CN111518213B - 抗her2的双特异性抗体及其应用 - Google Patents
抗her2的双特异性抗体及其应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN111518213B CN111518213B CN202010078527.1A CN202010078527A CN111518213B CN 111518213 B CN111518213 B CN 111518213B CN 202010078527 A CN202010078527 A CN 202010078527A CN 111518213 B CN111518213 B CN 111518213B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- seq
- heavy chain
- bispecific antibody
- her2
- hcdr1
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 101001012157 Homo sapiens Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Proteins 0.000 title claims abstract description 107
- 102100030086 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Human genes 0.000 title claims abstract description 90
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 23
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 15
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 14
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract description 13
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 123
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 33
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 28
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 22
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 22
- 102220044643 rs587781450 Human genes 0.000 claims description 22
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 19
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 claims description 14
- 102220041067 rs587778601 Human genes 0.000 claims description 14
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 claims description 13
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 claims description 13
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims description 13
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 claims description 12
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 claims description 9
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 claims description 9
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 8
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 7
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 claims description 7
- 239000013598 vector Substances 0.000 claims description 7
- 230000035772 mutation Effects 0.000 claims description 6
- AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N Doxorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N 0.000 claims description 4
- 108010003272 Hyaluronate lyase Proteins 0.000 claims description 4
- 102000001974 Hyaluronidases Human genes 0.000 claims description 4
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 claims description 4
- 208000005718 Stomach Neoplasms Diseases 0.000 claims description 4
- 229940122429 Tubulin inhibitor Drugs 0.000 claims description 4
- 239000002254 cytotoxic agent Substances 0.000 claims description 4
- 239000003534 dna topoisomerase inhibitor Substances 0.000 claims description 4
- 206010017758 gastric cancer Diseases 0.000 claims description 4
- 229960002773 hyaluronidase Drugs 0.000 claims description 4
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 claims description 4
- 230000004048 modification Effects 0.000 claims description 4
- 238000012986 modification Methods 0.000 claims description 4
- 150000007523 nucleic acids Chemical group 0.000 claims description 4
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims description 4
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims description 4
- -1 pyrrole benzodiazepine compound Chemical class 0.000 claims description 4
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 claims description 4
- 229940044693 topoisomerase inhibitor Drugs 0.000 claims description 4
- SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N D-mannomethylose Natural products CC1OC(O)C(O)C(O)C1O SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- PNNNRSAQSRJVSB-SLPGGIOYSA-N Fucose Natural products C[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-SLPGGIOYSA-N 0.000 claims description 3
- SHZGCJCMOBCMKK-DHVFOXMCSA-N L-fucopyranose Chemical compound C[C@@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-DHVFOXMCSA-N 0.000 claims description 3
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 claims description 3
- 229930195731 calicheamicin Natural products 0.000 claims description 3
- HXCHCVDVKSCDHU-LULTVBGHSA-N calicheamicin Chemical group C1[C@H](OC)[C@@H](NCC)CO[C@H]1O[C@H]1[C@H](O[C@@H]2C\3=C(NC(=O)OC)C(=O)C[C@](C/3=C/CSSSC)(O)C#C\C=C/C#C2)O[C@H](C)[C@@H](NO[C@@H]2O[C@H](C)[C@@H](SC(=O)C=3C(=C(OC)C(O[C@H]4[C@@H]([C@H](OC)[C@@H](O)[C@H](C)O4)O)=C(I)C=3C)OC)[C@@H](O)C2)[C@@H]1O HXCHCVDVKSCDHU-LULTVBGHSA-N 0.000 claims description 3
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 claims description 3
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 claims description 3
- LMGGOGHEVZMZCU-FGJMKEJPSA-N (2s,4s)-4-[(2r,4s,5s,6s)-4-amino-5-hydroxy-6-methyloxan-2-yl]oxy-2,5,7,12-tetrahydroxy-6,11-dioxo-3,4-dihydro-1h-tetracene-2-carboxylic acid Chemical compound C1[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1C2=C(O)C(C(=O)C3=C(O)C=CC=C3C3=O)=C3C(O)=C2C[C@@](O)(C(O)=O)C1 LMGGOGHEVZMZCU-FGJMKEJPSA-N 0.000 claims description 2
- 102000004243 Tubulin Human genes 0.000 claims description 2
- 108090000704 Tubulin Proteins 0.000 claims description 2
- 108010044540 auristatin Proteins 0.000 claims description 2
- 229960004679 doxorubicin Drugs 0.000 claims description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 2
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 claims description 2
- 239000000833 heterodimer Substances 0.000 claims description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 2
- 210000001236 prokaryotic cell Anatomy 0.000 claims description 2
- 102100035360 Cerebellar degeneration-related antigen 1 Human genes 0.000 claims 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims 1
- 238000011282 treatment Methods 0.000 abstract description 8
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 abstract description 7
- 229960000575 trastuzumab Drugs 0.000 description 77
- 229960002087 pertuzumab Drugs 0.000 description 61
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 40
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 22
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 21
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 18
- 102000051957 human ERBB2 Human genes 0.000 description 17
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 17
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 16
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 14
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 14
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 13
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 12
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 12
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 10
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 10
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 10
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 10
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 10
- UQLDLKMNUJERMK-UHFFFAOYSA-L di(octadecanoyloxy)lead Chemical compound [Pb+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O UQLDLKMNUJERMK-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 9
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 9
- YOHYSYJDKVYCJI-UHFFFAOYSA-N n-[3-[[6-[3-(trifluoromethyl)anilino]pyrimidin-4-yl]amino]phenyl]cyclopropanecarboxamide Chemical compound FC(F)(F)C1=CC=CC(NC=2N=CN=C(NC=3C=C(NC(=O)C4CC4)C=CC=3)C=2)=C1 YOHYSYJDKVYCJI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 9
- PLOKOIJSGCISHE-BYULHYEWSA-N Asp-Val-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O PLOKOIJSGCISHE-BYULHYEWSA-N 0.000 description 8
- YWAQATDNEKZFFK-BYPYZUCNSA-N Gly-Gly-Ser Chemical compound NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YWAQATDNEKZFFK-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 8
- FUVBEZJCRMHWEM-FXQIFTODSA-N Pro-Asn-Ser Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O FUVBEZJCRMHWEM-FXQIFTODSA-N 0.000 description 8
- 108010077245 asparaginyl-proline Proteins 0.000 description 8
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 8
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 8
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 8
- 102000052116 epidermal growth factor receptor activity proteins Human genes 0.000 description 8
- 108700015053 epidermal growth factor receptor activity proteins Proteins 0.000 description 8
- DVWVZSJAYIJZFI-FXQIFTODSA-N Ala-Arg-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O DVWVZSJAYIJZFI-FXQIFTODSA-N 0.000 description 7
- YFBBUHJJUXXZOF-UWVGGRQHSA-N Leu-Gly-Pro Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O YFBBUHJJUXXZOF-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 7
- CUMXHKAOHNWRFQ-BZSNNMDCSA-N Phe-Asp-Tyr Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 CUMXHKAOHNWRFQ-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 7
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 7
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 7
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 7
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 7
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 7
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- FADYJNXDPBKVCA-UHFFFAOYSA-N L-Phenylalanyl-L-lysin Natural products NCCCCC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 FADYJNXDPBKVCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 6
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 6
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 6
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 6
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 6
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 5
- ZFADFBPRMSBPOT-KKUMJFAQSA-N Gln-Arg-Phe Chemical compound N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](Cc1ccccc1)C(O)=O ZFADFBPRMSBPOT-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 5
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 5
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 5
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 5
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 5
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 5
- 230000012202 endocytosis Effects 0.000 description 5
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 5
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 5
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 5
- 102000001301 EGF receptor Human genes 0.000 description 4
- 108060006698 EGF receptor Proteins 0.000 description 4
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 4
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 4
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 4
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 4
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 4
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 4
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 4
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 4
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 4
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 4
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 4
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 4
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 4
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 4
- YYSWCHMLFJLLBJ-ZLUOBGJFSA-N Ala-Ala-Ser Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YYSWCHMLFJLLBJ-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 3
- 101100314454 Caenorhabditis elegans tra-1 gene Proteins 0.000 description 3
- ZDZOTLJHXYCWBA-VCVYQWHSSA-N N-debenzoyl-N-(tert-butoxycarbonyl)-10-deacetyltaxol Chemical compound O([C@H]1[C@H]2[C@@](C([C@H](O)C3=C(C)[C@@H](OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)OC(C)(C)C)C=4C=CC=CC=4)C[C@]1(O)C3(C)C)=O)(C)[C@@H](O)C[C@H]1OC[C@]12OC(=O)C)C(=O)C1=CC=CC=C1 ZDZOTLJHXYCWBA-VCVYQWHSSA-N 0.000 description 3
- KLYYKKGCPOGDPE-OEAJRASXSA-N Phe-Thr-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O KLYYKKGCPOGDPE-OEAJRASXSA-N 0.000 description 3
- YMTLKLXDFCSCNX-BYPYZUCNSA-N Ser-Gly-Gly Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)NCC(O)=O YMTLKLXDFCSCNX-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 3
- 230000023445 activated T cell autonomous cell death Effects 0.000 description 3
- 108010086434 alanyl-seryl-glycine Proteins 0.000 description 3
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 3
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 3
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 3
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 3
- 238000006471 dimerization reaction Methods 0.000 description 3
- 229960003668 docetaxel Drugs 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 238000005734 heterodimerization reaction Methods 0.000 description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 3
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 3
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 239000012089 stop solution Substances 0.000 description 3
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 2
- ARHJJAAWNWOACN-FXQIFTODSA-N Ala-Ser-Val Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O ARHJJAAWNWOACN-FXQIFTODSA-N 0.000 description 2
- CREYEAPXISDKSB-FQPOAREZSA-N Ala-Thr-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O CREYEAPXISDKSB-FQPOAREZSA-N 0.000 description 2
- VKKYFICVTYKFIO-CIUDSAMLSA-N Arg-Ala-Glu Chemical compound OC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N VKKYFICVTYKFIO-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- KZXPVYVSHUJCEO-ULQDDVLXSA-N Arg-Phe-Lys Chemical compound NC(=N)NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 KZXPVYVSHUJCEO-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 2
- AOHKLEBWKMKITA-IHRRRGAJSA-N Arg-Phe-Ser Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N AOHKLEBWKMKITA-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 2
- RBOBTTLFPRSXKZ-BZSNNMDCSA-N Asn-Phe-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O RBOBTTLFPRSXKZ-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 2
- MKJBPDLENBUHQU-CIUDSAMLSA-N Asn-Ser-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O MKJBPDLENBUHQU-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- XYBJLTKSGFBLCS-QXEWZRGKSA-N Asp-Arg-Val Chemical compound NC(N)=NCCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O XYBJLTKSGFBLCS-QXEWZRGKSA-N 0.000 description 2
- QNFRBNZGVVKBNJ-PEFMBERDSA-N Asp-Ile-Gln Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N QNFRBNZGVVKBNJ-PEFMBERDSA-N 0.000 description 2
- MNQMTYSEKZHIDF-GCJQMDKQSA-N Asp-Thr-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O MNQMTYSEKZHIDF-GCJQMDKQSA-N 0.000 description 2
- 206010005003 Bladder cancer Diseases 0.000 description 2
- 206010055113 Breast cancer metastatic Diseases 0.000 description 2
- 102000000844 Cell Surface Receptors Human genes 0.000 description 2
- 108010001857 Cell Surface Receptors Proteins 0.000 description 2
- 102400000888 Cholecystokinin-8 Human genes 0.000 description 2
- 101800005151 Cholecystokinin-8 Proteins 0.000 description 2
- 241000271274 Cleopatra Species 0.000 description 2
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 2
- SZQCDCKIGWQAQN-FXQIFTODSA-N Cys-Arg-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O SZQCDCKIGWQAQN-FXQIFTODSA-N 0.000 description 2
- 208000000461 Esophageal Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- OYTPNWYZORARHL-XHNCKOQMSA-N Gln-Ala-Pro Chemical compound C[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N OYTPNWYZORARHL-XHNCKOQMSA-N 0.000 description 2
- JXFLPKSDLDEOQK-JHEQGTHGSA-N Gln-Gly-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O JXFLPKSDLDEOQK-JHEQGTHGSA-N 0.000 description 2
- OOLCSQQPSLIETN-JYJNAYRXSA-N Gln-His-Tyr Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC2=CN=CN2)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N)O OOLCSQQPSLIETN-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 2
- FQCILXROGNOZON-YUMQZZPRSA-N Gln-Pro-Gly Chemical compound NC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(O)=O FQCILXROGNOZON-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 2
- PAQUJCSYVIBPLC-AVGNSLFASA-N Glu-Asp-Phe Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 PAQUJCSYVIBPLC-AVGNSLFASA-N 0.000 description 2
- YQPFCZVKMUVZIN-AUTRQRHGSA-N Glu-Val-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O YQPFCZVKMUVZIN-AUTRQRHGSA-N 0.000 description 2
- MIIVFRCYJABHTQ-ONGXEEELSA-N Gly-Leu-Val Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O MIIVFRCYJABHTQ-ONGXEEELSA-N 0.000 description 2
- PDUHNKAFQXQNLH-ZETCQYMHSA-N Gly-Lys-Gly Chemical compound NCCCC[C@H](NC(=O)CN)C(=O)NCC(O)=O PDUHNKAFQXQNLH-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 2
- WNZOCXUOGVYYBJ-CDMKHQONSA-N Gly-Phe-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=CC=C1)NC(=O)CN)O WNZOCXUOGVYYBJ-CDMKHQONSA-N 0.000 description 2
- NVTPVQLIZCOJFK-FOHZUACHSA-N Gly-Thr-Asp Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O NVTPVQLIZCOJFK-FOHZUACHSA-N 0.000 description 2
- 208000017891 HER2 positive breast carcinoma Diseases 0.000 description 2
- TWYOYAKMLHWMOJ-ZPFDUUQYSA-N Ile-Leu-Asn Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O TWYOYAKMLHWMOJ-ZPFDUUQYSA-N 0.000 description 2
- OTSVBELRDMSPKY-PCBIJLKTSA-N Ile-Phe-Asn Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)N OTSVBELRDMSPKY-PCBIJLKTSA-N 0.000 description 2
- PMGDADKJMCOXHX-UHFFFAOYSA-N L-Arginyl-L-glutamin-acetat Natural products NC(=N)NCCCC(N)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(O)=O PMGDADKJMCOXHX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000880493 Leptailurus serval Species 0.000 description 2
- AXZGZMGRBDQTEY-SRVKXCTJSA-N Leu-Gln-Met Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O AXZGZMGRBDQTEY-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 2
- CQGSYZCULZMEDE-UHFFFAOYSA-N Leu-Gln-Pro Natural products CC(C)CC(N)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)N1CCCC1C(O)=O CQGSYZCULZMEDE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FEHQLKKBVJHSEC-SZMVWBNQSA-N Leu-Glu-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(C)C)C(O)=O)=CNC2=C1 FEHQLKKBVJHSEC-SZMVWBNQSA-N 0.000 description 2
- KIZIOFNVSOSKJI-CIUDSAMLSA-N Leu-Ser-Cys Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N KIZIOFNVSOSKJI-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- AIMGJYMCTAABEN-GVXVVHGQSA-N Leu-Val-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O AIMGJYMCTAABEN-GVXVVHGQSA-N 0.000 description 2
- IXHKPDJKKCUKHS-GARJFASQSA-N Lys-Ala-Pro Chemical compound C[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)N IXHKPDJKKCUKHS-GARJFASQSA-N 0.000 description 2
- GQZMPWBZQALKJO-UWVGGRQHSA-N Lys-Gly-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O GQZMPWBZQALKJO-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 2
- AIRZWUMAHCDDHR-KKUMJFAQSA-N Lys-Leu-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O AIRZWUMAHCDDHR-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 2
- PDIDTSZKKFEDMB-UWVGGRQHSA-N Lys-Pro-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(O)=O PDIDTSZKKFEDMB-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 2
- UGCIQUYEJIEHKX-GVXVVHGQSA-N Lys-Val-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O UGCIQUYEJIEHKX-GVXVVHGQSA-N 0.000 description 2
- SPSSJSICDYYTQN-HJGDQZAQSA-N Met-Thr-Gln Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(N)=O SPSSJSICDYYTQN-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 2
- 206010030155 Oesophageal carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 description 2
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 description 2
- RAGOJJCBGXARPO-XVSYOHENSA-N Phe-Thr-Asp Chemical compound OC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@H](O)C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 RAGOJJCBGXARPO-XVSYOHENSA-N 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 102000004022 Protein-Tyrosine Kinases Human genes 0.000 description 2
- 108090000412 Protein-Tyrosine Kinases Proteins 0.000 description 2
- 101710100969 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-3 Proteins 0.000 description 2
- 101710100963 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-4 Proteins 0.000 description 2
- QVOGDCQNGLBNCR-FXQIFTODSA-N Ser-Arg-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O QVOGDCQNGLBNCR-FXQIFTODSA-N 0.000 description 2
- ULVMNZOKDBHKKI-ACZMJKKPSA-N Ser-Gln-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O ULVMNZOKDBHKKI-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 2
- QYSFWUIXDFJUDW-DCAQKATOSA-N Ser-Leu-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O QYSFWUIXDFJUDW-DCAQKATOSA-N 0.000 description 2
- GJFYFGOEWLDQGW-GUBZILKMSA-N Ser-Leu-Gln Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)N GJFYFGOEWLDQGW-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- YUJLIIRMIAGMCQ-CIUDSAMLSA-N Ser-Leu-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YUJLIIRMIAGMCQ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- UPLYXVPQLJVWMM-KKUMJFAQSA-N Ser-Phe-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O UPLYXVPQLJVWMM-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 2
- ZKBKUWQVDWWSRI-BZSNNMDCSA-N Ser-Phe-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O ZKBKUWQVDWWSRI-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 2
- AZWNCEBQZXELEZ-FXQIFTODSA-N Ser-Pro-Ser Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O AZWNCEBQZXELEZ-FXQIFTODSA-N 0.000 description 2
- NKANXQFJJICGDU-QPLCGJKRSA-N Tamoxifen Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(/CC)=C(C=1C=CC(OCCN(C)C)=CC=1)/C1=CC=CC=C1 NKANXQFJJICGDU-QPLCGJKRSA-N 0.000 description 2
- FQPDRTDDEZXCEC-SVSWQMSJSA-N Thr-Ile-Ser Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O FQPDRTDDEZXCEC-SVSWQMSJSA-N 0.000 description 2
- GXUWHVZYDAHFSV-FLBSBUHZSA-N Thr-Ile-Thr Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O GXUWHVZYDAHFSV-FLBSBUHZSA-N 0.000 description 2
- BIBYEFRASCNLAA-CDMKHQONSA-N Thr-Phe-Gly Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)NCC(O)=O)CC1=CC=CC=C1 BIBYEFRASCNLAA-CDMKHQONSA-N 0.000 description 2
- ZESGVALRVJIVLZ-VFCFLDTKSA-N Thr-Thr-Pro Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)N)O ZESGVALRVJIVLZ-VFCFLDTKSA-N 0.000 description 2
- SVGAWGVHFIYAEE-JSGCOSHPSA-N Trp-Gly-Gln Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O)=CNC2=C1 SVGAWGVHFIYAEE-JSGCOSHPSA-N 0.000 description 2
- MBLJBGZWLHTJBH-SZMVWBNQSA-N Trp-Val-Arg Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O)=CNC2=C1 MBLJBGZWLHTJBH-SZMVWBNQSA-N 0.000 description 2
- QOIKZODVIPOPDD-AVGNSLFASA-N Tyr-Cys-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O QOIKZODVIPOPDD-AVGNSLFASA-N 0.000 description 2
- QUILOGWWLXMSAT-IHRRRGAJSA-N Tyr-Gln-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O QUILOGWWLXMSAT-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 2
- VYQQQIRHIFALGE-UWJYBYFXSA-N Tyr-Ser-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 VYQQQIRHIFALGE-UWJYBYFXSA-N 0.000 description 2
- ZPFLBLFITJCBTP-QWRGUYRKSA-N Tyr-Ser-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(O)=O ZPFLBLFITJCBTP-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 2
- 208000007097 Urinary Bladder Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- VJOWWOGRNXRQMF-UVBJJODRSA-N Val-Ala-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)C(C)C)C(O)=O)=CNC2=C1 VJOWWOGRNXRQMF-UVBJJODRSA-N 0.000 description 2
- PVPAOIGJYHVWBT-KKHAAJSZSA-N Val-Asn-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)NC(=O)[C@H](C(C)C)N)O PVPAOIGJYHVWBT-KKHAAJSZSA-N 0.000 description 2
- SSYBNWFXCFNRFN-GUBZILKMSA-N Val-Pro-Ser Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O SSYBNWFXCFNRFN-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- OWFGFHQMSBTKLX-UFYCRDLUSA-N Val-Tyr-Tyr Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)N[C@@H](CC2=CC=C(C=C2)O)C(=O)O)N OWFGFHQMSBTKLX-UFYCRDLUSA-N 0.000 description 2
- 108010008685 alanyl-glutamyl-aspartic acid Proteins 0.000 description 2
- 108010069020 alanyl-prolyl-glycine Proteins 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 108010008355 arginyl-glutamine Proteins 0.000 description 2
- 108010069205 aspartyl-phenylalanine Proteins 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 239000007640 basal medium Substances 0.000 description 2
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 description 2
- 238000002659 cell therapy Methods 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 2
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 2
- 239000012470 diluted sample Substances 0.000 description 2
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 2
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 2
- 201000004101 esophageal cancer Diseases 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 2
- 108010067216 glycyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 2
- XKUKSGPZAADMRA-UHFFFAOYSA-N glycyl-glycyl-glycine Natural products NCC(=O)NCC(=O)NCC(O)=O XKUKSGPZAADMRA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010010147 glycylglutamine Proteins 0.000 description 2
- 108010015792 glycyllysine Proteins 0.000 description 2
- 108010037850 glycylvaline Proteins 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- UWKQSNNFCGGAFS-XIFFEERXSA-N irinotecan Chemical compound C1=C2C(CC)=C3CN(C(C4=C([C@@](C(=O)OC4)(O)CC)C=4)=O)C=4C3=NC2=CC=C1OC(=O)N(CC1)CCC1N1CCCCC1 UWKQSNNFCGGAFS-XIFFEERXSA-N 0.000 description 2
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 2
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 2
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- KKZJGLLVHKMTCM-UHFFFAOYSA-N mitoxantrone Chemical compound O=C1C2=C(O)C=CC(O)=C2C(=O)C2=C1C(NCCNCCO)=CC=C2NCCNCCO KKZJGLLVHKMTCM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000001048 orange dye Substances 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 2
- 108010020755 prolyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 2
- 108010077112 prolyl-proline Proteins 0.000 description 2
- 108010031719 prolyl-serine Proteins 0.000 description 2
- 239000008213 purified water Substances 0.000 description 2
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 2
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 2
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 2
- IZTQOLKUZKXIRV-YRVFCXMDSA-N sincalide Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O)C1=CC=C(OS(O)(=O)=O)C=C1 IZTQOLKUZKXIRV-YRVFCXMDSA-N 0.000 description 2
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 2
- 238000004114 suspension culture Methods 0.000 description 2
- RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N taxol Chemical compound O([C@@H]1[C@@]2(C[C@@H](C(C)=C(C2(C)C)[C@H](C([C@]2(C)[C@@H](O)C[C@H]3OC[C@]3([C@H]21)OC(C)=O)=O)OC(=O)C)OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)C=1C=CC=CC=1)C=1C=CC=CC=1)O)C(=O)C1=CC=CC=C1 RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 108010033670 threonyl-aspartyl-tyrosine Proteins 0.000 description 2
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 2
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 2
- 108010044292 tryptophyltyrosine Proteins 0.000 description 2
- 108010003137 tyrosyltyrosine Proteins 0.000 description 2
- 201000005112 urinary bladder cancer Diseases 0.000 description 2
- 229960004528 vincristine Drugs 0.000 description 2
- OGWKCGZFUXNPDA-XQKSVPLYSA-N vincristine Chemical compound C([N@]1C[C@@H](C[C@]2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C([C@]56[C@H]([C@@]([C@H](OC(C)=O)[C@]7(CC)C=CCN([C@H]67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C=O)C=3)OC)C[C@@](C1)(O)CC)CC1=C2NC2=CC=CC=C12 OGWKCGZFUXNPDA-XQKSVPLYSA-N 0.000 description 2
- OGWKCGZFUXNPDA-UHFFFAOYSA-N vincristine Natural products C1C(CC)(O)CC(CC2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C(C56C(C(C(OC(C)=O)C7(CC)C=CCN(C67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C=O)C=3)OC)CN1CCC1=C2NC2=CC=CC=C12 OGWKCGZFUXNPDA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MWWSFMDVAYGXBV-MYPASOLCSA-N (7r,9s)-7-[(2r,4s,5s,6s)-4-amino-5-hydroxy-6-methyloxan-2-yl]oxy-6,9,11-trihydroxy-9-(2-hydroxyacetyl)-4-methoxy-8,10-dihydro-7h-tetracene-5,12-dione;hydrochloride Chemical compound Cl.O([C@@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 MWWSFMDVAYGXBV-MYPASOLCSA-N 0.000 description 1
- VVIAGPKUTFNRDU-UHFFFAOYSA-N 6S-folinic acid Natural products C1NC=2NC(N)=NC(=O)C=2N(C=O)C1CNC1=CC=C(C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 VVIAGPKUTFNRDU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SKHCUBQVZJHOFM-NAKRPEOUSA-N Ala-Arg-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O SKHCUBQVZJHOFM-NAKRPEOUSA-N 0.000 description 1
- BUDNAJYVCUHLSV-ZLUOBGJFSA-N Ala-Asp-Ser Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O BUDNAJYVCUHLSV-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- IKKVASZHTMKJIR-ZKWXMUAHSA-N Ala-Asp-Val Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O IKKVASZHTMKJIR-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 1
- WCBVQNZTOKJWJS-ACZMJKKPSA-N Ala-Cys-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O WCBVQNZTOKJWJS-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- REAQAWSENITKJL-DDWPSWQVSA-N Ala-Met-Asp-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O REAQAWSENITKJL-DDWPSWQVSA-N 0.000 description 1
- 102100024092 Aldo-keto reductase family 1 member C4 Human genes 0.000 description 1
- JOTRDIXZHNQYGP-DCAQKATOSA-N Arg-Ser-Lys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N JOTRDIXZHNQYGP-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- XWFPGQVLOVGSLU-CIUDSAMLSA-N Asn-Gln-Arg Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N XWFPGQVLOVGSLU-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- UDSVWSUXKYXSTR-QWRGUYRKSA-N Asn-Gly-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O UDSVWSUXKYXSTR-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- JTXVXGXTRXMOFJ-FXQIFTODSA-N Asn-Pro-Asn Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O JTXVXGXTRXMOFJ-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- WLVLIYYBPPONRJ-GCJQMDKQSA-N Asn-Thr-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O WLVLIYYBPPONRJ-GCJQMDKQSA-N 0.000 description 1
- JBDLMLZNDRLDIX-HJGDQZAQSA-N Asn-Thr-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O JBDLMLZNDRLDIX-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 1
- YNQIDCRRTWGHJD-ZLUOBGJFSA-N Asp-Asn-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O YNQIDCRRTWGHJD-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- HSWYMWGDMPLTTH-FXQIFTODSA-N Asp-Glu-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O HSWYMWGDMPLTTH-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- VNXQRBXEQXLERQ-CIUDSAMLSA-N Asp-Ser-Lys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N VNXQRBXEQXLERQ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- YIDFBWRHIYOYAA-LKXGYXEUSA-N Asp-Ser-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O YIDFBWRHIYOYAA-LKXGYXEUSA-N 0.000 description 1
- GAGWJHPBXLXJQN-UORFTKCHSA-N Capecitabine Chemical compound C1=C(F)C(NC(=O)OCCCCC)=NC(=O)N1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](C)O1 GAGWJHPBXLXJQN-UORFTKCHSA-N 0.000 description 1
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 1
- CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N Cyclophosphamide Chemical compound ClCCN(CCCl)P1(=O)NCCCO1 CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001712 DNA sequencing Methods 0.000 description 1
- 108090000204 Dipeptidase 1 Proteins 0.000 description 1
- 206010061818 Disease progression Diseases 0.000 description 1
- 238000012286 ELISA Assay Methods 0.000 description 1
- 101150029707 ERBB2 gene Proteins 0.000 description 1
- 101150039808 Egfr gene Proteins 0.000 description 1
- 206010014733 Endometrial cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010014759 Endometrial neoplasm Diseases 0.000 description 1
- MPJKWIXIYCLVCU-UHFFFAOYSA-N Folinic acid Natural products NC1=NC2=C(N(C=O)C(CNc3ccc(cc3)C(=O)NC(CCC(=O)O)CC(=O)O)CN2)C(=O)N1 MPJKWIXIYCLVCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FGYPOQPQTUNESW-IUCAKERBSA-N Gln-Gly-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N FGYPOQPQTUNESW-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- DMYACXMQUABZIQ-NRPADANISA-N Glu-Ser-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O DMYACXMQUABZIQ-NRPADANISA-N 0.000 description 1
- XCLCVBYNGXEVDU-WHFBIAKZSA-N Gly-Asn-Ser Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O XCLCVBYNGXEVDU-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- BIRKKBCSAIHDDF-WDSKDSINSA-N Gly-Glu-Cys Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O BIRKKBCSAIHDDF-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- UFPXDFOYHVEIPI-BYPYZUCNSA-N Gly-Gly-Asp Chemical compound NCC(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(O)=O UFPXDFOYHVEIPI-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- MTBIKIMYHUWBRX-QWRGUYRKSA-N Gly-Phe-Asn Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)CN MTBIKIMYHUWBRX-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- QAMMIGULQSIRCD-IRXDYDNUSA-N Gly-Phe-Tyr Chemical compound C([C@H](NC(=O)C[NH3+])C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C([O-])=O)C1=CC=CC=C1 QAMMIGULQSIRCD-IRXDYDNUSA-N 0.000 description 1
- ZZWUYQXMIFTIIY-WEDXCCLWSA-N Gly-Thr-Leu Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O ZZWUYQXMIFTIIY-WEDXCCLWSA-N 0.000 description 1
- CJGDTAHEMXLRMB-ULQDDVLXSA-N His-Arg-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O CJGDTAHEMXLRMB-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 1
- TVMNTHXFRSXZGR-IHRRRGAJSA-N His-Lys-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O TVMNTHXFRSXZGR-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- 101000917858 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-A Proteins 0.000 description 1
- 241000701024 Human betaherpesvirus 5 Species 0.000 description 1
- SVBAHOMTJRFSIC-SXTJYALSSA-N Ile-Ile-Asn Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)N SVBAHOMTJRFSIC-SXTJYALSSA-N 0.000 description 1
- NZGTYCMLUGYMCV-XUXIUFHCSA-N Ile-Lys-Arg Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)O)N NZGTYCMLUGYMCV-XUXIUFHCSA-N 0.000 description 1
- RMNMUUCYTMLWNA-ZPFDUUQYSA-N Ile-Lys-Asp Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N RMNMUUCYTMLWNA-ZPFDUUQYSA-N 0.000 description 1
- RVNOXPZHMUWCLW-GMOBBJLQSA-N Ile-Met-Asn Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)N RVNOXPZHMUWCLW-GMOBBJLQSA-N 0.000 description 1
- SAEWJTCJQVZQNZ-IUKAMOBKSA-N Ile-Thr-Asn Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)N SAEWJTCJQVZQNZ-IUKAMOBKSA-N 0.000 description 1
- FXJLRZFMKGHYJP-CFMVVWHZSA-N Ile-Tyr-Asn Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)N FXJLRZFMKGHYJP-CFMVVWHZSA-N 0.000 description 1
- 108700005091 Immunoglobulin Genes Proteins 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- GPICTNQYKHHHTH-GUBZILKMSA-N Leu-Gln-Ser Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O GPICTNQYKHHHTH-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- IAJFFZORSWOZPQ-SRVKXCTJSA-N Leu-Leu-Asn Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O IAJFFZORSWOZPQ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- VCHVSKNMTXWIIP-SRVKXCTJSA-N Leu-Lys-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O VCHVSKNMTXWIIP-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- MVVSHHJKJRZVNY-ACRUOGEOSA-N Leu-Phe-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O MVVSHHJKJRZVNY-ACRUOGEOSA-N 0.000 description 1
- 102100029193 Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-A Human genes 0.000 description 1
- 108060001084 Luciferase Proteins 0.000 description 1
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 description 1
- MPGHETGWWWUHPY-CIUDSAMLSA-N Lys-Ala-Asp Chemical compound OC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN MPGHETGWWWUHPY-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- XABXVVSWUVCZST-GVXVVHGQSA-N Lys-Val-Gln Chemical compound NC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN XABXVVSWUVCZST-GVXVVHGQSA-N 0.000 description 1
- 102000043136 MAP kinase family Human genes 0.000 description 1
- 108091054455 MAP kinase family Proteins 0.000 description 1
- 208000003445 Mouth Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- SITLTJHOQZFJGG-UHFFFAOYSA-N N-L-alpha-glutamyl-L-valine Natural products CC(C)C(C(O)=O)NC(=O)C(N)CCC(O)=O SITLTJHOQZFJGG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930193140 Neomycin Natural products 0.000 description 1
- 108700020796 Oncogene Proteins 0.000 description 1
- 108091007960 PI3Ks Proteins 0.000 description 1
- 229930012538 Paclitaxel Natural products 0.000 description 1
- 208000009565 Pharyngeal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 206010034811 Pharyngeal cancer Diseases 0.000 description 1
- HXSUFWQYLPKEHF-IHRRRGAJSA-N Phe-Asn-Arg Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)O)N HXSUFWQYLPKEHF-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- BWTKUQPNOMMKMA-FIRPJDEBSA-N Phe-Ile-Phe Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 BWTKUQPNOMMKMA-FIRPJDEBSA-N 0.000 description 1
- DSXPMZMSJHOKKK-HJOGWXRNSA-N Phe-Phe-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O DSXPMZMSJHOKKK-HJOGWXRNSA-N 0.000 description 1
- FGWUALWGCZJQDJ-URLPEUOOSA-N Phe-Thr-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O FGWUALWGCZJQDJ-URLPEUOOSA-N 0.000 description 1
- 102000003993 Phosphatidylinositol 3-kinases Human genes 0.000 description 1
- 108090000430 Phosphatidylinositol 3-kinases Proteins 0.000 description 1
- IHCXPSYCHXFXKT-DCAQKATOSA-N Pro-Arg-Glu Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O IHCXPSYCHXFXKT-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- FDMKYQQYJKYCLV-GUBZILKMSA-N Pro-Pro-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@H]1NCCC1 FDMKYQQYJKYCLV-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- PRKWBYCXBBSLSK-GUBZILKMSA-N Pro-Ser-Val Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O PRKWBYCXBBSLSK-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 1
- 102100029986 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-3 Human genes 0.000 description 1
- 102100029981 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-4 Human genes 0.000 description 1
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102100028255 Renin Human genes 0.000 description 1
- 108090000783 Renin Proteins 0.000 description 1
- LVVBAKCGXXUHFO-ZLUOBGJFSA-N Ser-Ala-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O LVVBAKCGXXUHFO-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- HZWAHWQZPSXNCB-BPUTZDHNSA-N Ser-Arg-Trp Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(O)=O HZWAHWQZPSXNCB-BPUTZDHNSA-N 0.000 description 1
- MQQBBLVOUUJKLH-HJPIBITLSA-N Ser-Ile-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O MQQBBLVOUUJKLH-HJPIBITLSA-N 0.000 description 1
- CUXJENOFJXOSOZ-BIIVOSGPSA-N Ser-Ser-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)N)C(=O)O CUXJENOFJXOSOZ-BIIVOSGPSA-N 0.000 description 1
- NADLKBTYNKUJEP-KATARQTJSA-N Ser-Thr-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O NADLKBTYNKUJEP-KATARQTJSA-N 0.000 description 1
- UKKROEYWYIHWBD-ZKWXMUAHSA-N Ser-Val-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O UKKROEYWYIHWBD-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical class O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000000453 Skin Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000000102 Squamous Cell Carcinoma of Head and Neck Diseases 0.000 description 1
- 229940123237 Taxane Drugs 0.000 description 1
- DWYAUVCQDTZIJI-VZFHVOOUSA-N Thr-Ala-Ser Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O DWYAUVCQDTZIJI-VZFHVOOUSA-N 0.000 description 1
- UNURFMVMXLENAZ-KJEVXHAQSA-N Thr-Arg-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O UNURFMVMXLENAZ-KJEVXHAQSA-N 0.000 description 1
- GKWNLDNXMMLRMC-GLLZPBPUSA-N Thr-Glu-Gln Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)N)O GKWNLDNXMMLRMC-GLLZPBPUSA-N 0.000 description 1
- YOOAQCZYZHGUAZ-KATARQTJSA-N Thr-Leu-Ser Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YOOAQCZYZHGUAZ-KATARQTJSA-N 0.000 description 1
- KZSYAEWQMJEGRZ-RHYQMDGZSA-N Thr-Leu-Val Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O KZSYAEWQMJEGRZ-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 1
- YJVJPJPHHFOVMG-VEVYYDQMSA-N Thr-Met-Asp Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N)O YJVJPJPHHFOVMG-VEVYYDQMSA-N 0.000 description 1
- IQPWNQRRAJHOKV-KATARQTJSA-N Thr-Ser-Lys Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN IQPWNQRRAJHOKV-KATARQTJSA-N 0.000 description 1
- OGOYMQWIWHGTGH-KZVJFYERSA-N Thr-Val-Ala Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O OGOYMQWIWHGTGH-KZVJFYERSA-N 0.000 description 1
- MNYNCKZAEIAONY-XGEHTFHBSA-N Thr-Val-Ser Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O MNYNCKZAEIAONY-XGEHTFHBSA-N 0.000 description 1
- NLWCSMOXNKBRLC-WDSOQIARSA-N Trp-Lys-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O NLWCSMOXNKBRLC-WDSOQIARSA-N 0.000 description 1
- NECCMBOBBANRIT-RNXOBYDBSA-N Trp-Phe-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O NECCMBOBBANRIT-RNXOBYDBSA-N 0.000 description 1
- SLCSPPCQWUHPPO-JYJNAYRXSA-N Tyr-Glu-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 SLCSPPCQWUHPPO-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 1
- DZKFGCNKEVMXFA-JUKXBJQTSA-N Tyr-Ile-His Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](NC(=O)[C@@H](N)Cc1ccc(O)cc1)C(=O)N[C@@H](Cc1cnc[nH]1)C(O)=O DZKFGCNKEVMXFA-JUKXBJQTSA-N 0.000 description 1
- PHKQVWWHRYUCJL-HJOGWXRNSA-N Tyr-Phe-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O PHKQVWWHRYUCJL-HJOGWXRNSA-N 0.000 description 1
- XGZBEGGGAUQBMB-KJEVXHAQSA-N Tyr-Pro-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@H](CC2=CC=C(C=C2)O)N)O XGZBEGGGAUQBMB-KJEVXHAQSA-N 0.000 description 1
- MQGGXGKQSVEQHR-KKUMJFAQSA-N Tyr-Ser-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 MQGGXGKQSVEQHR-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- XFEMMSGONWQACR-KJEVXHAQSA-N Tyr-Thr-Met Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=C(C=C1)O)N)O XFEMMSGONWQACR-KJEVXHAQSA-N 0.000 description 1
- TVGWMCTYUFBXAP-QTKMDUPCSA-N Val-Thr-His Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N)O TVGWMCTYUFBXAP-QTKMDUPCSA-N 0.000 description 1
- GVNLOVJNNDZUHS-RHYQMDGZSA-N Val-Thr-Lys Chemical compound [H]N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O GVNLOVJNNDZUHS-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 1
- HTONZBWRYUKUKC-RCWTZXSCSA-N Val-Thr-Val Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O HTONZBWRYUKUKC-RCWTZXSCSA-N 0.000 description 1
- ZHWZDZFWBXWPDW-GUBZILKMSA-N Val-Val-Cys Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O ZHWZDZFWBXWPDW-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 238000009098 adjuvant therapy Methods 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960000723 ampicillin Drugs 0.000 description 1
- AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N ampicillin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=CC=C1 AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 229940125644 antibody drug Drugs 0.000 description 1
- 108010009111 arginyl-glycyl-glutamic acid Proteins 0.000 description 1
- 108010038850 arginyl-isoleucyl-tyrosine Proteins 0.000 description 1
- 239000003886 aromatase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229940046844 aromatase inhibitors Drugs 0.000 description 1
- 108010047857 aspartylglycine Proteins 0.000 description 1
- 229960000397 bevacizumab Drugs 0.000 description 1
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 1
- 229940088954 camptosar Drugs 0.000 description 1
- 238000013368 capillary electrophoresis sodium dodecyl sulfate analysis Methods 0.000 description 1
- 229960004562 carboplatin Drugs 0.000 description 1
- 190000008236 carboplatin Chemical compound 0.000 description 1
- 230000003915 cell function Effects 0.000 description 1
- 230000022534 cell killing Effects 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 description 1
- 229960004316 cisplatin Drugs 0.000 description 1
- DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L cisplatin Chemical compound N[Pt](N)(Cl)Cl DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 208000035250 cutaneous malignant susceptibility to 1 melanoma Diseases 0.000 description 1
- 229960004397 cyclophosphamide Drugs 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000002354 daily effect Effects 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 230000003828 downregulation Effects 0.000 description 1
- 230000007783 downstream signaling Effects 0.000 description 1
- VQNATVDKACXKTF-XELLLNAOSA-N duocarmycin Chemical compound COC1=C(OC)C(OC)=C2NC(C(=O)N3C4=CC(=O)C5=C([C@@]64C[C@@H]6C3)C=C(N5)C(=O)OC)=CC2=C1 VQNATVDKACXKTF-XELLLNAOSA-N 0.000 description 1
- 229960005501 duocarmycin Drugs 0.000 description 1
- 229930184221 duocarmycin Natural products 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 230000002121 endocytic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 1
- FRPJXPJMRWBBIH-RBRWEJTLSA-N estramustine Chemical compound ClCCN(CCCl)C(=O)OC1=CC=C2[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 FRPJXPJMRWBBIH-RBRWEJTLSA-N 0.000 description 1
- 229960001842 estramustine Drugs 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 239000013613 expression plasmid Substances 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 238000009093 first-line therapy Methods 0.000 description 1
- VVIAGPKUTFNRDU-ABLWVSNPSA-N folinic acid Chemical compound C1NC=2NC(N)=NC(=O)C=2N(C=O)C1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 VVIAGPKUTFNRDU-ABLWVSNPSA-N 0.000 description 1
- 235000008191 folinic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011672 folinic acid Substances 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- SDUQYLNIPVEERB-QPPQHZFASA-N gemcitabine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1C(F)(F)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 SDUQYLNIPVEERB-QPPQHZFASA-N 0.000 description 1
- 108020002326 glutamine synthetase Proteins 0.000 description 1
- 108010078144 glutaminyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 108010049041 glutamylalanine Proteins 0.000 description 1
- 201000010536 head and neck cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000014829 head and neck neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 201000000459 head and neck squamous cell carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 208000019691 hematopoietic and lymphoid cell neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 1
- 229940127121 immunoconjugate Drugs 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 229960004768 irinotecan Drugs 0.000 description 1
- 229960001691 leucovorin Drugs 0.000 description 1
- 208000012987 lip and oral cavity carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 1
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 1
- 230000001394 metastastic effect Effects 0.000 description 1
- 206010061289 metastatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 229960001156 mitoxantrone Drugs 0.000 description 1
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 description 1
- ZDZOTLJHXYCWBA-BSEPLHNVSA-N molport-006-823-826 Chemical compound O([C@H]1[C@H]2[C@@](C([C@H](O)C3=C(C)[C@@H](OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)OC(C)(C)C)C=4C=CC=CC=4)C[C@@]1(O)C3(C)C)=O)(C)[C@@H](O)C[C@H]1OC[C@]12OC(=O)C)C(=O)C1=CC=CC=C1 ZDZOTLJHXYCWBA-BSEPLHNVSA-N 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 1
- 230000035407 negative regulation of cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 238000009099 neoadjuvant therapy Methods 0.000 description 1
- 229960004927 neomycin Drugs 0.000 description 1
- 208000002154 non-small cell lung carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000010606 normalization Methods 0.000 description 1
- 229960001756 oxaliplatin Drugs 0.000 description 1
- DWAFYCQODLXJNR-BNTLRKBRSA-L oxaliplatin Chemical compound O1C(=O)C(=O)O[Pt]11N[C@@H]2CCCC[C@H]2N1 DWAFYCQODLXJNR-BNTLRKBRSA-L 0.000 description 1
- JMANVNJQNLATNU-UHFFFAOYSA-N oxalonitrile Chemical compound N#CC#N JMANVNJQNLATNU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001592 paclitaxel Drugs 0.000 description 1
- 235000020323 palazzo Nutrition 0.000 description 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 1
- 238000009522 phase III clinical trial Methods 0.000 description 1
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 1
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000008488 polyadenylation Effects 0.000 description 1
- 238000010837 poor prognosis Methods 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 229960004618 prednisone Drugs 0.000 description 1
- XOFYZVNMUHMLCC-ZPOLXVRWSA-N prednisone Chemical compound O=C1C=C[C@]2(C)[C@H]3C(=O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 XOFYZVNMUHMLCC-ZPOLXVRWSA-N 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 108010079317 prolyl-tyrosine Proteins 0.000 description 1
- 108010090894 prolylleucine Proteins 0.000 description 1
- 239000012521 purified sample Substances 0.000 description 1
- YUOCYTRGANSSRY-UHFFFAOYSA-N pyrrolo[2,3-i][1,2]benzodiazepine Chemical class C1=CN=NC2=C3C=CN=C3C=CC2=C1 YUOCYTRGANSSRY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 102200129685 rs11559290 Human genes 0.000 description 1
- 102200007939 rs128626231 Human genes 0.000 description 1
- 102220088977 rs869312698 Human genes 0.000 description 1
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 1
- 108010069117 seryl-lysyl-aspartic acid Proteins 0.000 description 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 1
- 238000001542 size-exclusion chromatography Methods 0.000 description 1
- 201000000849 skin cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- ZWYUGDUPLSGYSK-UHFFFAOYSA-N spiro[2,4-dihydro-1h-naphthalene-3,5'-imidazolidine]-2',4'-dione Chemical compound N1C(=O)NC(=O)C11CC2=CC=CC=C2CC1 ZWYUGDUPLSGYSK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 229960001603 tamoxifen Drugs 0.000 description 1
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 1
- 108010072986 threonyl-seryl-lysine Proteins 0.000 description 1
- 108010058119 tryptophyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 1
- 208000029729 tumor suppressor gene on chromosome 11 Diseases 0.000 description 1
- 108010071635 tyrosyl-prolyl-arginine Proteins 0.000 description 1
- GBABOYUKABKIAF-GHYRFKGUSA-N vinorelbine Chemical compound C1N(CC=2C3=CC=CC=C3NC=22)CC(CC)=C[C@H]1C[C@]2(C(=O)OC)C1=CC([C@]23[C@H]([C@]([C@H](OC(C)=O)[C@]4(CC)C=CCN([C@H]34)CC2)(O)C(=O)OC)N2C)=C2C=C1OC GBABOYUKABKIAF-GHYRFKGUSA-N 0.000 description 1
- 229960002066 vinorelbine Drugs 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/32—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against translation products of oncogenes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
- A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
- A61K47/6851—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a determinant of a tumour cell
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/82—Translation products from oncogenes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/46—Hybrid immunoglobulins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
- C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
- C07K2317/31—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency multispecific
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
- C07K2317/34—Identification of a linear epitope shorter than 20 amino acid residues or of a conformational epitope defined by amino acid residues
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/51—Complete heavy chain or Fd fragment, i.e. VH + CH1
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/515—Complete light chain, i.e. VL + CL
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
- C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
- C07K2317/732—Antibody-dependent cellular cytotoxicity [ADCC]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/77—Internalization into the cell
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
- C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
- C07K2317/94—Stability, e.g. half-life, pH, temperature or enzyme-resistance
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Oncology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
本发明公开了一种抗HER2的双特异性抗体，其包括分别用于识别HER2的胞外结构域II和胞外结构域IV的第一蛋白功能区和第二蛋白功能区，所述第一蛋白功能区包括第一重链和轻链，所述第二蛋白功能区包括第二重链和轻链，具体的第一重链、第二重链和轻链的序列见本文。本发明还公开了包括所述双特异性抗体的药物组合物和它们的用途。本发明的双特异性抗体和含其的药物组合物可用于癌症的治疗。
Description
技术领域
本发明涉及生物医药领域，具体涉及一种抗HER2的双特异性抗体及其应用。
背景技术
HER2是一种185kDa的细胞表面受体酪氨酸激酶(cell surface receptortyrosine kinase)和表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor，EGFR)家族的成员，所述EGFR家族包括四种不同的受体：EGFR/ErbB-1、HER2/ErbB-2、HER3/ErbB-3、和HER4/ErbB-4。所述EGFR家族的四种成员形成同二聚体和异二聚体，其中HER2是优选的且是其它ErbB受体的最强的二聚配偶体(Graus-Porta等人，Embo J 1997；16:1647-1655；Tao等人，J Cell Sci2008；121:3207-3217)。HER2可以通过过表达或通过与其它可以由配体结合而激活的ErbB的异二聚化而激活(Riese和Stern，Bioessays1998；20:41-48)。对于HER2，还没有鉴定出配体。HER2活化导致受体磷酸化，其通过多种信号途径，如MAPK、磷酸肌醇3-激酶/AKT、JAK/STAT、和PKC，而触发下游的信号级联放大，其最终导致多种细胞功能的调节，如生长、存活、和分化(Huang等人，Expert Opin Biol THER2009；9:97-110)。
对HER2在肿瘤方面的关注集中于其在乳腺癌(breast cancer)中的作用，其中HER2过表达在大约20％的病例中报道，且其与不良的预后有关联(Reese等人，StemCells1997；15:1-8；Andrechek等人，Proc Natl Acad Sci U SA2000；97:3444-3449；和Slamon等人，Science1987；235:177-182)。除了乳腺癌以外，HER2表达还与其它人癌瘤种类关联，包括前列腺癌、非小细胞肺癌、膀胱癌、卵巢癌、胃癌、结肠癌、食管癌、和头和颈的鳞状细胞癌(Garcia de Palazzo等人，Int J Biol Markers1993；8:233-239；Ross等人，Oncologist2003；8:307-325；Osman等人，J Urol2005；174:2174-2177；Kapitanovic等人，Gastroenterology1997；112:1103-1113；Turken等人，Neoplasma2003；50:257-261；和Oshima等人，Int J Biol Markers2001；16:250-254)。下表显示了HER2在各种不同来源肿瘤细胞中的表达情况。
表1.肿瘤细胞及HER2表达情况
曲妥珠单抗(Trastuzumab)是一种重组的、人源化单克隆抗体，其针对HER2蛋白质的域IV，由此在高HER2过表达的细胞内阻断配体非依赖性HER2同二聚化，并在较小的程度上还阻断HER2与其它家族成员的异二聚化(Cho等人，Nature2003；421:756-760和Wehrman等人，Proc Natl Acad Sci 2006；103:19063-19068)。在具有中等HER2表达水平的细胞中，发现了曲妥珠单抗抑制HER2/EGFR异二聚体的形成(Wehrman等人，Proc Natl Acad Sci2006；103:19063-19068；Schmitz等人，Exp Cell Res2009；315:659-670)。曲妥珠单抗介导抗体依赖性细胞毒性(antibody-dependent cellular cytotoxicity，ADCC)并阻止胞外域脱落(ectodomain shedding)，否则其会导致在HER2过表达细胞中形成截短的组成型活性蛋白质。而且，还对于曲妥珠单抗报道了对高水平表达HER2的肿瘤细胞的体外和体内的增殖(在Nahta和Esteva，Oncogene 2007；26:3637-3643中综述)的抑制。曲妥珠单抗已被NMPA和FDA批准用于HER2过表达转移性乳腺癌的一线治疗和辅佐治疗，无论是与化学疗法组合还是在一种或多种化学疗法之后的单剂。其被发现仅在20-50％的HER2过表达乳腺癌患者中有效，且许多初始反应者(responder)在几个月后显示了复发(Dinh等人，Clin AdvHematol Oncol 2007；5:707-717)。美国国立综合癌症机构(National ComprehensiveCancer Network,NCCN)在2019版乳腺癌临床治疗指南中，将帕妥珠单抗和曲妥珠单抗联合多西他赛(一类推荐)或紫杉醇作为HER2阳性晚期(转移性)乳腺癌和新辅助治疗(即手术前)的一线用药方案，预期增加乳腺癌手术成功率和降低复发率，改善生存期和生存质量。
帕妥珠单抗(Pertuzumab)(OmnitargTM)是另一种人源化单克隆抗体。其针对HER2蛋白质的域II，导致对配体诱导的异二聚化的抑制(即HER2与已结合配体的ErbB家族的另一个成员的二聚化)；其据报道为不严格需要高HER2表达水平的机制(Franklin等人，Cancer Cell2004；5:317-328)。虽然帕妥珠单抗也介导ADCC，帕妥珠单抗的主要作用机制依赖其对二聚化的阻断(Hughes等人，Mol Cancer THER2009；8:1885-1892)。此外，发现帕妥珠单抗通过抑制EGFR/HER2异二聚体的形成而增强EGFR内化(internalization)和下调，否则所述异二聚体在质膜表面将EGFR拘束(Hughes等人，Mol Cancer THER2009；8:1885-1892)。这一点与所观察到的EGFR同二聚体比EGFR/HER2二聚体的内化更有效相关联(Pedersen等人，Mol Cancer Res2009；7:275-284)。根据最新的CLEOPATRA，NeoSphere，VELVET和PERUSE临床研究结果，靶向HER2不同表位的帕妥珠单抗和曲妥珠单抗的联合应用，可显著提高HER2阳性乳腺癌患者的无疾病进展生存期和中位生存期。
另一种提出的基于HER2的治疗方法是将针对不同HER2表位的HER2抗体组合，在体外和体内肿瘤模型中都已经报道了其在降低肿瘤生长方面比单独的HER2抗体更有效(Emde等人，Oncogene2011；30:1631-1642；Spiridon等人，Clin Cancer res2002；8:1720-1730)。例如，据报道，当在患者中将两者组合时，帕妥珠单抗和曲妥珠单抗的互补性机制导致增强的抗肿瘤作用和功效，所述患者是之前的曲妥珠单抗疗法期间有进展的患者(Baselga等人，J Clin Oncol2010；28:1138-1144)。在III期临床试验(CLEOPATRA)中，已经在患者中显示了帕妥珠单抗加曲妥珠单抗的抗体组合与多烯他赛一起导致了与曲妥珠单抗与多西他赛一起相比延长的无进展生存(prolonged progression-free survival)，所述患者患有之前未治疗过的HER2阳性转移性乳腺癌。
帕妥珠单抗和曲妥珠单抗联合比单用效果更明显，帕妥珠单抗单药反应率仅3.4％，但和曲妥珠单抗联合使用反应率可达21.4％。尽管如此，曲妥珠单抗和帕托珠单抗均仅适用于HER2强阳性(IHC检测结果为3+)的乳腺癌治疗，针对HER2弱阳性的乳腺癌，曲妥珠单抗及帕托珠单抗的治疗效果均不理想。近年来，细胞治疗在血液肿瘤治疗方面取得了非凡的成就，因此有科学家基于曲妥珠单抗开发了用于HER2阳性乳腺癌的治疗。结果病人在CAR-T细胞输入后的第5天因为严重的副作用去世(Morgan等人，The American Societyof Gene&Cell Therapy 2010；4:843-851)。抗HER2不同表位的双特异性抗体是用于识别HER2表面两种不同抗原表位的单克隆抗体药物，其包含有两条不同抗体的重链可变区和两条相同的轻链可变区(CN105829347A；CN105820251A；CN105980409A)，能够特异性结合HER2表面的第二、第四结构域，目的为提供一种即具有曲妥珠单抗活性又具有帕妥珠单抗活性的双特异性抗体，替代目前临床上曲妥珠单抗加帕妥珠单抗两种抗体联合治疗的方法。然而，现有技术(CN105829347A；CN105820251A；CN105980409A)抗体存在与抗原结合活性差，或者稳定性不佳易形成沉淀的特征，而稳定性是抗体成药性的必要条件。
发明内容
鉴于现有技术存在上述亲和力低、稳定性不佳易形成沉淀的技术缺陷，本发明的目的在于提供一种抗HER2不同表位的双特异性抗体及其应用。本申请的发明人发现，分别采用帕妥珠单抗和曲妥珠单抗的重链，优化天然曲妥珠单抗轻链作为共同的轻链，能够获得对HER2靶点第二、第四结构域的亲和力分别与野生型的帕妥珠单抗和曲妥珠单抗相当的双特异性单抗。由于双特异性及高亲和力的特征，本发明的抗体对于HER2弱阳性的乳腺癌很可能也有效。同时，意外的发现，本发明的抗体对于多种HER2表达肿瘤细胞均具有增强的增殖抑制效果。
为解决上述技术问题，本发明第一方面的技术方案为：提供一种抗HER2的双特异性抗体，所述双特异性抗体包括分别用于识别HER2的胞外结构域IV和胞外结构域II的第一蛋白功能区和第二蛋白功能区，所述第一蛋白功能区包括第一重链和轻链，所述第二蛋白功能区包括第二重链和轻链，其中，所述第一重链包括如SEQ ID NO:4的氨基酸序列或其突变所示的重链可变区，所述第二重链包括如SEQ ID NO:3的氨基酸序列或其突变所示的重链可变区，且所述轻链包括轻链可变区，所述轻链可变区在SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列上发生选自以下位点的一个或多个氨基酸的置换：R24、N30、T31、A32、F53、L54、S56、R66、H91、T93、T94和P96。在此，所述双特异性抗体可为scFv、F(ab)2或类IgG的结构。
在一较佳的具体实施例中，所述双特异性抗体的轻链可变区中，所述氨基酸置换是将原氨基酸残基置换为选自以下的氨基酸残基：Asp(D)、Glu(E)、Ser(S)、Thr(T)、Asn(N)、Gln(Q)、Gly(G)、Ala(A)、Val(V)、Ile(I)、Leu(L)、Lys(K)、Met(M)、Phe(F)、Tyr(Y)、Trp(W)和Arg(R)。
在一较佳的具体实施例中，所述双特异性抗体的轻链可变区在SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列上发生一个或多个以下氨基酸残基的置换：R24K、N30S、T31I、A32G、F53Y、L54R、S56T、R66G、H91Y、T93I、T94Y和P96Y。优选氨基酸残基的置换发生在一个或多个以下位点：N30S、F53Y、L54R、S56T和P96Y。
在一较佳的具体实施例中，所述双特异性抗体的轻链可变区在SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列上发生选自以下组的氨基酸残基的置换：(1)F53Y，(2)F53Y、L54R和S56T，(3)P96Y，(4)N30S和F53Y，(5)N30S、F53Y、L54R和S56T，或(6)N30S、P96Y。
在一较佳的具体实施例中，所述双特异性抗体还包括轻链恒定区，所述轻链恒定区优选人轻链恒定区λ链或κ链。较佳地，所述轻链在SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列上发生选自以下组的氨基酸残基的置换：(1)F53Y，(2)F53Y、L54R和S56T，(3)P96Y，(4)N30S和F53Y，(5)N30S、F53Y、L54R和S56T，或(6)N30S、P96Y。
在一较佳的具体实施例中，所述双特异性抗体的第一重链和第二重链还包括重链恒定区，所述重链恒定区优选人重链恒定区。较佳地，所述双特异性抗体的第一重链和第二重链间形成异二聚体，所述第一重链和第二重链优选由Knob-in-Hole结构连接。更佳地，所述第二重链的重链可变区在如SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列上发生D102E突变。
在一较佳的具体实施例中，所述双特异性抗体的第一重链的重链可变区包含以下CDR序列：如SEQ ID NO:5所示的HCDR1，如SEQ ID NOs:6-13所示的HCDR2，如SEQ ID NOs:14-19所示的HCDR3；
优选地，所述第一重链的重链可变区包含如SEQ ID NO:5所示的HCDR1，如SEQ IDNO:6所示的HCDR2，如SEQ ID NO:15所示的HCDR3；或，如SEQ ID NO:5所示的HCDR1，如SEQID NO:7所示的HCDR2，如SEQ ID NO:16所示的HCDR3；或，如SEQ ID NO:5所示的HCDR1，如SEQ ID NO:8所示的HCDR2，如SEQ ID NO:15所示的HCDR3；或，如SEQ ID NO:5所示的HCDR1，如SEQ ID NO:9所示的HCDR2，如SEQ ID NO:15所示的HCDR3；或，如SEQ ID NO:5所示的HCDR1，如SEQ ID NO:10所示的HCDR2，如SEQ ID NO:15所示的HCDR3；或，如SEQ ID NO:5所示的HCDR1，如SEQ ID NO:7所示的HCDR2，如SEQ ID NO:17所示的HCDR3；或，如SEQ ID NO:5所示的HCDR1，如SEQ ID NO:11所示的HCDR2，如SEQ ID NO:17所示的HCDR3；或，如SEQ IDNO:5所示的HCDR1，如SEQ ID NO:12所示的HCDR2，如SEQ ID NO:17所示的HCDR3；或，如SEQID NO:5所示的HCDR1，如SEQ ID NO:13所示的HCDR2，如SEQ ID NO:17所示的HCDR3；或，如SEQ ID NO:5所示的HCDR1，如SEQ ID NO:7所示的HCDR2，如SEQ ID NO:18所示的HCDR3；或，如SEQ ID NO:5所示的HCDR1，如SEQ ID NO:7所示的HCDR2，如SEQ ID NO:19所示的HCDR3。
在一较佳的具体实施例中，所述双特异性抗体降低了岩藻糖修饰；优选地，所述抗体是无岩藻糖修饰的。
为解决上述技术问题，本发明第二方面的技术方案为：提供一种编码含如上所述的双特异性抗体或其抗原结合部分的核酸序列。
为解决上述技术问题，本发明第三方面的技术方案为：提供一种表达载体，其包含上述第二方面的核酸序列。
为解决上述技术问题，本发明第四方面的技术方案为：提供一种原核或真核细胞，其包含上述第三方面的表达载体。
为解决上述技术问题，本发明第五方面的技术方案为：提供一种轻链，所述轻链包括轻链可变区，所述轻链可变区在SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列上发生选自以下组的氨基酸残基的置换：(1)F53Y，(2)F53Y、L54R和S56T，(3)P96Y，(4)N30S和F53Y，(5)N30S、F53Y、L54R和S56T，或(6)N30S、P96Y。优选地，所述轻链还包括轻链恒定区，所述轻链恒定区优选人轻链恒定区λ链或κ链。更优选地，所述轻链在SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列上发生选自以下组的氨基酸残基的置换：(1)F53Y，(2)F53Y、L54R和S56T，(3)P96Y，(4)N30S和F53Y，(5)N30S、F53Y、L54R和S56T，或(6)N30S、P96Y。
为解决上述技术问题，本发明第六方面的技术方案为：提供上述第五方面的轻链在制备抗体中的应用；优选地，所述抗体为scFv、Fab’、F(ab)2或全长抗体，或单克隆抗体、双特异性抗体或多特异性抗体。
为解决上述技术问题，本发明第七方面的技术方案为：提供一种抗HER2的双特异性抗体的药物偶联物，其由如上所述的双特异性抗体与细胞毒性药物共价偶联。优选地，所述细胞毒性药物为微管蛋白抑制剂、拓扑异构酶抑制剂或DNA小沟抑制剂。更优选地，所述微管蛋白抑制剂为美登素类化合物，或奥瑞斯他汀衍生物，或微管素；所述拓扑异构酶抑制剂为DXd或其衍生物，或SN-38，或阿霉素及其衍生物；所述DNA小沟抑制剂为卡奇霉素(Calicheamicin)，倍癌霉素(Duocarmycin)及其衍生物，吡咯苯二氮平类化合物(pyrrolobenzodiazepines)或吲哚苯二氮平类化合物(indolinobenzodiazepines)。
为解决上述技术问题，本发明第八方面的技术方案为：提供一种包括如上所述的双特异性抗体的药物组合物。优选地，所述药物组合物还包括透明质酸酶。更优选地，所述透明质酸酶为rHuPH20或经修饰的rHuPH20。最优选地，还包括药学上可接受的载体或赋形剂。
为解决上述技术问题，本发明第九方面的技术方案为：提供一种制备如上所述的双特异性抗体的方法，其包括以下步骤：
(1)将包含编码所述重链的核苷酸序列和包含编码所述轻链的核苷酸序列构建在同一载体或不同的载体中；
(2)将上述步骤构建的载体在不同宿主细胞或同一宿主细胞中表达。
为解决上述技术问题，本发明第十方面的技术方案为：提供一种如上所述的抗HER2的双特异性抗体、抗HER2的双特异性抗体的药物偶联物和包括双特异性抗体的药物组合物在制备治疗HER2表达肿瘤药物中的应用。优选地，所述阳性肿瘤包括乳腺癌、胃癌、前列腺癌、肺癌、膀胱癌、卵巢癌、结肠癌、食管癌、和头颈癌、子宫内膜癌、恶性黑素瘤、咽癌、口腔癌、皮肤癌；更优选为乳腺癌、胃癌和肺癌。
此外，为解决上述技术问题，本发明第十一方面的技术方案为：提供一种药盒组合，其包括药盒A和药盒B；所述药盒A包含一种如上所述的抗HER2的双特异性抗体、抗HER2的双特异性抗体的药物偶联物和包括双特异性抗体的药物组合物；所述药盒B包含靶向HER2或其它靶点的其它抗体、双特异性抗体、基因修饰的细胞或药物组合物。所述药盒A和药盒B的使用不分先后顺序，或先使用药盒A再使用药盒B，或先使用药盒B再使用药盒A。
本发明所述的抗HER2的双特异性抗体、所述的免疫偶联物和所述的药物组合物或所述的药盒组合可施用于病人，用于治疗相关肿瘤。
在本发明中，本发明的HER2识别抗体或其抗原结合部分或其混合物或含其抗原结合部分的治疗性免疫细胞还可与化疗药物和/或其它抗体联用，因此本发明的组合物中还可含有化疗药物和/或其它抗体。
在本发明中，所述化疗药物包括但不限于：阿霉素(Adriamycin)、环磷酰胺和紫杉烷类[紫杉醇(Taxol)和多西他赛(Taxotere)]、卡培他滨(Xeloda)、吉西他滨(Gemzar)、长春瑞滨(Navelbine)、他莫昔芬、芳香酶抑制剂(瑞宁得、弗隆、阿诺新)、5-FU加亚叶酸、伊立替康(camptosar)、奥沙利铂、顺铂、卡铂、雌莫司汀、米托蒽醌(Novantrone)、泼尼松、长春新碱(Oncovin)等，或它们的组合。
在符合本领域常识的基础上，上述各优选条件，可任意组合，即得本发明各较佳实例。
本发明所用试剂和原料均市售可得。
本发明的积极进步效果为：通过对曲妥珠轻链可变区、帕妥珠的重链可变区、曲妥珠重链可变区的指定氨基酸突变，得到一种亲和力高、稳定性好、肿瘤细胞杀伤活性强、ADCC活性高的双特异性单抗。
附图说明
图1显示抗人HER2不同表位双特异抗体针对MDA-MB-175细胞的增殖抑制活性结果；A为KJ015w与帕妥珠对比；B为曲妥珠与帕妥珠对比。
图2显示双特异性单抗蛋白电泳图。
图3显示抗人HER2不同表位双特异抗体细胞结合活性。
图4显示抗人HER2不同表位双特异抗体针对NCI-N87(A)和MCF-7(B)细胞的内吞结果。
图5显示抗人HER2不同表位双特异抗体针对MDA-MB-175细胞增殖抑制活性结果；其中，A为KJ015-A的结果；B为KJ015-B的结果；C为KJ015-C的结果；D为KJ015-D的结果。
图6显示抗人HER2不同表位双特异抗体针对BT474细胞增殖抑制活性结果；其中，A为KJ015-A的结果；B为KJ015-B和KJ015-C的结果；C为KJ015-D的结果。
图7显示抗人HER2不同表位双特异抗体针对SK-BR-3细胞增殖抑制活性结果；其中，A为KJ015-A的结果；B为KJ015-B和KJ015-C的结果；C为KJ015-D的结果。
图8显示抗人HER2不同表位双特异抗体针对NCI-N87细胞增殖抑制活性结果；其中，A为KJ015-A和KJ015-B的结果；B为KJ015-C和KJ015-D的结果。
图9显示抗人HER2不同表位双特异抗体针对Calu-3细胞增殖抑制活性结果；其中，A为KJ015-A和KJ015-C的结果；B为KJ015-B的结果；C为KJ015-D的结果。
图10显示抗人HER2不同表位双特异抗体针对JIMT-1细胞的ADCC活性结果；其中，A为KJ015-A和KJ015-B的结果；B为KJ015-C和KJ015-D的结果。
图11显示抗人HER2不同表位双特异抗体针对SK-BR-3细胞ADCC活性结果；其中，A为KJ015-A和KJ015-B的结果；B为KJ015-C和KJ015-D的结果。
图12显示抗人HER2不同表位双特异抗体针对NCI-N87细胞ADCC活性结果；其中，A为KJ015-A和KJ015-B的结果；B为KJ015-C和KJ015-D的结果；C为KJ015-E的结果。
图13显示抗人HER2不同表位双特异抗体针对MDA-MB-175细胞ADCC活性结果；其中，A为KJ015-A～KJ015-C的结果；B为KJ015-D和KJ015-E的结果。
具体实施方式
下面通过具体实施方式来进一步说明本发明的技术方案。本领域技术人员应该明了，所述实施了仅仅是帮助理解本发明，不应视为对本发明的具体限制。
下列实施例中未注明具体条件的实验方法，按照常规方法和条件，或按照商品说明书选择。
实施例1：抗人HER2不同表位双特异抗体构建表达
全基因合成编码曲妥珠单抗重链(含knob结构)、帕妥珠单抗重链(含hole结构)和曲妥珠单抗轻链(SEQ ID NO:2)DNA片段，分别克隆至本室构建的表达载体，表达载体由下述原件构成：
1)谷氨酰胺合成酶基因，作为筛选标记；或新霉素抗性基因，作为重链筛选标记，
2)复制起点：ori，
3)来自载体pUC18的复制起点，其容许此质粒在大肠杆菌中复制，
4)β-内酰胺酶基因，其在大肠杆菌中赋予氨苄青霉素抗性，
5)来自人巨细胞病毒的立即早期增强子和启动子，
6)人1-免疫球蛋白聚腺苷酸化(“poly A”)信号序列，和
如上所述，通过基因合成来制备包含重链或轻链的免疫球蛋白基因，并克隆入pUC57(Amp)质粒中。使用Hind III和EcoRI酶切含重链基因的pUC57(Amp)质粒、含轻链基因基因的pUC57(Amp)质粒及对应的表达质粒，并分别将重链及轻链定向克隆至对应质粒。酶切和连接的操作按商业提供的试剂盒说明书进行。
将上述构建好的曲妥珠单抗重链、帕妥珠单抗重链和轻链表达载体分别转化大肠杆菌DH5α，挑取阳性克隆接种于500ml LB培养基中扩增。利用Qiagen公司超纯质粒纯化试剂盒(Ultrapure Plasmid DNA Purification Kit)，按照生产商说明书抽提纯化DNA。采用Invitrogen公司的脂质体法试剂盒将上述含重链和轻链编码序列的质粒DNA以1:1:2～1:1:4的比例共转染入CHO-K1(中国仓鼠卵巢细胞，购自ATCC)，操作方法按照生产商说明书进行。
转染后24-48小时将细胞培养基更换为含筛选药物的筛选培养基，每3-4天更换一次筛选培养基，直至细胞克隆形成。待细胞克隆直径达1-2mm时用克隆环从平板上挑取单克隆转接入24孔板中。单细胞克隆在24孔板中长至50-70％满层时，取各克隆的培养上清进行ELISA检测，选取表达量高且生长状态良好的细胞进行扩增培养。
上述ELISA检测方法为将曲妥珠单抗特异性抗原帕妥珠特异性抗原分别用包被液(pH9.6CBS)稀释到一定浓度(2μg/ml)后包被于96孔板上，100μl/孔，于2～8℃放置过夜。弃去孔中液体，用PBST洗3次，甩干后加入300μl/孔的封闭液(1％BSA PBST)，室温2hr，再用PBST洗3次，甩干。用稀释液PBS(pH7.0)稀释标准品曲妥珠单抗、帕妥珠单抗，100ng/mL起始二倍比稀释7个点。表达上清根据情况适当稀释，以100μl/孔复孔加样至96孔板中，37℃孵育1hr，弃液，洗板3次，甩干。用稀释液稀释酶联抗体(HRP-抗人IgGγ轻链特异性抗体，Thermo)至一定浓度(1:2000)，以100μl/孔加至96孔板中，37℃下反应1hr，弃液，洗板3-6次，甩干。配制底物混合液，以100μl/孔加入到96孔板中，37℃孵育20min。加入终止液50μl/孔，终止反应。在490nm处读取吸收值OD，根据标准曲线计算样品的含量。
最终得到野生型KJ015w抗体表达细胞株。各细胞株采用CD2基础培养基扩增至100ml体积，进行补料批培养，从第3天开始，每天补加2％Feed4悬浮培养12天后，分别收集培养上清液，通过ProteinA亲和层析法，纯化得到双特异性单抗蛋白样品。
实施例2：抗人HER2不同表位双特异抗体与HER2亲和力测定
采用Biacore T200测定单靶点的HER2抗体曲妥珠单抗、帕妥珠单抗、HER2双特异抗体KJ015w与三种形式的HER2抗原的亲和力。
首先将Anti-Human Fc(AHC)抗体偶联到CM5芯片上，然后用AHC捕获待测试的抗体IgG(2μg/ml)，再将不同浓度的三种抗原分子流过捕获了IgG的芯片表面，检测HER2抗体与各不同浓度抗原的结合活性，得到的数据根据Biacore T200分析软件进行拟合，得到确切的动力学常数，其对比结果见表2所示。
表2：抗体KJ015w与三种形式的HER2抗原的亲和力测试结果
曲妥珠单抗、帕妥珠单抗和双特异抗HER2抗体KJ015w均能结合至HER2膜外区全长抗原，双特异抗HER2抗体KJ015w既能识别帕妥珠单抗特异性HER2抗原也能识别曲妥珠单抗特异性HER2抗原/>但其与帕妥珠单抗特异性HER2抗原的亲和力比帕妥珠单抗低了2个数量级。
实施例3：抗人HER2不同表位双特异抗体细胞增殖抑制活性检测
MDA-MB-175细胞培养瓶放置于37℃、5％二氧化碳恒温培养箱中静置培养，每天观察培养基颜色及细胞汇合度，记录细胞倍增时间。每隔2-4天对细胞进行传代培养。细胞约80％满层时，进行消化种板。弃培养基，用PBS洗一次，添加0.25％胰蛋白酶(Gibco)进行消化。吹打细胞收集至离心管中，500g离心3min。弃上清，加入完全培养基重悬细胞，取100μL细胞悬液进行计数。用含2％FBS的培养基将细胞密度调整至1×105个/mL，100μL每孔铺至96孔板中。
用含2％FBS的培养基稀释待测药物，先将待测药物稀释至150μg/mL，再4倍梯度稀释8次，获得9个浓度梯度的药物，最后一个点为阴性对照点。不同细胞，抗体起始浓度不同，详细见结果图中起始浓度点。取稀释好的药物100μL加入已铺好细胞的96孔板对应孔中，每个点双复孔。将96孔板放置于二氧化碳培养箱中孵育反应96～120小时。
孵育结束，96孔板中加入CCK8试剂20μL/孔，微孔板震荡仪震荡混匀。染色0.5-6小时后，用酶标仪读取OD 450nm吸光度数值。采用GraphPad软件对原始数据进行曲线拟合分析。
抗体增殖抑制活性的结果(图1A)显示KJ015w针对MDA-MB-175细胞具有增殖抑制活性。
实施例4：抗人HER2不同表位双特异抗体构建表达
全基因合成编码三种轻链变体的DNA片段[在SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列上分别发生选自以下组的氨基酸残基的置换：F53Y(M1)，F53Y、L54R和S56T(M2)，P96Y(M3)]，分别克隆至本室构建的抗体重轻链表达载体。
将上述构建好的曲妥珠单抗重链、帕妥珠单抗重链和轻链表达载体分别转化大肠杆菌DH5α，挑取阳性克隆接种于500ml LB培养基中扩增。利用Qiagen公司超纯质粒纯化试剂盒(Ultrapure Plasmid DNA Purification Kit)，按照生产商说明书抽提纯化DNA。采用Invitrogen公司的脂质体法试剂盒将上述含重链和轻链编码序列的质粒DNA以一定比例(1:1:2)共转染入CHO-K1，操作方法按照生产商说明书进行。
转染后24-48小时将细胞培养基更换为含筛选药物的筛选培养基，每3-4天更换一次筛选培养基，直至细胞克隆形成。待细胞克隆直径达1-2mm时用克隆环从平板上挑取单克隆转接入24孔板中。单细胞克隆在24孔板中长至50-70％满层时，取各克隆的培养上清进行ELISA检测，选取表达量高且生长状态良好的细胞进行扩增培养。
上述ELISA检测方法为将曲妥珠单抗特异性抗原帕妥珠特异性抗原分别用包被液(pH9.6CBS)稀释到一定浓度(2μg/ml)后包被于96孔板上，100μl/孔，于2～8℃放置过夜。弃去孔中液体，用PBST洗3次，甩干后加入300μl/孔的封闭液(1％BSA PBST)，室温2hr，再用PBST洗3次，甩干。用稀释液PBS(pH7.0)稀释标准品曲妥珠单抗、帕妥珠单抗，100ng/mL起始二倍比稀释7个点。表达上清根据情况适当稀释，以100μl/孔复孔加样至96孔板中，37℃孵育1hr，弃液，洗板3次，甩干。用稀释液稀释酶联抗体(HRP-抗人IgGγ轻链特异性抗体，Thermo)至一定浓度(1:2000)，以100μl/孔加至96孔板中，37℃下反应1hr，弃液，洗板3-6次，甩干。配制底物混合液，以100μl/孔加入到96孔板中，37℃孵育20min。加入终止液50μl/孔，终止反应。在490nm处读取吸收值OD，根据标准曲线计算样品的含量。
最终得到野生型突变体KJ015m1、KJ015m2和KJ015m3抗体表达细胞株。各细胞株采用CD2基础培养基扩增至100ml体积，进行补料批培养，从第3天开始，每天补加2％Feed4/>悬浮培养12天后，分别收集培养上清液，通过ProteinA亲和层析法，初步纯化得到3个共同轻链双特异性单抗蛋白样品(图2)。图2说明3个双特异性单抗蛋白纯度均较高。
实施例5：抗人HER2不同表位双特异抗体与HER2亲和力检测
将曲妥珠单抗特异性抗原帕妥珠特异性抗原/>HER2全长抗原/>分别用包被液(pH9.6CBS)稀释到一定浓度(2μg/ml)后包被于96孔板上，100μl/孔，于2～8℃放置过夜。弃去孔中液体，用PBST洗3次，甩干后加入300μl/孔的封闭液(1％BSA PBST)，室温2hr，再用PBST洗3次，甩干。用稀释液PBS(pH7.0)稀释标准品曲妥珠单抗、帕妥珠单抗，2000ng/mL起始三倍比稀释10个梯度，以100μl/孔复孔加样至96孔板中，37℃孵育1hr，弃液，洗板3次，甩干。用稀释液稀释酶联抗体(HRP-抗人IgGγ轻链特异性抗体，Thermo)至一定浓度(1:2000)，以100μl/孔加至96孔板中，37℃下反应1hr，弃液，洗板3-6次，甩干。配制底物混合液，以100μl/孔加入到96孔板中，37℃孵育20min。加入终止液50μl/孔，终止反应。
表3.各HER2抗体与HER2不同表位抗原ELISA亲和力检测结果
注：**和KJ015w相比，P＜0.01；***和KJ015w相比，P＜0.001。
表3结果说明，本发明的双特异性抗体KJ015m1、KJ015m2和、KJ015m3与帕妥珠抗体特异性抗原结合的亲和力均比野生型(即KJ015w)的高(P＜0.001)。本发明的双特异性抗体与曲妥珠抗体特异性抗原的结合与野生型相当，其中KJ015m1的亲和力略优于野生型(P＜0.01)。在与HER2全长抗原的结合实验中，KJ015m1、KJ015m2表现与野生型相当，KJ015m3的亲和力明显优于野生型(P＜0.001)。
实施例6：抗人HER2不同表位双特异抗体热稳定性检测
将待测抗体用PBS稀释至1mg/ml，将SYPRO orange dye染料(Life technologies)用去离子水稀释至40×。取稀释后样品12.5μL，加入40×染料2.5μl、去离子水5μL；按照每孔20μl上样复孔。封膜后上机，以25℃运行2分钟、95℃运行2分钟的PCR反应程序进行反应。将原始读数导出，将结果导入Graphpad Prism进行曲线拟合分析。检测得到各样品Tm值见表4，结果表明M1～M3轻链变体的热稳定性均较好。
表4.抗人HER2不同表位双特异抗体热稳定性数据
实施例7：抗人HER2不同表位双特异抗体重链改造
选择轻链变体M1～3作为轻链，进行帕妥珠单抗重链突变改造。使用M1、M2、M3混合轻链，利用kunkel技术对单一重链模板的目标区域进行高通量突变，构建文库两个：文库一的突变区域在HCDR1、HCDR2和HCDR3；文库二的突变区域在HCDR2。分别电转超级感受态细胞，扩大培养；分别收获噬菌体文库一和文库二。
使用抗原重组蛋白HER2 ECD作为baits，基于maxi-sorp 96孔板的固相法筛选，采用滴度检测验证噬菌体是否富集。使用文库一和文库二分别筛选。对每个文库分别富集的噬菌体，挑选48个单克隆进行培养。收集培养得到的噬菌体，进行ELISA鉴定。挑选出比野生抗体亲和力高的阳性单克隆，并进行DNA测序，得到抗体序列。
实施例8：候选序列亲和常数检测
基于实施例1的质粒，重链和轻链编码序列的质粒DNA以一定比例(1:1)共转染入ExpiCHO-S细胞株(Gibco)，操作方法按照转染试剂盒说明书进行。转染后培养7-10天，收取培养上清，用Protein A亲合层析的方法纯化后用于亲和常数检测。
采用Biacore T200测定单靶点的HER2抗体与HER2 ECD抗原的亲和力。首先将Anti-Human Fc(AHC)抗体偶联到CM5芯片上，然后用AHC捕获待测试的抗体IgG(2μg/ml)，再将不同浓度的三种抗原分子流过捕获了IgG的芯片表面，检测HER2抗体与各不同浓度抗原的结合活性，得到的数据根据Biacore T200分析软件进行拟合，得到确切的动力学常数。详细的亲和力常数结果见表5。根据亲和常数数据，经亲和力改造的帕妥珠重链的亲和力常数相对于野生型帕妥珠重链均提高了两个数量级。D102E曲妥珠重链相对于野生型曲妥珠重链，亲和力提高了约3倍。
表5.候选序列亲和力常数
注：表5的候选重链中，相对帕妥珠重链的可变区序列，仅发生了HCDR2和HCDR3区域的突变。另，HCDR1的序列均为SEQ ID NO:5。
实施例9：抗人HER2不同表位双特异抗体制备
基于实施例1的质粒，按照表7进行抗体重链的基因合成，并进行质粒抽提得到对应重链质粒。按照相同方法构建N30S M1轻链、N30S M2轻链、D102E曲妥珠重链。采用的瞬时转染试剂盒将上述含重链和轻链编码序列的质粒DNA以一定比例(1:1:2)共转染入ExpiCHO-S细胞株(Gibco)，操作方法按照/>转染试剂盒说明书进行。转染后培养7-10天，收取培养上清，用protein A亲合层析的方法纯化后用于功能评价。纯化后样品采用0.22μm膜除菌过滤，2～8℃保存。得到样品信息见表6。样品保存过程中发现，仅KJ015-E样品出现了沉淀现象，其他样品均澄清，说明KJ015-E样品不稳定。
表6.HER2双特异性抗体序列组合
| 名称 | 共同轻链 | 第二重链 | 第一重链 |
| KJ015-A | M1 | 曲妥珠重链 | 表5重链序号1 |
| KJ015-B | M1 | 曲妥珠重链 | 表5重链序号2 |
| KJ015-C | N30S M1 | D102E曲妥珠重链 | 表5重链序号1 |
| KJ015-D | N30S M1 | D102E曲妥珠重链 | 表5重链序号2 |
| KJ015-E# | SEQ ID NO:54 | SEQ ID NO:92 | SEQ ID NO:64 |
#：序号为来自专利US20170029529的SEQ ID NO。
实施例10：抗人HER2不同表位双特异抗体纯度检测
参照分子排阻色谱法(中国药典2010版三部附录III B)进行KJ015抗体纯度检测。以亲水改性硅胶为填充剂(TSKgel SuperSW mAb HR，300×7.8mm)，以磷酸氢二钠和异丙醇的混合溶液(取磷酸氢二钠28.4g，加纯化水溶解并稀释至800ml，用磷酸调节pH值至7.0，加异丙醇10ml，用纯化水定容至1L)为流动相；流速为每分钟0.7ml；检测波长为280nm。取供试品溶液20μl，注入液相色谱仪进行检测。按峰面积归一化法计算抗体单体峰面积。参考USPMedicines Compendium Bevacizumab以及Beckman Coulter官方文档、采用PA800 plus仪器进行KJ015样品的CE-SDS检测。检测得到各样品的纯度值见表7。由此可见，各抗体纯度均较高，与曲妥珠单抗、帕妥珠单抗相近，可用于后续的活性评价工作。
表7.各待测抗体样品纯度
实施例11：抗人HER2不同表位双特异抗体热稳定性检测
将待测抗体用PBS稀释至1mg/mL，将SYPRO orange dye染料(Life technologies)用去离子水稀释至40×。取稀释后样品12.5μL，加入40×染料2.5μl、去离子水5μL；按照每孔20μl上样复孔。封膜后上机，以25℃运行2分钟、95℃运行2分钟的PCR反应程序进行反应。将原始读数导出，将结果导入Graphpad Prism进行曲线拟合分析。检测得到各样品Tm值见表8。由此可见，各抗体Tm值差异不大，与曲妥珠单抗、帕妥珠单抗相近。
表8.各样品Tm值
实施例12：抗人HER2不同表位双特异抗体细胞结合活性
细胞培养瓶放置于37℃、5％二氧化碳恒温培养箱中静置培养，每天观察培养基颜色及细胞汇合度，记录细胞倍增时间。每隔2-4天对细胞进行传代培养。细胞约80％满层时，进行消化种板。弃培养基，用PBS洗一次，添加0.25％胰蛋白酶(Gibco)进行消化。吹打细胞收集至离心管中，500g离心3min。弃上清，加入完全培养基重悬细胞，取100μL细胞悬液进行计数。用PBS(含1％BSA)重悬细胞，调整细胞密度至3×106个/mL。
用含2％FBS的培养基稀释待测药物，先将待测药物稀释至固定浓度，再3倍梯度稀释5次，获得6个浓度梯度的药物。不同细胞，抗体起始浓度不同，详细见结果图中起始浓度点。取100μL重悬后细胞，加入终浓度为300nM～1nM的待检测抗体，以同型IgG作为阴性对照，4℃孵育1小时。孵育结束后，预冷PBS洗3次，用50μL PBS(含1％BSA)重悬细胞，加入抗人荧光二抗，4℃孵育半小时。孵育结束后，预冷PBS洗3次，上机检测。
检测结果显示(图3)，KJ015A-D样品均具有结合活性，且高于曲妥珠单抗，和曲妥珠单抗+帕妥珠单抗混合样品结果相当。
实施例13：抗人HER2不同表位双特异抗体内吞活性
细胞培养瓶放置于37℃、5％二氧化碳恒温培养箱中静置培养，每天观察培养基颜色及细胞汇合度，记录细胞倍增时间。每隔2-4天对细胞进行传代培养。细胞约80％满层时，进行消化种板。弃培养基，用PBS洗一次，添加0.25％胰蛋白酶(Gibco)进行消化。吹打细胞收集至离心管中，500g离心3min。弃上清，加入完全培养基重悬细胞，取100μL细胞悬液进行计数。用PBS(含1％BSA)重悬细胞，调整细胞密度至3×106个/mL。
取100μL重悬后细胞，加入终浓度为10μg/mL(NCI-N87)、50μg/mL(MCF-7)的待检测抗体，以同型IgG作为阴性对照，4℃孵育1小时。用预冷PBS洗3次，用100μL完全培养基重悬细胞，放置在37℃细胞培养箱中孵育1小时。孵育结束后，预冷PBS洗3次，用50μLPBS(含1％BSA)重悬细胞，加入抗人荧光二抗，4℃孵育半小时。孵育结束后，预冷PBS洗3次，上机检测。内吞(％)＝1-(MFI某时间点供试品处理组-MFI该时间点对照hIgG)/(MFI0小时供试品处理组-MFI0小时对照hIgG)×100％计算出各待检抗体在各时间点的内吞率后作图。/>
内吞结果如图4所示，在NCI-N87细胞上，所有4个样品的内吞效率均介于曲妥珠单抗和曲妥珠单抗+帕妥珠单抗之间；针对MCF-7细胞，KJ015-A样品活性略低于曲妥珠单抗和曲妥珠单抗+帕妥珠单抗，KJ015-B样品活性与这两个抗体相当，KJ015-C、KJ015-D样品的活性则高于曲妥珠单抗和曲妥珠单抗+帕妥珠单抗联合使用。
实施例14：抗人HER2不同表位双特异抗体增殖抑制活性
采用细胞增殖抑制的方法评价不同变体的抗HER2抗体抑制HER2阳性肿瘤细胞的表达，所用细胞系如表9所示。
细胞培养瓶放置于37℃、5％二氧化碳恒温培养箱中静置培养，每天观察培养基颜色及细胞汇合度，记录细胞倍增时间。每隔2-4天对细胞进行传代培养。细胞约80％满层时，进行消化种板。弃培养基，用PBS洗一次，添加0.25％胰蛋白酶(Gibco)进行消化。吹打细胞收集至离心管中，500g离心3min。弃上清，加入完全培养基重悬细胞，取100μL细胞悬液进行计数。用含2％FBS的培养基将细胞密度调整至1×105个/mL，100μL每孔铺至96孔板中。
用含2％FBS的培养基稀释待测药物，先将待测药物稀释至20-6000μg/mL，再2.2～3倍梯度稀释8-10次，获得9-11个浓度梯度的药物，最后一个点为阴性对照点。不同细胞，抗体起始浓度不同，详细见结果图中起始浓度点。取稀释好的药物100μL加入已铺好细胞的96孔板对应孔中，每个点双复孔。将96孔板放置于二氧化碳培养箱中孵育反应96～120小时。
孵育结束，96孔板中加入CCK8试剂20μL/孔，微孔板震荡仪震荡混匀。染色0.5-6小时后，用酶标仪读取OD 450nm吸光度数值。采用GraphPad软件对原始数据进行曲线拟合分析。
表9.细胞增殖抑制率
MDA-MB-175细胞增殖抑制活性的结果(图5)显示，A～D样品均能够抑制MDA-MB-175细胞的生长，均呈剂量依赖性，增殖抑制活性显著高于曲妥珠单抗。其中KJ015-A、B样品和曲妥珠单抗+帕妥珠单抗联合使用活性相当；KJ015-C、D样品的最高抑制率为曲妥珠单抗+帕妥珠单抗联合使用的1.1倍；KJ015-D样品的EC50值为1.5μg/ml，低于曲妥珠单抗+帕妥珠单抗联合样品的2.3μg/ml。
BT474细胞增殖抑制活性的结果结果(图6)显示，KJ015-A～D能够抑制BT474细胞的生长，均呈剂量依赖性。其样品的增殖抑制活性显著优于曲妥珠单抗、曲妥珠单抗和帕妥珠单抗联合使用，最大抑制率均约为曲妥珠单抗+帕妥珠单抗联合使用的1.2倍。
SK-BR-3细胞增殖抑制活性的结果(图7)显示，KJ015-A～D能够抑制SK-BR-3细胞的生长，均呈剂量依赖性。其样品的增殖抑制活性显著优于曲妥珠单抗、曲妥珠单抗和帕妥珠单抗联合使用，最大抑制率均约为曲妥珠单抗+帕妥珠单抗联合使用的2.2倍。
NCI-N87细胞增殖抑制活性的结果(图8)显示4个候选抗体对NCI-N87细胞的杀伤活性基本相当；对NCI-N87细胞的最大杀伤率均高于曲妥珠单抗、曲妥珠单抗和帕妥珠单抗联合使用，最大抑制率均约为曲妥珠单抗+帕妥珠单抗联合使用的1.6～1.7倍。
Calu-3细胞增殖抑制活性的结果结果(图9)显示，KJ015-A～D能够抑制Calu-3细胞的生长，均呈剂量依赖性。其样品的增殖抑制活性显著高于曲妥珠单抗，是曲妥珠单抗+帕妥珠单抗联合使用的平均约1.2倍。
实施例15：抗人HER2不同表位双特异抗体ADCC活性
细胞培养瓶放置于37℃、5％二氧化碳恒温培养箱中静置培养，每天观察培养基颜色及细胞汇合度，记录细胞倍增时间。每隔2-4天对细胞进行传代培养。细胞约80％满层时，进行消化种板。弃培养基，用PBS洗一次，添加0.25％胰蛋白酶(Gibco)进行消化。吹打细胞收集至离心管中，500g离心3min。弃上清，加入完全培养基重悬细胞，取100μL细胞悬液进行计数。用含2％FBS的培养基将细胞密度调整至2.5～7.5×105个/mL，100μL每孔铺至96孔板中。
96孔板过夜培养后，进行加样。用含1％FBS的培养基稀释待测药物，先将待测药物稀释至75～300μg/mL(起始浓度可根据不同细胞进行调整)，再4～5倍梯度稀释8次，获得9个浓度梯度的药物，最后一个点为阴性对照点。不同细胞，抗体起始浓度不同，详细见结果图中起始浓度点。取稀释好的药物25μL加入已铺好细胞的96孔板对应孔中，每个点双复孔。用1640+1％FBS将效应细胞Jurkat-NFAT/CD16a稀释至1～3×106/mL，每孔加入25uL。(效应细胞数可根据不同细胞进行调整)在96孔板边缘添加足量灭菌水，后将96孔板放置于二氧化碳培养箱中孵育反应4-6小时。
孵育结束，将待测细胞从培养箱中取出，放置于室温(22℃-25℃)至少平衡15min，然后向96孔板中加入室温孵育后的荧光素酶试剂75μL/孔，微孔板震荡仪震荡混匀，室温放置3-5min，用酶标仪读取荧光值。采用GraphPad软件对原始数据进行曲线拟合分析。
JIMT-1细胞ADCC活性的结果(图10)显示，KJ015-A-D样品均具有ADCC活性并且呈剂量依赖性，A样品最大信号值分别为曲妥珠单抗、曲妥珠单抗和帕妥珠单抗联合使用的1.2倍；B样品分别为1.3倍和1.2倍；C样品分别为1.5倍和1.3倍；D样品分别为1.5倍和1.3倍；说明KJ015-A-D样品的ADCC活性均高于曲妥珠单抗、曲妥珠单抗和帕妥珠单抗联合使用。
SK-BR-3细胞ADCC活性的结果(图11)显示，KJ015-A-D样品均具有ADCC活性并且呈剂量依赖性，A～D样品最大信号值分别为曲妥珠单抗和帕妥珠单抗联合使用的1.8倍、1.7倍、1.7倍、1.6倍；说明KJ015-A-D样品的ADCC活性均高于曲妥珠单抗和帕妥珠单抗联合使用。
NCI-N87细胞ADCC活性的结果(图12)显示，KJ015-A-D样品均具有ADCC活性并且呈剂量依赖性，A～C样品最大信号值均约为曲妥珠单抗和帕妥珠单抗联合使用的1.2倍；说明KJ015-A-C样品的ADCC活性均高于曲妥珠单抗和帕妥珠单抗联合使用。KJ015-D样品的ADCC活性与曲妥珠单抗和帕妥珠单抗联合使用相当。KJ015-E样品的活性最大信号值为曲妥珠单抗和帕妥珠单抗联合使用的0.9倍，EC50值为46.07ng/ml，与曲妥珠单抗和帕妥珠单抗联合使用的10.17ng/ml差异显著。
MDA-MB-175细胞ADCC活性的结果(图13)显示，KJ015-A-D样品均具有ADCC活性并且呈剂量依赖性，A～D样品最大信号值均约为曲妥珠单抗和帕妥珠单抗联合使用的1.2、1.4、1.3、1.2倍；说明KJ015-A-D样品的ADCC活性均高于曲妥珠单抗和帕妥珠单抗联合使用。KJ015-E样品的ADCC活性与曲妥珠单抗和帕妥珠单抗联合使用相当。
本发明主要涉及的序列如下表10所示。
表10本发明抗体序列
本发明尚有多种实施方式，凡采用等同变换或者等效变换而形成的所有技术方案，均落在本发明的保护范围之内。
SEQUENCE LISTING
<110> 苏州康聚生物科技有限公司
<120> 抗HER2的双特异性抗体及其应用
<130> P180116923C
<150> 2019101090084
<151> 2019-02-03
<160> 19
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 107
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 曲妥珠轻链可变区WT
<400> 1
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Val Asn Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ser Ala Ser Phe Leu Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Arg Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln His Tyr Thr Thr Pro Pro
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 2
<211> 214
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 曲妥珠轻链WT
<400> 2
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Val Asn Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ser Ala Ser Phe Leu Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Arg Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln His Tyr Thr Thr Pro Pro
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
100 105 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
115 120 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
130 135 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
180 185 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
195 200 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 3
<211> 120
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 第二重链可变区（曲妥珠）WT
<400> 3
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Asn Ile Lys Asp Thr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Arg Ile Tyr Pro Thr Asn Gly Tyr Thr Arg Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Ala Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ser Arg Trp Gly Gly Asp Gly Phe Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 4
<211> 119
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 第一重链可变区（帕妥珠）WT
<400> 4
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Thr Asp Tyr
20 25 30
Thr Met Asp Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Asp Val Asn Pro Asn Ser Gly Gly Ser Ile Tyr Asn Gln Arg Phe
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Leu Ser Val Asp Arg Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asn Leu Gly Pro Ser Phe Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 5
<211> 13
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 帕妥珠HCDR1
<400> 5
Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Thr Asp Tyr Thr Met Asp
1 5 10
<210> 6
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 第一重链HCDR2（帕妥珠）WT
<400> 6
Asp Val Asn Pro Asn Ser Gly Gly Ser Ile Tyr Asn Gln Arg Phe Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 7
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 第一重链HCDR2（帕妥珠）变体1
<400> 7
Asp Val Asn Pro Asn Ser Gly Gly Ser Ile Leu Asn Arg Arg Phe Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 8
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 第一重链HCDR2（帕妥珠）变体2
<400> 8
Asp Val Asn Pro Asn Ser Gly Gly Ser Ile Leu Asn Val Arg Phe Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 9
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 第一重链HCDR2（帕妥珠）变体3
<400> 9
Asp Val Asn Pro Asn Ser Gly Gly Ser Ile Phe Asn Gln Arg Phe Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 10
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 第一重链HCDR2（帕妥珠）变体4
<400> 10
Asp Val Asn Pro Asn Ser Gly Gly Ser Ile Phe Asn His Arg Phe Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 11
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 第一重链HCDR2（帕妥珠）变体5
<400> 11
Asp Val Asn Pro Asn Ser Gly Gly Ser Ile Ile Asn Gln Arg Phe Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 12
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 第一重链HCDR2（帕妥珠）变体6
<400> 12
Asp Val Asn Pro Asn Ser Gly Gly Ser Ile Met Asn Gln Arg Phe Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 13
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 第一重链HCDR2（帕妥珠）变体7
<400> 13
Asp Val Asn Pro Asn Ser Gly Gly Ser Ile Thr Asn Gln Arg Phe Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 14
<211> 12
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 第一重链HCDR3（帕妥珠）WT
<400> 14
Ala Arg Asn Leu Gly Pro Ser Phe Tyr Phe Asp Tyr
1 5 10
<210> 15
<211> 12
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 第一重链HCDR3（帕妥珠）变体1
<400> 15
Ala Arg Asn Leu Gly Pro Trp Phe Tyr Phe Asp Tyr
1 5 10
<210> 16
<211> 12
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 第一重链HCDR3（帕妥珠）变体2
<400> 16
Ala Arg Asn Leu Gly Pro Asn Phe Tyr Phe Asp Tyr
1 5 10
<210> 17
<211> 12
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 第一重链HCDR3（帕妥珠）变体3
<400> 17
Ala Arg Asn Leu Gly Pro Phe Phe Tyr Phe Asp Tyr
1 5 10
<210> 18
<211> 12
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 第一重链HCDR3（帕妥珠）变体4
<400> 18
Ala Arg Asn Leu Gly Pro Leu Phe Tyr Phe Asp Tyr
1 5 10
<210> 19
<211> 12
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 第一重链HCDR3（帕妥珠）变体5
<400> 19
Ala Arg Asn Leu Gly Pro Tyr Phe Tyr Phe Asp Tyr
1 5 10
Claims (21)
1.一种抗HER2的双特异性抗体，其特征在于，所述双特异性抗体包括分别用于识别HER2的胞外结构域II和胞外结构域IV的第一蛋白功能区和第二蛋白功能区，所述第一蛋白功能区包括第一重链和轻链，所述第二蛋白功能区包括第二重链和轻链，其中，所述轻链的轻链可变区在SEQ ID NO: 1所示的氨基酸序列上发生选自以下组的氨基酸残基的置换：(1) N30S和F53Y，(2) F53Y，(3) F53Y、L54R和S56T，或(4) N30S、F53Y、L54R和S56T，所述第一重链的重链可变区包含以下CDR序列：如SEQ ID NO: 5所示的HCDR1，如SEQ ID NOs: 6-13任一所示的HCDR2，如SEQ ID NOs: 14-19任一所示的HCDR3，且所述第二重链的重链可变区在如SEQ ID NO: 3所示的氨基酸序列上发生D102E突变。
2.如权利要求1所述的双特异性抗体，其特征在于，所述双特异性抗体还包括轻链恒定区，所述轻链恒定区为人轻链恒定区λ链或κ链。
3. 如权利要求1所述的双特异性抗体，所述轻链在SEQ ID NO: 2所示的氨基酸序列上发生选自以下组的氨基酸残基的置换：（1）N30S和F53Y，（2）F53Y，（3）F53Y、L54R和S56T，或（4）N30S、F53Y、L54R和S56T。
4.如权利要求1所述的双特异性抗体，其特征在于，所述双特异性抗体的第一重链和第二重链还包括重链恒定区，所述重链恒定区为人重链恒定区。
5.如权利要求1所述的双特异性抗体，所述双特异性抗体的第一重链和第二重链间形成异二聚体。
6.如权利要求5所述的双特异性抗体，所述第一重链和第二重链由Knob-in-Hole结构连接。
7. 如权利要求1所述的双特异性抗体，其特征在于所述第一重链的重链可变区包含如SEQ ID NO: 5所示的HCDR1，如SEQ ID NO: 7所示的HCDR2，如SEQ ID NO: 18所示的HCDR3；或，如SEQ ID NO: 5所示的HCDR1，如SEQ ID NO: 6所示的HCDR2，如SEQ ID NO: 15所示的HCDR3；或，如SEQ ID NO: 5所示的HCDR1，如SEQ ID NO: 7所示的HCDR2，如SEQ ID NO: 16所示的HCDR3；或，如SEQ ID NO: 5所示的HCDR1，如SEQ ID NO: 8所示的HCDR2，如SEQ IDNO: 15所示的HCDR3；或，如SEQ ID NO: 5所示的HCDR1，如SEQ ID NO: 9所示的HCDR2，如SEQ ID NO: 15所示的HCDR3；或，如SEQ ID NO: 5所示的HCDR1，如SEQ ID NO: 10所示的HCDR2，如SEQ ID NO: 15所示的HCDR3；或，如SEQ ID NO: 5所示的HCDR1，如SEQ ID NO: 7所示的HCDR2，如SEQ ID NO: 17所示的HCDR3；或，如SEQ ID NO: 5所示的HCDR1，如SEQ IDNO: 11所示的HCDR2，如SEQ ID NO: 17所示的HCDR3；或，如SEQ ID NO: 5所示的HCDR1，如SEQ ID NO: 12所示的HCDR2，如SEQ ID NO: 17所示的HCDR3；或，如SEQ ID NO: 5所示的HCDR1，如SEQ ID NO: 13所示的HCDR2，如SEQ ID NO: 17所示的HCDR3；或，如SEQ ID NO: 5所示的HCDR1，如SEQ ID NO: 7所示的HCDR2，如SEQ ID NO: 19所示的HCDR3。
8.如权利要求1所述的双特异性抗体，其特征在于，所述双特异性抗体降低了岩藻糖修饰。
9.如权利要求1所述的双特异性抗体，所述抗体是无岩藻糖修饰的。
10.一种编码含如权利要求1-9中任一项所述的双特异性抗体或其抗原结合部分的核酸序列。
11.一种表达载体，其包含如权利要求10所述的核酸序列。
12.一种原核或真核细胞，其包含如权利要求11所述的表达载体。
13.一种抗HER2的双特异性抗体的药物偶联物，其特征在于，其由如权利要求1-9中任一项所述的双特异性抗体与细胞毒性药物共价偶联而成。
14.如权利要求13所述的药物偶联物，所述细胞毒性药物为微管蛋白抑制剂、拓扑异构酶抑制剂或DNA小沟抑制剂。
15.如权利要求14所述的药物偶联物，所述微管蛋白抑制剂为美登素类化合物、奥瑞斯他汀或微管素；所述拓扑异构酶抑制剂为DXd、SN-38或阿霉素；所述DNA小沟抑制剂为卡奇霉素、倍癌霉素、吡咯苯二氮平类化合物或吲哚苯二氮平类化合物。
16.一种药物组合物，其包括如权利要求1-9中任一项所述的双特异性抗体。
17.如权利要求16所述的药物组合物，所述药物组合物还包括透明质酸酶。
18.如权利要求17所述的药物组合物，所述透明质酸酶为rHuPH20或经修饰的rHuPH20。
19.如权利要求16或17所述的药物组合物，所述药物组合物还包括药学上可接受的载体或赋形剂。
20.一种制备如权利要求1-9中任一项所述的双特异性抗体的方法，其特征在于，其包括以下步骤：
(1) 将包含编码所述重链的核苷酸序列和包含编码所述轻链的核苷酸序列构建在同一载体或不同的载体中；
(2) 将上述步骤构建的载体在不同宿主细胞或同一宿主细胞中表达。
21.如权利要求1-9中任一项所述的抗HER2的双特异性抗体、权利要求13-15中任一项所述的药物偶联物或权利要求16-19中任一项所述的药物组合物在制备用于治疗HER2表达肿瘤的药物中的用途，其中所述肿瘤选自乳腺癌、胃癌和肺癌。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN2019101090084 | 2019-02-03 | ||
| CN201910109008 | 2019-02-03 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN111518213A CN111518213A (zh) | 2020-08-11 |
| CN111518213B true CN111518213B (zh) | 2024-05-28 |
Family
ID=71840931
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202010078527.1A Active CN111518213B (zh) | 2019-02-03 | 2020-02-03 | 抗her2的双特异性抗体及其应用 |
| CN202080011381.7A Pending CN113631580A (zh) | 2019-02-03 | 2020-02-03 | 抗her2的双特异性抗体及其应用 |
Family Applications After (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202080011381.7A Pending CN113631580A (zh) | 2019-02-03 | 2020-02-03 | 抗her2的双特异性抗体及其应用 |
Country Status (5)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20220143178A1 (zh) |
| EP (1) | EP3988574A4 (zh) |
| JP (1) | JP2022527652A (zh) |
| CN (2) | CN111518213B (zh) |
| WO (1) | WO2020156555A1 (zh) |
Families Citing this family (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN110658340B (zh) * | 2015-01-08 | 2023-10-31 | 苏州康宁杰瑞生物科技有限公司 | 具有共同轻链的双特异性抗体或抗体混合物 |
| CN113135996A (zh) * | 2019-12-09 | 2021-07-20 | 启愈生物技术(上海)有限公司 | 一种双特异抗体及其应用 |
| CN115702008A (zh) * | 2020-08-13 | 2023-02-14 | 正大天晴药业集团股份有限公司 | 抗体药物偶联物 |
| CN117616052A (zh) * | 2021-07-05 | 2024-02-27 | 江苏康宁杰瑞生物制药有限公司 | 抗体药物偶联物及其应用 |
| CN113480657B (zh) * | 2021-08-06 | 2023-01-20 | 南京融捷康生物科技有限公司 | 针对her2的单域抗体及其衍生蛋白和应用 |
| CN113817065B (zh) * | 2021-09-06 | 2023-04-18 | 深圳市乐土生物医药有限公司 | 一种抗her2的多肽及其用途 |
| WO2024061224A1 (zh) * | 2022-09-20 | 2024-03-28 | 普米斯生物技术(珠海)有限公司 | 抗her2抗体及其用途 |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2005092925A2 (en) * | 2004-03-24 | 2005-10-06 | Xencor, Inc. | Immunoglobulin variants outside the fc region |
| CN105820251A (zh) * | 2015-01-08 | 2016-08-03 | 苏州康宁杰瑞生物科技有限公司 | 具有共同轻链的双特异性抗体或抗体混合物 |
| WO2016179707A1 (en) * | 2015-05-13 | 2016-11-17 | Zymeworks Inc. | Antigen-binding constructs targeting her2 |
| WO2018014864A1 (en) * | 2016-07-22 | 2018-01-25 | Beijing Mabworks Biotech Co. Ltd. | Bispecific anti-her2 antibody |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DK1501856T3 (da) * | 2002-04-10 | 2013-03-25 | Genentech Inc | Anti-HER2 antistofvarianter |
| CA2931356A1 (en) | 2013-11-27 | 2015-06-04 | Zymeworks Inc. | Bispecific antigen-binding constructs targeting her2 |
| WO2015091738A1 (en) * | 2013-12-20 | 2015-06-25 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Bispecific her2 antibodies and methods of use |
| WO2016082044A1 (en) * | 2014-11-27 | 2016-06-02 | Zymeworks Inc. | Methods of using bispecific antigen-binding constructs targeting her2 |
| US10377833B2 (en) * | 2016-07-22 | 2019-08-13 | Beijing Mabworks Biotech Co., Ltd. | Bispecific anti-HER2 antibody |
| CN113527499A (zh) * | 2017-04-09 | 2021-10-22 | 轩竹生物科技有限公司 | 有共同轻链的双互补位和多互补位抗体和使用方法 |
-
2020
- 2020-02-03 JP JP2021560470A patent/JP2022527652A/ja active Pending
- 2020-02-03 EP EP20748159.9A patent/EP3988574A4/en active Pending
- 2020-02-03 US US17/593,989 patent/US20220143178A1/en active Pending
- 2020-02-03 CN CN202010078527.1A patent/CN111518213B/zh active Active
- 2020-02-03 WO PCT/CN2020/074171 patent/WO2020156555A1/zh unknown
- 2020-02-03 CN CN202080011381.7A patent/CN113631580A/zh active Pending
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2005092925A2 (en) * | 2004-03-24 | 2005-10-06 | Xencor, Inc. | Immunoglobulin variants outside the fc region |
| CN105820251A (zh) * | 2015-01-08 | 2016-08-03 | 苏州康宁杰瑞生物科技有限公司 | 具有共同轻链的双特异性抗体或抗体混合物 |
| WO2016179707A1 (en) * | 2015-05-13 | 2016-11-17 | Zymeworks Inc. | Antigen-binding constructs targeting her2 |
| WO2018014864A1 (en) * | 2016-07-22 | 2018-01-25 | Beijing Mabworks Biotech Co. Ltd. | Bispecific anti-her2 antibody |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP3988574A1 (en) | 2022-04-27 |
| EP3988574A9 (en) | 2022-08-03 |
| WO2020156555A1 (zh) | 2020-08-06 |
| CN111518213A (zh) | 2020-08-11 |
| EP3988574A4 (en) | 2022-10-12 |
| JP2022527652A (ja) | 2022-06-02 |
| CN113631580A (zh) | 2021-11-09 |
| US20220143178A1 (en) | 2022-05-12 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN111518213B (zh) | 抗her2的双特异性抗体及其应用 | |
| EP2829552B1 (en) | Bispecific chimeric proteins with DARPin-molecules | |
| CN113227151B (zh) | 抗her2/pd1双特异性抗体 | |
| CN105367657B (zh) | 抗her3抗体、其制法及其应用 | |
| KR20120060235A (ko) | 특이성 결합 단백질 및 용도 | |
| CN113454121B (zh) | 抗cd73抗体及其应用 | |
| CN111995685B (zh) | 一种靶向her2和pd-1的双特异性抗体及其应用 | |
| CN104225594A (zh) | 抗her2人源化抗体及其相关的抗肿瘤组合物 | |
| CN113754775A (zh) | 一种抗pd-l1和her2的双特异性抗体 | |
| CA3058341A1 (en) | Antibodies for the treatment of erbb-2/erbb-3 positive tumors | |
| Richter et al. | Receptor-targeted cancer therapy | |
| WO2019114793A1 (zh) | 一种egfr抗体及其制备方法和应用 | |
| US20210395371A1 (en) | Preparation and use of anti-met-and-ron bispecific antibody and antibody-drug conjugate thereof | |
| CN110467676B (zh) | 特异性结合egfr的单克隆抗体及其抗癌用途 | |
| CN113754774A (zh) | 一种抗pd-l1和egfr的四价双特异性抗体 | |
| CN111417654B (zh) | 具有增加的对于表皮生长因子受体的亲和力的抗体及其衍生片段 | |
| CN110563846B (zh) | 一种特异性结合egfr的单克隆抗体及其抗癌用途 | |
| WO2022111535A1 (zh) | 结合her2的多价双特异性抗体、其制备方法和用途 | |
| WO2023186092A1 (zh) | 针对c-Met的单克隆抗体以及双特异性抗体 | |
| CN114805590A (zh) | 结合her2的双特异性抗体 | |
| CN117586413A (zh) | 异多聚体蛋白质及其制备方法 | |
| CN116102649A (zh) | 抗cldn18.2单克隆抗体及其应用 | |
| CN117126289A (zh) | 一种抗trop-2/cd3双特异性抗体 | |
| CN116284427A (zh) | 抗muc17/cd3双特异性抗体、其制备方法及用途 | |
| CN115594751A (zh) | 受体偏好的il2/抗il2单链抗体融合蛋白 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| TA01 | Transfer of patent application right |
Effective date of registration: 20210729 Address after: 201908 room a1002, building 3, No. 2288, Shitai Road, Baoshan District, Shanghai Applicant after: Shanghai Baoji Pharmaceutical Co.,Ltd. Address before: 215123 room 301A, C13 / F, bio nano Park, 218 Xinghu street, Suzhou Industrial Park, Suzhou City, Jiangsu Province Applicant before: SUZHOU KANGJU BIOLOGICAL TECHNOLOGY Co.,Ltd. |
|
| TA01 | Transfer of patent application right | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| CB02 | Change of applicant information |
Address after: No. 28 Luoxin Road, Baoshan District, Shanghai, 201908 Applicant after: Shanghai Baoji Pharmaceutical Co.,Ltd. Address before: 201908 room a1002, building 3, No. 2288, Shitai Road, Baoshan District, Shanghai Applicant before: Shanghai Baoji Pharmaceutical Co.,Ltd. |
|
| CB02 | Change of applicant information | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |