CN111569466A - 一种中草药提取液中单宁酸的去除方法 - Google Patents

一种中草药提取液中单宁酸的去除方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种中草药提取液中单宁酸的去除方法，将角蛋白原料研磨成粉，将粉末状角蛋白微波处理，进行蓬松化，冷却至室温后，按比例加入中草药提取液中，搅拌，过滤。本发明采用蓬松化后的角蛋白上的羰基与单宁酸的羟基氢结合吸附，去除中草药提取液中的单宁酸，同时可以有效保护水溶性有效成分，从而提高中草药提取液以及中药制剂的安全性。

Description

一种中草药提取液中单宁酸的去除方法
技术领域
本发明涉及一种中草药提取液中单宁酸的去除方法，具体为一种通过蓬松角蛋白吸附单宁酸的方法。
背景技术
单宁酸属于天然多酚类化合物，广泛存在于植物的根、皮、叶以及果实中。因此，很多中草药提取液中都存在单宁酸。水解单宁酸具有消炎、解毒、抗菌抑菌、止血等作用，在医药上曾用于治疗咽喉炎、扁桃腺炎、痔疮和皮肤疱症等，内用可制止腹泻、肠出血等。但是单宁酸属于高聚物，在中药制剂中会影响制剂的稳定性和澄清度。文献报道，中草药注射液中的单宁将使血液中的蛋白质凝固，从而引起皮下出血引，多次注射局部组织有可能导致组织坏死造成无菌炎症；单宁还能加速红细胞的凝聚，并能与血红蛋白形成药物性沉淀。含单宁的药物也常常使患者出现食欲减退、恶心、头痛等现象。
单宁酸是中药提取液中常见的杂质，常见去除方法有水醇法、明胶法、聚酰胺法、胶醇法。但水醇法和明胶法除单宁酸效果较差，聚酰胺法和胶醇法除单宁酸效果不佳，且损失率大。马勇等(马勇,王恩德,邵悦.膨润土负载壳聚糖对中药注射液中鞣酸的吸附作用研究.微量元素与健康研究,2003,20(2):22-24.)将壳聚糖与膨润土相结合，制备出一种复合吸附剂，膨润土作为阳离子吸附剂，通过壳聚糖絮凝单宁酸的方法去除单宁酸。廖学品等(廖学品,马贺伟,陆忠兵等.中草药提取物中单宁(鞣质)的选择性脱除.天然产物研究与开发,2004,16(01):10-15.)以牛皮为原料通过甲醛交联反应制备胶原纤维吸附材料，为中药制剂提供了一种选择性脱除单宁酸的方法。
角蛋白上富含羰基，羰基作为氢键的受体，可以和单宁酸上羟基提供的氢键相结合，富含羟基的单宁酸高聚物会被角蛋白结合吸附，从而实现单宁酸的去除。
发明内容
本发明的目的在于解决现有技术问题的不足，提供一种去除中草药提取液中单宁酸的方法，具体采用蓬松化角蛋白吸附单宁酸。
为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：
一种中草药提取液中单宁酸的去除方法，其特征在于：包括如下步骤：
(1)将角蛋白原料研磨成粉，粒径小于20目；
(2)将粉末状角蛋白微波处理，进行蓬松化；
(3)将步骤(2)中的蓬松化角蛋白冷却至室温，按比例加入中草药提取液中，搅拌，过滤。
优选的，所述步骤(1)中，角蛋白原料为羊角、牛角、猪蹄甲中的一种或多种。
优选的，所述步骤(2)中，每10g角蛋白粉的微波功率为500-1000w，时间为10-60min；更优选的，10g角蛋白粉的微波功率为600-800w，时间为10-30min。
优选的，所述步骤(3)中，蓬松化角蛋白粉末(g)与中草药提取液(ml)比例为1:50-1:1500；更优选的，蓬松化角蛋白粉末(g)与中草药提取液(ml)比例为1:800-1:1000。
优选的，所述步骤(3)中，搅拌转速为800-1000r/min，搅拌时间为5-8min，离心转速为1000-1500r/min，离心时间为10-20min；更优选的，搅拌转速为1000r/min，搅拌时间为5min，离心转速为1000r/min，离心时间为15min。
本发明与现有技术相比，其有益效果主要体现在：
本发明所述方法中所采用的角蛋白很难溶于水，在单宁酸去除过程中不会影响溶于水的小分子有效成分；在去除单宁酸的同时可以有效地维持中草药提取液的稳定性。本发明采用蓬松化后的角蛋白上的羰基与单宁酸的羟基氢结合吸附，去除中草药提取液中的单宁酸，同时可以有效保护水溶性有效成分，从而提高中草药提取液以及中药制剂的安全性。
具体实施方式
下面通过具体实施例对本发明的技术方案作进一步的具体说明。
实施例1
蓬松化角蛋白吸附单宁酸：
(1)取干燥的猪蹄甲粉，过20目筛。
(2)称取过筛猪蹄甲粉10g进行微波(功率：600w，时间：20min)使其蓬松化，所得猪蹄甲粉孔隙率为74.7％，比表面积为100m2/g。
(3)称取蓬松化后的猪蹄甲粉1g加入1000mL金银花提取液(单宁酸含量为0.38％)，搅拌5min，离心15min后，取上清液进行高效液相色谱法检测。
实施例2
蓬松化角蛋白吸附单宁酸：
(1)取干燥的猪蹄甲粉，过20目筛。
(2)称取过筛猪蹄甲粉10g进行微波(功率：600w，时间：30min)使其蓬松化，所得猪蹄甲粉孔隙率为75.4％，比表面积为110m2/g。。
(3)称取蓬松化后的猪蹄甲粉1g加入1000mL金银花提取液(单宁酸含量为0.38％)，搅拌5min，离心15min后，取上清液进行高效液相色谱法检测。
实施例3
蓬松化角蛋白吸附单宁酸：
(1)取干燥的猪蹄甲粉，过20目筛。
(2)称取过筛猪蹄甲粉10g进行微波(功率：700w，时间：20min)使其蓬松化，所得猪蹄甲粉孔隙率为76％，比表面积为160m2/g。。
(3)称取蓬松化后的猪蹄甲粉1g加入1000mL金银花提取液(单宁酸含量为0.38％)，搅拌5min，离心15min后，取上清液进行高效液相色谱法检测。
实施例4
蓬松化角蛋白吸附单宁酸：
(1)取干燥的猪蹄甲粉，过20目筛。
(2)称取过筛猪蹄甲粉10g进行微波(功率：700w，时间：30min)使其蓬松化，所得猪蹄甲粉孔隙率为87.2％，比表面积为180m2/g。。
(3)称取蓬松化后的猪蹄甲粉1.2g加入1000mL金银花提取液(单宁酸含量为0.38％)，搅拌5min，离心15min后，取上清液进行高效液相色谱法检测。
实施例5
蓬松化角蛋白吸附单宁酸：
(1)取干燥的猪蹄甲粉，过20目筛。
(2)称取过筛猪蹄甲粉10g进行微波(功率：800w，时间：10min)使其蓬松化，所得猪蹄甲粉孔隙率为87.2％，比表面积为185m2/g。
(3)称取蓬松化后的猪蹄甲粉1.25g加入1000mL金银花提取液(单宁酸含量为0.38％)，搅拌5min，离心15min后，取上清液进行高效液相色谱法检测。
实施例6
蓬松化角蛋白吸附单宁酸：
(1)取干燥的猪蹄甲粉，过20目筛。
(2)称取过筛猪蹄甲粉10g进行微波(功率：800w，时间：20min)使其蓬松化，所得猪蹄甲粉孔隙率为87％，比表面积为185m2/g。
(3)称取蓬松化后的猪蹄甲粉1.25g加入1000mL金银花提取液(单宁酸含量为0.38％)，搅拌5min，离心15min后，取上清液进行高效液相色谱法检测。
实施例7
蓬松化角蛋白吸附单宁酸：
(1)取干燥的羊角粉末，过20目筛。
(2)称取过筛羊角粉10g进行微波(功率：800w，时间：10min)使其蓬松化，所得羊角粉孔隙率为85％，比表面积为183m2/g。
(3)称取蓬松化后的羊角粉1.25g加入1000mL金银花提取液(单宁酸含量为0.38％)，搅拌5min，离心15min后，取上清液进行高效液相色谱法检测。
实施例8
蓬松化角蛋白吸附单宁酸：
(1)取干燥的牛角粉末，过20目筛。
(2)称取过筛牛角粉10g进行微波(功率：800w，时间：10min)使其蓬松化，所得牛角粉孔隙率为85％，比表面积为180m2/g。
(3)称取蓬松化后的牛角粉1.25g加入1000mL金银花提取液(单宁酸含量为0.38％)，搅拌5min，离心15min后，取上清液进行高效液相色谱法检测。
实施例9
蓬松化角蛋白吸附单宁酸：
(1)取干燥的猪蹄甲粉，过20目筛。
(2)称取过筛猪蹄甲粉10g进行微波(功率：800w，时间：10min)使其蓬松化，所得猪蹄甲粉孔隙率为87.2％，比表面积为185m2/g。
(3)称取蓬松化后的猪蹄甲粉1.25g加入1000mL大黄提取液(单宁酸含量为9.48％)，搅拌5min，离心15min后，取上清液进行高效液相色谱法检测。
实施例10
蓬松化角蛋白吸附单宁酸：
(1)取干燥的猪蹄甲粉，过20目筛。
(2)称取过筛猪蹄甲粉10g进行微波(功率：800w，时间：10min)使其蓬松化，所得猪蹄甲粉孔隙率为87.2％，比表面积为185m2/g。
(3)称取蓬松化后的猪蹄甲粉1.25g加入1000mL黄芩提取液(单宁酸含量为0.84％)，搅拌5min，离心15min后，取上清液进行高效液相色谱法检测。
实施例11
蓬松化角蛋白吸附单宁酸：
(1)取干燥的猪蹄甲粉，过20目筛。
(2)称取过筛猪蹄甲粉10g进行微波(功率：800w，时间：10min)使其蓬松化，所得猪蹄甲粉孔隙率为87.2％，比表面积为185m2/g。
(3)称取蓬松化后的猪蹄甲粉1.25g加入1000mL生地提取液(单宁酸含量为0.18％)，搅拌5min，离心15min后，取上清液进行高效液相色谱法检测。
对比例1
普通角蛋白吸附单宁酸：
(1)取干燥的猪蹄甲粉，过20目筛，所得猪蹄甲粉孔隙率为2.5％，比表面积为0.03m2/g。
(2)称取过筛后的猪蹄甲粉1.25g加入1000mL金银花提取液(单宁酸含量为0.38％)，搅拌5min，离心15min后，取上清液进行高效液相色谱法检测。
对比例2
明胶法去除单宁酸
(1)量取100mL 1.5％的明胶溶液加入1000mL金银花提取液(单宁酸含量为0.38％)。
(2)35℃下搅拌30min，高速离心至分层，取上清液进行高效液相色谱法检测。
实施例12
1、单宁酸含量检测
取各例上清液5mL，用0.45μm微孔滤膜过滤，取续滤液2μL注入高效液相色谱仪进样分析。高效液相色谱仪采用Hypersil ODS(225×4.0mm,5μm)色谱柱，柱温为室温，流动相为水:甲醇(20:80，v/v)，流速0.5mg/mL，VWD检测器，275nm单波长检测峰面积。
根据峰面积，利用外标法计算实施例1-6，对比例1-2中的单宁酸含量，算出不同条件下中药提取液中单宁酸的脱除率，所得结果见表1。
表1实施例1-6和对比例1提取液单宁酸脱除率
序号 微波条件(w；min) 单宁酸脱除率(％)
实施例1 600；20 84
实施例2 600；30 86
实施例3 700；20 93
实施例4 700；30 96
实施例5 800；10 97.5
实施例6 800；20 97
实施例7 800；10 96
实施例8 800；10 95.7
实施例9 800；10 96.8
实施例10 800；10 97
实施例11 800；10 97.2
对比例1 —— 12
对比例2 —— 62
由表1可知，角蛋白对单宁酸的去除有一定的效果，蓬松化后的角蛋白对单宁酸的去除率明显高于普通角蛋白，且不同微波条件下的角蛋白蓬松化程度有所差别，对单宁酸去除率也有所影响。以10g角蛋白粉为单位进行微波，700w条件下微波30min，角蛋白已完全蓬松；800w微波10min也达到了同样的效果。蓬松化角蛋白对中草药提取物中单宁酸的去除率高达97％左右。
以上所述的实施例只是本发明的较佳方案，并非对本发明作任何形式上的限制，在不超出权利要求所记载的技术方案的前提下还有其它的变体及改型。

Claims (8)

1.一种中草药提取液中单宁酸的去除方法，其特征在于：包括如下步骤：
(1)将角蛋白原料研磨成粉，粒径小于20目；
(2)将粉末状角蛋白微波处理，进行蓬松化；
(3)将步骤(2)中的蓬松化角蛋白冷却至室温，按比例加入中草药提取液中，搅拌，过滤。
2.如权利要求1所述的去除方法，其特征在于：所述步骤(1)中，角蛋白原料为羊角、牛角、猪蹄甲中的一种或多种。
3.如权利要求1所述的去除方法，其特征在于：所述步骤(2)中，每10g角蛋白粉的微波功率为500-1000w，时间为10-60min。
4.如权利要求1所述的去除方法，其特征在于：所述步骤(2)中，每10g角蛋白粉的微波功率为600-800w，时间为10-30min。
5.如权利要求1所述的去除方法，其特征在于：所述步骤(3)中，蓬松化角蛋白粉末(g)与中草药提取液(ml)比例为1:50-1:1500。
6.如权利要求1所述的去除方法，其特征在于：所述步骤(3)中，蓬松化角蛋白粉末(g)与中草药提取液(ml)比例为1:800-1:1000。
7.如权利要求1所述的去除方法，其特征在于：所述步骤(3)中，搅拌转速为800-1000r/min，搅拌时间为5-8min，离心转速为1000-1500r/min，离心时间为10-20min。
8.如权利要求1所述的去除方法，其特征在于：所述步骤(3)中，搅拌转速为1000r/min，搅拌时间为5min，离心转速为1000r/min，离心时间为15min。
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杨崇岭等: "改性羽毛对锌离子的吸附", 《离子交换与吸附》 *
林黑着主编: "《海水鱼类配合饲料学》", 31 July 2018, 广州：华南理工大学出版社 *
王健等: "中药注射液中鞣质去除方法的探讨", 《基层中药杂志》 *

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