CN114262270B

CN114262270B - 一种芳基二氢萘木脂素类化合物及其制备方法以及应用

Info

Publication number: CN114262270B
Application number: CN202210022930.1A
Authority: CN
Inventors: 王立平; 哈丽旦·吾甫尔; 许言超; 王冬阳; 吴耽; 何文文; 朱伟明
Original assignee: Key Laboratory of Natural Product Chemistry of Guizhou Academy of Sciences
Current assignee: Key Laboratory of Natural Product Chemistry of Guizhou Academy of Sciences
Priority date: 2022-01-10
Filing date: 2022-01-10
Publication date: 2023-07-07
Anticipated expiration: 2042-01-10
Also published as: CN114262270A

Abstract

本发明公开了一种具有抗肿瘤活性的芳基二氢萘木脂素类化合物及其制备方法以及应用，其结构通式如下：属于医药技术领域，该类化合物从骨碎补的干燥根茎中提取分离得到的。同时，化合物1以12‑羟基月桂酸通过甲基化反应、酯化反应、氧化偶联反应制得；化合物2以分离得到的已知化合物glyceryl 12‑caffeoyloxylaurate进行氧化偶联反应制得；本发明所公开的化合物既可以通过提取分离得到，又可以通过化学合成得到；本发明所公开的化合物1和2对人宫颈癌HeLa细胞株具有很强的选择性抑制活性。

Description

一种芳基二氢萘木脂素类化合物及其制备方法以及应用

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种具有抗肿瘤活性的芳基二氢萘木脂素类化合物，同时涉及该具有抗肿瘤活性的芳基二氢萘木脂素类化合物的提取分离和合成方法，及其在制备人宫颈癌HeLa细胞株抑制剂中的应用。

背景技术

宫颈癌是妇科三大恶性肿瘤之一，在我国的发病率较高。其治疗手段较为单一，且副作用较大，受到一定限制。宫颈癌主要是由人乳头瘤病毒持续感染引起的癌症，主要包括宫颈鳞状细胞癌和宫颈腺癌。临床上对宫颈癌的治疗主要采用手术加放疗和化疗方案，通过诱导癌细胞凋亡而发挥治疗效果。虽然早、中期患者通过手术治疗多数预后良好，但晚期和复发患者的治疗效果仍有限，因此急需开发新型治疗方法和药物。目前，人宫颈癌新辅助治疗中常用的药物包括：顺氯氨铂(cisplatin,DDP)、异环磷酰(ifosfamide,IFO)、紫杉醇(taxol)、卡铂(carboplatin)、氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-Fu)、长春新碱(vineristin)、丝裂霉素(mitomycin)等。但化疗的同时，给病人带来的毒副反应，往往是化疗失败的首要原因。化疗药物的毒副作用如消化系统，血液系统，神经系统，免疫系统等多方面系统症状给癌症病人化疗带来了极大的阻碍。近些年来，医药研究机构和药品研发者们热衷于从天然植物中寻找新的高效低毒的人宫颈癌治疗药物。

骨碎补为水龙骨科植物槲蕨Drynaria fortunei (Kunze)J.Sm.的干燥根茎。其味苦温，归肝、肾经，具有疗伤止痛，补肾强骨，消风祛斑的功效。民间有报道骨碎补对宫颈癌有一定的疗效，化学成分研究也从中分离获得了对宫颈癌细胞具有抑制作用的化合物。例如，从骨碎补中分离得到的三萜类化合物Chiratone是一种罕见的、新颖的三萜类化合物，它对宫颈癌HeLa细胞株有着明显的细胞毒活性；新木质素类化合物(VBE-1,2,3,4)在体内外具有较强抗肿瘤作用，包括宫颈癌，且毒性很低。因此，从骨碎补中寻找抗肿瘤活性的天然产物有重要意义。

发明内容

本发明主要提供从骨碎补中分离得到的芳基二氢萘木脂素类化合物1和2，并提供该化合物的提取分离和合成方法和用途。本发明的目的通过提取分离和制备获得的具有抗肿瘤活性的芳基二氢萘木脂素类化合物，并提供一种具有体外抗肿瘤活性的芳基二氢萘木脂素类化合物的合成方法。本发明的再一目的在于提供该具有抗肿瘤活性的芳基二氢萘木脂素类化合物在制备人宫颈癌HeLa细胞株抑制剂中的应用。

本发明的目的及解决其主要技术问题是采用以下技术方案来实现的：

本发明的具有抗肿瘤活性的芳基二氢萘木脂素类化合物，其结构通式如下：

其中：

R可以为B片段时，该芳基二氢萘木脂素类化合物为化合物1；

R可以为A片段时，该芳基二氢萘木脂素类化合物为化合物2。

上述的具有抗肿瘤活性的芳基二氢萘木脂素类化合物，具体化合物如下：

本发明的一种具有抗肿瘤活性的芳基二氢萘木脂素类化合物的制备方法，包括以下步骤：

(1)取骨碎补干燥根茎，采用95％甲醇常温提取3-5次后浓缩得浸膏，其浸膏用甲醇溶解后，经过石油醚等体积萃取、浓缩得石油醚层浸膏和甲醇层浸膏；甲醇层浸膏用水混溶成浑浊物，经过石油醚和乙酸乙酯混合溶液等体积萃取、浓缩得中等极性层浸膏；

(2)中等极性层浸膏经过200-300目硅胶柱层析，采用石油醚：乙酸乙酯＝(100：0～50:1)、二氯甲烷：乙酸乙酯＝50:1～10:1、二氯甲烷：甲醇＝20:1～2:1比例的洗脱剂梯度洗脱，点薄层板合并为22个部分：Fr1～22；

(3)对步骤2中Fr 18进行流动相为甲醇和二氯甲烷等体积的Sephadex LH-20凝胶柱层析，并经过半制备高效液相色谱纯化得到化合物1，其中半制备HPLC的流动相为甲醇:水含0.15％TFA体积比为88:12；化合物1通过半制备型HPLC用Cellulose-5手性柱分离，得到一对对映异构体(+)-1和(-)-1，其中半制备HPLC的流动相为甲醇:水体积比为90:10；

(4)对步骤2中Fr 22进行硅胶柱层析，流动相为甲醇和二氯甲烷等体积的Sephadex LH-20凝胶柱层析，并经过智能型快速制备纯化系统纯化得到化合物2，其中智能型快速制备纯化系统的流动相为甲醇:水体积比为5-100％。化合物2通过半制备型HPLC用Cellulose-5手性柱分离，得到一对对映异构体(+)-2和(-)-2，其中半制备HPLC的流动相为甲醇:水体积比为80:20；

本发明提供一种具有体外抗肿瘤活性的芳基二氢萘木脂素类化合物的合成方法，具体包括以下步骤：

(1)R选自B片段时为化合物1，合成方法为：将12-羟基月桂酸溶于甲醇，加入硫酸通过甲基化反应得到12-羟基月桂酸甲酯；12-羟基月桂酸甲酯、咖啡酸、三苯基膦和偶氮二甲酸二乙酯通过酯化反应得到骨碎补烷酸酯A；在丙酮溶液中，骨碎补烷酸酯A在六水三氯化铁条件下氧化偶联得到偶联产物1；

(2)R选自A片段时为化合物2，合成方法为：在丙酮溶液中，将分离得到的已知化合物glyceryl 12-caffeoyloxylaurate与六水三氯化铁通过氧化偶联得到偶联产物2；

本发明的具有抗肿瘤活性的芳基二氢萘木脂素类化合物在制备人宫颈癌HeLa细胞株抑制剂中的应用。本发明与现有技术相比，具有明显的有益效果，从以上技术方案可知：本发明的制备方法包括甲醇提取，浸膏浓缩，硅胶柱层析，梯度洗脱，凝胶柱层析，半制备高效液相色谱纯化，提取分离方法简易，其采用的原料容易大量获得。采用CCK-8法测试分离和合成得到的芳基二氢萘木脂素类化合物1和2对人宫颈癌HeLa细胞株的体外抗肿瘤作用，试验结果表明化合物1和2在体外对人宫颈癌HeLa细胞株具有很强的选择性抑制活性，其IC₅₀值分别为0.16±0.02μM和0.06±0.01μM。同时，(+)-1对人宫颈癌HeLa细胞株的细胞毒活性(IC₅₀0.11±0.02μM)稍强于对映异构体(-)-1对人宫颈癌HeLa细胞株的细胞毒活性(IC₅₀0.24±0.01μM)。(+)-2对人宫颈癌HeLa细胞株的细胞毒活性(IC₅₀0.02±0.00μM)明显强于对映异构体(-)-2对人宫颈癌HeLa细胞株的细胞毒活性(IC₅₀0.13±0.02μM)。因此本发明中分离和合成得到的芳基二氢萘木脂素类化合物具有体外抗肿瘤活性，因而具有制备临床肿瘤预防和治疗药物的前景，所得到的化合物为开发疗效好且毒副作用小的新型抗肿瘤药物创造了条件。

附图说明

图1：本发明化合物1和2的结构式

图2：本发明化合物1的高分辨质谱图

图3：本发明化合物2的高分辨质谱图

图4：本发明化合物1的核磁共振氢谱图

图5：本发明化合物2的核磁共振氢谱图

图6：本发明化合物1的核磁共振碳谱图

图7：本发明化合物2的核磁共振碳谱图

具体实施方式

下面结合附图和具体实施例，进一步阐述本发明。这些实施例应理解为仅用于说明本发明而不用于限制本发明的保护范围。以下结合较佳实施例，对依据本发明提出的具有抗肿瘤活性的芳基二氢萘木脂素类化合物、其提取分离制备和仿生合成方法及应用具体实施方式，详细说明如后。

实施例1：

化合物1和2的制备和结构鉴定

一种具有抗肿瘤活性的芳基二氢萘木脂素类化合物的提取分离制备方法，包括以下步骤：

(2)中等极性层浸膏经过200-300目硅胶柱层析，采用石油醚：乙酸乙酯＝(100：0～50:1)、二氯甲烷：乙酸乙酯＝50:1～10:1、二氯甲烷：甲醇＝20:1～2:1比例的洗脱剂梯度洗脱，点薄层板合并为22个部分：Fr 1～22；

(3)对步骤2中Fr 18进行流动相为甲醇和二氯甲烷等体积的Sephadex LH-20凝胶柱层析,并经过半制备高效液相色谱纯化得到化合物1，其中半制备HPLC的流动相为甲醇:水含0.15％TFA体积比为88:12；化合物1通过半制备型HPLC用Cellulose-5手性柱分离，得到一对对映异构体(+)-1和(-)-1，其中半制备HPLC的流动相为甲醇:水体积比为90:10；

所述化合物1和2的结构鉴定采用各种波谱技术：主要通过高分辨质谱，紫外光谱，红外光谱，旋光，核磁共振等数据进行综合分析，从而确定化合物1和2的结构，其结构式和理化性质如下：

化合物1：采用各种波谱技术分析化合物，其数据分析如下：Brown oil；UV(MeOH)λ_max(logε):343(3.94),314(3.96),294(3.78),252(4.14)nm；IR(KBr)v_max 3388,2925,2854,1733,1716,1652,1521,1457,1361,1243,1197cm^-1；HR-ESIMS m/z 805.4129[M+Na]⁺(calcd.for C₄₄H₆₂O₁₂Na,805.4133)；(+)-1:[α]²⁵ _D+137.2(c0.10,MeOH)；ECD(1.15mM,MeOH),λ_max(Δε)228(+2.12),253(-7.41),293(+1.50),313(-1.35),346(+5.92)nm；(–)-1:[α]²⁵ _D-138.8(c 0.10,MeOH)；ECD(1.15mM,MeOH),λ_max(Δε)223(-2.43),254(+9.07),292(-2.08),313(+1.39),348(-6.58)nm。其核磁共振氢谱、核磁共振碳谱数据如表1、2所示。

化合物2：采用各种波谱技术分析化合物，其数据分析如下：Brown oil；UV(MeOH)λ_max(logε):343(4.01),314(3.93),293(3.83),252(3.65)nm；IR(KBr)v_max 3374,2925,2854,1712,1585,1517,1245,1195cm^-1；HR-ESIMS m/z 925.4548[M+Na]⁺(calcd.forC₄₈H₇₀O₁₆Na,925.4556)；(+)-2:[α]²⁵ _D+125.0(c 0.12,MeOH)；ECD(1.11mM,MeOH),λ_max(Δε)226(+1.43),254(-5.20),293(+1.09),313(-0.80),348(+4.28)nm；(–)-2:[α]²⁵ _D-125.3(c0.12,MeOH)；ECD(1.11mM,MeOH),λ_max(Δε)225(-1.04),255(+3.91),292(-0.90),312(+0.69),344(-2.92)nm。其核磁共振氢谱、核磁共振碳谱数据如表1、2所示。

表1.化合物1和2的核磁共振氢谱数据

^a测试溶剂为CDCl₃.

^b测试溶剂为DMSO-d₆.

表2.化合物1和2的核磁共振碳谱数据

^a测试溶剂为CDCl₃.

^b测试溶剂为DMSO-d₆.

实施例2：化合物1的合成

将12-羟基月桂酸(1.0g,4.6mmol)溶于40mL甲醇中，缓慢滴入25滴硫酸溶液，加热回流4h后，将反应冷却至室温，真空旋蒸出甲醇后，混合物用乙酸乙酯(20mL)稀释，并再用蒸馏水和饱和氯化钠洗涤，无水硫酸钠干燥后真空浓缩得到粗产物。粗产物用半制备HPLC分离纯化得到白色油状产物12-羟基月桂酸甲酯0.871g，收率82％，其中半制备HPLC的流动相为甲醇:水(0.15％TFA)体积比为70:30。¹H NMR(CDCl₃,600MHz)δ3.62(s,3H),3.58(t,J＝6.7Hz,2H),2.26(t,J＝7.5Hz,2H),1.58-1.55(m,2H),1.53-1.50(m,2H),1.31-1.29(m,2H),1.26-1.20(m,12H).¹³C NMR(150MHz,CDCl₃)δ174.5,62.9,51.5,34.2,32.8,29.6,29.5×3,29.3,29.2,25.8,25.0；ESI-MS m/z 253.2[M+Na]⁺。12-羟基月桂酸甲酯(575mg,2.5mmol)、咖啡酸(0.9g,5.0mmol)和PPh₃(1.965g,7.5mmol)，加入60mL无水四氢呋喃(THF)溶解后，冰水浴下搅拌5分钟后，加入DEAD(1.825mL,7.5mmol)，室温下反应9h。加水(20mL)终止反应，混合物用乙酸乙酯(100mL)萃取，无水硫酸钠干燥后浓缩，真空旋蒸出溶剂后，用智能型快速制备纯化系统分离，半制备HPLC进一步纯化得到黄色油状产物骨碎补烷酸酯A(389.1mg,0.99mmol,收率40％)，其中智能型快速制备纯化系统的流动相为甲醇:水体积比为5-100％，半制备HPLC的流动相为甲醇:水体积比为83:17。¹H NMR(600MHz,DMSO-d₆)δ9.58(s,1H,3/4-OH),9.13(s,1H,3/4-OH),7.46(d,J＝16.0Hz,1H,H-7),7.04(d,J＝1.5Hz,1H,H-2),6.98(dd,J＝8.0,1.5Hz,1H,H-6),6.76(d,J＝8.0Hz,1H,H-5),6.25(d,J＝16.0Hz,1H,H-8),4.09(t,J＝6.5Hz,2H,H-10),3.56(s,3H,H-22),2.25(t,J＝7.0Hz,2H,H-20),1.62-1.58(m,2H,H-11),1.51-1.47(m,2H,H-19),1.33-1.31(m,2H,H-12),1.26-1.22(m,12H,H-13/14/15/16/17/18).¹³C NMR(150MHz,DMSO-d₆)δ173.3(C-21),166.6(C-9),148.4(C-4),145.6(C-3),145.0(C-7),125.5(C-1),121.3(C-6),115.7(C-5),114.8(C-2),114.0(C-8),63.7(C-10),51.1(C-22),33.3(C-20),29.0～28.5(C-13/14/15/16/17/18),28.3(C-11),25.5(C-12),24.5(C-19)；ESI-MS m/z 415.4[M+Na]⁺。将骨碎补烷酸酯A(300mg,0.77mmol)溶于15mL丙酮中，慢慢滴入FeCl₃·6H₂O(1.8g,6.67mmol)的水溶液1.5mL，5℃搅拌1.5小时后，冰水浴中反应38小时，真空旋蒸出溶剂丙酮后，混合物用乙酸乙酯(20mL)稀释，并用蒸馏水和饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥后真空浓缩得到偶联粗产物，粗产物以流动相为甲醇和二氯甲烷等体积的Sephadex LH-20凝胶柱分离，半制备HPLC进一步纯化得到棕黄色油状产物1(29.6mg,0.04mmol,10％)，其中半制备HPLC的流动相为甲醇:水(0.15％TFA)体积比为85:15。HR-ESIMS m/z 805.41284([M+Na]⁺,calcd.for C₄₄H₆₂O₁₂Na,805.41335)。其核磁共振氢谱、核磁共振碳谱数据如表1、2所示。化合物1的全合成路线如下：

实施例3：化合物2的合成

将glyceryl 12-caffeoyloxylaurate(20mg,0.04mmol)溶于1.5mL丙酮中，冰水浴中搅拌5分钟后，慢慢滴入FeCl₃·6H₂O(120mg,0.44mmol)的水溶液100μL，5℃搅拌1.5小时后，冰水浴中反应38小时，真空旋蒸出溶剂丙酮后，混合物用乙酸乙酯(10mL)稀释，并用蒸馏水和饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥后真空浓缩得到偶联粗产物，粗产物以流动相为甲醇和二氯甲烷等体积的Sephadex LH-20凝胶柱分离，半制备HPLC进一步纯化得到棕黄色油状产物2(1.8mg,10％)，其中半制备HPLC的流动相为乙腈:水体积比为55:45。HR-ESIMS m/z 925.45306([M+Na]⁺,calcd.for C₄₈H₇₀O₁₆Na,925.45561)。其核磁共振氢谱、核磁共振碳谱数据如表1、2所示。化合物2的合成路线如下：

为了进一步验证本发明合成的化合物的有益效果，通过对实施例1-3方案中获得的化合物进行抗肿瘤活性测试，具体实验如下：

1、实验方法

(1)接种细胞：用含10％胎牛血清的培养液将细胞配成单个细胞悬液，96孔板每孔接种100μL5×10⁴/mL的细胞，在5％CO₂，37℃的条件下预培养24h。

(2)加入待测样品溶液：用DMSO溶解样品，经相应基础培养基稀释样品后，吸出孔内旧培养基，每孔加入100μL样品溶液，每个样品设置不同浓度(10μM至0.001μM)，每种浓度均设6个复孔；置于培养箱培养72h。

(3)显色：吸出旧培养基，每孔直接加入稀释十倍的100μL CCK-8溶液，在37℃，5％CO₂继续培养3h(避光操作)。

(4)比色：用酶标仪测定450nm处吸光度，记录结果，EXCEL数据标准化处理后以log浓度为横坐标，细胞存活率为纵坐标绘制细胞生长曲线，应用概率单位回归分析法(ProbitAnalysis)，通过GraphPad Prism 8计算样品的IC₅₀值(计算公式：Y＝100/(1+(IC50/X)^HillSlope))，实验结果用±SD表示。

(5)阳性对照样品：盐酸阿霉素。实验结果如表3所示。

2、实验结果

表3.芳基二氢萘木脂素类化合物1和2对肿瘤细胞株抑制活性(IC₅₀±SD,μM)

^aHeLa，人宫颈癌细胞株；

^bHCT116，人结肠癌细胞株；

^cMCF-7，人乳癌MCF-7细胞株；

^dHepG2，人肝癌HepG2细胞株；

^eMV--11，人粒单核细胞白血病MV-4-11细胞株；

^fHEK293T，人胚肾HEK293T细胞株。

由表3可知，化合物1和2在体外对人宫颈癌HeLa细胞株具有很强的细胞毒活性，其IC₅₀值分别为0.16±0.02μM，0.06±0.01μM。(+)-1对人宫颈癌HeLa细胞株的细胞毒活性(IC₅₀0.11±0.02μM)稍强于对映异构体(-)-1对人宫颈癌HeLa细胞株的细胞毒活性(IC₅₀0.24±0.01μM)。(+)-2对人宫颈癌HeLa细胞株的细胞毒活性(IC₅₀0.02±0.00μM)明显强于对映异构体(-)-2对人宫颈癌HeLa细胞株的细胞毒活性(IC₅₀0.13±0.02μM)。化合物1和2对人结肠癌HCT116细胞株、人乳癌MCF-7细胞株、人肝癌HepG2细胞株、人粒单核细胞白血病MV4-11细胞株、人胚肾HEK293T细胞株抑制作用均较弱。上述试验结果证明本发明化合物1和2对人宫颈癌HeLa细胞株具有高选择性的抑制作用，为骨碎补植物的综合利用，治疗宫颈癌的药物开发方面提供了新药物和新的途径。

以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非对本发明作任何形式上的限制，任何未脱离本发明技术方案内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与修饰，均仍属于本发明技术方案的范围内。

Claims

1.一种具有抗肿瘤活性的芳基二氢萘木脂素类化合物，其结构式为（Ⅰ）式：

;

（Ⅰ）

其中：

R为

时，该芳基二氢萘木脂素类化合物为化合物1；

R为

时，该芳基二氢萘木脂素类化合物为化合物2。

2.一种如权利要求1所述的具有抗肿瘤活性的芳基二氢萘木脂素类化合物的提取分离方法，包括以下步骤：

步骤A.取骨碎补干燥根茎，采用95%甲醇常温提取3-5次后浓缩得浸膏，其浸膏用甲醇溶解后，经过石油醚等体积萃取、浓缩得石油醚层浸膏和甲醇层浸膏；甲醇层浸膏用水混溶成浑浊物，经过石油醚和乙酸乙酯混合溶液等体积萃取、浓缩得中等极性部位浸膏；

步骤B.中等极部位浸膏经过200-300目硅胶柱层析，采用石油醚：乙酸乙酯=100：0～50:1、二氯甲烷：乙酸乙酯=50:1～10:1、二氯甲烷：甲醇=20:1～2:1比例的洗脱剂梯度洗脱，点薄层板合并为22个部分：Fr 1～22；

步骤C.对步骤B中Fr 18进行流动相为甲醇和二氯甲烷等体积的Sephadex LH-20凝胶柱层析，并经过半制备高效液相色谱纯化得到化合物1，其中半制备HPLC的流动相为甲醇:水含0.15%三氟乙酸体积比为88:12；化合物1通过半制备型HPLC用Cellulose-5手性柱分离，得到一对对映异构体(+)-1和(-)-1，其中半制备HPLC的流动相为甲醇:水体积比为90:10；

步骤D.对步骤B中Fr 22进行硅胶柱层析，流动相为甲醇和二氯甲烷等体积的SephadexLH-20凝胶柱层析，并经过智能型快速制备纯化系统纯化得到化合物2，其中智能型快速制备纯化系统的流动相为甲醇:水体积比为5-100%；化合物2通过半制备型HPLC用Cellulose-5手性柱分离，得到一对对映异构体 (+)-2 和 (-)-2，其中半制备HPLC的流动相为甲醇:水体积比为80:20。

3.一种如权利要求1所述的具有抗肿瘤活性的芳基二氢萘木脂素类化合物的合成方法，包括以下步骤：

A.化合物1的合成方法为：将12-羟基月桂酸溶于甲醇，加入硫酸通过甲基化反应得到12-羟基月桂酸甲酯；12-羟基月桂酸甲酯、咖啡酸、三苯基膦和偶氮二甲酸二乙酯通过酯化反应得到骨碎补烷酸酯A；在丙酮溶液中，骨碎补烷酸酯A在六水三氯化铁条件下氧化偶联得到偶联产物1；化合物1通过半制备型HPLC用Cellulose-5手性柱分离，得到一对对映异构体(+)-1和(-)-1，其中半制备HPLC的流动相为甲醇:水体积比为90:10；

；

B.化合物2的合成方法为：在丙酮溶液中，将分离得到的已知化合物glyceryl 12-caffeoyloxylaurate与六水三氯化铁通过氧化偶联得到偶联产物2；化合物2通过半制备型HPLC用Cellulose-5手性柱分离，得到一对对映异构体 (+)-2 和 (-)-2，其中半制备HPLC的流动相为甲醇:水体积比为80:20；

。

4.一种如权利要求1所述的具有抗肿瘤活性的芳基二氢萘木脂素类化合物的应用，所述化合物在制备人宫颈癌细胞株抑制药剂中的应用。