CN111471012B - 一种蜈蚣喹啉类化合物、制备方法及其应用 - Google Patents

一种蜈蚣喹啉类化合物、制备方法及其应用 Download PDF

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Abstract

本发明属于医药领域，涉及一种从蜈蚣中分离、纯化得到的喹啉类新化合物及其制备方法，以及该新化合物在制备抗肿瘤药物中的应用。以蜈蚣药材为原料，通过提取、萃取、柱色谱层析和精制等步骤得到喹啉新化合物3,8‑二羟基‑4‑甲氧基喹啉。体外抗肿瘤细胞活性试验结果表明3,8‑二羟基‑4‑甲氧基喹啉针对肿瘤细胞的增殖具有较强的抑制作用，可用于抗肿瘤药物的开发及临床肿瘤的预防与治疗。

Description

一种蜈蚣喹啉类化合物、制备方法及其应用
技术领域
本发明涉及一种从蜈蚣中分离、纯化得到的新的天然化合物，尤其涉及一种蜈蚣喹啉类新化合物、制备方法及其应用，属于医药领域。
背景技术
蜈蚣作为传统中药材，最早收载于《神农本草经》，临床应用已有两千多年的历史，具有辛温走窜、调达肝经之功效，为息风镇痉、攻毒散结、通络止痛之要药。现代研究表明，蜈蚣具有抗肿瘤、抗血栓、抗炎镇痛、抗菌等药理活性，主要化学成分有蛋白质、多肽、多糖、脂肪酸、氨基酸、微量元素以及喹啉类生物碱等，其中喹啉类生物碱因具有抗肿瘤、抗菌、防治心血管疾病等多方面的药理活性，较为受人关注。
1996年以来，从少棘蜈蚣中分离出多个喹啉类化合物，韩国学者Surk-Sik Moon等(Jineol，acytotoxic Alkaloid from the Centipede Scolopendrasubspinipes.J.Nat.Prod))首次报道从少棘蜈蚣中分离出Jineol，并通过试验证明其对人类肿瘤细胞系—肺癌细胞(A-549)、卵巢癌细胞(SKOV-3)、人结肠癌细胞(HCT-15)、人恶性黑色素瘤细胞(SK-MEL-2)等均有适度的抑制作用。Naoki等报道(A Novel QuinolineAlkaloid Possessing a 7-Benzyl Group from the Centipede，Scolopendra subspinipes.Chem.Pharm.Bull.2001)从少棘蜈蚣中分离出一种新的喹啉类生物碱Scolopendrine。CN101370781A公开了一种从蜈蚣中提取和纯化的用于预防和治疗心血管疾病的组合物，该组合物含有新型喹啉类化合物3,4-二甲氧基-喹啉-2,8-二醇。CN104529891A公开了从少棘蜈蚣中分离出的3，5-二羟基喹啉以及其抗肝癌、肺癌和结肠癌的活性。发明人前期亦从少棘蜈蚣中分离得到具有抗肿瘤作用的两个新喹啉类化合物(中CN201810312129.4)，分别为3-羟基-8-喹啉硫酸酯和3-羟基-4-甲氧基-8-喹啉硫酸酯。
发明内容
本发明人对蜈蚣进行了更深入地研究，发现一个新的喹啉类化合物及其在抗肿瘤药物中的用途。
所述的新的喹啉类化合物，具有以下分子结构式：
Figure BDA0001954428800000021
本发明的目的之二在于提供制备上述喹啉类新化合物的方法，所述喹啉类新化合物的制备方法，包括如下步骤：
1)提取：取蜈蚣，以甲醇溶液或乙醇溶液提取，过滤，滤液浓缩，得提取物浓缩液；
2)萃取：取步骤1)所得提取物浓缩液用有机溶剂萃取，取有机相萃取液浓缩，得萃取得到的脂溶性部位；
3)柱色谱层析：取步骤2)所得脂溶性部位经柱色谱洗脱，洗脱液浓缩，得目标洗脱液；
4)精制：取步骤3)所得目标洗脱液经色谱法纯化，干燥，得喹啉类化合物。
优选地，步骤1)所述蜈蚣为蜈蚣科动物少棘蜈蚣S.subspinipes mutilansL.Koch、多棘蜈蚣S.mutidens Newport、黑头蜈蚣S.negrocapitis Zhang et Wang、哈氏蜈蚣S.dohaaniBrandt或墨江蜈蚣S.mojiangica C.Z.Zhang的干燥体。
优选地，步骤2)所述有机溶剂选自乙酸乙酯、氯仿、二氯甲烷或乙醚中的一种。
优选地，步骤3)所述柱色谱为硅胶柱色谱和/或聚酰胺柱色谱色谱。
优选地，所述步骤3)柱色谱层析包括下列步骤：步骤2)所述脂溶性部位通过硅胶柱色谱，以氯仿：甲醇＝10：1为洗脱液洗脱3-4倍柱体积，洗脱液弃去，再以氯仿：甲醇＝1：1为洗脱液洗脱3-4倍柱体积，收集洗脱液，浓缩，得目标洗脱液。
或者，取步骤2)所述脂溶性部位通过聚酰胺色谱柱，先用水洗脱，再以甲醇或乙醇洗脱，收集醇洗脱液，浓缩，得目标洗脱液；进一步优选地，步骤2)所述脂溶性部位通过聚酰胺色谱柱，先用水洗脱3-4倍柱体积，再以甲醇或乙醇洗脱3-4倍柱体积，收集醇洗脱液，浓缩，得目标洗脱液。
优选地，所述步骤4)精制包括下列步骤：
A、取步骤3)目标洗脱液以中低压制备色谱洗脱分离，得目标化合物粗品；
B、取步骤A所得目标化合物粗品以高压制备色谱精制，得目标化合物，调节pH，浓缩，得浓缩液；
C、取步骤B所得浓缩液通过中低压制备色谱除盐，干燥，即得喹啉类化合物。
优选的，所述步骤4)精制包括下列步骤：
A、取所述步骤3)目标洗脱液以中低压制备色谱洗脱分离，以乙腈-0.1％磷酸水溶液为流动相，检测波长为254nm，分离得目标化合物粗品；
B、取步骤A所得目标化合物粗品以高压制备色谱精制，以乙腈-0.1％磷酸水溶液为流动相，检测波长为254nm，得目标化合物，调节pH＝7.0，浓缩，得浓缩液；
C、取步骤B所得浓缩液通过中低压制备色谱除盐，干燥，即得喹啉类化合物；
进一步优选的，所述步骤A、步骤B中乙腈-0.1％磷酸水溶液的比例以体积比计为：10-25:90-75。
具体的，本发明所述新的喹啉类化合物的制备步骤如下：
1)提取：取蜈蚣，以3-8倍量的甲醇溶液或乙醇溶液提取2-4次，过滤，合并过滤液，滤液浓缩，得提取物浓缩液；
2)萃取：取步骤1)所得提取物浓缩液用1倍量的乙酸乙酯、氯仿、二氯甲烷或乙醚中的一种进行萃取3-5次，萃取液合并后浓缩，得萃取部位；
3)柱色谱层析：取步骤2)所述萃取部位通过硅胶柱色谱，以氯仿：甲醇＝10：1为洗脱液洗脱3-4倍柱体积，洗脱液弃去，再以氯仿：甲醇＝1：1为洗脱液洗脱3-4倍柱体积，收集洗脱液，浓缩，得目标洗脱液；
或者，取步骤2)所述脂溶性部位通过聚酰胺色谱柱，先用水洗脱3-4倍柱体积，再以甲醇或乙醇洗脱3-4倍柱体积，收集醇洗脱液，浓缩，得目标洗脱液。
4)精制：取所述步骤3)目标洗脱液以中低压制备色谱洗脱分离，以乙腈：0.1％磷酸水溶液＝10-25:90-75为流动相，检测波长为254nm，分离得目标化合物粗品；目标化合物粗品以高压制备色谱精制，以乙腈：0.1％磷酸水溶液＝10-25:90-75为流动相，检测波长为254nm，得目标化合物，调节pH＝7.0，浓缩，得浓缩液；浓缩液通过中低压制备色谱除盐，干燥，即得喹啉类化合物。
本发明的目标化合物，经过HRESIMS(positive)，结合1H-NMR，13C-NMR图谱的分析，确证了其结构，具体解析如下：
黄色粉末，高分辨质谱HRESIMS(posotive)给出分子式为C10H10NO3，192.0655[M+H]+。根据分子式计算出该分子的不饱合度为7。
1H-NMR(MeOD,600MHz)显示：在低场区有4个烯质子，分别为δ8.48(1H,s)，推测为孤立的芳香氢；δ7.49(1H,dd,J＝7.2Hz,1.2Hz)，δ7.34(1H,t,J＝7.2Hz,8.4Hz)，δ6.91(1H,dd,J＝6.6Hz,1.2Hz),为苯环ABX偶合系统信号；在高场区有3个H信号为δ4.11(3H,s)，推测为甲氧基上面的氢。
13C-NMR(MeOD,600MHz)显示：共有10个碳信号，9个在低场区，均为芳香碳，1个碳信号在高场区。结合DEPT谱推测为4个次甲基分别为δ143.19，δ128.40，δ112.49，δ109.52；1个甲氧基信号为δ61.28；5个季碳信号分别为δ154.13，δ148.83，δ143.45，δ136.15，δ126.76。
1H-1HCOSY谱显示H(δ7.36)与H(δ7.49)、H(δ6.91)相偶合。
由HSQC谱可知H(δ8.48)与C(δ143.19)相关，H(δ7.49)与C(δ112.49)相关，H(δ7.34)与C(δ128.40)相关，H(δ6.91)与C(δ109.52)相关，H(δ4.11)与C(δ61.28)相关。
由HMBC谱可知：H(δ8.48，H-2)与C(δ148.83，C-4)、C(δ143.45，C-3)、C(δ136.15，C-9)有远程偶合；H(δ7.49，H-5)与C(δ148.83，C-4)、C(δ136.15，C-9)、C(δ109.52，C-7)有远程偶合；H(δ7.34，H-6)与C(δ154.13，C-8)、C(δ126.76，C-10)有远程偶合；H(δ6.91，H-7)与C(δ136.15，C-9)、C(δ112.49，C-5)有远程偶合。
根据以上分析可确认该化合物的分子结构。经检索，未见与之重复的化合物，证明该化合物为全新化合物，命名为3,8-二羟基-4-甲氧基喹啉。该化合物的NMR数据见表1。
表1NMR Data for the compound(in MeOD)
Figure BDA0001954428800000041
本发明同时公开了所述的喹啉类新化合物3,8-二羟基-4-甲氧基喹啉在制备抗肿瘤药物中的用途；优选地，所述肿瘤为肺癌、肝癌和结肠癌。
以下通过体外抗肿瘤细胞活性试验，进一步验证本发明蜈蚣喹啉类新化合物3,8-二羟基-4-甲氧基喹啉的抗肿瘤活性，试验材料、方法及结果如下：
1)试验材料
采用MTT法测定3,8-二羟基-4-甲氧基喹啉的体外抗肿瘤活性，以五氟尿嘧啶(5-Fu，上海旭东海普制药厂，25mg/mL，150511)作为阳性对照药物，试验药物3,8-二羟基-4-甲氧基喹啉用培养液溶解并稀释至浓度分别为：100μg/mL、50μg/mL、25μg/mL、10μg/mL、5μg/mL、1μg/mL和阳性药物(5-Fu)用培养基溶液稀释至浓度为25μg/mL；另设空白对照组。
癌症细胞采用肺癌细胞(Calu-3)、肝癌细胞(HepG2)、结肠癌细胞(HCT-8)、宫颈癌细胞(Hela)，以上细胞均来自鲁南制药集团股份有限公司新药药理中心细胞培养室。
主要试剂包括：RPMI-1640培养基、胰蛋白酶、MTT、DMSO均为Sigma公司产品；小牛血清为杭州四季青生物工程材料有限公司产品；其余试剂均为生化试剂或分析纯级试剂。
主要设备包括：Multiskan FC酶标仪(赛默飞世尔)、CO2培养箱(德国Herseus公司)。
2)试验方法
①接种细胞：收集对数期细胞，根据不同细胞的生长速度确定每孔细胞数目，调整细胞悬液浓度，每孔加入100μl边缘孔用无菌PBS填充，接种完毕后将培养板移入CO2培养箱中，培养48h；
②显色：培养结束后，每孔加MTT溶液20μl。继续培养4h，终止培养，小心吸弃上清液，对于悬浮细胞需要离心后再吸弃上清液。每孔加DMSO 150μl，震荡10min；
③比色：波长570nm(参比630nm)下(空白调零)，在酶标仪上测定各孔的紫外吸收值(OD)，记录结果，计算肿瘤细胞抑制率，并采用SPSS软件计算IC50。
Figure BDA0001954428800000051
3)试验结果及结论见表2。
表2 3,8-二羟基-4-甲氧基喹啉抗肿瘤细胞活性结果
Figure BDA0001954428800000052
Figure BDA0001954428800000061
由试验结果可知，3,8-二羟基-4-甲氧基喹啉对试验所选的肺癌细胞(Calu-3)、肝癌细胞(HepG2)、结肠癌细胞(HCT-8)的细胞株有较强的抑制作用，其IC50值均小于10μg/mL，对宫颈癌细胞(Hela)的增殖的IC50值大于10μg/mL。结果表明3,8-二羟基-4-甲氧基喹啉对肺癌细胞(Calu-3)、肝癌细胞(HepG2)、结肠癌细胞(HCT-8)的细胞株有较强的抑制作用，可用于抗肿瘤药物的开发及临床肿瘤的预防与治疗。
附图说明
附图1是本发明新化合物的结构式；
附图2是本发明新化合物的HMBC和1H-1H COSY相关图；
附图3是为本发明新化合物的HRESIMS图谱；
附图4是本发明新化合物的1H-NMR图谱；
附图5是本发明新化合物的13C-NMR图谱；
附图6是本发明新化合物的DEPT图谱；
附图7是本发明新化合物的二维HSQC图谱；
附图8是本发明新化合物的二维HMBC图谱。
具体实施方式
下通过具体实施例进一步说明本发明，但本领域相关技术人员理应知晓，所述实施例并不以任何方式限制本发明。
实施例1化合物3,8-二羟基-4-甲氧基喹啉的制备
1)提取：取少棘蜈蚣1.0kg，以5倍量90％乙醇提取4次，过滤，合并过滤液，浓缩至1.0kg，得提取浓缩液；
2)萃取：步骤1)提取浓缩液以1倍量的乙醚萃取5次，浓缩，得乙醚萃取部位；
3)柱色谱层析：所述步骤2)乙醚萃取部位通过聚酰胺色谱柱，先用水洗脱4倍柱体积，再用乙醇洗脱3倍柱体积，收集乙醇溶液，浓缩至0.1kg，得目标洗脱液；
4)精制：所述步骤3)目标洗脱液以中低压制备色谱洗脱分离，以乙腈：0.1％磷酸水溶液＝25：75为流动相，检测波长为254nm，分离得目标化合物粗品；
上述目标化合物粗品以高压制备色谱精制，以乙腈：0.1％磷酸水溶液＝25：75为流动相，检测波长为254nm，得目标化合物，调pH＝7.0，浓缩，浓缩液通过中低压制备色谱除盐，干燥，即得3,8-二羟基-4-甲氧基喹啉13mg。
实施例2化合物3,8-二羟基-4-甲氧基喹啉的制备
1)提取：取哈氏蜈蚣1.0kg，以3倍量50％乙醇提取2次，过滤，合并过滤液，浓缩至1.0kg，得提取浓缩液；
2)萃取：步骤1)提取浓缩液以1倍量的氯仿萃取3次，浓缩，得氯仿萃取部位；
3)柱色谱层析：步骤2)所述氯仿萃取部位通过硅胶柱色谱，以氯仿：甲醇＝10：1为洗脱液洗脱4倍柱体积，弃去，再以氯仿：甲醇＝1：1为洗脱液洗脱3倍柱体积，收集目标洗脱液，浓缩，得目标洗脱液；
4)精制：所述步骤3)目标洗脱液以中低压制备色谱洗脱分离，以乙腈：0.1％磷酸水溶液＝21：79为流动相，检测波长为254nm，分离得目标化合物粗品；
上述目标化合物粗品以高压制备色谱精制，以乙腈：0.1％磷酸水溶液＝21：79为流动相，检测波长为254nm，得目标化合物，调pH＝7.0，浓缩，浓缩液通过中低压制备色谱除盐，干燥，即得3,8-二羟基-4-甲氧基喹啉10mg。
实施例3化合物3,8-二羟基-4-甲氧基喹啉的制备
1)提取：取多棘蜈蚣1.0kg，以4倍量90％甲醇提取3次，过滤，合并过滤液，浓缩至1.0kg，得提取浓缩液；
2)萃取：步骤1)提取浓缩液以1倍量的二氯甲烷萃取4次，浓缩，得二氯甲烷萃取部位；
3)柱色谱层析：所述步骤2)二氯甲烷萃取部位通过聚酰胺色谱柱，先用水洗脱3倍量，再用乙醇洗脱3倍量，收集乙醇溶液，浓缩至0.1kg，得目标洗脱液；
4)精制：所述步骤3)目标洗脱液以中低压制备色谱洗脱分离，以乙腈：0.1％磷酸水溶液＝15：85为流动相，检测波长为254nm，分离得目标化合物粗品；
上述目标化合物粗品以高压制备色谱精制，以乙腈：0.1％磷酸水溶液＝15：85为流动相，检测波长为254nm，得目标化合物，调pH＝7.0，浓缩，浓缩液通过中低压制备色谱除盐，干燥，即得3,8-二羟基-4-甲氧基喹啉19mg。
实施例4化合物3,8-二羟基-4-甲氧基喹啉的制备
1)提取：取黑头蜈蚣1.0kg，以8倍量50％甲醇提取4次，过滤，合并过滤液，浓缩至1.0kg，得提取浓缩液；
2)萃取：步骤1)提取浓缩液以1倍量的乙醚萃取4次，浓缩，得乙醚萃取部位；
3)柱色谱层析：所述步骤2)乙醚部位通过聚酰胺色谱柱，先用水洗脱4倍柱体积，再用甲醇洗脱4倍柱体积，收集乙醇溶液，浓缩至0.1kg，得目标洗脱液；
4)精制：所述步骤3)目标洗脱液以中低压制备色谱洗脱分离，以乙腈：0.1％磷酸水溶液＝19：81为流动相，检测波长为254nm，分离得目标化合物粗品；
上述目标化合物粗品以高压制备色谱精制，以乙腈：0.1％磷酸水溶液＝19：81为流动相，检测波长为254nm，得目标化合物，调pH＝7.0，浓缩，浓缩液通过中低压制备色谱除盐，干燥，即得3,8-二羟基-4-甲氧基喹啉13mg。
实施例5化合物3,8-二羟基-4-甲氧基喹啉的制备(最佳实施例)
1)提取：取多棘蜈蚣1.0kg，以6倍量70％乙醇提取3次，过滤，合并过滤液，浓缩至1.0kg，得提取浓缩液；
2)萃取：步骤1)提取浓缩液以1倍量的乙酸乙酯萃取4次，浓缩，得乙酸乙酯萃取部位；
3)柱色谱层析：所述步骤2)乙酸乙酯萃取部位通过聚酰胺色谱柱，先用水洗脱3倍柱体积，再用乙醇洗脱4倍柱体积，收集乙醇溶液，浓缩至0.1kg，得目标洗脱液；
4)精制：所述步骤3)目标洗脱液以中低压制备色谱洗脱分离，以乙腈：0.1％磷酸水溶液＝18：82为流动相，检测波长为254nm，分离得目标化合物粗品；
上述目标化合物粗品以高压制备色谱精制，以乙腈：0.1％磷酸水溶液＝18：82为流动相，检测波长为254nm，得目标化合物，调pH＝7.0，浓缩，浓缩液通过中低压制备色谱除盐，干燥，即得3,8-二羟基-4-甲氧基喹啉22mg。
实施例6化合物3,8-二羟基-4-甲氧基喹啉的制备
1)提取：取哈氏蜈蚣1.0kg，以5倍量40％乙醇提取2次，过滤，合并过滤液，浓缩至1.0kg，得提取浓缩液；
2)萃取：步骤1)提取浓缩液以1倍量的氯仿萃取3次，浓缩，得氯仿萃取部位；
3)柱色谱层析：所述步骤2)氯仿萃取部位通过聚酰胺色谱柱，先用水洗脱4倍柱体积，再用乙醇洗脱3倍柱体积，收集乙醇溶液，浓缩至0.1kg，得目标洗脱液。
4)精制：所述步骤3)目标洗脱液以中低压制备色谱洗脱分离，以乙腈：0.1％磷酸水溶液＝10：90为流动相，检测波长为254nm，分离得目标化合物粗品；
上述目标化合物粗品以高压制备色谱精制，以乙腈：0.1％磷酸水溶液＝10：90为流动相，检测波长为254nm，得目标化合物，调pH＝7.0，浓缩，浓缩液通过中低压制备色谱除盐，干燥，即得3,8-二羟基-4-甲氧基喹啉11mg。
实施例7化合物3,8-二羟基-4-甲氧基喹啉的制备
1)提取：取墨江蜈蚣1.0kg，以8倍量60％甲醇提取4次，过滤，合并过滤液，浓缩至1.0kg，得提取浓缩液；
2)萃取：步骤1)提取浓缩液以1倍量的乙酸乙酯萃取5次，浓缩，得乙酸乙酯萃取部位；
3)柱色谱层析：步骤2)所述乙酸乙酯萃取部位通过硅胶柱色谱，以氯仿：甲醇＝10：1为洗脱液洗脱3倍柱体积，弃去，再以氯仿：甲醇＝1：1为洗脱液洗脱3倍柱体积，收集目标洗脱液，浓缩，得目标洗脱液；
4)精制：所述步骤3)目标洗脱液以中低压制备色谱洗脱分离，以乙腈：0.1％磷酸水溶液＝17：83为流动相，检测波长为254nm，分离得目标化合物粗品；
上述目标化合物粗品以高压制备色谱精制，以乙腈：0.1％磷酸水溶液＝17：83为流动相，检测波长为254nm，得目标化合物，调pH＝7.0，浓缩，浓缩液通过中低压制备色谱除盐，干燥，即得3,8-二羟基-4-甲氧基喹啉9mg。
实施例8化合物3,8-二羟基-4-甲氧基喹啉的制备
1)提取：取黑头蜈蚣1.0kg，以3倍量甲醇提取2次，过滤，合并过滤液，浓缩至1.0kg，得提取浓缩液；
2)萃取：步骤1)提取浓缩液以1倍量的氯仿萃取3次，浓缩，得氯仿萃取部位；
3)柱色谱层析：所述步骤2)氯仿萃取部位通过聚酰胺色谱柱，先用水洗脱3倍体积，再用乙醇洗脱3倍柱体积，收集乙醇溶液，浓缩至0.1kg，得目标洗脱液。
4)精制：所述步骤3)目标洗脱液以中低压制备色谱洗脱分离，以乙腈：0.1％磷酸水溶液＝13：87为流动相，检测波长为254nm，分离得目标化合物粗品；
上述目标化合物粗品以高压制备色谱精制，以乙腈：0.1％磷酸水溶液＝13：87为流动相，检测波长为254nm，得目标化合物，调pH＝7.0，浓缩，浓缩液通过中低压制备色谱除盐，干燥，即得3,8-二羟基-4-甲氧基喹啉15mg。
实施例9化合物3,8-二羟基-4-甲氧基喹啉的制备
1)提取：取少棘蜈蚣1.0kg，以6倍量80％乙醇提取3次，过滤，合并过滤液，浓缩至1.0kg，得提取浓缩液；
2)萃取：步骤1)提取浓缩液以1倍量的乙酸乙酯萃取4次，浓缩，得乙酸乙酯萃取部位；
3)柱色谱层析：步骤2)所述乙酸乙酯萃取部位通过硅胶柱色谱，以氯仿：甲醇＝10：1为洗脱液洗脱3倍柱体积，弃去，再以氯仿：甲醇＝1：1为洗脱液洗脱4倍柱体积，收集目标洗脱液，浓缩，得目标洗脱液；
4)精制：所述步骤3)目标洗脱液以中低压制备色谱洗脱分离，以乙腈：0.1％磷酸水溶液＝20：80为流动相，检测波长为254nm，分离得目标化合物粗品；
上述目标化合物粗品以高压制备色谱精制，以乙腈：0.1％磷酸水溶液＝20：80为流动相，检测波长为254nm，得目标化合物，调pH＝7.0，浓缩，浓缩液通过中低压制备色谱除盐，干燥，即得3,8-二羟基-4-甲氧基喹啉19mg。
实施例10化合物3,8-二羟基-4-甲氧基喹啉的制备
1)提取：取哈氏蜈蚣1.0kg，以7倍量乙醇提取3次，过滤，合并过滤液，浓缩至1.0kg，得提取浓缩液；
2)萃取：步骤1)提取浓缩液以1倍量的乙醚萃取5次，浓缩，得乙醚萃取部位；
3)柱色谱层析：所述步骤2)乙醚萃取部位通过聚酰胺色谱柱，先用水洗脱3倍柱体积，再用甲醇洗脱4倍柱体积，收集甲醇溶液，浓缩至0.1kg，得目标洗脱液；
4)精制：所述步骤3)目标洗脱液以中低压制备色谱洗脱分离，以乙腈：0.1％磷酸水溶液＝23：77为流动相，检测波长为254nm，分离得目标化合物粗品；
上述目标化合物粗品以高压制备色谱精制，以乙腈：0.1％磷酸水溶液＝23：77为流动相，检测波长为254nm，得目标化合物，调pH＝7.0，浓缩，浓缩液通过中低压制备色谱除盐，干燥，即得3,8-二羟基-4-甲氧基喹啉9mg。
实施例11化合物3,8-二羟基-4-甲氧基喹啉的制备
1)提取：取多棘蜈蚣1.0kg，以6倍量40％乙醇提取4次，过滤，合并过滤液，浓缩至1.0kg，得提取浓缩液；
2)萃取：步骤1)提取浓缩液以1倍量的二氯甲烷萃取4次，浓缩，得二氯甲烷萃取部位；
3)柱色谱层析：所述步骤2)二氯甲烷萃取部位通过聚酰胺色谱柱，先用水洗脱4倍柱体积，再用甲醇洗脱3倍柱体积，收集甲醇溶液，浓缩至0.1kg，得目标洗脱液；
4)精制：所述步骤3)目标洗脱液以中低压制备色谱洗脱分离，以乙腈：0.1％磷酸水溶液＝16：84为流动相，检测波长为254nm，分离得目标化合物粗品；
上述目标化合物粗品以高压制备色谱精制，以乙腈：0.1％磷酸水溶液＝16：84为流动相，检测波长为254nm，得目标化合物，调pH＝7.0，浓缩，浓缩液通过中低压制备色谱除盐，干燥，即得3,8-二羟基-4-甲氧基喹啉13mg。
实施例12化合物3,8-二羟基-4-甲氧基喹啉的制备
1)提取：取墨江蜈蚣1.0kg，以7倍量80％甲醇提取2次，过滤，合并过滤液，浓缩至1.0kg，得提取浓缩液；
2)萃取：步骤1)提取浓缩液以1倍量的乙酸乙酯萃取5次，浓缩，得乙酸乙酯萃取部位；
3)柱色谱层析：步骤2)所述乙酸乙酯萃取部位通过硅胶柱色谱，以氯仿：甲醇＝10：1为洗脱液洗脱4倍柱体积，弃去，再以氯仿：甲醇＝1：1为洗脱液洗脱4倍柱体积，收集目标洗脱液，浓缩，得目标洗脱液；
4)精制：所述步骤3)目标洗脱液以中低压制备色谱洗脱分离，以乙腈：0.1％磷酸水溶液＝22：78为流动相，检测波长为254nm，分离得目标化合物粗品；
上述目标化合物粗品以高压制备色谱精制，以乙腈：0.1％磷酸水溶液＝22：78为流动相，检测波长为254nm，得目标化合物，调pH＝7.0，浓缩，浓缩液通过中低压制备色谱除盐，干燥，即得3,8-二羟基-4-甲氧基喹啉10mg。

Claims (3)

1.一种制备喹啉类化合物的方法，其特征在于，包括如下步骤：
1)提取：取蜈蚣，以3-8倍量甲醇溶液或乙醇溶液提取2-4次，过滤，合并过滤液，浓缩，得提取浓缩液；
2)萃取：步骤1)提取浓缩液以1倍量的乙酸乙酯、氯仿、二氯甲烷或乙醚中的一种萃取3-5次，浓缩，得脂溶性部位；
3)柱色谱层析：取步骤2)所述脂溶性部位通过硅胶柱色谱，以氯仿：甲醇＝10：1为洗脱液洗脱3-4倍柱体积，洗脱液弃去，再以氯仿：甲醇＝1：1为洗脱液洗脱3-4倍柱体积，收集洗脱液，浓缩，得目标洗脱液；
或；取步骤2)所述脂溶性部位通过聚酰胺色谱柱，先用水洗脱，再以甲醇或乙醇洗脱，收集醇洗脱液，浓缩，得目标洗脱液；
4)精制：步骤3)所述浓缩目标洗脱液以中低压制备色谱洗脱分离，以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相，检测波长为254nm，分离得目标化合物粗品，再以高压制备色谱精制，以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相，检测波长为254nm，得目标化合物，调节pH，浓缩，得浓缩液，浓缩液通过中低压制备色谱除盐，干燥，得喹啉类化合物；
所述蜈蚣为蜈蚣科动物少棘蜈蚣、多棘蜈蚣、黑头蜈蚣、哈氏蜈蚣或墨江蜈蚣干燥体；
所述喹啉类化合物具有以下分子结构式：
。
2.根据权利要求1所述的制备喹啉类化合物的方法，其特征在于，所述步骤3)柱色谱层析包括下列步骤：取步骤2)所述脂溶性部位通过聚酰胺色谱柱，先用水洗脱3-4倍柱体积，再以甲醇或乙醇洗脱3-4倍柱体积，收集醇洗脱液，浓缩，得目标洗脱液。
3.根据权利要求1所述的制备喹啉类化合物的方法，其特征在于，步骤4）中，乙腈-0.1％磷酸水溶液的比例以体积比计为：10-25:90-75。
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Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2008013966A2 (en) * 2006-07-28 2008-01-31 Johns Hopkins University Use of 8-quinolinol and its analogs to target cancer stem cells
CN101370781A (zh) * 2005-11-17 2009-02-18 韩国生命工学研究院 预防和治疗心血管疾病的新型喹啉化合物，以及含有蜈蚣提取物或从提取物中分离的化合物的组合物
CN101589026A (zh) * 2006-06-22 2009-11-25 普拉纳生物技术有限公司 治疗脑神经胶质瘤的方法
CN101868447A (zh) * 2007-08-21 2010-10-20 香港理工大学 制备和施用作为抗癌剂的喹啉衍生物的方法
CN102603628A (zh) * 2010-12-22 2012-07-25 香港理工大学 作为抗癌试剂的喹啉衍生物
CN104529891A (zh) * 2015-01-21 2015-04-22 天津理工大学 少棘蜈蚣中喹啉类生物碱作为治疗肿瘤药品的制备及应用
CN105399669A (zh) * 2015-11-27 2016-03-16 中国药科大学 一种二羟基异喹啉及其从蜈蚣中制备的方法和应用

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TWI516264B (zh) * 2010-05-06 2016-01-11 臺北醫學大學 芳香醯喹啉化合物

Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101370781A (zh) * 2005-11-17 2009-02-18 韩国生命工学研究院 预防和治疗心血管疾病的新型喹啉化合物，以及含有蜈蚣提取物或从提取物中分离的化合物的组合物
CN101589026A (zh) * 2006-06-22 2009-11-25 普拉纳生物技术有限公司 治疗脑神经胶质瘤的方法
WO2008013966A2 (en) * 2006-07-28 2008-01-31 Johns Hopkins University Use of 8-quinolinol and its analogs to target cancer stem cells
CN101868447A (zh) * 2007-08-21 2010-10-20 香港理工大学 制备和施用作为抗癌剂的喹啉衍生物的方法
CN102603628A (zh) * 2010-12-22 2012-07-25 香港理工大学 作为抗癌试剂的喹啉衍生物
CN104529891A (zh) * 2015-01-21 2015-04-22 天津理工大学 少棘蜈蚣中喹啉类生物碱作为治疗肿瘤药品的制备及应用
CN105399669A (zh) * 2015-11-27 2016-03-16 中国药科大学 一种二羟基异喹啉及其从蜈蚣中制备的方法和应用

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Jineol, a Cytotoxic Alkaloid from the Centipede Scolopendra subspinipes;Surk-Sik Moon等;《J. Nat. Prod.》;19960701;第59卷(第8期);第777-779页 *
蜈蚣中有效成分的研究;孙琳娜;《中国优秀硕士学位论文全文数据库 医药卫生科技辑》;20160115(第1期);全文 *

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