CN111304317B - 一种用于人葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症的基因突变检测试剂盒 - Google Patents
一种用于人葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症的基因突变检测试剂盒 Download PDFInfo
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Abstract
本发明涉及一种用于人葡萄糖‑6‑磷酸脱氢酶缺乏症的基因突变检测试剂盒,包括如SEQ NO.1~382所示序列的探针。本发明对中国地区500个G6PD基因阳性突变位点进行分布分析,并结合人类基因突变数据库(Human Gene Mutation Database,HGMD)数据库及欧美地区基因突变热点数据,更全面地总结了G6PD基因突变热点,以解决近99%的G6PD缺乏症患者遗传突变检测问题,实现G6PD缺乏症疾病遗传诊断的快速和有效进行。
Description
技术领域
本发明属于基因突变检测领域,特别涉及一种用于人葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症的基因突变检测试剂盒。
背景技术
目前,人葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)缺乏症诊断的方法包括酶学诊断和基因诊断两大类,其中G6PD酶活性检测方法因其具有操作简单、方便快捷、价格低廉等诸多优点已在临床诊断和筛查中被广泛应用,但对于不同基因突变所导致的G6PD缺乏症,酶学诊断本身存在方法学的局限性,且由于G6PD不稳定,酶活性测定容易受到标本采集、递送时间、检测方法等因素的影响,因此假阳性率极高。
现有的基因诊断方法可较好的解决G6PD缺乏症女性杂合子检出的问题,但是当前常规的基因诊断方法也普遍存在操作繁琐、通量低、易存在假阴性或假阳性现象而导致漏诊、误诊等缺点,均无法成为临床基因诊断的最佳选择。例如,等位基因特异性寡核苷酸探针杂交法需要较为繁琐的聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)后杂交盒洗脱等步骤,杂交及洗脱条件的控制给该方法带来众多误诊及漏诊的可能;多重等位基因特异性PCR法经济、简便,但该方法对引物设计要求较高,且在PCR反应体系中,多对引物可能存在相互干扰,会对结果产生影响;高分辨率熔解曲线法操作简便,但对于不同突变位点的检测,往往需要多管操作,通量较低,而单管多位点检测结果较难判读,临床应用受限。CN103695554A等开发了针对G6PD缺乏症诊断用基因检测膜条及相关引物,针对G6PD缺乏症已报道的十余个常见突变位点进行检测,但位点覆盖不够全面,可能会造成漏诊,不利于该疾病的遗传筛查及提前干预等。CN104450925A等利用荧光定量PCR,设计覆盖多数G6PD突变人群的常见位点引物及探针,以对其进行单独分型,但仍存在缺乏标准化程序、仪器规格和试剂选择等的多样性使部分结果重复性差等不足,给其广泛开展带来阻碍。CN104450925A等则利用PCR结合一代测序的方法,扩增G6PD基因所有外显子并进行直接测序,以提高患者及携带者的检出率,但该方法操作复杂,许多外显子扩增效果不佳、存在杂峰或峰图不完整、质量差,较难适用于临床的常规检测。因此,本领域仍然需寻求一种新的G6PD缺乏症疾病遗传检测技术。
发明内容
本发明针对现有各项诊断方法的不足,提供了一种用于人葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症的基因突变检测试剂盒,可弥补现有酶学诊断方法对G6PD缺乏症检测中假阳性率高的缺陷,提高卫生经济学效益。
本发明提供了一种用于人葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症的基因突变检测试剂盒,包括如SEQ NO.1~382所示序列的探针。
进一步的,所述探针与含有某个特异性位点的DNA片段杂交。
进一步的,所述试剂盒还包括变性混合液、扩增混合液、片段化混合液、沉淀混合液和杂交混合液。
进一步的,所述试剂盒在GeneTitan MC中进行检测。
进一步的,所述GeneTitan MC检测采用的试剂包括染料混合物、稳定混合物和连接混合物。
本发明提高了该疾病检测的标准化程度并覆盖更多可能的突变位点,提高诊断准确率,为新生儿筛查和遗传干预提供更为有效的诊断方法,提高人口质量。
有益效果
本发明通过设计合成捕获探针,可更全面的富集中国人群常见G6PD基因突变型,针对G6PD缺乏症分子遗传特点进行高质量和高效率的遗传学诊断。一方面可弥补现有酶学诊断方法对G6PD缺乏症检测中假阳性率高的缺陷,减少了不必要的受试者召回并利于减轻病人及家属的精神负担,提高卫生经济学效益;另一方面通过更全面的G6PD基因突变热点分析,可解决更多的G6PD缺乏症患者(近99%)遗传突变检测问题,实现G6PD缺乏症疾病遗传诊断的快速和有效进行。
附图说明
图1为本发明的检测流程图。
图2为实施例1中的部分样本DNA片段化结果。
图3为实施例1中的数据质控结果。
具体实施方式
下面结合具体实施例,进一步阐述本发明。应理解,这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。此外应理解,在阅读了本发明讲授的内容之后,本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改,这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。
实施例1
一、合成芯片
通过数据库筛选和人群频率的计算,顺位挑选382个位点,并将这些位点合成相应探针生产成芯片(见表1,部分探针重复设计,是为了在芯片不同位置放置相同的探针,从而增加某些位点的结果准确度)。
表1位点编号及序列信息(染色体位置:Xq28)
二、采集样品
经G6PD患者知情同意,获准后采集外周血,共计25例,包括男性患者24例,女性患者1例,均为SNV患者,作为验证样品。
三、样品制备与检测反应
25例验证样品先进行DNA抽提,通过凝胶电泳,Nanodrop等进行质控,确保每个DNA样品胶图清晰可见且均无降解,光密度(Optical Density,OD)260/280比值介于1.8至2.0之间,OD 260/230比值大于1.5(不满足任一条件的样品需进行纯化等处理)。质检合格的样品先进行全基因组扩增,扩增产物再经过酶切、沉淀回收与重悬等步骤得到DNA片段(片段长度为25-125bp,全基因组分布),重悬液中加入杂交反应试剂,转移至杂交板然后上机进行杂交。杂交结束后再加入配制好的荧光试剂进行连接反应,经过冲洗与成像处理后,即完成检测反应(图1)。
具体制备步骤:
第一步:DNA扩增
试剂:Module 1,–20℃,P/N 901711(Axiom 2.0 Reagent Kit)
1.按照以下体系配置变性混合液(Denaturation Master Mix):
成分 | 1× |
Axiom 2.0Denat Soln 10X | 2μl |
Axiom Water | 18μl |
2.取20μl DNA样本(5ng/μL),分别加入20μl上述变性混合液,室温孵育10min。
3.立即加入130μl Axiom 2.0Neutral Soln,盖好密封膜震荡混匀离心。
4.按照以下体系配置扩增混合液(Amplification Master Mix):
成分 | 1× |
Axiom 2.0Amp Soln | 225μl |
Axiom 2.0Amp Enzyme | 5μl |
旋涡混匀扩增混合液,而后转管2次,再次旋涡混匀。
5.将230μl扩增混合液沿管壁缓慢加入样本板中,切忌反复上下吹打,盖好密封膜,震荡混匀2次,1000rpm离心1min。6.将上述样本置于37℃孵育箱中23±1h。
第二步:片段化和沉淀
试剂:Module 2-1,–20℃,P/N 901528;Module 2-2,2–8℃,P/N 901529(Axiom2.0 Reagent Kit)
1.将样本置于65℃孵育箱中孵育20min,而后转移至37℃孵育箱中继续孵育45min。
2.按照以下体系配置片段化混合液(Fragmentation Master Mix):
成分 | 1× |
Axiom 10X Frag Buffer | 45.7μl |
Axiom Frag Diluent | 10.3μl |
Axiom Frag Enzyme | 1.0μl |
3.小心将上述扩增后样本由37℃孵育箱转移至室温,加入57μl片段化混合液,盖好密封膜,震荡混匀2次离心。
4.将样本迅速转移至37℃孵育箱中孵育30min,而后加入19μl终止液(室温),盖好密封膜震荡混匀离心。
5.按照以下体系配置沉淀混合液(Precipitation Master Mix):
成分 | 1× |
Axiom Precip Soln 1 | 238μl |
Axiom Precip Soln 2 | 2μl |
6.在室温环境下加入240μl沉淀混合液,盖好密封膜震荡混匀离心。
7.加入600μl异丙醇,用移液器上下混匀以保证充分混合,盖好密封膜,并将样本转移至-20℃环境中过夜(16-24h)。
第三步:干燥、重悬及质量控制
试剂:Module 2-1,–20℃,P/N 901528;Module 2-2,2–8℃,P/N 901529(Axiom2.0 Reagent Kit)
InvitrogenTMTrackIt Cyan/Orange Loading Buffer(Invitrogen P/N 10482-028)
25bp Invitrogen Ladder(Invitrogen P/N 10488-022)
Nuclease free water,ultrapure MB Grade(USB,P/N 71786)
Invitrogen E-GelTM48 4%agarose gels G8008-04
1.将样本从-20℃中取出,4℃3200×g离心40min。
2.将密封膜小心揭下,并将样本倒置于废液桶上以使液体流出,而后轻轻倒置于无尘纸上5min。
3.将样本正置于37℃杂交炉中20min晾干。
4.在样本中加入35μl Axiom Resusp Buffer,盖好密封膜,置于震荡仪中(TiterPlate Shakers-4PL速度9震荡10min或Jitterbug速度7震荡10min)。
5.按照以下体系配置杂交混合液(Hybridization Master Mix):
成分 | 1× |
Axiom Hyb Buffer | 70.5μl |
Axiom Hyb Soln 1 | 0.5μl |
Axiom Hyb Soln 2 | 9μl |
6.确认5中样本完全重悬后,加入80μl杂交混合液,盖好密封膜震荡混匀离心。
7.取33μl无核酸酶水至PCR板中,并混入3μl上述6中混合液,置备为QC稀释液,盖好密封膜震荡混匀离心。
8.取10μl上述QC稀释液样本至OD板中(96-well UV Star plate,E&K ScientificP/N 25801),加90μl无核酸酶水至上述OD板中,上下吹打混匀,读取吸光值。
9.取120μl 1000倍稀释胶上样染料至胶样本板中,并混入3μl上述QC稀释板样本,盖好密封膜震荡混匀离心,跑胶进行质量控制。
第四步:变性和杂交
试剂:Module 3,P/N 901472(Axiom 2.0 Reagent Kit)
杂交盘,P/N 901606(Axiom GeneTitanTMConsumables Kit)
1.将杂交后的混合液置于室温中5min,短暂震荡后,1000rpm离心30s,并置于室温中至少25min。
2.将上述杂交板放置于PCR仪中,开始变性程序(Axiom 2.0Denature program):95℃ for 10min;48℃ for 3min;48℃ for hold。
3.变性程序结束后,取出杂交板,放置于预热96孔金属槽中。用移液器小心将105μl变性杂交液转移至杂交盘中,切勿产生气泡。
4.将上述杂交板载入GeneTitan MC Instrument仪器中,持续杂交23.5h-24h。
第五步:GenetitanTM MC仪器试剂准备
试剂:Module 4-1,–20℃,P/N 901278;Module 4-2,2-8℃,P/N 901276
仪器:GeneTitan MC Instrument
耗材:扫描盘(1)、染料盘(5)-Axiom GeneTitanTMConsumables Kit(P/N 901606)
1.按照以下体系配置染料混合物1(Stain 1Master Mix):
成分 | 1× |
Axiom Wash A | 201.6μl |
Axiom Stain Buffer | 4.2μl |
Axiom Stain 1-A | 2.1μl |
Axiom Stain 1-B | 2.1μl |
轻轻翻转试管10次以混合,避光置于冰上。
2.按照以下体系配置染料混合物2(Stain 2Master Mix):
成分 | 1× |
Axiom Wash A | 100.8μl |
Axiom Stain Buffer | 2.1μl |
Axiom Stain 2-A | 1.05μl |
Axiom Stain 2-B | 1.05μl |
轻轻翻转试管10次以混合,避光置于冰上。
3.按照以下体系配置稳定混合物(Stabilization Master Mix):
成分 | 1× |
Axiom Water | 93.19μl |
Axiom Stabilize Diluent | 10.50μl |
Axiom Stabilize Soln | 1.31μl |
最大速度旋涡混匀3s,置于冰上。
4.按照以下体系配置连接混合物(Ligation Master Mix):
Stage 1
成分 | 1× |
Axiom Ligate Buffer | 66.15μl |
Axiom Ligate Soln 1 | 13.12μl |
Axiom Ligate Soln 2 | 3.73μl |
最大速度旋涡混匀3s,置于冰上。
5.将Axiom Ligation Enzyme从-20℃冰箱中取出,置于冷却块中冷却至20℃。而后按下列顺序准备连接混合物(Ligation Master Mix):
Stage 2
成分 | 1× |
Ligation Master Mix from Stage 1 | 82.42μl |
Axiom Probe Mix 1 | 10.5μl |
Axiom Probe Mix 2 | 10.5μl |
Axiom Ligate Enzyme | 1.58μl |
轻轻翻转试管10次以混合,避光置于冰上。
6.将上述混合物分别加入对应的反应盘中:其中染料混合物1染料盘2个(每孔105μl)、染料混合物2染料盘1个(每孔105μl)、稳定混合物染料盘1个(每孔105μl)、连接混合物染料盘1个(每孔105μl),避免产生气泡。
7.将上述反应盘用对应盖子覆盖,而后直接载入GeneTitan MC仪器中。
8.将扫描盘的顶盖移去,每孔中加入150μl Axiom Hold Buffer,避免接触扫描盘底部。将盖子的切口角对准扫描盘的切口边缘,盖住扫描盘,而后放置于工作台顶部。
四、数据分析与注释
反应完成后会得到每块芯片板的原始荧光信号数据,利用软件(Axiom AnalysisSuite)进行芯片板质控、单个样品质控、探针序列比对、样品比对和结果验证即可得到相应样品的位点信息的结果文件。分析原理如下,每块芯片板上含有96张芯片,每张芯片均固定好定制探针,这些探针能特异性的与含有某个位点的DNA片段杂交。共有四种类型的双色报告探针,其一端分别携带碱基A、T、G、C,其中A/T探针另一端携带一种荧光基团(别藻青蛋白),G/C探针另一端携带另一种颜色荧光基团(藻红蛋白)。杂交结束,再利用DNA连接酶将报告探针与杂交序列进行连接反应,进而通过酶反应促使两种基团发出荧光信号,机器能捕捉并区分这些荧光信号并记录。结果文件包含每个样品得到的突变位点,这些位点需要进一步的注释分析,包括突变评级和医学解读,方可得到的明确的位点信息。
临床医生会联合分析注释信息与样品患者的表型数据,最终判断是否符合G6PD缺乏症特征,从而给出最终诊断结果。
五、其他说明
制备过程中,一些操作行为如移液、试管、混匀器、定量等涉及到的耗材为本领域常用物品,常见操作手段、血液样本DNA提取及质检步骤等均是本领域的公共知识,不再赘述。
六、实验结果
1.G6PD缺乏症现有酶学诊断方法容易受到标本采集、递送时间、检测方法等因素的影响,假阳性率约为6.5%;而基于PCR的检测方法过于依赖引物设计,且本身稳定性不是很好,检测位点一般只有十几个,且存在约3%的假阳性率;本发明单次检测具备高通量,结果更准确,假阳性率极低,操作简单等优点。
2.本发明为了减少人工误差和提高通量,在设备采购与操作上尽量以自动化和多样品操作为主。主要包括自动化高通量基因芯片分析系统、芯片及自动解读软件,通过本套设备流程,可以实现每周(5个工作日)8块芯片板的通量,并能显著提高结果的可靠性。
3.生产成型的芯片需要经过阳性样品的验证,对阳性样品信息,质控结果和结果准确性进行汇总分析:
验证样品位点信息(转录本:NM_001042351.2):
部分样本DNA片段化结果如图2所示,数据质控结果如图3所示。
数据分析及解读结果:
注:Affected表示检测到突变,且有影响;Carrier表示携带突变无明显影响。
综上,本发明产品对25例阳性G6PD突变位点100%验证,所设计的探针既能检测半合子样本,也能检测出携带者样本,充分说明了本发明的通用性、有效性。
SEQUENCE LISTING
<110> 上海源庆生物科技有限公司
<120> 一种用于人葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症的基因突变检测试剂盒
<130> 1
<160> 382
<170> PatentIn version 3.3
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ggccatcccg ga 72
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<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 25
cactctcttc atcagctcgt ctgcctccgt ggggccttcg gctggagagt gacgggtgga 60
ggagaggcat ga 72
<210> 26
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 26
cactctcttc atcagctcgt ctgcctccgt ggggccttcg gctggagagt gacgggtgga 60
ggagaggcat ga 72
<210> 27
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 27
ccttgcgctc gttcagggcc ttgccgcagc gcaggagtga agggcacccc tacgtggcgg 60
aaagggcagc ct 72
<210> 28
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 28
ccttgcgctc gttcagggcc ttgccgcagc gcaggagtga agggcacccc tacgtggcgg 60
aaagggcagc ct 72
<210> 29
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 29
tcaccagctc gttgcgcttg cactgctggt ggaagagtgt cgccggccac atcatggaac 60
tgcagcctca cc 72
<210> 30
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 30
tcaccagctc gttgcgcttg cactgctggt ggaagagtgt cgccggccac atcatggaac 60
tgcagcctca cc 72
<210> 31
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 31
agattggggc ctgggagata ctcaccgatg cacccagtga tgatgaatat gtgtgtatcc 60
gactgatgga ag 72
<210> 32
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 32
tcctcggggt tgaagaacat gcccggcttc ttggtctatc atcttggtgt acacggcctc 60
gttgggctgc ac 72
<210> 33
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 33
ccctaccttc tcatcacgga cgtcatctga gttggatgga ggcgggcttc tccatggcca 60
ccagacacag ca 72
<210> 34
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 34
ccctaccttc tcatcacgga cgtcatctga gttggatgga ggcgggcttc tccatggcca 60
ccagacacag ca 72
<210> 35
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 35
ctcgccctct ccatcggggt tccccacgta ctggcctcag gaccacattg ttggcctgca 60
cctctgagat gc 72
<210> 36
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 36
ctaccttctc atcacggacg tcatctgagt tggtgagagg cgggcttctc catggccacc 60
agacacagca tc 72
<210> 37
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 37
ctaccttctc atcacggacg tcatctgagt tggtgagagg cgggcttctc catggccacc 60
agacacagca tc 72
<210> 38
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 38
aatctggtgc agcagtgggg tgaaaatacg ccaggctctc acggagctcg tcgctgaggg 60
gacatggtat gg 72
<210> 39
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 39
accctttggt ggcctcgccc tctccatcgg ggttcctcca cgtactggcc caggaccaca 60
ttgttggcct gc 72
<210> 40
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 40
accctttggt ggcctcgccc tctccatcgg ggttcctcca cgtactggcc caggaccaca 60
ttgttggcct gc 72
<210> 41
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 41
gtagacggtc gggggcaagg ccaggtagaa gaggcaggtt ggcctgtgac cccaggtgga 60
gggcattcat gt 72
<210> 42
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 42
cacgatgaag gtgttttcgg gcagaaggcc atcccaggaa cagccacctg agggcagggc 60
acagctgtaa cc 72
<210> 43
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 43
cacgatgaag gtgttttcgg gcagaaggcc atcccaggaa cagccacctg agggcagggc 60
acagctgtaa cc 72
<210> 44
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 44
catgcaggac tcgtgaatgt tcttggtgac ggcctctgta gacggtcggg ggcaaggcca 60
ggtagaagag gc 72
<210> 45
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 45
caccacccac cttgaagaag ggctcactct gtttgctgga tgtcagccac tgtgaggcgg 60
gaacgggcat ag 72
<210> 46
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 46
caccacccac cttgaagaag ggctcactct gtttgctgga tgtcagccac tgtgaggcgg 60
gaacgggcat ag 72
<210> 47
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 47
gcaggtccct cccgaagggc ttctccacga tgatgctggt tccagcctct gctgggagcc 60
cggagctgcg tt 72
<210> 48
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 48
ggcatcgccc tggaaaagct cttcccgcag gatccctgca cacctgggtc cggctcaggg 60
ccacctgctc tg 72
<210> 49
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 49
caggatgagg cgctcatagg cgtcagggag cttcactgtt ctgtgaggga gagagtgtct 60
tgctgatgcc ac 72
<210> 50
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 50
agggctcact ctgtttgcgg atgtcagcca ctgtgagggc gggaacgggc atagcccacg 60
atgaaggtgt tt 72
<210> 51
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 51
agggctcact ctgtttgcgg atgtcagcca ctgtgagggc gggaacgggc atagcccacg 60
atgaaggtgt tt 72
<210> 52
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 52
tgaagaacat gcccggcttc ttggtcatca tcttggttgt acacggcctc gttgggctgc 60
acgcggatca cc 72
<210> 53
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 53
tgaagaacat gcccggcttc ttggtcatca tcttggttgt acacggcctc gttgggctgc 60
acgcggatca cc 72
<210> 54
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 54
tcagggcctt gccgcagcgc aggatgaagg gcaccaccta cgtggcggaa agggcagcct 60
cagcaccagc tc 72
<210> 55
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 55
tcagggcctt gccgcagcgc aggatgaagg gcaccaccta cgtggcggaa agggcagcct 60
cagcaccagc tc 72
<210> 56
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 56
ccaggatgag gcgctcatag gcgtcaggga gcttcaccgt tctgtgaggg agagagtgtc 60
ttgctgatgc ca 72
<210> 57
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 57
tgggctgcac gcggatcacc agctcgttgc gcttgacact gctggtggaa gatgtcgccg 60
gccacatcat gg 72
<210> 58
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 58
tgggctgcac gcggatcacc agctcgttgc gcttgacact gctggtggaa gatgtcgccg 60
gccacatcat gg 72
<210> 59
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 59
tccatcgggg ttccccacgt actggcccag gaccaacatt gttggcctgc acctctgaga 60
tgcatttcaa ca 72
<210> 60
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 60
aacccactct cttcatcagc tcgtctgcct ccgtgagggc ctcggctgga gagtgacggg 60
tggaggagag gc 72
<210> 61
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 61
ggcaaagaag tcctccagct tgagcttctc ctctgagggt ggcctgggag acacggacag 60
acagacacac ag 72
<210> 62
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 62
ggcaaagaag tcctccagct tgagcttctc ctctgagggt ggcctgggag acacggacag 60
acagacacac ag 72
<210> 63
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 63
caaaagtggc ggtggtggac ccgcggggca ccgtggtggt cgtccaggta ccctttggtg 60
gcctcgccct ct 72
<210> 64
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 64
caaaagtggc ggtggtggac ccgcggggca ccgtggtggt cgtccaggta ccctttggtg 60
gcctcgccct ct 72
<210> 65
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 65
ccagctccga ctcctcgggg ttgaagaaca tgccccggct tcttggtcat catcttggtg 60
tacacggcct cg 72
<210> 66
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 66
ccagctccga ctcctcgggg ttgaagaaca tgccccggct tcttggtcat catcttggtg 60
tacacggcct cg 72
<210> 67
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 67
tgccagcctc ccaggagaga ggaagagctc tcacccggat gatcccaaat tcatcgaaat 60
agcccccgcg ac 72
<210> 68
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 68
tctgtagggc accttgtatc tgttgccgta ggtcacggtc cagctccgac tcctcggggt 60
tgaagaacat gc 72
<210> 69
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 69
tctgtagggc accttgtatc tgttgccgta ggtcacggtc cagctccgac tcctcggggt 60
tgaagaacat gc 72
<210> 70
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 70
tggggtgaaa atacgccagg cctcacggag ctcgtcggct gaggggacat ggtatggctt 60
gggaggccgg tg 72
<210> 71
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 71
aggggcagtg gtgggacaca cttaccagat ggtggaggta gatcttcttc ttggccaggt 60
caccctgtgg ca 72
<210> 72
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 72
aggggcagtg gtgggacaca cttaccagat ggtggaggta gatcttcttc ttggccaggt 60
caccctgtgg ca 72
<210> 73
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 73
acccactctc ttcatcagct cgtctgcctc cgtggaggcc tcggctggag agtgacgggt 60
ggaggagagg ca 72
<210> 74
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 74
acccactctc ttcatcagct cgtctgcctc cgtggaggcc tcggctggag agtgacgggt 60
ggaggagagg ca 72
<210> 75
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 75
cagccggtca gagctctgca ggtccctccc gaaggagctt ctccacgatg atgcggttcc 60
agcctctgct gg 72
<210> 76
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 76
cagccggtca gagctctgca ggtccctccc gaaggagctt ctccacgatg atgcggttcc 60
agcctctgct gg 72
<210> 77
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 77
cagctccgac tcctcggggt tgaagaacat gcccgagctt cttggtcatc atcttggtgt 60
acacggcctc gt 72
<210> 78
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 78
cagctccgac tcctcggggt tgaagaacat gcccgagctt cttggtcatc atcttggtgt 60
acacggcctc gt 72
<210> 79
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 79
ctccttgaag gtgaggataa cgcaggcgat gttgtctccg gttccagatg gggccgaaga 60
tcctgttggc aa 72
<210> 80
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 80
acggacgtca tctgagttgg tggaggcggg cttctctcat ggccaccaga cacagcatct 60
gcagtaggtg gt 72
<210> 81
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 81
acggacgtca tctgagttgg tggaggcggg cttctctcat ggccaccaga cacagcatct 60
gcagtaggtg gt 72
<210> 82
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 82
tcccgaaggg cttctccacg atgatgcggt tccagctctc tgctgggagc ccggagctgc 60
gttaccccct tg 72
<210> 83
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 83
tcccgaaggg cttctccacg atgatgcggt tccagctctc tgctgggagc ccggagctgc 60
gttaccccct tg 72
<210> 84
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 84
cacttaccag atggtggggt agatcttctt cttggctcag gtcaccctgt ggcagaggga 60
acaggtgtgt gg 72
<210> 85
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 85
cacttaccag atggtggggt agatcttctt cttggctcag gtcaccctgt ggcagaggga 60
acaggtgtgt gg 72
<210> 86
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 86
ctgcagcctc acctcggcct tgcgctcgtt cagggctctt gccgcagcgc aggatgaagg 60
gcacccctac gt 72
<210> 87
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 87
ctgcagcctc acctcggcct tgcgctcgtt cagggctctt gccgcagcgc aggatgaagg 60
gcacccctac gt 72
<210> 88
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 88
cattctccac atagaggacg acggctgcaa aagtggtcgg tggtggaccc gcggggcacc 60
gtggggtcgt cc 72
<210> 89
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 89
cagggaggag atgtggttgg acagccggtc agagcatctg caggtccctc ccgaagggct 60
tctccacgat ga 72
<210> 90
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 90
cagggaggag atgtggttgg acagccggtc agagcatctg caggtccctc ccgaagggct 60
tctccacgat ga 72
<210> 91
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 91
aggtagtggt cgatgcggta gatctggtcc tcacgcgaac agggaggaga tgtggttgga 60
cagccggtca ga 72
<210> 92
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 92
aggtagtggt cgatgcggta gatctggtcc tcacgcgaac agggaggaga tgtggttgga 60
cagccggtca ga 72
<210> 93
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 93
acagggagga gatgtggttg gacagccggt cagagcttct gcaggtccct cccgaagggc 60
ttctccacga tg 72
<210> 94
<211> 73
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 94
ccttgaaggt gaggataacg caggcgatgt tgtccactgg ttccagatgg ggccgaagat 60
cctgttggca aat 73
<210> 95
<211> 73
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 95
ggtgcagcag tggggtgaaa atacgccagg cctcaacggg agctcgtcgc tgaggggaca 60
tggtatggct tgg 73
<210> 96
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 96
ggtccagctc cgactcctcg gggttgaaga acatgctccg gcttcttggt catcatcttg 60
gtgtacacgg cc 72
<210> 97
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 97
gtggggtgaa aatacgccag gcctcacgga gctcgatcgc tgaggggaca tggtatggct 60
tgggaggccg gt 72
<210> 98
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 98
ctgccttgct gggcctcgaa ggcatcacct accatcgcca cctctcattc tccacataga 60
ggacgacggc tg 72
<210> 99
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 99
ttggacagcc ggtcagagct ctgcaggtcc ctccccgaag ggcttctcca cgatgatgcg 60
gttccagcct ct 72
<210> 100
<211> 73
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 100
ccacttgtag gtgccctcat actggaaacc cactctcttc atcagctcgt ctgcctccgt 60
ggggcctcgg ctg 73
<210> 101
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 101
gggactgggg tgcaccccct accttctcat cacggagcgt catctgagtt ggtggaggcg 60
ggcttctcca tg 72
<210> 102
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 102
gggctgcacg cggatcacca gctcgttgcg cttgcagctg ctggtggaag atgtcgccgg 60
ccacatcatg ga 72
<210> 103
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 103
ctcattctcc acatagagga cgacggctgc aaaagctggc ggtggtggac ccgcggggca 60
ccgtggggtc gt 72
<210> 104
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 104
ctcgttgcgc ttgcactgct ggtggaagat gtcgcctggc cacatcatgg aactgcagcc 60
tcacctcggc ct 72
<210> 105
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 105
ccgactcctc ggggttgaag aacatgcccg gcttcgttgg tcatcatctt ggtgtacacg 60
gcctcgttgg gc 72
<210> 106
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 106
ccggcttctt ggtcatcatc ttggtgtaca cggccctcgt tgggctgcac gcggatcacc 60
agctcgttgc gc 72
<210> 107
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 107
ccgactcctc ggggttgaag aacatgcccg gcttcgttgg tcatcatctt ggtgtacacg 60
gcctcgttgg gc 72
<210> 108
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 108
tcttggtcat catcttggtg tacacggcct cgttgaggct gcacgcggat caccagctcg 60
ttgcgcttgc ac 72
<210> 109
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 109
ggcctcgaag gcatcaccta ccatcccacc tctcaattct ccacatagag gacgacggct 60
gcaaaagtgg cg 72
<210> 110
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 110
ccggcttctt ggtcatcatc ttggtgtaca cggccctcgt tgggctgcac gcggatcacc 60
agctcgttgc gc 72
<210> 111
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 111
tcccccggcc caggcttggc cccacctcag caccactgag gttctgcacc atctccttgc 60
ccaggtagtg gt 72
<210> 112
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 112
tcatggaact gcagcctcac ctcggccttg cgctcgtttc agggccttgc cgcagcgcag 60
gatgaagggc ac 72
<210> 113
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 113
caccagctcg ttgcgcttgc actgctggtg gaagactgtc gccggccaca tcatggaact 60
gcagcctcac ct 72
<210> 114
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 114
atctgagttg gtggaggcgg gcttctccat ggccacgcag acacagcatc tgcagtaggt 60
ggttctgcat ca 72
<210> 115
<211> 90
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 115
aggtagaaga ggcggttggc ctgtgacccc aggtgagggg aattagaggg cattcatgtg 60
gctgttgagg cgctggtagg aggctgcatc 90
<210> 116
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 116
tggacccgcg gggcaccgtg gggtcgtcca ggtacctctt tggtggcctc gccctctcca 60
tcggggttcc cc 72
<210> 117
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 117
agatgtggtt ggacagccgg tcagagctct gcaggctccc tcccgaaggg cttctccacg 60
atgatgcggt tc 72
<210> 118
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 118
ggcctcgttg ggctgcacgc ggatcaccag ctcgtctgcg cttgcactgc tggtggaaga 60
tgtcgccggc ca 72
<210> 119
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 119
agctgggcct cacctgcgca cgaagtgcat ctggcctccc gcagaagacg tccaggatga 60
ggcgctcata gg 72
<210> 120
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 120
ctgcaccatc tccttgccca ggtagtggtc gatgcaggta gatctggtcc tcacggaaca 60
gggaggagat gt 72
<210> 121
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 121
acacggcctc gttgggctgc acgcggatca ccagcctcgt tgcgcttgca ctgctggtgg 60
aagatgtcgc cg 72
<210> 122
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 122
tggacccgcg gggcaccgtg gggtcgtcca ggtacctctt tggtggcctc gccctctcca 60
tcggggttcc cc 72
<210> 123
<211> 76
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 123
gatcccaaat tcatcgaaat agcccccgcg accctcagtg ccaaagggct ccttgaaggt 60
gaggataacg caggcg 76
<210> 124
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 124
accctccaca ctgctccttc tctgtagggc accttgttat ctgttgccgt aggtcaggtc 60
cagctccgac tc 72
<210> 125
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 125
ctcatcacgg acgtcatctg agttggtgga ggcggagctt ctccatggcc accagacaca 60
gcatctgcag ta 72
<210> 126
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 126
ggccacatca tggaactgca gcctcacctc ggcctctgcg ctcgttcagg gccttgccgc 60
agcgcaggat ga 72
<210> 127
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 127
ctgcaccatc tccttgccca ggtagtggtc gatgcaggta gatctggtcc tcacggaaca 60
gggaggagat gt 72
<210> 128
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 128
gtggcctcgc cctctccatc ggggttcccc acgtacgtgg cccaggacca cattgttggc 60
ctgcacctct ga 72
<210> 129
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 129
caggtccagc tccgactcct cggggttgaa gaacactgcc cggcttcttg gtcatcatct 60
tggtgtacac gg 72
<210> 130
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 130
ctcatcacgg acgtcatctg agttggtgga ggcggagctt ctccatggcc accagacaca 60
gcatctgcag ta 72
<210> 131
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 131
ccggcagctg ggcctcacct gcgcacgaag tgcatcgtgg ctcccgcaga agacgtccag 60
gatgaggcgc tc 72
<210> 132
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 132
gggaacgggc atagcccacg atgaaggtgt tttcggtgca gaaggccatc ccggaacagc 60
cacctgaggg ca 72
<210> 133
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 133
ggtccagctc cgactcctcg gggttgaaga acatgctccg gcttcttggt catcatcttg 60
gtgtacacgg cc 72
<210> 134
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 134
tcatcacgga cgtcatctga gttggtggag gcgggcgttc tccatggcca ccagacacag 60
catctgcagt ag 72
<210> 135
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 135
tgcggatgtc agccactgtg aggcgggaac gggcactagc ccacgatgaa ggtgttttcg 60
ggcagaaggc ca 72
<210> 136
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 136
accctccaca ctgctccttc tctgtagggc accttgttat ctgttgccgt aggtcaggtc 60
cagctccgac tc 72
<210> 137
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 137
cacggaacag ggaggagatg tggttggaca gccggatcag agctctgcag gtccctcccg 60
aagggcttct cc 72
<210> 138
<211> 76
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 138
gatcccaaat tcatcgaaat agcccccgcg accctcagtg ccaaagggct ccttgaaggt 60
gaggataacg caggcg 76
<210> 139
<211> 73
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 139
taggagttgc gggcaaagaa gtcctccagc ttgagcttct cctctggggt ggcctgggag 60
acacggacag aca 73
<210> 140
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 140
tcatcacgga cgtcatctga gttggtggag gcgggcgttc tccatggcca ccagacacag 60
catctgcagt ag 72
<210> 141
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 141
tgcggatgtc agccactgtg aggcgggaac gggcactagc ccacgatgaa ggtgttttcg 60
ggcagaaggc ca 72
<210> 142
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 142
agatgtggtt ggacagccgg tcagagctct gcaggctccc tcccgaaggg cttctccacg 60
atgatgcggt tc 72
<210> 143
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 143
ggtagaagag gcggttggcc tgtgacccca ggtggagggg cattcatgtg gctgttgagg 60
cgctggtagg ag 72
<210> 144
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 144
caggtccagc tccgactcct cggggttgaa gaacactgcc cggcttcttg gtcatcatct 60
tggtgtacac gg 72
<210> 145
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 145
caggtccctc ccgaagggct tctccacgat gatgcaggtt ccagcctctg ctgggagccc 60
ggagctgcgt ta 72
<210> 146
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 146
atctgagttg gtggaggcgg gcttctccat ggccacgcag acacagcatc tgcagtaggt 60
ggttctgcat ca 72
<210> 147
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 147
tctgttgccg taggtcaggt ccagctccga ctcctctggg gttgaagaac atgcccggct 60
tcttggtcat ca 72
<210> 148
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 148
ccggcagctg ggcctcacct gcgcacgaag tgcatcgtgg ctcccgcaga agacgtccag 60
gatgaggcgc tc 72
<210> 149
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 149
tgggagatac tcaccgatgc acccatgatg atgaactatg tgtgtatccg actgatggaa 60
ggcatcgccc tg 72
<210> 150
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 150
aatagccccc gcgaccctca gtgccaaagg gctcccttga aggtgaggat aacgcaggcg 60
atgttgtccc gg 72
<210> 151
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 151
ggccacatca tggaactgca gcctcacctc ggcctctgcg ctcgttcagg gccttgccgc 60
agcgcaggat ga 72
<210> 152
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 152
tcatggaact gcagcctcac ctcggccttg cgctcgtttc agggccttgc cgcagcgcag 60
gatgaagggc ac 72
<210> 153
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 153
ggcctcgaag gcatcaccta ccatcccacc tctcaattct ccacatagag gacgacggct 60
gcaaaagtgg cg 72
<210> 154
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 154
gtggagggca ttcatgtggc tgttgaggcg ctggtaggga ggctgcatca tcgtactggc 60
cagccacata gg 72
<210> 155
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 155
tctgttgccg taggtcaggt ccagctccga ctcctctggg gttgaagaac atgcccggct 60
tcttggtcat ca 72
<210> 156
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 156
ccactctctt catcagctcg tctgcctccg tggggacctc ggctggagag tgacgggtgg 60
aggagaggca tg 72
<210> 157
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 157
ccacgatgaa ggtgttttcg ggcagaaggc catccctgga acagccacct gagggcaggg 60
cacagctgta ac 72
<210> 158
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 158
gggctgcacg cggatcacca gctcgttgcg cttgcagctg ctggtggaag atgtcgccgg 60
ccacatcatg ga 72
<210> 159
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 159
gggcatagcc cacgatgaag gtgttttcgg gcagaagggc catcccggaa cagccacctg 60
agggcagggc ac 72
<210> 160
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 160
tgggagatac tcaccgatgc acccatgatg atgaactatg tgtgtatccg actgatggaa 60
ggcatcgccc tg 72
<210> 161
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 161
caggatgagg cgctcatagg cgtcagggag cttcactgtt ctgtgaggga gagagtgtct 60
tgctgatgcc ac 72
<210> 162
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 162
ccactctctt catcagctcg tctgcctccg tggggacctc ggctggagag tgacgggtgg 60
aggagaggca tg 72
<210> 163
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 163
gggagggcaa cggcaagcct tacatctggc tcatgctagg actcgtgaat gttcttggtg 60
acggcctcgt ag 72
<210> 164
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 164
gggcatagcc cacgatgaag gtgttttcgg gcagaagggc catcccggaa cagccacctg 60
agggcagggc ac 72
<210> 165
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 165
ctcgttgcgc ttgcactgct ggtggaagat gtcgcctggc cacatcatgg aactgcagcc 60
tcacctcggc ct 72
<210> 166
<211> 90
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 166
aggtagaaga ggcggttggc ctgtgacccc aggtgagggg aattagaggg cattcatgtg 60
gctgttgagg cgctggtagg aggctgcatc 90
<210> 167
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 167
gtgcatctgg ctcccgcaga agacgtccag gatgaaggcg ctcataggcg tcagggagct 60
tcacgttctg tg 72
<210> 168
<211> 73
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 168
ccacttgtag gtgccctcat actggaaacc cactctcttc atcagctcgt ctgcctccgt 60
ggggcctcgg ctg 73
<210> 169
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 169
tggggactgg ggtgcacccc ctaccttctc atcacaggac gtcatctgag ttggtggagg 60
cgggcttctc ca 72
<210> 170
<211> 73
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 170
aacgggcata gcccacgatg aaggtgtttt cgggcagaag gccatcccgg aacagccacc 60
tgagggcagg gca 73
<210> 171
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 171
ctctccatcg gggttcccca cgtactggcc caggaaccac attgttggcc tgcacctctg 60
agatgcattt ca 72
<210> 172
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 172
gtggagggca ttcatgtggc tgttgaggcg ctggtaggga ggctgcatca tcgtactggc 60
cagccacata gg 72
<210> 173
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 173
cttgaaggtg aggataacgc aggcgatgtt gtcccaggtt ccagatgggg ccgaagatcc 60
tgttggcaaa tc 72
<210> 174
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 174
gtggggtgaa aatacgccag gcctcacgga gctcgatcgc tgaggggaca tggtatggct 60
tgggaggccg gt 72
<210> 175
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 175
cacggacgtc atctgagttg gtggaggcgg gcttcatcca tggccaccag acacagcatc 60
tgcagtaggt gg 72
<210> 176
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 176
taccttctca tcacggacgt catctgagtt ggtggagggc gggcttctcc atggccacca 60
gacacagcat ct 72
<210> 177
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 177
ctcgtagacg gtcgggggca aggccaggta gaagaaggcg gttggcctgt gaccccaggt 60
ggagggcatt ca 72
<210> 178
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 178
cagtgccaaa gggctccttg aaggtgagga taacgctagg cgatgttgtc ccggttccag 60
atggggccga ag 72
<210> 179
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 179
ccaggatgag gcgctcatag gcgtcaggga gcttcaccgt tctgtgaggg agagagtgtc 60
ttgctgatgc ca 72
<210> 180
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 180
catcttggtg tacacggcct cgttgggctg cacgccggat caccagctcg ttgcgcttgc 60
actgctggtg ga 72
<210> 181
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 181
cacggacgtc atctgagttg gtggaggcgg gcttcatcca tggccaccag acacagcatc 60
tgcagtaggt gg 72
<210> 182
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 182
actggggtgc accccctacc ttctcatcac ggacgctcat ctgagttggt ggaggcgggc 60
ttctccatgg cc 72
<210> 183
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 183
atctggtgca gcagtggggt gaaaatacgc caggccgtca cggagctcgt cgctgagggg 60
acatggtatg gc 72
<210> 184
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 184
gggaacgggc atagcccacg atgaaggtgt tttcggtgca gaaggccatc ccggaacagc 60
cacctgaggg ca 72
<210> 185
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 185
gtgcatctgg ctcccgcaga agacgtccag gatgaaggcg ctcataggcg tcagggagct 60
tcacgttctg tg 72
<210> 186
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 186
ccacgatgaa ggtgttttcg ggcagaaggc catccctgga acagccacct gagggcaggg 60
cacagctgta ac 72
<210> 187
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 187
tcttggtgta cacggcctcg ttgggctgca cgcggagtca ccagctcgtt gcgcttgcac 60
tgctggtgga ag 72
<210> 188
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 188
gggagggcaa cggcaagcct tacatctggc tcatgctagg actcgtgaat gttcttggtg 60
acggcctcgt ag 72
<210> 189
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 189
tgtgaggcgg gaacgggcat agcccacgat gaaggctgtt ttcgggcaga aggccatccc 60
ggaacagcca cc 72
<210> 190
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 190
ggaagggagg gcaacggcaa gccttacatc tggctcgatg caggactcgt gaatgttctt 60
ggtgacggcc tc 72
<210> 191
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 191
cagctcaatc tggtgcagca gtggggtgaa aatacagcca ggcctcacgg agctcgtcgc 60
tgaggggaca tg 72
<210> 192
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 192
ggaagggagg gcaacggcaa gccttacatc tggctcgatg caggactcgt gaatgttctt 60
ggtgacggcc tc 72
<210> 193
<211> 73
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 193
tctgcaccat ctccttgccc aggtagtggt cgatgcgtgg tagatctggt cctcacggaa 60
cagggaggag atg 73
<210> 194
<211> 73
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 194
tctgcaccat ctccttgccc aggtagtggt cgatgcgtgg tagatctggt cctcacggaa 60
cagggaggag atg 73
<210> 195
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 195
gttctgcacc atctccttgc ccaggtagtg gtcgactgcg gtagatctgg tcctcacgga 60
acagggagga ga 72
<210> 196
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 196
gttctgcacc atctccttgc ccaggtagtg gtcgactgcg gtagatctgg tcctcacgga 60
acagggagga ga 72
<210> 197
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 197
gggaacgggc atagcccacg atgaaggtgt tttcgaggca gaaggccatc ccggaacagc 60
cacctgaggg ca 72
<210> 198
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 198
cagctcaatc tggtgcagca gtggggtgaa aatacgtcca ggcctcacgg agctcgtcgc 60
tgaggggaca tg 72
<210> 199
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 199
ccctaccttc tcatcacgga cgtcatctga gttggctgga ggcgggcttc tccatggcca 60
ccagacacag ca 72
<210> 200
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 200
ccctaccttc tcatcacgga cgtcatctga gttggctgga ggcgggcttc tccatggcca 60
ccagacacag ca 72
<210> 201
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 201
gggtgcaccc cctaccttct catcacggac gtcatactga gttggtggag gcgggcttct 60
ccatggccac ca 72
<210> 202
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 202
agtggcggtg gtggacccgc ggggcaccgt ggggtctgtc caggtaccct ttggtggcct 60
cgccctctcc at 72
<210> 203
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 203
caggcgatgt tgtcccggtt ccagatgggg ccgaacgatc ctgttggcaa atctgcaggg 60
aggggcaagg tg 72
<210> 204
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 204
ggagggcaac ggcaagcctt acatctggct catgcacgga ctcgtgaatg ttcttggtga 60
cggcctcgta ga 72
<210> 205
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 205
tcaccggatg atcccaaatt catcgaaata gccccctgcg accctcagtg ccaaagggct 60
ccttgaaggt ga 72
<210> 206
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 206
gcacacccca gctcagtgcc tcgtcacaga tgggccttgc gacagggcat gctcctgggg 60
actggggtgc ac 72
<210> 207
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 207
ggttggcctg tgaccccagg tggagggcat tcatgctggc tgttgaggcg ctggtaggag 60
gctgcatcat cg 72
<210> 208
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 208
aatatagggg atgggcttgg gcttctccag ctcaagtctg gtgcagcagt ggggtgaaaa 60
tacgccaggc ct 72
<210> 209
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 209
cttggtcatc atcttggtgt acacggcctc gttggcgctg cacgcggatc accagctcgt 60
tgcgcttgca ct 72
<210> 210
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 210
tctcatcacg gacgtcatct gagttggtgg aggcgaggct tctccatggc caccagacac 60
agcatctgca gt 72
<210> 211
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 211
ctgggcctca cctgcgcacg aagtgcatct ggctcaccgc agaagacgtc caggatgagg 60
cgctcatagg cg 72
<210> 212
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 212
aagctcttcc cgcaggatcc cgcacacctg ggtccaggct cagggccacc tgctctgcca 60
tgacgctgtc tg 72
<210> 213
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 213
accggatgat cccaaattca tcgaaatagc ccccgacgac cctcagtgcc aaagggctcc 60
ttgaaggtga gg 72
<210> 214
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 214
tcttggtcat catcttggtg tacacggcct cgttgcggct gcacgcggat caccagctcg 60
ttgcgcttgc ac 72
<210> 215
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 215
gttctgcctt gctgggcctc gaaggcatca cctacacatc ccacctctca ttctccacat 60
agaggacgac gg 72
<210> 216
<211> 73
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 216
aaagggctcc ttgaaggtga ggataacgca ggcgatgttg tcccggttcc agatggggcc 60
gaagatcctg ttg 73
<210> 217
<211> 73
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 217
taggagttgc gggcaaagaa gtcctccagc ttgagcttct cctctggggt ggcctgggag 60
acacggacag aca 73
<210> 218
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 218
acagggagga gatgtggttg gacagccggt cagagcttct gcaggtccct cccgaagggc 60
ttctccacga tg 72
<210> 219
<211> 71
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 219
ctctgctggg agcccggagc tgcgttaccc ccttgaaccc ctcttcgggg agtgaggatc 60
agagctgcat c 71
<210> 220
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 220
agtggcggtg gtggacccgc ggggcaccgt ggggtctgtc caggtaccct ttggtggcct 60
cgccctctcc at 72
<210> 221
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 221
caggcgatgt tgtcccggtt ccagatgggg ccgaacgatc ctgttggcaa atctgcaggg 60
aggggcaagg tg 72
<210> 222
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 222
caccagctcg ttgcgcttgc actgctggtg gaagactgtc gccggccaca tcatggaact 60
gcagcctcac ct 72
<210> 223
<211> 88
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 223
tcgccggcca catcatggaa ctgcagcctc acctcggcct tgcgctcgtt cagggccttg 60
ccgcagcgca ggatgaaggg caccccta 88
<210> 224
<211> 73
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 224
ttctccacat agaggacgac ggctgcaaaa gtggcggtgg tggacccgcg gggcaccgtg 60
gggtcgtcca ggt 73
<210> 225
<211> 73
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 225
aacgggcata gcccacgatg aaggtgtttt cgggcagaag gccatcccgg aacagccacc 60
tgagggcagg gca 73
<210> 226
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 226
gatcaccagc tcgttgcgct tgcactgctg gtggaatgat gtcgccggcc acatcatgga 60
actgcagcct ca 72
<210> 227
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 227
ccactgtgag gcgggaacgg gcatagccca cgatgatagg tgttttcggg cagaaggcca 60
tcccggaaca gc 72
<210> 228
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 228
ggagggcaac ggcaagcctt acatctggct catgcacgga ctcgtgaatg ttcttggtga 60
cggcctcgta ga 72
<210> 229
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 229
tcaccggatg atcccaaatt catcgaaata gccccctgcg accctcagtg ccaaagggct 60
ccttgaaggt ga 72
<210> 230
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 230
gcacacccca gctcagtgcc tcgtcacaga tgggccttgc gacagggcat gctcctgggg 60
actggggtgc ac 72
<210> 231
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 231
gtgccagcct cccaggagag aggaagagct ctcacacgga tgatcccaaa ttcatcgaaa 60
tagcccccgc ga 72
<210> 232
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 232
ggttggcctg tgaccccagg tggagggcat tcatgctggc tgttgaggcg ctggtaggag 60
gctgcatcat cg 72
<210> 233
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 233
aatatagggg atgggcttgg gcttctccag ctcaagtctg gtgcagcagt ggggtgaaaa 60
tacgccaggc ct 72
<210> 234
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 234
catggaactg cagcctcacc tcggccttgc gctcgattca gggccttgcc gcagcgcagg 60
atgaagggca cc 72
<210> 235
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 235
tctcatcacg gacgtcatct gagttggtgg aggcgaggct tctccatggc caccagacac 60
agcatctgca gt 72
<210> 236
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 236
aagctcttcc cgcaggatcc cgcacacctg ggtccaggct cagggccacc tgctctgcca 60
tgacgctgtc tg 72
<210> 237
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 237
accggatgat cccaaattca tcgaaatagc ccccgacgac cctcagtgcc aaagggctcc 60
ttgaaggtga gg 72
<210> 238
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 238
tggcctcgcc ctctccatcg gggttcccca cgtacgtggc ccaggaccac attgttggcc 60
tgcacctctg ag 72
<210> 239
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 239
gttctgcctt gctgggcctc gaaggcatca cctacacatc ccacctctca ttctccacat 60
agaggacgac gg 72
<210> 240
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 240
tgaggcgctc ataggcgtca gggagcttca cgttcctgtg agggagagag tgtcttgctg 60
atgccactgc ct 72
<210> 241
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 241
gatgatgcgg ttccagcctc tgctgggagc ccggaagctg cgttaccccc ttgaacccct 60
cttcggggag tg 72
<210> 242
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 242
gatgaggcgc tcataggcgt cagggagctt cacgttctgt gagggagaga gtgtcttgct 60
gatgccactg cc 72
<210> 243
<211> 74
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 243
gtgccagcct cccaggagag aggaagagct ctcacatcgg atgatcccaa attcatcgaa 60
atagcccccg cgac 74
<210> 244
<211> 73
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 244
aaagggctcc ttgaaggtga ggataacgca ggcgatgttg tcccggttcc agatggggcc 60
gaagatcctg ttg 73
<210> 245
<211> 73
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 245
tggtcgatgc ggtagatctg gtcctcacgg aacagggagg agatgtggtt ggacagccgg 60
tcagagctct gca 73
<210> 246
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 246
tgggcctcac ctgcgcacga agtgcatctg gctccctgca gaagacgtcc aggatgaggc 60
gctcataggc gt 72
<210> 247
<211> 73
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 247
gggaacgggc atagcccacg atgaaggtgt tttcgagtgc agaaggccat cccggaacag 60
ccacctgagg gca 73
<210> 248
<211> 73
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 248
gggaacgggc atagcccacg atgaaggtgt tttcgagtgc agaaggccat cccggaacag 60
ccacctgagg gca 73
<210> 249
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 249
ctgcatcatc gtactggcca gccacatagg agttgctggg caaagaagtc ctccagcttg 60
agcttctcct ct 72
<210> 250
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 250
cctcccgaag ggcttctcca cgatgatgcg gttccaggcc tctgctggga gcccggagct 60
gcgttacccc ct 72
<210> 251
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 251
cctcggggtt gaagaacatg cccggcttct tggtcagtca tcttggtgta cacggcctcg 60
ttgggctgca cg 72
<210> 252
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 252
cggccttgcg ctcgttcagg gccttgccgc agcgcatgga tgaagggcac ccctacgtgg 60
cggaaagggc ag 72
<210> 253
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 253
catagaggac gacggctgca aaagtggcgg tggtgagacc cgcggggcac cgtggggtcg 60
tccaggtacc ct 72
<210> 254
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 254
gccaaagggc tccttgaagg tgaggataac gcaggcggat gttgtcccgg ttccagatgg 60
ggccgaagat cc 72
<210> 255
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 255
agcccacgat gaaggtgttt tcgggcagaa ggccactccc ggaacagcca cctgagggca 60
gggcacagct gt 72
<210> 256
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 256
ccacatcatg gaactgcagc ctcacctcgg ccttgctgct cgttcagggc cttgccgcag 60
cgcaggatga ag 72
<210> 257
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 257
tctggtcctc acggaacagg gaggagatgt ggttgagaca gccggtcaga gctctgcagg 60
tccctcccga ag 72
<210> 258
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 258
tgaggcgctc ataggcgtca gggagcttca cgttcctgtg agggagagag tgtcttgctg 60
atgccactgc ct 72
<210> 259
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 259
gatgaggcgc tcataggcgt cagggagctt cacgttctgt gagggagaga gtgtcttgct 60
gatgccactg cc 72
<210> 260
<211> 73
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 260
tggttggaca gccggtcaga gctctgcagg tccctcccga agggcttctc cacgatgatg 60
cggttccagc ctc 73
<210> 261
<211> 73
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 261
cagctcaatc tggtgcagca gtggggtgaa aatacagtcc aggcctcacg gagctcgtcg 60
ctgaggggac atg 73
<210> 262
<211> 73
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 262
ggtccagctc cgactcctcg gggttgaaga acatgcgtcc ggcttcttgg tcatcatctt 60
ggtgtacacg gcc 73
<210> 263
<211> 73
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 263
ccagctccga ctcctcgggg ttgaagaaca tgccccgtgc ttcttggtca tcatcttggt 60
gtacacggcc tcg 73
<210> 264
<211> 73
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 264
tcttggtcat catcttggtg tacacggcct cgttgacggc tgcacgcgga tcaccagctc 60
gttgcgcttg cac 73
<210> 265
<211> 73
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 265
gggctgcacg cggatcacca gctcgttgcg cttgcacgct gctggtggaa gatgtcgccg 60
gccacatcat gga 73
<210> 266
<211> 73
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 266
ctgcaccatc tccttgccca ggtagtggtc gatgcagtgt agatctggtc ctcacggaac 60
agggaggaga tgt 73
<210> 267
<211> 73
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 267
cggcaagcct tacatctggc tcatgcagga ctcgtcgtaa tgttcttggt gacggcctcg 60
tagacggtcg ggg 73
<210> 268
<211> 73
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 268
agacggtcgg gggcaaggcc aggtagaaga ggcggcgttg gcctgtgacc ccaggtggag 60
ggcattcatg tgg 73
<210> 269
<211> 73
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 269
tcatggaact gcagcctcac ctcggccttg cgctccgttt cagggccttg ccgcagcgca 60
ggatgaaggg cac 73
<210> 270
<211> 73
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 270
ccctaccttc tcatcacgga cgtcatctga gttggactgg aggcgggctt ctccatggcc 60
accagacaca gca 73
<210> 271
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 271
cctcggggtt gaagaacatg cccggcttct tggtcagtca tcttggtgta cacggcctcg 60
ttgggctgca cg 72
<210> 272
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 272
cggccttgcg ctcgttcagg gccttgccgc agcgcatgga tgaagggcac ccctacgtgg 60
cggaaagggc ag 72
<210> 273
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 273
agcccacgat gaaggtgttt tcgggcagaa ggccactccc ggaacagcca cctgagggca 60
gggcacagct gt 72
<210> 274
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 274
tctggtcctc acggaacagg gaggagatgt ggttgagaca gccggtcaga gctctgcagg 60
tccctcccga ag 72
<210> 275
<211> 73
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 275
tggttggaca gccggtcaga gctctgcagg tccctcccga agggcttctc cacgatgatg 60
cggttccagc ctc 73
<210> 276
<211> 73
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 276
ggtccagctc cgactcctcg gggttgaaga acatgcgtcc ggcttcttgg tcatcatctt 60
ggtgtacacg gcc 73
<210> 277
<211> 73
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 277
ccagctccga ctcctcgggg ttgaagaaca tgccccgtgc ttcttggtca tcatcttggt 60
gtacacggcc tcg 73
<210> 278
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<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 278
gggctgcacg cggatcacca gctcgttgcg cttgcacgct gctggtggaa gatgtcgccg 60
gccacatcat gga 73
<210> 279
<211> 73
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 279
gatcaccagc tcgttgcgct tgcactgctg gtggaagtga tgtcgccggc cacatcatgg 60
aactgcagcc tca 73
<210> 280
<211> 73
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 280
gggtgcaccc cctaccttct catcacggac gtcatacgtg agttggtgga ggcgggcttc 60
tccatggcca cca 73
<210> 281
<211> 73
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 281
ctgcaccatc tccttgccca ggtagtggtc gatgcagtgt agatctggtc ctcacggaac 60
agggaggaga tgt 73
<210> 282
<211> 73
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 282
cggcaagcct tacatctggc tcatgcagga ctcgtcgtaa tgttcttggt gacggcctcg 60
tagacggtcg ggg 73
<210> 283
<211> 73
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 283
agacggtcgg gggcaaggcc aggtagaaga ggcggcgttg gcctgtgacc ccaggtggag 60
ggcattcatg tgg 73
<210> 284
<211> 73
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 284
ggtagaagag gcggttggcc tgtgacccca ggtggacggg gcattcatgt ggctgttgag 60
gcgctggtag gag 73
<210> 285
<211> 73
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 285
tcatggaact gcagcctcac ctcggccttg cgctccgttt cagggccttg ccgcagcgca 60
ggatgaaggg cac 73
<210> 286
<211> 73
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 286
ccctaccttc tcatcacgga cgtcatctga gttggactgg aggcgggctt ctccatggcc 60
accagacaca gca 73
<210> 287
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 287
agacggtcgg gggcaaggcc aggtagaaga ggcgggttgg cctgtgaccc caggtggagg 60
gcattcatgt gg 72
<210> 288
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 288
gatcaccagc tcgttgcgct tgcactgctg gtggaaggat gtcgccggcc acatcatgga 60
actgcagcct ca 72
<210> 289
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 289
ggtccagctc cgactcctcg gggttgaaga acatgcgccg gcttcttggt catcatcttg 60
gtgtacacgg cc 72
<210> 290
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 290
gggaacgggc atagcccacg atgaaggtgt tttcgaggca gaaggccatc ccggaacagc 60
cacctgaggg ca 72
<210> 291
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 291
tcatggaact gcagcctcac ctcggccttg cgctccgttc agggccttgc cgcagcgcag 60
gatgaagggc ac 72
<210> 292
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 292
agacggtcgg gggcaaggcc aggtagaaga ggcggcttgg cctgtgaccc caggtggagg 60
gcattcatgt gg 72
<210> 293
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 293
ccagctccga ctcctcgggg ttgaagaaca tgcccgtgct tcttggtcat catcttggtg 60
tacacggcct cg 72
<210> 294
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 294
agacggtcgg gggcaaggcc aggtagaaga ggcgggttgg cctgtgaccc caggtggagg 60
gcattcatgt gg 72
<210> 295
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 295
ggtagaagag gcggttggcc tgtgacccca ggtggacggg cattcatgtg gctgttgagg 60
cgctggtagg ag 72
<210> 296
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 296
cggcaagcct tacatctggc tcatgcagga ctcgtgtaat gttcttggtg acggcctcgt 60
agacggtcgg gg 72
<210> 297
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 297
tcatggaact gcagcctcac ctcggccttg cgctccgttc agggccttgc cgcagcgcag 60
gatgaagggc ac 72
<210> 298
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 298
agacggtcgg gggcaaggcc aggtagaaga ggcggcttgg cctgtgaccc caggtggagg 60
gcattcatgt gg 72
<210> 299
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 299
gggctgcacg cggatcacca gctcgttgcg cttgcacctg ctggtggaag atgtcgccgg 60
ccacatcatg ga 72
<210> 300
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 300
gggctgcacg cggatcacca gctcgttgcg cttgcacctg ctggtggaag atgtcgccgg 60
ccacatcatg ga 72
<210> 301
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 301
ctgcaccatc tccttgccca ggtagtggtc gatgcgtgta gatctggtcc tcacggaaca 60
gggaggagat gt 72
<210> 302
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 302
ctgcaccatc tccttgccca ggtagtggtc gatgcgtgta gatctggtcc tcacggaaca 60
gggaggagat gt 72
<210> 303
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 303
ggtccagctc cgactcctcg gggttgaaga acatgcgccg gcttcttggt catcatcttg 60
gtgtacacgg cc 72
<210> 304
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 304
ccagctccga ctcctcgggg ttgaagaaca tgcccgtgct tcttggtcat catcttggtg 60
tacacggcct cg 72
<210> 305
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 305
cggcaagcct tacatctggc tcatgcagga ctcgtgtaat gttcttggtg acggcctcgt 60
agacggtcgg gg 72
<210> 306
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 306
tggctcccgc agaagacgtc caggatgagg cgctcagtag gcgtcaggga gcttcacgtt 60
ctgtgaggga ga 72
<210> 307
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 307
gaggcggttg gcctgtgacc ccaggtggag ggcatctcat gtggctgttg aggcgctggt 60
aggaggctgc at 72
<210> 308
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 308
tggctcccgc agaagacgtc caggatgagg cgctcagtag gcgtcaggga gcttcacgtt 60
ctgtgaggga ga 72
<210> 309
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 309
attctccaca tagaggacga cggctgcaaa agtggctggt ggtggacccg cggggcaccg 60
tggggtcgtc ca 72
<210> 310
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 310
gtggctgttg aggcgctggt aggaggctgc atcatctgta ctggccagcc acataggagt 60
tgcgggcaaa ga 72
<210> 311
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 311
gtggctgttg aggcgctggt aggaggctgc atcatctgta ctggccagcc acataggagt 60
tgcgggcaaa ga 72
<210> 312
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 312
gaggcggttg gcctgtgacc ccaggtggag ggcatctcat gtggctgttg aggcgctggt 60
aggaggctgc at 72
<210> 313
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 313
cgatgcggta gatctggtcc tcacggaaca gggagagaga tgtggttgga cagccggtca 60
gagctctgca gg 72
<210> 314
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 314
ctgcatcatc gtactggcca gccacatagg agttgctggg caaagaagtc ctccagcttg 60
agcttctcct ct 72
<210> 315
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 315
cacggaacag ggaggagatg tggttggaca gccggatcag agctctgcag gtccctcccg 60
aagggcttct cc 72
<210> 316
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 316
ctgccttgct gggcctcgaa ggcatcacct accatcgcca cctctcattc tccacataga 60
ggacgacggc tg 72
<210> 317
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 317
cggtggtgga cccgcggggc accgtggggt cgtccagggt accctttggt ggcctcgccc 60
tctccatcgg gg 72
<210> 318
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 318
tctctcacgt gggtgctcgc ccctttcctc cccctctgtc cctccctccc accctggccc 60
cactcaggag tg 72
<210> 319
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 319
caacggcaag ccttacatct ggctcatgca ggactctgtg aatgttcttg gtgacggcct 60
cgtagacggt cg 72
<210> 320
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 320
gcggatgtca gccactgtga ggcgggaacg ggcataggcc cacgatgaag gtgttttcgg 60
gcagaaggcc at 72
<210> 321
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 321
attgttggcc tgcacctctg agatgcattt caacactctt gacctgagag aaagccaagg 60
gagagaatgg gc 72
<210> 322
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 322
gcaaggccag gtagaagagg cggttggcct gtgacaccca ggtggagggc attcatgtgg 60
ctgttgaggc gc 72
<210> 323
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 323
agatactcac cgatgcaccc atgatgatga atatgctgtg tatccgactg atggaaggca 60
tcgccctgga aa 72
<210> 324
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 324
caccgtgggg tcgtccaggt accctttggt ggcctctgcc ctctccatcg gggttcccca 60
cgtactggcc ca 72
<210> 325
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 325
tcacctacca tcccacctct cattctccac atagaaggac gacggctgca aaagtggcgg 60
tggtggaccc gc 72
<210> 326
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 326
ccagctcaat ctggtgcagc agtggggtga aaatactgcc aggcctcacg gagctcgtcg 60
ctgaggggac at 72
<210> 327
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 327
accacccacc ttgaagaagg gctcactctg tttgcaggat gtcagccact gtgaggcggg 60
aacgggcata gc 72
<210> 328
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 328
ggacagccgg tcagagctct gcaggtccct cccgaagggg cttctccacg atgatgcggt 60
tccagcctct gc 72
<210> 329
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 329
caacggcaag ccttacatct ggctcatgca ggactctgtg aatgttcttg gtgacggcct 60
cgtagacggt cg 72
<210> 330
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 330
accacccacc ttgaagaagg gctcactctg tttgcaggat gtcagccact gtgaggcggg 60
aacgggcata gc 72
<210> 331
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 331
agatactcac cgatgcaccc atgatgatga atatgctgtg tatccgactg atggaaggca 60
tcgccctgga aa 72
<210> 332
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 332
tcacctacca tcccacctct cattctccac atagaaggac gacggctgca aaagtggcgg 60
tggtggaccc gc 72
<210> 333
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 333
aggtatgcag gggccggcag ctgggcctca cctgcagcac gaagtgcatc tggctcccgc 60
agaagacgtc ca 72
<210> 334
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 334
ctggggactg gggtgcaccc cctaccttct catcactgga cgtcatctga gttggtggag 60
gcgggcttct cc 72
<210> 335
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 335
gcaaggccag gtagaagagg cggttggcct gtgacaccca ggtggagggc attcatgtgg 60
ctgttgaggc gc 72
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<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 336
attgttggcc tgcacctctg agatgcattt caacactctt gacctgagag aaagccaagg 60
gagagaatgg gc 72
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<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 337
ggacagccgg tcagagctct gcaggtccct cccgaagggg cttctccacg atgatgcggt 60
tccagcctct gc 72
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<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 338
gcggatgtca gccactgtga ggcgggaacg ggcataggcc cacgatgaag gtgttttcgg 60
gcagaaggcc at 72
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<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 339
tggtcccccg gcccaggctt ggccccacct cagcaaccat gaggttctgc accatctcct 60
tgcccaggta gt 72
<210> 340
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 340
cagtggtggg acacacttac cagatggtgg ggtagagtct tcttcttggc caggtcaccc 60
tgtggcagag gg 72
<210> 341
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 341
gtccctcccg aagggcttct ccacgatgat gcggtctcca gcctctgctg ggagcccgga 60
gctgcgttac cc 72
<210> 342
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 342
cagtggtggg acacacttac cagatggtgg ggtagagtct tcttcttggc caggtcaccc 60
tgtggcagag gg 72
<210> 343
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 343
ctcacggaac agggaggaga tgtggttgga cagccaggtc agagctctgc aggtccctcc 60
cgaagggctt ct 72
<210> 344
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 344
tcccggttcc agatggggcc gaagatcctg ttggcacaat ctgcagggag gggcaaggtg 60
gaggaactga cc 72
<210> 345
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 345
catcatcttg gtgtacacgg cctcgttggg ctgcacggcg gatcaccagc tcgttgcgct 60
tgcactgctg gt 72
<210> 346
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 346
agcccccacc ctttcctcac ctgccataaa tatagcggga tgggcttggg cttctccagc 60
tcaatctggt gc 72
<210> 347
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 347
gttgggctgc acgcggatca ccagctcgtt gcgctctgca ctgctggtgg aagatgtcgc 60
cggccacatc at 72
<210> 348
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 348
tcatcttggt gtacacggcc tcgttgggct gcacgctgga tcaccagctc gttgcgcttg 60
cactgctggt gg 72
<210> 349
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 349
tgggcctcac ctgcgcacga agtgcatctg gctccctgca gaagacgtcc aggatgaggc 60
gctcataggc gt 72
<210> 350
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 350
cccgaagggc ttctccacga tgatgcggtt ccagccttct gctgggagcc cggagctgcg 60
ttaccccctt ga 72
<210> 351
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 351
gcccacgatg aaggtgtttt cgggcagaag gccatctccg gaacagccac ctgagggcag 60
ggcacagctg ta 72
<210> 352
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 352
acacttacca gatggtgggg tagatcttct tcttgcgcca ggtcaccctg tggcagaggg 60
aacaggtgtg tg 72
<210> 353
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 353
ggtggacccg cggggcaccg tggggtcgtc caggtagccc tttggtggcc tcgccctctc 60
catcggggtt cc 72
<210> 354
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 354
ggtgcagcag tggggtgaaa atacgccagg cctcacggga gctcgtcgct gaggggacat 60
ggtatggctt gg 72
<210> 355
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 355
ctcgttgggc tgcacgcgga tcaccagctc gttgcagctt gcactgctgg tggaagatgt 60
cgccggccac at 72
<210> 356
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 356
gtccagctcc gactcctcgg ggttgaagaa catgcaccgg cttcttggtc atcatcttgg 60
tgtacacggc ct 72
<210> 357
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 357
agttggtgga ggcgggcttc tccatggcca ccagactaca gcatctgcag taggtggttc 60
tgcatcacgt cc 72
<210> 358
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 358
gcttgggctt ctccagctca atctggtgca gcagtcgggg tgaaaatacg ccaggcctca 60
cggagctcgt cg 72
<210> 359
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 359
cctcgttggg ctgcacgcgg atcaccagct cgttgctgct tgcactgctg gtggaagatg 60
tcgccggcca ca 72
<210> 360
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 360
cggcttcttg gtcatcatct tggtgtacac ggcctctgtt gggctgcacg cggatcacca 60
gctcgttgcg ct 72
<210> 361
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 361
catcatcttg gtgtacacgg cctcgttggg ctgcacggcg gatcaccagc tcgttgcgct 60
tgcactgctg gt 72
<210> 362
<211> 73
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 362
agattggggc ctgggagata ctcaccgatg cacccatgat gatgaatatg tgtgtatccg 60
actgatggaa ggc 73
<210> 363
<211> 73
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 363
agattggggc ctgggagata ctcaccgatg cacccatgat gatgaatatg tgtgtatccg 60
actgatggaa ggc 73
<210> 364
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 364
tcatcttggt gtacacggcc tcgttgggct gcacgctgga tcaccagctc gttgcgcttg 60
cactgctggt gg 72
<210> 365
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 365
ctcgttcagg gccttgccgc agcgcaggat gaaggagcac ccctacgtgg cggaaagggc 60
agcctcagca cc 72
<210> 366
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 366
actgcagcct cacctcggcc ttgcgctcgt tcaggagcct tgccgcagcg caggatgaag 60
ggcaccccta cg 72
<210> 367
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 367
acacttacca gatggtgggg tagatcttct tcttgcgcca ggtcaccctg tggcagaggg 60
aacaggtgtg tg 72
<210> 368
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 368
ggtggacccg cggggcaccg tggggtcgtc caggtagccc tttggtggcc tcgccctctc 60
catcggggtt cc 72
<210> 369
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 369
ctcgttgggc tgcacgcgga tcaccagctc gttgcagctt gcactgctgg tggaagatgt 60
cgccggccac at 72
<210> 370
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 370
gtccagctcc gactcctcgg ggttgaagaa catgcaccgg cttcttggtc atcatcttgg 60
tgtacacggc ct 72
<210> 371
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 371
agttggtgga ggcgggcttc tccatggcca ccagactaca gcatctgcag taggtggttc 60
tgcatcacgt cc 72
<210> 372
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 372
tctgcaccat ctccttgccc aggtagtggt cgatgcgggt agatctggtc ctcacggaac 60
agggaggaga tg 72
<210> 373
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 373
gcttgggctt ctccagctca atctggtgca gcagtcgggg tgaaaatacg ccaggcctca 60
cggagctcgt cg 72
<210> 374
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 374
cctcgttggg ctgcacgcgg atcaccagct cgttgctgct tgcactgctg gtggaagatg 60
tcgccggcca ca 72
<210> 375
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 375
cggcttcttg gtcatcatct tggtgtacac ggcctctgtt gggctgcacg cggatcacca 60
gctcgttgcg ct 72
<210> 376
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 376
caggtatgca ggggccggca gctgggcctc acctgctgca cgaagtgcat ctggctcccg 60
cagaagacgt cc 72
<210> 377
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 377
ggtgcagcag tggggtgaaa atacgccagg cctcaacgga gctcgtcgct gaggggacat 60
ggtatggctt gg 72
<210> 378
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 378
ccttgaaggt gaggataacg caggcgatgt tgtccacggt tccagatggg gccgaagatc 60
ctgttggcaa at 72
<210> 379
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 379
ccttgaaggt gaggataacg caggcgatgt tgtccctggt tccagatggg gccgaagatc 60
ctgttggcaa at 72
<210> 380
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 380
tctgcaccat ctccttgccc aggtagtggt cgatgctggt agatctggtc ctcacggaac 60
agggaggaga tg 72
<210> 381
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 381
aggaggctgc atcatcgtac tggccagcca catagcgagt tgcgggcaaa gaagtcctcc 60
agcttgagct tc 72
<210> 382
<211> 72
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 382
aggaggctgc atcatcgtac tggccagcca catagcgagt tgcgggcaaa gaagtcctcc 60
agcttgagct tc 72
Claims (5)
1.一种用于人葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症的基因突变检测试剂盒,其特征在于:包括如SEQ NO.1~382所示序列的探针。
2.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于:所述探针与含有某个特异性位点的DNA片段杂交。
3.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于:所述试剂盒还包括变性混合液、扩增混合液、片段化混合液、沉淀混合液和杂交混合液。
4.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于:所述试剂盒在GeneTitan MC中进行检测。
5.根据权利要求4所述的试剂盒,其特征在于:所述GeneTitan MC检测采用的试剂包括染料混合物、稳定混合物和连接混合物;其中,所述染料混合物包括染料混合物1和染料混合物2;
所述染料混合物1的组成为:。
所述染料混合物2的组成为:
所述稳定混合物的组成为:
Axiom Water 93.19μl
Axiom Stabilize Diluent 10.50μl
Axiom Stabilize Soln 1.31μl;
所述连接混合物的组成为:
Ligation Master Mix from Stage 1 82.42μl
Axiom Probe Mix 1 10.5μl
Axiom Probe Mix 2 10.5μl
Axiom Ligate Enzyme 1.58μl;其中,Stage 1的的组成为:
Axiom Ligate Buffer 66.15μl
Axiom Ligate Soln 1 13.12μl
Axiom Ligate Soln 2 3.73μl。
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---|---|---|---|
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Publications (2)
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ID=71152278
Family Applications (1)
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Citations (3)
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---|---|---|---|---|
WO2007070482A2 (en) * | 2005-12-14 | 2007-06-21 | Xueliang Xia | Microarray-based preimplantation genetic diagnosis of chromosomal abnormalities |
CN102174657A (zh) * | 2011-03-22 | 2011-09-07 | 危梅娟 | 诊断g6pd缺乏症的核酸杂交膜条、pcr引物及试剂盒 |
CN102899411A (zh) * | 2012-09-26 | 2013-01-30 | 广东凯普生物科技股份有限公司 | G6pd缺乏症基因检测试剂盒 |
-
2020
- 2020-03-06 CN CN202010149696.XA patent/CN111304317B/zh active Active
Patent Citations (3)
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