CN113046440B - 一种尤文肉瘤相关融合基因检测探针组合物、试剂盒及其应用 - Google Patents

一种尤文肉瘤相关融合基因检测探针组合物、试剂盒及其应用 Download PDF

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Abstract

本发明提供了一种尤文肉瘤相关融合基因检测探针组合物、试剂盒及其应用，所述探针组合物的靶基因包括NUTM2B全外显子、FUS全外显子、YWHAE全外显子、CIC全外显子、EWSR1全外显子、EWSR17～8号内含子、EWSR1 8～9号内含子及BCOR全外显子。本发明针对尤文肉瘤常见的基因融合突变形式，设计全面覆盖融合基因突变位点的探针组合物，显著提高了不同融合现象的检出率，降低了漏检率。

Description

一种尤文肉瘤相关融合基因检测探针组合物、试剂盒及其 应用
技术领域
本发明属于基因检测技术领域，涉及一种尤文肉瘤相关融合基因检测探针组合物、试剂盒及其应用。
背景技术
尤文肉瘤(Ewing sarcoma，ES)是一种少见的小圆细胞恶性肿瘤，属于尤文氏肉瘤家族肿瘤(Ewing sarcoma family of tumors，ESFT)，好发于5～15岁，男孩较女孩多见。该病虽然罕见，但是发生于骨的ES是影响儿童和青少年健康的第二常见原发性恶性骨肿瘤，这类肿瘤恶性程度高、易复发、预后差。
尤文肉瘤以22q12染色体上EWS基因(EWSR1)与ETS基因家族的几种基因(FLI1、ERG、ETV1、ETV4、FEV)融合为特征。85％的尤文肉瘤患者中，出现了EWS与11号染色体上FLI1基因的融合，以及相应的t(11；22)(q24；q12)染色体易位导致的EWS-FLI1融合基因转录。在5％～10％的病例中，EWS与ETS基因家族的其他基因相融合。在极少数病例中，FUS替代EWS，导致没有EWS的重新排列，发生由t(16；21)(p11；q24)易位导致的FUS-ERG融合基因转录或t(2；16)(q35；p11)易位导致的FUS-FEV融合基因转录。
随着分子生物学的发展，尤文样肉瘤亚型也需要进一步明确，例如BCOR-CCNB3、CIC-DUX4是已发现的尤文样肉瘤亚型，其治疗方案和原则与尤文肉瘤类似，但是预后可能有显著差异。
目前在临床上，主要采用荧光原位杂交技术(FISH)对EWS-FLI1融合进行检测，为尤文肉瘤的临床诊断提供辅助判断依据。但是FISH检测探针成本高且操作繁琐、结果判读耗时且存在主观误差等，同时EWS-FLI1融合只出现在85％左右的尤文肉瘤患者中，可能导致漏检。
CN108559780A公开了用于肿瘤融合基因EWS-FLI1检测的引物对、探针、试剂盒及其两步检测法，属于基因工程技术领域，能够解决现有的对于融合基因EWS-FLI1的检测操作繁琐、结果判读耗时且存在主观误差等技术问题。该用于肿瘤融合基因EWS-FLI1检测的引物对包括：用于融合基因EWS-FLI1 I型融合的如SEQ No.1序列所示的正向引物EWS_F、如SEQ No.2序列所示的反向引物FLI1_Exon 7&8R；和用于融合基因EWS-FLI1 II型融合的如SEQ No.1序列所示的正向引物EWS_F、如SEQ No.4序列所示的反向引物FLI1_Exon 6&7R。本发明能够应用于EWS-FLI1融合基因的定量检测中，进而有效用于尤文肉瘤家族肿瘤的检测中。但是，该引物对、探针、试剂盒仅能检测融合基因EWS-FLI1的两个位点，不能完全覆盖造成尤文肉瘤的基因突变区。
发明内容
针对现有技术的不足和实际需求，本发明提供了一种尤文肉瘤基因检测探针组合物、试剂盒及其应用，通过一次性检测数十种融合基因，有利于尤文肉瘤、非ETS融合小圆细胞肿瘤、尤文样肿瘤(CIC重排肉瘤、BCOR重排肉瘤)的一次性鉴别诊断。
为达此目的，本发明采用以下技术方案：
第一方面，本发明提供了一种尤文肉瘤相关融合基因检测探针组合物，所述探针组合物的靶基因包括NUTM2B全外显子、FUS全外显子、YWHAE全外显子、CIC全外显子、EWSR1全外显子、EWSR1 7～8号内含子、EWSR1 8～9号内含子或BCOR全外显子中的任意一种或至少两种的组合。
本发明中，针对尤文肉瘤常见的基因融合突变形式，参考图1设计探针，覆盖包含BCOR、CIC、EWSR1、FUS、NUTM2B、YWHAE 6个基因全外显子及EWSR1 2个内含子intron7-8、intron8-9位点，在尤文肉瘤样本DNA和RNA两个层面进行样本检测，有利于实现基于杂交捕获的高通量测序技术的精准分子分型及治疗、预后相关提示。
优选地，所述探针组合物在染色体上的杂交位点如下表所示；
Figure BDA0003014201890000011
Figure BDA0003014201890000021
Figure BDA0003014201890000031
Figure BDA0003014201890000041
Figure BDA0003014201890000051
Figure BDA0003014201890000061
常规融合基因的捕获探针主要选择融合基因和融合伴侣基因在融合断点两端的位点设计探针，存在阳性检出率低、只能检出探针特异性断点位置的融合现象的问题；本发明中，针对融合基因突变，采用单端基因全外显子区域全覆盖的原则设计探针，伴侣基因根据测序结果进行确认，该探针设计方法显著提高了因融合断点位置不同导致的不同融合现象的检出率，降低了漏检率。
优选地，所述探针组合物包括SEQ ID NO:1～204所示的核酸序列。
第二方面，本发明提供了一种尤文肉瘤相关融合基因检测试剂盒，所述试剂盒包括第一方面所述的探针组合物。
优选地，所述试剂盒还包括反转录试剂、测序文库构建试剂、PCR试剂或探针杂交试剂中的任意一种或至少两种的组合。
优选地，所述反转录试剂包括一链cDNA合成缓冲液、一链cDNA合成酶、二链cDNA合成缓冲液或二链cDNA合成酶中的任意一种或至少两种的组合。
优选地，所述测序文库构建试剂包括DNA片段化缓冲液、DNA片段化酶、末端加A尾缓冲液、末端加A尾酶、连接缓冲液、连接酶或接头中的任意一种或至少两种的组合。
优选地，所述PCR试剂包括PCR缓冲液和/或PCR引物。
优选地，所述探针杂交试剂包括杂交缓冲液和/或RNA酶抑制剂。
优选地，所述试剂盒还包括核酸纯化试剂。
优选地，所述核酸纯化试剂包括磁珠和/或清洗液。
第三方面，本发明提供了一种以非疾病诊断为目的的尤文肉瘤相关融合基因检测方法，所述检测方法以从样本(例如石蜡样本、病理鉴定确认的新鲜组织样本)中提取的DNA和RNA为检测对象，通过探针组合物靶向捕获富集目标区域进行高通量测序，后续进行融合变异的分析，实现了在一个反应管中同时检测DNA和RNA两个层面的融合突变现象的效果，流程图如图2所示，包括以下步骤：
从样本中提取DNA和RNA，对RNA进行片段化，同步进行一链cDNA合成和二链cDNA合成，得到cDNA/DNA复合物；
使用片段化酶打断cDNA/DNA复合物，并进行末端修复和加A尾、接头连接、PCR富集和纯化，得到基于总核酸构建的全基因组测序(WGS)文库(总量不少于200ng)；
取200ng WGS文库，加入第一方面所述的探针组合物，以及相应的杂交缓冲液和封闭液，进行杂交捕获；
针对捕获后的产物进行洗脱纯化，加入扩增引物进行目标区域的富集扩增，对最终获得的捕获文库进行定量和质控后进行高通量测序。
优选地，从样本中提取核酸的总量要求满足：DNA≥50ng，RNA≥100ng，RNA完整值(RIN)≥5。
优选地，一链cDNA合成反应体系包括样本DNA、RNA、反转录酶、RNA片段化酶和dNTPs，所述反转录酶与RNA片段化酶的体积比为1:(5-8)。
优选地，所述一链cDNA合成的条件为：20～30℃反应5～10min，40～42℃反应10～15min，65～70℃反应10～20min。
优选地，二链cDNA合成反应体系包括样本DNA、一链cDNA、DNA聚合酶和无核酶水。
优选地，所述二链cDNA合成的条件为：20～30℃反应20～40min，60～65℃反应10～15min。
优选地，片段化和末端修复加A尾反应体系包括DNA片段化酶及对应预混缓冲液、末端修复加A尾酶及对应预混缓冲液、DNA片段化-加A尾酶增强子及对应增强预混缓冲液。
优选地，所述接头连接的反应温度为22～26℃，反应时间为10～15min。
优选地，所述接头连接的反应体系中，片段化DNA与接头的比例为(15～20)ng:1μL。
优选地，所述WGS文库总量≥200ng，WGS文库中DNA片段的长度为220bp～400bp。
优选地，所述捕获文库的浓度≥2.0ng/μL。
第四方面，本发明提供了一种尤文肉瘤相关融合基因检测装置，所述检测装置兼容DNA和RNA两套模板的检测，输出的检测结果互相补充，避免因单独检测DNA或单独检测RNA造成的漏检，包括：
核酸提取单元：用于从尤文肉瘤样本中提取核酸；
反转录单元：用于将提取的RNA反转录为DNA；
预文库构建单元：用于将提取和/或反转录的DNA进行片段化、加A尾、连接接头和PCR扩增，构建预文库；
杂交捕获单元：用于利用第一方面所述的探针组合物从预文库中捕获目的片段，并进行PCR扩增，构建探针捕获文库；
测序单元：用于对探针捕获文库进行测序和数据处理。
第五方面，本发明提供了第一方面所述的探针组合物、第二方面所述的试剂盒或第四方面所述的检测装置在制备尤文肉瘤诊断产品中的应用。
与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
(1)本发明采用单端基因全外显子区域全覆盖的原则，根据融合基因序列设计探针，并根据测序结果确认融合伴侣基因，由此设计的探针组合物覆盖包含BCOR、CIC、EWSR1、FUS、NUTM2B、YWHAE6个基因全外显子及EWSR1 2个内含子7-8、8-9位点，显著提高了不同融合现象的检出率，降低了漏检率，并且实现了未知融合伴侣或未知融合位点的检出；
(2)本发明的检测方法和/或检测装置以提取的DNA和RNA为检测对象，实现了在一个反应管中同时检测DNA和RNA两个层面的融合突变现象的效果，检测结果互相补充，避免了因RNA降解或表达量低导致的漏检、以及因探针对DNA内含子区或高复杂区捕获效率差导致的漏检，显著提高了检测结果的准确性。
附图说明
图1为探针设计示意图；
图2为实验流程图；
图3为样本在DNA层面融合变异检出的测序结果Circos图示；
图4为样本在RNA层面融合变异检出的测序结果IGV图示。
具体实施方式
为进一步阐述本发明所采取的技术手段及其效果，以下结合实施例和附图对本发明作进一步地说明。可以理解的是，此处所描述的具体实施方式仅仅用于解释本发明，而非对本发明的限定。
实施例中未注明具体技术或条件者，按照本领域内的文献所描述的技术或条件，或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可通过正规渠道商购获得的常规产品。
实施例1核酸提取和反转录
本实施例首先从样本中提取核酸，并采用Qubit 3.0进行质控，随后以提取的核酸为模板进行一链cDNA合成；
根据表1在冰上配制一链cDNA合成反应体系，使用移液器轻轻吹打充分混匀后，瞬时离心；将反应体系置于PCR仪中，按照表2程序进行一链cDNA合成；
表1
成分 体积(μL)
DNA/RNA 8.5
RNA片段化混合液(RNA Fragmentation Mix) 8.5
一链cDNA合成缓冲液(1st Strand Buffer) 7
一链cDNA合成酶混合液(1st Strand Enzyme Mix) 1
表2
温度(℃) 时间
25 10min
42 15min
70 15min
4 保持
以一链cDNA为模板，根据表3在冰上配制二链cDNA合成反应体系，使用移液器轻轻吹打充分混匀后，瞬时离心；将反应体系置于PCR仪中，按照表4程序进行二链cDNA合成；
表3
成分 体积(μL)
一链cDNA 25
二链合成缓冲液(2nd Strand Buffer) 3.6
二链cDNA合成酶混合液(2nd Strand Enzyme Mix) 6.5
无酶水(Nuclease-free Water) 14.9
表4
温度(℃) 时间
16 30min
65 15min
4 保持
向二链cDNA产物中加入90μL磁珠，混合均匀后室温放置5min(不放在磁力架上)，随后置于磁力架上待液体澄清后弃上清液；加入200μL 80％乙醇清洗，静置30s后弃上清，重复一次；快速离心后弃去残余乙醇，室温晾干；
将样本从磁力架上取下，加入32μL无酶水重悬磁珠，充分吸打混匀，室温静置2min后置于磁力架上，待溶液澄清后小心吸取31.3μL上清液转移至新的无核酸酶EP管中，置于冰上备用。
实施例2预文库构建
本实施例采用实施例1提取/反转录的DNA样本进行预文库构建，步骤如下：
将5μL DNA片段化-加A尾缓冲液(DNA Frag-A Tailing Buffer)和2.5μL DNA片段化-加A尾增强剂(DNA Frag-A Tailing Enhancer)轻柔吹打混匀，随后加入DNA样本、10μLDNA片段化酶(DNA Frag Enzyme)和1.2μL加A尾酶(End Repair-A Tailing Enzyme Mix)，轻柔吹打混匀；
将配制好的体系简短离心至管底后马上转移到4℃预冷的PCR仪(热盖温度为70℃)中，按照表5程序进行反应；
表5
温度(℃) 时间
32 22min
65 30min
4 保持
按照表6配制反应体系，轻轻吹打充分混匀后，置于PCR仪中，按照表7程序进行接头连接反应；
表6
成分 体积(μL)
片段化加A尾产物 50
接头(Adaptor(IL)) 5
连接缓冲液(Ligation Buffer) 16
连接酶(Ligase) 6
无酶水(Nuclease-free Water) 3
表7
温度(℃) 时间
25 15min
4 保持
待接头连接反应结束后，加入64μL磁珠进行产物纯化，置于磁力架上去除上清液，加入15μL无酶水重悬磁珠，涡旋振荡器混合均匀，室温放置2min；取上清液，加入25μL PCR预混液(PCR Mix)、8μL预文库扩增引物(Pre-Primer Mix)，混合均匀后快速离心5s，置于磁力架上1min，取上清液转移至新的PCR管中，根据表8和表9执行PCR反应，其中，表8的循环数N根据表9确定；
表8
Figure BDA0003014201890000091
表9
Figure BDA0003014201890000092
Figure BDA0003014201890000101
待PCR扩增结束后，向产物中加入40μL磁珠进行纯化，置于磁力架上去除上清液，加入21μL无酶水重悬磁珠，充分吹打混匀，室温静置2min，置于磁力架上，待溶液澄清后小心吸取20μL上清液转移至新的无核酸酶管中，进行质检，文库总量≥200ng、片段大小为220bp～400bp即为质检合格的预文库。
实施例3目的片段捕获
(1)将200～500ng定量后的预文库转移至新的离心管中，使用浓缩干燥仪浓缩(温度不超过45℃)，随后加入5μL无酶水和7.7μL通用封闭混合液(Universal Blocker Mix(IL))，充分震荡混匀，置于PCR仪(带热盖模式)上按照表10执行程序；
表10
温度(℃) 时间
95 5min
65 保持
(2)在1.5mL EP管中按照表11配制杂交混合液，混匀后快速离心，全部转移到上述预文库混合液中(始终保持于PCR仪上)，轻轻吹打后，65℃杂交16h；
表11
Figure BDA0003014201890000102
(3)预文库与探针杂交完成后，加入200μL磁珠，移液枪吹打混匀，室温旋转孵育30min，随后从旋转器上取下离心管，简短离心后，置于磁力架上待液体清澈，吸弃上清；加入200μL清洗液重悬磁珠，振荡器上混匀5s，室温孵育15min，每间隔5min在涡旋振荡器上震荡一次，简短离心后，置于磁力架上待液体清澈，吸弃上清；
置于65℃PCR仪上，立即加入200μL预热好的清洗液，吹打混匀，65℃孵育10min，共3次，吸弃上清后再简短离心，用移液枪吸弃残余液体；
加入20μL无酶水重悬磁珠，上下吹打混匀，将全部磁珠悬液加入到新的PCR管中，即为探针捕获文库。
实施例4文库扩增和测序
按照表12配制PCR反应体系，上下吹打混合均匀，置于PCR仪上，按照表13执行PCR扩增；
表12
成分 体积(μL)
磁珠悬液 20
PCR预混液(PCR Mix) 25
PCR引物(Post-Primer Mix) 5
表13
Figure BDA0003014201890000103
Figure BDA0003014201890000111
PCR扩增完成后，将PCR管置于磁力架上静置1min，吸取上清液转移至新的PCR管中，随后加入40μL磁珠，吹打混匀，室温放置5min，置于磁力架上待液体澄清弃上清液；
加入200μL 80％乙醇静置1min，弃上清；再加入200μL 80％乙醇静置30s，弃上清，快速离心后用移液枪吸弃残余乙醇，室温放置3min干燥；
从磁力架上取下管子，加入20μL TE缓冲液洗脱，吹打混匀后室温静置5min，置于磁力架上待液体澄清，吸取上清液，转移至新的无核酸酶管中；
使用Qubit对文库进行浓度测定，使用Agilent 2100对样本进行质检，杂交捕获文库的峰值约为220～400bp，一般浓度约为5～15ng/μL；
将文库进行变性稀释后混合上样，按照PE75模式上机测序，组织样本的测序深度为1200X，血液对照样本的测序深度为500X；
对测序结果进行质控分析和突变分析，Q30＞80％、比对率＞90％、目标区域覆盖度＞90％，样本数据量高于预期数据量，可以进行后续数据分析。
如图3和图4所示，样本在DNA层面检测出EWSR1-FLI1融合变异，在RNA层面也检测出EWSR1-FLI1融合变异。
综上所述，本发明针对尤文肉瘤常见的基因融合突变形式，设计全面覆盖融合基因突变位点的探针组合物，实现了基于杂交捕获高通量测序的尤文肉瘤相关融合基因的检出，在尤文肉瘤的精准分子分型及治疗、预后相关提示等方面具有重要意义。
申请人声明，本发明通过上述实施例来说明本发明的详细方法，但本发明并不局限于上述详细方法，即不意味着本发明必须依赖上述详细方法才能实施。所属技术领域的技术人员应该明了，对本发明的任何改进，对本发明产品各原料的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选择等，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。
SEQUENCE LISTING
<110> 上海宝藤生物医药科技股份有限公司；上海宝藤医学检验所有限公司；上海张江医学创新研究院
<120> 一种尤文肉瘤相关融合基因检测探针组合物、试剂盒及其应用
<130> 20210208
<160> 204
<170> PatentIn version 3.3
<210> 1
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gggaaggagc atgggttgat tggcacaaaa gtaggtctgc tgataaagaa tggaagtaaa 60
ggggccatca ggtagaagct tttgctgtga gtcagaagga caatttaaaa gttgcctaaa 120
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<400> 2
gaggcacacg ccatctctgc tgctgccttc cagttggaag ggaaactcag gttcttgcct 60
aatggccgaa gcccttcaca gaacgtcccc cacccctaac agctgcccac tgcccctccc 120
<210> 3
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 3
cctctgcaga atgtctgggg tcctatgttc caggaacctg tttactttca aattttccct 60
gtttcagttg gactcaggag catctggtga gccaggtcac tctctgggtc ttacccttgg 120
<210> 4
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 4
cttttcttat tgcggaaact gccagacggc ggtggtcagt gcccagcctg aggggatggc 60
ttcgaatgga ggtaagcctg tagggatgag ggcattatct gagtctgcca tgcctcaact 120
<210> 5
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 5
gtctccacag catacccagt gctgggaccg ggcgtgaccg cgaaccctgg cacctccctg 60
tctgtgttca cggctctgcc cttcaccaca cccgctcccg gcccagcaca cgggccgctc 120
<210> 6
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 6
cttgtgactg caggggctcc tccaggcggc cctctggtgc tgtctacctt ccccagcaca 60
cctctggtga cagaacagga tggctgcggc ccgagtgggg ccggggcttc caacgtcttt 120
<210> 7
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 7
gtccagatga ggacagaggt ggggcctgtg aaggccgctc aggcgcagac cttggtccta 60
actcaggccc ccctcgtctg gcaggctcca ggcgccctct gcggaggtgt tgtgtgtcca 120
<210> 8
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 8
cctcccctac tcctggcagc tgctcctgtg gtgcctgtta tggctgccca ggtggttggg 60
ggcacccagg cctgtgaggg aggctggtcc cagggccttc ctcttccacc accaccacca 120
<210> 9
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 9
ccggctgccc agctgccccc cattgtgtcc caagggaatg ctgggccatg gccacaaggg 60
gctcatggag agagcagcct ggcttcctcc caggccaagg ccccgccaga tgactcctgt 120
<210> 10
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 10
aaccccagga gtgtctatga gaacttccga ctctggcagc actacaagcc cctggcccgg 60
aggcaccttc cccagagtcc tgacaccgaa gcgctttcgt gcttcctcat gtgagtgtcc 120
<210> 11
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 11
tgggcttggg atgaagggtg ggcttataga ctgagactga ctgcactggt ttacagccca 60
gttctccgat cgctggcccg gcggaagccc accatgaccc tggaggaggg actgtggcgg 120
<210> 12
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 12
gccatgcggg aatggcagca cacgagcaac tttgaccgga tgatcttcta cgagatggcg 60
gaaaagtgag tctggggtcc tgggagcagg gcccgcgtgg cagggtgaga gtgaatgaca 120
<210> 13
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 13
ggagggggcc tggaccctct cagcacagcc tgggcctcct tcaccgccag gttcctggag 60
tttgaggctg aggaggagat gcagattcag aaatcgcaat ggatgaaggg gccccagtgc 120
<210> 14
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 14
ctgcctcctc cagccacacc gaggcttgaa cctcgaggac ccccggcccc tgaggtggtc 60
aagcagccag gtatggcttc ccacattccc acaggagcca tggcaaaggc caaaagggcc 120
<210> 15
<211> 119
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 15
ggagcggccc tcaccacgcc cgtcctcctc cctctctgcc tcagtgtacc ttcccagcaa 60
ggccggcccc aaggccccga ctgcctgcct gccaccaccc aggccccaga ggccagtga 119
<210> 16
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 16
tgccaccacc caggccccag agaccagcag agaccaaggt ccctgaggag atccccccag 60
aagtggtgca ggagtatgtg gacatcatgg aggagctgct ggggccttcc ctcggggcca 120
<210> 17
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 17
cgggggagcc cgagaaacaa cgggaagagg gcaaagtgaa gcagccacag gaagaggact 60
ggacgccccc agacccgggc ctcctgagct acattgacaa gctgtgttcc cagaaagact 120
<210> 18
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 18
tcgtcaccaa ggtgggctgg cctggagtgc tggggtctgc tggattccag gggctggcac 60
tcccaggtcc ttggaattaa gctctgttcc ttagctactc agcagtgtgt gtatttccat 120
<210> 19
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 19
aggtggaggc cgtcattcat ccccaattcc tggaagaatt gctttcccca gatccacaga 60
tggatttctt ggccctaagc caggacctgg agcaggagga aggactcacc cttgcccagg 120
<210> 20
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 20
cagtgccagt aagtgccccc tttcctcccg cagctagtgg agaagcgcct cccacccttg 60
aaggagaaac agcatgcgag ggcagcccct agtcgtggca cagcccggtt ggactcaagt 120
<210> 21
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 21
tcttctaagt ttgcagctgg ccaaggagca gagagagacg tccctgaccc ccaacaaggg 60
gttggcatgg aaacctgccc accccagatg actgcccggg actctcaggg acgaggcaga 120
<210> 22
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 22
gcacacactg gcatggccag gtccgaagac tctgttgtgc ttttgggatg tcaggattcc 60
cctgggctga gggctgcctg gccaacctct cctccccagg accacagacc cacctgccct 120
<210> 23
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 23
ggcgtgggta ccaaggatgc cttggatctc cctggagggt ctcctgtcag ggagtcacat 60
gggctggctc aggggtcaag tgaggaggag gaactcccca gcctggcctt cctcttgggt 120
<210> 24
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 24
tcccagcaca agcttctgcc ctggtggcta ccccagagcc ctgtccctgc ctcgggcctt 60
ctcagcccag aaaagtgggg accccaggga actcatcagt ccccatctgc tgagagaaga 120
<210> 25
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 25
ggcctcaacc tagcaccttc tcctgccaac aaggccaaga agcgacctct ctttggaagc 60
ctgtcccctg ctgaaaagac accctaccca gggcctgggc tcagggtctc tggggagcaa 120
<210> 26
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 26
tccctgactt gggggctggg tggcccctca cagtctcaaa agagaaaggg tgaccccttg 60
gtctccagga aggagaagaa gcagcattgt agccagtagg ggcttctgag caggctctct 120
<210> 27
<211> 119
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 27
ggggccaatc cccaaggatg gggctctggc atccgatgcc ccaaagcggt caaaagcttc 60
ttctccccca gtgctgatct tgctgggcct tagctttgga gggtagggga gggagggga 119
<210> 28
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 28
gctggggagt gggggtggga agcagtgcgt tgggggcctc gtgtgtaagt gtgaataaat 60
gtagttgtct tggaaaatgc tcttggggct gctgcctctg tcctcggtgc tgtgctgctc 120
<210> 29
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 29
aacccacagg ggccggcccc actctttcct cctgatgtag ggagcccctt cagatgctcc 60
agggactgac agatgctgag gaagccctga tccctcccac taccgactca caaggccctg 120
<210> 30
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 30
actcagcggt gttggaactt cgttgcttgc ttgcctgtgc gcgcgtgcgc ggacatggcc 60
tcaaacggta ggtaagggcg cgaggcgacg gcggcggcgc acccggccga ggcctcccag 120
<210> 31
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 31
tttcagagtg gcagctgaag ataatgtgat tgtatttttc ttttgcagat tatacccaac 60
aagcaaccca aaggtgagtg ctatttttgg gcttccagag tttgtagagg gcaagggtgg 120
<210> 32
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 32
gtcacgccat gttttctgat cacgctggtt ttccttttat ttagctatgg ggcctacccc 60
acccagcccg ggcagggcta ttcccagcag agcagtcagc cctacggaca gcagagttac 120
<210> 33
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 33
agtggttata gccagtccac ggacacttca ggctatggcc agagcagcta ttcttcttat 60
ggccagagcc agaacagtga gtctttctca gcgggtcacc tcttcctact ctttctgaat 120
<210> 34
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 34
ttctctttcc tggtggcttt tgtgactccc tttttcttat cctggtagca ggctatggaa 60
ctcagtcaac tccccaggga tatggctcga ctggcggcta tggcagtagc cagagctccc 120
<210> 35
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 35
aatcgtctta cgggcagcag tcctcctacc ctggctatgg ccagcagcca gctcccagca 60
gcacctcggg aaggtacggt ggtgttgatg tcggggaagg cttgaaaaga ggggtgaatt 120
<210> 36
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 36
gaaaggaaat tgggggctat gctgggattg tgattgtgtt ttttgtttgt tttccctagt 60
tacggtagca gttctcagag cagcagctat gggcagcccc agagtgggag ctacagccag 120
<210> 37
<211> 119
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 37
cagcctagct atggtggaca gcagcaaagc tatggacagc agcaaagcta taatccccct 60
cagggctatg gacagcagaa ccagtacaac agcagcagtg gtggtggagg tggaggtgg 119
<210> 38
<211> 119
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 38
cattctttct tttctcacag gtaactatgg ccaagatcaa tcctccatga gtagtggtgg 60
tggcagtggt ggcggttatg gcaatcaaga ccagagtggt ggaggtggca gcggtggct 119
<210> 39
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 39
ggcggcggcg gcggtggtgg ttacaaccgc agcagtggtg gctatgaacc cagaggtcgt 60
ggaggtggcc gtggaggcag aggtggcatg gggtaggtgt ctcatgagcc agggagtatc 120
<210> 40
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 40
gttggaagct tcatgtcctt tcttctaact tgtcttctcc agcggaagtg accgtggtgg 60
cttcaataaa tttggtggta agtgaacaga gtttccaaaa ttcccaactc ccagcaatgc 120
<210> 41
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 41
ttgtttttgt tttttttttg ttcttttttt ccatgtcact aaaggccctc gggaccaagg 60
atcacgtcat gactccggtg agttcacacg tggtggcatg aaaagagtgg ctaaagtggt 120
<210> 42
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 42
acaagcagaa caggataatt cagacaacaa caccatcttt gtgcaaggcc tgggtgagaa 60
tgttacaatt gagtctgtgg ctgattactt caagcagatt ggtattatta aggtacttgt 120
<210> 43
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 43
gaaagggagt actgtagcct ttaaaattga tgttacctca ttttgctttc ttcagacaaa 60
caagaaaacg ggacagccca tgattaattt gtacacagac agggaaactg gcaagctgaa 120
<210> 44
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 44
gggagaggca acggtctctt ttgatgaccc accttcagct aaagcagcta ttgactggtt 60
tgatggtatg tatgagaagg ctggcagagg tggggctggg gatatagggc agcaagcctt 120
<210> 45
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 45
tttctctagg taaagaattc tccggaaatc ctatcaaggt ctcatttgct actcgccggg 60
cagactttaa tcggggtggt ggcaatggtc gtggaggccg agggcgagga ggtgaggagc 120
<210> 46
<211> 119
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 46
aaggcttgca tggaatgggt tagatttacc aaacttggag agggagcaga cccatacttg 60
gtctatctgc attaggaccc atgggccgtg gaggctatgg aggtggtggc agtggtggt 119
<210> 47
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 47
ggaggtggtg gcggtggagg acagcagcga gctggtgact ggaagtgtcc taatccgtga 60
gtgaaactta atttttttct tagttctctt gcatgcgtgc tctttgatat attggtactg 120
<210> 48
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 48
ttctccttag cacctgtgag aatatgaact tctcttggag gaatgaatgc aaccagtgta 60
aggcccctaa accagatggc ccaggagggg gaccaggtgg ctctcacatg ggtaagaaag 120
<210> 49
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 49
acatagggga atgggaatat gatagatctt gtttcttttg tcctaggggg taactacggg 60
gatgatcgtc gtggtggcag aggaggctat gatcgaggcg gctaccgggg ccgcggcggg 120
<210> 50
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 50
gaccgtggag gcttccgagg gggccggggt ggtggggaca gaggtggctt tggccctggc 60
aagatggatt ccaggtaaga ctttaaatca gaataaaaaa gtagagcagt tgaacagagg 120
<210> 51
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 51
aaatataatg gatacttaat tttttttttt ttttttgcag gggtgagcac agacaggatc 60
gcagggagag gccgtattaa ttagcctggc tccccaggtt ctggaacagc tttttgtcct 120
<210> 52
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 52
tggtcagaga tggtttctct tgttggctta tgtctcactg attttcgtct tccacgtcct 60
gcagcgcttc tttattctgc tcttcacctg ttaaaaaaga aaaaaagtca attatttcgt 120
<210> 53
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 53
tgaaagcgga attcactgtg ccatgaacgt gacttacaaa gtagagtttt taggaaagga 60
agagttgggt tttcctttag gaatctatat tgcaaggaaa aagggaggga gaacaatcat 120
<210> 54
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 54
aaacaaatcc tgcaactgaa agaggtgcct gtttcactcc gtgcttgctt accgtcaccc 60
tgcatgtctg aagtccatag tgtcagatta tcacgtaaca actgcatgat aagtgtagag 120
<210> 55
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 55
tccttatagc tttcttcact cagcgtatcc agttctgcaa ttgcatcatc aaaagctgct 60
tttgccaacc taaaggtatt tcaatagaag tgttataaaa attaagtcca aaatcagaat 120
<210> 56
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 56
tcttccccac aacttacctg caggcacggt caggggaatt aagaatttcg tagtagaata 60
cggaaaaatt gagagcaaga cctaagcgaa taggatgcgt tggtggaagt tctgtcattg 120
<210> 57
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 57
caatatcact agcagcttta taagccacta ggctgttctc cgcagcctcc ttcctgtcgt 60
ttcctgtggc aaattctgcc agatacctgt ggtagtcccc tttcctaaaa caaaaccaaa 120
<210> 58
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 58
aacctacatt ttataataga aaaccttgga ctcgccagtg ttagctgctg gaatgaggtg 60
tttgtccagt acatccagaa tgtcacaaca gattaacttt agctcagtct caacctaaaa 120
<210> 59
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 59
tgatggcaca acaatctcac catttgccga tattcccgaa tcatttttag cttgtcttct 60
cctcccttgt tttcttcttt ctgttcaatg ctgctgatta ttctccagga ggctcttcta 120
<210> 60
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 60
gctccaatca cattcttata tgcaacagat aggaggtttc tttcttcaac tgtcagctcc 60
acatccatcc ctgctacttt cttcattgac tccaccattt ctgtatggga aaaggaaaag 120
<210> 61
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 61
tccagccccc cgttgccccc ccaactcacc gtcgtatcgc tcagcctgct cggccagctt 60
cgcctggtac accagatcct ctcgatcatc catagcggca gcggctccgg cagggtctgc 120
<210> 62
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 62
ctgccgggtc ccccctgcgc cggaccatgt attcggccca caggcccctg atgcccgcgt 60
ccagcgcggc ctcccgtggc ctcggcatgt tcggtcagta gcgcctgggc cctgggactg 120
<210> 63
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 63
ggccaggctc tcctgctgca cagctcacct ggctcctttc cacagtgtgg acgaatgtgg 60
aacctcgctc tgtggctgtg ttcccttggc actccttagt ccccttcctg gcacccagcc 120
<210> 64
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 64
agcctgaccc ctccgtgcag ccgagcgagg cccagcaacc tgccagccac ccagtggcct 60
ccaaccagag caaaggtgag ggctggtggg gactgggggg aggcaagggt gtggggtcca 120
<210> 65
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 65
agaacctgct gagtcggcag ctgttgctca tgaacggcca ccaggtggga cagggagtgc 60
tgaccctgag cggccccctg gagccacatg ccctgagagc ccaggacccg gacccccaca 120
<210> 66
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 66
ccctttgggg gtggtggaat ctggtaaggg tccgcctccc accacggagg aggaggcctc 60
cggcccccca ggagagcccc ggctggacag tgagacagag agtgaccatg atgatgcgtg 120
<210> 67
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 67
tgggggtggg atggccagag acatggccct cactgtccct gctgccccgc cgcagcttcc 60
tctccatcat gtctcctgag atccagttgc ctctaccgcc cggaaaacgt cggacccagt 120
<210> 68
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 68
ccctcagtgc cctacccaag gaacgggact catcttctga gaaggatgga cgcagcccca 60
acaaggtact ttatccctgc ctgtcctgtg ctcaccccgt ggccacccac acctgtctgc 120
<210> 69
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 69
gtcccgctct gggctgtgtt taatgcagcg ggagaaggac cacatccggc ggcccatgaa 60
tgccttcatg atcttcagca agcggcaccg ggccctggtc caccagcgtc atcccaacca 120
<210> 70
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 70
ggacaaccgg accgtcagca agatcctggg cgagtggtgg tatgccctgg ggcccaagga 60
gaagcagaag taccacgacc tggccttcca ggtaacgctg ttgcctcttg gctcctccca 120
<210> 71
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 71
tgggtgagtg aagggttgcc ctgccctctc ctgccaggtg aaggaggccc acttcaaggc 60
ccacccagat tggaagtggt gcaacaagga ccgaaagaag tccagctcag aggccaagcc 120
<210> 72
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 72
cacgagcctg gggctggcag gagggcacaa ggagacgcgg gagcggagca tgtcggagac 60
gggcactgct gctgcccctg ggggttagtc agccccttgg ctctcccacc ctgccacctc 120
<210> 73
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 73
ccactctcta ctttacagtg tcctctgagc tcctgtccgt tgcagcccag acactcctga 60
gctcagacac caaggctccg gggagcagct cctgtggggc agaacggcta cacacagttg 120
<210> 74
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 74
ggggacctgg ctcagcccgg ccccgagctt tctcccacag cggggtacac agcctggacg 60
gcggagaagt agacagtcag gcgctacagg aactgacgca ggtctagggt gcaggccccc 120
<210> 75
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 75
cctgcagatg gtgtctggcc ctgcatcgta ctctggccca aagccttcta cccagtatgg 60
agctccagga ccctttgcag cccctggtga gggaggtgcc ttggcggcca ctgggcggcc 120
<210> 76
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 76
cccgctgctg cccacccgag cttctcgttc tcagcgtgcg gccagtgagg acatgacgag 60
tgatgaggag cgcatggtca tctgtgagga ggaaggggat gatgatgtca ttggtgagca 120
<210> 77
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 77
tccctcagct gacgatggct tcggcaccac tgacattgat ctcaagtgca aggagcgggt 60
gaccgacagc gagagtgggg acagctctgg ggaggaccca gagggcaaca aggtgagggc 120
<210> 78
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 78
tcggagtgtc ctgacctggg gtgtctccct tcctttcatg cagggctttg gtcggaaggt 60
gttttcacct gtgatccgtt cctcctttac ccactgccgc cccccactgg accctgagcc 120
<210> 79
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 79
cccagggccc ccggatcctc ctgtagcctt tggcaaaggc tatggttccg ccccatcctc 60
ctctgcgtcc tcgcctgctt cctcctcagc ctcggcagcc acctccttct cactgggctc 120
<210> 80
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 80
aggaaccttc aaggcccagg agtctggtca gggcagcaca gcgggccccc tacggccccc 60
accccctggg gctgggggtc cagcgacacc ttccaaggca acccggttcc tcccaatgga 120
<210> 81
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 81
tcctgccacc ttccggcgca agagacccga aagtgtgggt ggcctggagc caccaggccc 60
ctcagtcatc gcggcccctc ccagcggagg aggaaacatc ctgcagacac tggtgctgcc 120
<210> 82
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 82
cccaaacaag gaggagcaag agggcggcgg agccagagtg ccctccgccc ccgccccatc 60
actggcctat ggggccccag cagctcccct gtcccgtcct gccgccacca tggtcaccaa 120
<210> 83
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 83
tgtggtgcgg cctgtcagca gcactcctgt gcccatcgcc tctaagccct tccccacctc 60
tggccgggct gaggcgtctc caaatgacac agcaggtgcc aggactgaaa tgggcactgg 120
<210> 84
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 84
gtctcgggtg cctgggggct ccccgctggg tgtcagctta gtgtattcgg acaagaagtc 60
ggcagcagcc acctcaccag ccccacactt ggtggctgga cccctgctgg gcactgtggg 120
<210> 85
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 85
gaaggcgcct gccactgtca ctaacctact ggtgggcacc ccggggtatg gggcccctgc 60
gccccctgct gtccagttca ttgcccaggg ggcccctggt ggtgggacca ctgcgggctc 120
<210> 86
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 86
aggagcaggt gctgggagtg gccccaatgg gccagtaccc ctgggcatcc tgcaaccagg 60
tgccctgggc aaggctgggg gaatcaccca ggtacagtac atcctgccca cgctgcccca 120
<210> 87
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 87
gcagcttcag gtggcacctg ccccagcacc agcccctggg accaaggcag cggctcccag 60
cggccctgca cccaccacca gcatccgttt caccctccca ccgggcactt ccaccaacgg 120
<210> 88
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 88
caaagtcctg gctgccactg cacccactcc tggcatcccc atcctgcagt ctgtaccctc 60
cgccccaccc cccaaaggtg agacctgggc cgggcagcac taggggaggg gccatagtcc 120
<210> 89
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 89
ttcctttctt gcctcttaac ttccagccca gtcagtttct cccgtgcagg ccccgccccc 60
gggtggctca gcccagctgc tgcctgggaa ggtcctagtg cctctggccg cccctagcat 120
<210> 90
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 90
gtcagtgcgg ggtggagggg ccggccagcc actgccactg gtgagcccgc ccttctcagt 60
acctgtgcag aatggtgccc agccccccag caaggtgagg gcctgccttt ctctctacct 120
<210> 91
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 91
tcccctgccc cagtctgggg ccacagctca ccctggccta tgggtgccct tctccacaga 60
tcatccagct gaccccggtg cctgtgagca cacccagcgg cctggtgccg cccctgagcc 120
<210> 92
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 92
cagccacact ccctggaccc acctctcagc ctcagaaggt cctgttgccc tcctccacca 60
ggtaattgca gctgagccca tactcagagg ccagggaagg ggtggggcgg ggccggctta 120
<210> 93
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 93
ttacctcact cctccccatt tcctctcctg cggcagaatc acctatgtgc agtcagcggg 60
cgggcacgcg ctgcccctgg gtaccagccc tgcgtccagc caggctggaa cagtcacctc 120
<210> 94
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 94
gtacgggccc acgagctctg tagctctagg cttcacctcg ctggggccca gcggccccgc 60
cttcgtgcag cccctgctct caggtgaggg gcggcctggc aggcagtgct ggggacccag 120
<210> 95
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 95
tgaggggcgg cctggcaggc agtgctgggg acccagggtg gggctgaggc agtccgggcc 60
ctaacttggt ctcctgcttc ttcttctctg tctttcagca ggccaagccc cactgctggc 120
<210> 96
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 96
tcccggtcag gtgggcgtgt cacctgtgcc cagtccccag ctgccgcctg cctgtgcagc 60
ccccggaggt cctgtcataa cagcatttta ctctggcagc cctgcaccca cctcctcagc 120
<210> 97
<211> 119
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 97
acccctggcc cagccatccc aggccccccc aagcctggtc tacactgtgg ccaccagcac 60
aaccccacct gcagccacca ttctgcccaa gggcccgcca gcccctgcca ctgccaccc 119
<210> 98
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 98
tagccctttc cccagcgcca caggtaggtg tcagatcaac ccagagcaga gtgagttggg 60
ggacccaggg gatgggctcc agtcaggcct ggctcagcaa acaattttct ccccactagc 120
<210> 99
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 99
aattttctcc ccactagcag gttccatgac ctacagctta gtggccccca aggcccagcg 60
gcccagcccg aaggcccccc agaaagtgaa ggcagccatc gccagcattc ccgtggggtc 120
<210> 100
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 100
ctttgaggca ggtgcctctg ggcggcctgg ccctgcaccc cggcagcctc tggagcctgg 60
cccagtccga gagccaactg ccccagagtc tgagcttgag gggcagccca caccaccagc 120
<210> 101
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 101
ccctccaccc ctgccagaga cctggactcc cacggcccgg agcagccccc cactgccccc 60
acctgctgag gagcggacca gcgccaaggg ccctgagacc atggtgagcg cctgcaggcc 120
<210> 102
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 102
cctttgcccc agagtctgag ctcagtgttc gccatctccc tgcccatctc caccccaggc 60
cagcaaattc cccagctcat cttcagactg gcgcgtccct gggcagggcc tggagaatcg 120
<210> 103
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 103
tggggagcct cccactcctc ccagcccggc cccagctcca gctgtagccc ctggtggcag 60
cagcgagagc agcagtgggc gggcagccgg ggacaccccg gagcgcaagg aggcggctgg 120
<210> 104
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 104
tactggcaag aaggtgaagg tgcggccccc gcccctgaag aagacctttg actctgtgga 60
caagtgagca tgggctgggg ccttggtgga gcgtgttagg gtggcgggag tgggagcagc 120
<210> 105
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 105
ctgcaggctg aggcggggga ggtgaccctg ccggccctcc agcagggtcc tgtcagaagt 60
ggacttcgaa gagcgctttg ctgagttgcc tgagtttcgg cctgaggagg tgctgccctc 120
<210> 106
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 106
ccccaccctg cagtctctgg ccacctcacc ccgggccatc ctgggctctt accgcaagaa 60
gaggaagaac tccacgggta ggcgagcatt gggcacccag ggtccttagg tggagggcag 120
<210> 107
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 107
taggtggagg gcagactggg gccacctgca ctgagtctgc ttctgtttgg ccagacctgg 60
attcagcacc cgaggacccc acctcgccca agcgcaagat gagaagacgc tccagctgca 120
<210> 108
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 108
gctcggagcc caacaccccc aagagtgcca agtgcgaggg ggacatcttc acctttgacc 60
gtacaggtgc cgtggtgggc agaactttgg gggcctgggg acctgcaaga ggagtgggtc 120
<210> 109
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 109
caggaaggcc ctgccgctgc tgcagccttg ccatgctgcc tgtgccctgc acaggtacag 60
aagccgagga cgtgcttggg gagctagagt atgacaaggt gccatactcc tccctgcggc 120
<210> 110
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 110
gcaccctgga ccagcgccgg gccctggtca tgcagctctt tcaggaccat ggcttcttcc 60
cgtcaggtga gcctgtctcg gagtcttggg gtcactcggg tgggacttat ctgtacatct 120
<210> 111
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 111
tgggacttat ctgtacatct catcctgtgc tccccaccgt ttttctatct ccagcccagg 60
ccacagccgc cttccaggcc cgctatgcag acatctttcc ctccaaggtt tgtctgcagt 120
<210> 112
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 112
tgaagatccg tgaggtgcgc cagaagatca tgcaggctgc cactcccacg gagcagcccc 60
ctggagctga ggctcctctc cctgtaccgc cccccactgg caccgctgct gcccctgccc 120
<210> 113
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 113
ccactcccag ccccgcaggg ggccctgacc ccacctcacc cagctcggac tctggcacgg 60
cccaggctgc cccgccactg cctccacccc cagagtcggg gcctggacag cctggctggg 120
<210> 114
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 114
agggggctcc ccagccctcc cccccacccc caggtccctc cacagctgcc acaggcaggt 60
gagggacccc tgagaagatg ccaggactta tagtaccccc tcaggacatg gacagtatgt 120
<210> 115
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 115
gggggcagga aggttatctc ctcccgggta aagccatttc gtcctctcca gtttggggcg 60
gaatgaggcc tgctcctctt gtaaataccc ccttccctcg aagctccctc ccggtgctgg 120
<210> 116
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 116
ggggcagctg aggggctgca ggggcagtct ccctcctcca agcccctgta cataacctgg 60
agcgtgtgac cttcagagct tttcacttta tgcaaaatgg ctcctgtgag ggctgcaagc 120
<210> 117
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 117
tggagggtgg tgcaggcctt gggccacagg gaggcgcctg tggaataggg ggagttcatg 60
cacccctttt ttccccagag gggctggact caggttagtt tgggggtggg ggctcctgca 120
<210> 118
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 118
ctttgccaca ggcacgggga gggttttctc ctcaccccct ctgccctccc aacttgggtt 60
gtactttcta agaaggtgat tccccctgcc cttgccccct tccccagaac aaaacatgtt 120
<210> 119
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 119
gatcatgtgc aatatttctt actgtgccga gaagccgcaa tgagcgagat taaagctgtt 60
taacacacct gtgtggctgt aggctcttaa cagggagggc tgttggttgt accagtcctg 120
<210> 120
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 120
agaacgagga ggaaggagag aaaatggcgt ccacgggtga gtatggtgga actgcggtcg 60
cgccggcggt agccggaacg cccaaactgg gggtcgttcg tctctgggct tggctgggaa 120
<210> 121
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 121
tctgctaact ttacactatt tttcctcctt gttttcctct agattacagt acctatagcc 60
aagctgcagc gcagcagggg taagtcagtc ttttataacc gtattttgtg tgtgattaat 120
<210> 122
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 122
tctattcaag ttattgcatt taattctttt gcagctacag tgcttacacc gcccagccca 60
ctcaaggata tgcacagacc acccaggtaa tctttaaaat aattacatgt agctgcacct 120
<210> 123
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 123
ttgctaaaat acaaaagttc atgtatgaag ttcttgcatt cgtttttttt tggagcaggc 60
atatgggcaa caaagctatg gaacctatgg acagcccact gatgtcagct atacccaggc 120
<210> 124
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 124
tcagaccact gcaacctatg ggcagaccgc ctatgcaact tcttatggac agcctcccac 60
tggtaaggcc tgccttggag agatttttgg gtcgttctgg ctagggcatt ggctaagaag 120
<210> 125
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 125
ttgcttcatc tgatagtgta ccctctactt tttgttttgt gctttccaca gtagaaggga 60
ccagtacagg tttgactatc ctgctcattc ttgcatggga aatgctttcc atcttgtcta 120
<210> 126
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 126
tctgatgcag ctctcctttg ttctaggtta tactactcca actgcccccc aggcatacag 60
ccagcctgtc caggggtatg gcactggtgc ttatgatacc accactgcta cagtcaccac 120
<210> 127
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 127
cacccaggcc tcctatgcag ctcagtctgc atatggcact cagcctgctt atccagccta 60
tgggcagcag ccagcagcca ctgcacctac aaggtaaggc catggtgtcc ttaatgcgtc 120
<210> 128
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 128
tcacttttta attttattta ttatttctcc tcttagaccg caggatggaa acaagcccac 60
tgagactagt caacctcaat ctagcacagg gggttacaac cagcccagcc taggatatgg 120
<210> 129
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 129
acagagtaac tacagttatc cccaggtacc tgggagctac cccatgcagc cagtcactgc 60
acctccatcc taccctccta ccaggtcagt ctactttttg tggcaaaaca aaaacagtga 120
<210> 130
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 130
tctctctctt tcagctattc ctctacacag ccgactagtt atgatcagag cagttactct 60
cagcagaaca cctatgggca accgagcagc tatggacagc agagtagcta tggtcaacaa 120
<210> 131
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 131
agcagctatg ggcagcagcc tcccactagt tacccacccc aaactggatc ctacagccaa 60
gctccaagtc aatatagcca acagagcagc agctacgggc agcagagtga gttgctaaga 120
<210> 132
<211> 119
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 132
atagccaaca gagcagcagc tacgggcagc agagtgagtt gctaagagag aaaaccaaat 60
aagaatgaat gtgtttagag tttttttgtg gggttgattt tttttgttgg tttgttttt 119
<210> 133
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 133
catggcttac agatgtgact ctttcctcag gttcattccg acaggaccac cccagtagca 60
tgggtgttta tgggcaggag tctggaggat tttccggacc aggagagaac cggagcatga 120
<210> 134
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 134
gtggccctga taaccggggc aggggaagag ggggatttga tcgtggaggc atgagcagag 60
gtgggcgggg aggaggacgc ggtggaatgg ggtaagagca aaccttttct ccttttacct 120
<210> 135
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 135
gaacttcaaa attaaagttg atttttaact tccatattag caaatactct tcactactga 60
aagacagtac tattttgcat attctgcata actttaagaa agtctttagt gaaatcttta 120
<210> 136
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 136
cgtggaaact ttttaacatg ctttgtcgca tttatatgct acaggttaca aagtgagagc 60
cttgtataca cttcaatact taaaaagtac ccgtactcag tactcagccg gcagcataat 120
<210> 137
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 137
gaaaagtggg actagacacg gtgtccatat ggagaggaaa aatatacata gaatattttt 60
aacaaaatgt attcattgta taaatggaat ccttctgtaa ctttggtaac tgcatacttg 120
<210> 138
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 138
ttgtttggta atgaaccaga ggaggtataa tactctagaa ttgtgtaaca ttaaagtgta 60
aacttttgtg tttaaagaga gagaacattt tatggtgtgt acttttaaaa aggaaacaaa 120
<210> 139
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 139
tttaaaggga aaggccttca tttcttcgtt tatcccccca gcagcgctgg agagcgaggt 60
ggcttcaata agcctggtgg taagtttttg agtattacca tagatagtgt ttaaaaaaaa 120
<210> 140
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 140
gacgtgcact aataatattt tatatgatct ttcctggttg gcaggaccca tggatgaagg 60
accagatctt gatctaggta attttgaatt ctagttgtgc ttcatatcgt gctttgtaaa 120
<210> 141
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 141
gcccacctgt agatccagat gaagactctg acaacagtgc aatttatgta caaggattaa 60
atgacagtgt gactctagat gatctggcag acttctttaa gcagtgtggg gttgttaagg 120
<210> 142
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 142
tttctcccaa attagtatat tctagtcatg cctaactatg ctattctttg tctagatgaa 60
caagagaact gggcaaccca tgatccacat ctacctggac aaggaaacag gaaagcccaa 120
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<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 143
aggcgatgcc acagtgtcct atgaagaccc acccactgcc aaggctgccg tggaatggtt 60
tgatggtgag atgtactcac tggcattctt aatctccctg gctatagaat atggcatgag 120
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<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 144
tggagttggt gaacagggag tacaggggag taattgatgt tctgttgtct tgttccaggg 60
aaagattttc aagggagcaa acttaaagtc tcccttgctc ggaagaagcc tccaatgaac 120
<210> 145
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 145
agtatgcggg gtggtctgcc accccgtgag ggcagaggca tgccaccacc actccgtgga 60
ggtacttttt ctgagctcct atgttgcatt aaaaggtttt cagtacactt catacccttg 120
<210> 146
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 146
gagaaatgat ttgctgtttc ttgttgttct tgttgtaggt ccaggaggcc caggaggtcc 60
tgggggaccc atgggtcgca tgggaggccg tggaggagat agaggaggct tccctccaag 120
<210> 147
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 147
aggaccccgg ggttcccgag ggaacccctc tggaggagga aacgtccagc accgagctgg 60
agactggcag tgtcccaatc cgtatgtact tgtcttggca aattgatacc ctacgagtga 120
<210> 148
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 148
tagtgagtgt gtacctgttc acacaccacc tttccttgtt tatcttcctt agttcaattg 60
gtgatttctg ctgtgatgta attgtatgca ggggttgtgg aaaccagaac ttcgcctgga 120
<210> 149
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 149
gaacagagtg caaccagtgt aaggccccaa agcctgaagg cttcctcccg ccaccctttc 60
cgcccccggg taggtgcagg tttcatgagt gtcccctcag cttcctggtg ctaaacctct 120
<210> 150
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 150
cagggcctct gcagccaccc actgactgct ttcgccctgc tattctcacc ttaggtggtg 60
atcgtggcag aggtggccct ggtggcatgc ggggaggaag aggtggcctc atggatcgtg 120
<210> 151
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 151
gtggtcccgg tggaatgttc agaggtggcc gtggtggaga cagaggtggc ttccgtggtg 60
gccggggcat ggaccgaggt ggctttggtg gaggaagacg aggtggccct ggggggcccc 120
<210> 152
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 152
ctggaccttt gatggaacag atgggaggaa gaagaggagg acgtggagga cctggaaaaa 60
tggataagta agtgctggtg aaaagcagct gtgggccgcc aggcacagta agaggacagc 120
<210> 153
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 153
cccttcccat tctaaccgaa gggccctctt taccttgcag aggcgagcac cgtcaggagc 60
gcagagatcg gccctactag atgcagagac cccgcagagc tgcattgact accagattta 120
<210> 154
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 154
ctataacaca ctgtacatgg tgggtccagc ttgctcacca gtagttgtct gaggccagat 60
cactggggtg gagccactct acagaggagc ccagcagagt ctgaatttcg ttcgtgaatt 120
<210> 155
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 155
ccaccagatc taacagctcc ttactttcag ggttgaaggc ttccaggtct ttggagcaag 60
agaacaagag acttgcagaa acctgccgat aaaattctgc ctctgcaatg gtgacaattt 120
<210> 156
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 156
ccacgtttgg aaaattgcag cgaaatatgc gggaggacat tttcaatttc ttaaggacat 60
ccgaaagcag tagccagttt cgtggcctac aaaacagaaa ggaaaatgct ttgagtttcc 120
<210> 157
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 157
agcagctcag ctagttttca atcacatgac agccatgctc acccctgagc cacagatact 60
tggatgttat aacacggtaa gaggggggtc tctgaaaatt caaattcaaa cacatcgcta 120
<210> 158
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 158
taggcatcgt catcatcatc ctggtcttct ggtcctgggg ggttggctaa aacatcatag 60
ccactttcat catctggttc taatggaggg caaataagag aggaaggaat cagtaaacta 120
<210> 159
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 159
agagcaaaca atgcagctta ccacaaacag agctgccata gaagtcccaa gtgccactgg 60
cgtcatcatc attgcgaccc tggaggtcat ttaaataatc tggagggaga gaaaaataaa 120
<210> 160
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 160
ttatcatcta atttttgaat aagaccattt cttgaacttt gtcatacctg ttaagaactt 60
ttccataagt tcactgtggg tcattttcat gatggttcta cctgagtacg tagccaaggt 120
<210> 161
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 161
ggggtcagca ccataagaga gaagtagtcg gacaatttcc aagtgatcgt tctcaacagc 60
atcgtgcaga ggcctaggaa gagaggcgca atagaattat gctcatgcaa gccacacttg 120
<210> 162
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 162
agcagagcca ggctgagaac aagacacatc actgacctgg ttccatcctg ggcactacag 60
ttgacatcag cgccatattc aaggaggtgt cgcacaatgt tgagccagcc cctagcacaa 120
<210> 163
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 163
gcttcatgca gggcgcagta acctgcgttg tcccgatgat ttacatcaca aatcttgttc 60
tctaagcagt acaggaccac ttcctgtggg gaggggaggg aagaatgcca tcagatcact 120
<210> 164
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 164
gcaggccccg ccccccagcc tgcagcccca gggagcgccc acagggacac acctcatagc 60
caagcctggc tgcccgctgc agaagggtct cgccagcgtt cttattgaca ataagtctcc 120
<210> 165
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 165
gtgcttccgg cggcataggg cgagactggg tggtctcctg aggggaactt gagcatggca 60
gctgtgtgga ctgggaggct ggtagcagtt gctgcaagcg gtcgaagggc tttggctcct 120
<210> 166
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 166
gcttggctgg tgacagatca tagtccgaac tgggctccgg ccgctttctg aatctccgga 60
cagtcaccta tcataaaacc aagcagcgca cacggttaag cccgtgtcct tctaacagcc 120
<210> 167
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 167
ccggggtcaa gaggtacctt gccatcggca ttctccacgt agtattcccc tgtcagtggc 60
aatccccgcc tggactcctg agggatcaag tgtttggttt tgcacagtct cttcccggat 120
<210> 168
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 168
ggcttctcgc tgttgtcggt gtatttctgc agcagggagg cagcctggca atcctcttct 60
tcgtctgcac acagcacatc tgtcttctgg ttttctttaa ttttctgctg tttggcaggc 120
<210> 169
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 169
ggcctggagg ctggtgcgca gcttggctga gcctgctttt tgccgcctgc actggtggat 60
gaaagactct tcatgggcgg agagccggag aacacaggca agcctaaata cggagggggt 120
<210> 170
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 170
ccgcatacct tgttcattgt cactgggttt aagagactct tccgaccagc ttctgttgcc 60
tttggcctct gcccttttcc tgccaggttt ctcttcagtg atgttagtcc cctgaggaat 120
<210> 171
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 171
ggcctcaggc tgagtggcct gggtcacttc cttcctgctt tgccggccag gtttgccatc 60
tgctgccgac acctgctgct cccatcgttc tctaaggtgc agcaagtggc gttgtttttt 120
<210> 172
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 172
aggatggagc cctgttaatt caatgcacac cttcaggttg gtcagctcac tataatgtgg 60
gtcttctaag tggttagagg aactgtttgt catttccctc tcaggccagt catctaatgg 120
<210> 173
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 173
atgcaaaggc ccaccccccg gcaggcgggc gaagcagaca gggctcacct ttagagactc 60
gtcggcgttt ggctttcagc agagggtcct ctggcacctc ctccgcagtg gtctcagtgt 120
<210> 174
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 174
ggctgctgtc acctgagact ttgcgtttcc tgtccacccg gagggtgggg ctgtgaggca 60
tgtccgaggc cacctggtct gcgggaggct cgctcacagg ctgcctctcc acaaagtact 120
<210> 175
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 175
tctccacagg aagatctttg tcctctgggg cttcaaaggg atcacggtgc ttgtttccaa 60
cactatactc gcctggggga ggggagacaa gagggcatta atgaagcccg aaggtcgcca 120
<210> 176
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 176
caagcaaact gctcaggttt acttacatct ctcactttcg ttctgttctg caatggcctc 60
ctccagggtg accgactttg gctttttgtc ctgatttcct ttcaaccttt cccagtcggc 120
<210> 177
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 177
tgggctgaat ttgcacatct cggagtcttt ggttgctggg tggccacctt ctctttcttt 60
catctccaac tctgagaagc gcatcattgc acgctagaaa gagaacggag atggaaaaaa 120
<210> 178
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 178
aagattctag taataaaaat ttgaagaact gacctcacag taagcagcgg gtagacataa 60
aatactgtcc tcttgtaatc cttccatcta tgtaattaaa atgggcactc aatggatcat 120
<210> 179
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 179
tgaaattcag gtgggggggc tcacctgcaa tgcccgttgc tcccggctga gctgactgga 60
atctgcatac agttcggtag tgacacattt gaatcggtca cccacgtaac ccgctgagtt 120
<210> 180
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 180
ggcgattctc tttgccagct tagatggctt cggtttcaga actttgccat catttgattc 60
agcctcatca gctccatctt tggtataggt gggggtcaca tccacacttg gtggggcact 120
<210> 181
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 181
gcccacacaa aatggtttgg gatcctcttg ggttttacca aaagttacag cagggccatc 60
gctccccaga ggtggctcca ggaatggagt cgagactggc aaccctaggt tctctttgtt 120
<210> 182
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 182
ggtacctgcc agaacactgt ccttgcttac ggtgaagact ggctgtttga aagtataagt 60
ttcgtggaag tcactgatgc gccccaactc ctctctcagg gcgatgaaat cacggtgctg 120
<210> 183
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 183
ctgcagggcc ggctcaactg agggcttggg gggctcagcg ctctggccaa cactctctgc 60
tgcaaagctg ggtttggaca cgtttgtgtc agttttagca tctggttctt ctcggagaag 120
<210> 184
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 184
gtctacgtag acaagcttgt cgcttttgac aacagtcttc ccttgattcc agttggggtt 60
cggctttagg ttcttgtcgg tggggacatc tggatgtaac ttggtgctgc tagtttccaa 120
<210> 185
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 185
aatctcggaa aaccgattcc ggagggttgg gtcctcgtaa cgggctctct catgggaccg 60
ggatctcctc tctggtttct cctctttagt aatctctatg ggcgtgtgtg gtatcaacat 120
<210> 186
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 186
gggatgcacc atgcccaacc ccagggcatc ttggtaggtc acaaactctg gacggccggt 60
gggaagccca tagggcagcc caggctttgg ggcaaggtgc ccaggaaaca gactgccatt 120
<210> 187
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 187
gggtaacaaa actgggtgag ggtagacagg tcctttgcca tgtaaggaga ggggacttac 60
agcaatgccc tcaggggctg ggtaagggag gtaactcctg gggtagggaa ttggtgggga 120
<210> 188
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 188
cctgaatgcc tcatttggag acagaaatat agagcttggt ggaaggccgt tctcgtttgc 60
tttgaaactc ggttctgggt tgctggcttt ggcgcccttg ctgctggtgc tgctactgtg 120
<210> 189
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 189
cttggcagga gtggccgggg gctggcccac gtgctgaata acggatggtg tggtttctac 60
agagctcctg ctggttttgg tgccatctgc attggcattg ggggcgggtg atgcggaggc 120
<210> 190
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 190
tgggcggcct gcactcgaca ctgaccctga aacgttagtg atgacagcat cggtgccgcc 60
catgcgcggg catgatgaac tccgctgctg tggtatcgcc cagtccaatg ccttgttttt 120
<210> 191
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 191
cagcgacatg cttttgccat tgttctcttc gttaggactt ggcccgggca ccacccagga 60
tgagggagca gtgctgatga tttcagatct atagatagca caaccatttc ctggaggaga 120
<210> 192
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 192
tagtgtttct ttcggaatct cacttccgga gagcactaag ccacttccag ccctgctgtg 60
aaccaggacc gtgggagcca tctttttcat gtggtcagct ttggaagcat ctacatccac 120
<210> 193
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 193
cactttagaa gacaagtcta gtggcttatc tgtgacgtct ttggtaacgg tctgcttctc 60
caacagagga ggtgagctgc catcttttct gtcttgaacc gctgtcttcc gggcatgccc 120
<210> 194
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 194
gggcactggc tgggcacctt cgcccccttc cggagccttg ggatacttgc cattggagag 60
cctggccgcg gggaactcgc tgctaactgt catgtatggc tttgacaggg caactgaagg 120
<210> 195
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 195
agaggtggag atcctggcat agtgcttgtg gaactccgag taggtgtctg cagcaggctg 60
ggtgggaagg tggactcggg gtgacggccg aggcgagggg ggcaacagga gagctgtgtc 120
<210> 196
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 196
ccccggcagg ccactggtga ccgccttggc agagggaacc ctgggctgct tactgttctg 60
gatgtgagga taggcgtggg aatcaacagg attcccaggg ctgacgccca tcttccacgg 120
<210> 197
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 197
gaggcttttg tctgcgcaat ggacgagagg cgggatggct ggggaggccg aaggtgtcga 60
gagcctcatg ggtgatgcca aggacgatgg gatgtgggga ccgacgtagt gaggtggcgg 120
<210> 198
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 198
caggtagaga aagcgctccc cattggtgca gactggagaa tacagcggct gggccaagct 60
gtaggactgc tgaggtagca aggccttgta catgttcagt gaatacttat ttggcgagtc 120
<210> 199
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 199
gaggaaaggg tagatggctg gcgtggcacc ctccatgtaa ggattgaccc agggcagccg 60
cagataacta gcaccattga tgttgagagg gctctgtttg tcgctggcag gcctgtccaa 120
<210> 200
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 200
gcccagcgct tctgctgtgg ctacagcact tttttgtatt ccaggcggtg ttttgtatat 60
agcactgaag ccatttgggg gttttccaga gacggcagaa gcctccactg tctcgggtgt 120
<210> 201
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 201
attcggtttg aactgcatct ctggatttct ttccgaagaa aacccaaggc cacctagagt 60
gcttgtggca gcctcccgac ctttctctga gcccagtcca cacaagctag aatagacgat 120
<210> 202
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 202
gtttcccggg acccgcagcc cttcccggat caggccagtg cggtccatgc tcagtgctgc 60
caggccatcg atcctatggg ccgtgctcgc atccaccttt gcagaagaac aacatgggtg 120
<210> 203
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 203
agaagctatt aatctcttac cacgttgtgg ttcaagggat tctcttccct cagttccagt 60
ctggcttttg aagcgtcacc atcatttaca aggattttcc tatttaaaaa gatacaccaa 120
<210> 204
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 204
cagatgggcg cattcacctg tcttcgctcg ccccacacat gcggaccctc tcgctgttca 60
tccagctgtg aacgttccca tacagggggg ttgctgagag catgtcgtct tctgggatgg 120

Claims (15)

1.一种尤文肉瘤相关融合基因检测探针组合物，其特征在于，所述探针组合物的靶基因为NUTM2B全外显子、FUS全外显子、YWHAE全外显子、CIC全外显子、EWSR1全外显子、EWSR17～8号内含子、EWSR1 8～9号内含子和BCOR全外显子的组合；
所述探针组合物为SEQ ID NO:1～204所示的核酸序列；
SEQ ID NO:1：
GGGAAGGAGCATGGGTTGATTGGCACAAAAGTAGGTCTGCTGATAAAGAATGGAAGTAAAGGGGCCATCAGGTAGAAGCTTTTGCTGTGAGTCAGAAGGACAATTTAAAAGTTGCCTAAA；
SEQ ID NO:2：
GAGGCACACGCCATCTCTGCTGCTGCCTTCCAGTTGGAAGGGAAACTCAGGTTCTTGCCTAATGGCCGAAGCCCTTCACAGAACGTCCCCCACCCCTAACAGCTGCCCACTGCCCCTCCC；
SEQ ID NO:3：
CCTCTGCAGAATGTCTGGGGTCCTATGTTCCAGGAACCTGTTTACTTTCAAATTTTCCCTGTTTCAGTTGGACTCAGGAGCATCTGGTGAGCCAGGTCACTCTCTGGGTCTTACCCTTGG；
SEQ ID NO:4：
CTTTTCTTATTGCGGAAACTGCCAGACGGCGGTGGTCAGTGCCCAGCCTGAGGGGATGGCTTCGAATGGAGGTAAGCCTGTAGGGATGAGGGCATTATCTGAGTCTGCCATGCCTCAACT；
SEQ ID NO:5：
GTCTCCACAGCATACCCAGTGCTGGGACCGGGCGTGACCGCGAACCCTGGCACCTCCCTGTCTGTGTTCACGGCTCTGCCCTTCACCACACCCGCTCCCGGCCCAGCACACGGGCCGCTC；
SEQ ID NO:6：
CTTGTGACTGCAGGGGCTCCTCCAGGCGGCCCTCTGGTGCTGTCTACCTTCCCCAGCACACCTCTGGTGACAGAACAGGATGGCTGCGGCCCGAGTGGGGCCGGGGCTTCCAACGTCTTT；
SEQ ID NO:7：
GTCCAGATGAGGACAGAGGTGGGGCCTGTGAAGGCCGCTCAGGCGCAGACCTTGGTCCTAACTCAGGCCCCCCTCGTCTGGCAGGCTCCAGGCGCCCTCTGCGGAGGTGTTGTGTGTCCA；
SEQ ID NO:8：
CCTCCCCTACTCCTGGCAGCTGCTCCTGTGGTGCCTGTTATGGCTGCCCAGGTGGTTGGGGGCACCCAGGCCTGTGAGGGAGGCTGGTCCCAGGGCCTTCCTCTTCCACCACCACCACCA；
SEQ ID NO:9：
CCGGCTGCCCAGCTGCCCCCCATTGTGTCCCAAGGGAATGCTGGGCCATGGCCACAAGGGGCTCATGGAGAGAGCAGCCTGGCTTCCTCCCAGGCCAAGGCCCCGCCAGATGACTCCTGT；
SEQ ID NO:10：
AACCCCAGGAGTGTCTATGAGAACTTCCGACTCTGGCAGCACTACAAGCCCCTGGCCCGGAGGCACCTTCCCCAGAGTCCTGACACCGAAGCGCTTTCGTGCTTCCTCATGTGAGTGTCC；
SEQ ID NO:11：
TGGGCTTGGGATGAAGGGTGGGCTTATAGACTGAGACTGACTGCACTGGTTTACAGCCCAGTTCTCCGATCGCTGGCCCGGCGGAAGCCCACCATGACCCTGGAGGAGGGACTGTGGCGG；
SEQ ID NO:12：
GCCATGCGGGAATGGCAGCACACGAGCAACTTTGACCGGATGATCTTCTACGAGATGGCGGAAAAGTGAGTCTGGGGTCCTGGGAGCAGGGCCCGCGTGGCAGGGTGAGAGTGAATGACA；
SEQ ID NO:13：
GGAGGGGGCCTGGACCCTCTCAGCACAGCCTGGGCCTCCTTCACCGCCAGGTTCCTGGAGTTTGAGGCTGAGGAGGAGATGCAGATTCAGAAATCGCAATGGATGAAGGGGCCCCAGTGC；
SEQ ID NO:14：
CTGCCTCCTCCAGCCACACCGAGGCTTGAACCTCGAGGACCCCCGGCCCCTGAGGTGGTCAAGCAGCCAGGTATGGCTTCCCACATTCCCACAGGAGCCATGGCAAAGGCCAAAAGGGCC；
SEQ ID NO:15：
GGAGCGGCCCTCACCACGCCCGTCCTCCTCCCTCTCTGCCTCAGTGTACCTTCCCAGCAAGGCCGGCCCCAAGGCCCCGACTGCCTGCCTGCCACCACCCAGGCCCCAGAGGCCAGTGA；
SEQ ID NO:16：
TGCCACCACCCAGGCCCCAGAGACCAGCAGAGACCAAGGTCCCTGAGGAGATCCCCCCAGAAGTGGTGCAGGAGTATGTGGACATCATGGAGGAGCTGCTGGGGCCTTCCCTCGGGGCCA；
SEQ ID NO:17：
CGGGGGAGCCCGAGAAACAACGGGAAGAGGGCAAAGTGAAGCAGCCACAGGAAGAGGACTGGACGCCCCCAGACCCGGGCCTCCTGAGCTACATTGACAAGCTGTGTTCCCAGAAAGACT；
SEQ ID NO:18：
TCGTCACCAAGGTGGGCTGGCCTGGAGTGCTGGGGTCTGCTGGATTCCAGGGGCTGGCACTCCCAGGTCCTTGGAATTAAGCTCTGTTCCTTAGCTACTCAGCAGTGTGTGTATTTCCAT；
SEQ ID NO:19：
AGGTGGAGGCCGTCATTCATCCCCAATTCCTGGAAGAATTGCTTTCCCCAGATCCACAGATGGATTTCTTGGCCCTAAGCCAGGACCTGGAGCAGGAGGAAGGACTCACCCTTGCCCAGG；
SEQ ID NO:20：
CAGTGCCAGTAAGTGCCCCCTTTCCTCCCGCAGCTAGTGGAGAAGCGCCTCCCACCCTTGAAGGAGAAACAGCATGCGAGGGCAGCCCCTAGTCGTGGCACAGCCCGGTTGGACTCAAGT；
SEQ ID NO:21：
TCTTCTAAGTTTGCAGCTGGCCAAGGAGCAGAGAGAGACGTCCCTGACCCCCAACAAGGGGTTGGCATGGAAACCTGCCCACCCCAGATGACTGCCCGGGACTCTCAGGGACGAGGCAGA；
SEQ ID NO:22：
GCACACACTGGCATGGCCAGGTCCGAAGACTCTGTTGTGCTTTTGGGATGTCAGGATTCCCCTGGGCTGAGGGCTGCCTGGCCAACCTCTCCTCCCCAGGACCACAGACCCACCTGCCCT；
SEQ ID NO:23：
GGCGTGGGTACCAAGGATGCCTTGGATCTCCCTGGAGGGTCTCCTGTCAGGGAGTCACATGGGCTGGCTCAGGGGTCAAGTGAGGAGGAGGAACTCCCCAGCCTGGCCTTCCTCTTGGGT；
SEQ ID NO:24：
TCCCAGCACAAGCTTCTGCCCTGGTGGCTACCCCAGAGCCCTGTCCCTGCCTCGGGCCTTCTCAGCCCAGAAAAGTGGGGACCCCAGGGAACTCATCAGTCCCCATCTGCTGAGAGAAGA；
SEQ ID NO:25：
GGCCTCAACCTAGCACCTTCTCCTGCCAACAAGGCCAAGAAGCGACCTCTCTTTGGAAGCCTGTCCCCTGCTGAAAAGACACCCTACCCAGGGCCTGGGCTCAGGGTCTCTGGGGAGCAA；
SEQ ID NO:26：
TCCCTGACTTGGGGGCTGGGTGGCCCCTCACAGTCTCAAAAGAGAAAGGGTGACCCCTTGGTCTCCAGGAAGGAGAAGAAGCAGCATTGTAGCCAGTAGGGGCTTCTGAGCAGGCTCTCT；
SEQ ID NO:27：
GGGGCCAATCCCCAAGGATGGGGCTCTGGCATCCGATGCCCCAAAGCGGTCAAAAGCTTCTTCTCCCCCAGTGCTGATCTTGCTGGGCCTTAGCTTTGGAGGGTAGGGGAGGGAGGGGA；
SEQ ID NO:28：
GCTGGGGAGTGGGGGTGGGAAGCAGTGCGTTGGGGGCCTCGTGTGTAAGTGTGAATAAATGTAGTTGTCTTGGAAAATGCTCTTGGGGCTGCTGCCTCTGTCCTCGGTGCTGTGCTGCTC；
SEQ ID NO:29：
AACCCACAGGGGCCGGCCCCACTCTTTCCTCCTGATGTAGGGAGCCCCTTCAGATGCTCCAGGGACTGACAGATGCTGAGGAAGCCCTGATCCCTCCCACTACCGACTCACAAGGCCCTG；
SEQ ID NO:30：
ACTCAGCGGTGTTGGAACTTCGTTGCTTGCTTGCCTGTGCGCGCGTGCGCGGACATGGCCTCAAACGGTAGGTAAGGGCGCGAGGCGACGGCGGCGGCGCACCCGGCCGAGGCCTCCCAG；
SEQ ID NO:31：
TTTCAGAGTGGCAGCTGAAGATAATGTGATTGTATTTTTCTTTTGCAGATTATACCCAACAAGCAACCCAAAGGTGAGTGCTATTTTTGGGCTTCCAGAGTTTGTAGAGGGCAAGGGTGG；
SEQ ID NO:32：
GTCACGCCATGTTTTCTGATCACGCTGGTTTTCCTTTTATTTAGCTATGGGGCCTACCCCACCCAGCCCGGGCAGGGCTATTCCCAGCAGAGCAGTCAGCCCTACGGACAGCAGAGTTAC；
SEQ ID NO:33：
AGTGGTTATAGCCAGTCCACGGACACTTCAGGCTATGGCCAGAGCAGCTATTCTTCTTATGGCCAGAGCCAGAACAGTGAGTCTTTCTCAGCGGGTCACCTCTTCCTACTCTTTCTGAAT；
SEQ ID NO:34：
TTCTCTTTCCTGGTGGCTTTTGTGACTCCCTTTTTCTTATCCTGGTAGCAGGCTATGGAACTCAGTCAACTCCCCAGGGATATGGCTCGACTGGCGGCTATGGCAGTAGCCAGAGCTCCC；
SEQ ID NO:35：
AATCGTCTTACGGGCAGCAGTCCTCCTACCCTGGCTATGGCCAGCAGCCAGCTCCCAGCAGCACCTCGGGAAGGTACGGTGGTGTTGATGTCGGGGAAGGCTTGAAAAGAGGGGTGAATT；
SEQ ID NO:36：
GAAAGGAAATTGGGGGCTATGCTGGGATTGTGATTGTGTTTTTTGTTTGTTTTCCCTAGTTACGGTAGCAGTTCTCAGAGCAGCAGCTATGGGCAGCCCCAGAGTGGGAGCTACAGCCAG；
SEQ ID NO:37：
CAGCCTAGCTATGGTGGACAGCAGCAAAGCTATGGACAGCAGCAAAGCTATAATCCCCCTCAGGGCTATGGACAGCAGAACCAGTACAACAGCAGCAGTGGTGGTGGAGGTGGAGGTGG；
SEQ ID NO:38：
CATTCTTTCTTTTCTCACAGGTAACTATGGCCAAGATCAATCCTCCATGAGTAGTGGTGGTGGCAGTGGTGGCGGTTATGGCAATCAAGACCAGAGTGGTGGAGGTGGCAGCGGTGGCT；
SEQ ID NO:39：
GGCGGCGGCGGCGGTGGTGGTTACAACCGCAGCAGTGGTGGCTATGAACCCAGAGGTCGTGGAGGTGGCCGTGGAGGCAGAGGTGGCATGGGGTAGGTGTCTCATGAGCCAGGGAGTATC；
SEQ ID NO:40：
GTTGGAAGCTTCATGTCCTTTCTTCTAACTTGTCTTCTCCAGCGGAAGTGACCGTGGTGGCTTCAATAAATTTGGTGGTAAGTGAACAGAGTTTCCAAAATTCCCAACTCCCAGCAATGC；
SEQ ID NO:41：
TTGTTTTTGTTTTTTTTTTGTTCTTTTTTTCCATGTCACTAAAGGCCCTCGGGACCAAGGATCACGTCATGACTCCGGTGAGTTCACACGTGGTGGCATGAAAAGAGTGGCTAAAGTGGT；
SEQ ID NO:42：
ACAAGCAGAACAGGATAATTCAGACAACAACACCATCTTTGTGCAAGGCCTGGGTGAGAATGTTACAATTGAGTCTGTGGCTGATTACTTCAAGCAGATTGGTATTATTAAGGTACTTGT；
SEQ ID NO:43：
GAAAGGGAGTACTGTAGCCTTTAAAATTGATGTTACCTCATTTTGCTTTCTTCAGACAAACAAGAAAACGGGACAGCCCATGATTAATTTGTACACAGACAGGGAAACTGGCAAGCTGAA；
SEQ ID NO:44：
GGGAGAGGCAACGGTCTCTTTTGATGACCCACCTTCAGCTAAAGCAGCTATTGACTGGTTTGATGGTATGTATGAGAAGGCTGGCAGAGGTGGGGCTGGGGATATAGGGCAGCAAGCCTT；
SEQ ID NO:45：
TTTCTCTAGGTAAAGAATTCTCCGGAAATCCTATCAAGGTCTCATTTGCTACTCGCCGGGCAGACTTTAATCGGGGTGGTGGCAATGGTCGTGGAGGCCGAGGGCGAGGAGGTGAGGAGC；
SEQ ID NO:46：
AAGGCTTGCATGGAATGGGTTAGATTTACCAAACTTGGAGAGGGAGCAGACCCATACTTGGTCTATCTGCATTAGGACCCATGGGCCGTGGAGGCTATGGAGGTGGTGGCAGTGGTGGT；
SEQ ID NO:47：
GGAGGTGGTGGCGGTGGAGGACAGCAGCGAGCTGGTGACTGGAAGTGTCCTAATCCGTGAGTGAAACTTAATTTTTTTCTTAGTTCTCTTGCATGCGTGCTCTTTGATATATTGGTACTG；
SEQ ID NO:48：
TTCTCCTTAGCACCTGTGAGAATATGAACTTCTCTTGGAGGAATGAATGCAACCAGTGTAAGGCCCCTAAACCAGATGGCCCAGGAGGGGGACCAGGTGGCTCTCACATGGGTAAGAAAG；
SEQ ID NO:49：
ACATAGGGGAATGGGAATATGATAGATCTTGTTTCTTTTGTCCTAGGGGGTAACTACGGGGATGATCGTCGTGGTGGCAGAGGAGGCTATGATCGAGGCGGCTACCGGGGCCGCGGCGGG；
SEQ ID NO:50：
GACCGTGGAGGCTTCCGAGGGGGCCGGGGTGGTGGGGACAGAGGTGGCTTTGGCCCTGGCAAGATGGATTCCAGGTAAGACTTTAAATCAGAATAAAAAAGTAGAGCAGTTGAACAGAGG；
SEQ ID NO:51：
AAATATAATGGATACTTAATTTTTTTTTTTTTTTTTGCAGGGGTGAGCACAGACAGGATCGCAGGGAGAGGCCGTATTAATTAGCCTGGCTCCCCAGGTTCTGGAACAGCTTTTTGTCCT；
SEQ ID NO:52：
TGGTCAGAGATGGTTTCTCTTGTTGGCTTATGTCTCACTGATTTTCGTCTTCCACGTCCTGCAGCGCTTCTTTATTCTGCTCTTCACCTGTTAAAAAAGAAAAAAAGTCAATTATTTCGT；
SEQ ID NO:53：
TGAAAGCGGAATTCACTGTGCCATGAACGTGACTTACAAAGTAGAGTTTTTAGGAAAGGAAGAGTTGGGTTTTCCTTTAGGAATCTATATTGCAAGGAAAAAGGGAGGGAGAACAATCAT；
SEQ ID NO:54：
AAACAAATCCTGCAACTGAAAGAGGTGCCTGTTTCACTCCGTGCTTGCTTACCGTCACCCTGCATGTCTGAAGTCCATAGTGTCAGATTATCACGTAACAACTGCATGATAAGTGTAGAG；
SEQ ID NO:55：
TCCTTATAGCTTTCTTCACTCAGCGTATCCAGTTCTGCAATTGCATCATCAAAAGCTGCTTTTGCCAACCTAAAGGTATTTCAATAGAAGTGTTATAAAAATTAAGTCCAAAATCAGAAT；
SEQ ID NO:56：
TCTTCCCCACAACTTACCTGCAGGCACGGTCAGGGGAATTAAGAATTTCGTAGTAGAATACGGAAAAATTGAGAGCAAGACCTAAGCGAATAGGATGCGTTGGTGGAAGTTCTGTCATTG；
SEQ ID NO:57：
CAATATCACTAGCAGCTTTATAAGCCACTAGGCTGTTCTCCGCAGCCTCCTTCCTGTCGTTTCCTGTGGCAAATTCTGCCAGATACCTGTGGTAGTCCCCTTTCCTAAAACAAAACCAAA；
SEQ ID NO:58：
AACCTACATTTTATAATAGAAAACCTTGGACTCGCCAGTGTTAGCTGCTGGAATGAGGTGTTTGTCCAGTACATCCAGAATGTCACAACAGATTAACTTTAGCTCAGTCTCAACCTAAAA；
SEQ ID NO:59：
TGATGGCACAACAATCTCACCATTTGCCGATATTCCCGAATCATTTTTAGCTTGTCTTCTCCTCCCTTGTTTTCTTCTTTCTGTTCAATGCTGCTGATTATTCTCCAGGAGGCTCTTCTA；
SEQ ID NO:60：
GCTCCAATCACATTCTTATATGCAACAGATAGGAGGTTTCTTTCTTCAACTGTCAGCTCCACATCCATCCCTGCTACTTTCTTCATTGACTCCACCATTTCTGTATGGGAAAAGGAAAAG；
SEQ ID NO:61：
TCCAGCCCCCCGTTGCCCCCCCAACTCACCGTCGTATCGCTCAGCCTGCTCGGCCAGCTTCGCCTGGTACACCAGATCCTCTCGATCATCCATAGCGGCAGCGGCTCCGGCAGGGTCTGC；
SEQ ID NO:62：
CTGCCGGGTCCCCCCTGCGCCGGACCATGTATTCGGCCCACAGGCCCCTGATGCCCGCGTCCAGCGCGGCCTCCCGTGGCCTCGGCATGTTCGGTCAGTAGCGCCTGGGCCCTGGGACTG；
SEQ ID NO:63：
GGCCAGGCTCTCCTGCTGCACAGCTCACCTGGCTCCTTTCCACAGTGTGGACGAATGTGGAACCTCGCTCTGTGGCTGTGTTCCCTTGGCACTCCTTAGTCCCCTTCCTGGCACCCAGCC；
SEQ ID NO:64：
AGCCTGACCCCTCCGTGCAGCCGAGCGAGGCCCAGCAACCTGCCAGCCACCCAGTGGCCTCCAACCAGAGCAAAGGTGAGGGCTGGTGGGGACTGGGGGGAGGCAAGGGTGTGGGGTCCA；
SEQ ID NO:65：
AGAACCTGCTGAGTCGGCAGCTGTTGCTCATGAACGGCCACCAGGTGGGACAGGGAGTGCTGACCCTGAGCGGCCCCCTGGAGCCACATGCCCTGAGAGCCCAGGACCCGGACCCCCACA；
SEQ ID NO:66：
CCCTTTGGGGGTGGTGGAATCTGGTAAGGGTCCGCCTCCCACCACGGAGGAGGAGGCCTCCGGCCCCCCAGGAGAGCCCCGGCTGGACAGTGAGACAGAGAGTGACCATGATGATGCGTG；
SEQ ID NO:67：
TGGGGGTGGGATGGCCAGAGACATGGCCCTCACTGTCCCTGCTGCCCCGCCGCAGCTTCCTCTCCATCATGTCTCCTGAGATCCAGTTGCCTCTACCGCCCGGAAAACGTCGGACCCAGT；
SEQ ID NO:68：
CCCTCAGTGCCCTACCCAAGGAACGGGACTCATCTTCTGAGAAGGATGGACGCAGCCCCAACAAGGTACTTTATCCCTGCCTGTCCTGTGCTCACCCCGTGGCCACCCACACCTGTCTGC；
SEQ ID NO:69：
GTCCCGCTCTGGGCTGTGTTTAATGCAGCGGGAGAAGGACCACATCCGGCGGCCCATGAATGCCTTCATGATCTTCAGCAAGCGGCACCGGGCCCTGGTCCACCAGCGTCATCCCAACCA；
SEQ ID NO:70：
GGACAACCGGACCGTCAGCAAGATCCTGGGCGAGTGGTGGTATGCCCTGGGGCCCAAGGAGAAGCAGAAGTACCACGACCTGGCCTTCCAGGTAACGCTGTTGCCTCTTGGCTCCTCCCA；
SEQ ID NO:71：
TGGGTGAGTGAAGGGTTGCCCTGCCCTCTCCTGCCAGGTGAAGGAGGCCCACTTCAAGGCCCACCCAGATTGGAAGTGGTGCAACAAGGACCGAAAGAAGTCCAGCTCAGAGGCCAAGCC；
SEQ ID NO:72：
CACGAGCCTGGGGCTGGCAGGAGGGCACAAGGAGACGCGGGAGCGGAGCATGTCGGAGACGGGCACTGCTGCTGCCCCTGGGGGTTAGTCAGCCCCTTGGCTCTCCCACCCTGCCACCTC；
SEQ ID NO:73：
CCACTCTCTACTTTACAGTGTCCTCTGAGCTCCTGTCCGTTGCAGCCCAGACACTCCTGAGCTCAGACACCAAGGCTCCGGGGAGCAGCTCCTGTGGGGCAGAACGGCTACACACAGTTG；
SEQ ID NO:74：
GGGGACCTGGCTCAGCCCGGCCCCGAGCTTTCTCCCACAGCGGGGTACACAGCCTGGACGGCGGAGAAGTAGACAGTCAGGCGCTACAGGAACTGACGCAGGTCTAGGGTGCAGGCCCCC；
SEQ ID NO:75：
CCTGCAGATGGTGTCTGGCCCTGCATCGTACTCTGGCCCAAAGCCTTCTACCCAGTATGGAGCTCCAGGACCCTTTGCAGCCCCTGGTGAGGGAGGTGCCTTGGCGGCCACTGGGCGGCC；
SEQ ID NO:76：
CCCGCTGCTGCCCACCCGAGCTTCTCGTTCTCAGCGTGCGGCCAGTGAGGACATGACGAGTGATGAGGAGCGCATGGTCATCTGTGAGGAGGAAGGGGATGATGATGTCATTGGTGAGCA；
SEQ ID NO:77：
TCCCTCAGCTGACGATGGCTTCGGCACCACTGACATTGATCTCAAGTGCAAGGAGCGGGTGACCGACAGCGAGAGTGGGGACAGCTCTGGGGAGGACCCAGAGGGCAACAAGGTGAGGGC；
SEQ ID NO:78：
TCGGAGTGTCCTGACCTGGGGTGTCTCCCTTCCTTTCATGCAGGGCTTTGGTCGGAAGGTGTTTTCACCTGTGATCCGTTCCTCCTTTACCCACTGCCGCCCCCCACTGGACCCTGAGCC；
SEQ ID NO:79：
CCCAGGGCCCCCGGATCCTCCTGTAGCCTTTGGCAAAGGCTATGGTTCCGCCCCATCCTCCTCTGCGTCCTCGCCTGCTTCCTCCTCAGCCTCGGCAGCCACCTCCTTCTCACTGGGCTC；
SEQ ID NO:80：
AGGAACCTTCAAGGCCCAGGAGTCTGGTCAGGGCAGCACAGCGGGCCCCCTACGGCCCCCACCCCCTGGGGCTGGGGGTCCAGCGACACCTTCCAAGGCAACCCGGTTCCTCCCAATGGA；
SEQ ID NO:81：
TCCTGCCACCTTCCGGCGCAAGAGACCCGAAAGTGTGGGTGGCCTGGAGCCACCAGGCCCCTCAGTCATCGCGGCCCCTCCCAGCGGAGGAGGAAACATCCTGCAGACACTGGTGCTGCC；
SEQ ID NO:82：
CCCAAACAAGGAGGAGCAAGAGGGCGGCGGAGCCAGAGTGCCCTCCGCCCCCGCCCCATCACTGGCCTATGGGGCCCCAGCAGCTCCCCTGTCCCGTCCTGCCGCCACCATGGTCACCAA；
SEQ ID NO:83：
TGTGGTGCGGCCTGTCAGCAGCACTCCTGTGCCCATCGCCTCTAAGCCCTTCCCCACCTCTGGCCGGGCTGAGGCGTCTCCAAATGACACAGCAGGTGCCAGGACTGAAATGGGCACTGG；
SEQ ID NO:84：
GTCTCGGGTGCCTGGGGGCTCCCCGCTGGGTGTCAGCTTAGTGTATTCGGACAAGAAGTCGGCAGCAGCCACCTCACCAGCCCCACACTTGGTGGCTGGACCCCTGCTGGGCACTGTGGG；
SEQ ID NO:85：
GAAGGCGCCTGCCACTGTCACTAACCTACTGGTGGGCACCCCGGGGTATGGGGCCCCTGCGCCCCCTGCTGTCCAGTTCATTGCCCAGGGGGCCCCTGGTGGTGGGACCACTGCGGGCTC；
SEQ ID NO:86：
AGGAGCAGGTGCTGGGAGTGGCCCCAATGGGCCAGTACCCCTGGGCATCCTGCAACCAGGTGCCCTGGGCAAGGCTGGGGGAATCACCCAGGTACAGTACATCCTGCCCACGCTGCCCCA；
SEQ ID NO:87：
GCAGCTTCAGGTGGCACCTGCCCCAGCACCAGCCCCTGGGACCAAGGCAGCGGCTCCCAGCGGCCCTGCACCCACCACCAGCATCCGTTTCACCCTCCCACCGGGCACTTCCACCAACGG；
SEQ ID NO:88：
CAAAGTCCTGGCTGCCACTGCACCCACTCCTGGCATCCCCATCCTGCAGTCTGTACCCTCCGCCCCACCCCCCAAAGGTGAGACCTGGGCCGGGCAGCACTAGGGGAGGGGCCATAGTCC；
SEQ ID NO:89：
TTCCTTTCTTGCCTCTTAACTTCCAGCCCAGTCAGTTTCTCCCGTGCAGGCCCCGCCCCCGGGTGGCTCAGCCCAGCTGCTGCCTGGGAAGGTCCTAGTGCCTCTGGCCGCCCCTAGCAT；
SEQ ID NO:90：
GTCAGTGCGGGGTGGAGGGGCCGGCCAGCCACTGCCACTGGTGAGCCCGCCCTTCTCAGTACCTGTGCAGAATGGTGCCCAGCCCCCCAGCAAGGTGAGGGCCTGCCTTTCTCTCTACCT；
SEQ ID NO:91：
TCCCCTGCCCCAGTCTGGGGCCACAGCTCACCCTGGCCTATGGGTGCCCTTCTCCACAGATCATCCAGCTGACCCCGGTGCCTGTGAGCACACCCAGCGGCCTGGTGCCGCCCCTGAGCC；
SEQ ID NO:92：
CAGCCACACTCCCTGGACCCACCTCTCAGCCTCAGAAGGTCCTGTTGCCCTCCTCCACCAGGTAATTGCAGCTGAGCCCATACTCAGAGGCCAGGGAAGGGGTGGGGCGGGGCCGGCTTA；
SEQ ID NO:93：
TTACCTCACTCCTCCCCATTTCCTCTCCTGCGGCAGAATCACCTATGTGCAGTCAGCGGGCGGGCACGCGCTGCCCCTGGGTACCAGCCCTGCGTCCAGCCAGGCTGGAACAGTCACCTC；
SEQ ID NO:94：
GTACGGGCCCACGAGCTCTGTAGCTCTAGGCTTCACCTCGCTGGGGCCCAGCGGCCCCGCCTTCGTGCAGCCCCTGCTCTCAGGTGAGGGGCGGCCTGGCAGGCAGTGCTGGGGACCCAG；
SEQ ID NO:95：
TGAGGGGCGGCCTGGCAGGCAGTGCTGGGGACCCAGGGTGGGGCTGAGGCAGTCCGGGCCCTAACTTGGTCTCCTGCTTCTTCTTCTCTGTCTTTCAGCAGGCCAAGCCCCACTGCTGGC；
SEQ ID NO:96：
TCCCGGTCAGGTGGGCGTGTCACCTGTGCCCAGTCCCCAGCTGCCGCCTGCCTGTGCAGCCCCCGGAGGTCCTGTCATAACAGCATTTTACTCTGGCAGCCCTGCACCCACCTCCTCAGC；
SEQ ID NO:97：
ACCCCTGGCCCAGCCATCCCAGGCCCCCCCAAGCCTGGTCTACACTGTGGCCACCAGCACAACCCCACCTGCAGCCACCATTCTGCCCAAGGGCCCGCCAGCCCCTGCCACTGCCACCC；
SEQ ID NO:98：
TAGCCCTTTCCCCAGCGCCACAGGTAGGTGTCAGATCAACCCAGAGCAGAGTGAGTTGGGGGACCCAGGGGATGGGCTCCAGTCAGGCCTGGCTCAGCAAACAATTTTCTCCCCACTAGC；
SEQ ID NO:99：
AATTTTCTCCCCACTAGCAGGTTCCATGACCTACAGCTTAGTGGCCCCCAAGGCCCAGCGGCCCAGCCCGAAGGCCCCCCAGAAAGTGAAGGCAGCCATCGCCAGCATTCCCGTGGGGTC；
SEQ ID NO:100：
CTTTGAGGCAGGTGCCTCTGGGCGGCCTGGCCCTGCACCCCGGCAGCCTCTGGAGCCTGGCCCAGTCCGAGAGCCAACTGCCCCAGAGTCTGAGCTTGAGGGGCAGCCCACACCACCAGC；
SEQ ID NO:101：
CCCTCCACCCCTGCCAGAGACCTGGACTCCCACGGCCCGGAGCAGCCCCCCACTGCCCCCACCTGCTGAGGAGCGGACCAGCGCCAAGGGCCCTGAGACCATGGTGAGCGCCTGCAGGCC；
SEQ ID NO:102：
CCTTTGCCCCAGAGTCTGAGCTCAGTGTTCGCCATCTCCCTGCCCATCTCCACCCCAGGCCAGCAAATTCCCCAGCTCATCTTCAGACTGGCGCGTCCCTGGGCAGGGCCTGGAGAATCG；
SEQ ID NO:103：
TGGGGAGCCTCCCACTCCTCCCAGCCCGGCCCCAGCTCCAGCTGTAGCCCCTGGTGGCAGCAGCGAGAGCAGCAGTGGGCGGGCAGCCGGGGACACCCCGGAGCGCAAGGAGGCGGCTGG；
SEQ ID NO:104：
TACTGGCAAGAAGGTGAAGGTGCGGCCCCCGCCCCTGAAGAAGACCTTTGACTCTGTGGACAAGTGAGCATGGGCTGGGGCCTTGGTGGAGCGTGTTAGGGTGGCGGGAGTGGGAGCAGC；
SEQ ID NO:105：
CTGCAGGCTGAGGCGGGGGAGGTGACCCTGCCGGCCCTCCAGCAGGGTCCTGTCAGAAGTGGACTTCGAAGAGCGCTTTGCTGAGTTGCCTGAGTTTCGGCCTGAGGAGGTGCTGCCCTC；
SEQ ID NO:106：
CCCCACCCTGCAGTCTCTGGCCACCTCACCCCGGGCCATCCTGGGCTCTTACCGCAAGAAGAGGAAGAACTCCACGGGTAGGCGAGCATTGGGCACCCAGGGTCCTTAGGTGGAGGGCAG；
SEQ ID NO:107：
TAGGTGGAGGGCAGACTGGGGCCACCTGCACTGAGTCTGCTTCTGTTTGGCCAGACCTGGATTCAGCACCCGAGGACCCCACCTCGCCCAAGCGCAAGATGAGAAGACGCTCCAGCTGCA；
SEQ ID NO:108：
GCTCGGAGCCCAACACCCCCAAGAGTGCCAAGTGCGAGGGGGACATCTTCACCTTTGACCGTACAGGTGCCGTGGTGGGCAGAACTTTGGGGGCCTGGGGACCTGCAAGAGGAGTGGGTC；
SEQ ID NO:109：
CAGGAAGGCCCTGCCGCTGCTGCAGCCTTGCCATGCTGCCTGTGCCCTGCACAGGTACAGAAGCCGAGGACGTGCTTGGGGAGCTAGAGTATGACAAGGTGCCATACTCCTCCCTGCGGC；
SEQ ID NO:110：
GCACCCTGGACCAGCGCCGGGCCCTGGTCATGCAGCTCTTTCAGGACCATGGCTTCTTCCCGTCAGGTGAGCCTGTCTCGGAGTCTTGGGGTCACTCGGGTGGGACTTATCTGTACATCT；
SEQ ID NO:111：
TGGGACTTATCTGTACATCTCATCCTGTGCTCCCCACCGTTTTTCTATCTCCAGCCCAGGCCACAGCCGCCTTCCAGGCCCGCTATGCAGACATCTTTCCCTCCAAGGTTTGTCTGCAGT；
SEQ ID NO:112：
TGAAGATCCGTGAGGTGCGCCAGAAGATCATGCAGGCTGCCACTCCCACGGAGCAGCCCCCTGGAGCTGAGGCTCCTCTCCCTGTACCGCCCCCCACTGGCACCGCTGCTGCCCCTGCCC；
SEQ ID NO:113：
CCACTCCCAGCCCCGCAGGGGGCCCTGACCCCACCTCACCCAGCTCGGACTCTGGCACGGCCCAGGCTGCCCCGCCACTGCCTCCACCCCCAGAGTCGGGGCCTGGACAGCCTGGCTGGG；
SEQ ID NO:114：
AGGGGGCTCCCCAGCCCTCCCCCCCACCCCCAGGTCCCTCCACAGCTGCCACAGGCAGGTGAGGGACCCCTGAGAAGATGCCAGGACTTATAGTACCCCCTCAGGACATGGACAGTATGT；
SEQ ID NO:115：
GGGGGCAGGAAGGTTATCTCCTCCCGGGTAAAGCCATTTCGTCCTCTCCAGTTTGGGGCGGAATGAGGCCTGCTCCTCTTGTAAATACCCCCTTCCCTCGAAGCTCCCTCCCGGTGCTGG；
SEQ ID NO:116：
GGGGCAGCTGAGGGGCTGCAGGGGCAGTCTCCCTCCTCCAAGCCCCTGTACATAACCTGGAGCGTGTGACCTTCAGAGCTTTTCACTTTATGCAAAATGGCTCCTGTGAGGGCTGCAAGC；
SEQ ID NO:117：
TGGAGGGTGGTGCAGGCCTTGGGCCACAGGGAGGCGCCTGTGGAATAGGGGGAGTTCATGCACCCCTTTTTTCCCCAGAGGGGCTGGACTCAGGTTAGTTTGGGGGTGGGGGCTCCTGCA；
SEQ ID NO:118：
CTTTGCCACAGGCACGGGGAGGGTTTTCTCCTCACCCCCTCTGCCCTCCCAACTTGGGTTGTACTTTCTAAGAAGGTGATTCCCCCTGCCCTTGCCCCCTTCCCCAGAACAAAACATGTT；
SEQ ID NO:119：
GATCATGTGCAATATTTCTTACTGTGCCGAGAAGCCGCAATGAGCGAGATTAAAGCTGTTTAACACACCTGTGTGGCTGTAGGCTCTTAACAGGGAGGGCTGTTGGTTGTACCAGTCCTG；
SEQ ID NO:120：
AGAACGAGGAGGAAGGAGAGAAAATGGCGTCCACGGGTGAGTATGGTGGAACTGCGGTCGCGCCGGCGGTAGCCGGAACGCCCAAACTGGGGGTCGTTCGTCTCTGGGCTTGGCTGGGAA；
SEQ ID NO:121：
TCTGCTAACTTTACACTATTTTTCCTCCTTGTTTTCCTCTAGATTACAGTACCTATAGCCAAGCTGCAGCGCAGCAGGGGTAAGTCAGTCTTTTATAACCGTATTTTGTGTGTGATTAAT；
SEQ ID NO:122：
TCTATTCAAGTTATTGCATTTAATTCTTTTGCAGCTACAGTGCTTACACCGCCCAGCCCACTCAAGGATATGCACAGACCACCCAGGTAATCTTTAAAATAATTACATGTAGCTGCACCT；
SEQ ID NO:123：
TTGCTAAAATACAAAAGTTCATGTATGAAGTTCTTGCATTCGTTTTTTTTTGGAGCAGGCATATGGGCAACAAAGCTATGGAACCTATGGACAGCCCACTGATGTCAGCTATACCCAGGC；
SEQ ID NO:124：
TCAGACCACTGCAACCTATGGGCAGACCGCCTATGCAACTTCTTATGGACAGCCTCCCACTGGTAAGGCCTGCCTTGGAGAGATTTTTGGGTCGTTCTGGCTAGGGCATTGGCTAAGAAG；
SEQ ID NO:125：
TTGCTTCATCTGATAGTGTACCCTCTACTTTTTGTTTTGTGCTTTCCACAGTAGAAGGGACCAGTACAGGTTTGACTATCCTGCTCATTCTTGCATGGGAAATGCTTTCCATCTTGTCTA；
SEQ ID NO:126：
TCTGATGCAGCTCTCCTTTGTTCTAGGTTATACTACTCCAACTGCCCCCCAGGCATACAGCCAGCCTGTCCAGGGGTATGGCACTGGTGCTTATGATACCACCACTGCTACAGTCACCAC；
SEQ ID NO:127：
CACCCAGGCCTCCTATGCAGCTCAGTCTGCATATGGCACTCAGCCTGCTTATCCAGCCTATGGGCAGCAGCCAGCAGCCACTGCACCTACAAGGTAAGGCCATGGTGTCCTTAATGCGTC；
SEQ ID NO:128：
TCACTTTTTAATTTTATTTATTATTTCTCCTCTTAGACCGCAGGATGGAAACAAGCCCACTGAGACTAGTCAACCTCAATCTAGCACAGGGGGTTACAACCAGCCCAGCCTAGGATATGG；
SEQ ID NO:129：
ACAGAGTAACTACAGTTATCCCCAGGTACCTGGGAGCTACCCCATGCAGCCAGTCACTGCACCTCCATCCTACCCTCCTACCAGGTCAGTCTACTTTTTGTGGCAAAACAAAAACAGTGA；
SEQ ID NO:130：
TCTCTCTCTTTCAGCTATTCCTCTACACAGCCGACTAGTTATGATCAGAGCAGTTACTCTCAGCAGAACACCTATGGGCAACCGAGCAGCTATGGACAGCAGAGTAGCTATGGTCAACAA；
SEQ ID NO:131：
AGCAGCTATGGGCAGCAGCCTCCCACTAGTTACCCACCCCAAACTGGATCCTACAGCCAAGCTCCAAGTCAATATAGCCAACAGAGCAGCAGCTACGGGCAGCAGAGTGAGTTGCTAAGA；
SEQ ID NO:132：
ATAGCCAACAGAGCAGCAGCTACGGGCAGCAGAGTGAGTTGCTAAGAGAGAAAACCAAATAAGAATGAATGTGTTTAGAGTTTTTTTGTGGGGTTGATTTTTTTTGTTGGTTTGTTTTT；
SEQ ID NO:133：
CATGGCTTACAGATGTGACTCTTTCCTCAGGTTCATTCCGACAGGACCACCCCAGTAGCATGGGTGTTTATGGGCAGGAGTCTGGAGGATTTTCCGGACCAGGAGAGAACCGGAGCATGA；
SEQ ID NO:134：
GTGGCCCTGATAACCGGGGCAGGGGAAGAGGGGGATTTGATCGTGGAGGCATGAGCAGAGGTGGGCGGGGAGGAGGACGCGGTGGAATGGGGTAAGAGCAAACCTTTTCTCCTTTTACCT；
SEQ ID NO:135：
GAACTTCAAAATTAAAGTTGATTTTTAACTTCCATATTAGCAAATACTCTTCACTACTGAAAGACAGTACTATTTTGCATATTCTGCATAACTTTAAGAAAGTCTTTAGTGAAATCTTTA；
SEQ ID NO:136：
CGTGGAAACTTTTTAACATGCTTTGTCGCATTTATATGCTACAGGTTACAAAGTGAGAGCCTTGTATACACTTCAATACTTAAAAAGTACCCGTACTCAGTACTCAGCCGGCAGCATAAT；
SEQ ID NO:137：
GAAAAGTGGGACTAGACACGGTGTCCATATGGAGAGGAAAAATATACATAGAATATTTTTAACAAAATGTATTCATTGTATAAATGGAATCCTTCTGTAACTTTGGTAACTGCATACTTG；
SEQ ID NO:138：
TTGTTTGGTAATGAACCAGAGGAGGTATAATACTCTAGAATTGTGTAACATTAAAGTGTAAACTTTTGTGTTTAAAGAGAGAGAACATTTTATGGTGTGTACTTTTAAAAAGGAAACAAA；
SEQ ID NO:139：
TTTAAAGGGAAAGGCCTTCATTTCTTCGTTTATCCCCCCAGCAGCGCTGGAGAGCGAGGTGGCTTCAATAAGCCTGGTGGTAAGTTTTTGAGTATTACCATAGATAGTGTTTAAAAAAAA；
SEQ ID NO:140：
GACGTGCACTAATAATATTTTATATGATCTTTCCTGGTTGGCAGGACCCATGGATGAAGGACCAGATCTTGATCTAGGTAATTTTGAATTCTAGTTGTGCTTCATATCGTGCTTTGTAAA；
SEQ ID NO:141：
GCCCACCTGTAGATCCAGATGAAGACTCTGACAACAGTGCAATTTATGTACAAGGATTAAATGACAGTGTGACTCTAGATGATCTGGCAGACTTCTTTAAGCAGTGTGGGGTTGTTAAGG；
SEQ ID NO:142：
TTTCTCCCAAATTAGTATATTCTAGTCATGCCTAACTATGCTATTCTTTGTCTAGATGAACAAGAGAACTGGGCAACCCATGATCCACATCTACCTGGACAAGGAAACAGGAAAGCCCAA；
SEQ ID NO:143：
AGGCGATGCCACAGTGTCCTATGAAGACCCACCCACTGCCAAGGCTGCCGTGGAATGGTTTGATGGTGAGATGTACTCACTGGCATTCTTAATCTCCCTGGCTATAGAATATGGCATGAG；
SEQ ID NO:144：
TGGAGTTGGTGAACAGGGAGTACAGGGGAGTAATTGATGTTCTGTTGTCTTGTTCCAGGGAAAGATTTTCAAGGGAGCAAACTTAAAGTCTCCCTTGCTCGGAAGAAGCCTCCAATGAAC；
SEQ ID NO:145：
AGTATGCGGGGTGGTCTGCCACCCCGTGAGGGCAGAGGCATGCCACCACCACTCCGTGGAGGTACTTTTTCTGAGCTCCTATGTTGCATTAAAAGGTTTTCAGTACACTTCATACCCTTG；
SEQ ID NO:146：
GAGAAATGATTTGCTGTTTCTTGTTGTTCTTGTTGTAGGTCCAGGAGGCCCAGGAGGTCCTGGGGGACCCATGGGTCGCATGGGAGGCCGTGGAGGAGATAGAGGAGGCTTCCCTCCAAG；
SEQ ID NO:147：
AGGACCCCGGGGTTCCCGAGGGAACCCCTCTGGAGGAGGAAACGTCCAGCACCGAGCTGGAGACTGGCAGTGTCCCAATCCGTATGTACTTGTCTTGGCAAATTGATACCCTACGAGTGA；
SEQ ID NO:148：
TAGTGAGTGTGTACCTGTTCACACACCACCTTTCCTTGTTTATCTTCCTTAGTTCAATTGGTGATTTCTGCTGTGATGTAATTGTATGCAGGGGTTGTGGAAACCAGAACTTCGCCTGGA；
SEQ ID NO:149：
GAACAGAGTGCAACCAGTGTAAGGCCCCAAAGCCTGAAGGCTTCCTCCCGCCACCCTTTCCGCCCCCGGGTAGGTGCAGGTTTCATGAGTGTCCCCTCAGCTTCCTGGTGCTAAACCTCT；
SEQ ID NO:150：
CAGGGCCTCTGCAGCCACCCACTGACTGCTTTCGCCCTGCTATTCTCACCTTAGGTGGTGATCGTGGCAGAGGTGGCCCTGGTGGCATGCGGGGAGGAAGAGGTGGCCTCATGGATCGTG；
SEQ ID NO:151：
GTGGTCCCGGTGGAATGTTCAGAGGTGGCCGTGGTGGAGACAGAGGTGGCTTCCGTGGTGGCCGGGGCATGGACCGAGGTGGCTTTGGTGGAGGAAGACGAGGTGGCCCTGGGGGGCCCC；
SEQ ID NO:152：
CTGGACCTTTGATGGAACAGATGGGAGGAAGAAGAGGAGGACGTGGAGGACCTGGAAAAATGGATAAGTAAGTGCTGGTGAAAAGCAGCTGTGGGCCGCCAGGCACAGTAAGAGGACAGC；
SEQ ID NO:153：
CCCTTCCCATTCTAACCGAAGGGCCCTCTTTACCTTGCAGAGGCGAGCACCGTCAGGAGCGCAGAGATCGGCCCTACTAGATGCAGAGACCCCGCAGAGCTGCATTGACTACCAGATTTA；
SEQ ID NO:154：
CTATAACACACTGTACATGGTGGGTCCAGCTTGCTCACCAGTAGTTGTCTGAGGCCAGATCACTGGGGTGGAGCCACTCTACAGAGGAGCCCAGCAGAGTCTGAATTTCGTTCGTGAATT；
SEQ ID NO:155：
CCACCAGATCTAACAGCTCCTTACTTTCAGGGTTGAAGGCTTCCAGGTCTTTGGAGCAAGAGAACAAGAGACTTGCAGAAACCTGCCGATAAAATTCTGCCTCTGCAATGGTGACAATTT；
SEQ ID NO:156：
CCACGTTTGGAAAATTGCAGCGAAATATGCGGGAGGACATTTTCAATTTCTTAAGGACATCCGAAAGCAGTAGCCAGTTTCGTGGCCTACAAAACAGAAAGGAAAATGCTTTGAGTTTCC；
SEQ ID NO:157：
AGCAGCTCAGCTAGTTTTCAATCACATGACAGCCATGCTCACCCCTGAGCCACAGATACTTGGATGTTATAACACGGTAAGAGGGGGGTCTCTGAAAATTCAAATTCAAACACATCGCTA；
SEQ ID NO:158：
TAGGCATCGTCATCATCATCCTGGTCTTCTGGTCCTGGGGGGTTGGCTAAAACATCATAGCCACTTTCATCATCTGGTTCTAATGGAGGGCAAATAAGAGAGGAAGGAATCAGTAAACTA；
SEQ ID NO:159：
AGAGCAAACAATGCAGCTTACCACAAACAGAGCTGCCATAGAAGTCCCAAGTGCCACTGGCGTCATCATCATTGCGACCCTGGAGGTCATTTAAATAATCTGGAGGGAGAGAAAAATAAA；
SEQ ID NO:160：
TTATCATCTAATTTTTGAATAAGACCATTTCTTGAACTTTGTCATACCTGTTAAGAACTTTTCCATAAGTTCACTGTGGGTCATTTTCATGATGGTTCTACCTGAGTACGTAGCCAAGGT；
SEQ ID NO:161：
GGGGTCAGCACCATAAGAGAGAAGTAGTCGGACAATTTCCAAGTGATCGTTCTCAACAGCATCGTGCAGAGGCCTAGGAAGAGAGGCGCAATAGAATTATGCTCATGCAAGCCACACTTG；
SEQ ID NO:162：
AGCAGAGCCAGGCTGAGAACAAGACACATCACTGACCTGGTTCCATCCTGGGCACTACAGTTGACATCAGCGCCATATTCAAGGAGGTGTCGCACAATGTTGAGCCAGCCCCTAGCACAA；
SEQ ID NO:163：
GCTTCATGCAGGGCGCAGTAACCTGCGTTGTCCCGATGATTTACATCACAAATCTTGTTCTCTAAGCAGTACAGGACCACTTCCTGTGGGGAGGGGAGGGAAGAATGCCATCAGATCACT；
SEQ ID NO:164：
GCAGGCCCCGCCCCCCAGCCTGCAGCCCCAGGGAGCGCCCACAGGGACACACCTCATAGCCAAGCCTGGCTGCCCGCTGCAGAAGGGTCTCGCCAGCGTTCTTATTGACAATAAGTCTCC；
SEQ ID NO:165：
GTGCTTCCGGCGGCATAGGGCGAGACTGGGTGGTCTCCTGAGGGGAACTTGAGCATGGCAGCTGTGTGGACTGGGAGGCTGGTAGCAGTTGCTGCAAGCGGTCGAAGGGCTTTGGCTCCT；
SEQ ID NO:166：
GCTTGGCTGGTGACAGATCATAGTCCGAACTGGGCTCCGGCCGCTTTCTGAATCTCCGGACAGTCACCTATCATAAAACCAAGCAGCGCACACGGTTAAGCCCGTGTCCTTCTAACAGCC；
SEQ ID NO:167：
CCGGGGTCAAGAGGTACCTTGCCATCGGCATTCTCCACGTAGTATTCCCCTGTCAGTGGCAATCCCCGCCTGGACTCCTGAGGGATCAAGTGTTTGGTTTTGCACAGTCTCTTCCCGGAT；
SEQ ID NO:168：
GGCTTCTCGCTGTTGTCGGTGTATTTCTGCAGCAGGGAGGCAGCCTGGCAATCCTCTTCTTCGTCTGCACACAGCACATCTGTCTTCTGGTTTTCTTTAATTTTCTGCTGTTTGGCAGGC；
SEQ ID NO:169：
GGCCTGGAGGCTGGTGCGCAGCTTGGCTGAGCCTGCTTTTTGCCGCCTGCACTGGTGGATGAAAGACTCTTCATGGGCGGAGAGCCGGAGAACACAGGCAAGCCTAAATACGGAGGGGGT；
SEQ ID NO:170：
CCGCATACCTTGTTCATTGTCACTGGGTTTAAGAGACTCTTCCGACCAGCTTCTGTTGCCTTTGGCCTCTGCCCTTTTCCTGCCAGGTTTCTCTTCAGTGATGTTAGTCCCCTGAGGAAT；
SEQ ID NO:171：
GGCCTCAGGCTGAGTGGCCTGGGTCACTTCCTTCCTGCTTTGCCGGCCAGGTTTGCCATCTGCTGCCGACACCTGCTGCTCCCATCGTTCTCTAAGGTGCAGCAAGTGGCGTTGTTTTTT；
SEQ ID NO:172：
AGGATGGAGCCCTGTTAATTCAATGCACACCTTCAGGTTGGTCAGCTCACTATAATGTGGGTCTTCTAAGTGGTTAGAGGAACTGTTTGTCATTTCCCTCTCAGGCCAGTCATCTAATGG；
SEQ ID NO:173：
ATGCAAAGGCCCACCCCCCGGCAGGCGGGCGAAGCAGACAGGGCTCACCTTTAGAGACTCGTCGGCGTTTGGCTTTCAGCAGAGGGTCCTCTGGCACCTCCTCCGCAGTGGTCTCAGTGT；
SEQ ID NO:174：
GGCTGCTGTCACCTGAGACTTTGCGTTTCCTGTCCACCCGGAGGGTGGGGCTGTGAGGCATGTCCGAGGCCACCTGGTCTGCGGGAGGCTCGCTCACAGGCTGCCTCTCCACAAAGTACT；
SEQ ID NO:175：
TCTCCACAGGAAGATCTTTGTCCTCTGGGGCTTCAAAGGGATCACGGTGCTTGTTTCCAACACTATACTCGCCTGGGGGAGGGGAGACAAGAGGGCATTAATGAAGCCCGAAGGTCGCCA；
SEQ ID NO:176：
CAAGCAAACTGCTCAGGTTTACTTACATCTCTCACTTTCGTTCTGTTCTGCAATGGCCTCCTCCAGGGTGACCGACTTTGGCTTTTTGTCCTGATTTCCTTTCAACCTTTCCCAGTCGGC；
SEQ ID NO:177：
TGGGCTGAATTTGCACATCTCGGAGTCTTTGGTTGCTGGGTGGCCACCTTCTCTTTCTTTCATCTCCAACTCTGAGAAGCGCATCATTGCACGCTAGAAAGAGAACGGAGATGGAAAAAA；
SEQ ID NO:178：
AAGATTCTAGTAATAAAAATTTGAAGAACTGACCTCACAGTAAGCAGCGGGTAGACATAAAATACTGTCCTCTTGTAATCCTTCCATCTATGTAATTAAAATGGGCACTCAATGGATCAT；
SEQ ID NO:179：
TGAAATTCAGGTGGGGGGGCTCACCTGCAATGCCCGTTGCTCCCGGCTGAGCTGACTGGAATCTGCATACAGTTCGGTAGTGACACATTTGAATCGGTCACCCACGTAACCCGCTGAGTT；
SEQ ID NO:180：
GGCGATTCTCTTTGCCAGCTTAGATGGCTTCGGTTTCAGAACTTTGCCATCATTTGATTCAGCCTCATCAGCTCCATCTTTGGTATAGGTGGGGGTCACATCCACACTTGGTGGGGCACT；
SEQ ID NO:181：
GCCCACACAAAATGGTTTGGGATCCTCTTGGGTTTTACCAAAAGTTACAGCAGGGCCATCGCTCCCCAGAGGTGGCTCCAGGAATGGAGTCGAGACTGGCAACCCTAGGTTCTCTTTGTT；
SEQ ID NO:182：
GGTACCTGCCAGAACACTGTCCTTGCTTACGGTGAAGACTGGCTGTTTGAAAGTATAAGTTTCGTGGAAGTCACTGATGCGCCCCAACTCCTCTCTCAGGGCGATGAAATCACGGTGCTG；
SEQ ID NO:183：
CTGCAGGGCCGGCTCAACTGAGGGCTTGGGGGGCTCAGCGCTCTGGCCAACACTCTCTGCTGCAAAGCTGGGTTTGGACACGTTTGTGTCAGTTTTAGCATCTGGTTCTTCTCGGAGAAG；
SEQ ID NO:184：
GTCTACGTAGACAAGCTTGTCGCTTTTGACAACAGTCTTCCCTTGATTCCAGTTGGGGTTCGGCTTTAGGTTCTTGTCGGTGGGGACATCTGGATGTAACTTGGTGCTGCTAGTTTCCAA；
SEQ ID NO:185：
AATCTCGGAAAACCGATTCCGGAGGGTTGGGTCCTCGTAACGGGCTCTCTCATGGGACCGGGATCTCCTCTCTGGTTTCTCCTCTTTAGTAATCTCTATGGGCGTGTGTGGTATCAACAT；
SEQ ID NO:186：
GGGATGCACCATGCCCAACCCCAGGGCATCTTGGTAGGTCACAAACTCTGGACGGCCGGTGGGAAGCCCATAGGGCAGCCCAGGCTTTGGGGCAAGGTGCCCAGGAAACAGACTGCCATT；
SEQ ID NO:187：
GGGTAACAAAACTGGGTGAGGGTAGACAGGTCCTTTGCCATGTAAGGAGAGGGGACTTACAGCAATGCCCTCAGGGGCTGGGTAAGGGAGGTAACTCCTGGGGTAGGGAATTGGTGGGGA；
SEQ ID NO:188：
CCTGAATGCCTCATTTGGAGACAGAAATATAGAGCTTGGTGGAAGGCCGTTCTCGTTTGCTTTGAAACTCGGTTCTGGGTTGCTGGCTTTGGCGCCCTTGCTGCTGGTGCTGCTACTGTG；
SEQ ID NO:189：
CTTGGCAGGAGTGGCCGGGGGCTGGCCCACGTGCTGAATAACGGATGGTGTGGTTTCTACAGAGCTCCTGCTGGTTTTGGTGCCATCTGCATTGGCATTGGGGGCGGGTGATGCGGAGGC；
SEQ ID NO:190：
TGGGCGGCCTGCACTCGACACTGACCCTGAAACGTTAGTGATGACAGCATCGGTGCCGCCCATGCGCGGGCATGATGAACTCCGCTGCTGTGGTATCGCCCAGTCCAATGCCTTGTTTTT；
SEQ ID NO:191：
CAGCGACATGCTTTTGCCATTGTTCTCTTCGTTAGGACTTGGCCCGGGCACCACCCAGGATGAGGGAGCAGTGCTGATGATTTCAGATCTATAGATAGCACAACCATTTCCTGGAGGAGA；
SEQ ID NO:192：
TAGTGTTTCTTTCGGAATCTCACTTCCGGAGAGCACTAAGCCACTTCCAGCCCTGCTGTGAACCAGGACCGTGGGAGCCATCTTTTTCATGTGGTCAGCTTTGGAAGCATCTACATCCAC；
SEQ ID NO:193：
CACTTTAGAAGACAAGTCTAGTGGCTTATCTGTGACGTCTTTGGTAACGGTCTGCTTCTCCAACAGAGGAGGTGAGCTGCCATCTTTTCTGTCTTGAACCGCTGTCTTCCGGGCATGCCC；
SEQ ID NO:194：
GGGCACTGGCTGGGCACCTTCGCCCCCTTCCGGAGCCTTGGGATACTTGCCATTGGAGAGCCTGGCCGCGGGGAACTCGCTGCTAACTGTCATGTATGGCTTTGACAGGGCAACTGAAGG；
SEQ ID NO:195：
AGAGGTGGAGATCCTGGCATAGTGCTTGTGGAACTCCGAGTAGGTGTCTGCAGCAGGCTGGGTGGGAAGGTGGACTCGGGGTGACGGCCGAGGCGAGGGGGGCAACAGGAGAGCTGTGTC；
SEQ ID NO:196：
CCCCGGCAGGCCACTGGTGACCGCCTTGGCAGAGGGAACCCTGGGCTGCTTACTGTTCTGGATGTGAGGATAGGCGTGGGAATCAACAGGATTCCCAGGGCTGACGCCCATCTTCCACGG；
SEQ ID NO:197：
GAGGCTTTTGTCTGCGCAATGGACGAGAGGCGGGATGGCTGGGGAGGCCGAAGGTGTCGAGAGCCTCATGGGTGATGCCAAGGACGATGGGATGTGGGGACCGACGTAGTGAGGTGGCGG；
SEQ ID NO:198：
CAGGTAGAGAAAGCGCTCCCCATTGGTGCAGACTGGAGAATACAGCGGCTGGGCCAAGCTGTAGGACTGCTGAGGTAGCAAGGCCTTGTACATGTTCAGTGAATACTTATTTGGCGAGTC；
SEQ ID NO:199：
GAGGAAAGGGTAGATGGCTGGCGTGGCACCCTCCATGTAAGGATTGACCCAGGGCAGCCGCAGATAACTAGCACCATTGATGTTGAGAGGGCTCTGTTTGTCGCTGGCAGGCCTGTCCAA；
SEQ ID NO:200：
GCCCAGCGCTTCTGCTGTGGCTACAGCACTTTTTTGTATTCCAGGCGGTGTTTTGTATATAGCACTGAAGCCATTTGGGGGTTTTCCAGAGACGGCAGAAGCCTCCACTGTCTCGGGTGT；
SEQ ID NO:201：
ATTCGGTTTGAACTGCATCTCTGGATTTCTTTCCGAAGAAAACCCAAGGCCACCTAGAGTGCTTGTGGCAGCCTCCCGACCTTTCTCTGAGCCCAGTCCACACAAGCTAGAATAGACGAT；
SEQ ID NO:202：
GTTTCCCGGGACCCGCAGCCCTTCCCGGATCAGGCCAGTGCGGTCCATGCTCAGTGCTGCCAGGCCATCGATCCTATGGGCCGTGCTCGCATCCACCTTTGCAGAAGAACAACATGGGTG；
SEQ ID NO:203：
AGAAGCTATTAATCTCTTACCACGTTGTGGTTCAAGGGATTCTCTTCCCTCAGTTCCAGTCTGGCTTTTGAAGCGTCACCATCATTTACAAGGATTTTCCTATTTAAAAAGATACACCAA；
SEQ ID NO:204：
CAGATGGGCGCATTCACCTGTCTTCGCTCGCCCCACACATGCGGACCCTCTCGCTGTTCATCCAGCTGTGAACGTTCCCATACAGGGGGGTTGCTGAGAGCATGTCGTCTTCTGGGATGG。
2.一种尤文肉瘤相关融合基因检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括权利要求1所述的尤文肉瘤相关融合基因检测探针组合物。
3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括反转录试剂、测序文库构建试剂、PCR试剂或探针杂交试剂中的任意一种或至少两种的组合。
4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述反转录试剂包括一链cDNA合成缓冲液、一链cDNA合成酶、二链cDNA合成缓冲液或二链cDNA合成酶中的任意一种或至少两种的组合。
5.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述测序文库构建试剂包括DNA片段化缓冲液、DNA片段化酶、末端加A尾缓冲液、末端加A尾酶、连接缓冲液、连接酶或接头中的任意一种或至少两种的组合。
6.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述PCR试剂包括PCR缓冲液和/或PCR引物。
7.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述探针杂交试剂包括杂交缓冲液和/或RNA酶抑制剂。
8.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括核酸纯化试剂。
9.根据权利要求8所述的试剂盒，其特征在于，所述核酸纯化试剂包括磁珠和/或清洗液。
10.一种以非疾病诊断为目的的尤文肉瘤相关融合基因检测方法，其特征在于，所述检测方法包括：
将样本RNA反转录为DNA后，进行片段化、加A尾、连接接头和PCR扩增，构建预文库；
利用权利要求1所述的探针组合物从所述预文库中杂交捕获目的片段，进行PCR扩增，构建探针捕获文库；
对所述探针捕获文库进行测序和数据处理，分析尤文肉瘤相关融合基因的融合类型。
11.根据权利要求10所述的检测方法，其特征在于，所述反转录包括一链cDNA合成和二链cDNA合成。
12.根据权利要求11所述的检测方法，其特征在于，所述一链cDNA合成的条件为：20～30℃反应5～10min，40～42℃反应10～15min，65～70℃反应10～20min。
13.根据权利要求11所述的检测方法，其特征在于，所述二链cDNA合成的条件为：20～30℃反应20～40min，60～65℃反应10～15min。
14.一种尤文肉瘤相关融合基因检测装置，其特征在于，所述检测装置包括：
核酸提取单元：用于从尤文肉瘤样本中提取核酸；
反转录单元：用于将提取的RNA反转录为DNA；
预文库构建单元：用于将提取和/或反转录的DNA进行片段化、加A尾、连接接头和PCR扩增，构建预文库；
杂交捕获单元：用于利用权利要求1所述的尤文肉瘤相关融合基因检测探针组合物从预文库中捕获目的片段，并进行PCR扩增，构建探针捕获文库；
测序单元：用于对探针捕获文库进行测序和数据处理。
15.权利要求1所述的尤文肉瘤相关融合基因检测探针组合物、权利要求2-9中任一项所述的尤文肉瘤相关融合基因检测试剂盒或权利要求14所述的尤文肉瘤相关融合基因检测装置在制备尤文肉瘤诊断产品中的应用。
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CN110499290B (zh) * 2019-06-20 2021-04-06 上海市第一人民医院 一株人尤文肉瘤细胞系
CN110564850B (zh) * 2019-07-16 2022-10-11 中国人民解放军东部战区总医院 一种ewsr1-tfeb融合基因及其检测引物和应用
CN110878358B (zh) * 2019-12-19 2020-08-25 上海宝藤生物医药科技股份有限公司 一组甲状腺癌标志物及其应用
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