CN111528458A - 一种基于酵母菌和植物乳杆菌分段发酵花果得到的功能性原料及其应用 - Google Patents

一种基于酵母菌和植物乳杆菌分段发酵花果得到的功能性原料及其应用 Download PDF

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Abstract

本发明属于发酵技术领域，公开一种基于酵母菌和植物乳杆菌分段发酵花果得到的功能性原料，花果包括葛根、葛花、玉米芯、橘红、麦芽。本发明先用酵母菌发酵葛根和麦芽，发酵结束后再利用植物乳杆菌发酵葛花、玉米芯、橘红和麦芽，酵母菌的好氧发酵能很好的利用葛根和麦芽中的糖、蛋白等成分，可以分解营养物产生适合植物乳杆菌生产的营养成分，而且不会产生酒精或酒精生产量少，可以加快植物乳杆菌的快速生长繁殖，使制备得到的功能性原料中的总黄酮含量大幅度增加，从而增加了其抗氧化性能和抑制酪氨酸酶的活性。最终制备得到的功能性原料可以用于食品、美容用品；具体的，可以是固体饮料，液体饮料，护肤品等产品中，具有实际和广泛的应用价值。

Description

一种基于酵母菌和植物乳杆菌分段发酵花果得到的功能性原 料及其应用
技术领域
本发明属于发酵技术领域，具体涉及一种基于酵母菌和植物乳杆菌分段发酵花果得到的功能性原料及其应用。
背景技术
发酵是指人们借助微生物在有氧或无氧条件下的生命活动来制备微生物菌体本身、或者直接代谢产物或次级代谢产物的过程。发酵有时也写作酦酵，其定义由使用场合的不同而不同。通常所说的发酵，多是指生物体对于有机物的某种分解过程。发酵是人类较早接触的一种生物化学反应，如今在食品工业、生物和化学工业中均有广泛应用。
黄酮类化合物（flavonoids）是一类存在于自然界的、具有2-苯基色原酮（flavone）结构的化合物。它们分子中有一个酮式羰基，第一位上的氧原子具碱性，能与强酸成盐，其羟基衍生物多具黄色，故又称黄碱素或黄酮。黄酮类化合物在植物体中通常与糖结合成苷类，小部分以游离态（苷元）的形式存在。绝大多数植物体内都含有黄酮类化合物，它在植物的生长、发育、开花、结果以及抗菌防病等方面起着重要的作用。
功能性原料因其丰富的营养元素以及广泛的应用场景，使得其备受现代人们喜爱，现有技术也有越来越多功能性原料的研究，黄酮类化合物作为功能性原料的一种，其应用还较少，原因主要是目前植物中黄酮类化合物的含量较低，不利于植物资源的利用和黄酮类化合物的价值推广和应用。
发明内容
为了克服上述现有技术的不足，本发明的目的是提供一种基于酵母菌和植物乳杆菌分段发酵花果得到的功能性原料。
本发明的第二个目的是提供上述功能性原料的应用。
为实现上述目的，本发明所采用的技术方案为：
一种基于酵母菌和植物乳杆菌分段发酵花果得到的功能性原料，其特征在于，所述花果包括葛根、葛花、玉米芯、橘红、麦芽。
优选的，所述分段发酵的过程为：
S1、利用酵母菌对第一发酵底物进行发酵，所述第一发酵底物包括葛根、麦芽，发酵结束后得酵母菌发酵液；
S2、步骤S1的酵母菌发酵液灭菌后，加入第二发酵底物，所述第二发酵底物包括葛花、玉米芯、橘红、麦芽，得到混合底料，然后利用植物乳杆菌发酵混合底料得终发酵液。
S3、步骤S2的终发酵液经灭菌、过滤收集上清；
S4、上清经浓缩后，以浓缩液作为芯材，添加壁材，经喷雾干燥制得的干粉即为功能性原料。
优选的，步骤S4喷雾干燥时采用低温喷雾干燥设备，低温喷雾干燥设备可以尽量的降低温度过高对酶的损耗；壁材选自麦芽糊精或者β-环糊精，其中，出料温度为50-65℃，物料浓度为10%，进料速度为15-25 mL/min。步骤S4中所述壁材与芯材的用量比为1：5-10。
优选的，步骤S1的发酵方法具体为：将酵母菌活化液加入第一发酵底物中，25-30℃下发酵，然后升温至38-42℃发酵，发酵全程通入滤菌空气。
优选的，步骤S2的发酵方法具体为：植物乳杆菌活化液加入混合底料后，通入滤菌空气、35-38℃发酵20-30h，然后停止通入滤菌空气，35-38℃搅拌发酵45-50h。
葛根又名葛藤，葛麻叶，甜葛藤，粉葛藤等，属多年生缠绕藤本植物；中药葛根具体指豆科植物野葛的干燥根，素有“南方人参”的美誉。葛根主要成份为葛根素、大豆苷元、大豆苷等异黄酮类化合物，并含有多糖及多种微量元素。其主要活性物质为葛根黄酮类物质，尤以葛根素含量最高，功能最突出。葛根素有抗氧自由基、解酒护肝、护肤养颜、改善骨质疏松、调节雌激素，以及改善微循环、改善心肌耗氧量、降脂减肥、调节血压、降血糖等多种保健功能。
葛花为豆科植物野葛或甘葛藤的花，又称粉葛花，甘葛龙。具有解酒醒牌，治伤酒发热烦漏，不思饮食，呕逆吐酸、呕血等作用。同时具有清热解毒、养肝、护胃、补肾之功效，而葛花异黄酮为其主要有效成分。
麦芽为大麦的成熟果实经发芽干燥而得。在临床上生麦芽常用于健脾和胃、通乳。麦芽主要含有α-淀粉酶，β-淀粉酶，催化酶，过氧化异构酶，大麦芽碱大麦芽胍碱A、B，腺嘌呤，胆碱，蛋白质，氨基酸，维生素A、D、E，细胞色素C，白栝楼碱等。麦黄酮为麦芽中主要的黄酮类成分。
玉米芯是甜玉米棒脱粒加工之后，经过严格筛选制作而成，其具有良好的硬度、韧性、吸水性和耐磨性。甜玉米芯中富含大量黄酮类物质。
橘红为芸香科植物及其栽培变种的干燥外层果皮，富含黄酮类物质，具有治疗风寒咳嗽、慢性气管炎、哮喘、喉痒痰多、胸中痰滞、呕吐呃逆、饮食积滞、食积伤酒、呕恶痞闷、长期胃痛、气痛等多重功效。
葛根、葛花、麦芽、玉米芯和橘红都富含黄酮类物质，本发明采用酵母菌和植物乳杆菌对上述原料进行分段发酵，先用酵母菌发酵葛根和麦芽，发酵结束后再利用植物乳杆菌发酵葛花、玉米芯、橘红和麦芽，酵母菌和植物乳杆菌发酵条件差异较大，酵母菌发酵需要通入大量氧气，植物乳杆菌发酵只需微氧，一起发酵时酵母菌会抑制植物乳杆菌的生长，分阶段培养可以更好控制发酵条件；酵母菌的好氧发酵能很好的利用葛根和麦芽中的糖、蛋白等成分，酵母菌先在28℃等较低温度下培养可以让酵母菌菌体快速生长繁殖，然后再升温到40℃较高的温度下可以让酵母菌更快发酵分解营养物产生适合植物乳杆菌生产的营养成分（如氨基酸、维生素、生长因子等），而且不会产生酒精或酒精产量少，可以加快植物乳杆菌的快速生长繁殖，如此再经植物乳杆菌发酵后使终发酵液中总黄酮含量大幅度增加，从而增加了其抗氧化性能和抑制酪氨酸酶的活性。
优选的，酵母菌活化液的添加体积为第一发酵底物的3-8%。
优选的，植物乳杆菌活化液的添加体积为混合底料的3-8%。
优选的，步骤S1在 25-30℃下发酵20-25h，然后升温至38-42℃发酵65-75h。
优选的，步骤S1的第一发酵底物按重量份计，包括以下组分：葛根8-15份、麦芽8-15份、葡萄糖1-4份、糖蜜2-8份、水100-150份。
更具体的，步骤S1的第一发酵底物按重量份计，包括以下组分：葛根10份、麦芽10份、葡萄糖2份、糖蜜5份、水100份。
优选的，所述第二发酵底物按重量份计，包括以下组分：葛花8-15份、玉米芯8-15份、橘红8-15份、麦芽8-15份、葡萄糖8-15份、糖蜜8-15份、磷酸氢二钾1-3份，水120-180份。
更具体的，第二发酵底物按重量份计，包括以下组分：葛花10份、玉米芯10份、橘红10份、麦芽10份、葡萄糖10份、糖蜜10份、磷酸氢二钾2份，水150份。
优选的，所述葛根、葛花、麦芽、玉米芯和橘红在使用前先经过以下预处理：烘干，然后磨成粉，并过40-80目筛。
本发还提供所述功能原料在抑制酪氨酸酶活性方面的应用。
本发明还提所述供功能原料在提高抗氧化性能方面的应用。
本发明还提供所述功能原料在制备功能性产品中的应用，其特征在于，所述功能性产品包括但不限于食品、美容用品、医药、保健品。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
本发明提供一种基于酵母菌和植物乳杆菌分段发酵花果得到的功能性原料，所述花果包括葛根、葛花、玉米芯、橘红、麦芽。本发明先用酵母菌发酵葛根和麦芽，发酵结束后再利用植物乳杆菌发酵葛花、玉米芯、橘红和麦芽，酵母菌的好氧发酵能很好的利用葛根和麦芽中的糖、蛋白等成分，可以分解营养物产生适合植物乳杆菌生产的营养成分（如氨基酸、维生素、生长因子等），而且不会产生酒精或酒精生产量少，可以加快植物乳杆菌的快速生长繁殖，使制备得到的功能性原料中的总黄酮含量大幅度增加，从而增加了其抗氧化性能和抑制酪氨酸酶的活性。
最终制备得到的功能性原料可以用于食品、美容用品；具体的，可以是固体饮料，液体饮料，护肤品等产品中，具有实际和广泛的应用价值。
附图说明
图1为功能性原料中总黄酮含量的测定；
图2为功能性原料的抗氧化活性测定；
图3为功能性原料的酪氨酸酶抑制率测定。
具体实施方式
下面对本发明的具体实施方式作进一步说明。在此需要说明的是，对于这些实施方式的说明用于帮助理解本发明，但并不构成对本发明的限定。此外，下面所描述的本发明各个实施方式中所涉及的技术特征只要彼此之间未构成冲突就可以相互组合。
下述实验例中所使用的试验方法如无特殊说明，均为常规方法；所使用的材料、试剂等，如无特殊说明，为可从商业途径得到的试剂和材料。
实施例1
一种基于酵母菌和植物乳杆菌分段发酵花果得到的功能性原料，包括以下步骤：
S1、预处理：将酿酒酵母接种于PDA培养基28℃下培养24h，收集酵母菌活化液备用；将植物乳杆菌接种于MRS培养基，37℃下培养12h，收集植物乳杆菌活化液备用；将葛根、葛花、麦芽、玉米芯和橘红烘干，然后磨成份，并过60目筛，备用；
S2、将酵母菌活化液添加到第一发酵底物（葛根10kg、麦芽10kg、葡萄糖2kg、糖蜜5kg、水100kg）中，28℃先搅拌发酵24h，然后升温至40℃搅拌发酵72h，发酵全程通入滤菌空气，所酵母菌活化液的添加体积为第一发酵底物的5%；
S3、酿酒酵母发酵结束后升温至70℃，灭菌处理20min后收集得到酵母发酵液；
S4、往步骤S3的酵母菌发酵液中加入第二发酵底物得到混合底料，所述第二发酵底物按重量份计，包括以下组分：葛花10kg、玉米芯10kg、橘红10kg、麦芽10kg、葡萄糖10kg、糖蜜10kg、磷酸氢二钾2kg，水150kg；
S5、调节混合底料的pH为6.5，然后将植物乳杆菌活化液加入到混合底料中，通入滤菌空气、37℃搅拌发酵24h，然后停止通入滤菌空气，37℃再搅拌发酵48h，所述植物乳杆菌活化液的添加体积为混合底料的5%；
S6、植物乳杆菌发酵结束后升温至121℃，灭菌处理30min后收集终发酵液；
S7、将灭菌后终发酵液用膜过滤处理得到发酵上清；
S8、将发酵上清浓缩至原来的五分之一，然后往其中添加环糊精（环糊精的添加质量为浓缩上清的4%），混匀再添加麦芽糊精（麦芽糊精的添加质量为浓缩上清的6%），最后在60℃下经喷雾干燥处理成干粉，得到本发明的功能性原料。
实施例2
一种基于酵母菌和植物乳杆菌分段发酵花果得到的功能性原料，包括以下步骤：
S1、预处理：同实施例1；
S2、将酵母菌活化液添加到第一发酵底物（葛根8kg、麦芽8kg、葡萄糖1kg、糖蜜2kg、水100kg）中，26℃先搅拌发酵20h，然后升温至38℃搅拌发酵65h，发酵全程通入滤菌空气，所酵母菌活化液的添加体积为第一发酵底物的3%；
S3、酿酒酵母发酵结束后升温至70℃，灭菌处理20min后收集得到酵母发酵液；
S4、往步骤S3的酵母菌发酵液中加入第二发酵底物得到混合底料，所述第二发酵底物按重量份计，包括以下组分：葛花8kg、玉米芯8kg、橘红8kg、麦芽8kg、葡萄糖8kg、糖蜜8kg、磷酸氢二钾1kg，水120kg；
S5、调节混合底料的pH为6.5，然后将植物乳杆菌活化液加入到混合底料中，通入滤菌空气、35℃搅拌发酵20h，然后停止通入滤菌空气，35℃再搅拌发酵45h，所述植物乳杆菌活化液的添加体积为混合底料的4%；
S6、植物乳杆菌发酵结束后升温至121℃，灭菌处理30min后收集终发酵液；
S7、将灭菌后终发酵液用膜过滤处理得到发酵上清；
S8、将发酵上清浓缩至原来的五分之一，然后往其中添加环糊精（环糊精的添加质量为浓缩上清的5%），混匀再添加麦芽糊精（麦芽糊精的添加质量为浓缩上清的15%），最后在60℃下经喷雾干燥处理成干粉，得到本发明的功能性原料。
实施例3
一种基于酵母菌和植物乳杆菌分段发酵花果得到的功能性原料，包括以下步骤：
S1、预处理：同实施例1；
S2、将酵母菌活化液添加到第一发酵底物（葛根15kg、麦芽15kg、葡萄糖4kg、糖蜜8kg、水150kg）中，30℃先搅拌发酵25h，然后升温至42℃搅拌发酵75h，发酵全程通入滤菌空气，所酵母菌活化液的添加体积为第一发酵底物的8%；
S3、酿酒酵母发酵结束后升温至70℃，灭菌处理20min后收集得到酵母发酵液；
S4、往步骤S3的酵母菌发酵液中加入第二发酵底物得到混合底料，所述第二发酵底物按重量份计，包括以下组分：葛花15kg、玉米芯15kg、橘红15kg、麦芽15kg、葡萄糖15kg、糖蜜15kg、磷酸氢二钾3kg，水180kg；
S5、调节混合底料的pH为6.5，然后将植物乳杆菌活化液加入到混合底料中，通入滤菌空气、38℃搅拌发酵30h，然后停止通入滤菌空气，38℃再搅拌发酵50h，所述植物乳杆菌活化液的添加体积为混合底料的8%；
S6、植物乳杆菌发酵结束后升温至121℃，灭菌处理30min后收集终发酵液；
S7、将灭菌后终发酵液用膜过滤处理得到发酵上清；
S8、将发酵上清浓缩至原来的五分之一，然后往其中添加环糊精（环糊精的添加质量为浓缩上清的2%），混匀再添加麦芽糊精（麦芽糊精的添加质量为浓缩上清的14%），最后在60℃下经喷雾干燥处理成干粉，得到本发明的功能性原料。
对比例1
一种基于酵母菌和植物乳杆菌分段发酵花果得到的功能性原料，基本同实施例1，唯一不同的是：步骤S2替换为：将酵母菌活化液添加到第一发酵底物（葛根10kg、麦芽10kg、葡萄糖2kg、糖蜜5kg、水100kg）中，28℃搅拌发酵96h发酵全程通入滤菌空气，所酵母菌活化液的添加体积为第一发酵底物的5%。
对比例2
一种基于酵母菌和植物乳杆菌分段发酵花果得到的功能性原料，包括以下步骤：
S1、预处理：同实施例1；
S2、将酵母菌活化液和植物乳杆菌活化液同时添加到发酵底物（葛花10kg、玉米芯10kg、橘红10kg、麦芽10kg、葡萄糖10kg、糖蜜10kg、磷酸氢二钾2kg，水150kg）中，28℃先搅拌发酵24h，然后升温至40℃搅拌发酵72h，发酵全程通入滤菌空气，所酵母菌活化液和植物乳杆菌活化液的添加体积分别为发酵底物的5%；
S3、发酵结束后升温至121℃，灭菌处理30min后收集终发酵液；
S4、将灭菌后终发酵液用膜过滤处理得到发酵上清；
S5、将发酵上清浓缩至原来的五分之一，然后往其中添加环糊精（环糊精的添加质量为浓缩上清的4%），混匀再添加麦芽糊精（麦芽糊精的添加质量为浓缩上清的6%），最后在60℃下经喷雾干燥处理成干粉，得到本发明的功能性原料。
对比例3
一种基于酵母菌发酵花果得到的功能性原料，包括以下步骤：
S1、预处理：将酿酒酵母接种于PDA培养基28℃下培养24h，收集酵母菌活化液备用；将葛根、葛花、麦芽、玉米芯和橘红烘干，然后磨成份，并过60目筛，备用；
S2、将酵母菌活化液添加到发酵底物（葛花10kg、玉米芯10kg、橘红10kg、麦芽10kg、葡萄糖10kg、糖蜜10kg、磷酸氢二钾2kg，水150kg）中，28℃先搅拌发酵24h，然后升温至40℃搅拌发酵72h，发酵全程通入滤菌空气，所酵母菌活化液的添加体积为发酵底物的5%；
S3、发酵结束后升温至121℃，灭菌处理30min后收集终发酵液；
S4、将灭菌后终发酵液用膜过滤处理得到发酵上清；
S5、将发酵上清浓缩至原来的五分之一，然后往其中添加环糊精（环糊精的添加质量为浓缩上清的4%），混匀再添加麦芽糊精（麦芽糊精的添加质量为浓缩上清的6%），最后在60℃下经喷雾干燥处理成干粉，得到本发明的功能性原料。
对比例4
一种基于植物乳杆菌发酵花果得到的功能性原料，包括以下步骤：
S1、预处理：将植物乳杆菌接种于MRS培养基，37℃下培养12h，收集植物乳杆菌活化液备用；将葛根、葛花、麦芽、玉米芯和橘红烘干，然后磨成份，并过60目筛，备用；
S2、将植物乳杆菌活化液加入到第二发酵底物中，所述第二发酵底物按重量份计，包括以下组分：葛花10kg、玉米芯10kg、橘红10kg、麦芽10kg、葡萄糖10kg、糖蜜10kg、磷酸氢二钾2kg，水150kg；
S3、调节混合底料的pH为6.5，通入滤菌空气、37℃搅拌发酵24h，然后停止通入滤菌空气，37℃再搅拌发酵48h，所述植物乳杆菌活化液的添加体积为混合底料的5%；
S4、植物乳杆菌发酵结束后升温至121℃，灭菌处理30min后收集终发酵液；
S5、将灭菌后终发酵液用膜过滤处理得到发酵上清；
S6、将发酵上清浓缩至原来的五分之一，然后往其中添加环糊精（环糊精的添加质量为浓缩上清的4%），混匀再添加麦芽糊精（麦芽糊精的添加质量为浓缩上清的6%），最后在60℃下经喷雾干燥处理成干粉，得到本发明的功能性原料。
一、发酵液总黄酮含量测定
（1）原理
黄酮母核中含有碱性氧原子，一般又多带酚羟基，能和铝离子产生黄色络合物，又加入亚硝酸钠和氢氧化钠，使在碱性溶液中呈红色，溶液在510nm处有最大吸收，显色反应在60min内稳定。用芦丁作为对照品，用硝酸铝作为黄酮类比色测定的显色剂，吸光度与芦丁的浓度呈线形关系，采用分光光度法对总黄酮进行了含量测定。
（2）仪器与试剂
紫外可见分光光度计，电子天平（0.1mg）；60%的乙醇溶液；5%亚硝酸钠溶液；10%硝酸铝溶液。
（3）芦丁标准溶液的配制
称量13.2mg芦丁，用60%乙醇定容到25mL容量瓶作为标准溶液。
（4）标准曲线的制作
准确吸取0，0.4，0.8，1.2，1.6，2.0mL芦丁标准溶液，加入10毫升容量瓶内，然后分别加入2.0、1.6、1.2、0.8、0.4、0mL的60%乙醇溶液，再加入5%亚硝酸钠溶液0.5mL摇匀，放置6min；加入10%硝酸铝溶液0.5mL，放置6min后，加入4%氢氧化钠溶液4.0mL，加60%乙醇定容，摇匀后，放置15min；在510nm处测定吸光度，用0.0mL作为空白，用芦丁含量的浓度作为横坐标，纵坐标作为一定浓度下所对应的吸光度，作标准曲线。
（5）总黄酮含量的测定和计算
分别称取0.8g实施例1和对比例1-4中的样品粉末，加入60mL 60%乙醇放于100mL圆底烧瓶内，置于水浴锅上，70℃条件下回流提取60min，过滤、定容于100mL，吸取样品量1.0mL，放入10毫升容量瓶内，用60%乙醇加到2.0mL，加入5%亚硝酸钠溶液0.5mL，摇匀，放置6min；加入10%硝酸铝，溶液0.5mL，放置6min后，加入4%氢氧化钠溶液4.0mL，摇匀后，加60%乙醇定容，放置15min；在510nm处测定吸光度，根据标准曲线计算总黄酮的含量。
总黄酮含量=A/M×100×稀释倍数，A为标准曲线中的含量，M为样品的质量(mg)。
测定结果见图1。由图1可见，采用本发明的基于酵母菌和植物乳杆菌分段发酵的方法，制备得到的发酵液的总黄酮含量得到较明显的提高。
二、发酵液抗氧化活性测定
（1）DPPH（1,1-二苯基-2-三硝基苯肼）贮备液的制备
准确称取DPPH试剂3.5mg，用无水乙醇溶解，并定量转入10mL容量瓶中，用无水乙醇定容至刻度，取2L至100mL容量瓶中，摇匀得浓度为0.0178mmo1/L DPPH贮备液，置于冰箱中冷藏备用。
（2）试液的制备
分别称取5.2mg实施例1和对比例1-4中的样品粉末，用无水乙醇溶解，并定量转入50mL容量瓶中，用无水乙醇定量至刻度，取10mL至100mL容量瓶中，摇匀得浓度为0.0233mmo1/L试液。
（3）DPPH自由基清除率的测定
在10mL比色管中依次加入4.0mL DPPH溶液和黄酮提取液，再加入无水乙醇至刻度，混匀立即用1cm比色皿在517nm波长处测吸光值（A），吸光值记为Ai，再在温室避光保存30min后测吸光值，记为Aj，对照试验为只加DPPH的乙醇溶液，其吸光值记为Ac。按下式计算自由基清除率（K）：K（%）=[1-（Ai-Aj）/Ac]*100%。
测定结果见图2。由图2可见，采用本发明的基于酵母菌和植物乳杆菌分段发酵的方法，制备得到的发酵液的DPPH自由基清除率得到较明显的提高，说明其抗氧化能力较好。
三、发酵液酪氨酸酶活性的测定
（1）试液的制备
分别称取5.2mg实施例1和对比例1-4中的样品粉末，用无水乙醇溶解，并定量转入50mL容量瓶中，用无水乙醇定量至刻度，取10mL至100mL容量瓶中，摇匀得浓度为0.0233mmo1/L试液。
采用分光光度法测定，用蒸馏水校正零点，向试管中分别加入0.5mL待测试液，一定量pH7.1的磷酸盐缓冲液，2.0mL左旋多巴溶液以及2.0mL蒸馏水，35℃温育10min后，加入0.5mL粗酪氨酸酶提取液，立刻在475nm处测定吸光度A，记录初始吸光度A0，此后每2min记录1次，连续记录至14min。其中待测试液的浓度是0.20mg/mL，底物左旋多巴浓度为0.016mol/L。用芦丁作为对照组。通过测定酶催化反应体系的OD475mm随时间的增长直线，从直线斜率即可求得酶活力。
酶活力的计算公式：酶活力=（A14-A0）×1000/14。
式中：A14表示在14min时测得的吸光度值；A0表示初始测得的吸光度值。
测定结果见图3。由图3可见，采用本发明的基于酵母菌和植物乳杆菌分段发酵的方法，制备得到的发酵液的酪氨酸酶抑制率得到较明显的提高。
以上对本发明的实施方式作了详细说明，但本发明不限于所描述的实施方式。对于本领域的技术人员而言，在不脱离本发明原理和精神的情况下，对这些实施方式进行多种变化、修改、替换和变型，仍落入本发明的保护范围内。

Claims (10)

1.一种基于酵母菌和植物乳杆菌分段发酵花果得到的功能性原料，其特征在于，所述花果包括葛根、葛花、玉米芯、橘红、麦芽。
2.根据权利要求1所述的基于酵母菌和植物乳杆菌分段发酵花果得到的功能性原料，其特征在于，所述分段发酵的过程为：
S1、利用酵母菌对第一发酵底物进行发酵，所述第一发酵底物包括葛根、麦芽，发酵结束后得酵母菌发酵液；
S2、步骤S1的酵母菌发酵液灭菌后，加入第二发酵底物，所述第二发酵底物包括葛花、玉米芯、橘红、麦芽，得到混合底料，然后利用植物乳杆菌发酵混合底料得终发酵液；
S3、步骤S2的终发酵液经灭菌、过滤收集上清；
S4、上清经浓缩后，以浓缩液作为芯材，添加壁材，经喷雾干燥制得的干粉即为功能性原料。
3.根据权利要求2所述的基于酵母菌和植物乳杆菌分段发酵花果得到的功能性原料，其特征在于，步骤S4中所述壁材与芯材的用量比为1：5-10。
4.根据权利要求3所述的基于酵母菌和植物乳杆菌分段发酵花果得到的功能性原料，其特征在于，步骤S1的发酵方法具体为：将酵母菌活化液加入第一发酵底物中，25-30℃下发酵，然后升温至38-42℃发酵，发酵全程通入滤菌空气。
5.根据权利要求4所述的基于酵母菌和植物乳杆菌分段发酵花果得到的功能性原料，其特征在于，所述第一发酵底物按重量份计，包括以下组分：葛根8-15份、麦芽8-15份、葡萄糖1-4份、糖蜜2-8份、水100-150份；酵母菌活化液的添加体积为第一发酵底物的3-8%。
6.根据权利要求1所述的基于酵母菌和植物乳杆菌分段发酵花果得到的功能性原料，其特征在于，步骤S2的发酵方法具体为：植物乳杆菌活化液加入混合底料后，通入滤菌空气、35-38℃发酵20-30h，然后停止通入滤菌空气，35-38℃搅拌发酵45-50h。
7.根据权利要求6所述的基于酵母菌和植物乳杆菌分段发酵花果得到的功能性原料，其特征在于，所述第二发酵底物按重量份计，包括以下组分：葛花8-15份、玉米芯8-15份、橘红8-15份、麦芽8-15份、葡萄糖8-15份、糖蜜8-15份、磷酸氢二钾1-3份，水120-180份；植物乳杆菌活化液的添加体积为混合底料的3-8%。
8.权利要求1至7任一项所述功能原料在抑制酪氨酸酶活性方面的应用。
9.权利要求1至7任一项所述功能原料在提高抗氧化性能方面的应用。
10.权利要求1至7任一项所述功能原料在制备功能性产品中的应用，其特征在于，所述功能性产品包括但不限于食品、美容用品、医药、保健品。
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