CN111278326A - 改善皮肤、头发和头皮健康的基于酵母的面膜 - Google Patents

Abstract

本发明提供了使用基于酵母的化妆品面膜改善面部皮肤、头发和头皮健康的材料和方法。在一个具体实施方式中，本发明提供了一种应用于面部的基于酵母的面膜，其可改善面部的健康和外观。在另一具体实施方式中，本发明提供了一种应用于头发和头皮的基于酵母的面膜，其有助于防止脱发，以及改善头发和头皮的健康和外观。还提供了使用基于酵母的面膜的方法。

Description

改善皮肤、头发和头皮健康的基于酵母的面膜

相关申请的交叉引用

本申请要求于2017年7月28日提交的申请号为62/538,152的美国临时专利申请的优先权，其全部内容通过引用并入本文。

背景技术

几十年来，化妆品和外表的改善一直是人类日常生活的一部分。在所有的化妆品美容关注点中，改善面部皮肤健康和外观是最期望的关注点之一。因此，面部的选择性处理对消费者来说非常重要。已经使用各种各样的化妆品递送系统来向面部区域提供有益的成分和组合物，如乳液、磨砂膏、洗剂、滋补剂、面霜、喷雾剂、喷洒剂(splashes)、凝胶和化妆棒(sticks)。特别地，化妆品面膜是最流行和最方便的可用递送系统。

应用于面部、下巴、颈部和耳朵的各种面膜产品可以配制成为这些区域的皮肤递送特定的益处。这些益处包括用于减缓衰老、减少皱纹、治疗痤疮、爽肤、美白、紧致、保湿、光滑、去角质等的化合物。此外，面膜可以应用于人体的定点部位，以获得最大的吸收度、生物利用度和对皮肤的整体益处。此外，面膜可以吸附到皮肤上，去除皮肤上不需要的油脂、污染物、杂质、细菌和死细胞。去除面膜后，例如面膜干在脸上并剥去或洗净后，可以对面部皮肤进行另外的深层清洁。

化妆品护肤面膜领域的一个新趋势是在面膜配方中使用微生物。酵母菌被认为是健康、美丽和年轻的天然来源，因为它们能够再生和保湿皮肤，促进改进的血液循环和新陈代谢，保护皮肤免受自由基的影响。酵母由于活性成分的丰富组合，几十年来一直被用于自制的皮肤改善药物。特别是，酵母可以提供氨基酸和肽，从而增强参与毒素清除的物质，减缓色素沉着的过程，并激活胶原蛋白的生成机制。

此外，酵母还提供一些对皮肤健康至关重要的维生素，包括：B1(硫胺素)，用于调节碳水化合物、脂肪和蛋白质代谢、能量和水盐平衡，以及防止皮肤过早老化；B2(核黄素)，其在氧化还原反应和体内其他维生素的合成中发挥重要作用，改善面部的颜色和色差(shading)；B3(烟酰胺，烟酸)，其具有血管扩张特性，促进脂肪和糖转化为能量；B5(泛酸)，其有助于产生抗体，增强免疫防御，例如，抵抗病毒感染；生物素(B7或H)，其有助于通过循环系统携带二氧化碳，参与葡萄糖激酶的最大化，是激活抗坏血酸所必需的，抗坏血酸对刺激皮肤细胞再生很重要；B9(叶酸)，其是红细胞生成所必需的，影响所有组织的发育和生长，有效阻止痤疮的蔓延，阻止反复的皮疹；维生素E(生育酚)，其是一种强抗氧化剂，能保护细胞膜免受自由基的负面影响，防止病理性过氧化的机制，从而对抗衰老过程。

酵母还可以提供各种宏观元素和微观元素(如钠、磷、钾、铁、钙、碘、镁、钼、锌和其它矿物质)，这些元素积极参与新陈代谢，减少炎症过程，使皮肤恢复活力，并控制皮脂腺分泌皮下脂肪。

另一个酵母组合物可以发挥作用的化妆品领域是头发和头皮健康。脱发是一个常见的问题，是由毛囊变弱、氧合不良、自由基积聚和某些必需营养素缺乏引起的。有各种各样的治疗方法旨在对抗脱发并改善头皮健康，以刺激头发生长。例如，这些包括毛发移植、药物和激素治疗，以及非药物治疗，如紫外线照射、运动疗法、血管重建手术和针灸。一些商业产品，例如洗发水和去角质剂，要么是无效的，要么是长期使用很昂贵。

然而，基于酵母的产品作为治疗脱发和改善头皮健康的经济有效的替代品，已经显示出很有希望的结果。最著名的头发和头皮健康应用涉及使用啤酒酵母或面包酵母(酵母菌)。酵母提供的有益于面部皮肤健康的维生素、矿物质和蛋白质同样也有助于加强毛囊，促进头发生长，防止脱发。

然而，这些类型的酵母在控制可能导致病症(例如脱发、头发稀疏和头皮屑)的致病真菌和细菌方面是无效的。

化妆品行业是一个数十亿美元的行业，它向消费者提供能够增强健康和外观的产品；然而，许多化妆品可能含有对人类和/或环境有害的某些成分，而且，许多化妆品对于其声称的目的根本无效。因此，消费者对经济、安全、有效的化妆品有持续的需求。特别需要改善面部皮肤、头皮和头发的健康和外观的组合物和方法。

发明简述

本发明提供了基于微生物的产品，及其生产方法和在局部化妆品组合物中的用途。更具体地说，本发明提供了使用含有基于微生物的产品的局部化妆品组合物来改善皮肤、头发和头皮健康的材料和方法。有利的是，本发明的局部组合物和方法是环境友好的、非药物的和划算的。

在优选实施方式中，提供局部化妆品组合物，其包含治疗有效量的微生物和/或其生长副产物。

在一个实施方式中，局部化妆品组合物被配制为用于改善面部皮肤的面膜。在优选实施方式中，面膜是剥离式面膜。面膜也可以配制成水洗面膜或纸质面膜。

在一个实施方式中，所述局部化妆品组合物被配制为用于改善头皮和头发健康的发膜。

在一个实施方式中，所述组合物可包括治疗有效量的活性或非活性酵母细胞和/或其生长副产物。还可以包括其他成分，例如植物油、海藻酸钠、黄原胶、二水硫酸钙、山梨醇、氧化镁、瓜尔胶、硅藻土、焦磷酸四钠和水。所述组合物还可包括酵母提取物(例如，酵母菌水解物和/或自溶物)。

在一些实施方式中，用于改善皮肤、头发和头皮健康的组合物还包括由微生物产生的一种或多种生物表面活性剂。具体而言，在某些实施方式中，所述组合物可包含治疗有效量的糖脂(例如甘露糖赤藓糖醇脂(MEL)、槐糖脂(SLP)、鼠李糖脂(RLP)、海藻糖脂(TL))、脂肽(例如表面活性素、地衣素、伊枯草菌素或泛革素)或其组合。生物表面活性剂可以进行纯化，也可以粗加工形式使用，这意味着它们不会从发酵液(它们在发酵液中制备)中分离出来。

在一些实施方式中，局部组合物还包括治疗有效量的一种或多种已知的例如以任何方式治疗、补充、恢复活力、保湿、保护和/或改善皮肤、头发和/或头皮的外观和/或健康的药剂(例如，白藜芦醇、透明质酸、抗真菌剂或者抗粉刺剂)。

在一些实施方式中，局部组合物还包括局部可接受的载体，例如油包水或水包油乳液或含水精华素。

在一些实施方式中，局部化妆品组合物还包括通常在化妆品组合物中发现的其它佐剂和添加剂，例如，有机溶剂、硅酮、抗菌剂、稳定剂、增稠剂、软化剂、防晒剂、保湿剂、调节剂或芳香剂。

在某些实施方式中，提供了用于改善受试者面部皮肤的健康和/或外观的方法，所述方法包括：

a)使用非药物清洁剂清洁受试者的面部皮肤，以去除皮肤上的化妆品、污垢和油脂；b)生产包含酵母细胞和/或其生长副产物的面膜组合物；c)将面膜组合物薄层应用于面部皮肤；d)允许面膜组合物在皮肤上干燥若干分钟；e)用温水洗去面膜组合物。

在一个实施方式中，步骤b)包括将酵母细胞添加到植物油(例如椰子油或橄榄油)中并与水混合以形成稠糊状物。例如，在一个实施方式中，步骤b)包括将约30-50g酵母细胞与天然油(例如橄榄油或椰子油)混合。

在一些具体实施方式中，该方法包括：

a)使用非药物清洁剂清洁受试者的面部皮肤，以去除皮肤上的化妆品、污垢和油脂；b)生产包括酵母细胞和/或其生长副产物的剥离式面膜组合物；C)将面膜组合物薄层应用于面部皮肤；D)允许面膜组合物在皮肤上干燥若干分钟，以形成致密的薄膜；e)将薄膜从皮肤上剥落；f)用温水洗掉皮肤上的任何剩余薄膜。

在一些实施方式中，步骤b)可以包括将酵母细胞添加到包含海藻酸钠、黄原胶、二水硫酸钙、山梨醇、氧化镁、瓜尔胶、硅藻土和焦磷酸四钠的粉末混合物中以形成酵母粉末混合物；将酵母粉末混合物与水以例如约1:25的比例混合，从而产生一种液体或半液体面膜组合物。

所述方法的步骤b)还可包括向所述组合物中添加其它成分或适当添加剂和/或佐剂，例如微生物生物表面活性剂或皮肤活化剂。

该方法可以每天应用一次或两次，根据需要持续数天、数周或数月，以使受试者实现所需的面部皮肤改善。该方法还可用于治疗皮肤病，例如寻常痤疮。

在某些实施方式中，本发明提供了改善头发和头皮健康的方法，所述方法包括将有效量的局部化妆品组合物直接应用于头皮和头发若干分钟，足以实现头发和/或头皮健康和/或外观的期望数量的改善。

在一个实施方式中，改善头发和头皮健康的方法包括：a)将约30-50g酵母细胞与橄榄油或椰子油混合以形成酵母油混合物；b)向酵母油混合物中加水以形成稠糊状物；c)将糊状物应用于受试者的干燥的头发和头皮；d)用塑料包裹膜覆盖受试者的头发；e)让糊状物在头发和头皮上停留至少60分钟；f)用水冲洗头发和头皮上的糊状物。

步骤(a)和/或(b)还可包括将其他成分或适当添加剂和/或佐剂添加到该组合物中，例如微生物生物表面活性剂或皮肤活化剂。

该方法可每天应用一次或两次，根据需要持续数天、数周或数月，以使受试者在头发和/或头皮的健康和/或外观方面达到所需的改善。

该方法还可用于治疗头皮病症，例如头皮屑或脱发。对于这些用途，所述局部组合物被直接应用于存在所述病症的区域足够时间，以缓解或减轻所述病症的症状。

如上所述，本发明的组合物包括酵母细胞，酵母细胞可以作为活细胞或非活性细胞包含在组合物中。当提及“酵母细胞”时，术语“酵母提取物”和/或酵母菌水解物或自溶物不包括在内。

优选地，酵母细胞能够产生一种或多种期望的生长副产物，例如，生物表面活性剂、酶和蛋白质。在一些实施方式中，酵母是毕赤进化支酵母，选自异常毕赤酵母(Wickerhamomyces anomalus)、库德里阿兹威毕赤酵母(Wickerhamomyces kudriavzevii)和/或季也蒙毕赤酵母(Meyerozyma guilliermondii)。在一些实施方式中，酵母是生化产生酵母，例如，能够产生糖脂生物表面活性剂的酵母，例如，假丝酵母(Starmerella)、假酵母(Pseudozyma)等。

在进一步的实施方式中，本发明包括用于增强皮肤、头发和头皮健康和外观的所述组合物的家中制备和使用的套件。

发明详述

本发明提供了用于改善皮肤、头发和头皮健康的材料和方法，使用含有生化产生的酵母和/或其生长副产物的局部化妆品组合物。有利的是，本发明的局部组合物和方法是环境友好的、非药物的和划算的。

在优选实施方式中，所述组合物包括治疗有效量的酵母细胞和/或其生长副产物。该组合物还可包括一种或多种其它成分，例如，植物油、海藻酸钠、黄原胶、二水硫酸钙、山梨醇、氧化镁、瓜尔胶、硅藻土、焦磷酸四钠和水。所述组合物还可包括酵母提取物(例如，酵母菌酵母水解物或自溶物)。

在一个实施方式中，局部化妆品组合物被配制为用于改善面部皮肤的面膜。在优选实施方式中，面膜是剥离式面模。面膜也可以配制成水洗面膜或纸质面膜。

在一个实施方式中，所述局部化妆品组合物被配制为用于改善头皮和头发健康的发膜。

如上所述，本发明的组合物包括酵母细胞，酵母细胞可以作为活细胞或非活性细胞包含在组合物中。当提及“酵母细胞”时，术语“酵母提取物”和/或酵母菌水解物或自溶物不包括在内。

优选地，酵母细胞能够产生一种或多种理想的生长副产物，例如，生物表面活性剂、酶和/或蛋白质。在一些实施方式中，酵母是毕赤进化支酵母，例如，异常毕赤酵母(Wickerhamomyces anomalus)、库德里阿兹威毕赤酵母(Wickerhamomyces kudriavzevii)和/或季也蒙毕赤酵母(Meyerozyma guilliermondii)。在一些实施方式中，酵母能够产生糖脂生物表面活性剂，例如，假丝酵母(Starmerella)、假酵母(Pseudozyma)等。

本发明还提供了用于用于增强皮肤、头发和头皮的健康和外观的本发明组合物的家中制备和使用的套件。

选定的定义

如本文所使用的，“基于微生物的组合物”是指包含因微生物或其它细胞培养物的生长而产生的成分的组合物。因此，基于微生物的组合物可以包括微生物本身和/或微生物生长的副产品(例如，生物表面活性剂、溶剂和/或酶)。这些细胞可能处于营养状态或孢子形式，或两者的混合物。这些细胞可能是浮游生物，也可能是生物膜形式，或者两者的混合物。细胞可能是完整的或溶解的。这些细胞可以与培养它们的液体培养基一起存在，例如，以在每毫升组合物中1×10⁴、1×10⁵、1×10⁶、1×10⁷、1×10⁸、1×10⁹、1×10¹⁰或1×10¹¹或更多细胞的浓度存在。在一个实施方式中，基于微生物的组合物可仅包含去除了细胞的培养细胞的液体培养基。生长副产物可以存在于液体培养基中，并且可以包括例如代谢物、细胞膜成分、表达蛋白和/或其他细胞成分。

本发明还提供了“基于微生物的产品”，这些产品将在实践中应用以实现期望的结果。基于微生物的产品可以简单地是从微生物培养过程中获得的基于微生物的组合物。或者，基于微生物的产品可包含已添加的其它成分。这些附加成分可以包括，例如稳定剂、缓冲液、适当的载体(例如水、盐溶液或任何其他适当的载体)、支持进一步的微生物生长的添加的营养物质、非营养生长增强剂、和/或有助于跟踪微生物和/或其应用环境中的组合物的试剂。基于微生物的产品还可以包括基于微生物的组合物的混合物。基于微生物的产品还可以包括以某种方式(例如但不限于过滤、离心、溶解、干燥、纯化等)处理的基于微生物的组合物的一种或多种成分。

“代谢物”是指由新陈代谢产生的任何物质(如生长副产物)或参与特定代谢过程所必需的物质。代谢物可以是有机化合物，它是新陈代谢的原料(例如葡萄糖)、中间产物(例如乙酰辅酶A)或最终产物(例如正丁醇)。代谢物的例子包括但不限于酶、酸、溶剂、醇、蛋白质、碳水化合物、维生素、矿物质、微量元素、氨基酸、聚合物和生物表面活性剂。

如本文所使用的，术语“分离的”或“纯化的”，当用于生物材料或天然材料，如核酸分子、多核苷酸、多肽、蛋白质、有机化合物，如小分子、微生物细胞/菌株或宿主细胞时，意味着该材料基本上不含其它化合物，如本质上与之相关的细胞物质。也就是说，如果没有这些其它化合物，这些材料就不会天然产生，和/或与在天然材料中发现的那些相比具有不同或独特的特征。

在某些实施方式中，纯化的化合物为感兴趣化合物的至少60％(按重量计)。优选地，所述制剂为所需化合物的至少75％、更优选地至少90％、且最优选地至少99％或100％(w/w)(按重量计)。纯度通过任何适当的标准方法来测量，例如，柱色谱法、薄层色谱法或高效液相色谱(HPLC)分析法。

如本文所使用的，“表面活性剂”是指降低两种液体之间或液体与固体之间的表面张力(或界面张力)的表面活性物质。表面活性剂用作例如清洁剂、润湿剂、乳化剂、发泡剂和/或分散剂。“生物表面活性剂”是指由活细胞产生的表面活性物质。

如本文所使用的，术语“受试者”是指动物，特别是哺乳动物。在优选实施方式中，受试者是任何性别的人。受试者可以处于任何年龄或发展阶段，包括婴儿、幼儿、青春期前的儿童、青少年、十几岁的青少年、成人和老年人。

如本文所使使用的，“化妆品可接受的”、“局部可接受的”和“皮肤可接受”是互换使用的，旨在表示特定成分在所使用的水平上应用于人类表皮(例如皮肤)是安全和无毒的。在一个实施方式中，该组合物的组分被认为是公认安全的(GRAS)。

如本文中所使用的，术语“改善”、“增强”和“补充”，当在皮肤(包括面部皮肤)、头皮和头发的上下文中使用时，包括在皮肤、头皮和/或头发中提供益处或积极改变。这种变化可能有利于或积极改变皮肤、头皮和/或头发的外观，以及皮肤、头皮和/或头发的健康。益处或积极的改变可以是永久的或暂时的。

“改善”还包括治疗皮肤、头皮或头发的任何病症。如本文所使用的，术语“治疗”指在任何程度上根除、减少、减轻、改善或逆转某一病症或失调的症状或症候，并且包括但不要求完全治愈该病症或失调。因此，治疗可以包括治愈或部分减少或改善疾病。

如本文所使用的，“预防”病症或失调是指避免、延迟、预防或最小化该病症或失调的特定症状或症候的出现。预防可以，但不要求是绝对的或完全的，这意味着症状或症候可能在以后还会出现。预防可以包括降低这种病症或失调发生的严重程度，和/或抑制这种病症或失调向更严重的病症或失调发展。

如本文所使用的，术语“治疗有效量”、“治疗有效剂量”、“有效量”和“有效剂量”用于指的是能够治疗或预防受试者的病症或失调的某物(例如化合物、组合物、时间)的量。实际数量将根据许多因素而变化，包括但不限于特定病症或失调、病症或失调的严重程度、受试者的大小、年龄和健康状况以及给药途径。

如本文所使使用的，术语“皮肤病症”包括人类和动物影响皮肤的病症、失调或疾病。这种皮肤病症包括但不限于涉及表皮、真皮(包括结缔组织、皮脂腺和毛囊)和皮下组织(下皮)的病症。皮肤病症的症状包括，例如，痤疮样症状、色素沉着或丧失、潮红、炎症、皱纹、干燥、松弛、增厚、结垢、疤痕、剥落、皮疹、荨麻疹、水泡、溃疡、脱皮、脱发和皮肤外观的其他变化。在某些实施方式中，可使用本文所述的组合物、产品和方法治疗和/或预防的皮肤病症包括但不限于痤疮、斑点、酒渣鼻、毛囊炎、癌、黑色素瘤、口周皮炎、蜂窝组织炎、痈、光损伤、皮肤老化(例如皱纹和干燥)、老年斑、疤痕、狼疮、银屑病、鱼鳞病、过敏性皮肤炎、慢性伤口、褥疮、毛发角化病、皮脂囊肿、白癜风、黑斑病、疣、炎症性皮肤病、炎症后色素沉着过度、角化病、湿疹、干燥症、瘙痒、扁平苔藓、结节性痒疹、微生物感染、体味和粟疹。

如本文所使用的，术语“头皮病症”和“头发病症”包括影响头皮和/或头发的人类和动物病症、失调或疾病。这些病症包括但不限于头发或头皮干燥、头发稀疏、头发脆弱、脱发、男性秃顶、秃头、癣、脂溢性湿疹、脂溢性皮炎、乳痂、痤疮、银屑病、头虱、结节性脆发病、头皮屑(例如由马拉色菌真菌引起的头皮屑)、毛囊炎(例如，金黄色葡萄球菌等引起的)。

与“包括”或“包含”同义的过渡术语“含有”是包括的或开放的，不排除附加的、未引用的元素或方法步骤。相比之下，过渡短语“由……组成”不包括权利要求中未指明的任何元素、步骤或成分。过渡短语“基本上由……组成”将权利要求的范围限制在指定的材料或步骤上“以及那些不实质上影响所要求保护的发明的基本和新颖的特性的材料或步骤”。

除非特别说明或根据上下文显而易见，否则此处使用的术语“或”应理解为包含在内。除非特别说明或根据上下文显而易见，否则术语“一个”和“所述”应理解为单数或复数。

除非特别说明或根据上下文显而易见，否则如本文所使用的术语“大约”被理解为在本领域的正常公差范围内，例如在平均值的2个标准偏差内。“大约”可以理解为在规定值的10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％、2％、1％、0.5％、0.1％、0.05％或0.01％内。

本文中任何变量定义中化学基团列表的叙述包括将该变量定义为任何单个基团或所列基团的任何组合。本文中针对变量或方面的实施方式的叙述包括该实施方式作为任何单个实施方式或与任何其他实施方式或其部分组合。

本文提供的任何组合物或方法可以与本文提供的任何其他组合物和方法中的一个或多个组合。

从以下对本发明的优选实施方式的描述以及权利要求书，可以明显看出本发明的其它特征和优点。此处引用的所有参考文献均通过引用并入本文中。

改善皮肤、头皮和头发健康的化妆品组合物

本发明提供了用于改善皮肤、头皮和/或头发健康的局部化妆品组合物，其中所述组合物包括治疗有效量的培养微生物和/或其生长副产物。优选地，化妆品组合物是面膜或发膜的形式。在一个实施方式中，所述组合物包含10％至50％w/w酵母细胞、更优选20％至40％、甚至更优选30％w/w的酵母细胞。

“面膜”是一种应用于脸部和/或颈部，并在其上留下一段时间后去除的组合物。面膜可以包含一些成分，以活化、补充、治愈、清爽面部皮肤或向面部皮肤提供一些其他益处或治疗面部皮肤，无论是暂时的还是永久的。有些面膜设计为干燥或固化在脸上，而另一些则保持湿润或凝胶状。面膜可以用水冲洗、用布擦拭或从脸上剥落。

“发膜”涉及对头发和/或头皮进行调理和强化治疗，敷在头发和头皮上，并在去除(如用水冲洗)前保留一定时间。通常，发膜可以含有深层调理和保湿成分，以及油脂或提取物、强化蛋白质、维生素和其它有益成分。发膜对任何头发类型(例如油性到干性到染色的)的人都是有用的。

在一个实施方式中，所述组合物可包括治疗有效量的活酵母细胞或非活性酵母细胞和/或其生长副产物。还可以包括其它成分，例如植物油、海藻酸钠、黄原胶、二水硫酸钙、山梨醇、氧化镁、瓜尔胶、硅藻土、焦磷酸四钠和水。除酵母细胞外，该组合物还可包括酵母提取物(例如，酵母菌酵母水解物和/或自溶物)。

在一些实施方式中，用于改善皮肤、头发和头皮健康的组合物还包括由微生物产生的一种或多种生物表面活性剂。具体而言，在某些实施方式中，所述组合物可包含治疗有效量的糖脂(例如甘露糖赤藓糖醇脂(MEL)、槐糖脂(SLP)、鼠李糖脂(RLP)、海藻糖脂(TL))、脂肽(例如表面活性素、地衣素、伊枯草菌素或泛革素)或其组合。生物表面活性剂可以是经纯化的，也可以粗加工形式使用，这意味着它们未从培养它们的发酵液中分离出来。

在一些实施方式中，局部组合物还包括治疗有效量的一种或多种已知的例如以任何方式治疗、补充、恢复活力、保湿、保护和/或改善皮肤、头发和/或头皮的外观和/或健康的药剂(例如，白藜芦醇、透明质酸、抗真菌剂，或者抗粉刺剂)。

在一个实施方式中，所述局部化妆品组合物被配制成用于改善和/或补充面部皮肤的面膜，例如，通过平衡皮肤救济、抚平皱纹、减少老年斑、消除过度光泽、减少炎症、净化毛孔、恢复皮肤的自然色质和增加皮肤的张力、丰满度和弹性。

在优选实施方式中，用于改善面部皮肤的组合物被配制为剥离式面膜。面膜也可以配制成水洗面膜，甚至是纸面膜。

在特定实施方式中，用于改善面部皮肤的组合物包括治疗有效量的酵母细胞和/或其生长副产物，以及以下一种或多种：植物油、海藻酸钠、黄原胶、瓜尔胶、二水硫酸钙、山梨醇、氧化镁、硅藻土，焦磷酸四钠和水。这些成分的量可以根据例如要覆盖的面部皮肤的量和期望的面部皮肤的特定改善来调整。

在一个示例性实施方式中，面膜组合物的一种应用可包括20至70g酵母细胞，更优选为30至50g酵母细胞；以及约50ml至300毫升的植物油，例如椰子油、橄榄油、荷荷芭油、玫瑰籽油、菜油、摩洛哥坚果油或鳄梨油。

在一个示例性实施方式中，所述面膜组合物可配制为剥离式面膜，其包含：30％w/w酵母细胞；5.0％至15.0％w/w海藻酸钠，优选10.0％w/w海藻酸钠；1.0％至5.0％黄原胶，优选2.0％w/w黄原胶；1.0％至20％w/w二水硫酸钙，优选10.0％w/w二水硫酸钙；1.0％至20％w/w山梨醇，优选10.0％w/w山梨醇；1.0％至10.0％w/w氧化镁，优选4.5％w/w氧化镁；1.0％至5.0％w/w瓜尔胶，优选2.0％w/w瓜尔胶；10.0％至50.0％w/w硅藻土，优选30.0％w/w硅藻土；0.5％至5.0％w/w焦磷酸四钠，优选1.5％w/w焦磷酸四钠。

如果包括酵母提取物，则添加约5至约25g，更优选约5至15g。

在一些实施方式中，局部化妆品组合物被配制为可用于改善头皮和头发健康的发膜。

例如，所述发膜组合物可包括治疗有效量的酵母细胞和/或其生长副产物，以及天然油(例如植物油，如橄榄油、椰子油、荷荷巴油、玫瑰籽油、摩洛哥坚果油或鳄梨油)。该组合物还可包括酵母提取物(例如，酵母菌酵母自溶物)和/或化妆品添加剂，例如天然染发剂。

在一个示例性实施方式中，所述发膜组合物的一种应用包括：20至70g酵母细胞，更优选地30至50g酵母细胞；以及大约50ml至300ml油。

如果包括酵母提取物，则添加约5至约25g，更优选约5至15g。

每种成分的量可以根据例如要覆盖的头发和/或头皮的量以及对头发和/或头皮所期望的特定改善来调整。

在优选实施方式中，本发明的组合物包括微生物和/或其生长副产物。微生物可以是，例如，细菌、酵母和/或真菌。这些微生物可以是天然的，也可以是基因修饰微生物。例如，微生物可以用特定的基因转化以显示特定的特性。这些微生物也可能是所需菌株的突变体。如本文所使用的，“突变”是指参考微生物的菌株、遗传变体或亚型，其中该突变体与参考微生物相比具有一个或多个遗传变异(例如，点突变、错义突变、无义突变、缺失、重复、移码突变或重复扩增)。在微生物领域中，制造突变体的程序是众所周知的。例如，紫外线诱变和亚硝基胍被广泛用于这方面。

在优选实施方式中，微生物是酵母或真菌。根据本发明适于使用的酵母和真菌种类包括：无梗囊霉属、曲霉属、短梗霉(例如出芽短梗霉)、布拉霉属、假丝酵母(例如白假丝酵母、丘陵假丝酵母)、德巴利酵母属(例如，汉氏德巴利酵母菌)、虫霉属、镰刀菌属、汉森氏酵母属(例如，葡萄有孢汉森氏酵母)、汉逊酵母属、伊萨酵母属、克鲁维酵母菌属、被孢霉属、毛霉属(例如，梨状毛霉)、青霉属、腐霉属、须霉属、毕赤酵母属(例如，异常毕赤酵母、季也蒙毕赤酵母、西方毕赤酵母、库德里阿兹威氏毕赤酵母)、假酵母(例如，蚜虫假酵母菌)、根霉属、酵母菌(例如，酿酒酵母、布拉酵母菌后继者、圆酵母)、假丝酵母属(例如，球拟假丝酵母)、球拟酵母属、壶菌属、木霉属(例如，里氏木霉、哈茨木霉、绿木霉)、黑粉菌属(例如，玉米黑粉菌)、威克汉姆酵母(例如，异常威克汉姆酵母)、拟威尔酵母属和/或接合酵母属(例如，拜耳接合酵母)。

更优选地，微生物是一种被称为“嗜杀酵母”的酵母。如本文所使用的，“嗜杀酵母”是指一种酵母菌株，其特征是其分泌有毒蛋白质或有毒糖蛋白，该菌株本身对所述有毒蛋白质或有毒糖蛋白免疫。嗜杀酵母分泌的外毒素能够控制其他酵母、真菌或细菌菌株。例如，可以被嗜杀酵母控制的微生物包括镰刀菌属和其他丝状真菌。这类酵母包括但不限于：威克汉姆酵母、毕赤酵母属、汉逊酵母属、汉森氏酵母属、黑粉菌属、德巴利酵母属、假丝酵母、隐球酵母、克鲁维酵母菌属、球拟酵母属、拟威尔酵母属、接合酵母属等。

在具体实施方式中，微生物为毕赤分支酵母，包括异常毕赤酵母(异常威克汉姆酵母)、库德里阿兹威毕赤酵母(Wickerhamomyces kudriavzevii)、季也蒙毕赤酵母(Meyerozyma guilliermondii)和/或其组合。

微生物可以以活的、非活性的和/或干细胞的形式使用。这些酵母种类由于其优于酵母菌酵母而特别适于在本发明中使用。例如，这些种类的酵母产生能够破坏微生物细胞壁的水解酶。

使用毕赤酵母的另一个优点是它们对人类没有致病性，这一点可以从它们在食品工业的各个领域的应用中得到证明。此外，这些酵母菌株及其衍生物不会对人体皮肤和粘膜造成负面副作用(当然，除非受试者对酵母过敏)。

使用异常毕赤酵母的具体好处包括其产生广谱抗真菌/抗细菌毒素外切-β-1,3-葡聚糖酶，能够杀死人类皮肤和粘膜的许多真菌。此外，该酵母毒素对皮肤、口腔、膀胱和念珠菌分离株具有抗真菌活性。这种酵母菌株还可以产生有利于改善皮肤质量的酯酶、脂肪酶、糖苷酶、淀粉酶和蛋白酶。

库德里阿兹威氏毕赤酵母产生一种蛋白质，其能抑制某些对人体健康有重要意义的病原体，如大肠杆菌、粪肠球菌、克雷伯菌属、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、产碱假单胞菌和痤疮丙酸杆菌。

季也蒙毕赤酵母产生几丁质酶，几丁质酶具有显著的杀灭真菌的能力，包括马拉色菌属，马拉色菌属是银屑病、湿疹、过敏性皮肤炎、头皮屑、皮肤干燥、花斑癣、酒渣鼻、脂溢性皮炎和真菌痤疮的病因和/或促进剂。

在某些实施方式中，本发明的组合物包括微生物生长副产物，例如，通过培养生化产生微生物而产生的生物两亲分子(例如，生物表面活性剂)。在一些实施方式中，生物两亲分子以粗制形式进行利用，其中该分子存在于培养微生物的液体培养基中并且从中收集而不经纯化。粗制形式包括，例如，液体培养基中至少20％、30％、40％、50％、60％、70％或80％的两亲分子。在一些实施方式中，从培养产物中纯化生物两亲分子。

在某些实施方式中，所述组合物可包含治疗有效量的糖脂，例如甘露糖赤藓糖醇脂(MEL)、槐糖脂(SLP)、海藻糖脂(TL)和鼠李糖脂(RLP)；和/或脂肽，例如表面活性素、伊枯草菌素A或泛革素。在一个实施方式中，所述组合物可包含上述任何生物表面活性剂的组合。

根据本发明的生物两亲分子具有以下一种或多种能力：杀死皮肤中的病原体，调节皮肤的免疫系统，杀死黑色素细胞以允许替代细胞生长，减少氧化应激，增强角质形成细胞和成纤维细胞的增殖和功能，增强组合物中生物表面活性剂和一种或多种其它活性成分的皮肤渗透性。因此，这些有益分子在自身提供治疗益处的同时，还可以增强局部组合物在治疗例如与微生物制剂的存在有关的皮肤、头皮和/或头发病症中的整体有效性。

MEL是主要由假酵母属产生的糖脂。MEL无毒，在较宽的温度和pH范围内稳定。此外，无需任何额外的防腐剂就可以使用MEL。

在优选实施方式中，局部化妆品组合物中的MEL浓度范围为总组合物的0.001％到90％，0.01％到50％，0.05％到10％，优选0.1％到2.0％(按重量计)。

SLP是由几种非致病酵母大量产生的，其中研究最多的是球拟假丝酵母。一些毕赤酵母(如异常毕赤酵母)也能产生SLP。SLP具有环境相容性、高生物降解性、低毒性、高选择性和在宽范围的温度、pH和盐度条件下的比活性。

在优选实施方式中，局部化妆品组合物中的SLP浓度范围为总组合物的0.001％到90％，0.01％到50％，0.05％到10％，优选0.1％到2.0％(按重量计)。在一个实施方式中，所述局部组合物包括酸性形式的SLP。

RLP是主要由假单胞菌产生的糖脂。它们是天然乳化剂，可根据本发明用于替代化妆品组合物中的非生物表面活性剂，例如月桂酸硫酸钠、十二烷基硫酸钠和月桂醇醚硫酸钠。此外，RLP可以配制为增加保湿或润滑皮肤，最小化皱纹的出现，增加皮肤的光滑度。此外，RLP还可以用作抗细菌(革兰氏阳性)药物和抗真菌药物。

在优选实施方式中，局部化妆品组合物中的RLP浓度范围为总组合物的0.001％到90％，0.01％到50％，0.05％到10％，优选0.1％到2.0％(按重量计)。

海藻糖脂类(TL)是由红串红球菌等细菌产生的糖脂。TL具有乳化和分散特性。它们表现出提高水平的表面活性，具有一定的抗病毒和抗微生物特性。

在优选实施方式中，局部化妆品组合物中的TL浓度范围为总组合物的0.001％到90％，0.01％到50％，0.05％到10％，优选0.1％到2.0％(按重量计)。

表面活性素是由某些细菌菌株(主要是枯草芽孢杆菌)产生的脂肽。表面活性素具有高水平的表面活化功能，具有极强的亲水性，与其它的生物表面活性剂相比，在更宽的浓度范围内形成透明凝胶。这种生物表面活性剂可以作为化妆品的皮肤渗透剂、发泡剂和乳化剂。此外，表面活性素具有有效的抗细菌(革兰氏阴性)、抗真菌和抗病毒特性。

在优选实施方式中，局部化妆品组合物中的表面活性素的浓度范围为总组合物的0.001％到90％，0.01％到50％，0.05％到10％，0.1％到5.0％，优选0.01％到2.0％(按重量计)。

根据本发明有用的其他生物两亲分子包括甘露糖蛋白、β-葡聚糖和具有生物乳化和表面/界面张力降低特性的其它代谢物。

在一些实施方式中，局部化妆品组合物中的微生物生长副产物可包含治疗有效量的由微生物产生的酶和/或蛋白质。例如，可以包括约0.001％到约20％，优选地约0.01％到约15％，或约0.05％到约10％(按重量计)的一种或多种酶和/或蛋白质。这些酶包括但不限于有助于改善皮肤、头皮和/或头发健康的外切β-1,3-葡聚糖酶、几丁质酶、酯酶、脂肪酶、糖苷酶、淀粉酶和蛋白酶。

在一些实施方式中，局部化妆品组合物还包括治疗有效量的白藜芦醇。在某些实施方式中，白藜芦醇相对于本发明局部组合物的总重量的量在0.001到5.0％重量范围内，更优选在0.05到2.0％重量范围内，并且最优选在0.2到1.0％重量范围内。

白藜芦醇是一种天然存在的物质，存在于葡萄、蓝莓、树莓和桑椹等水果的果皮中。据报道，它是一种非常有效的抗氧化剂，通过信号转导的基因表达调节剂，炎症介质抑制剂，并且，通过同时作用于多种机制，它被认为是一种有前途的、多靶点的抗癌试剂，在癌症预防和治疗中都有意义。此外，白藜芦醇具有独特的皮肤漂白能力，因为它可以减少黑色素的合成。

在一个实施方式中，局部化妆品组合物还可包括聚合稳定剂，例如，约0.01％到约5.0％，或约0.05％到约2.0％，或约0.5％到约1.0％的聚(丙烯)酸。聚(丙烯)酸有助于防止白藜芦醇结晶。

在一些实施方式中，局部组合物还包括治疗有效量的透明质酸。透明质酸是在人体皮肤成纤维细胞中自然产生的，可用于烧伤、溃疡等皮肤伤口的愈合，也可用作皮肤保湿剂。透明质酸可以帮助保湿、组织修复，并将构成皮肤结构成分的胶原蛋白和弹性蛋白结合在一起。它还可以帮助建立保护屏障，防止不期望的微生物。

在一个实施方式中，局部组合物包含约0.01％至约10.0％，或约0.05％至约8.0％，约0.5％至约5.0％，或约1.0％至约3.0％(按重量计)的透明质酸。

在一些实施方式中，局部化妆品组合物还包括局部或化妆品可接受的载体。

化妆品可接受的载体可以是乳液的形式。适当的乳液的非限制性实例包括油包水乳液、水包油乳液、水包硅酮乳液、硅酮包水乳液、水包蜡乳液、水-油-水三相乳液或具有奶油、凝胶或微乳液外观的类似物。

如本文所用，除非另有说明，术语“油”包括硅油。该乳液可包括乳化剂，例如非离子、阴离子或两性表面活性剂或没食子酸盐，其通常量为约0.001％至约5％(按重量计)。

化妆品可接受的载体可包括：水；植物油；矿物油；酯油，如棕榈酸辛酯、肉豆蔻酸异丙酯和棕榈酸异丙酯；醚，如二癸酰基醚和异山梨酸二甲醚；醇，如乙醇和异丙醇；脂肪醇，如十六醇、棕榈醇，硬脂醇和山嵛醇；异辛烷、异十二烷(IDD)和异十六烷等异构烷烃；硅油，如环甲基硅油、二甲基硅油、二甲基硅油交联聚合物、聚硅氧烷及其衍生物，优选有机改性衍生物，包括PDMS、二甲基硅油共聚醇、二甲基硅氧烷醇和氨端二甲基硅氧烷醇；烃油，如矿物油、凡士林、异二十烷和聚烯烃，如(氢化)聚异丁烯；多元醇，如丙二醇、甘油、丁二醇、戊二醇、己二醇、辛乙二醇；蜡，如蜂蜡、巴西棕榈蜡、地蜡、微晶蜡、聚乙烯蜡和植物蜡；或上述的任何组合或混合物。水性载体可包括一种或多种可与水混溶的溶剂，包括低级醇，例如乙醇、异丙醇等。载体可包含该组合物的约1％至约99％、10％至约85％、25％至75％或50％至约65％的重量。

在一些实施方式中，局部化妆品组合物还可包括通常包含在化妆品组合物中的附加化妆品佐剂和添加剂，例如，有机溶剂、调节剂、稳定剂、硅酮、增稠剂、软化剂、防晒剂、保湿剂或芳香剂。每种成分的含量，无论是活性成分还是非活性成分，都是化妆品领域中为达到预期目的而通常使用的量，其范围通常在组合物的约0.0001％到约25％之间，或约0.001％到约20％之间，尽管含量可能在这些范围之外。这些成分的性质及其数量必须与本发明组合物的生产和功能相兼容。

在一个实施方式中，所述组合物可包括额外的皮肤活化物，包括但不限于类维生素A、植物性药材、角质溶解剂、脱屑剂、角质形成细胞增殖促进剂、胶原酶抑制剂、弹性蛋白酶抑制剂、脱色剂、抗炎剂、类固醇、抗痤疮剂、抗氧化剂，以及后期糖基化终产物(AGE)抑制剂，仅举几个例子。

在一个实施方式中，所述组合物可包括额外的抗老化成分，包括但不限于：植物性药材(例如豆科紫矿树提取物、芦荟提取物)；植醇；植烷酸；磷脂；硅酮；凡士林；甘油三酯；欧米茄脂肪酸；类维生素A；羟基酸(包括α-羟基酸和β-羟基酸)、水杨酸和烷基水杨酸酯；去角质剂(例如，乙醇酸、3,6,9-三氧杂十一碳二酸等)、雌激素合成酶刺激化合物(例如，咖啡因和衍生物)；能够抑制5α还原酶活性的化合物(例如，亚麻酸，亚油酸、非那雄胺及其混合物；以及屏障功能增强剂(例如神经酰胺、甘油酯、胆固醇及其酯、α-羟基和ω-羟基脂肪酸及其酯)。

示例性类维生素A包括但不限于维甲酸(例如全反式或9-顺式或13-顺式)及其衍生物、视黄醛、视黄醇(维生素A)及其酯(例如棕榈酸视黄酯、乙酸视黄酯和丙酸视黄酯)及其盐。当存在时，类维生素A通常以约0.0001％到约5％的重量百分比、更典型地以约0.01％到约2.5％的重量百分比或约0.1％到约1.0％的重量百分比的量被包括。该组合物还包括：抗氧化剂，例如抗坏血酸和/或BHT；和/或螯合剂，例如EDTA或其盐(例如EDTA二钠)。

在另一个实施方式中，本发明的局部组合物还包括以下一种或多种：皮肤渗透促进剂；润肤剂，例如肉豆蔻酸异丙酯、凡士林、挥发性或非挥发性硅油(例如，甲基硅油、二甲基硅油)、酯油、矿物油和脂肪酸酯；保湿剂，如甘油、己二醇或辛乙二醇；皮肤丰满剂，如棕榈酰寡肽、胶原蛋白、胶原蛋白和/或糖胺聚糖(GAG)增强剂；防晒剂，如阿凡苯宗或辛基甲氧基肉桂酸酯；去角质剂；抗氧化剂。

合适的去角质剂包括，例如，α-羟基酸、β-羟基酸、含氧酸、含氧二酸及其衍生物，例如其酯、其酸酐及其盐。合适的羟基酸包括例如乙醇酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、2-羟基烷酸、扁桃酸、水杨酸及其衍生物。一种典型的去角质剂是乙醇酸。当存在时，去角质剂按重量计占组合物的约0.001％至约20％。

可用于本发明组合物中的抗氧化剂的实例包括具有酚羟基功能的化合物，例如抗坏血酸及其衍生物/酯；β-胡萝卜素；儿茶素；姜黄素；阿魏酸衍生物(例如阿魏酸乙酯、阿魏酸钠)；没食子酸衍生物(例如没食子酸丙酯)；番茄红素；还原酸；迷迭香酸；鞣酸；四氢姜黄素；生育酚及其衍生物，包括醋酸生育酚；尿酸；或其任何混合物。其他合适的抗氧化剂是那些具有一个或多个巯基官能团(--SH)，以还原或非还原形式存在的抗氧化剂，例如谷胱甘肽、硫辛酸、巯基乙酸和其他硫氢基化合物。抗氧化剂可以是无机物，例如亚硫酸氢盐、偏亚硫酸氢盐、亚硫酸盐或其他含硫的无机盐和无机酸。抗氧化剂可单独或集体地占组合物总重量的约0.001％至约10％(w/w)或约0.01％至约5％(w/w)。

非生物表面活性剂也可以添加到制剂中。表面活性剂的实例包括但不限于：烷基硫酸盐、烷基醚硫酸盐(例如，月桂基硫酸钠/铵和月桂醇聚醚硫酸钠/铵)、两性物质(例如，两性乙酸盐和两性丙酸盐)、磺基琥珀酸盐、烷基聚葡萄糖苷、甜菜碱(例如，椰油酰胺丙基甜菜碱(CAPB))、磺内盐、肌氨酸盐，羟乙基磺酸盐、牛磺酸酯、乙氧基山梨聚糖酯、烷醇酰胺和氨基酸表面活性剂。

粘度调节剂也可以添加到所述组合物中，粘度调节剂包括，例如，椰油酰胺DEA、油酸酰胺DEA、氯化钠、纤维素聚合物、聚丙烯酸酯、乙氧基化酯、醇、二醇、二甲苯磺酸盐、聚山梨酯20、烷醇酰胺和纤维素衍生物(例如，羟丙基甲基纤维素和羟乙基纤维素)。

还可以添加聚合物，例如，黄原胶、瓜尔胶、聚季铵盐-10、PEG-120甲基葡糖二油酸酯、PEG-150二硬脂酸酯、PEGG-150聚甘油-2三硬脂酸酯和PEG-150五赤藓醇基四硬酯酸酯。

其他添加剂包括：维生素，如生育酚和抗坏血酸；维生素衍生物，如抗坏血酸单棕榈酸酯、醋酸生育酚和维生素E棕榈酸酯；增稠剂，如羟烷基纤维素、羧甲基纤维素、卡波姆和植物胶，如黄原胶；胶凝剂，如端酯聚酯酰胺；结构剂；色素、着色剂或染料；蛋白质，如乳铁蛋白；和pH调节剂(柠檬酸、乙醇胺、氢氧化钠等)。

所述组合物可任选地包含本领域技术人员已知的其他成分，包括但不限于矿物、粘度和/或流变性调节剂、皮肤冷却化合物、皮肤保护剂、润滑剂、芳香剂、防腐剂、稳定剂、珍珠、chromalites、云母、防腐剂、调节剂、麻醉剂，抗过敏药、抗真菌药、抗微生物药、抗炎药、防腐剂、脱色剂、成膜剂、药物制剂、光稳定剂、表面平滑剂和光学扩散剂。

除上述外，本发明的化妆品组合物还可含有任何其他化合物，用于改善皮肤、头发和/或头皮健康和/或外观。有关这些和其他合适化妆品成分的详细信息，请参见化妆品、化妆用具和香料协会(CTFA)出版的“Internatinal Cosmetic Ingredient Dictionary andHandbook”，第10版(2004年)，第2177-2299页，此处通过引用将其全部纳入本文。这些不同物质的量是那些通常用于化妆品或医药领域的量，例如，它们可以占组合物总重量的约0.01％到约20％。

该组合物可在宽范围的pH水平内配制。在一个实施方式中，局部组合物的pH范围为1.0到13.0。在一些实施方式中，局部组合物的pH范围为2.0到12.0。适用于本发明的组合物的其他pH范围包括3.5至7.0或7.0至10.5。可添加适当的pH调节剂，如氢氧化钠、柠檬酸和三乙醇胺，以使pH值在所需范围内。

在一些实施方式中，本发明提供了用于在家制备并使用本发明的组合物的套件。

微生物的生长及其副产物的产生

本发明提供了培养微生物和生产微生物代谢物和/或其他微生物生长副产物的方法。微生物培养系统通常采用浸没式培养发酵，但也可以采用表面培养和混合系统。如本文所使用的“发酵”是指细胞在受控条件下的生长。生长可以是需氧的或厌氧的。

在一个实施方式中，本发明提供用于生产生物质(例如，活细胞材料)、细胞外代谢物(例如，小分子和排出的蛋白质)、残余营养物和/或细胞内成分(例如，酶和其他蛋白质)的材料和方法。

根据本发明使用的微生物生长容器可以是任何工业用发酵罐或培养反应器。在一个实施方式中，容器可以具有功能控制/传感器，或者可以连接到功能控制/传感器，以测量培养过程中的重要因素，例如pH、氧气、压力、温度、搅拌器轴功率、湿度、粘度和/或微生物密度和/或代谢物浓度。

在另一实施方式中，该容器还可以监测容器内微生物的生长(例如，测量细胞数量和生长阶段)。或者，可以从容器中提取每日样品，并通过本领域已知的技术(例如稀释平板技术)进行计数。稀释平板是一种简单的技术，用于估计样品中的微生物数量。该技术还可以提供一个指标，用以比较不同的环境或处理。

在一个实施方式中，该方法包括用氮源补充培养基。氮源可以是例如硝酸钾、硝酸铵、硫酸铵、磷酸铵、氨、尿素和/或氯化铵。这些氮源可以单独使用，也可两种或两种以上组合使用。

该方法可为生长培养提供氧合作用。一个实施方式利用空气的缓慢运动去除低含氧空气并引入含氧空气。含氧空气可以是环境空气，其通过机构每天补充，所述机构包括用于机械搅拌液体的叶轮和用于向液体供应气泡以将氧气溶解到液体中的空气喷布器。

该方法还可以包括用碳源补充培养基。碳源通常是：碳水化合物，例如葡萄糖、蔗糖、乳糖、果糖、海藻糖、甘露糖、甘露糖醇和/或麦芽糖；有机酸，例如乙酸、富马酸、柠檬酸、丙酸、苹果酸、丙二酸和/或丙酮酸；醇，例如乙醇、丙醇、丁醇、戊醇、己醇、异丁醇，和/或甘油；脂肪和油，如大豆油、米糠油、橄榄油、玉米油、芝麻油和/或亚麻籽油等。这些碳源可以单独使用，也可以两种或两种以上组合使用。

在一个实施方式中，培养基中包括微生物的生长因子和微量营养素。当生长的微生物无法产生所需的所有维生素时，这是尤其优选的。无机营养素，包括微量元素，如铁、锌、铜、锰、钼和/或钴，也可包括在培养基中。此外，维生素、必需氨基酸和微量元素的来源可以包括，例如，以面粉或膳食的形式，例如玉米粉，或以提取物的形式，例如酵母提取物、马铃薯提取物、牛肉提取物、大豆提取物、香蕉皮提取物等，或以纯化形式。例如，那些对蛋白质生物合成有用的氨基酸也可以包括在内。

在一个实施方式中，也可以包括无机盐。可用无机盐可以是磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、磷酸氢二钠、硫酸镁、氯化镁、硫酸铁、氯化铁、硫酸锰、氯化锰、硫酸锌、氯化铅、硫酸铜、氯化钙、碳酸钙和/或碳酸钠。这些无机盐可以单独使用，也可以两种或两种以上组合使用。

在一些实施方式中，培养方法还可包括在培养过程之前和/或期间在液体培养基中添加额外的酸和/或抗微生物剂。抗微生物剂或抗生素用于保护培养物免受污染。此外，还可添加消泡剂，以防止培养过程中产生气体时泡沫的形成和/或积聚。

混合物的pH值应适合感兴趣的微生物。缓冲液和pH调节剂(如碳酸盐和磷酸盐)可用于稳定pH值接近优选值。当金属离子以高浓度存在时，可能需要在液体培养基中使用螯合剂。

微生物培养和微生物副产品生产的方法和设备可以在分批、准连续或连续的过程中进行。

在一个实施方式中，微生物培养方法在约5°至约100℃、优选15°至60℃、更优选25°至50℃下进行。在另一个实施方式中，培养可在恒定温度下连续进行。在另一实施方式中，培养可在变化的温度下进行。

在一个实施方式中，该方法和培养过程中使用的设备是无菌的。培养设备，如反应器/容器，可与灭菌单元(如高压灭菌器)分离，但连接至灭菌单元。该培养设备还可以具有在开始接种之前就地消毒的消毒单元。空气可以用本领域已知的方法消毒。例如，环境空气在进入容器之前可以通过至少一个过滤器。在其它实施方式中，可对该培养基进行巴氏杀菌，或任选地完全不添加热量，其中可利用低水活性和低pH值来控制细菌生长。

在一个实施方式中，本发明提供了通过在适合于生长和副产物生产的条件下培养本发明的微生物菌株以及可选地纯化生长副产物来生产微生物生长副产物(例如，生物表面活性剂、酶、蛋白质和/或其他代谢物)的方法。

在一个实施方式中，本发明还提供了一种用于生产其他微生物代谢物(例如乙醇、乳酸、β-葡聚糖、肽、代谢中间体、多不饱和脂肪酸和脂质)的方法。所述方法产生的代谢物含量可以是，例如，至少20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％或90％。

发酵液的生物质含量可以是，例如5g/l到180g/l或更多。在一个实施方式中，液体培养基的固体含量为10g/l到150g/l。

感兴趣的微生物产生的微生物生长副产物可以保留在微生物中或分泌到液体培养基中。

在一些实施方式中，生长副产物保持其粗制形态，而无需纯化。这种粗制的生长副产物可以采取包括生长副产物和发酵液的液体混合物的形式。这种粗制形式的溶液可包括约25％至约75％、约30％至约70％、约35％至约65％、约40％至约60％、约45％至约55％或约50％的纯生长副产物。

在另一实施方式中，产生微生物生长副产物的方法可进一步包括浓缩和纯化感兴趣的微生物生长副产物的步骤。在另一实施方式中，液体培养基可包含稳定微生物生长副产物活性的化合物。

在一个实施方式中，在培养完成时(例如，在达到期望的细胞密度或达到液体培养基中指定代谢物的密度时)移除所有微生物培养组合物。在这个分批过程中，一个全新的批次在第一批收获时开始。

在另一实施方式中，在任一时间仅移除发酵产物的一部分。在本实施方式中，具有活细胞的生物质作为新培养批次的接种剂保留在容器中。去除的组合物可以是无细胞液体培养基或含有细胞。这样，就形成了一个准连续系统。

有利的是，该方法不需要复杂的设备或高能耗。感兴趣的微生物可以在现场进行小规模或大规模的培养和利用，甚至还可以与它们的培养基混合。同样，微生物代谢产物也可以在需要的地方大量产生。

基于微生物的产品的制备

本发明的一种基于微生物的产品简单地是含有微生物和/或微生物产生的微生物代谢物和/或任何残余营养物的发酵液。发酵产物可不经提取或纯化直接使用。

然而，使用文献中描述的标准提取和/或纯化方法或技术，可以容易地实现提取和纯化。例如，在某些实施方式中，基于微生物的产品仅包括微生物生长的副产物，无论是粗制的还是纯化的形式。在特定实施方式中，副产物是由根据本发明生长的微生物产生的生物表面活性剂。

微生物生长产生的微生物和/或液体培养基可以从生长容器中去除，并通过例如管道输送转移以供立即使用。

在其他实施方式中，可将该组合物(微生物、液体培养基、或微生物和液体培养基)放置在适当大小的容器中，考虑例如预期用途、预期应用方法、发酵罐的大小以及从微生物生长设施到使用位置的任何运输方式。因此，放置基于微生物的组合物的容器可以是，例如，1加仑到1000加仑或更多。在其它实施方式中，容器为2加仑、5加仑、25加仑或更大。

在某些实施方式中，本发明的组合物比例如单独的生物表面活性剂具有优势，包括以下一种或多种：作为酵母细胞壁外表面一部分的高浓度甘露糖蛋白(甘露糖蛋白是高效的生物乳化剂)；酵母细胞壁中存在生物聚合物β-葡聚糖(另一种乳化剂)；培养物中存在能够降低表面张力和界面张力的生物表面活性剂；以及存在其他代谢物(如乳酸、乙醇等)。

从生长容器中收集基于微生物的组合物后，当收获的产品放入容器和/或用管道输送(或以其他方式运输以供使用)时，可添加更多成分。添加剂可以是，例如，缓冲剂、载体、在相同或不同设施中生产的其他基于微生物的组合物、粘度调节剂、防腐剂、微生物生长营养物、追踪剂、溶剂、杀菌剂、其他微生物和特定于预期用途的其他成分。

根据本发明，制剂中包含的其它适当添加剂包括通常用于这样的制剂的物质。这类添加剂的实例包括表面活性剂、乳化剂、润滑剂、缓冲剂、溶解度控制剂、pH调节剂、防腐剂、稳定剂和耐紫外光剂。

在一个实施方式中，所述组合物还可包括缓冲剂，所述缓冲剂包括有机酸和氨基酸或其盐。合适的缓冲剂包括柠檬酸盐、葡萄糖酸盐、酒石酸盐、苹果酸盐、乙酸盐、乳酸盐、草酸盐、天冬氨酸盐、丙二酸盐、葡庚糖酸盐、丙酮酸盐、半乳糖二酸盐、葡糖二酸盐、丙醇二酸盐、谷氨酸盐、甘氨酸、赖氨酸、谷氨酰胺、蛋氨酸、半胱氨酸、精氨酸及其混合物。也可使用磷酸和亚磷酸或其盐。合成缓冲剂适合使用，但最好使用天然缓冲剂，如上文列出的有机酸和氨基酸或其盐。

在另一实施方式中，pH调节剂包括氢氧化钾、氢氧化铵、碳酸钾或碳酸氢钾、盐酸、硝酸、硫酸或其混合物。

在一个实施方式中，附加组分(例如作为多元酸的盐的水性制剂，例如碳酸钠或碳酸氢钠、硫酸钠、磷酸钠、磷酸二氢钠)可包括在该制剂中。

有利的是，根据本发明，基于微生物的产品可以包括培养微生物的液体培养基。例如，按重量计，所述产品可以是液体培养基的至少1％、5％、10％、25％、50％、75％或100％。例如，产品中的生物质的量(按重量计)可以是0％到100％的任意数值，包括其间的所有百分比。

任选地，产品可以在使用前储存。储存时间最好短。因此，存储时间可以小于60天、45天、30天、20天、15天、10天、7天、5天、3天、2天、1天或12小时。在优选实施方式中，如果产品中存在活细胞，则将产品存储在例如低于20℃、15℃、10℃或5℃的低温下。另一方面，生物表面活性剂组合物通常可存储在环境温度下。

在一个实施方式中，培养微生物菌株以产生非活性的(无生命的)基于微生物的组合物。通过培养所需微生物、由微流态化或伽玛辐射(或通过本领域已知的不引起蛋白质变性的任何其他方法)破坏微生物、然后在较低温度下进行巴氏杀菌来制备该组合物。在一个实施方式中，失活发生在巴氏杀菌温度(高达65℃至70℃，持续足以使100％酵母细胞失活的时间段)和将pH值增加至约10.0的情况下。这会诱导细胞部分水解，破坏DNA，但留下完好无损的有价值的成分，如蛋白质和酸。然后，将该组合物中和至约7.0-7.5的pH值，并混合水解的各种组分。

改善面部皮肤、头皮和头发健康和/或外观的方法

本发明提供了利用基于微生物的产品改善受试者面部皮肤、头皮和/或头发健康的方法。更具体地说，这些方法利用本发明的局部化妆品组合物来改善受试者的面部皮肤、头皮和/或头发健康和/或外观。

根据本发明的方法使用的酵母细胞可以是例如毕赤酵母或其它生物化学产生酵母(例如假丝酵母、假酵母或威克汉姆酵母)。此外，当生产根据本发明的面膜组合物时，可以向该组合物添加更多的成分或合适的添加剂和/或佐剂，例如微生物生物表面活性剂或皮肤活化剂。

在某些实施方式中，提供用于改善皮肤、头发和头皮健康的方法，所述方法包括直接向皮肤、头发和/或头皮施加有效量的本发明的局部化妆品组合物数分钟(例如10分钟)，并持续特定时间(例如，1个月至1年或更长)，以在皮肤、头发或头皮的健康和/或外观方面达到预期的改善量。可使用手指、手或手指、梳子、画笔、抹刀、布、海绵、棉球或圆片棉，或使用化妆品领域已知的任何其他工具或方法来应用该组合物。最好注意避免将面膜组合物涂抹在受试者的眼睑、眼睛周围的皮肤或嘴唇上。

在某些实施方式中，提供了用于改善受试者面部皮肤的健康和/或外观的方法，所述方法包括：

a)使用非药物清洁剂清洁受试者面部皮肤，去除皮肤上的化妆品、污垢和油脂；

b)生产包含酵母细胞和/或其生长副产物的面膜组合物；

c)将薄层面膜组合物应用于面部皮肤；

d)允许面膜组合物在皮肤上干燥数分钟；和

e)用温水洗去面膜组合物。

优选地，步骤b)在步骤c)之前立即发生。根据本实施方式，“在……之前立即”是指提前5分钟或更短，优选地，4、3或2分钟或更短，甚至更优选地，1分钟或更短。

步骤b)可包括将酵母细胞添加到植物油(例如椰子油或橄榄油)中并与水混合以形成稠糊状物。例如，在一个实施方式中，步骤b)可包括将约30-50g酵母细胞与天然油(例如橄榄油或椰子油)混合。

在一个实施例中，步骤d)包括使面膜组合物在皮肤上干燥10到15或20分钟。

在一些实施方式中，受试者可以在涂敷面膜组合物之前，熏蒸面部以打开皮肤毛孔。熏蒸可以通过任何已知且安全的手段实现，例如，将沸水倒入碗中，并将面部置于碗上，使蒸汽接触面部皮肤。

在一些具体实施方式中，该方法包括：

a)使用非药物清洁剂清洁受试者面部皮肤，去除皮肤上的化妆品、污垢和油脂；

b)生产包含酵母细胞和/或其生长副产物的剥离式面膜组合物；

c)将薄层面膜组合物应用于面部皮肤；

d)使面膜组合物在皮肤上干燥数分钟，形成致密的膜；

e)从皮肤上剥下薄膜；和

f)用温水洗掉皮肤上任何残留的薄膜，

其中，步骤b)包括将酵母细胞添加到包含海藻酸钠、黄原胶、二水硫酸钙、山梨醇、氧化镁、瓜尔胶、硅藻土和焦磷酸四钠的粉末混合物中以形成酵母粉末混合物；并且以例如约1:25的比率将酵母粉末混合物与水混合以产生液体或半液体面膜组合物。

优选地，步骤b)在步骤c)之前立即发生。根据本实施方式，“在……之前立即”是指提前5分钟或更短，优选地，4、3或2分钟或更短，甚至更优选地，1分钟或更短。

在一个实施方式中，步骤d)包括使面膜组合物在皮肤上干燥10到15分钟或20分钟。

在某些实施方式中，本发明提供改善头发和头皮健康的方法，该方法包括：a)将大约30-50g酵母细胞与天然油(例如橄榄油或椰子油)混合以形成酵母油混合物；b)向酵母油混合物中加水以形成稠糊状物；c)将糊状物涂在受试者干燥的头发和头皮上；d)用塑料包裹膜覆盖受试者的头发；e)让糊状物在头发和头皮上停留至少一小时；f)从头发和头皮上冲洗糊状物。任选地，该方法还可包括以任何方式干燥和/或定型头发。

步骤a)和/或b)还可包括将其他成分或合适的添加剂和/或佐剂添加到该组合物中，例如微生物生物表面活性剂或头发调节剂。

在某些实施方式中，局部化妆品组合物可每天施用数分钟、每天重复若干次，持续数天，以在皮肤、头发和/或头皮健康和/或外观方面实现预期的改善。

这些方法还可用于治疗头皮疾病，例如头皮屑或脱发。对于这种用途，局部组合物直接应用于存在这种病症的皮肤区域，每天数分钟，每天重复数次，并且持续数天，以减少病症及其相关症状的出现。

为了达到和/或保持所期望的效果，只要效果是期望的，改善皮肤、头发和/或头皮健康的方法就可以持续，例如，直到一种病症减少或根除，或直到皮肤得到积极的改变。这可能需要在至少一周、至少两周、至少四周或至少八周或更长时间内每天至少一次局部施用。在一些实施方式中，该组合物每隔一天、每两天、每三天、每星期等施用一次，持续一周或数周。一旦停止使用局部组合物，对皮肤、头皮或头发健康的期望改善也可能减少。

除了面部、头皮和头发之外，本发明的组合物和方法也适用于受试者皮肤(即外皮)的任何部分。这些部位可以包括但不限于耳朵、颈部、背部、肩部、手臂、手、胸部、腹部、臀部、腿部和脚部的皮肤。

在一个实施方式中，将以约0.001至约100mg/cm²、更典型地约0.01至约20mg/cm²或约0.1至约10mg/cm²的量应用本发明的组合物。

实施例

应当理解，本文所描述的示例和实施方式仅用于说明目的，本领域技术人员将认识到根据其进行的各种修改或改变，它们将包括在本申请的精神和范围内。

实施例1-套件

在一些实施方式中，本发明提供用于方便在家制备并使用本发明的基于微生物的局部化妆品组合物的套件。

该套件可以包括盒子或其他包装，以容纳用于制备和应用一次面膜或发膜的所有组件，以及其说明书。

该盒可容纳用于形成面膜组合物的每个组件的单独预测量包装。一个密封包装将包含酵母细胞和/或其生长副产物。这可能是液体形式，例如，包括培养酵母细胞的发酵液。这也可能是干燥形式。

在剥离式面膜的情况下，第二密封包装可以包含粉末混合物，粉末混合物包括海藻酸钠、黄原胶、二水合硫酸钙、山梨糖醇、氧化镁、瓜尔胶、硅藻土和/或焦磷酸四钠。任选地，另一密封包装可以包含进一步的化妆品可接受的添加剂，例如生物表面活性剂组合物，尽管这些成分也可以在第二密封包装的粉末混合物中。

在发膜的情况下，密封的瓶子或容器可以包括例如橄榄油或椰子油。第三个密封包装可以包含酵母提取物和可选的化妆品可接受的添加剂，例如生物表面活性剂组合物。该套件还可以包括天然染发剂和/或梳子。

该套件还可包括用于将所述组合物的不同组分混合在一起的容器或碗。根据预期，水将从水龙头来源中获得。该套件还可包括用于混合的工具。混合工具可以是多用途的，这意味着它也可以用于将组合物应用于受试者的面部、头发或头皮；但是，也可以包括单独的工具来应用组合物，尽管也可以使用手。该套件还可以包括手套，以保持手清洁(如果需要)。

这些套件可用于实践本发明的方法。例如，可以使用套件制备局部化妆品组合物，其形式可以是面膜或发膜，然后可以根据本发明的方法立即将其应用于受试者的面部、头发或头皮。

实施例2-培养用于酶生产和用于个人护理组合物的毕赤酵母

毕赤酵母可用于生产多种个人护理组合物，因为其细胞衍生物可消除污染皮肤的真菌，减少生长在皮肤和粘膜表面的致病酵母，减少皮肤和粘膜的细菌污染，刺激皮肤细胞产生胶原蛋白和弹性蛋白(举几个例子)。

用于生产异常毕赤酵母(Wickerhamomyces anomalus)、库德里阿兹威氏毕赤酵母和季也蒙毕赤酵母(Meyerozyma guilliermondi)的基本培养基是相同的。培养基包括2％葡萄糖、1％酵母提取物、1％菜籽油、5％甘油和50毫摩尔柠檬酸盐缓冲液。如果为了生产几丁质酶而培养季也蒙毕赤氏酵母，则添加0.1％的微粉化几丁质。如果化妆品需要有机状态，则不使用无机盐，并且所有营养培养基成分必须经过有机状态认证。

发酵温度在25-30℃之间，初始pH值在5.5-6.0之间。饱和氧含量范围为(100％环境空气的)15-25％。总发酵时间可达72小时(通过达到固定相来确定)。

对于浓缩酶和/或蛋白质的生产，一旦培养物产生，应立即冷却至5-10℃，以防止上清液中活性物质的可能降解。然后通过离心或微滤(或其组合)通过0.1微米过滤器分离酵母生物质和酵母上清液，同时保持工艺温度不高于10℃。

蛋白质分子可以用盐析技术沉淀出来。蛋白质通过增加盐(即硫酸铵)的浓度析出来。将蛋白质浓缩10-20倍(或更多，取决于最终个人护理产品所需的浓度)后，收集蛋白质并用冷盐水冲洗2-3次(每次持续搅拌1小时)。

将浓缩产物与海藻酸钠混合至最终浓度为1％的海藻酸钠，或与黄原胶混合至最终浓度为0.5％的黄原胶，可稳定浓缩产物的酶活性。

最终得到的底物的抗细菌或抗真菌活性可以测试。抗真菌的能力可以用念珠菌酵母(具有临床意义)和马拉色真菌进行孔板试验，而抗细菌活性可以用大肠杆菌和铜绿假单胞菌培养物测定。应使用孔周围以毫米为单位的抑制直径来测量生长抑制。

一旦测试完成，浓缩的酵母副产品，以及剩余的酵母生物质，可以用来生产各种个人护理产品。

实施例3-培养异常威克汉姆酵母和蚜虫假酵母菌以生产生物表面活性剂

在工作容积为800L的反应器中，在未灭菌的条件下，培养异常威克汉姆酵母，用于生物质和槐糖脂的生产。使用空容器灭菌方法，其中内表面用2-3％过氧化氢处理，并用漂白剂和高压热水冲洗。含有所有必要成分的培养基成分在85-90℃温度下去污或溶解在3％过氧化氢中。发酵温度保持在25-30℃之间。pH值从5.0-5.5开始，然后下降到3.0-3.5，在3.0-3.5稳定下来。生物质的生产在大约48小时的发酵后实现。

发酵7-9天后可发生槐糖脂积累。发酵完成后，含有生物质的培养物和低浓度槐糖脂(如适用)，二者均可添加到面膜和发膜组合物中。

在相同的条件下，在相同的反应器中培养蚜虫假酵母菌，但有两个例外：最适pH值保持在5.0-5.5之间，在7-12天内获得生物质和甘露糖赤藓糖醇脂(MEL)。MEL可包含在本发明的组合物中。

实施例4-用于SLP生产和纯化的球拟假丝酵母发酵

在含有0.5％酵母提取物、10％葡萄糖、10％菜籽油和1％尿素的营养培养基中，在14升的反应器中进行了用于SLP生产的球拟假丝酵母的补料分批发酵。初始pH为5.5。培养温度为25℃。

最初，发酵持续5天，然后收获得到的SLP。在反应器中加入额外数量的营养成分后，保持相同的比例，这个过程继续进行。然后，在2-3天内，收获新的SLP部分。

每次循环中收获的SLP量为0.5-1.0升的最终产品。产品中SLP的浓度通常达到50％。这种准连续的工艺过程通常持续两周，之后将开始一个新的循环。

从发酵产物中提取SLP后，用孔径为2微米的过滤器采用10％的水溶液过滤，纯化SLP。然后将产品储存在冰箱中，以制备化妆品组合物。

Claims (31)

1.一种用于改善面部皮肤、头皮和/或头发健康的组合物，所述组合物包含治疗有效量的酵母细胞和/或其生长副产物。

2.根据权利要求1所述的组合物，其中所述酵母细胞为毕赤酵母、假丝酵母、威克汉姆酵母或假酵母。

3.根据权利要求1所述的组合物，其中所述酵母细胞为干酵母细胞。

4.根据权利要求1所述的组合物，其中微生物生长副产物是生物两亲分子、酶和/或蛋白质。

5.根据权利要求4所述的组合物，其中所述生物两亲分子是选自糖脂和脂肽的生物表面活性剂，其中所述糖脂选自甘露糖赤藓糖醇脂（MEL）、槐糖脂（SLP）、海藻糖脂（TL）和鼠李糖脂（RLP）；并且其中所述脂肽选自表面活性素、伊枯草菌素、地衣素和泛革素。

6.根据权利要求4所述的组合物，其中所述酶和/或蛋白质选自外切β-1,3-葡聚糖酶、酯酶、脂肪酶、糖苷酶、淀粉酶、蛋白酶和几丁质酶。

7.根据权利要求1所述的组合物，其进一步包含一种或多种以下成分：植物油、海藻酸钠、黄原胶、二水合硫酸钙、山梨醇、氧化镁、瓜尔胶、硅藻土、焦磷酸四钠及水。

8.根据权利要求1所述的组合物，其被配制为面膜。

9.根据权利要求8所述的组合物，包括：

30%w/w酵母细胞；

10.0%w/w海藻酸钠；

2.0%w/w黄原胶；

10.0%w/w二水硫酸钙；

10.0%w/w山梨醇；

4.5%w/w氧化镁；

2.0%w/w瓜尔胶；

30%w/w硅藻土；和

1.5%w/w焦磷酸四钠。

10.根据权利要求8所述的组合物，包括30至50g酵母细胞和50至300 ml植物油。

11.根据权利要求1所述的组合物，其被配制为发膜。

12.根据权利要求11所述的组合物，其进一步包含酵母提取物，即酵母菌酵母水解物或自溶物。

13.根据权利要求12所述的组合物，包含30至50g酵母细胞、50-300毫升橄榄油或椰子油、及5至25g酵母提取物。

14.根据权利要求1所述的组合物，其进一步包含一种或多种化妆品佐剂和/或添加剂。

15.根据权利要求14所述的组合物，其中所述佐剂和/或添加剂选自有机溶剂、硅酮、pH调节剂、螯合剂、凝胶剂、蛋白质、维生素、润肤剂、油、羟基酸、去角质剂、粘度调节剂、聚合物、矿物、杀虫剂、润滑剂、防腐剂、植物药、澄清剂，非生物表面活性剂、抗氧化剂、增稠剂、软化剂、防晒剂、保湿剂、着色剂和芳香剂。

16.一种改善受试者面部皮肤健康的方法，所述方法包括：

a） 使用非药物清洁剂清洁受试者面部皮肤，去除皮肤上的化妆品、污垢和油脂；

b）生产包含酵母细胞和/或其生长副产物的面膜组合物；

c）将薄层面膜组合物应用于面部皮肤；

d）允许面膜组合物在皮肤上干燥数分钟；和

e）用温水洗掉残留在皮肤上的任意面膜组合物部分。

17.根据权利要求16所述的方法，其中所述酵母细胞为毕赤酵母、假丝酵母、威克汉姆酵母或假酵母。

18.根据权利要求16所述的方法，其中步骤b）还包括将一种或多种微生物生长副产物和/或一种或多种化妆品添加剂和/或佐剂添加到所述组合物中。

19.根据权利要求18所述的方法，其中所述化妆品添加剂或佐剂是微生物生物表面活性剂。

20.根据权利要求16所述的方法，其中步骤b）发生于紧接步骤c）之前，其中紧接之前意指步骤c）之前5分钟或更少。

21.根据权利要求16所述的方法，其中步骤d）包含将30至50g酵母细胞与50至300毫升椰子油或橄榄油混合。

22.根据权利要求16所述的方法，其中步骤b）包含：

向含有海藻酸钠、黄原胶、二水硫酸钙、山梨醇、氧化镁、瓜尔胶、硅藻土和焦磷酸四钠的粉末混合物中添加酵母细胞，以形成酵母粉末混合物；和

以约1:25的比例将酵母粉混合物与水混合，以制备液体或半液体的面膜组合物。

23.根据权利要求22所述的方法，其中d）包括使面膜组合物在皮肤上干燥数分钟，形成致密膜，并且所述方法还包括e）从皮肤上剥离膜。

24.根据权利要求16所述的方法，其中所述面膜不应用于受试者的眼睑、受试者眼睛周围的皮肤或受试者的嘴唇。

25.根据权利要求16所述的方法，其中在将面膜组合物应用于受试者的面部皮肤之前，该方法还包括熏蒸受试者的面部以打开皮肤的孔。

26.根据权利要求16所述的方法，每天执行一次或两次。

27.一种改善受试者头皮和头发健康的方法，所述方法包括：

a） 将约30至50g酵母细胞与椰子油或橄榄油混合；

b） 将水加入酵母-橄榄油混合物中，形成稠糊状物；

c） 在受试者干燥的头发和头皮上涂上糊状物；

d） 用塑料包裹膜覆盖受试者的头发；

e） 使糊状物在头发和头皮上停留至少一小时；和

f） 洗去头发和头皮上的糊状物。

28.根据权利要求27所述的方法，其中所述酵母细胞为毕赤酵母、假丝酵母、威克汉姆酵母或假酵母。

29.根据权利要求27所述的方法，其中步骤b）还包括将一种或多种微生物生长副产物和/或一种或多种化妆品添加剂和/或佐剂添加到所述组合物中。

30.根据权利要求27所述的方法，其中所述组合物每日施用。

31.根据权利要求27所述的方法，其中每日施用重复一周或更长时间。