CN111587964A - 阿魏酸酯酶制剂、复合酶制剂以及蛋鸡复合饲料 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种阿魏酸酯酶制剂，该酶制剂是以阿魏酸酯酶马克斯克鲁维酵母重组菌株，通过高密度发酵获得液体酶，然后加入玉米淀粉、玉米芯粉或麦芽糊精载体进行喷雾干燥制得。本发明提供的阿魏酸酯酶复合酶制剂能够显著提高饲料的利用率，提高蛋白、淀粉以及非淀粉多糖(NSP)的消化率。本发明还提供了一种含阿魏酸酯酶的蛋鸡复合饲料，该复合饲料可以提高蛋鸡的产蛋率，降低蛋鸡的料蛋比。

Description

阿魏酸酯酶制剂、复合酶制剂以及蛋鸡复合饲料

技术领域

本发明属于生物工程技术领域，涉及酶制剂及其应用，具体涉及一种阿魏酸酯酶制剂、 含有该阿魏酸酯酶制剂的复合酶制剂以及前述酶制剂在制备蛋鸡复合饲料中的应用。

背景技术

非淀粉多糖(non-starch polysaccharides，NSP)是指淀粉以外的多糖，主要有纤维 素、半纤维素、果胶、葡聚糖、菊粉、海藻多糖以及几丁质等，在小麦、大麦玉米等谷物中，NSP以纤维素、半纤维素和果胶为主，是人和动物膳食纤维的一部分。

在饲料中，半纤维素是一类主要抗营养因子，在动物肠道中会与水分子相互结合缠在一 起成为网状胶质结构，增加食糜的黏度，减低脂肪、蛋白质、碳水化合物以及其它营养物的 消化吸收，甚至能够影响动物的健康。在饲料中添加降解非淀粉多糖的水解酶，不仅能够将 降低食糜的黏度，而且非淀粉多糖的降解能够为动物提供额外的营养，改善肠道菌群，从而 提高营养物质消化率、改善动物健康、提高生产性能。

饲料中的半纤维素主要包含木聚糖、甘露聚糖、阿拉伯聚糖以及阿魏酸等，在这些成分 当中，阿魏酸是一个关键的消化拮抗因素：在木质纤维素中它通过酯键将纤维素、木聚糖和 木质素相互紧密交联，从而阻碍酶的水解。半纤维素的降解需要多种酶的协同参与，主要包 括木聚糖酶、甘露聚糖酶、半乳糖苷酶、阿拉伯糖苷酶以及阿魏酸酯酶等等。其中，阿魏酸 酯酶(feruloyl esterases，EC 3.1.1.73)又称为肉桂酸酯酶，是羧酸酯水解酶的一个亚 类，其能够水解阿魏酸等酚酸与半纤维素、木质素等之间的酯键，打破植物细胞壁中的致密 网状结构，使纤维素暴露，提高纤维素的降解率，同时还释放出阿魏酸。

阿魏酸具有很强的抗氧化、抗炎症作用，广泛应用于食品添加剂和药品中，在机体内可 以清除自由基，促进清除自由基的酶的产生，增加谷胱甘肽转硫酶和醌还原酶的活性，有较 强的抗血小板聚集、抗血栓形成、抗心龇缺血等作用，并抑制酪氨酸酶活性，来调节机体生 理机能。若在饲料中添加阿魏酸酯酶，则不仅能够促进非淀粉多糖的水解提高饲料的利用率， 而且能够在酸性条件下水解释放阿魏酸，提高饲料的营养价值。

然而，现有技术中，虽然已经从多种微生物中可以发现或分离得到阿魏酸酯酶，如橄榄 色链霉菌Streptomyces olivochromogenes、荧光假单胞菌Pseudomonasfluorescens、嗜 松青霉Penicillium pinophilum、裂褶菌Penicillium pinophilum以及黑曲霉Aspergillus niger等，但是这些菌株的阿魏酸酯酶表达量较低，其中产酶量最高的菌株黑曲霉表达量仅 为10.6U/mL，并不能达到作为饲料添加剂的需求；目前，国内外也未有将阿魏酸酯酶产品 的应用于饲料添加的报道。

发明内容

本发明是为了解决上述问题而进行的，目的在于提供一种表达量高、能够应用于饲料添 加的阿魏酸酯酶产品，同时提供含有该阿魏酸酯酶产品的蛋鸡复合饲料。

作为一种实施形态，本发明提供了一种阿魏酸酯酶制剂，其特征在于，利用重组表达阿 魏酸酯酶的马克斯克鲁维酵母菌株制备得到。

上述阿魏酸酯酶制剂中还可以具有这样的技术特征，其中，利用重组表达阿魏酸酯酶的 马克斯克鲁维酵母菌株制备的过程包括如下步骤：

i)采用阿魏酸酯酶重组马克斯克鲁维酵母菌株通过高密度发酵获得阿魏酸酯酶液体 酶；

ii)在阿魏酸酯酶液体酶中添加10-20％的载体，该载体为玉米淀粉、玉米芯粉或麦芽 糊精中的一种或任意几种的组合；

iii)喷雾干燥获得阿魏酸酯酶制剂。

作为另一种实施形态，本发明提供了一种阿魏酸酯酶复合酶制剂，其特征在于，含有纤 维素酶、木聚糖酶和阿魏酸酯酶，其中，阿魏酸酯酶为如上任一项所述的阿魏酸酯酶制剂。

上述阿魏酸酯酶复合酶制剂中还可以具有这样的技术特征，其中，以酶活计，每克阿魏 酸酯酶复合酶制剂含有纤维素酶1000-3000U、木聚糖酶20000-40000U、阿魏酸酯酶制剂 100000-300000U。进一步，以酶活计，每克阿魏酸酯酶复合酶制剂可以含有纤维素酶2000U、 木聚糖酶30000U、阿魏酸酯酶制剂200000U。

上述阿魏酸酯酶复合酶制剂中还可以含有α-淀粉酶、甘露聚糖酶、α-半乳糖苷酶以及 植酸酶中的一种或任意几种的组合。进一步，α-淀粉酶、甘露聚糖酶、α-半乳糖苷酶以及 植酸酶的含量可以分别为6500U/g、1250U/g、1000U/g、5000U/g。

作为又一种实施形态，本发明还提供了一种蛋鸡复合饲料，其特征在于，含有蛋鸡日粮 以及如上任一项所述的阿魏酸酯酶复合酶制剂。

上述蛋鸡复合饲料中还可以具有这样的技术特征，其中，阿魏酸酯酶复合酶制剂的添加 量为每吨蛋鸡日粮中添加200-1000克。

发明的作用与效果

根据本发明所提供的阿魏酸酯酶制剂、复合酶制剂以及蛋鸡饲料，由阿魏酸酯酶制剂采 用重组表达阿魏酸酯酶的马克斯克鲁维酵母菌株制备得到，该菌株的表达酶活高，且容易实 现高密度发酵，因此能够采用简单的工艺制得高酶活的阿魏酸酯酶制剂。相应地，利用该阿 魏酸酯酶制剂制得的复合酶制剂也具有良好的酶活且工艺简单，而采用该阿魏酸酯酶制剂制 得的蛋鸡饲料能够显著提高饲料原料的蛋白、淀粉以及非淀粉多糖的利用率，降低肠道食糜 的黏度，并释放抗氧化物质阿魏酸，提高蛋鸡的产蛋率。

附图说明

图1为本发明实施例1的马克斯克鲁维酵母重组菌的高密度发酵制备阿魏酸酯酶的结 果。

图2为本发明实施例3的阿魏酸酯酶复合酶制剂的体外仿生试验结果柱形图。

图3为本发明实施例4的含阿魏酸酯酶的蛋鸡复合饲料喂食效果柱形图。

具体实施方式

为了使本发明实现的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解，以下结合实 施例及附图对本发明作具体阐述。应理解，这些实施例仅用于说明本发明，而不用于限制本 发明的范围。

下述各实施例中，未注明来源的试剂、试剂盒等经由一般商业途径购得，未注明的实验 操作过程及条件参照本领域常规进行。

实施例中，重组表达阿魏酸酯酶的马克斯克鲁维酵母菌株为Fim-1-AnfeaA，该菌株是 将来源于黑曲霉(Aspergillus niger)阿魏酸酯酶AnfaeA基因经优化后转入马克斯克鲁维 酵母获得，具体获得过程如下：

1、获取优化后AnfaeA基因核苷酸序列

参照马克斯克鲁维酵母的密码子偏好性，在不改变氨基酸序列的前提下将来源于黑曲霉 (Aspergillus niger)的阿魏酸酯酶AnfaeA基因核苷酸序列进行密码子优化。其中，来源 于黑曲霉的阿魏酸酯酶AnfaeA基因核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，优化后AnfaeA基因核 苷酸序列如SEQ ID No.2所示，优化后对应的氨基酸序列如SEQ ID No.3所示。

2、构建黑曲霉来源的阿魏酸酯酶AnfaeA马克斯克鲁维酵母重组表达载体

以合成的AnfaeA DNA为模板，用引物AnfaeA-132-F(序列如SEQ ID No.4所示)和AnfaeA-132-R(序列如SEQ ID No.5所示)PCR扩增AnfaeA基因。PCR的过程参照PhantaSuper Fidelity DNA Polymerase的产品说明进行(Vazyme,货号P505-d1/d2/d3)。按照SanPrep 柱式DNA胶回收试剂盒(生工，货号B518131-0050)的说明书操作，对PCR产物进行回收， 即得AnfaeA基因片段。用限制性酶Sma I和Not I对马克斯克鲁维酵母表达载体pUKDN132 进行双酶切，酶切产物经过1％琼脂糖凝胶电泳后，用SanPrep柱式DNA胶回收试剂盒回收 11kb左右的载体片段。采用Gibson Assembly无痕连接系统(NEB公司，货号E2611S/L)， 将AnfaeA基因片段与载体片段进行连接，获得黑曲霉来源的阿魏酸酯酶AnfaeA马克斯克鲁 维酵母重组表达载体132-AnfaeA。重组载体包括酵母自主复制序列、菊粉酶启动子、黑曲 霉来源的阿魏酸酯酶AnfaeA基因、菊粉酶终止子、筛选标记基因URA3，其具体序列如SEQ ID No.6所示。

3、构建马克斯克鲁维酵母重组菌株FIM-AnfaeA

本发明采用的酵母表达宿主菌株来源于马克斯克鲁维酵母菌FIM-1(保藏于中国微生物 菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.10621，保藏单位代码： CGMCC，保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期为2015年3月13 日，分类命名：马克斯克鲁维酵母Kluyveromyces marxianus)，通过同源重组的方法敲除URA3基因，并利用含有5氟乳清酸(1.5g/L)的YPD筛选获得尿嘧啶缺陷的表达宿主菌，被命名为马克斯克鲁维酵母FIM-1(Δura3)。

采用醋酸锂转化法(World Journal of Microbiology&Biotechnology 16:653-654, 2000)，将132-AnfaeA转入FIM-1(Δura3)中。将转化后的产物涂布于SD平板(0.67％无 氨基酸酵母氮源、2％葡萄糖、2％琼脂)，将平板放置30℃恒温培养箱培养，培养2-4天直至克隆形成，即得重组表达阿魏酸酯酶的马克斯克鲁维酵母菌株Fim-1-AnfeaA。

实施例1马克斯克鲁维酵母制备阿魏酸酯酶液体酶

将甘油管保存的重组表达阿魏酸酯酶马克斯克鲁维酵母菌株Fim-1-AnfeaA接种于YPD 固体培养基上，30℃培养2天进行活化。挑取3-5个单克隆转接于含300mL的YPD培养基 中，30℃振荡(180-220rpm)培养18-24h，重组酵母的细胞密度OD_600nm达到15-20制备得到种子液。种子液按照10％的比例接种到装有30L培养基的100升发酵罐中发酵过程中通风并搅拌，罐压控制在0.1MPa左右，补料采用全料流加方式，溶解氧控制在20-30％，同时控制温度在30-35℃，pH值控制在5.5-6.0之间，发酵时间控制在72h。

阿魏酸酯酶的测定方法如下：取20μL稀释酶液、170μL PBST80％NaCl,2％KCl,14.2％ Na₂HPO₄,2.7％KH₂PO₄,2.5％Triton X-100,pH6.4)和10μL 10mM 2-氯-4硝基苯酚阿魏酸 酯((2-chloro-4-nitrophenylferulate，CNPF)混合均匀，在37℃水浴中反应20min，结 束后立即用BioTeck EON酶标仪测定OD_410nm吸光值，测定后的OD值，以CNP标准曲线计算 发酵液中阿魏酸酯酶酶活，每分钟水解产生1nM CNP定义为1个酶活单位(U)。

图1为本发明实施例1的马克斯克鲁维酵母重组菌的高密度发酵制备阿魏酸酯酶的结 果。图1A为马克斯克鲁维酵母重组菌发酵过程的阿魏酸酯酶产量折线图，其中横坐标为发 酵时间(h)，纵坐标为酶活(U/ml)；图1B是马克斯克鲁维酵母重组菌发酵过程上清中阿魏 酸酯酶的SDS-PAGE电泳检测结果图，其中39KDa附近的条带为阿魏酸酯酶AnfeaA。

如图1所示，经过72小时的高密度发酵，在马克斯克鲁维酵母菌株Fim-1-AnfeaA的发 酵上清液中，以酶活计AnfeaA的产量能够达到20万U/ml，以电泳结果经BSA灰度扫描法计算得到的蛋白含量计，AnfeaA的产量能够达到10g/L左右。

实施例2阿魏酸酯酶制剂的制备

重组菌株Fim-1-AnfeaA发酵液通过板框压滤法分离菌体和上清，收集的上清加入20-25％质量百分比的玉米淀粉、玉米芯粉和麦芽糊精混合载体，搅拌混匀后进行喷雾干燥， 得到阿魏酸酯酶制剂。其中，干燥过程进风温度为160-170℃，排风温度70-80℃，进料速 率在3-4L/h。

干燥后，测定阿魏酸酯酶制剂的酶活在40-50万U/g，酶活收率在80％左右。

实施例3阿魏酸酯酶制剂的体外消化仿生试验

称取2.0g蛋鸡饲料，加入4U/g的木聚糖酶和30-300U/g阿魏酸酯酶，置于50ml三角锥形瓶中，加入2.0ml pH2.0的胃蛋白酶消化液，再加入8ml pH0.88的盐酸缓冲液至终消化体系为10ml，用封口膜封住锥形瓶口，将锥形瓶置于恒温水浴摇床中震荡消化45分钟进行胃阶段消化。胃消化结束后取出锥形瓶，加入1.5ml胰蛋白酶消化液，将锥形瓶内消化液无损转移到透析袋内，再加入8.5ml pH6.5的磷酸缓冲液，将透析袋两段封紧，放入到含pH6.5磷酸缓冲液的300ml烧杯中，将烧杯置于恒温水浴摇床中震荡消化4.0小时进行肠阶段消化。

肠阶段消化结束后，将透析袋内消化液无损转移到烘干称重的滤纸上过滤，过滤完后烘 干称重，计算干物质消化率，检测残渣中蛋白、淀粉和NSP含量，计算干物质、蛋白、淀粉 和NSP的消化率。

图2为本发明实施例3的阿魏酸酯酶复合酶制剂的体外仿生试验结果柱形图。图2中， 各物质的消化率柱形图从左往右依次为4U/g木聚糖酶、4U/g木聚糖酶+30U/g阿魏酸酯酶、 4U/g木聚糖酶+150U/g阿魏酸酯酶以及4U/g木聚糖酶+300U/g阿魏酸酯酶。

如图2所示，添加阿魏酸酯酶能够显著提高蛋白、淀粉和NSP的消化率，并且在 30-300U/g范围内，随着阿魏酸酯酶剂量的增加，蛋白、淀粉和NSP的消化率也呈升明显的 升高趋势。添加300U/g阿魏酸酯酶时，干物质消化率提高10％，蛋白消化率提高约2％左右， 淀粉消化率提高14％左右，而非淀粉多糖NSP的消化率能从1％提高到13.6，说明蛋鸡日粮 中添加阿魏酸酯酶能显著提高饲料的利用率。

实施例4添加阿魏酸酯酶复合酶制剂的蛋鸡复合饲料的蛋鸡喂食效果

选用体重均匀产蛋率接近的24周龄白来航蛋鸡96只，随机分成个4处理组，每组3个重复，每重复8只，采用三层层叠式笼养(4只/笼，2笼/重复)，试验为期49天，试验 设计见表1。

表1试验分组

试验日粮和营养水平：参照美国NRC(1994)蛋鸡营养标准配制成全价粉状料，饲料中 未添加任何抗生素，试验日粮见表2。

表2饲料组成与营养水平(风干基础)

表2中：

注1：预混料为每kg日粮提供；按蛋鸡体重每kg计，含有：VA 3000IU，VD₃ 2400IU，VE 16IU，VK₃ 2mg，硫胺素(VB₁,thiamine)1.6mg，核黄素(VB_2,riboflavin)6.5mg， 烟酸Niacin 28mg，氯化胆碱choline chloride 450mg，泛酸钙D-Calcium pantothenate 9mg，吡哆醇(VB₆,pyridoxin)3.25mg，生物素Biotin 0.07mg，叶酸Folic acid 0.8 mg，氰钴胺素(VB₁₂,cobalamin)0.015mg，铁Fe(as ferrous of sulfate)267.5mg， 铜Cu(as coppersulfate)13mg，锰Mn(as manganese sulfate)95mg，锌Zn(as zinc sulfate)90mg，碘I1.35mg，硒Se(as sodium selenite)0.29mg。

注2：营养水平为计算值。

蛋鸡饲养试验采用人工光照和自然光照相结合的方式，每天保持16h光照 (05:00-21:00)，光照强度10-15LX，机械通风+自然通风，室温22-25℃，湿度40％-60％。 每天喂料两次(8:30,15:30)，喂料量以每天基本不剩料为标准，并记录喂料时间点舍内温 湿度。每日16:30捡蛋，捡蛋后分别进行记数、标记、存放。定期清理粪便，按照常规免疫 程序进行免疫接种。预试验期间，观察蛋鸡的产蛋率，并对各组进行调整，使各组间产蛋率 无统计学差异。整个试验期间自由采食和饮水。试验过程中，记录蛋重、产蛋个数、计算平 均蛋重、产蛋率(包括破损蛋)、平均日采食量、料蛋比(包括破损蛋)。

图3为本发明实施例4的含阿魏酸酯酶的蛋鸡复合饲料喂食效果柱形图。图3中，每周 的产蛋率柱形图从左至右依次为对照组、10U/kg阿魏酸酯酶、50U/kg阿魏酸酯酶、100U/kg 阿魏酸酯酶。

如图3所示，在蛋鸡饲料中加入30-300U/g的阿魏酸酯酶并喂食7周后，蛋鸡的产蛋率 提升5％以上，并且每克饲料中添加300U/g阿魏酸酯酶的蛋鸡产蛋率提升的效果更明显，第 五、六周的产蛋率能提高10％左右。

实施例的作用与效果

根据上述实施例，由于阿魏酸酯酶制剂采用重组表达阿魏酸酯酶的马克斯克鲁维酵母菌 株制备得到，该菌株的表达酶活高，且容易实现高密度发酵，因此能够采用简单的工艺制得 高酶活的阿魏酸酯酶制剂。相应地，利用该阿魏酸酯酶制剂制得的复合酶制剂也具有良好的 酶活且工艺简单。

根据实施例1可知，采用马克斯克鲁维酵母菌株Fim-1-AnfeaA进行发酵，AnfeaA的产量能够达到20万U/ml、10g/L，因此其能够高效地获得高酶活的阿魏酸酯酶液体酶，适 用于大规模生产。

根据实施例2可知，制备阿魏酸酯酶制剂时，加入20％-25％的混合载体并进行喷雾干燥， 酶活回收率可达80％，说明加入载体并喷雾干燥的方法能够很好地保留酶活。

根据实施例3～4的结果可知，蛋鸡日粮添加阿魏酸酯酶复合酶制剂从而制得蛋鸡饲料 时，其能够显著提高饲料原料的蛋白、淀粉以及非淀粉多糖的利用率，降低肠道食糜的黏度， 并释放抗氧化物质阿魏酸，提高蛋鸡的产蛋率。

另外，实施例的阿魏酸酯酶复合酶制剂含有阿魏酸酯酶以及木聚糖酶，但将复合酶制剂 中的木聚糖酶替换为其他同类酶同样可以提升消化率的效果，即，复合酶制剂中除了阿魏酸 酯酶以外还可以含有纤维素酶、木聚糖酶或二者的组合，复合酶制剂中各种酶的适宜添加量 为维素酶1000-3000U、木聚糖酶20000-40000U、阿魏酸酯酶制剂100000-300000U。

进一步，实施例的蛋鸡饲料除了阿魏酸酯酶复合酶制剂以外还可以含有其他适用于作为 饲料添加剂的酶类，例如，还可以含有α-淀粉酶、甘露聚糖酶、α-半乳糖苷酶以及植酸酶 中的任意一种或几种的组合。参照现有技术中的常见添加量，α-淀粉酶、甘露聚糖酶、α- 半乳糖苷酶以及植酸酶的含量可以分别设置为6500U/g、1250U/g、1000U/g、5000U/g，或者这些含量±20％范围内的任意一个其他含量。

以上对本发明的具体实施例进行了详细描述，但其只是作为范例，本发明并不限制于以 上描述的具体实施例。对于本领域技术人员而言，任何对本发明进行的等同修改和替代也都 在本发明的范畴之中。因此，在不脱离本发明的精神和范围下所作的均等变换和修改，都应 涵盖在本发明的范围内。

序列表

<110> 复旦大学

武汉新华扬生物股份有限公司

<120> 阿魏酸酯酶制剂、复合酶制剂以及蛋鸡复合饲料

<160> 6

<170> SIPOSequenceListing 1.0

<210> 1

<211> 783

<212> DNA

<213> 黑曲霉(Aspergillus niger)

<400> 1

gcctccacgc aaggcatctc cgaagacctc tacaatcgct tggtagagat ggccactatc 60

tcccaagccg cctacgccga cctatgcaat attccatcga ctattatcaa aggagagaaa 120

atttacaacg ctcaaactga tatcaacgga tggatcctcc gcgacgacac cagcaaagaa 180

attatcaccg tcttccgtgg cactggcagt gacacaaacc tacagctcga tactaactac 240

acgctcacgc cattcgacac tctacctcaa tgcaacgatt gcgaggtaca cggtggatac 300

tatattggat ggatctcagt ccaagaccaa gtcgagtcgc ttgtcaaaca acaggctagc 360

cagtatccgg actatgcgct taccgtgaca ggccatagtc tgggagcgtc gatggcagca 420

ctcactgccg cccagctgtc cgcgacatac gacaacgtcc gtctgtacac attcggcgaa 480

ccgcgcagcg gcaaccaggc cttcgcgtcg tacatgaacg atgcgttcca ggtctcgagc 540

ccggagacga cccagtactt ccgggtcact cattccaacg acggcatccc aaacttgccc 600

ccggcggacg agggttacgc ccatggtggt gtagagtact ggagcgttga tccttacagc 660

gcccagaaca cgtttgtctg tactggggat gaagtacagt gctgtgaggc acagggcgga 720

cagggggtga atgatgcgca tactacttat tttgggatga cgagcggagc ttgtacttgg 780

taa 783

<210> 2

<211> 783

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial sequence)

<400> 2

gcctctaccc aaggtatctc cgaagacttg tacaacagat tggtcgagat ggccaccatc 60

tctcaagccg cctacgctga cttatgcaac atcccatcca ccatcatcaa gggtgaaaag 120

atttacaacg cccagaccga tatcaacggt tggatcttga gagacgacac ctccaaggag 180

atcatcaccg tcttcagagg taccggttcc gacaccaact tgcagttgga caccaactac 240

accttgaccc cattcgacac cttgccacaa tgcaacgact gtgaagtcca cggtggttac 300

tatatcggct ggatctccgt ccaagaccaa gtcgagtcct tggtcaagca gcaagcttcc 360

caataccccg attacgcttt gaccgtcacc ggtcattctt tgggtgcctc tatggctgct 420

ttgaccgctg ctcaattgtc cgccacctac gacaacgtca gattgtacac cttcggcgag 480

ccaagatctg gtaaccaagc tttcgcctcc tacatgaacg acgccttcca agtttcctct 540

ccagagacca cccagtactt cagagttacc cactccaacg acggcatccc aaacttgcca 600

ccagctgacg aaggttacgc tcatggtggc gttgaatact ggtccgtcga tccatactct 660

gcccaaaaca ccttcgtctg taccggtgat gaggtccaat gctgtgaggc tcaaggtggt 720

caaggtgtta acgacgccca caccacctac ttcggtatga cctccggtgc ttgtacttgg 780

taa 783

<210> 3

<211> 261

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial sequence)

<400> 3

Met Ala Ser Thr Gln Gly Ile Ser Glu Asp Leu Tyr Asn Arg Leu Val

1 5 10 15

Glu Met Ala Thr Ile Ser Gln Ala Ala Tyr Ala Asp Leu Cys Asn Ile

20 25 30

Pro Ser Thr Ile Ile Lys Gly Glu Lys Ile Tyr Asn Ala Gln Thr Asp

35 40 45

Ile Asn Gly Trp Ile Leu Arg Asp Asp Thr Ser Lys Glu Ile Ile Thr

50 55 60

Val Phe Arg Gly Thr Gly Ser Asp Thr Asn Leu Gln Leu Asp Thr Asn

65 70 75 80

Tyr Thr Leu Thr Pro Phe Asp Thr Leu Pro Gln Cys Asn Asp Cys Glu

85 90 95

Val His Gly Gly Tyr Tyr Ile Gly Trp Ile Ser Val Gln Asp Gln Val

100 105 110

Glu Ser Leu Val Lys Gln Gln Ala Ser Gln Tyr Pro Asp Tyr Ala Leu

115 120 125

Thr Val Thr Gly His Ser Leu Gly Ala Ser Met Ala Ala Leu Thr Ala

130 135 140

Ala Gln Leu Ser Ala Thr Tyr Asp Asn Val Arg Leu Tyr Thr Phe Gly

145 150 155 160

Glu Pro Arg Ser Gly Asn Gln Ala Phe Ala Ser Tyr Met Asn Asp Ala

165 170 175

Phe Gln Val Ser Ser Pro Glu Thr Thr Gln Tyr Phe Arg Val Thr His

180 185 190

Ser Asn Asp Gly Ile Pro Asn Leu Pro Pro Ala Asp Glu Gly Tyr Ala

195 200 205

His Gly Gly Val Glu Tyr Trp Ser Val Asp Pro Tyr Ser Ala Gln Asn

210 215 220

Thr Phe Val Cys Thr Gly Asp Glu Val Gln Cys Cys Glu Ala Gln Gly

225 230 235 240

Gly Gln Gly Val Asn Asp Ala His Thr Thr Tyr Phe Gly Met Thr Ser

245 250 255

Gly Ala Cys Thr Trp

260

<210> 4

<211> 52

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial sequence)

<400> 4

ttacaagaga gacggtgacc ccggggcctc tacccaaggt atctccgaag ac 52

<210> 5

<211> 54

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial sequence)

<400> 5

atcaaagctt gcggccttaa gcggccgctt accaagtaca agcaccggag gtca 54

<210> 6

<211> 11388

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial sequence)

<400> 6

cgtaatcatg tcatagctgt ttcctgtgtg aaattgttat ccgctcacaa ttccacacaa 60

catacgagcc ggaagcataa agtgtaaagc ctggggtgcc taatgagtga gctaactcac 120

attaattgcg ttgcgctcac tgcccgcttt ccagtcggga aacctgtcgt gccagctgca 180

ttaatgaatc ggccaacgcg cggggagagg cggtttgcgt attgggcgct cttccgcttc 240

ctcgctcact gactcgctgc gctcggtcgt tcggctgcgg cgagcggtat cagctcactc 300

aaaggcggta atacggttat ccacagaatc aggggataac gcaggaaaga acatgtgagc 360

aaaaggccag caaaaggcca ggaaccgtaa aaaggccgcg ttgctggcgt ttttccatag 420

gctccgcccc cctgacgagc atcacaaaaa tcgacgctca agtcagaggt ggcgaaaccc 480

gacaggacta taaagatacc aggcgtttcc ccctggaagc tccctcgtgc gctctcctgt 540

tccgaccctg ccgcttaccg gatacctgtc cgcctttctc ccttcgggaa gcgtggcgct 600

ttctcatagc tcacgctgta ggtatctcag ttcggtgtag gtcgttcgct ccaagctggg 660

ctgtgtgcac gaaccccccg ttcagcccga ccgctgcgcc ttatccggta actatcgtct 720

tgagtccaac ccggtaagac acgacttatc gccactggca gcagccactg gtaacaggat 780

tagcagagcg aggtatgtag gcggtgctac agagttcttg aagtggtggc ctaactacgg 840

ctacactaga agaacagtat ttggtatctg cgctctgctg aagccagtta ccttcggaaa 900

aagagttggt agctcttgat ccggcaaaca aaccaccgct ggtagcggtg gtttttttgt 960

ttgcaagcag cagattacgc gcagaaaaaa aggatctcaa gaagatcctt tgatcttttc 1020

tacggggtct gacgctcagt ggaacgaaaa ctcacgttaa gggattttgg tcatgagatt 1080

atcaaaaagg atcttcacct agatcctttt aaattaaaaa tgaagtttta aatcaatcta 1140

aagtatatat gagtaaactt ggtctgacag ttaccaatgc ttaatcagtg aggcacctat 1200

ctcagcgatc tgtctatttc gttcatccat agttgcctga ctccccgtcg tgtagataac 1260

tacgatacgg gagggcttac catctggccc cagtgctgca atgataccgc gagacccacg 1320

ctcaccggct ccagatttat cagcaataaa ccagccagcc ggaagggccg agcgcagaag 1380

tggtcctgca actttatccg cctccatcca gtctattaat tgttgccggg aagctagagt 1440

aagtagttcg ccagttaata gtttgcgcaa cgttgttgcc attgctacag gcatcgtggt 1500

gtcacgctcg tcgtttggta tggcttcatt cagctccggt tcccaacgat caaggcgagt 1560

tacatgatcc cccatgttgt gcaaaaaagc ggttagctcc ttcggtcctc cgatcgttgt 1620

cagaagtaag ttggccgcag tgttatcact catggttatg gcagcactgc ataattctct 1680

tactgtcatg ccatccgtaa gatgcttttc tgtgactggt gagtactcaa ccaagtcatt 1740

ctgagaatag tgtatgcggc gaccgagttg ctcttgcccg gcgtcaatac gggataatac 1800

cgcgccacat agcagaactt taaaagtgct catcattgga aaacgttctt cggggcgaaa 1860

actctcaagg atcttaccgc tgttgagatc cagttcgatg taacccactc gtgcacccaa 1920

ctgatcttca gcatctttta ctttcaccag cgtttctggg tgagcaaaaa caggaaggca 1980

aaatgccgca aaaaagggaa taagggcgac acggaaatgt tgaatactca tactcttcct 2040

ttttcaatat tattgaagca tttatcaggg ttattgtctc atgagcggat acatatttga 2100

atgtatttag aaaaataaac aaataggggt tccgcgcaca tttccccgaa aagtgccacc 2160

tgacgtctaa gaaaccatta ttatcatgac attaacctat aaaaataggc gtatcacgag 2220

gccctttcgt ctcgcgcgtt tcggtgatga cggtgaaaac ctctgacaca tgcagctccc 2280

ggagacggtc acagcttgtc tgtaagcgga tgccgggagc agacaagccc gtcagggcgc 2340

gtcagcgggt gttggcgggt gtcggggctg gcttaactat gcggcatcag agcagattgt 2400

actgagagtg caccataaaa ttgtaaacgt taatattttg ttaaaattcg cgttaaattt 2460

ttgttaaatc agctcatttt ttaaccaata ggccgaaatc ggcaaaatcc cttataaatc 2520

aaaagaatag cccgagatag ggttgagtgt tgttccagtt tggaacaaga gtccactatt 2580

aaagaacgtg gactccaacg tcaaagggcg aaaaaccgtc tatcagggcg atggcccact 2640

acgtgaacca tcacccaaat caagtttttt ggggtcgagg tgccgtaaag cactaaatcg 2700

gaaccctaaa gggagccccc gatttagagc ttgacgggga aagccggcga acgtggcgag 2760

aaaggaaggg aagaaagcga aaggagcggg cgctagggcg ctggcaagtg tagcggtcac 2820

gctgcgcgta accaccacac ccgccgcgct taatgcgccg ctacagggcg cgtactatgg 2880

ttgctttgac gtatgcggtg tgaaataccg cacagatgcg taaggagaaa ataccgcatc 2940

aggcgccatt cgccattcag gctgcgcaac tgttgggaag ggcgatcggt gcgggcctct 3000

tcgctattac gccagctggc gaaaggggga tgtgctgcaa ggcgattaag ttgggtaacg 3060

ccagggtttt cccagtcacg acgttgtaaa acgacggcca gtgccaagct tgcatgcatc 3120

actaatgaaa agcatacgac gcctgcgtct gacatgcact cattctgaag aagattctgg 3180

gcgcgtttcg ttctcgtttt cctctgtata ttgtactctg gtggacaatt tgaacataac 3240

gtctttcacc tcgccattct caataatggg ttccaattct atccaggtag cggttaattg 3300

acggtgctta agccgtatgc tcactctaac gctaccgttg tccaaacaac ggaccccttt 3360

gtgacgggtg taagacccat catgaagtaa aacatctcta acggtatgga aaagagtggt 3420

acggtcaagt ttcctggcac gagtcaattt tccctcttcg tgtagatcag aggctatata 3480

catgccgagg tattcgatca ctctacgatg acggtctgtt agctcaacaa cttcttctaa 3540

atgctccata accgtaacgt aagaagcata actgtcaata ctgaagtcat cccagtttat 3600

tggtgctcct gttgaacagt catccactat atgttcgaat agcccaggat cacgaggagg 3660

tcctacaaac ggatacggta cagtcttctt tttatagtct gcaaattcta gaatagcatt 3720

ttttatccaa tagtgtcgaa tcgtcctggc cgttctaccg ataaaggatc caatgtgatt 3780

attagctcca ctacacgata tgttaagttt gatcgatgtc ttgttaacaa acgctaaact 3840

caagttcggc atttccaaca gcgagaagaa atcatcaatt ccatcggcta tctcttgata 3900

agtcattaga tcatatacct tctcgggatg tcgttgagtt actttatgac tagaaatctt 3960

caggttatca tcaacgtaat tgttctccaa tagctctgga gagggacata acaatacttt 4020

gattttttcc atggcctgga cttgtttccg taggaaatac ttgttctttt gtagacgttc 4080

catgatgagt ttgtatacct ctgctggaga tatccattct agatctttga tataagtttg 4140

gtatggtaaa gagttgattt tgtaggacac gtaaatctgc gctagataag tacattgtgc 4200

aaatgcctct ggtacttcgt aagacccatg ctgcgtaatt atagtattat tgagtggatc 4260

ataagcgttg tactcgtttt tgaatttaaa actgtctaat aaggccctgt aaatctctct 4320

gacttgttgt acacctttct gctcttcggg actgagatcg gatagcaatg gagcagcagt 4380

ttctgagctt tctgatgggg ctgacatggc agatgcctat tcaatgctgc cttttgtttg 4440

ggaggttatg aaatgcatct gtttacattg tatgtaatac ccttactagg caatgttata 4500

agcaaaaatc ctttgatcac atggaatatc actttatacg tgttgaaata tgcaaaaaaa 4560

cagtccccct gagctcaggg ggtggtttac gcttttgagg ctcagcagcg cgaattctct 4620

cttggggctg aagtgaaatt taaaaaagtc gcttgaggct cagccggaat tataaaacat 4680

cacctgagtc ttgagagcgc tttcactcac ctgaggctca gctgaaattt caaaaagtca 4740

cttgagccca gaaggagtgt ttcaccccct gaggctataa cgttcgttat tttaatacct 4800

aaataaacaa aaatatatgg tacaggaacg cgaggcaacg cgccgataca gggtcaatgg 4860

gtacacgaga gggtgacact aggcgtagaa agtcattagt ataaaataca gtggtatata 4920

gtagatattt agtttgtttt ccttttcttt ttctccaaaa cgatatcaga catttgtctg 4980

ataatgaagc attatcagac aaatgtctga tatcgttttt caataataat atacatcatc 5040

acaaaacaaa caaacatagc atcgcaagcc ccatcatgcc accaccgtcc gctgtgatcg 5100

caactcatgt ttccggcggt attctgcaat gaattggaga acctcgtctg agataattcc 5160

atgccattgt tcgaacaact ggaggctagg atgagctgag aaggattgag cgaccaagcg 5220

cggacttgac ggtgggctga gtggtgggct accagggctg ttaccctcct cttcaagtag 5280

ctcctcgcga gataaaggtt tattagaagg atccttcaaa acatatattt cactgcccaa 5340

tggggcttcc ttgtaaaaac ctgatataaa ggcaaataca cggtcatcta cagtcacact 5400

accatgactg tagtgtgatc tagccactgc actttgaatt tcacggtccc cagcccaatt 5460

gcccagtgag gagacatatt ttcccttctc agatctcgat aaaaaggtcg ccattaaatg 5520

tcttccaaaa tgagacttcg ggccgttcca gatcttgaag actggttcat cgacatgctg 5580

ggtaagaaac ctagagaacg ttctggccaa tgactctggt aaaaactgat gagtttgatt 5640

agttggtcta ttactggata ctgttttttc aataggcgag caaacacgca aatagtcgta 5700

taatgatatc agaagatcgc aatcaccatt cacaggatag aagttaacgt accgttcagt 5760

tctgcttttc gtttctgtca cagtagcacg cacaattggg cccagaaatg aattgttgta 5820

gatctcaaaa gtccttggat ctagattctt cagatcgctg tatctgcagc aatttccaac 5880

agctcccaga agtagcaatc ggtattccgc tcgttttgta gtggttacgc aggactgatc 5940

gaagaagcag gcaatcctgg agacaatctt ccaaatatct ttttcttttg acagaatatt 6000

agtgaattgt aatccaacca tagaagcatc gtatttatgt gtttcctcgt agcgatcaaa 6060

caaggaaact tcttgatttt taaatgggct aacaacaacc ttgtaagaag gcaatgctga 6120

ttcgatatcc ttttgcagag actctgtctt tcttagtcta acagtgaatt tgataatttt 6180

gtcatcctta tcaaaagaca gagatttgcc aattgcgctc ttgtaagagc ggtaggtatt 6240

gattttcatc tcgcgtcgga tagatagcga ctgcattgtc aagatagaga atagggacgc 6300

cagcttattt ctaatttctt tcgcatttat attaaaggtg tcagattcca gaatttcatt 6360

aatttcatta gcacactgat gaggtgtgag gtgagcagcc tccgcaaagg tagacatagg 6420

ggcattggtt ggaggccttt gaggtaccac tagagtgctg caaacatagc accgttcgag 6480

actttaaaat cttcagtttt aaaattatga aaaaaaacat cgtcctgagt tgaaacggtc 6540

gtttcaacct ccgtgtacag aaagatacat agcatatggc aagctgcacg cagcgtaaac 6600

atgccggaca actgtcattt cgtcagatca gttgatctac tctctgtgat actgcttcgt 6660

ttgtccacgg aggtcggact aactctcacc acgcttccac ggcattcgaa agaactaata 6720

ttgtatcatt gtacatatga ggaacacgca gttgaactga gcaaaccagg actcaggaaa 6780

gcaggaggta agtgctcgct tttcgtggat ccagaggaac gtgaaaattc gccttctcct 6840

cctataccgc cgtatcagat atcagagatg ccccttcatg aacttctcga gtcaggcaat 6900

gctaaattgg ttccaaatcc cgagtttgat ctaactgatc cagacgactt tcataagtgt 6960

ttctcggtca cctattcagc attatcttta atggtaccat atctgcccag agctgctcta 7020

aaggctgctc gagtgttttg taaagatcat tcaatattaa caacggatat gcttgatttg 7080

aattatcttg aagagctaat tgagttctca aaggaaactg tgaacaaaat cccagctaga 7140

atccctatag aggacatgct tctcgagcgg ggatatgtgc taccatgggt tcatggtggt 7200

acagtgaagg gaggaaagct actgaccccc aacgattgat tctttaccga atcattgcat 7260

aattcattgc ataattcatt gcagaatacc gccggaaaca tgagttgcga tcacagcgga 7320

cggtggtggc atgatggggc ttgcgatgct atgtttgttt gttttgtgat gatgtatatt 7380

attattgaaa aacgatatca gacatttgtc tgataatgct tcattatcag acaaatgtct 7440

gatatcgttt tggagaaaaa gaaaaggaaa acaaactaaa tatctactat ataccactgt 7500

attttatact aatgactttc tacgcctagt gtcaccctct cgtgtaccca ttgaccctgt 7560

atcggcgcgt tgcctcgcgt tcctgtacca tatatttttg tttatttagg tattaaaatt 7620

tactttcctc atacaaatat taaattcacc aaacttctca aaaactaatt attcgtagtt 7680

acaaactcta ttttacaatc acgtttattc aaccattcta catccaataa ccaaaatgcc 7740

catgtacctc tcagcgaagt ccaacggtac tgtccaatat tctcattaaa tagtctttca 7800

tctatatatc agaaggtaat tataattaga gatttcgaat cattaccgtg ccgattcgca 7860

cgctgcaacc gcggcacaaa cacaaacaca aacacaaaaa cgctaaatta tgcacacaag 7920

ggccggcggg gctgccggaa aaaaaaaggg aaaaatacac agacgagcgc gcacagatgg 7980

ggttaccact gcaagttaca agttgcaagt tgcacgctgg aatcagaatt ggaatcagaa 8040

ttggaattgg aattagaatt agaattaaac ttggggtagc cacgggaacg ggataactca 8100

ggaatcgctc gcaggcgtct ccgtctaggc aatcccaagg taagcctagg cactcccaca 8160

ggggaaagaa cggttgaagg caaagtagtg ctaacaattg gtaacgaatg gtaacaagtg 8220

tgtccgtctc cacctgacat ttgctagagc tggggattcc acattcttgt gctctgaatt 8280

ctcaaaccga aatggggcgt tgttacccca ggtatccggt tgtagttggc actggggatg 8340

gaaaaaaatg atgttgatgt tgagttagtt gggttgagtc aattagtgcg tgaaagtatc 8400

accacttttg tcatccggcg tttctgtgcg aatcacacac acacacacag tttattggag 8460

cacttgtttc tggcgtattc gtaattgttc tgcggtgcgg ttctgtgtgc atttttcctg 8520

gggtgtctgc cgcacctact catcacccac gccgtgggtt tgagccatgg cggaggtacg 8580

actgactggc tgcctgcctg cctgactgac tgcctgactg caggaaaaga gggtttcgaa 8640

ggaaaaactt ttcctgtgtt aatccggccg tgcgccgctg ctccaaaatc caccttcatg 8700

agaaggagtt tgaaaaaaca aaaaaattca catataaaaa gcgtatctcg agatctcaaa 8760

gtctcccttg aatcgtgttt gccagttgta actcatcctt tattcttcta ttctatctct 8820

ctctttcctt cccctaatca gcaattaaat ccggggtaag gaagaattac tactgtgtgt 8880

aacggttata tttcgttttt tatttttttt ttccattgcc atagagaaag aaaaaaaaaa 8940

aaaagagagt ttgtgaagat cttccattcg aatcccataa gtgacacatt taattttttt 9000

tttgttagat atgaagttag catactccct cttgcttcca ttggcaggag tcagtgcttc 9060

agtgatcaat tacaagagag acggtgaccc cgggactagt gcggccgctt aaggccgcaa 9120

gctttgatct gatctgctta ctttactaac gacaaaaaaa aatcaaaaaa aaaaaaacaa 9180

tcagtccttc tcttcttacg atatgatatg attaaatgat gctatgaaat catcttcttc 9240

ttaactttct taaatcttac gcgtcactta ctctatatac ccgtttagct ttgcctggtc 9300

acagcgacat tttatataag tgtacgtatt ttcttttttt ttttaaaaat ttctattcta 9360

accttagaaa agtgcccttt aaaccagctg tcctggcact atatctttat catgtgccgg 9420

tcgctttccc tttccgtttc ccttttcctt tcaattggtg gcctggaatt ccgaactcat 9480

tttcgcatct gaaactaatt ctcgaaacct ttaacatcaa acaattgaaa agatcatcat 9540

caccagaaat aagaaaaaga tcaacacaac agctaataac agtacgaaag aaagatcgct 9600

cgagtgaaaa ggcagccaag aaaggtcatt cgatttgggt ctagactgat tatagacata 9660

ccaattgcac tcagtaagaa aatgagtttc aaatttgacg atgacggtgt ggtaaaagaa 9720

tttcacggca acaccatcat atgccatatt cctcaacaaa ccgaattctt caacaaattg 9780

ttggacttct accgttttgc gaaacgactt tccttctacg acaagatcac cctacttcct 9840

ccttcaagct accacgttac gatcatgaat tgctgccacg aacacgatcg ttctgagggc 9900

cactggccca aaggaatcga tccggacaca agcatgctgc ggtgtacatc acatctgacc 9960

aacattctag gatcggtcga attctgattg gaaagaccat tctgctttac ttttagagca 10020

tcttggtctt ctgagctcat tatacctcaa tcaaaactga aattaggtgc ctgtcacggc 10080

tcttttttta ctgtaccttt gacttccttt cttatttcca aggatgctca tcacaatacg 10140

cttctagatc tattatgcat tataattaat agttgtagct acaaaaggta aaagaaagtc 10200

cggggcaggc aacaatagaa atcggcaaaa aaaactacag aaatactaag agcttcttcc 10260

ccattcagtc atcgcatttc gaaacaagag gggaatggct ctggctaggg aactaaccac 10320

catcgactga ctctatgcac taaccacgtg actacatata tgtgatcgtt tttaacattt 10380

ttcaaaggct gtgtgtctgg ctgtttccat taattttcac tgattaagca gtcatattga 10440

atctgagctc atcaccaaca agaaattcta ccgtaaaagt gtaaaagttc gtttaaatca 10500

tttgtaaact ggaacagcaa gaggaagtat catcagctag ccccataaac taatcaaagg 10560

aggatgtcga ctaagagtta ctcggaaaga gcagctgctc atagaagtcc agttgctgcc 10620

aagcttttaa acttgatgga agagaagaag tcaaacttat gtgcttctct tgatgttcgt 10680

aaaacagcag agttgttaag attagttgag gttttgggtc catatatctg tctattgaag 10740

acacatgtag atatcttgga ggatttcagc tttgagaata ccattgtgcc gttgaagcaa 10800

ttagcagaga aacacaagtt tttgatattt gaagacagga agtttgccga cattgggaac 10860

actgttaaat tacaatacac gtctggtgta taccgtatcg ccgaatggtc tgatatcacc 10920

aatgcacacg gtgtgactgg tgcgggcatt gttgctggtt tgaagcaagg tgccgaggaa 10980

gttacaaaag aacctagagg gttgttaatg cttgccgagt tatcgtccaa ggggtctcta 11040

gcgcacggtg aatacactcg tgggaccgtg gaaattgcca agagtgataa ggactttgtt 11100

attggattta ttgctcaaaa cgatatgggt ggaagagaag agggctacga ttggttgatc 11160

atgacgccag gtgttggtct tgatgacaaa ggtgatgctt tgggacaaca atacagaact 11220

gtggatgaag ttgttgccgg tggatcagac atcattattg ttggtagagg tcttttcgca 11280

aagggaagag atcctgtagt ggaaggtgag agatacagaa aggcgggatg ggacgcttac 11340

ttgaagagag taggcagatc cgcttaagag gggtaccgag ctcgaatt 11388

Claims (9)

1.一种阿魏酸酯酶制剂，其特征在于，利用重组表达阿魏酸酯酶的马克斯克鲁维酵母菌株制备得到。

2.根据权利要求1所述的阿魏酸酯酶制剂，其特征在于：

其中，利用所述重组表达阿魏酸酯酶的马克斯克鲁维酵母菌株制备的过程包括如下步骤：

i)采用所述阿魏酸酯酶重组马克斯克鲁维酵母菌株通过高密度发酵获得阿魏酸酯酶液体酶；

ii)在所述阿魏酸酯酶液体酶中添加10％-20％质量百分比的载体，该载体为玉米淀粉、玉米芯粉或麦芽糊精中的一种或任意几种的组合；

iii)喷雾干燥获得所述阿魏酸酯酶制剂。

3.一种阿魏酸酯酶复合酶制剂，其特征在于，含有纤维素酶、木聚糖酶和阿魏酸酯酶制剂，

其中，所述阿魏酸酯酶制剂为权利要求1～2中任一项所述的阿魏酸酯酶制剂。

4.根据权利要求3所述的阿魏酸酯酶复合酶制剂，其特征在于：

其中，以酶活计，每克所述阿魏酸酯酶复合酶制剂含有所述纤维素酶1000-3000U、所述木聚糖酶20000-40000U、所述阿魏酸酯酶制剂100000-300000U。

5.根据权利要求4所述的阿魏酸酯酶复合酶制剂，其特征在于：

其中，以酶活计，每克所述阿魏酸酯酶复合酶制剂含有所述纤维素酶2000U、所述木聚糖酶30000U、所述阿魏酸酯酶制剂200000U。

6.根据权利要求3所述的阿魏酸酯酶复合酶制剂，其特征在于，还含有：

α-淀粉酶、甘露聚糖酶、α-半乳糖苷酶以及植酸酶中的一种或任意几种的组合。

7.根据权利要求6所述的阿魏酸酯酶复合酶制剂，其特征在于：

其中，所述α-淀粉酶、甘露聚糖酶、α-半乳糖苷酶以及植酸酶的含量分别为6500U/g、1250U/g、1000U/g、5000U/g。

8.一种蛋鸡复合饲料，其特征在于，含有蛋鸡日粮以及如权利要求3～7中任一项所述的阿魏酸酯酶复合酶制剂。

9.根据权利要求8所述的蛋鸡复合饲料，其特征在于：

其中，所述阿魏酸酯酶复合酶制剂的添加量为每吨所述蛋鸡日粮中添加200-1000克。

Images