CN111351867B - 一种测定鲁比前列酮供试品有关物质的分析方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一种测定鲁比前列酮供试品有关物质的分析方法，该方法采用正相高效液相色谱法，分离测定了鲁比前列酮化合物、式II化合物、式III化合物、式IV化合物和式V化合物，该方法避免了传统分析方法中鲁比前列酮为双峰的问题。该方法有利于有关物质校正因子的计算和有关物质的准确定量，是一种全新的有利于鲁比前列酮质量控制的分析方法。

Description

一种测定鲁比前列酮供试品有关物质的分析方法
技术领域
本发明属于药物分析领域，特别涉及鲁比前列酮有关物质的高效液相色谱分析方法。
技术背景
鲁比前列酮(化合物L)是一种局限性氯离子通道激活剂，可选择性地活化位于胃肠道上皮尖端管腔细胞膜上的2型氯离子通道，增加肠液的分泌和肠道的运动性，从而增加排便，FDA已批准鲁比前列酮用于治疗成人慢性特发性便秘，成年女性的便秘型肠易激综合征以及服用阿片类药物导致的便秘。
Figure BDA0001915993490000011
在鲁比前列酮供试品质量控制中，现有文献资料中，例如公开号为CN102020625B的专利中，公开了一种鲁比前列酮的反相高效液相色谱分析法，对鲁比前列酮供试品中有关物质进行检测。但是采用现有公开的分析方法，鲁比前列酮为双峰，不利于有关物质校正因子的计算和有关物质的准确定量。因此，为有效控制质量，需要寻找一种新的鲁比前列酮有关物质的分析方法。
发明内容
一方面，本发明提供了一种鲁比前列酮有关物质的分析方法，其特征在于：所述方法是高效液相色谱法，该方法采用正相色谱柱，流动相由正己烷、乙醇和冰醋酸组成，所述流动相中的正己烷、乙醇和冰醋酸的体积比为400～600∶30～80∶0.5～5。
在一些实施方案中，所述正相色谱柱采用极性固定相作为填料；在一些典型的实施方案中，所述正相色谱柱采用1，2-二羟基丙烷基官能团的有机硅烷键合硅胶为填料；在一些更为典型的实施方案中，所述正相色谱柱选自Li Chrospher 100Diol/Merck、WatersACQUITY BEH200SEC、Kromasil Diol或LiChrosorb Diol；在一些最为典型的实施方案中，所述正相色谱柱采用Li Chrospher 100Diol/Merck，且其规格为4.0mm×250mm，5μm。
在一些实施方案中，所述流动相中的正己烷、乙醇和冰醋酸的体积比为450～550∶35～55∶0.5～3；在一些典型的实施方案中，所述流动相中的正己烷、乙醇和冰醋酸的体积比为480∶50∶2。
在一些实施方案中，所述流动相的流速为0.7-1.5ml/min；在一些更为典型的实施方案中，所述流动相的流速流动相的流速为0.9-1.1ml/min；在一些典为0.9ml/min、1.0ml/min和1.1ml/min或其中任意两数值组成的范围；在一些最为典型的实施方案中，所述流动相的流速为1.0ml/min。
在一些实施方案中，所述分析方法在高效液相色谱仪上进行，采用二极管阵列检测器、紫外吸收检测器、示差折光检测器或蒸发光散射检测器；在一些典型的实施方案中，所述分析方法在高效液相色谱仪上进行，采用紫外吸收检测器；在一些较为典型的实施方案中，所述分析方法在高效液相色谱仪上进行，采用紫外吸收检测器，且其检测波长为292-296nm；在一些更为典型的实施方案中，所述分析方法在高效液相色谱仪上进行，采用紫外吸收检测器，且其检测波长为292nm、293nm、294nm、295nm或296nm；在一些最为典型的实施方案中，所述分析方法在高效液相色谱仪上进行，采用紫外吸收检测器，且其检测波长为294nm。
在一些实施方案中，所述正相色谱柱的柱温为25-40℃；在一些典型的实施方案中，所述正相色谱柱的柱温为28-38℃；在一些更为典型的实施方案中，所述正相色谱柱的柱温为33-37℃；在一些最为典型的实施方案中，所述正相色谱柱的柱温为35℃。
在一些实施方案中，所述分析方法采用等度洗脱或梯度洗脱；在一些典型的实施方案中，所述分析方法采用等度洗脱。
一方面，本发明提供了一种鲁比前列酮有关物质的分析方法，其特征在于：
所述分析方法是在高效液相色谱仪上进行的；
检测器是紫外吸收检测器，检测波长是294nm；
色谱柱是正相色谱柱，柱温为35℃；
流动相是由正己烷、乙醇和冰醋酸组成的混合溶液，其中，正己烷、乙醇和冰醋酸的体积比为480∶50∶2，流动相的流速为：1.0ml/min；
分别注入鲁比前列酮供试品溶液、对照溶液和系统适用性溶液；
所述系统适用性溶液包含化合物L和选自式II化合物、式III化合物、式IV化合物和式V化合物中的一种或两种以上混合物；
通过主成分自身对照法计算样品中式II化合物、式III化合物、式IV化合物和/或式V化合物的含量。
在一些实施方案中，所述的自身对照法加入校正因子进行计算；在一些实施方案中，所述的自身对照法不加入校正因子进行计算；在一些典型的实施方案中，式III化合物和式V化合物的含量计算中，加入校正因子进行计算，式II化合物和式IV化合物的含量计算中，不加入校正因子进行计算。在一些更为典型的实施方案中，式III化合物的校正因子为0.44，式V化合物的校正因子为0.5。
在一些特定的实施方案中，本发明提供了一种鲁比前列酮有关物质的分析方法，其特征在于：
(1)流动相溶液：配置正己烷、乙醇、冰醋酸的体积比为480∶50∶2的混合溶液；
(2)式II化合物定位溶液配制：取式II化合物对照品，精密称定，加流动相溶解并稀释，定容，摇匀，即得；
其中，所述的式II化合物，其结构式为：
Figure BDA0001915993490000021
(3)式III化合物定位溶液配制：取式III化合物对照品，精密称定，加流动相溶解并稀释，定容，摇匀，即得，
其中，所述的式III化合物，其结构式为：
Figure BDA0001915993490000031
(4)式IV化合物定位溶液配制：取式IV化合物对照品，精密称定，加流动相溶解并稀释，定容，摇匀，即得，
其中，所述的式IV化合物，其结构式为：
Figure BDA0001915993490000032
(5)式V化合物定位溶液配制：取式V化合物对照品，精密称定，加流动相溶解并稀释，定容，摇匀，即得，
其中，所述的式V化合物，其结构式为：
Figure BDA0001915993490000033
(6)系统适用性溶液配制：取式II化合物、式III化合物、式IV化合物、式V化合物和化合物L各适量，精密称定，加流动相溶解并稀释，定容，摇匀，即得；
(7)供试品溶液配制：取鲁比前列酮供试品适量，精密称定，用流动相溶解并稀释，定容，摇匀，即得；
(8)对照溶液配制：精密量取供试品溶液适量，用流动相定量稀释100倍作为对照溶液；
(9)供试品测定：采用Li Chrospher 100Diol/Merck，规格为4.0mm×250mm，5μm的正相色谱柱，流动相为正己烷-乙醇-冰醋酸(V∶V∶V＝480∶50∶2)的混合溶液，调整流速为1.0ml/min，采集30min，柱温为35℃；检测波长为294nm，进样量为40μl，分别量取流动相溶液、式II化合物定位溶液、式III化合物定位溶液、式IV化合物定位溶液、式V化合物定位溶液、化合物L定位溶液、系统适用性溶液﹑供试品溶液和对照溶液，分别注入液相色谱仪，记录各色谱图；
(10)含量计算：根据各色谱图，通过加校正因子或不加校正因子的主成分自身对照法计算样品中各有关物质含量：
Figure BDA0001915993490000034
其中，At为供试品溶液色谱图中式II化合物、式III化合物、式IV化合物或式V化合物各自的峰面积；f为校正因子。
在一些实施方案中，供试品溶液中，式II化合物含量不高于0.50％，优选为不高于0.10％；式III化合物含量不高于0.50％，优选为不高于0.10％；式IV化合物含量不高于0.50％，优选为不高于0.10％；式V化合物含量不高于0.50％，优选为不高于0.10％；其他未知单个杂质的含量均不高于1.0％，优选为不高于0.50％。
再一方面，本发明提供了一种式III化合物，其结构为：
Figure BDA0001915993490000041
在一些实施方案中，本发明提供了一种纯度≥90％的式III化合物；在一些典型的实施方案中，本发明提供了一种纯度≥95％的式III化合物；在一些更为典型的实施方案中，本发明提供了一种纯度≥98％的式III化合物。
再一方面，本发明还提供了一种式III化合物在鲁比前列酮的杂质检查时作为参比标示物的用途。
在一些实施方案中，本发明提供了一种纯度不低于90％的式III化合物在鲁比前列酮的杂质检查时作为参比标示物的用途；在一些典型的实施方案中，本发明提供了一种纯度不低于95％的式III化合物在鲁比前列酮的杂质检查时作为参比标示物的用途；在一些更典型的实施方案中，本发明提供了一种纯度不低于98％的式III化合物在鲁比前列酮的杂质检查时作为参比标示物的用途。
在一些实施方案中，鲁比前列酮供试品中式III化合物的含量不高于0.50％；在一些更为典型的实施方案中鲁比前列酮供试品中式III化合物的含量不高于0.10％。
另一方面，本发明提供了一种式III化合物的制备方法，其特征在于，化合物III-1经反应得到式III化合物：
Figure BDA0001915993490000042
在一些实施方案中，本发明提供了一种式III化合物的制备方法，其特征在于：化合物III-1在乙腈、冰醋酸和三氟乙酸存在下，反应得到式III化合物。
在一些实施方案中，本发明提供了一种式III化合物的制备方法，包括以下步骤：将化合物III-1、乙腈和冰醋酸加入到反应容器中，加入三氟乙酸，待反应结束后，得到式III化合物。
在一些实施方案中，本发明提供了一种式III化合物的制备方法，包括以下步骤：将化合物III-1、乙腈和冰醋酸加入到反应容器中，升温，搅拌，加入三氟乙酸，待反应结束后，萃取，洗涤，干燥，得到式III化合物。
在一些实施方案中，本发明提供了一种式III化合物的制备方法，包括以下步骤：将化合物III-1、乙腈和冰醋酸加入到反应容器中，升温，搅拌，加入三氟乙酸，反应结束后，加入水，乙酸乙酯萃取，有机相经饱和碳酸氢钠溶液洗涤，饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥后，抽滤，滤液减压浓缩，得到式III化合物。
在一些实施方案中，本发明提供了一种式III化合物的制备方法，包括以下步骤：将化合物III-1、乙腈加入到反应瓶中，搅拌溶解至澄清，加入冰醋酸室温搅拌，升温，内温升至50℃后搅拌过夜，加入三氟乙酸反应至结束，在反应瓶中加入水，并用乙酸乙酯萃取，合并有机相，用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤，再用饱和氯化钠溶液洗涤，有机相加无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压干燥，得油状物，即的化合物III。
本文中，式II化合物结构式为
Figure BDA0001915993490000051
该化合物可以通过直接购买或参照已公开的文献制备得到，所述的文献包括但不限于WO2007091697。
本文中，式III化合物结构式为
Figure BDA0001915993490000052
该化合物可以通过实施例中的制备方法制得。
本文中，式IV化合物结构式为
Figure BDA0001915993490000053
该化合物可以通过直接购买或参照已公开的文献制备得到，所述的文献包括但不限于US20130184476。
本文中，式V化合物结构式为
Figure BDA0001915993490000054
该化合物可以通过直接购买或参照已公开的文献制备得到，所述的文献包括但不限于US 20130184476、CN102050808A。
本文中，除非另有说明，所述的鲁比前列酮包括化合物L或其药学上可接受的盐；用以“供试品配置”的鲁比前列酮包括但不限于新制备或经储存的鲁比前列酮原料药、包含鲁比前列酮的药物组合物。
本文中，有关物质也表述为杂质。
本文中，适量是指在根据实验目的，各化合物的量均在其高效液相色谱仪的检测限或定量限范围内。
定位溶液浓度为10ng/ml-100mg/ml；优选为0.1μg/ml-10mg/ml；更优选为1μg/ml-2mg/ml。
系统适用性溶中化合物II、化合物III、化合物IV、化合物V的浓度为：0.1μg/ml-100mg/ml；优选为1μg/ml-10mg/ml；更优选为2μg/ml-2mg/ml。
系统适用性溶中化合物L的浓度为：1μg/ml-1000mg/ml；优选为10μg/ml-100mg/ml；更优选为50μg/ml-50mg/ml。
对照溶液中，化合物L的浓度为0.1μg/ml-10mg/ml；优选为2μg/ml-2mg/ml；更优选为5μg/ml-1mg/ml。
本发明中校正因子的计算可通过精密称取主成分(化合物L)对照品和杂质对照品各适量，分别配制成不同浓度的溶液，HPLC检测，绘制主成分浓度和杂质浓度对其峰面积的回归曲线，以主成分回归直线斜率与杂质回归直线斜率的比计算校正因子。
本发明的方法并不限于上述4个杂质，任何采用本发明方法分离测定鲁比前列酮及其杂质，均落入本发明保护范围内，特别是分离测定鲁比前列酮及本发明所述的式II化合物、式III化合物、式IV化合物、式V化合物。
本发明要解决的技术问题是提供一种能准确测定鲁比前列酮供试品有关物质含量的高效液相色谱分析方法，该检测方法中，溶剂不干扰杂质检测，方法专属性良好，且该检测方法简便﹑快速﹑准确﹑灵敏度高﹑重复性好﹑准确度好。本发明提供的方法可以准确测定鲁比前列酮供试品中上述已鉴定杂质，且主峰与相邻杂质峰的分离度≥1.2、各杂质间的分离度≥1.5。
本发明的有关物质的检测方法中，鲁比前列酮为单峰，有利于杂质校正因子的计算，能更准确地对杂质进行定量；且本方法中，各色谱峰均能有效分离，可以快速准确地进行供试品有关物质的定性及定量分析，保证鲁比前列酮质量的可控性。
附图说明
图1是系统适用性溶液的色谱图。
图2是供试品溶液的色谱图。
具体实施方式
下面的实施例可以使本专业的技术人员更全面地理解本发明，但并不因此将本发明限制在所述的实施例范围之中。
实施例1专属性试验--杂质定位
仪器：岛津/LC-20AT高效液相色谱仪
色谱柱：Li Chrospher 100Diol/Merck(4.0mm×250mm，5μm)
流动相：正己烷-乙醇-冰醋酸(480∶50∶2)的混合溶液，等度洗脱30分钟
检测波长：294nm
流速：1ml/min
柱温：35℃
进样量：40μl
杂质定位溶液配制：式II化合物、式III化合物、式IV化合物、式V化合物标品各适量，精密称定，分别加流动相溶解并稀释制成每1ml中约含20μg的溶液。
供试品溶液配制：取鲁比前列酮供试品适量，精密称定，用流动相溶解并稀释制成每1ml中约含20mg鲁比前列酮化合物的溶液，作为供试品溶液。
对照溶液配制：精密量取供试品溶液适量，用流动相定量稀释100倍，制成每1ml中约含20μg鲁比前列酮化合物的溶液，作为对照溶液。
系统适用性溶液配制：取化合物L、式II化合物、式III化合物、式IV化合物、式V化合物对照品各适量，精密称定，加流动相溶解并稀释制成每1ml中约含鲁比前列酮(化合物L)20mg，各杂质(式II化合物、式III化合物、式IV化合物、式V化合物)约为20μg的溶液，作为系统适用性溶液。
样品测定：分别量取空白溶剂﹑式II化合物定位溶液、式III化合物定位溶液、式IV化合物定位溶液、式V化合物定位溶液﹑系统适用性溶液﹑对照溶液和供试品溶液各40μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。
结果：空白溶剂对测定无干扰；各化合物保留时间及分离度见下表。鲁比前列酮与相邻杂质以及各杂质间的分离度均符合要求。
名称 保留时间(min) 与相邻杂质峰的分离度
式V化合物 3.467 /
式II化合物 5.484 9.5
式IV化合物 5.921 1.8
式III化合物 7.506 5.2
未知化合物 11.609 10.8
化合物L(鲁比前列酮) 12.495 1.6
系统适用性溶液色谱图见图1，供试品溶液色谱图见图2，测定结果表明，按加校正因子自身对照法计算各杂质的含量，杂质式V化合物、式II化合物、式IV化合物均未检出(低于0.01％)，式III化合物含量为0.01％，未知化合物含量为0.26％，鲁比前列酮(化合物L)纯度为99.72％。
实施例2耐用性试验
在实施例1的检测色谱条件的基础上分别考察当流动相的比例、流速、检测波长、柱温条件发生微小变化时，供试品溶液有关物质的检出情况，考察检测方法的耐用性。
溶液配制及测定方法参照实施例1，各色谱条件和检测结果见下表所示：
Figure BDA0001915993490000081
注：“乙醇-2％，其余条件均不变”是指流动相变更为：正己烷-乙醇-冰醋酸(480∶49∶2)，其余检测条件不变；“乙醇+2％，其余条件均不变”是指流动相变更为：正己烷-乙醇-冰醋酸(480∶51∶2)，其余检测条件不变。
以上结果表明，改变乙醇比例，柱温，流速及波长条件，有关物质测定结果没有明显改变。
实施例3检测限与定量限
取鲁比前列酮对照品和各杂质对照品溶液用流动相溶解并逐级稀释，分别进样40μl，按信噪比3∶1时的样品浓度即为检测限浓度。结果如下：式II化合物的检测限为5.8ng，式III化合物的检测限为3ng、杂质式IV化合物的检测限为6.0ng、式V化合物的检测限为1.8ng、化合物L(鲁比前列酮)12.0ng。
取鲁比前列酮对照品和各杂质对照品溶液用流动相溶解并逐级稀释，分别进样40μl，按信噪比大于10∶1时的样品浓度即为定量限浓度。结果如下：式II化合物的定量限为40.2ng，式III化合物的检测限为7ng、杂质式IV化合物的检测限为19.9ng、式V化合物的检测限为5.9ng、化合物L(鲁比前列酮)40.2ng。
实施例4专属性试验--破坏试验
对鲁比前列酮供试品进行破坏降解试验，考察所产生的降解产物与主峰及降解产物之间的分离情况以验证本方法专属性是否达到要求。
未破坏：取本品约20mg，精密称定，置1.0ml量瓶中，加适量溶剂超声使溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取40μl注入液相色谱仪，记录色谱图。同时做空白试验。
氧化破坏：取本品约20mg，精密称定，置1.0ml量瓶中，加3％过氧化氢溶液0.1ml，5小时后，加溶剂稀释至刻度，摇匀，精密量取40μl注入液相色谱仪，记录色谱图。同时做空白试验。
溶液光照破坏：取本品约20mg，精密称定，置1.0ml量瓶中，加溶剂稀释至刻度，置照度为6000lx、近紫外90μW/cm2、25℃光照仪中照射7天，取出，放至室温，加溶剂稀释至刻度，摇匀，精密量取40μl注入液相色谱仪，记录色谱图。
固体光照破坏：取本品约20mg，精密称定，置1.0ml量瓶中，置照度为6000lx、近紫外90μW/cm2、25℃光照仪中照射7天，取出，放至室温，加溶剂稀释至刻度，摇匀，精密量取40μl注入液相色谱仪，记录色谱图。
溶液高温破坏：取本品约20mg，精密称定，置1.0ml量瓶中，加溶剂稀释至刻度，置60℃烘箱中照射17小时，取出，放至室温，加溶剂稀释至刻度，摇匀，精密量取40μl注入液相色谱仪，记录色谱图。
固体高温破坏：取本品约20mg，精密称定，置1.0ml量瓶中，置60℃烘箱中照射17小时，取出，放至室温，加溶剂稀释至刻度，摇匀，精密量取40μl注入液相色谱仪，记录色谱图。
高湿破坏：取本品约20mg，精密称定，置1.0ml量瓶中，置92.5％饱和KNO3中，放置7天后，取出，放至室温，加溶剂稀释至刻度，摇匀，精密量取40μl注入液相色谱仪，记录色谱图。
测定：按照实施例1的色谱条件，分别取上述样品溶液40μl，注入液相色谱仪，记录色谱图，结果见下表所示：
Figure BDA0001915993490000091
结果表明，本品在高温和光照条件下，稳定性较差，溶液高温破坏和固体高温破坏，杂质式III化合物含量明显增加，且有较大降解杂质产生；溶液光照破坏，杂质式III化合物含量稍有增加，且有较大降解杂质产生；其它破坏条件下，无明显降解杂质产生。各破坏条件下，主峰与相邻色谱峰的分离度均符合要求，降解产物与主峰及降解产物之间均能够完全分离，说明本方法专属性好。
实施例6化合物III的制备与确认
将2.0g化合物L与15ml乙腈加入到50ml反应瓶中，搅拌溶解至澄清，加入24g冰醋酸室温搅拌，升温40min，内温升至50℃后搅拌过夜，停止加热，加入1.5ml三氟乙酸反应至结束，在反应瓶中加入水，并用乙酸乙酯萃取2次，合并有机相，用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤一次，再用饱和氯化钠溶液洗涤一次，有机相加无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压干燥，得油状物0.6g，即的化合物III。(HPLC＞97.0％)
1H-NMR：δ7.57(m,1H)，δ6.16(m,1H)，δ2.77(t,2H)，δ2.67(m,1H)，δ2.34(t,2H)，δ1.83-2.01(m,
5H)，δ1.59-1.73(m,3H)，δ1.34-1.45(m,11H)，δ0.96(t,3H)。
13C-NMR：δ211.6，δ200.5(t)，δ179.6，δ165.5，δ133.6，δ118.3(t)，δ51.2，δ46.6，δ33.9，δ33.6，δ32.1(t)，δ31.0，δ29.3，δ28.7，δ26.8，δ26.7，δ24.5，δ23.2(t)，δ22.3，δ13.7。
质谱：[M+H]+373.2。

Claims (18)

1.一种鲁比前列酮有关物质的分析方法，其特征在于：所述方法是高效液相色谱法，检测器是紫外吸收检测器，检测波长是292～296nm，柱温为33～37℃，该方法采用正相色谱柱Li Chrospher 100Diol/Merck，流动相由正己烷、乙醇和冰醋酸组成，所述流动相中的正己烷、乙醇和冰醋酸的体积比为480：49～51：2，流动相的流速为0.9～1.1ml/min，采用等度洗脱，所述有关物质选自式II化合物、式III化合物、式IV化合物或式V化合物，结构如下，
Figure FDA0003063950720000011
2.如权利要求1所述的分析方法，其特征在于：所述Li Chrospher 100Diol/Merck的规格为4.0mm×250mm，5μm。
3.如权利要求1所述的分析方法，其特征在于：所述流动相中的正己烷、乙醇和冰醋酸的体积比为480:50:2。
4.如权利要求1所述的分析方法，其特征在于：所述流动相的流速为1.0ml/min。
5.如权利要求1所述的分析方法，其特征在于：所述分析方法在高效液相色谱仪上进行，采用紫外吸收检测器，且其检测波长为292nm、293nm、294nm、295nm或296nm。
6.如权利要求1所述的分析方法，其特征在于：所述分析方法在高效液相色谱仪上进行，采用紫外吸收检测器，且其检测波长为294nm。
7.如权利要求1所述的分析方法，其特征在于：所述正相色谱柱的柱温为35℃。
8.一种鲁比前列酮有关物质的分析方法，其特征在于：
所述分析方法是在高效液相色谱仪上进行的；检测器是紫外吸收检测器，检测波长是294nm；色谱柱是正相色谱柱Li Chrospher 100Diol/Merck，柱温为35℃；流动相是由正己烷、乙醇和冰醋酸组成的混合溶液，其中，正己烷、乙醇和冰醋酸的体积比为480:50:2，流动相的流速为：1.0ml/min；分别注入鲁比前列酮供试品溶液、对照溶液和系统适用性溶液；所述系统适用性溶液包含化合物L和选自式II化合物、式III化合物、式IV化合物和式V化合物中的一种或两种以上混合物；通过主成分自身对照法计算样品中式II化合物、式III化合物、式IV化合物和/或式V化合物的含量；所述化合物L、式II化合物、式III化合物、式IV化合物和式V化合物的结构如下，
Figure FDA0003063950720000021
9.如权利要求8所述的分析方法，其特征在于：
所述的自身对照法加入校正因子进行计算或不加入校正因子进行计算。
10.如权利要求9所述的分析方法，其特征在于：式III化合物和式V化合物的含量计算中，加入校正因子进行计算，式II化合物和式IV化合物的含量计算中，不加入校正因子进行计算。
11.如权利要求10所述的分析方法，其特征在于：式III化合物的校正因子为0.44，式V化合物的矫正因子为0.5。
12.一种鲁比前列酮有关物质的分析方法，其特征在于：
(1)流动相溶液：配置正己烷、乙醇、冰醋酸的体积比为480:50:2的混合溶液；
(2)式II化合物定位溶液配制：取式II化合物对照品，精密称定，加流动相溶解并稀释，定容，摇匀，即得；
其中，所述的式II化合物，其结构式为：
Figure FDA0003063950720000022
(3)式III化合物定位溶液配制：取式III化合物对照品，精密称定，加流动相溶解并稀释，定容，摇匀，即得，
其中，所述的式III化合物，其结构式为：
Figure FDA0003063950720000023
(4)式IV化合物定位溶液配制：取式IV化合物对照品，精密称定，加流动相溶解并稀释，定容，摇匀，即得，
其中，所述的式IV化合物，其结构式为：
Figure FDA0003063950720000031
(5)式V化合物定位溶液配制：取式V化合物对照品，精密称定，加流动相溶解并稀释，定容，摇匀，即得，
其中，所述的式V化合物，其结构式为：
Figure FDA0003063950720000032
(6)系统适用性溶液配制：取式II化合物、式III化合物、式IV化合物、式V化合物和化合物L各适量，精密称定，加流动相溶解并稀释，定容，摇匀，即得；
(7)供试品溶液配制：取鲁比前列酮供试品适量，精密称定，用流动相溶解并稀释，定容，摇匀，即得；
(8)对照溶液配制：精密量取供试品溶液适量，用流动相定量稀释100倍作为对照溶液；
(9)供试品测定：采用Li Chrospher 100Diol/Merck，规格为4.0mm×250mm，5μm的正相色谱柱，流动相为正己烷-乙醇-冰醋酸的混合溶液，其体积比为480:50:2，调整流速为1.0ml/min，采集30min，柱温为35℃；检测波长为294nm，进样量为40μl，分别量取流动相溶液、式II化合物定位溶液、式III化合物定位溶液、式IV化合物定位溶液、式V化合物定位溶液、化合物L定位溶液、系统适用性溶液﹑供试品溶液和对照溶液，分别注入液相色谱仪，记录各色谱图；
(10)含量计算：根据各色谱图，通过加校正因子或不加校正因子的主成分自身对照法计算样品中各有关物质含量：
Figure FDA0003063950720000033
其中，At为供试品溶液色谱图中式II化合物、式III化合物、式IV化合物或式V化合物各自的峰面积；f为校正因子。
13.根据权利要求12所述的分析方法，其特征在于，供试品溶液中，式II化合物含量不高于0.50％，式III化合物含量不高于0.50％，式IV化合物含量不高于0.50％，式V化合物含量不高于0.50％，其他未知单个杂质的含量均不高于1.0％。
14.根据权利要求13所述的分析方法，其特征在于，供试品溶液中，式II化合物含量不高于0.10％。
15.根据权利要求13所述的分析方法，其特征在于，供试品溶液中，式III化合物含量不高于0.10％。
16.根据权利要求13所述的分析方法，其特征在于，供试品溶液中，式IV化合物含量不高于0.10％。
17.根据权利要求13所述的分析方法，其特征在于，供试品溶液中，式V化合物含量不高于0.10％。
18.根据权利要求13所述的分析方法，其特征在于，供试品溶液中，其他未知单个杂质的含量均不高于0.50％。
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CN112229923B (zh) * 2020-09-30 2022-11-11 东北制药集团股份有限公司 一种采用高效液相色谱检测15-酮及其有关物质的方法

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JP4648340B2 (ja) * 2006-02-07 2011-03-09 株式会社アールテック・ウエノ １５−ケトプロスタグランジンｅ誘導体の製造法
CN102020625B (zh) * 2009-09-22 2013-04-17 上海天伟生物制药有限公司 一种高纯度的鲁比前列酮及其制备方法和用途
CN102050808B (zh) * 2009-11-02 2014-03-12 上海天伟生物制药有限公司 一种前列腺素中间体的制备方法
WO2011054087A1 (en) * 2009-11-03 2011-05-12 Bernard Charles Sherman Stable pharmaceutical formulations comprising lubiprostone
CN102101835B (zh) * 2009-12-16 2015-07-22 武汉启瑞药业有限公司 前列腺素衍生物及其中间体的制备方法
US20130184476A1 (en) * 2011-07-13 2013-07-18 Mark Jackson Preparation of lubiprostone
CN104140410B (zh) * 2013-05-09 2017-12-15 江苏豪森药业集团有限公司 鲁比前列酮的制备方法
CN104072433A (zh) * 2014-07-16 2014-10-01 南京正大天晴制药有限公司 一种缬沙坦的水解杂质化合物及其制备方法、检测方法和用途
CN105985309B (zh) * 2015-02-06 2020-05-05 南京正大天晴制药有限公司 一种高纯度鲁比前列酮化合物的制备方法
CN108503619A (zh) * 2017-02-23 2018-09-07 广州楷模生物科技有限公司 1r,2r,3r-取代环戊酮类化合物的合成方法

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