（a2）：

6.特异SNP作为检测靶标在鉴定待测小麦是否携带Pm5e抗病基因中的应用；

所述特异SNP为如下（a1）或（a2）：

所述Pm5e抗病基因为如下（f1）或（f2）或（f3）：

（f3）小麦基因组中序列表的序列3所示的DNA分子。

7.用于检测特异SNP的物质的应用，为如下（e1）或（e2）或（e3）或（e4）或（e5）或（e6）或（e7）或（e8）：

（e1）鉴定或辅助鉴定小麦的白粉病抗病性；

（e2）筛选或辅助筛选白粉病抗病小麦；

（e3）筛选或辅助筛选白粉病感病小麦；

（e4）制备用于鉴定或辅助鉴定小麦的白粉病抗病性的试剂盒；

（e5）制备用于筛选或辅助筛选白粉病抗病小麦的试剂盒；

（e6）制备用于筛选或辅助筛选白粉病感病小麦的试剂盒；

（e7）鉴定或辅助鉴定待测小麦是否携带Pm5e抗病基因；

（e8）制备鉴定或辅助鉴定待测小麦是否携带Pm5e抗病基因的试剂盒；

所述特异SNP为如下（a1）或（a2）：

所述Pm5e抗病基因为如下（f1）或（f2）或（f3）：

（f3）小麦基因组中序列表的序列3所示的DNA分子。

8.特异引物组，由引物1、引物2和引物3组成；

引物1为序列表的序列5所示的单链DNA分子；

引物2为序列表的序列6所示的单链DNA分子；

引物3为序列表的序列7所示的单链DNA分子。

9.权利要求8所述特异引物组的应用，为如下（e1）或（e2）或（e3）或（e4）或（e5）或（e6）或（e7）或（e8）：

（e1）鉴定或辅助鉴定小麦的白粉病抗病性；

（e2）筛选或辅助筛选白粉病抗病小麦；

（e3）筛选或辅助筛选白粉病感病小麦；

（e5）制备用于筛选或辅助筛选白粉病抗病小麦的试剂盒；

（e6）制备用于筛选或辅助筛选白粉病感病小麦的试剂盒；

（e7）鉴定或辅助鉴定待测小麦是否携带Pm5e抗病基因；

所述Pm5e抗病基因为如下（f1）或（f2）或（f3）：

（f3）小麦基因组中序列表的序列3所示的DNA分子。

10.权利要求1或2或3或4所述的方法或权利要求8所述特异引物组在小麦育种中的应用；所述小麦育种为抗白粉病小麦育种。