CN111676175A - 一株动物双歧杆菌nx-6及其在制备降脂减肥药物中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一株动物双歧杆菌NX‑6及其在制备降脂减肥药物中的应用，属于微生物技术领域。本发明公开的一株动物双歧杆菌NX‑6，其保藏编号为CGMCC No.20114。新型动物双歧杆菌NX‑6未灭活与灭活的发酵上清液、菌悬液、细胞破碎物上清液对斑马鱼表现出良好的减缓体重和体长增长、改善体质量指数(BMI)、降低脂肪面积百分比的作用，具有潜在的减肥功效；且均能显著降低斑马鱼高血脂模型体内的甘油三酯(TG)和总胆固醇(TC)，表现出良好的降血脂作用。本发明所述的新型动物双歧杆菌NX‑6在制备治疗和/或预防肥胖、高血脂药物方面有巨大的潜在应用前景。

Description

一株动物双歧杆菌NX-6及其在制备降脂减肥药物中的应用

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，更具体的说是涉及一株动物双歧杆菌NX-6 及其在制备降脂减肥药物中的应用。

背景技术

高血脂是一种血脂超出正常水平的亚健康或疾病状态，是导致冠心病、动脉粥样硬化、高血压等心血管疾病的最主要诱因，和肥胖、糖尿病等多种代谢疾病的发病率正相关。从2002年到2012年，血脂异常在成人中的患病率大幅上升，治疗率和控制率低。2013～2014年中国慢性病与危险因素监测调查结果显示，中国≥18岁人群血清总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇 (LDL-C)、甘油三酯(TG)和高密度脂蛋白胆固醇水平(HDL-C)分别为4.70mmol/L、2.88mmol/L、1.14mmol/L、1.35mmol/L，TC水平较前明显升高。根据国家心血管病中心组织编撰的《中国心血管病报告2018》，我国现在心血管病人数2.9亿，2016年心血管病以40％的死亡率仍居首位，且患病率持续上升。

美国心脏病学会/美国心脏协会(ACC/AHA)和英国国家健康和保健研究所(NICE)的指南表明，降脂药物对动脉粥样硬化性心血管疾病(ASCVD) 的一级和二级预防有益，他汀类药物的效果最为明显。他汀类药物能将LDL-C 降低到20％到60％，对69511名冠心病患者的全因死亡风险分析发现使用他汀类药物降低胆固醇能使患者死亡风险减少16％。值得提出的是，他汀类药物虽然以良好的耐受度在治疗高血脂、心血管疾病中广泛使用，但会对骨骼肌、代谢、肾脏功能、神经系统等产生副作用，这些副作用在临床上被统称为他汀相关症状(SAS，statin associated symptoms)。此外，纤维蛋白、胆酸结合剂也能起到良好的降血脂作用，但都有明显的副作用而被限制。烟酸对正常 HDL-C或伴随低HDL-C的高胆固醇血症患者有一定的疗效，但耐受度较低。

当传统医学的应用受到限制，更多补充或替代治疗的手段就会越来越被需要和认可，目前以益生菌、天然产物、中草药为等主导的新型降血脂疗法因其天然无毒、效果显著、反应温和、来源安全的特点开始被越来越多的医疗学者重视。最早在19世纪70年代，曼恩就发现了发酵奶制品的降脂作用，并认为降血脂的机制是由于醋酸酯(乙酰辅酶A的前体)合成胆固醇被抑制。在这一开创性的研究报道了野生乳酸菌的降胆固醇作用后，大量的研究对乳酸菌的降胆固醇作用进行了研究，特别是乳杆菌和双歧杆菌。但目前国内益生菌的研究还只集中在基础研究，对益生菌降血脂功能的开发力度不够，功能评价路径尚不完善，最终造成我国拥有独立知识产权的优良菌株稀缺，应用在临床上代替或辅助治疗的功能性药物益生菌更是寥寥无几。基于此，建立科学、完整的功能评价体系，筛选出疗效强、活性好的国产专利药物菌株具有重要的社会价值和研究意义。

因此，提供一株动物双歧杆菌NX-6及其在制备降脂减肥药物中的应用是本领域技术人员亟需解决的问题。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了一株动物双歧杆菌NX-6及其在制备降脂减肥药物中的应用。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一株动物双歧杆菌Bifidobacterium animalis NX-6，其保藏编号为CGMCCNo.20114，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，简称 CGMCC，地址北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏日期为2020年06月19日，分类命名为动物双歧杆菌Bifidobacterium animalis。

进一步，所述的一株动物双歧杆菌NX-6在制备降脂减肥药物中的应用。

进一步，所述动物双歧杆菌NX-6为灭活的发酵上清液、菌悬液和细胞破碎物上清液。

进一步，所述动物双歧杆菌NX-6为未灭活的发酵上清液、菌悬液和细胞破碎物上清液。

本发明所述新型动物双歧杆菌NX-6，在体内对斑马鱼表现出良好的减缓体重和体长增长、改善体质量指数(BMI)、降低脂肪面积百分比的作用，具有潜在的减肥功效；同时该菌株能显著降低斑马鱼高血脂模型体内的甘油三酯(TG)和总胆固醇(TC)，表现出良好的降血脂作用。

本发明所述新型动物双歧杆菌NX-6在体内具有减肥、降血脂的作用，包括菌株未灭活与灭活的发酵上清液(胞外分泌物)、菌悬液(菌体)、细胞破碎物上清液(胞内物)。

经由上述的技术方案可知，与现有技术相比，本发明公开提供了一株动物双歧杆菌NX-6及其在制备降脂减肥药物中的应用，新型动物双歧杆菌 NX-6是从健康的婴幼儿新鲜粪便中分离得到的，在体内对斑马鱼表现出良好的减缓体重和体长增长、改善体质量指数(BMI)、降低脂肪面积百分比的作用，同时能显著降低斑马鱼高血脂模型体内的TG和TC，具备应用于减肥、调节血脂水平的潜能，此为利用新型动物双歧杆菌NX-6开发预防或治疗心血管疾病、预防肥胖、高血脂的益生菌制剂提供理论参考和指导依据。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据提供的附图获得其他的附图。

图1为本发明新型动物双歧杆菌NX-6的MALDI-TOF MS蛋白指纹图谱；

图2为本发明新型动物双歧杆菌NX-6形成的菌落形态图；

图3为本发明新型动物双歧杆菌NX-6革兰氏染色后的显微形态观察；

图4为本发明新型动物双歧杆菌NX-6未灭活与灭活的发酵上清液、菌悬液和细胞破碎物上清液对斑马鱼体重的影响；

图5为本发明新型动物双歧杆菌NX-6未灭活与灭活的发酵上清液、菌悬液和细胞破碎物上清液对斑马鱼体长的影响；

图6为本发明新型动物双歧杆菌NX-6未灭活与灭活的发酵上清液、菌悬液和细胞破碎物上清液对斑马鱼BMI的影响；

图7为本发明新型动物双歧杆菌NX-6未灭活与灭活的发酵上清液、菌悬液和细胞破碎物上清液对斑马鱼体内脂肪分布的影响；

图8为本发明新型动物双歧杆菌NX-6未灭活与灭活的发酵上清液、菌悬液和细胞破碎物上清液对斑马鱼体内脂肪面积百分比的影响；

图9为本发明新型动物双歧杆菌NX-6未灭活与灭活的发酵上清液、菌悬液和细胞破碎物上清液对斑马鱼高血脂模型体内甘油三酯的影响；

图10为本发明新型动物双歧杆菌NX-6未灭活与灭活的发酵上清液、菌悬液和细胞破碎物上清液对斑马鱼高血脂模型体内总胆固醇的影响。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1新型动物双歧杆菌NX-6分离、鉴定及保藏

(1)分离：将粪便样本经梯度稀释后，分别接种于BS固体培养基中， 37℃厌氧培养48h-72h，挑取平板上的单菌落划线三代得到纯化后的菌株。将三代划线得到的单克隆接种于BS液体培养基中，37℃厌氧培养12～16h，加入40％甘油，菌液与甘油等体积混合，置于-80℃冰箱中保存。

(2)菌株形态学鉴定：对筛选出的菌株进行酶触试验，观察有无气泡产生。对筛选出的菌株进行革兰氏染色后使用油镜镜检，革兰氏阳性呈紫色，革兰氏阴性呈红色。双歧杆菌可观察到Y型、V型特征。

(3)通过MALDI-TOF MS蛋白指纹图谱对经过形态学鉴定的菌株进行快速质谱鉴定。

(4)菌株的分子生物学鉴定：通过菌落PCR利用16S rDNA通用引物 27F和1492R，对经过质谱鉴定的菌株进行16S rDNA全长片段扩增，对扩增产物进行电泳，得到相应的条带后将扩增产物送往外包公司测序，并将测序结果与NCBI上的标准菌种序列进行比对鉴定。

27F：5’-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3’；SEQ ID NO.1；

1492R：5’-GGTTACCTTGTTACGACTT-3’；SEQ ID NO.2。

实验结果：从广东省广州市婴幼儿新鲜粪便中筛选出的菌株，经形态观察、MALDI-TOF MS蛋白指纹图谱和16S rDNA鉴定，其中菌株NX-6被鉴定为动物双歧杆菌，其16S rDNA序列如SEQ ID NO.3所示；MALDI-TOF MS 蛋白指纹图谱如图1所示。

TCTACTTAGACGGCTCCCCCCACAAGGGTCGGGCCACCGGCTTCGG GTGCTACCCACTTTCATGACTTGACGGGCGGTGTGTACAAGGCCCGGG AACGCATTCACCGCGGCGTTGCTGATCCGCGATTACTAGCGACTCCGCCTTCACGCAGTCGAGTTGCAGACTGCGATCCGAACTGAGACCGGTTTTCA GCGATCCGCCCCACGTCACCGTGTCGCACCGCGTTGTACCGGCCATTGT AGCATGCGTGAAGCCCTGGACGTAAGGGGCATGATGATCTGACGTCAT CCCCACCTTCCTCCGAGTTGACCCCGGCGGTCCCACATGAGTTCCCGGC ATCACCCGCTGGCAACATGCGGCGAGGGTTGCGCTCGTTGCGGGACTT AACCCAACATCTCACGACACGAGCTGACGACGACCATGCACCACCTGT GAACCGGCCCCGAAGGGAAACCGTGTCTCCACGGCGATCCGGCACATG TCAAGCCCAGGTAAGGTTCTTCGCGTTGCATCGAATTAATCCGCATGCT CCGCCGCTTGTGCGGGCCCCCGTCAATTTCTTTGAGTTTTAGCCTTGCG GCCGTACTCCCCAGGCGGGATGCTTAACGCGTTGGCTCCGACACGGGA CCCGTGGAAAGGGCCCCACATCCAGCATCCACCGTTTACGGCGTGGAC TACCAGGGTATCTAATCCTGTTCGCTCCCCACGCTTTCGCTCCTCAGCGT CAGTGACGGCCCAGAGACCTGCCTTCGCCATTGGTGTTCTTCCCGATAT CTACACATTCCACCGTTACACCGGGAATTCCAGTCTCCCCTACCGCACT CCAGCCCGCCCGTACCCGGCGCAGATCCACCGTTAGGCGATGGACTTTC ACACCGGACGCGACGAACCGCCTACGAGCCCTTTACGCCCAATAAATC CGGATAACGCTCGCACCCTACGTATTACCGCGGCTGCTGGCACGTAGTT AGCCGGTGCTTATTCGAACAATCCACTCAACACGGCCGAAACCGTGCC TTGCCCTTGAACAAAAGCGGTTTACAACCCGAAGGCCTCCATCCCGCAC GCGGCGTCGCTGCATCAGGCTTGCGCCCATTGTGCAATATTCCCCACTG CTGCCTCCCGTAGGAGTCTGGGCCGTATCTCAGTCCCAATGTGGCCGGT CACCCTCTCAGGCCGGCTACCCGTCAACGCCTTGGTGGGCCATCACCCC GCCAACAAGCTGATAGGACGCGACCCCATCCCATGCCGCAAAAGCATTTCCCACCCCACCATGCGATGGAGCGGAGCATCCGGTATTACCACCCGTT TCCAGGAGCTATTCCGGTGCACAGGGCAGGTTGGTCACGCATTACTCAC CCGTTCGCCACTCTCACCCCGACAGCAAGCTGCCAGGGATCCCGTTCGACTGCATGTGTAAGCACGCGCAGCG；SEQ ID NO.3。

该菌单菌落接种到BS固体培养基上37℃厌氧生长良好，呈球形、边缘规则的白色菌落(图2)，酶触试验阴性，革兰氏染色呈阳性(图3)。该菌株已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，简称CGMCC，地址北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏日期为2020年06月19日，分类命名为动物双歧杆菌Bifidobacteriumanimalis，保藏编号为CGMCC No.20114。

实施例2新型动物双歧杆菌NX-6发酵上清液(胞外分泌物)、菌悬液 (菌体)和细胞破碎物上清液(胞内物)的制备

将新型动物双歧杆菌NX-6活化培养后接种于BS液体培养基中，37℃培养15h后，调整发酵菌浓度为10⁹CFU/mL，4℃，6000r/min离心10min，得到培养上清液和菌体沉淀，上清液经0.22μm滤膜过滤后得发酵上清液(胞外分泌物)；菌体沉淀经PBS两次洗涤后，将菌体用PBS重新悬浮，调整细胞浓度为10⁹CFU/mL得到菌悬液(菌体)；将菌悬液用超声波破碎仪在冰浴中处理，工作3s、间隔8s，超声破碎15min，12000×g，4℃离心30min，收集上清液，经0.22μm滤膜过滤即为细胞破碎物上清液(胞内物)。发酵上清液(胞外分泌物)、菌悬液(菌体)和细胞破碎物上清液(胞内物)经 100℃加热20min后，制成热灭活的发酵上清液(胞外分泌物)、菌悬液(菌体)和细胞破碎物上清液(胞内物)。

实施例3斑马鱼饲养

洛伐他汀购自上海绿源生物科技有限公司，普通饲料和高胆固醇饲料均购自南通特洛菲饲料科技有限公司。

显微镜下挑选发育正常野生型AB系斑马鱼(5dpf)分为正常组(空白对照组)、模型组(高胆固醇)、阳性对照组(洛伐他汀)、样品(未灭活和灭活的：菌悬液、发酵上清液、细胞破碎物上清液)干预组，每组200条。正常组的斑马鱼喂养普通饲料(每次40mg)；模型组的斑马鱼喂养高胆固醇饲料(每次40mg)；阳性对照组的斑马鱼喂养高胆固醇饲料+洛伐他汀(高胆固醇饲料和洛伐他汀以19：1的重量比例混合，每次40mg)；样品干预组的斑马鱼喂养高胆固醇饲料+样品(高胆固醇饲料和样品以19：1的重量比混合，冷冻干燥，每次40mg)；每天喂养3次，喂养周期为15天。

实施例4斑马鱼体长和体重测量

用0.008％三卡因将斑马鱼麻醉后，用吸水纸吸干体表多余的水分，然后在电子天平上进行体重的称量(图4)，以及在显微镜下进行体长测量(图5)，并记录下数据；进而计算BMI(图6)。

采用SPSS 19.0软件统计处理数据，实验数据均用x±SEM数据表示，用单因素方差分析。各实验组组与模型对照组比较：*P<0.05，**P<0.01， ***P<0.005。

由图4、5、6可知，与空白对照组(0.72±0.04mg、5.57±0.23mm、0.0244 ±0.0026)相比，模型组斑马鱼的体重、体长和BMI(1.84±0.13mg、7.24 ±0.27mm、0.0369±0.0039)均显著增加，说明本次斑马鱼肥胖模型建立成功。

由图4、5、6可知，新型动物双歧杆菌NX-6未灭活的发酵上清液、菌悬液、细胞破碎物上清液组斑马鱼的体重分别为0.88±0.04mg、0.90±0.05mg、 0.83±0.03mg，体长分别为6.05±0.15mm、6.09±0.25mm、5.84±0.23mm，BMI分别为0.0246±0.0021、0.0252±0.0023、0.0252±0.0019，与模型组(1.84 ±0.13mg、7.24±0.27mm、0.0369±0.0039)相比差异性显著。另外，新型动物双歧杆菌NX-6灭活的发酵上清液、菌悬液、细胞破碎物上清液组斑马鱼的体重分别0.87±0.04mg、1.06±0.05mg、0.91±0.03mg，体长分别为6.03 ±0.24mm、6.45±0.24mm、6.09±0.18mm，BMI分别为0.0247±0.0019、 0.0256±0.0028、0.0254±0.0025，与模型组(1.84±0.13mg、7.24±0.27mm、 0.0369±0.0039)相比也均差异性显著。因此，上述结果表明新型动物双歧杆菌NX-6未灭活与灭活的发酵上清液、菌悬液、细胞破碎物上清液均具有减肥的作用。

实施例5斑马鱼整体油红O染色

1)固定：用PBS缓冲液冲洗幼鱼2次后，将幼鱼收集于2mL离心管中，加入1mL 4％多聚甲醛溶液，放入4℃冰箱中固定3天；

2)渗透：将离心管中固定的幼鱼置于6孔板中，用PBS缓冲液冲洗2次，在60℃摇床中依次用40％、60％、80％、100％1,2-丙二醇浸泡斑马鱼20min；

3)染色：加入新鲜配制0.5％油红O染液3mL，在常温避光染色12h，用PBS缓冲液清洗2次，每次1min，加入100％1,2-丙二醇去背景色；

5)显微镜下观察脂肪在斑马鱼体内沉积分布情况并拍照记录，结果见图 7。

6)使用Image-Pro-Plus 6.0软件对幼鱼的脂肪面积进行计算，脂肪面积百分比(％)＝脂肪面积/幼鱼总面积×100％。

采用SPSS 19.0软件统计处理数据，实验数据均用x±SEM数据表示，用单因素方差分析。各实验组组与模型对照组比较：*P<0.05，**P<0.01，***P <0.005。

图7斑马鱼整体油红O染色结果显示：正常组(空白对照组)斑马鱼腹部仅有少量脂滴分布，同时尾部血管基本无脂滴分布，脂肪面积百分比为5.99 ±0.24％(图8)。模型组斑马鱼腹部可见大量红色脂滴，而且尾部血管也可见红色脂滴；同时模型组斑马鱼的脂肪面积百分比为18.31±0.58％，与空白对照组(5.99±0.24％)相比较差异性显著(P<0.005)，说明本次斑马鱼肥高血脂模型建立成功。

由图7、8可知，洛伐他汀组斑马鱼也仅有少量脂滴分布，尾部血管也基本无脂滴分布，与正常组相似；另外，与模型组(18.31±0.58％)相比，洛伐他汀组斑马鱼的脂肪面积百分比(7.30±0.38％)显著减少(P<0.005)。因此，洛伐他汀具有降血脂的作用，与临床结果一致。新型动物双歧杆菌NX-6 未灭活的发酵上清液、菌悬液、细胞破碎物上清液组斑马鱼腹部仅有少量脂滴分布，尾部血管基本无脂滴分布；同时新型动物双歧杆菌NX-6未灭活的发酵上清液、菌悬液、细胞破碎物上清液组斑马鱼的脂肪面积百分比分别为8.68 ±0.82％、11.60±0.50％、11.04±0.44％，与模型组(18.31±0.58％)相比较均差异性显著(P<0.005)。另外，新型动物双歧杆菌NX-6灭活的发酵上清液、细胞破碎物上清液组斑马鱼腹部也仅有少量脂滴分布，尾部血管也基本无脂滴分布；灭活的菌悬液组有大量脂滴分布在斑马鱼腹部，但是几乎没有脂滴分布在尾部血管中。同时新型动物双歧杆菌NX-6灭活的发酵上清液、菌悬液、细胞破碎物上清液组斑马鱼的脂肪面积分别为10.62±0.56％、13.75± 0.76％、12.22±0.95％，与模型组(18.31±0.58％)相比均差异性显著(P< 0.005)。因此，上述结果表明新型动物双歧杆菌NX-6未灭活与灭活的发酵上清液、菌悬液、细胞破碎物上清液均具有降血脂的作用。

实施例6斑马鱼体内甘油三酯(TG)和总胆固醇(TC)测定

收集斑马鱼至1.5mL离心管，每个实验组收集3管；将离心管中的水吸干后，按照质量(mg)：体积(μL)为1∶9加入PBS缓冲液，将离心管用超声波破碎仪在冰浴中处理，工作5s、间隔8s，超声破碎10次，12000×g， 4℃离心10min，收集上清液。使用甘油三酯(TG)试剂盒(Sigma-Aldrich) 和总胆固醇(TC)试剂盒(Sigma-Aldrich)检测各组斑马鱼体内的甘油三酯 (图9)和总胆固醇(图10)浓度。

采用SPSS 19.0软件统计处理数据，实验数据均用x±SEM数据表示，用单因素方差分析。各实验组组与模型对照组比较：*P<0.05，**P<0.01，***P <0.005。

由图9、10可知，与空白对照组(0.08±0.01mmol/gprot、0.09±0.01 mmol/gprot)相比，模型组斑马鱼体内的甘油三酯和总胆固醇(0.29±0.02 mmol/gprot、0.27±0.01mmol/gprot)均显著增加(P<0.005)，说明本次斑马鱼高血脂模型建立成功。

由图9、10可知，洛伐他汀组斑马鱼的甘油三酯和总胆固醇分别为0.11 ±0.01mmol/gprot、0.12±0.01mmol/gprot，与模型组(0.29±0.02mmol/gprot、 0.27±0.01mmol/gprot)相比差异性显著(P<0.005)。因此，洛伐他汀具有降血脂的作用，与临床结果一致。新型动物双歧杆菌NX-6未灭活的发酵上清液、菌悬液、细胞破碎物上清液组斑马鱼的甘油三酯分别为0.15±0.01 mmol/gprot、0.21±0.01mmol/gprot、0.16±0.01mmol/gprot，总胆固醇分别为 0.16±0.01mmol/gprot、0.17±0.01mmol/gprot、0.18±0.01mmol/gprot，与模型组(0.29±0.02mmol/gprot、0.27±0.01mmol/gprot)相比差异性显著(P< 0.005)。另外，新型动物双歧杆菌NX-6灭活的发酵上清液、菌悬液、细胞破碎物上清液组斑马鱼的甘油三酯分别为0.19±0.01mmol/gprot、0.23±0.01 mmol/gprot、0.21±0.01mmol/gprot，总胆固醇分别为0.17±0.01mmol/gprot、 0.19±0.01mmol/gprot、0.20±0.01mmol/gprot，与模型组(0.29±0.02 mmol/gprot、0.27±0.01mmol/gprot)相比差异性显著(P<0.005)。上述结果表明新型动物双歧杆菌NX-6未灭活与灭活的发酵上清液、菌悬液、细胞破碎物上清液均具有降血脂的作用。

对所公开的实施例的上述说明，使本领域专业技术人员能够实现或使用本发明。对这些实施例的多种修改对本领域的专业技术人员来说将是显而易见的，本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下，在其它实施例中实现。因此，本发明将不会被限制于本文所示的这些实施例，而是要符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的最宽的范围。

序列表

<110> 广东南芯医疗科技有限公司 佛山市朗芯生物科技有限公司

<120> 一株动物双歧杆菌NX-6及其在制备降脂减肥药物中的应用

<160> 3

<170> SIPOSequenceListing 1.0

<210> 1

<211> 20

<212> DNA

<213> Artificial Sequence

<400> 1

agagtttgat cctggctcag 20

<210> 2

<211> 19

<212> DNA

<213> Artificial Sequence

<400> 2

ggttaccttg ttacgactt 19

<210> 3

<211> 1433

<212> DNA

<213> Artificial Sequence

<400> 3

tctacttaga cggctccccc cacaagggtc gggccaccgg cttcgggtgc tacccacttt 60

catgacttga cgggcggtgt gtacaaggcc cgggaacgca ttcaccgcgg cgttgctgat 120

ccgcgattac tagcgactcc gccttcacgc agtcgagttg cagactgcga tccgaactga 180

gaccggtttt cagcgatccg ccccacgtca ccgtgtcgca ccgcgttgta ccggccattg 240

tagcatgcgt gaagccctgg acgtaagggg catgatgatc tgacgtcatc cccaccttcc 300

tccgagttga ccccggcggt cccacatgag ttcccggcat cacccgctgg caacatgcgg 360

cgagggttgc gctcgttgcg ggacttaacc caacatctca cgacacgagc tgacgacgac 420

catgcaccac ctgtgaaccg gccccgaagg gaaaccgtgt ctccacggcg atccggcaca 480

tgtcaagccc aggtaaggtt cttcgcgttg catcgaatta atccgcatgc tccgccgctt 540

gtgcgggccc ccgtcaattt ctttgagttt tagccttgcg gccgtactcc ccaggcggga 600

tgcttaacgc gttggctccg acacgggacc cgtggaaagg gccccacatc cagcatccac 660

cgtttacggc gtggactacc agggtatcta atcctgttcg ctccccacgc tttcgctcct 720

cagcgtcagt gacggcccag agacctgcct tcgccattgg tgttcttccc gatatctaca 780

cattccaccg ttacaccggg aattccagtc tcccctaccg cactccagcc cgcccgtacc 840

cggcgcagat ccaccgttag gcgatggact ttcacaccgg acgcgacgaa ccgcctacga 900

gccctttacg cccaataaat ccggataacg ctcgcaccct acgtattacc gcggctgctg 960

gcacgtagtt agccggtgct tattcgaaca atccactcaa cacggccgaa accgtgcctt 1020

gcccttgaac aaaagcggtt tacaacccga aggcctccat cccgcacgcg gcgtcgctgc 1080

atcaggcttg cgcccattgt gcaatattcc ccactgctgc ctcccgtagg agtctgggcc 1140

gtatctcagt cccaatgtgg ccggtcaccc tctcaggccg gctacccgtc aacgccttgg 1200

tgggccatca ccccgccaac aagctgatag gacgcgaccc catcccatgc cgcaaaagca 1260

tttcccaccc caccatgcga tggagcggag catccggtat taccacccgt ttccaggagc 1320

tattccggtg cacagggcag gttggtcacg cattactcac ccgttcgcca ctctcacccc 1380

gacagcaagc tgccagggat cccgttcgac tgcatgtgta agcacgcgca gcg 1433

Claims (4)

1.一株动物双歧杆菌Bifidobacterium animalis NX-6，其特征在于，其保藏编号为CGMCC No.20114。

2.权利要求1所述的一株动物双歧杆菌NX-6在制备降脂减肥药物中的应用。

3.根据权利要求2所述的一株动物双歧杆菌NX-6在制备降脂减肥药物中的应用，其特征在于，所述动物双歧杆菌NX-6为灭活的发酵上清液、菌悬液和细胞破碎物上清液。

4.根据权利要求2所述的一株动物双歧杆菌NX-6在制备降脂减肥药物中的应用，其特征在于，所述动物双歧杆菌NX-6为未灭活的发酵上清液、菌悬液和细胞破碎物上清液。

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