CN111568893A - 一种共载多西他赛-白藜芦醇纳米长循环脂质体及其制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种共载多西他赛‑白藜芦醇纳米长循环脂质体及其制备方法和应用，属于药剂制备技术领域。所述纳米长循环脂质体包括药物活性成分和脂质膜材，其中所述药物活性成分为多西他赛与白藜芦醇；所述脂质膜材包括大豆卵磷脂、胆固醇和DSPE‑PEG2000。本发明首次验证具有抗肿瘤活性的中药白藜芦醇联用多西他赛作用于人前列腺癌细胞和人肺癌细胞具有较强的协同抗肿瘤效果，同时将二者制备成纳米长循环脂质体，不仅有效提高其溶解性，同时还可以提高药物渗透和滞留效应，在增强多西他赛抗肿瘤活性的基础上减少其副作用，为新型多西他赛纳米制剂的开发和研制奠定了基础。

Description

一种共载多西他赛-白藜芦醇纳米长循环脂质体及其制备方 法和应用

技术领域

本发明属于药剂制备技术领域，具体涉及一种共载多西他赛-白藜芦醇纳米长循环脂质体及其制备方法和应用。

背景技术

公开该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。

多西他赛(Docetaxel，DTX)是由浆果紫杉(Taxus baccata，Europeanyew)针叶中提取的前体物10-DAB经半合成得到的紫杉烷类抗癌药物，属于微管解聚抑制剂。临床上DTX广泛用于各类癌症的治疗，FDA已批准其应用于卵巢癌、乳腺癌以及非小细胞肺癌和前列腺癌的治疗。DTX为白色或类白色粉状物，水溶性较差，普通口服制剂的生物利用度仅为8％，体内药动学为呈三室模型，相半衰期分别为4min，36min和11.1h。目前多西他赛唯一临床应用制剂为注射剂，商品名为

系采用非离子表面活性剂Tween-80和乙醇(50:50，v/v)作为混合溶媒。其中Tween-80可以增加细胞膜流动性和膜渗透性，导致严重的超敏反应、体液潴留等不良反应，并且还会造成溶血和胆汁淤积。临床使用

须预服抗组胺剂和糖皮质激素类，这常常给病人带来痛苦，直接影响了多西他赛的使用。因此，开发具有良好的溶解性能且高效低毒的新型多西他赛给药系统是近些年来的研究热点。

白藜芦醇(Resveratrol，Res)为蒽醌萜类(非黄酮类)多酚化合物，在葡萄、虎杖等植物中含量较为丰富。目前人们已经发现Res具有包括抗癌、心血管保护、抗菌、神经保护、免疫调节等多种生理活性。同时，近年来研究发现白藜芦醇与紫杉醇、阿霉素等多种抗癌药物联用可增强后者的抗癌活性。Sprouse等发现白藜芦醇与紫杉醇联用时，可增强紫杉醇对乳腺癌细胞MDA-MB-231及其耐药细胞MDA-MB-231/PacR的抗肿瘤活性。Zhao等将白藜芦醇与阿霉素共同包载于PLGA纳米粒中，作用于阿霉素乳腺癌耐药细胞MCF-7/ADR与MDA-MB-231/ADR，研究发现共载药纳米粒可以通过抑制耐药相关蛋白P-gp，MRP-1和BCRP的表达而逆转阿霉素耐药，从而揭示了白藜芦醇与其他抗癌药物联用的临床潜力。

脂质体(Liposomes)是磷脂依靠疏水缔合作用在水中自发形成的一种分子有序组合体，为多层囊泡结构，每层均为类脂双分子膜，层间和脂质体内核为水相，双分子膜为油相。根据脂质体结构，可以使脂溶性药物可以分散于磷脂双分子层的疏水基团的夹层中，以提高难溶性药物的溶解度。脂质体由于自身具有良好的生物相容性和控缓释作用，已作为一种成熟的低毒高效制剂应用于临床治疗，如紫杉醇脂质体、阿霉素脂质体及盐酸吡柔比星脂质体等。然而，发明人发现，脂质体同样存在一些问题和不足，如稳定性不佳，易聚集和渗漏，同时进入血液后容易被网状内皮系统(Reticuloendothelial system，RES)快速清除，使脂质体无法完整达到目标部位，导致治疗效果欠佳。

发明内容

针对上述现有技术的不足，本发明提供一种共载多西他赛-白藜芦醇纳米长循环脂质体及其制备方法和应用，本发明首次验证具有抗肿瘤活性的中药白藜芦醇联用多西他赛作用于人前列腺癌细胞和人肺癌细胞具有较强的协同抗肿瘤效果，同时将二者制备成纳米长循环脂质体，不仅有效提高其溶解性，同时还可以提高药物渗透和滞留效应，在增强多西他赛抗肿瘤活性的基础上减少其副作用，为新型多西他赛纳米制剂的开发和研制奠定了基础。

为了实现上述技术目的，本发明的技术方案如下：

本发明的第一个方面，提供多西他赛联合白藜芦醇在制备抗肿瘤药物中的应用。本发明通过试验首次验证具有抗肿瘤活性的中药白藜芦醇联用多西他赛作用于人前列腺癌细胞PC3、DU145和人肺癌细胞H460具有较强的协同抗肿瘤效果。

本发明的第二个方面，提供一种纳米长循环脂质体，所述脂质体包括药物活性成分和脂质膜材，其中所述药物活性成分为多西他赛与白藜芦醇；所述脂质膜材包括大豆卵磷脂、胆固醇和DSPE-PEG2000。

本发明的第三个方面，提供上述纳米长循环脂质体的制备方法，所述方法包括采用薄膜水化法制备上述纳米长循环脂质体；

本发明的第四个方面，提供上述纳米长循环脂质体在制备抗肿瘤药物中的应用。

本发明的第五个方面，提供一种抗肿瘤药物，所述抗肿瘤药物包括上述纳米长循环脂质体。

上述一个或多个技术方案的有益技术效果：

1)首次验证具有抗肿瘤活性的中药白藜芦醇联用多西他赛作用于人前列腺癌细胞PC3、DU145和人肺癌细胞H460具有较强的协同抗肿瘤效果。

2)由于多西他赛与白藜芦醇水溶性较差，并且多西他赛的唯一临床注射剂

中非离子表面活性剂Tween-80可导致病人出现严重的超敏反应、体液潴留等不良反应。通过将两者制备成纳米长循环脂质体不仅可以提高其溶解性，同时可以提高药物渗透和滞留效应，在增强多西他赛抗肿瘤活性的基础上减少其副作用，为新型多西他赛纳米制剂的开发和研制奠定基础。

3)确证共载多西他赛-白藜芦醇长循环纳米脂质体不仅能显著抑制肿瘤模型小鼠的肿瘤生长，并且降低了多西他赛产生的副作用、延长了小鼠的生存时间，为多西他赛纳米给药系统提供更多的临床应用价值和研究思路。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据提供的附图获得其他的附图。

图1为本发明实施例中不同摩尔比的DTX和Res对不同细胞的细胞毒性和CI值测定；其中，(a)PC3，(b)DU145，(c)H460，(d)A549，(e)HepG2，(f)HUH7(n＝3)；

图2为本发明实施例中不同细胞进行Annexin V-FITC/PI双重染色分析；其中，(a)PC3，(b)H460；**p<0.01，*p<0.05，DTX与DTX+Res之间有显著性差异；##p<0.01，Res和DTX+Res之间有显著性差异；

图3为本发明实施例中DTX/Res-LPNs的透射电镜图和体外释放曲线图；其中，(a)为DTX/Res-LPNs的透射电镜图；(b)为DTX和Res的体外释放曲线图；p<0.05，**p<0.01，DTX-Sol组与DTX/Res-LPNs组相比有显著性差异；##p<0.01，Res-Sol组和DTX/Res-Sol组之间有显著性差异；

图4为本发明实施例中将PC3细胞与香豆素6溶液，香豆素6-LPNs和香豆素6溶液+Blank-LPNs在37℃下分别孵育4小时后，香豆素6的细胞摄取情况(bar表示100μm)；

图5为本发明实施例中人源肿瘤模型小鼠静脉注射不同制剂组后对比图，其中，(a)为肿瘤照片，(b)为肿瘤体积变化，(c)为肿瘤重量变化，(d)为生存曲线，(e)为体重变化。*p<0.05，**p<0.01，与对照组相比有显著性差异；##p<0.01，DTX/Res-Sol和Res-Sol之间有显著性差异。

图6为本发明实施例中不同制剂给药组小鼠肿瘤的HE与KI67染色图。

具体实施方式

应该指出，以下详细说明都是例示性的，旨在对本发明提供进一步的说明。除非另有指明，本文使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属技术领域的普通技术人员通常理解的相同含义。

需要注意的是，这里所使用的术语仅是为了描述具体实施方式，而非意图限制根据本发明的示例性实施方式。如在这里所使用的，除非上下文另外明确指出，否则单数形式也意图包括复数形式，此外，还应当理解的是，当在本说明书中使用术语“包含”和/或“包括”时，其指明存在特征、步骤、操作、器件、组件和/或它们的组合。应理解，本发明的保护范围不局限于下述特定的具体实施方案；还应当理解，本发明实施例中使用的术语是为了描述特定的具体实施方案，而不是为了限制本发明的保护范围。

本发明的一个具体实施方式中，提供多西他赛联合白藜芦醇在制备抗肿瘤药物中的应用。本发明通过试验首次验证具有抗肿瘤活性的中药白藜芦醇联用多西他赛作用于人前列腺癌细胞PC3、DU145和人肺癌细胞H460具有较强的协同抗肿瘤效果。

其中，所述多西他赛与白藜芦醇的摩尔比为1：0.25～4，如1：0.25、1：0.5、1：1、1：2和1：4。

由于多西他赛与白藜芦醇水溶性较差，并且多西他赛的唯一临床注射剂

中非离子表面活性剂Tween-80可导致病人出现严重的超敏反应、体液潴留等不良反应。经研究发现，将多西他赛与白藜芦醇制备成纳米长循环脂质体不仅可以提高其溶解性，同时可以提高药物渗透和滞留效应，在增强多西他赛抗肿瘤活性的基础上减少其副作用。

因此本发明的又一具体实施方式中，提供一种纳米长循环脂质体，所述脂质体包括药物活性成分和脂质膜材，其中所述药物活性成分为多西他赛与白藜芦醇；所述脂质膜材包括大豆卵磷脂、胆固醇和DSPE-PEG2000。

本发明的又一具体实施方式中，所述多西他赛与白藜芦醇的摩尔比为1：0.25～4，如1：0.25、1：0.5、1：1、1：2和1：4，优选的，所述多西他赛和白藜芦醇的摩尔比为1:1。

所述多西他赛、大豆卵磷脂和胆固醇的摩尔比为1：1：1～3，优选:1：1：2。

DSPE-PEG2000的加入量为总物料的1％-5％(w/w)。

本发明的又一具体实施方式中，提供上述纳米长循环脂质体的制备方法，所述方法包括采用薄膜水化法制备上述纳米长循环脂质体；

具体的，所述制备方法包括：

将上述药物活性成分和脂质膜材共溶于有机溶剂中，减压蒸发，形成脂质薄膜，然后干燥以完全除去溶剂；

将干燥后的薄膜用PBS水化后超声处理，得粗脂质体；将粗脂质体过滤整粒后即得。

本发明的又一具体实施方式中，所述有机溶剂可选用甲醇、无水乙醇、乙腈和二氯甲烷中的任意一种或多种；

本发明的又一具体实施方式中，减压蒸发温度控制为30-60℃；

本发明的又一具体实施方式中，超声处理控制时间为10-30分钟；

本发明的又一具体实施方式中，过滤整粒具体方法为：将粗脂质体依次通过0.45μm和0.22μm滤膜。

本发明的又一具体实施方式中，提供上述纳米长循环脂质体在制备抗肿瘤药物中的应用。

本发明的又一具体实施方式中，提供一种抗肿瘤药物，所述抗肿瘤药物包括上述纳米长循环脂质体。

本发明提供的抗肿瘤药物，还可以加入适宜的辅料和附加剂利用本领域公知的技术制备成现有不同剂型(dosage form)，如注射液、注射用冻干粉针，脂质体混悬液、片剂、凝胶剂、植入剂等，供静脉注射、局部注射、植入、吸入等途径给药。

需要说明的是，肿瘤在本发明中如本领域技术人员所知的那样加以使用。良性肿瘤被定义为不能在体内形成侵略性、转移性肿瘤的细胞过度增殖。反之，恶性肿瘤被定义为能够形成全身性疾病(例如在远端器官中形成肿瘤转移)的具有多种细胞异常和生化异常的细胞。

本发明的又一具体实施方式中，本发明的药物可用于治疗恶性瘤。可用本发明的药物治疗的恶性瘤的实例包括实体瘤和血液瘤。实体瘤可以是例如乳腺、膀胱、骨、脑、中枢和外周神经系统、结肠、内分泌腺(如甲状腺和肾上腺皮质)、食道、子宫内膜、生殖细胞、头和颈、肾、肝、肺、喉和下咽的肿瘤、间皮瘤、卵巢、胰腺、前列腺、直肠、肾、小肠、软组织、睾丸、胃、皮肤、输尿管、阴道和外阴的肿瘤。恶性瘤包括遗传性癌症，例如视网膜母细胞瘤和肾母细胞瘤(Wilmstumor)。此外，恶性瘤包括在所述器官中的原发性肿瘤及在远端器官中的相应继发性肿瘤(肿瘤转移)。血液瘤可以是例如侵略性和无痛形式的白血病和淋巴瘤，即非霍奇金病、慢性和急性髓样白血病(CML/AML)、急性淋巴细胞性白血病(ALL)、霍奇金病、多发性骨髓瘤和T-细胞型淋巴瘤。还包括骨髓增生异常综合征、浆细胞瘤、类肿瘤综合征和未知原发部位的癌症及AIDS相关的恶性瘤；

本发明的又一具体实施方式中，本发明的药物可用于治疗前列腺癌和肺癌，特别是前列腺癌。

应注意的是，恶性瘤不一定要求在远端器官中形成转移。某些肿瘤通过它们的侵略性生长性质对原发性器官本身施加毁灭性效应。这些可导致组织和器官结构破坏，最终导致所指器官的功能衰竭和死亡。

以下通过实施例对本发明做进一步解释说明，但不构成对本发明的限制。应理解这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。

实施例

1.研究过程

1)不同比例多西他赛-白藜芦醇联合抗肿瘤效果研究

将不同比例多西他赛-白藜芦醇作用于人前列腺癌细胞(PC3、DU145)、肺癌细胞(A549、H460)和肝癌细胞(HepG2、HUH7)，通过抑制增殖和诱导凋亡研究白藜芦醇与多西他赛的协同抗肿瘤活性，通过联合指数(Combination index，CI)评价基于不同比例DTX-Res的联用方案在肿瘤细胞上产生的联合抗肿瘤效应。计算公式如下：

其中，D_m1指的是Drug-1单独用药产生x细胞抑制率时相对应的浓度；D₁指的是当Drug-1与Drug-2联用后产生相同x抑制率时相对应的Drug-1浓度；同理，D_m2指的是单独用药产生x细胞抑制率时相对应的浓度，D₂指的是当Drug-1与Drug-2联用后产生相同抑制率时相对应的Drug-2浓度。

2)共载多西他赛-白藜芦醇长循环纳米脂质体的制备与质量评价

本研究首次使用具有抗肿瘤活性的中药白藜芦醇联用多西他赛，以大豆卵磷脂、胆固醇和DSPE-PEG2000为主要膜材，利用薄膜水化法制备共载多西他赛-白藜芦醇长循环纳米脂质体。将1mol多西他赛、1mol白藜芦醇、1mol大豆卵磷脂，2mol胆固醇与2％DSPE-MPEG2000(w/w)一起溶于20mL二氯甲烷中。将混合物溶液在50℃减压蒸发，形成脂质薄膜，然后真空干燥以完全除去溶剂。将干燥的膜用PBS(pH7.4)水化后超声处理20分钟，以得到粗脂质体。将粗脂质体通过0.45μm和0.22μm滤膜整粒后，以获得最终所需的多西他赛-白藜芦醇长循环纳米脂质体。使用相同的方法制备包载多西他赛的长循环纳米脂质体(DTX-LPNs)，包载白藜芦醇的长循环纳米脂质体(Res-LPNs)，包载香豆素6的长循环纳米脂质体(Coumarin6-LPNs)，以及不包载药物的长循环纳米脂质体(Blank-LPNs)。

3)研究共载药脂质体的体外释放与细胞摄取行为

a.体外释放行为：

在pH 7.4的PBS缓冲溶液下(模拟体液环境)，研究共载多西他赛-白藜芦醇长循环纳米脂质体的释放行为。分别于不同时间点取释放介质进行高效液相色谱分析测定，以药物的累积释药百分数(％)对时间绘制释放曲线；

b.细胞摄取行为：

制备载香豆素-6长循环纳米脂质体，香豆素-6浓度为10μg/mL，阴性对照组为10μg/mL香豆素-6溶液。取对数形式増殖的PC3细胞，经胰蛋白酶消化、离心重悬、细胞计数板计数，2x10⁵cells/well的密度接种6孔板，培养箱内培养至细胞贴壁后，吸除培养液，分别加入实验组和对照组制剂。培养4h后弃去孔内溶液，取提前预冷(4℃)的PBS溶液清洗三遍，除掉残余游离荧光物质，并加入0.5mL/well PBS浸润细胞。处理完毕的6孔板置于共聚焦显微镜下观察各孔荧光强度并拍照。

2)研究共载药脂质体的体内抗肿瘤活性及其副作用评价(关键改进点)

a.抗肿瘤活性评价：

将6周大的雄性Balb/c裸鼠右后肢皮下注射PC3细胞(2×10⁵细胞/0.1mL)。当肿瘤体积≥100mm³时，将小鼠随机分为六组(每组五只小鼠)：(1)0.9％生理盐水组(Control)；(2)多西他赛水溶液组(DTX-Sol)；(3)白藜芦醇水溶液组(Res-Sol)；(4)多西他赛/白藜芦醇混合水溶液组(DTX/Res-Sol)；(5)多西他赛-白藜芦醇长循环纳米脂质体组(DTX/Res-LPNs)；(6)空白长循环纳米脂质体组(Blank-LPNs)。每隔三天通过尾静脉注射给药，DTX剂量为20mg/kg，而Res的剂量为11.3mg/kg(基于DTX/Res的摩尔比为1：2)。治疗过程中测定小鼠的体重和肿瘤大小。通过游标卡尺测量肿瘤体积，并使用以下方程式计算：

V＝a×b²/2

其中a和b分别代表肿瘤的最长和最短直径。在第48天处死小鼠后，立即收获肿瘤组织，切成5μm厚的切片，用H&E(苏木精和伊红)染色以观察组织病理学变化。

2.研究结果

1)白藜芦醇联用多西他赛作用于人前列腺癌细胞PC3、DU145和人肺癌细胞H460具有较强的协同抗肿瘤效果

将不同的摩尔比例的多西他赛和白藜芦醇与不同细胞分别孵育48小时后，评价细胞存活情况。通过计算CI值作为反应协同效应的指标。CI值小于，等于和大于1分别表示协同作用，加和作用和拮抗作用。CI值越接近0，协同作用越强。如图1a，1b和1c所示，与单独给予DTX和Res相比，Res与DTX的联合应用在PC3，DU145和H460细胞中均表现出较高的细胞毒性，这表明联合治疗具有较大的应用潜力。即使对于A549，HepG2和HUH7细胞(图1d，1e和1f)，与单独使用任何一种药物相比，某些摩尔比下联合应用也显示出增强的细胞毒性。由图1可知，DTX与Res以摩尔比1：2时在PC3、DU145、HepG2细胞中呈现最优的抗肿瘤效果；以摩尔比1：1时在A549细胞中呈现最优的抗肿瘤效果；以摩尔比1：4时在H460细胞中呈现最优的抗肿瘤效果；以摩尔比4：1时在HUH7细胞中呈现最优的抗肿瘤效果。

2)白藜芦醇与多西他赛联用可显著诱导H460与PC3细胞的凋亡

如图2所示，对于PC3细胞，20μM DTX+40μM Res联合用药的凋亡细胞百分比(早期凋亡和晚期凋亡细胞的总和)为22.99±1.17％，显著性高于20μM DTX(14.59±3.01％，p<0.05)或40μM Res(11.29±0.80％，p<0.05)单独给药。此外，40μM DTX+80μM Res联合给药的凋亡细胞百分比为69.60±5.94％，也显著性高于40μM DTX(35.65±0.92％，p<0.01)或80μM Res(22.27±3.87％，p<0.01)单独给药(图2a)。对于H460细胞，20μM DTX+40μM Res联合用药的凋亡细胞百分比为39.29±0.19％，显著性高于20μM DTX(17.89±0.39％，p<0.01)。(图2b)。

3)共载多西他赛-白藜芦醇长循环纳米脂质体的表征

如表2所示，不同类型脂质体的平均粒径范围为80至110nm，其中DTX/Res-LPNs的粒径为99.76nm，所有脂质体均带负电荷。DTX和Res在DTX/Res-LPNs中的包封率分别81.52±3.13％和85.27±1.74％。透射电镜观察表明，DTX/Res-LPNs为多层结构，且形状接近球形。(图3a)。

表1.不同类型脂质体的表征(NA表示无)

如图3b所示，在pH 7.4的磷酸缓冲液中，多西紫杉醇和白藜芦醇的体外释放在最开始的4小时内表现为突释现象，并且DTX的累计释放量超过70％，而Res的累计释放量接近60％。但对于共载多西他赛-白藜芦醇长循环纳米脂质体组而言，在最初的12小时内，DTX的累积释放量仅达到48％，Res的累积释放量也仅达到37％，该结果表明共载药脂质体具有良好的控释能力。

为了考察PC3细胞对纳米脂质体的细胞摄取能力，选用荧光染料香豆素-6包载的长循环纳米脂质体以观察其细胞摄取行为。如图4所示，当PC3细胞与香豆素6-LPNs共培养时，其绿色荧光与其他组相比在细胞质中均呈现增强，表明脂质体具有良好的将药物递送至PC3细胞的能力。此外，在香豆素6-溶液和空白-LPNs的混合物组中未观察到大量绿色荧光，这证明简单的药物溶液和空白脂质体混合物的共递送效率不高。

4)共载多西他赛-白藜芦醇长循环纳米脂质体对前列腺癌的治疗作用

如图5所示，生理盐水治疗组小鼠的肿瘤体积和肿瘤重量迅速增加，而单独给予DTX，DTX/Res-Sol和DTX/Res-LPNs组小鼠肿瘤体积明显缩小。其中DTX/Res-LPNs组中的小鼠显着抑制了肿瘤的生长(p<0.05)，与游离Res组相比有显著性差异。应该注意的是，单独给予DTX和DTX/Res-Sol组中的小鼠在给药后前7天显著抑制了肿瘤体积的生长，但是这两组中的所有小鼠分别在第9天和第8天死亡(图5d)。可能的原因是高剂量的DTX在治疗过程中不仅抑制了肿瘤生长，还对小鼠产生了强烈的毒性和副作用。但是，脂质体组通过缓慢释放药物，从而减少了对小鼠的毒性和副作用，因此没有出现过早死亡的现象(图5b)。

通过小鼠的存活曲线和体重以评价制剂的安全性。如图5d和5e所示，与DTX/Res-LPNs组相比，单独给予DTX溶液和DTX/Res混合溶液组的小鼠显示出严重的体重减轻现象，而脂质体组小鼠并未出现体重大幅减轻的情况。并且脂质体组小鼠直到给药48天后无死亡现象，这表明脂质体组具有比其他制剂组更高的安全性。

如图6所示，与其他制剂组相比，共载多西他赛-白藜芦醇长循环纳米脂质体可诱导大量肿瘤细胞的细胞核解和细胞凋亡，证实了DTX/Res-LPNs可以有效抑制肿瘤的生长。

应注意的是，以上实例仅用于说明本发明的技术方案而非对其进行限制。尽管参照所给出的实例对本发明进行了详细说明，但是本领域的普通技术人员可根据需要对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的精神和范围。

Claims (10)

1.多西他赛联合白藜芦醇在制备抗肿瘤药物中的应用。

2.如权利要求1所述应用，其特征在于，所述多西他赛与白藜芦醇的摩尔比为1：0.25～4，优选为1：0.25、1：0.5、1：1、1：2和1：4。

3.一种纳米长循环脂质体，其特征在于，所述脂质体包括药物活性成分和脂质膜材，其中所述药物活性成分为多西他赛与白藜芦醇；所述脂质膜材包括大豆卵磷脂、胆固醇和DSPE-PEG2000。

4.如权利要求3所述的纳米长循环脂质体，其特征在于，所述多西他赛与白藜芦醇的摩尔比为1：0.25～4，优选为1：0.25、1：0.5、1：1、1：2和1：4。

5.如权利要求3所述的纳米长循环脂质体，其特征在于，所述多西他赛、大豆卵磷脂和胆固醇的摩尔比为1：1：1～3，优选:1：1：2；

DSPE-PEG2000的加入量为总物料的1％-5％，w/w。

6.权利要求3-5任一项所述纳米长循环脂质体的制备方法，其特征在于，所述方法包括采用薄膜水化法制备所述纳米长循环脂质体。

7.如权利要求6所述制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：

将所述药物活性成分和脂质膜材共溶于有机溶剂中，减压蒸发，形成脂质薄膜，然后干燥以完全除去溶剂；

将干燥后的薄膜用PBS水化后超声处理，得粗脂质体；将粗脂质体过滤整粒后即得。

8.如权利要求6所述制备方法，其特征在于，所述有机溶剂可选用甲醇、无水乙醇、乙腈和二氯甲烷中的任意一种或多种；

减压蒸发温度控制为30-60℃；

超声处理控制时间为10-30分钟；

过滤整粒具体方法为：将粗脂质体依次通过0.45μm和0.22μm滤膜。

9.权利要求3-5任一项所述纳米长循环脂质体在制备抗肿瘤药物中的应用；优选的，所述肿瘤为前列腺癌和肺癌。

10.一种抗肿瘤药物，其特征在于，所述抗肿瘤药物包括权利要求3-5任一项所述纳米长循环脂质体。

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