CN111148434A - 用于制造食物和饲料的方法和相关组合物 - Google Patents

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Abstract

本文提供了用于食物和饲料应用的方法和组合物,例如用于靶向寄宿于宿主昆虫中的一种或多种微生物,该调节导致该宿主的适合度提高。本发明的特征在于组合物,该组合物包括调节剂(例如,噬菌体、肽、小分子、抗生素、或其组合),该调节剂能以对宿主有益的方式改变该宿主的微生物区系。通过促进有利的微生物水平、微生物活性、微生物代谢、和/或微生物多样性,本文所述的调节剂可以用于提高在人类食物或动物饲料工业中使用的多种昆虫的适合度。

Description

用于制造食物和饲料的方法和相关组合物
相关申请的交叉引用
本申请要求于2017年1月24日提交的美国临时申请号62/450,038和于2017年11月9日提交的美国临时申请号62/584,011的优先权,其各自的内容通过引用以其全文特此并入本文。
背景技术
节肢动物(如,蟋蟀、蝉、蚱蜢、蚊、昆虫幼虫、毛虫和蝎)分别在人类和动物的食物和饲料的生产中具有许多传统用途和潜在的新用途。由于动物蛋白成本上升、食物和饲料不安全、环境压力、人口增长以及对人类和动物(例如,牲畜)可负担的和可持续的营养物来源的需求增加,作为食物和饲料的昆虫成为了一个尤其相关的问题。为了培育用于在食物和饲料工业中使用的有益节肢动物,本领域需要促进此类节肢动物的生长和增加其适合度的方法。
发明内容
本文披露了用于调节用于制造食物和饲料的昆虫的适合度的组合物和方法。该组合物包括药剂,该药剂改变寄宿于宿主中的一种或多种微生物的水平、活性或代谢,该改变导致宿主的适合度的调节。
在一个方面,本文提供了用于提高昆虫的营养特征的方法,该方法包括向该昆虫递送有效量的产甲硫氨酸细菌。
在一些实施例中,该昆虫是蟋蟀、蚱蜢、或蝗虫。
在一些实施例中,该昆虫在发育上可以是胚、幼虫、蛹或成虫。
在一些实施例中,该递送可以包括向该昆虫生长、生活、繁殖或进食的至少一个生境递送组合物。
在一些实施例中,可以将该产甲硫氨酸细菌以昆虫可食用组合物进行递送,从而被该昆虫摄取。
在一些实施例中,该产甲硫氨酸细菌可与农业上可接受的载体一起配制为液体、固体、气溶胶、膏剂、凝胶、或气体组合物。
在一些实施例中,该载体可以是种子涂层。
在第二方面,本文提供了修饰的昆虫,该修饰的昆虫包含寄宿于该昆虫中的外源性产甲硫氨酸细菌。
在第二方面的一些实施例中,该昆虫在发育上是胚、幼虫、蛹或成虫。
在第二方面的一些实施例中,该产甲硫氨酸细菌改变该昆虫的肠和/或血腔中的微生物区系。
在又另一个方面,该组合物包括药剂,该药剂改变寄宿于昆虫宿主中的一种或多种微生物的水平、活性或代谢,该改变导致该昆虫宿主的适合度提高。
在上述组合物的任一个的一些实施例中,该一种或多种微生物可以是寄宿于宿主中的细菌或真菌。在一些实施例中,寄宿于宿主中的细菌是选自下组的至少一种,该组由以下组成:暂定属物种(Candidatus spp)、布赫纳氏菌属物种(Buchenera spp)、布拉特杆菌属物种(Blattabacterium spp)、鲍曼属物种(Baumania spp)、威格尔斯沃思氏菌属物种(Wigglesworthia spp)、沃尔巴克氏体属物种(Wolbachia spp)、立克次体属物种(Rickettsia spp)、东方体属物种(Orientia spp)、伴突属物种(Sodalis spp)、伯克霍尔德氏菌属物种(Burkholderia spp)、贪铜菌属物种(Cupriavidus spp)、弗兰克氏菌属物种(Frankia spp)、中华根瘤菌属物种(Snirhizobium spp)、链球菌属物种(Streptococcusspp)、沃廉菌属物种(Wolinella spp)、木杆菌属物种(Xylella spp)、欧氏杆菌属物种(Erwinia spp)、农杆菌属物种(Agrobacterium spp)、芽孢杆菌属物种(Bacillus spp)、类芽孢杆菌属物种(Paenibacillus spp)、链霉菌属物种(Streptomyces spp)、微球菌属物种(Micrococcus spp)、棒状杆菌属物种(Corynebacterium spp)、醋杆菌属物种(Acetobacter spp)、蓝细菌属物种(Cyanobacteria spp)、沙门氏菌属物种(Salmonellaspp)、红球菌属物种(Rhodococcus spp)、假单胞菌属物种(Pseudomonas spp)、乳杆菌属物种(Lactobacillus spp)、肠球菌属物种(Enterococcus spp)、产碱杆菌属物种(Alcaligenes spp)、克雷伯氏菌属物种(Klebsiella spp)、类芽孢杆菌属物种(Paenibacillus spp)、节杆菌属物种(Arthrobacter spp)、棒状杆菌属物种(Corynebacterium spp)、短杆菌属物种(Brevibacterium spp)、栖热菌属物种(Thermusspp)、假单胞菌属物种(Pseudomonas spp)、梭菌属物种(Clostridium spp)、以及埃希氏杆菌属物种(Escherichia spp)。在一些实施例中,寄宿于宿主中的真菌是选自下组的至少一种,该组由以下组成:假丝酵母属(Candida)、梅奇酵母属(Metschnikowia)、德巴利酵母属(Debaromyces)、Starmerella、毕赤酵母属(Pichia)、隐球菌属(Cryptococcus)、南极假丝酵母属(Pseudozyma)、Symbiotaphrina bucneri、Symbiotaphrina kochii、休哈塔假丝酵母(Scheffersomyces shehatae)、树干毕赤酵母(Scheffersomyces stipites)、隐球菌属(Cryptococcus)、毛孢子菌属(Trichosporon)、Amylostereum areolatum、香柱菌属物种(Epichloe spp)、松果毕赤酵母(Pichia pinus)、荚膜汉逊酵母(Hansenula capsulate)、Daldinia decipien、长喙壳属物种(Ceratocystis spp)、长喙壳菌属物种(Ophiostomaspp)、以及Attamyces bromatificus。在某些情况下,该细菌是能够产生营养物(例如,氨基酸,例如甲硫氨酸)的天然存在的细菌。
在上述组合物的任一个中,该药剂(下文中也可称为调节剂)可以改变寄宿于宿主中的微生物的生长、分裂、生存力、代谢、和/或寿命。在上述实施例的任一个中,该调节剂可以降低寄宿于宿主中的一种或多种微生物的生存力。在一些实施例中,该调节剂增加寄宿于宿主中的一种或多种微生物的生长或生存力。
在上述实施例的任一个中,该调节剂是噬菌体、多肽、小分子、抗生素、细菌、或其任何组合。
在一些实施例中,该噬菌体结合寄宿于宿主中的细菌上的细胞表面蛋白。在一些实施例中,该噬菌体对寄宿于宿主中的细菌具有毒性。在一些实施例中,该噬菌体是选自下组的至少一种,该组由以下组成:肌尾噬菌体科(Myoviridae)、长尾噬菌体科(Siphoviridae)、短尾噬菌体科(Podoviridae)、脂毛噬菌体科(Lipothrixviridae)、古噬菌体科(Rudiviridae)、Ampullaviridae、Bicaudaviridae、Clavaviridae、覆盖噬菌体科(Corticoviridae)、囊状噬菌科(Cystoviridae)、纺锤形噬菌体科(Fuselloviridae)、Gluboloviridae、滴状病毒科(Guttaviridae)、丝状噬菌体科(Inoviridae)、光滑噬菌体科(Leviviridae)、微小噬菌体科(Microviridae)、芽生噬菌体科(Plasmaviridae)、以及复层病毒科(Tectiviridae)。
在一些实施例中,该多肽是细菌素、R-型细菌素、根瘤富含半胱氨酸肽(nodule C-rich peptide)、抗微生物肽、溶素、或含菌细胞调节肽中的至少一种。
在一些实施例中,该小分子是代谢物。
在一些实施例中,该抗生素是广谱抗生素。
在一些实施例中,该调节剂是天然存在的细菌。在一些实施例中,该细菌是选自下组的至少一种,该组由以下组成:Bartonella apis,Parasaccharibacter apium,Frischella perrara,Snodgrassella alvi,Gilliamela apicola、双歧杆菌属物种(Bifidobacterium spp)、以及乳杆菌属物种(Lactobacillus spp)。在一些实施例中,该细菌是选自下组的至少一种,该组由以下组成:暂定属物种(Candidatus spp)、布赫纳氏菌属物种(Buchenera spp)、布拉特杆菌属物种(Blattabacterium spp)、鲍曼属物种(Baumaniaspp)、威格尔斯沃思氏菌属物种(Wigglesworthia spp)、沃尔巴克氏体属物种(Wolbachiaspp)、立克次体属物种(Rickettsia spp)、东方体属物种(Orientia spp)、伴突属物种(Sodalis spp)、伯克霍尔德氏菌属物种(Burkholderia spp)、贪铜菌属物种(Cupriavidusspp)、弗兰克氏菌属物种(Frankia spp)、中华根瘤菌属物种(Snirhizobium spp)、链球菌属物种(Streptococcus spp)、沃廉菌属物种(Wolinella spp)、木杆菌属物种(Xylellaspp)、欧氏杆菌属物种(Erwinia spp)、农杆菌属物种(Agrobacterium spp)、芽孢杆菌属物种(Bacillus spp)、类芽孢杆菌属物种(Paenibacillus spp)、链霉菌属物种(Streptomyces spp)、微球菌属物种(Micrococcus spp)、棒状杆菌属物种(Corynebacterium spp)、醋杆菌属物种(Acetobacter spp)、蓝细菌属物种(Cyanobacteria spp)、沙门氏菌属物种(Salmonella spp)、红球菌属物种(Rhodococcusspp)、假单胞菌属物种(Pseudomonas spp)、乳杆菌属物种(Lactobacillus spp)、肠球菌属物种(Enterococcus spp)、产碱杆菌属物种(Alcaligenes spp)、克雷伯氏菌属物种(Klebsiella spp)、类芽孢杆菌属物种(Paenibacillus spp)、节杆菌属物种(Arthrobacter spp)、棒状杆菌属物种(Corynebacterium spp)、短杆菌属物种(Brevibacterium spp)、栖热菌属物种(Thermus spp)、假单胞菌属物种(Pseudomonasspp)、梭菌属物种(Clostridium spp)、以及埃希氏杆菌属物种(Escherichia spp)。
在上述组合物的任一个中,宿主适合度可以通过宿主的存活、繁殖、或代谢来测量。在一些实施例中,该调节剂通过降低该宿主的杀有害生物易感性(例如,对表12中列出的杀有害生物剂的易感性)来调节该宿主的适合度。在一些实施例中,该杀有害生物易感性是杀细菌易感性或杀真菌易感性。在一些实施例中,该杀有害生物易感性是杀昆虫易感性。
在上述组合物的任一个中,该组合物可以包括多种不同的调节剂。在一些实施例中,该组合物包括调节剂和杀有害生物剂(例如,表12中列出的杀有害生物剂)。在一些实施例中,该杀有害生物剂是杀细菌剂或杀真菌剂。在一些实施例中,该杀有害生物剂是杀昆虫剂。
在上述组合物的任一个中,该调节剂可以连接至第二部分。在一些实施例中,该第二部分是调节剂。
在上述组合物的任一个中,该调节剂可以连接至靶向结构域。在一些实施例中,该靶向结构域将调节剂靶向宿主中的靶位点。在一些实施例中,该靶向结构域将调节剂靶向寄宿于宿主中的一种或多种微生物。
在上述组合物的任一个中,该调节剂可以包括失活的前序列(pre-sequence或pro-sequence),从而形成前体调节剂。在一些实施例中,该前体调节剂在宿主中转化为活性形式。
在上述组合物的任一个中,该调节剂可以包括接头。在一些实施例中,该接头是可裂解接头。
在上述组合物的任一个中,该组合物可以进一步包括载体。在一些情况下,该载体可以是农业上可接受的载体。
在上述组合物的任一个中,该组合物可以进一步包括宿主诱饵、粘性剂、或其组合。在一些实施例中,该宿主诱饵是可食用试剂和/或化学引诱剂。
在上述组合物的任一个中,该组合物可以是处于有效调节宿主适合度的剂量。
在上述实施例的任一个中,相对于参考水平,该组合物的调节剂可有效提高该宿主中营养物的产量。在一些实施例中,该调节剂是产生营养物的微生物。在一些实施例中,该微生物是细菌。在一些实施例中,该营养物是维生素、碳水化合物、氨基酸或多肽。在某些实施例中,该氨基酸是甲硫氨酸。
在上述组合物的任一个中,可以将该组合物配制用于向寄生于宿主的肠中的微生物进行递送。
在上述组合物的任一个中,可以将该组合物配制用于向寄生于宿主的含菌细胞和/或宿主的肠中的微生物进行递送。在一些实施例中,可以将该组合物配制用于向植物进行递送。在一些实施例中,可以将该组合物配制用于在宿主进食站中使用。
在上述组合物的任一个中,可以将该组合物配制为液体、粉剂、粒剂或纳米颗粒。在一些实施例中,将该组合物配制为选自下组的一种,该组由以下组成:脂质体、聚合物、细菌分泌肽、以及合成纳米胶囊。在一些实施例中,该合成纳米胶囊向宿主中的靶位点递送组合物。在一些实施例中,该靶位点是宿主的肠。在一些实施例中,该靶位点是宿主中的含菌细胞。
在另外的方面,本文还提供了包括上述组合物的任一个的宿主。在一些实施例中,该宿主是昆虫。在一些实施例中,该昆虫是属于以下目的物种:虱目(Anoplura)、蜘蛛目(Araneae)、蜚蠊目(Blattodea)、鞘翅目(Coleoptera)、革翅目(Dermaptera)、网翅目(Dictyoptera)、双尾目(Diplura)、双翅目(Diptera)、纺足目(Embioptera)、蜉蝣目(Ephemeroptera)、蛩蠊目(Grylloblatodea)、半翅目(Hemiptera)、同翅目(Homoptera)、膜翅目(Hymenoptera)、等翅目(Isoptera)、鳞翅目(Lepidoptera)、螳螂目(Mantidae)、长翅目(Mecoptera)、脉翅目(Neuroptera)、蜻蜓目(Odonata)、直翅目(Orthoptera)、竹节虫目(Phasmida)、襀翅目(Plecoptera)、原尾目(Protura)、啮虫目(Psocoptera)、蚤目(Siphonaptera)、虱目(Siphunculata)、缨尾目(Thysanura)、捻翅目(Strepsiptera)、缨翅目(Thysanoptera)、毛翅目(Trichoptera)、或缺翅目(Zoraptera)。在某些实施例中,该昆虫是蟋蟀。在某些实施例中,该昆虫是蚱蜢。在某些实施例中,该昆虫是蝗虫。
在又另外的方面,本文还提供了用于调节宿主适合度的系统,该系统包含靶向宿主适合度所需的微生物的调节剂,其中该系统对于调节该宿主的适合度是有效的,并且其中该宿主是昆虫。该调节剂可以包括本文所述的组合物的任一个。在一些实施例中,将该调节剂配制为粉剂。在一些实施例中,将该调节剂配制为溶剂。在一些实施例中,将该调节剂配制为浓缩物。在一些实施例中,将该调节剂配制为稀释剂。在一些实施例中,通过将先前组合物的任一个与载体组合来制备该调节剂用于递送。
在另一个方面,本文还提供了使用本文所述的组合物的任一个来调节昆虫适合度的方法。在一种情况下,调节昆虫宿主的适合度的方法包括向宿主递送如先前权利要求中任一项所述的组合物,其中该调节剂靶向寄宿于宿主中的一种或多种微生物,从而调节宿主的适合度。在另一种情况下,调节昆虫宿主中的微生物多样性的方法包括向宿主递送如先前权利要求中任一项所述的组合物,其中该调节剂靶向寄宿于宿主中的一种或多种微生物,从而调节宿主中的微生物多样性。
在上述方法的任一个的一些实施例中,该调节剂可以改变寄宿于宿主中的一种或多种微生物的水平。在上述方法的任一个的一些实施例中,该调节剂可以改变寄宿于宿主中的一种或多种微生物的功能。在一些实施例中,该一种或多种微生物可以是细菌和/或真菌。在一些实施例中,该一种或多种微生物是宿主适合度所需的。在一些实施例中,该一种或多种微生物是宿主存活所需的。
在上述方法的任一个的一些实施例中,递送步骤可以包括以足以影响一种或多种微生物的剂量和时间来提供调节剂,从而调节宿主中的微生物多样性。在一些实施例中,该递送步骤包括将先前组合物的任一个局部施用至植物。在一些实施例中,该递送步骤包括通过基因工程化的植物来提供调节剂。在一些实施例中,该递送步骤包括将调节剂作为食物提供给宿主。在一些实施例中,该递送步骤包括提供携带调节剂的宿主。在一些实施例中,携带调节剂的宿主可以将调节剂传播给一种或多种另外的宿主。
在上述方法的任一个的一些实施例中,该组合物有效提高该宿主的健康和/或存活。在一些实施例中,该组合物有效提高宿主适合度、提高宿主寿限、提高有效授粉、提高宿主产物的产生、提高宿主繁殖、或其组合。在一些实施例中,该组合物有效降低该宿主对杀有害生物剂(例如,表12中列出的杀有害生物剂)的敏感性。在一些实施例中,该杀有害生物剂是新烟碱。在一些实施例中,该组合物有效提高该宿主对植物产生的化感剂的抗性。在一些实施例中,在组合物递送之前,该化感剂对该宿主具有毒性。在一些实施例中,该化感剂是咖啡因、大豆半胱氨酸蛋白酶抑制剂(soyacystatin)N、单萜类、二萜酸、或酚类化合物。在一些实施例中,该组合物有效提高该宿主中的营养物产量,从而提高了衍生自该宿主的产物中的营养物含量。在一些实施例中,该营养物是维生素、碳水化合物、氨基酸或多肽。
在上述方法的任一个的一些实施例中,该宿主的至少一部分可用于制造可消费产品。在上述方法的任一个的一些实施例中,该宿主是昆虫。在一些实施例中,该昆虫是属于以下目的物种:虱目(Anoplura)、蜘蛛目(Araneae)、蜚蠊目(Blattodea)、鞘翅目(Coleoptera)、革翅目(Dermaptera)、网翅目(Dictyoptera)、双尾目(Diplura)、双翅目(Diptera)、纺足目(Embioptera)、蜉蝣目(Ephemeroptera)、蛩蠊目(Grylloblatodea)、半翅目(Hemiptera)、同翅目(Homoptera)、膜翅目(Hymenoptera)、等翅目(Isoptera)、鳞翅目(Lepidoptera)、螳螂目(Mantidae)、长翅目(Mecoptera)、脉翅目(Neuroptera)、蜻蜓目(Odonata)、直翅目(Orthoptera)、竹节虫目(Phasmida)、襀翅目(Plecoptera)、原尾目(Protura)、啮虫目(Psocoptera)、蚤目(Siphonaptera)、虱目(Siphunculata)、缨尾目(Thysanura)、捻翅目(Strepsiptera)、缨翅目(Thysanoptera)、毛翅目(Trichoptera)、或缺翅目(Zoraptera)。在某些实施例中,该昆虫是蟋蟀。在某些实施例中,该昆虫是蚱蜢。在某些实施例中,该昆虫是蝗虫。在一些实施例中,该产品包括人类食品。在一些实施例中,该产品包括补充动物饲料或人类食品的营养补充剂。在一些实施例中,该产品包括动物饲料。在一些实施例中,这些动物是牲畜或农场动物。
在另一个方面,本文提供了制造人类或动物食品的方法,该方法包括(a)提供多个(例如,2个、>2个、>5个、>10个、>100个、>1000个、>5,000个、>10,000个、>50,000个、>100,000个)宿主昆虫,(b)以有效调节寄宿于该多个宿主昆虫中的一种或多种微生物的量,向该多个宿主昆虫递送本文所述的可摄取组合物,和(c)将该多个宿主昆虫加工(例如,研磨,任选地与载体或另一种食物组分混合)成食物、食品添加剂或食品补充剂。在一些实施例中,该可摄取组合物包含微生物。在一些实施例中,该微生物产生营养物,并且相对于参考水平,该微生物有效提高该宿主中的营养物产量。在一些实施例中,该微生物是细菌。在一些实施例中,该营养物是维生素、碳水化合物、氨基酸或多肽。在一些实施例中,该氨基酸是甲硫氨酸。
在上述方法的任一个的一些实施例中,该递送步骤包括将先前组合物的任一个递送至植物。在一些实施例中,该植物是农作物。在一些实施例中,该作物在递送时是未收获的作物。在一些实施例中,该作物在递送时是收获的作物。在一些实施例中,该作物包括收获的水果或蔬菜。在一些实施例中,该组合物以有效增加作物生长的量和持续时间递送。在一些实施例中,该作物包括玉米、大豆或小麦植物。
在另一个方面,本文还提供了筛选测定以鉴定调节宿主的适合度的调节剂。在一种情况下,鉴定调节宿主适合度的调节剂的筛选测定包括以下步骤:(a)将可以寄宿于宿主中的微生物暴露于一种或多种候选调节剂下,和(b)鉴定提高或降低宿主适合度的调节剂。
在筛选测定的一些实施例中,该调节剂是寄宿于宿主中的微生物。在一些实施例中,该微生物是细菌。在一些实施例中,当寄宿于宿主中时,该细菌提高宿主适合度。在一些实施例中,该细菌降解杀有害生物剂(例如,表12中列出的杀有害生物剂)。在一些实施例中,该杀有害生物剂是新烟碱。在一些实施例中,该细菌分泌氨基酸。在一些实施例中,其中该氨基酸是甲硫氨酸。
在筛选测定的一些实施例中,该调节剂影响降解化感物质的微生物。在一些实施例中,该调节剂是噬菌体、抗生素、或测试化合物。在一些实施例中,该抗生素是特美汀或阿奇霉素。
在筛选测定的一些实施例中,该宿主可以是无脊椎动物。在一些实施例中,该无脊椎动物是昆虫。在一些实施例中,该昆虫是蟋蟀。在某些实施例中,该昆虫是蚱蜢。在某些实施例中,该昆虫是蝗虫。
在筛选测定的上述实施例的任一个中,宿主适合度可以通过调节宿主微生物区系来调节。
定义
如本文所用的,术语“细菌素”是指具有抗微生物特性的肽或多肽。天然存在的细菌素是由某些原核生物产生的,并且对抗与生产菌株相关的生物,但不针对生产菌株本身。本文所预期的细菌素包括但不限于天然存在的细菌素(如由细菌产生的细菌素)及其衍生物(如工程化的细菌素、重组表达的细菌素、以及化学合成的细菌素)。在一些情况下,该细菌素是本文所述的细菌素的功能活性变体。在一些情况下,该细菌素的变体例如在指定区域或整个序列上与本文所述的细菌素或天然存在的细菌素的序列具有至少70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或99%同一性。
如本文所用的,术语“含菌细胞”是指在某些昆虫中发现的特化细胞,其中细胞内细菌具有共生细菌的特性。
如本文所用的,术语“有效量”是指足以影响以下所列举的结果的调节剂(例如,噬菌体、溶素、细菌素、小分子、或抗生素)或者包括所述药剂的组合物的量:例如以提高或促进宿主生物(例如,昆虫)的适合度;达到靶宿主内调节剂浓度的靶水平(例如,预定或阈值水平);达到靶宿主肠内调节剂浓度的靶水平(例如,预定或阈值水平);达到靶宿主含菌细胞内调节剂浓度的靶水平(例如,预定或阈值水平);调节靶宿主中一种或多种微生物(例如,内共生体)的水平或活性。
如本文所用的,术语“适合度”是指宿主生物存活和/或产生存活后代的能力。生物的适合度可以通过一个或多个参数来测量,包括但不限于寿限、营养物产量、繁殖速率、迁移、体重、以及代谢速率。适合度可另外地基于活动或产物产量的量度来测量。
如本文所用的,术语“肠”是指宿主肠的任何部分,包括宿主的前肠、中肠、或后肠。
如本文所用的,术语“宿主”是指携带寄宿微生物(例如,内源微生物、内共生微生物(例如,原生或次生内共生体)、共栖生物、和/或致病微生物)的生物(例如,昆虫)。
如本文所用的,“提高宿主适合度”或“促进宿主适合度”是指由于给予调节剂而产生的宿主生理学或所述宿主进行的任何活动的任何有利的改变,包括但不限于以下所希望效果中的任何一种或多种:(1)使宿主的群体提高约10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%、99%、100%或更多;(2)使宿主(例如,昆虫)的繁殖速率提高约10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%、99%、100%或更多;(3)使宿主(例如,昆虫)的迁移提高约10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%、99%、100%或更多;(4)使宿主(例如,昆虫)的体重提高约10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%、99%、100%或更多;(5)使宿主(例如,昆虫)的代谢速率或活动提高约10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%、99%、100%或更多;(6)使宿主副产物的产量提高约10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%、99%、100%或更多;(7)使宿主(例如,昆虫)的营养物(例如,蛋白、脂肪酸、或氨基酸)含量提高约10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%、99%、100%或更多;或(8)使宿主对杀有害生物剂的抗性提高约10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%、99%、100%或更多。可以确定与没有被给予调节剂的宿主生物相比宿主适合度的提高。
术语“昆虫”包括在任何发育阶段(即,未成熟昆虫和成虫昆虫)的属于节肢动物门以及属于昆虫纲(Insecta)或蛛形纲(Arachnida)的任何生物。
如本文所用的,“溶素”(也称为内溶素、自溶素、胞壁质水解酶、肽聚糖水解酶、或细胞壁水解酶)是指可以通过裂解细菌细胞壁中的肽聚糖来溶解细菌的水解酶。本文所预期的溶素包括但不限于天然存在的溶素(如由噬菌体产生的溶素、由细菌产生的溶素)及其衍生物(如工程化的溶素、重组表达的溶素、以及化学合成的溶素)。细菌素的功能活性变体可以例如在指定区域或整个序列上与包括任何本文所述的合成的、重组的或天然衍生的细菌素的序列具有至少70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或99%同一性。
如本文所用的,术语“微生物”是指细菌或真菌。微生物可以是指寄宿于宿主生物(例如,内源性微生物、内共生微生物(例如,原生或次生内共生体))的微生物或者对宿主为外源的微生物,包括那些可充当调节剂的微生物。如本文所用的,术语“靶微生物”是指寄宿于宿主中的并且直接或间接地受调节剂影响的微生物。
如本文所用的,术语“调节剂”或“药剂”是指能够改变寄宿于宿主生物(例如,昆虫)中的微生物的水平和/或功能,并且从而调节(例如,提高)宿主生物(例如,昆虫)的适合度的药剂。
如本文所用的,“提高昆虫的营养特征”是指提高营养物的产量,该营养物可提高该昆虫的蛋白含量、体质量、和/或整体营养价值。
如本文所用的,术语“杀有害生物剂(pesticide或pesticidal agent)”是指可用于控制农业有害生物、环境有害生物、或家养/家居有害生物,如昆虫、真菌、细菌、或病毒的物质。术语“杀有害生物剂”被理解为涵盖天然存在的或合成的杀昆虫剂(杀幼虫剂或杀成虫剂(adulticide)、昆虫生长调节剂、杀螨剂(杀螨药)、杀线虫剂、杀外寄生物药、杀细菌剂、杀真菌剂、或除草剂(可用于农业以控制或改变植物生长的物质)。杀有害生物剂(pesticide或pesticidal agent)的另外的实例列于表12中。在一些情况下,该杀有害生物剂是化感物质。如本文所用的,“化感物质”或“化感剂”是由生物产生的物质,该生物可以影响另一种生物(例如,宿主昆虫)的生理功能(例如,萌发、生长、存活或繁殖)。
如本文所用的,术语“肽”、“蛋白质”或“多肽”涵盖天然或非天然存在的氨基酸(D-或L-氨基酸)的任何链,无论长度(例如,至少2、3、4、5、6、7、10、12、14、16、18、20、25、30、40、50、100或更多个氨基酸)、存在或不存在翻译后修饰(例如,糖基化或磷酸化)、或存在例如与肽共价连接的一个或多个非氨基酰基基团(例如,糖、脂质等),并且包括例如天然蛋白、合成的或重组的多肽和肽、杂交分子、类肽或模拟肽。
如本文所用的,两个序列之间的“百分比同一性”通过BLAST 2.0算法(描述于Altschul等人,(1990)J.Mol.Biol.[分子生物学杂志]215:403-410)确定。用于进行BLAST分析的软件可通过美国国家生物技术信息中心(National Center for BiotechnologyInformation)公开获得。
如本文所用的,术语“细菌噬菌体”或“噬菌体”是指在细菌中感染和复制的病毒。细菌噬菌体在将它们的基因组注射进入细胞质后在细菌内进行复制,并使用导致细菌细胞溶解的裂解性周期或使细菌细胞保持完整的溶原性(非裂解性)周期进行复制。噬菌体可以是天然存在的噬菌体分离物,或工程化的噬菌体,包括媒介或编码部分噬菌体基因组(例如,包括在宿主细菌内进行噬菌体生命周期所必需的至少所有的必需基因)或完整噬菌体基因组的核酸。
如本文所用的,术语“植物”是指整株植物、植物器官、植物组织、种子、植物细胞、种子、或它们的子代。植物细胞包括但不限于来自种子、悬浮培养物、胚、分生组织区域、愈伤组织、叶、根、枝、配子体、孢子体、花粉、或小孢子的细胞。植物部分包括分化的或未分化的组织,这些组织包括但不限于以下:根、茎、枝、叶、花粉、种子、肿瘤组织、以及各种形式的细胞和培养物(例如,单细胞、原生质体、胚、或愈伤组织)。植物组织可以在植物中或在植物器官、组织或细胞培养物中。此外,植物可以被基因工程化以产生例如本文所述的方法或组合物中的调节剂的任一个的异源蛋白或RNA。
术语“通过......可获得”、“通过......可产生”或其他类似短语用于指示权利要求或实施例是指化合物、组合物、产物等本身,即该化合物、组合物、产物等可通过描述用于制造该化合物、组合物、产物等的方法获得或产生,但该化合物、组合物、产物等也可以通过该描述的方法以外的其他方法获得或产生。术语“通过......获得”、“通过......产生”或等等指示化合物、组合物、产物是通过所列举的具体方法获得或产生的。应理解,术语“通过......获得”、“通过......产生”和等等还披露了术语“通过......获得”、“通过......产生”和等等作为“通过......可获得”、“通过......可产生”和等等的优选的实施例。
从以下详细说明以及权利要求中,本发明的其他特征和优点将会是显而易见的。
附图说明
附图旨在说明本发明的一个或多个特征、方面或实施例,而非旨在进行限制。
图1是示出黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)从胚到达成虫期的时间的图。将黑腹果蝇的胚用接种了谷氨酸棒状杆菌(Corynebacterium glutamicum)(一种产生谷氨酸盐-谷氨酸棒状杆菌谷氨酸盐(C.glutamicum Glu)的菌株)的饲料或者用不含任何细菌的无外来菌的饲料饲养。从第一只成虫出现开始,每12小时测量从它们的蛹中出现的成虫的百分比。用补充细菌的饲料饲养的生物比它们的无细菌的对应物更快地到达成虫期。
图2A是示出黑腹果蝇中雄性性别对发育率差异的作用的图。将图11中出现的成虫按照性别分类并且将它们的出现率作图。
图2B是示出黑腹果蝇中雌性性别对发育率差异的作用的图。将图1中出现的成虫按照性别分类并且将它们的出现率作图。由于饲料中细菌的出现,雌性发育率的提高显著高于它们的雄性对应物。相比在雄性中,蝇饲料中细菌存在的益处在雌性中更高。
图3是示出谷氨酸棒状杆菌(C.glutamicum)菌株促进幼虫生物量的图。用补充了产生谷氨酸盐或甲硫氨酸的谷氨酸棒状杆菌的菌株的饲料饲养的幼虫比用无菌饲料或补充了大肠杆菌(Escherichia coli)的饲料饲养的那些幼虫更大。以幼虫图像中的像素数测量幼虫区域。中位数和95%的置信区间示出为图上的线。
图4是一组图,这些图显示了针对细菌呼吸的海马(Seahorse)通量测定的结果。如在方法中所述的,细菌生长至对数生长期并加载到海马(Seahorse)XFe96板中,用于氧消耗率(OCR)和细胞外酸化率(ECAR)的时间测量。大约20分钟后将处理物注射入孔中,并监测细菌以检测生长变化。利福平=100μg/mL;氯霉素=25μg/mL;噬菌体(针对大肠杆菌为T7,以及针对黏质沙雷氏菌(Serratia marcescens)为ΦSmVL-C1)是在SM缓冲液中以1∶2或1∶100稀释的裂解物。每条线上的标记仅作为每条线对应的条件的指标提供,并不指示数据点。
图5是显示针对黏质沙雷氏菌的噬菌体降低了蝇死亡率的图。用黏质沙雷氏菌针刺的蝇都在一天内死亡,而用黏质沙雷氏菌和噬菌体针刺的相当大部分的蝇在处理后存活了五天。几乎所有未经处理的对照蝇无论如何都存活至实验结束。使用对数秩检验来比较统计学显著性的曲线,星号表示p<0.0001。
具体实施方式
本文提供了用于食物和饲料应用的方法和组合物,例如,用于改变寄宿于宿主昆虫中的一种或多种微生物的水平、活性或代谢,该改变导致该宿主的适合度提高。本发明的特征在于组合物,该组合物包括调节剂(例如,噬菌体、肽、小分子、抗生素、或其组合),该调节剂能以对宿主有益的方式改变该宿主的微生物区系。通过促进有利的微生物水平、微生物活性、微生物代谢、和/或微生物多样性,本文所述的调节剂可以用于提高在人类食物和动物饲料工业中使用的多种昆虫的适合度。
本文所述的方法和组合物部分地基于以下实例,这些实例示出不同的药剂(例如,产甲硫氨酸微生物)如何可用在昆虫宿主(如蟋蟀、蝇、蚱蜢或蝗虫)中,以通过改变这些宿主中的微生物的水平、活性或代谢来间接改善这些宿主的健康(例如,提高甲硫氨酸含量、体质量、发育率、和/或存活)。产甲硫氨酸微生物是产氨基酸微生物的代表性实例并且更广泛地说代表产营养物的微生物,并且这一类型的其他微生物可用于本发明中。在此基础上,本披露描述了改变寄宿于宿主中的一种或多种微生物的水平、活动或代谢的药剂的使用的多种不同方法,该改变导致该宿主适合度的调节。
I.宿主
i.昆虫
如本文所述的任何组合物或方法的宿主可以是属于节肢动物门(例如,昆虫)的任何生物,包括本文所述的任何节肢动物。在一些情况下,该宿主可以是为可消耗产品(例如,食物或饲料)而培育的昆虫或蛛形纲动物。例如,该宿主可以是蛾、蝴蝶、蝇、蟋蟀、蚱蜢、蝗虫、蜘蛛、或甲虫。在一些情况下,该宿主属于以下目:虱目(Anoplura)、蜘蛛目(Araneae)、蜚蠊目(Blattodea)、鞘翅目(Coleoptera)、革翅目(Dermaptera)、网翅目(Dictyoptera)、双尾目(Diplura)、双翅目(Diptera)、纺足目(Embioptera)、蜉蝣目(Ephemeroptera)、蛩蠊目(Grylloblatodea)、半翅目(Hemiptera)、同翅目(Homoptera)、膜翅目(Hymenoptera)、等翅目(Isoptera)、鳞翅目(Lepidoptera)、螳螂目(Mantidae)、长翅目(Mecoptera)、脉翅目(Neuroptera)、蜻蜓目(Odonata)、直翅目(Orthoptera)、竹节虫目(Phasmida)、襀翅目(Plecoptera)、原尾目(Protura)、啮虫目(Psocoptera)、蚤目(Siphonaptera)、虱目(Siphunculata)、缨尾目(Thysanura)、捻翅目(Strepsiptera)、缨翅目(Thysanoptera)、毛翅目(Trichoptera)、或缺翅目(Zoraptera)。
在一些实例中,该宿主是黑水虻(black soldier fly,Hermetia illucens)、家蝇、小粉虫(lesser mealworm)、编织蚊、蚕(家蚕(Bombyx mori))、蚱蜢、中华稻蝗(中华蚱蜢(Acrida cinerea))、黄粉虫(yellow mealworm)(Clarias gariepinns)、蛾(Anapheinfracta或家蚕(Bombyx mori))、海灰翅夜蛾(Spodoptera littoralis)、家蟋蟀、白蚁、椰棕象虫(红棕象甲(Rhynchophorus ferruginens))、大负子蝽(印度田鳖(Lethocerusindicus))、龙虱、白蚁(非洲曼迪大白蚁(Macrotermes subhyalinus))、窃蠹甲(药材甲(Stegobium paniceum))、Imbrasia belina、紫棕象甲(Rhynchophorus phoenicis)、二疣犀甲(Oryctes rhinoceros)、非洲大白蚁(Macrotermes bellicosus)、Ruspoliadifferens、非洲蛀犀金龟甲(Oryctes Monoceros)、或黄猄蚊(Oecophylla smaragdina)。
在具体情况下,本文披露的调节剂可用于提高蟋蟀、蚱蜢、或蝗虫的适合度。
该宿主可处于任何发育阶段。例如,该宿主可以是胚、幼虫、蛹、或成虫。
ii.宿主适合度
本文提供的方法和组合物可用于提高本文所述的宿主中任一种的适合度。适合度的提高可能是由于寄宿于宿主中的微生物的任何改变,其中这些改变是给予调节剂的结果并且对宿主具有有益或有利的作用。
在一些情况下,由于给予调节剂,宿主适合度的提高可表现为宿主生理学的改善(例如,改善的健康或存活)。在一些情况下,生物的适合度可通过一种或多种参数来测量,这些参数包括但不限于相比于没有被给予调节剂的宿主生物的繁殖速率、寿限、迁移、繁殖力、体重、代谢速率或活动、或存活。例如,相比于没有被给予调节剂的宿主生物,本文提供的方法或组合物可有效改善该宿主的整体健康或改善该宿主的整体存活。在一些情况下,相对于参考水平(例如,在未接受调节剂的宿主中发现的水平),该宿主的改善的存活是约2%、5%、10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、100%、或大于100%。在一些情况下,相比于没有被给予调节剂的宿主生物,这些方法和组合物有效提高了宿主繁殖(例如,繁殖速率)。在一些情况下,相对于参考水平(例如,在未接受调节剂的宿主中发现的水平),这些方法和组合物可有效使其他的生理参数(如迁移、体重、寿限、繁殖力、或代谢速率)提高约2%、5%、10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、100%、或大于100%。
在一些情况下,相比于没有被给予调节剂的宿主生物,该宿主适合度提高可表现为在宿主中一种或多种营养物(例如,维生素、碳水化合物类、氨基酸、或多肽)产量的提高。在一些情况下,相对于参考水平(例如,在未接受调节剂的宿主中发现的水平),本文提供的方法或组合物可有效使该宿主中的营养物(例如,维生素、碳水化合物类、氨基酸、或多肽)的产量提高约2%、5%、10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、100%、或大于100%。在一些情况下,相比于没有被给予调节剂的宿主生物,本文提供的方法或组合物可通过提高由宿主中的一种或多种微生物(例如,内共生体)产生的营养物的产量来增加宿主中的营养物。
在一些情况下,相比于没有被给予调节剂的宿主生物,宿主适合度的提高可表现为该宿主对杀有害生物剂(例如,表12中列出的杀有害生物剂)的敏感性的降低和/或该宿主对杀有害生物剂(例如,表12中列出的杀有害生物剂)的抗性的提高。在一些情况下,相对于参考水平(例如,在未接受调节剂的宿主中找到的水平),本文提供的方法或组合物可有效使宿主对杀有害生物剂的敏感性降低约2%、5%、10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、100%、或大于100%。该杀有害生物剂可以是本领域已知的任何杀有害生物剂,包括杀昆虫剂。在一些情况下,该杀有害生物剂是新烟碱。在一些情况下,相比于没有被给予调节剂的宿主生物,本文提供的方法或组合物可通过提高该宿主将杀有害生物剂代谢或降解为可用底物的能力来降低该宿主对杀有害生物剂(例如,表12中列出的杀有害生物剂)的敏感性。
在一些情况下,相比于没有被给予调节剂的宿主生物,宿主适合度的提高可表现为该宿主对化感剂的敏感性的降低和/或该宿主对化感剂的抗性的提高。在一些情况下,相对于参考水平(例如,在未接受调节剂的宿主中发现的水平),本文提供的方法或组合物可有效使该宿主对化感剂的抗性提高约2%、5%、10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、100%、或大于100%。在一些情况下,相比于没有被给予调节剂的宿主生物相比,该化感剂是咖啡因、大豆半胱氨酸蛋白酶抑制剂N、单萜类、二萜酸或酚类化合物。在一些情况下,相比于没有被给予调节剂的宿主生物,本文提供的方法或组合物可通过提高该宿主将化感剂代谢或降解为可用底物的能力来降低该宿主对化感剂的敏感性。
在一些情况下,相比于没有被给予调节剂的宿主生物,本文提供的方法或组合物可以有效提高宿主对寄生物或病原体(例如真菌的、细菌的、或病毒的病原体或寄生螨)的抗性。在一些情况下,相对于参考水平(例如,在未接受调节剂的宿主中找到的水平),本文提供的方法或组合物可有效使该宿主对病原体或寄生物(例如,真菌病原体、细菌病原体或病毒病原体;或者寄生螨)的抗性提高约2%、5%、10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、100%、或大于100%。
在一些情况下,相比于没有被给予调节剂的宿主生物,宿主适合度提高可表现为其他适合度优点,如对某些环境因素(例如,高温或低温耐受性)的耐受性提高、在某些生境中的存活能力提高、或维持某种饲料的能力提高(例如,代谢大豆和玉米的能力提高)。在一些情况下,本文提供的方法或组合物能以本文所述的多种方式中的任一种来有效提高宿主适合度。此外,该调节剂可在任何数量的宿主纲、目、科、属、或物种(例如,1个宿主物种,2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、15个、20个、30个、40个、50个、60个、70个、80个、90个、100个、150个、200个、200个、250个、500个、或更多个宿主物种)中提高宿主适合度。在一些情况下,该调节剂作用于单一宿主纲、目、科、属、或物种。
可以使用本领域的任何标准方法来评估宿主适合度。在一些情况下,可以通过评估个体宿主来评估宿主适合度。可替代地,可以通过评估宿主群体来评估宿主适合度。例如,宿主适合度提高可表现为与其他昆虫的成功竞争的提高,从而导致该宿主群体的规模增加。
iii.饲料/食品生产中的宿主昆虫
在达到所希望的生命阶段后,可以收获宿主,并且如果需要,可以对其进行处理以用于制造可消耗产品。在一些情况下,该收获的昆虫能以完整的形式(例如,作为完整的、未经加工的昆虫)作为可消耗产品分售。在一些情况下,该完整的收获的昆虫被加工(例如,研磨)并作为可消耗产品分售。可替代地,可以从该昆虫中提取该昆虫的一个或多个部分(例如,一个或多个身体部分或一种或多种物质)用于制造可消费产品。
该可消耗产品可以是对于人类或动物消耗(例如,摄取)来说是安全的任何产品。在一些情况下,该宿主可用于制造动物饲料。在一些情况下,该动物是牲畜或农场动物(例如,鸡、牛、马或猪)。在一些情况下,该动物是鸟类、爬行动物、两栖动物、哺乳动物或鱼类。在一些情况下,该宿主可用于制造替代动物的正常饲料的产品。可替代地,该宿主可用于制造补充动物的正常饲料的产品。该宿主还可用于制造人用食品、食品添加剂或食品成分。在一些情况下,该宿主用于制造人用营养补充剂(例如,蛋白补充剂)。
该宿主可以是野生的昆虫或驯化的昆虫。另外地,在递送或施用本文所述的该组合物时,该宿主可以处于任何发育阶段。此外,在收获该宿主用于制造可消耗产品时,该宿主可处于任何发育阶段。在一些情况下,在收获、使用、加工或制造时,该宿主是幼虫、蛹、或成虫。该调节剂的递送和收获步骤可同时或不同时发生。
在一些情况下,基于昆虫物种的天然营养特征,对其进行选择。在一些情况下,将调节剂用于改善该昆虫的营养特征,其中相比于没有被给予调节剂的宿主生物,该调节剂导致营养物的产量提高。营养物的实例包括维生素、碳水化合物类、氨基酸、多肽、或脂肪酸。在一些情况下,该提高的产量可能是由于寄宿于该宿主中的微生物产生的营养物的产量提高。可替代地,该提高的产量可能是由于该宿主昆虫本身产生的营养物的产量的提高,其中在递送或给予调节剂之后,该宿主具有提高的适合度。
在一些情况下,在最后加工中,将第一昆虫物种与第二昆虫物种结合,其中该第二昆虫物种的营养特征对食品或饲料产品的整体营养价值提供了补充性益处。例如,具有高蛋白特征的物种可与具有高ω3/6脂肪酸特征的物种结合。以这种方式,昆虫蛋白粉可以定制混合以满足人类或不同动物物种的需要。
II.靶微生物
本文所述的调节剂靶向的微生物可以包括寄宿于宿主体内或体表的任何微生物,包括但不限于本文所述的任何细菌和/或真菌。寄宿于宿主中的微生物可以包括,例如,共生微生物(例如,为宿主提供有益的营养物或酶的内共生微生物)、共栖微生物、致病微生物、或寄生微生物。共生微生物(例如,细菌或真菌)可以是宿主的专性共生体或宿主的兼性共生体。寄宿于宿主中的微生物可以通过任何传播方式获得,包括垂直传播、水平传播或多个传播源。
i.细菌
根据本文提供的方法和组合物可靶向的示例性细菌包括但不限于:致病杆菌属物种(Xenorhabdus spp)、发光杆菌属物种(Photorhabdus spp)、暂定属物种(Candidatusspp)、布赫纳氏菌属物种(Buchnera spp)、布拉特杆菌属物种(Blattabacterium spp)、鲍曼属物种(Baumania spp)、威格尔斯沃思氏菌属物种(Wigglesworthia spp)、沃尔巴克氏体属物种(Wolbachia spp)、立克次体属物种(Rickettsia spp)、东方体属物种(Orientiaspp)、伴突属物种(Sodalis spp)、伯克霍尔德氏菌属物种(Burkholderia spp)、贪铜菌属物种(Cupriavidus spp)、弗兰克氏菌属物种(Frankia spp)、中华根瘤菌属物种(Snirhizobium spp)、链球菌属物种(Streptococcus spp)、沃廉菌属物种(Wolinellaspp)、木杆菌属物种(Xylella spp)、欧氏杆菌属物种(Erwinia spp)、农杆菌属物种(Agrobacterium spp)、芽孢杆菌属物种(Bacillus spp)、类芽孢杆菌属物种(Paenibacillus spp)、链霉菌属物种(Streptomyces spp)、微球菌属物种(Micrococcusspp)、棒状杆菌属物种(Corynebacterium spp)、醋杆菌属物种(Acetobacter spp)、蓝细菌属物种(Cyanobacteria spp)、沙门氏菌属物种(Salmonella spp)、红球菌属物种(Rhodococcus spp)、假单胞菌属物种(Pseudomonas spp)、乳杆菌属物种(Lactobacillusspp)、肠球菌属物种(Enterococcus spp)、产碱杆菌属物种(Alcaligenes spp)、克雷伯氏菌属物种(Klebsiella spp)、类芽孢杆菌属物种(Paenibacillus spp)、节杆菌属物种(Arthrobacter spp)、棒状杆菌属物种(Corynebacterium spp)、短杆菌属物种(Brevibacterium spp)、栖热菌属物种(Thermus spp)、假单胞菌属物种(Pseudomonasspp)、梭菌属物种(Clostridium spp)、以及埃希氏杆菌属物种(Escherichia spp)。可通过本文提供的方法和组合物靶向的细菌的非限制性实例显示于表1中。
表1:靶细菌和宿主昆虫的实例
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本文所述的组合物或方法可以靶向任何数量的细菌物种。例如,在一些情况下,该调节剂可以靶向单一细菌物种。在一些情况下,该调节剂可以靶向至少约1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、15、20、30、40、50、60、70、80、90、100、150、200、250、500、或更多种不同的细菌物种中的任一者。在一些情况下,该调节剂可以靶向约1至约5、约5至约10、约10至约20、约20至约50、约50至约100、约100至约200、约200至约500、约10至约50、约5至约20、或约10至约100种不同的细菌物种中的任一者。在一些情况下,该调节剂可以靶向至少约1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、15、20、30、40、50、60、70、80、90、100、或更多种细菌的门、纲、目、科或属中的任一者。
在一些情况下,相比于没有被给予调节剂的宿主生物,该调节剂可使宿主中一种或多种细菌(例如,共生细菌)的群体增加至少约10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%或更多中的任一者。在一些情况下,相比于没有被给予调节剂的宿主生物,该调节剂可使宿主中一种或多种细菌(例如,致病细菌或寄生细菌)的群体减少至少约10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%或更多中的任一者。在一些情况下,该调节剂可根除该宿主中的细菌(例如,致病细菌或寄生细菌)群体。在一些情况下,相比于没有被给予调节剂的宿主生物,该调节剂可使宿主中一种或多种共生细菌的水平提高至少约10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%或更多中的任一者和/或使宿主中一种或多种致病细菌的水平降低至少约10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%或更多中的任一者。
在一些情况下,该调节剂可以改变宿主的细菌多样性和/或细菌组成。在一些情况下,相比于没有被给予调节剂的宿主生物,调节剂可使宿主中的细菌多样性相对于起始多样性增加至少约10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%或更多中的任一者。在一些情况下,相比于没有被给予调节剂的宿主生物,调节剂可使宿主中的细菌多样性相对于起始多样性减少至少约10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%或更多中的任一者。
在一些情况下,该调节剂可以改变一种或多种细菌细胞的功能、活性、生长、和/或分化。例如,该调节剂可以改变细菌中一种或多种基因的表达。在一些情况下,该调节剂可以改变细菌中一种或多种蛋白质的功能。在一些情况下,该调节剂可以改变细菌中一种或多种细胞结构(例如,细胞壁、外膜或内膜)的功能。在一些情况下,该调节剂可以杀死(例如,裂解)细菌。
靶细菌可以寄宿于昆虫的一个或多个部分中。此外,靶细菌可以是细胞内或细胞外的。在一些情况下,细菌可以寄宿于宿主肠内或肠表的一个或多个部分中,该肠包括例如,前肠、中肠和/或后肠。在一些情况下,细菌作为细胞内细菌寄宿于宿主昆虫的细胞内。在一些情况下,细菌寄宿于宿主昆虫的含菌细胞。
可以通过本领域已知的任何方法(如微阵列、聚合酶链式反应(PCR)、实时PCR、流式细胞术、荧光显微镜法、透射电子显微术、荧光原位杂交技术(例如FISH)、分光光度计法、基质辅助激光解析电离-质谱法(MALDI-MS)、以及DNA测序)确定宿主中细菌的群体的改变。在一些情况下,对用调节剂处理的宿主样品进行测序(例如,通过16S rRNA或rDNA的宏基因组测序)以确定在递送或给予调节剂后宿主的微生物组。在一些情况下,还对未接受调节剂的宿主样品进行测序以提供参考。
ii.真菌
根据本文提供的方法和组合物可靶向的示例性真菌包括但不限于:Amylostereumareolatum,香柱菌属物种(Epichloe spp)、松果毕赤酵母(Pichia pinus)、荚膜汉逊酵母(Hansenula capsulate)、Daldinia decipien、长喙壳属物种(Ceratocystis spp)、长喙壳菌属物种(Ophiostoma spp)、以及Attamyces bromatificus。昆虫中发现的酵母和酵母样共生体的非限制性实例包括假丝酵母属(Candida)、梅奇酵母属(Metschnikowia)、德巴利酵母属(Debaromyces)、休哈塔假丝酵母(Scheffersomyces shehatae)和树干毕赤酵母(Scheffersomyces stipites)、Starmerella、毕赤酵母属(Pichia)、毛孢子菌属(Trichosporon)、隐球菌属(Cryptococcus)、南极假丝酵母属(Pseudozyma),以及来自盘菌亚门(subphylum Pezizomycotina)的酵母样共生体(例如,Symbiotaphrina bucneri和Symbiotaphrina kochii)。本文的方法和组合物可靶向的酵母的非限制性实例列于表2中。
表2
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本文所述的组合物或方法可以靶向任何数量的真菌物种。例如,在一些情况下,该调节剂可以靶向单一真菌物种。在一些情况下,该调节剂可以靶向至少约1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、15、20、30、40、50、60、70、80、90、100、150、200、250、500、或更多种不同的真菌物种中的任一者。在一些情况下,该调节剂可以靶向约1至约5、约5至约10、约10至约20、约20至约50、约50至约100、约100至约200、约200至约500、约10至约50、约5至约20、或约10至约100种不同的真菌物种中的任一者。在一些情况下,该调节剂可以靶向至少约1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、15、20、30、40、50、60、70、80、90、100、或更多种真菌的门、纲、目、科或属中的任一者。
在一些情况下,相比于没有被给予调节剂的宿主生物,该调节剂可使宿主中一种或多种真菌(例如,共生真菌)的群体增加至少约10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%或更多中的任一者。在一些情况下,相比于没有被给予调节剂的宿主生物,该调节剂可使宿主中一种或多种真菌(例如,致病真菌或寄生真菌)的群体减少至少约10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%或更多中的任一者。在一些情况下,该调节剂可根除该宿主中的真菌(例如,致病真菌或寄生真菌)群体。在一些情况下,相比于没有被给予调节剂的宿主生物,该调节剂可使宿主中一种或多种共生真菌的水平提高至少约10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%或更多中的任一者和/或可使宿主中一种或多种致病真菌的水平降低至少约10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%或更多中的任一者。
在一些情况下,该调节剂可以改变宿主的真菌多样性和/或真菌组成。在一些情况下,相比于没有被给予调节剂的宿主生物,该调节剂可使宿主中的真菌多样性相对于起始多样性增加至少约10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%或更多中的任一者。在一些情况下,相比于没有被给予调节剂的宿主生物,该调节剂可使宿主中的真菌多样性相对于起始多样性减少至少约10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%或更多中的任一者。
在一些情况下,该调节剂可以改变一种或多种真菌的功能、活性、生长、和/或分化。例如,该调节剂可以改变真菌中一种或多种基因的表达。在一些情况下,该调节剂可以改变真菌中一种或多种蛋白质的功能。在一些情况下,该调节剂可以改变真菌中一种或多种细胞组分的功能。在一些情况下,该调节剂可以杀死真菌。
此外,靶真菌可以寄宿于昆虫的一个或多个部分中。在一些情况下,真菌可以寄宿于昆虫肠内或肠表的一个或多个部分中,该肠包括例如,前肠、中肠和/或后肠。在一些情况下,真菌在细胞外生活在宿主的血淋巴、脂肪体或在特化结构中。
可以通过本领域已知的任何方法(如微阵列、聚合酶链式反应(PCR)、实时PCR、流式细胞术、荧光显微镜法、透射电子显微术、荧光原位杂交技术(例如FISH)、分光光度计法、基质辅助激光解析电离-质谱法(MALDI-MS)、以及DNA测序)确定宿主中真菌的群体的改变。在一些情况下,对用调节剂处理的宿主样品进行测序(例如,通过宏基因组测序)以确定在递送或给予调节剂后宿主的微生物组。在一些情况下,还对未接受调节剂的宿主样品进行测序以提供参考。
III.调节剂
本文提供的方法和组合物的调节剂可以包括噬菌体、多肽、小分子、抗生素、次生代谢物、细菌、真菌、或其任何组合。
i.噬菌体
本文所述的调节剂可以包括噬菌体(例如,裂解性噬菌体或非裂解性噬菌体)。在一些情况下,本文所述的有效浓度的任何噬菌体可以改变寄宿于本文所述的宿主中的一种或多种微生物(如本文所述)的水平、活性或代谢,该改变导致该宿主的适合度提高。在一些情况下,该调节剂包括选自以下目的至少一种噬菌体:复层病毒科(Tectiviridae)、肌尾噬菌体科(Myoviridae)、长尾噬菌体科(Siphoviridae)、短尾噬菌体科(Podoviridae)、有尾噬菌体目(Caudovirales)、脂毛噬菌体科(Lipothrixviridae)、古噬菌体科(Rudiviridae)、或线状病毒目(Ligamenvirales)。在一些情况下,该组合物包括选自以下科的至少一种噬菌体:肌尾噬菌体科(Myoviridae)、长尾噬菌体科(Siphoviridae)、短尾噬菌体科(Podoviridae)、脂毛噬菌体科(Lipothrixviridae)、古噬菌体科(Rudiviridae)、Ampullaviridae,Bicaudaviridae,Clavaviridae、覆盖噬菌体科(Corticoviridae)、囊状噬菌科(Cystoviridae)、纺锤形噬菌体科(Fuselloviridae)、Gluboloviridae、滴状病毒科(Guttaviridae)、丝状噬菌体科(Inoviridae)、光滑噬菌体科(Leviviridae)、微小噬菌体科(Microviridae)、芽生噬菌体科(Plasmaviridae)、和复层病毒科(Tectiviridae)。在本方法和组合物中有用的噬菌体的另外的非限制性实例列于表3中。
表3:噬菌体和靶细菌的实例
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在一些情况下,调节剂包括裂解性噬菌体。因此,在将裂解性噬菌体递送至寄宿于宿主的细菌细胞后,该噬菌体引起靶细菌细胞中的裂解。在一些情况下,该裂解性噬菌体靶向并杀死寄宿于宿主昆虫中的细菌以提高该宿主的适合度。可替代地或另外地,该调节剂的噬菌体可以是非裂解性噬菌体(也称为溶原性噬菌体或温和噬菌体)。因此,在将非裂解性噬菌体递送至寄宿于宿主的细菌细胞后,该细菌细胞可保持存活并能够稳定地维持噬菌体基因组中编码的基因的表达。在一些情况下,非裂解性噬菌体用于改变寄宿于宿主昆虫中的细菌中的基因表达以提高该宿主的适合度。在一些情况下,该调节剂包括裂解性噬菌体和非裂解性噬菌体的混合物。
本文所述的调节剂可包括具有窄的或宽的细菌靶范围的噬菌体。在一些情况下,该噬菌体具有窄的细菌靶范围。在一些情况下,该噬菌体是具有大的细菌靶范围的混杂的噬菌体。例如,该混杂的噬菌体可以靶向寄宿于宿主的至少约5、10、20、30、40、50、或更多中的任一者的细菌。具有窄细菌靶范围的噬菌体可靶向宿主中的特异性细菌菌株,而不影响该宿主中另一种细菌,例如非靶向的细菌。例如,该噬菌体可以靶向不超过寄宿于宿主的约50、40、30、20、10、8、6、4、2、或1中的任一者的细菌。
本文所述的组合物可以包括任何数量的噬菌体,如至少约1、2、3、4、5、10、15、20、30、40、50、100或更多个噬菌体中的任一者。在一些情况下,该组合物包括来自一个或多个(例如,2、3、4、5、6、7、8、9、10、或多种噬菌体)科,一个或多个目(例如,2、3、4、5、6、7、8、9、10、或多种噬菌体),或一个或多个物种(例如,1、2、3、4、5、10、15、20、30、40、50、100、或多种噬菌体)的噬菌体。包括一种或多种噬菌体的组合物在本文中也称为“噬菌体混合物”。噬菌体混合物是有用的,因为它们允许靶向更广泛的细菌的宿主范围。此外,它们允许每种细菌菌株(即亚种)被多个正交噬菌体靶向,从而防止或显著延迟抗性的发作。在一些情况下,混合物包括靶向一种细菌物种的多种噬菌体。在一些情况下,混合物包括靶向多种细菌物种的多种噬菌体。在一些情况下,单噬菌体“混合物”包括靶向物种内的许多菌株的单个混杂的噬菌体(即具有大宿主范围的噬菌体)。
本文所述的调节剂中噬菌体的合适浓度取决于如功效、存活率、噬菌体的可传递性、组合物中不同噬菌体的数量和/或溶素类型、配制品和组合物的施用方法等因素。在一些情况下,噬菌体是处于液体或固体配制品的形式。在一些情况下,本文所述的组合物的任一个中每种噬菌体的浓度为至少约102、103、104、105、106、107、108、109、1010或更多pfu/ml中的任一者。在一些情况下,本文所述的组合物的任一个中每种噬菌体的浓度为不超过约102、103、104、105、106、107、108、109pfu/ml中的任一者。在一些情况下,组合物中每种噬菌体的浓度为约102至约103、约103至约104、约104至约105、约105至约106、约107至约108、约108至约109、约102至约104、约104至约106、约106至约109、或约103至约108pfu/ml中的任一者。在一些情况下,其中组合物包括至少两种类型的噬菌体,每种类型的噬菌体的浓度可以相同或不同。例如,在一些情况下,混合物中一种噬菌体的浓度为约108pfu/ml,并且混合物中第二噬菌体的浓度为约106pfu/ml。
包括如本文所述的噬菌体的调节剂可以按足以实现以下的量和时间与靶宿主接触:(a)达到靶宿主内噬菌体浓度的靶水平(例如,预定或阈值水平);(b)达到靶宿主肠内噬菌体浓度的靶水平(例如,预定或阈值水平);(c)达到靶宿主含菌细胞内噬菌体浓度的靶水平(例如,预定或阈值水平);(d)调节靶宿主中一种或多种微生物(例如内共生体)的水平或活性;或/和(e)调节靶宿主的适合度。
如实例7和实例9所示,通过从昆虫宿主如蟋蟀中消除细菌病原体如黏质沙雷氏菌、Erwinia catotovora、和喜昆虫假单胞菌(Pseudomonas entomophila),噬菌体可用作调节剂。
ii.多肽
许多种多肽(例如,细菌素、R型细菌素、根瘤富含半胱氨酸肽、抗微生物肽、溶素、或含菌细胞调节肽)可用于本文所述的组合物和方法中。在一些情况下,本文所述的任何肽或多肽的有效浓度可以改变寄宿于宿主中的一种或多种微生物(如本文所述)的水平、活性或代谢,该改变导致该宿主的适合度提高。本文包括的多肽可以包括天然存在的多肽或重组产生的变体。例如,该多肽可以是本文所述的任何多肽的功能活性变体,例如在指定区域或整个序列上与本文所述的多肽或天然存在的多肽的序列具有至少70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或99%同一性。
包括如本文所述的多肽的调节剂可以按足以实现以下的量和时间与靶宿主接触:(a)达到靶宿主内浓度的靶水平(例如,预定或阈值水平);(b)达到靶宿主肠内浓度的靶水平(例如,预定或阈值水平);(c)达到靶宿主含菌细胞内浓度的靶水平(例如,预定或阈值水平);(d)调节靶宿主中一种或多种微生物(例如内共生体)的水平或活性;或/和(e)调节靶宿主的适合度。
(a)细菌素
本文所述的调节剂可以包括细菌素。在一些情况下,该细菌素是由革兰氏阳性细菌天然产生的,例如假单胞菌属(Pseudomonas)、链霉菌属(Streptomyces)、芽孢杆菌属(Bacillus)、葡萄球菌属(Staphylococcus)、或乳酸菌(LAB,如乳酸乳球菌(Lactococcuslactis))。在一些情况下,该细菌素是由革兰氏阴性细菌天然产生的,例如蜂房哈夫尼菌(Hafnia alvei)、弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacterfreundii)、产酸克雷伯氏菌(Klebsiellaoxytoca)、肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella pneumonia)、阴沟肠杆菌(Enterobactercloacae)、Serratia plymithicum、野油菜黄单胞菌(Xanthomonas campestris)、软腐欧氏杆菌(Erwinia carotovora)、青枯雷尔氏菌(Ralstonia solanacearum)、或大肠杆菌(Escherichia coli)。示例性细菌素包括但不限于I-IV类LAB抗生素(例如羊毛硫抗生素)、大肠杆菌素、小菌素(microcin)和脓菌素。细菌素的非限制性实例列于表4中。
表4:细菌素的实例
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在一些情况下,该细菌素是由革兰氏阴性细菌产生的大肠杆菌素、脓菌素、或小菌素(microcin)。在一些情况下,该细菌素是大肠杆菌素。大肠杆菌素可以是A组大肠杆菌素(例如,使用Tol系统以渗透靶细菌的外膜)或B组大肠杆菌素(例如,使用Ton系统以渗透靶细菌的外膜)。在一些情况下,该细菌素是小菌素(microcin)。小菌素(microcin)可以是I类小菌素(microcin)(例如,<5kDa,具有翻译后修饰)或II类小菌素(microcin)(例如,5-10kDa,具有或不具有翻译后修饰)。在一些情况下,II类小菌素(microcin)是IIa类小菌素(microcin)(例如,需要多于一个基因以合成和组装功能肽)或IIb类小菌素(microcin)(例如,在C-末端具有或不具有翻译后修饰的线性肽)。在一些情况下,该细菌素是脓菌素。在一些情况下,该脓菌素是R-脓菌素、F-脓菌素、或S-脓菌素。
在一些情况下,该细菌素是由革兰氏阳性细菌产生的I类、II类、III类、或IV类、细菌素。在一些情况下,该调节剂包括I类细菌素(例如,由革兰氏阳性细菌产生的含有羊毛硫氨酸的抗生素(羊毛硫抗生素))。I类细菌素或羊毛硫抗生素可以是低分子量肽(例如,小于约5kDa)并且可以具有翻译后修饰的氨基酸残基(例如,羊毛硫氨酸、β-甲基羊毛硫氨酸、或脱水氨基酸)。
在一些情况下,该细菌素是II类细菌素(例如,由革兰氏阳性细菌产生的非羊毛硫抗生素)。许多是带正电荷的不含羊毛硫氨酸的肽,这些肽(与羊毛硫抗生素不同)不进行广泛的翻译后修饰。II类细菌素可以属于以下子类之一:“片球菌素(pediocin)样”细菌素(例如,片球菌素(pediocin)PA-1和肉食杆菌素(carnobacteriocin)X(IIa类));双肽细菌素(例如,乳酸菌素F和ABP-118(IIb类));环形细菌素(例如,环状细菌素(carnocyclin)A和肠道菌素AS-48(IIc类));或未修饰的、线性的、非片球菌素(pediocin)样细菌素(例如,表皮菌素(epidermicin)NI01和乳球菌素A(IId类))。
在一些情况下,该细菌素是III类细菌素(例如,由革兰氏阳性细菌产生的)。III类细菌素可以具有大于10kDa的分子量并且可以是热不稳定的蛋白质。III类细菌素可以进一步细分为IIIA组细菌素和IIIB组细菌素。IIIA组细菌素包括溶菌酶,其通过细胞壁的裂解来杀死敏感菌株,例如Enterolisin A。IIIB组细菌素包括非裂解性蛋白质,例如Caseicin80、Helveticin J和乳酸菌素B。
在一些情况下,该细菌素是IV类细菌素(例如,由革兰氏阳性细菌产生的)。IV类细菌素是一组复合物蛋白,与其他脂质或碳水化合物部分相关,似乎是活性所需的。它们是相对疏水且热稳定的。IV类细菌素的实例leuconocin S、乳酸菌素27、和乳酸菌素S。
在一些情况下,该细菌素是R型细菌素。R型细菌素是收缩性杀菌蛋白复合物。一些R型细菌素具有收缩性的噬菌体尾样结构。噬菌体尾丝蛋白的C-末端区域决定靶结合特异性。它们可以通过受体结合蛋白(例如尾丝)附着于靶细胞。附着之后是鞘收缩以及通过靶细菌的包膜插入核心。核心穿透导致细胞膜电位的快速去极化并促使细胞死亡。与单一R型细菌素颗粒接触可导致细胞死亡。例如,R型细菌素可以是不耐热的、温和酸抗性的、胰蛋白酶抗性的、可通过离心沉降的、可通过电子显微镜分辨的、或其组合。其他R型细菌素可以是包括多种蛋白质、多肽或亚单元的复合物分子,并且可以类似于肌尾噬菌体科(Myoviridae)的细菌噬菌体的尾结构。在天然存在的R型细菌素中,亚单元结构可以由细菌基因组编码,例如艰难梭状芽孢杆菌(C.Difficile)或铜绿假单胞菌(P.Aeruginosa)的基因组并形成R型细菌素以用作针对其他细菌的天然防御。在一些情况下,该R型细菌素是脓菌素。在一些情况下,该脓菌素是R-脓菌素、F-脓菌素、或S-脓菌素。
在一些情况下,该细菌素是本文所述的细菌素的功能活性变体。在一些情况下,该细菌素的变体例如在指定区域或整个序列上与本文所述的细菌素或天然存在的细菌素的序列具有至少70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或99%同一性。
在一些情况下,根据标准方法,该细菌素可以被生物工程化以调节其生物活性(例如,增加或减少或调节)或指定其靶微生物。在其他情况下,该细菌素是由微生物细胞的翻译机制(例如核糖体等)产生的。在一些情况下,该细菌素是化学合成的。一些细菌素可以衍生自多肽前体。该多肽前体可以经历切割(例如,通过蛋白酶加工)以产生细菌素本身的多肽。因此,在一些情况下,该细菌素由前体多肽产生。在一些其他情况下,该细菌素包括已经历翻译后修饰(例如切割,或添加一个或多个官能团)的多肽。
可以在用于本文所述的任何用途的组合物中配制本文所述的细菌素。本文披露的组合物可以包括任何数量或类型(例如,类别)的细菌素,如至少约1种细菌素、2、3、4、5、10、15、20、30、40、50、100、或更多种细菌素中的任一者。本文所述的组合物中每种细菌素的合适的浓度取决于如功效、细菌素的稳定性、组合物中不同细菌素类型的数量、配制品和组合物的施用方法等因素。在一些情况下,液体组合物中每种细菌素是从约0.01ng/ml至约100mg/mL。在一些情况下,固体组合物中每种细菌素是从约0.01ng/g至约100mg/g。在一些情况下,其中该组合物包括至少两种类型的细菌素,每种类型的细菌素的浓度可以相同或不同。在一些情况下,该细菌素提供于包括分泌该细菌素的细菌细胞的组合物中。在一些情况下,该细菌素提供于包括多肽(例如,从细菌细胞分离的多肽)的组合物中。
细菌素可以中和(例如,杀死)除制备多肽的个体细菌细胞以外的至少一种微生物,包括与细菌细胞和其他微生物细胞克隆相关的细胞。因此,细菌细胞可通过分泌细菌素对多种微生物有机体发挥细胞毒性或生长抑制作用。在一些情况下,细菌素经由细胞质膜孔形成、细胞壁干扰(例如,肽聚糖酶活性)或核酸酶活性(例如,DNA酶活性、16S rRNA酶活性或tRNA酶活性)靶向并杀死寄宿于宿主中的一种或多种细菌。
在一些情况下,该细菌素具有中和活性。细菌素的中和活性可以包括但不限于阻止微生物繁殖或细胞毒性。一些细菌素具有细胞毒活性,并且因此可以杀死微生物有机体,例如细菌、酵母、藻类等。一些细菌素可以抑制微生物有机体(例如细菌、酵母、藻类等)的繁殖,例如通过阻止细胞周期。
在一些情况下,该细菌素具有杀伤活性。细菌素的杀伤机制对每组细菌素都是特异性的。在一些情况下,该细菌素具有窄谱生物活性。已知细菌素针对其靶菌株具有非常高的效力。一些细菌素活性仅限于与细菌素生产菌株密切相关的菌株(窄谱生物活性)。在一些情况下,该细菌素针对宽范围的属具有广谱生物活性。
在一些情况下,细菌素与靶细菌细胞膜上的受体分子或对接分子相互作用。例如,乳链菌肽针对其靶细菌菌株非常有效,即使在一位数的纳摩尔浓度下也显示出抗微生物活性。乳链菌肽分子已被证明与脂质II结合,脂质II是肽聚糖亚单元从细胞质到细胞壁的主要转运体。
在一些情况下,该细菌素具有抗真菌活性。已经鉴定了许多具有抗酵母或抗真菌活性的细菌素。例如,已经显示来自芽孢杆菌属(Bacillus)的细菌素具有针对一些酵母菌株的中和活性(参见,例如,Adetunji和Olaoye,Malaysian Journal of Microbiology[马来西亚微生物学杂志]9:130-13,2013)。在另一个实例中,已显示粪肠球菌(Enterococcusfaecalis)肽具有针对假丝酵母属(Candida)物种的中和活性(参见,例如,Shekh和Roy,BMCMicrobiology[BMC微生物学]12:132,2012)。在另一个实例中,已显示来自假单胞菌属(Pseudomonas)的细菌素具有针对真菌的中和活性,如月状弯孢霉(Curvularia lunata)、镰刀菌属(Fusarium)物种、长蠕孢属(Helminthosporium)物种、和离蠕孢属(Biopolaris)物种(参见,例如,Shalani和Srivastava,The Internet Journal ofMicrobiology[网络微生物学杂志],第5卷,第2期,2008)。在另一个实例中,已显示来自枯草芽孢杆菌(B.subtilis)的botrycidin AJ1316和alirin B1具有抗真菌活性。
包括如本文所述的细菌素的调节剂可以按足以实现以下的量和时间与靶宿主接触:(a)达到靶宿主内细菌素浓度的靶水平(例如,预定或阈值水平);(b)达到靶宿主肠内细菌素浓度的靶水平(例如,预定或阈值水平);(c)达到靶宿主含菌细胞内细菌素浓度的靶水平(例如,预定或阈值水平);(d)调节靶宿主中一种或多种微生物(例如内共生体)的水平或活性;或/和(e)调节靶宿主的适合度。
(b)溶素
本文所述的调节剂可包括溶素(例如,也称为胞壁质水解酶或肽聚糖自溶素)。可以使用任何适用于抑制寄宿于宿主的细菌的溶素。在一些情况下,该溶素是可以由细菌细胞天然产生的溶素。在一些情况下,该溶素是可以由细菌噬菌体天然产生的溶素。在一些情况下,该溶素从抑制寄宿于宿主的细菌的噬菌体获得。在一些情况下,该溶素是基于天然存在的溶素工程化的。在一些情况下,将该溶素工程化使其由宿主细菌分泌,例如通过向溶素中引入信号肽。在一些情况下,该溶素与噬菌体穴蛋白组合使用。在一些情况下,溶素由对溶素不敏感的重组细菌宿主表达。在一些情况下,该溶素用于抑制寄宿于宿主的革兰氏阳性或革兰氏阴性细菌。
该溶素可以是任何类的溶素,并且可以具有一种或多种底物特异性。例如,该溶素可以是糖苷酶,内肽酶、羧肽酶或其组合。在一些情况下,该溶素裂解细胞壁的糖部分中的β-1-4糖苷键,连接细菌细胞壁的糖和肽部分的酰胺键,和/或细胞壁的肽部分之间的肽键。该溶素可以属于一个或多个特异性溶素组,这取决于肽聚糖内的切割位点。在一些情况下,该溶素是N-乙酰基-β-D-胞壁酸酶(例如溶菌酶)、裂解性转糖基酶、N-乙酰基-β-D-氨基葡萄糖苷酶、N-乙酰胞壁酰基-L-丙氨酸酰胺酶、L,D-内肽酶、D,D-内肽酶、D,D-羧肽酶、L,D-羧肽酶或L,D-转肽酶。溶素的非限制性实例及其活性列于表5中。
表5:溶素的实例
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在一些情况下,该溶素是本文所述的溶素的功能活性变体。在一些情况下,该溶素的变体例如在指定区域或整个序列上与本文所述的溶素或天然存在的溶素的序列具有至少70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或99%的同一性。
在一些情况下,该溶素可以被生物工程化以调节其生物活性(例如,增加或减少或调节)或指定其靶微生物。在一些情况下,该溶素是由微生物细胞的翻译机制(例如核糖体等)产生的。在一些情况下,该溶素是化学合成的。在一些情况下,该溶素衍生自多肽前体。该多肽前体可以经历切割(例如,通过蛋白酶加工)以产生溶素本身的多肽。因此,在一些情况下,该溶素由前体多肽产生。在一些情况下,该溶素包括已经历翻译后修饰(例如切割,或添加一个或多个官能团)的多肽。
可以在用于本文所述的任何用途的组合物中配制本文所述的溶素。本文披露的组合物可以包括任何数量或类型(例如,类别)的溶素,如至少约1种溶素、2、3、4、5、10、15、20、或更多种溶素中的任一者。组合物中每种溶素的合适的浓度取决于如功效、溶素的稳定性、不同溶素的数量、配制品和组合物的施用方法等因素。在一些情况下,液体组合物中每种溶素是从约0.1ng/mL至约100mg/mL。在一些情况下,固体组合物中每种溶素是从约0.1ng/g至约100mg/g。在一些情况下,其中该组合物包括至少两种类型的溶素,每种类型的溶素的浓度可以相同或不同。
包括如本文所述的溶素的调节剂可以按足以实现以下的量和时间与靶宿主接触:(a)达到靶宿主内溶素浓度的靶水平(例如,预定或阈值水平);(b)达到靶宿主肠内溶素浓度的靶水平(例如,预定或阈值水平);(c)达到靶宿主含菌细胞内溶素浓度的靶水平(例如,预定或阈值水平);(d)调节靶宿主中一种或多种微生物(例如内共生体)的水平或活性;或/和(e)调节靶宿主的适合度。
(c)抗微生物肽
本文所述的调节剂可以包括抗微生物肽(AMP)。可以使用任何适用于抑制寄宿于宿主的微生物的AMP。AMP是一组多样化的分子,根据其氨基酸组成和结构分为亚组。AMP可以衍生或产生自天然产生AMP(包括衍生自植物的AMP(例如,copsin)、衍生自昆虫的AMP(例如,果蝇菌素、蝎肽(例如,Uy192、UyCT3、D3、D10、Uy17、Uy192)、蜂毒肽(Mastoparan)、poneratoxin、杀菌肽、家蚕抗菌肽、蜂毒素)、衍生自蛙类的AMP(例如,爪蟾抗菌肽、皮抑菌肽、aurein),以及衍生自哺乳动物的AMP(例如,组织蛋白酶抑制素(cathelicidin)、防御素和抗菌肽))的任何生物。例如,AMP可以是蝎肽,如Uy192(5’-FLSTIWNGIKGLL-3’;SEQ IDNO:221)、UyCT3(5’-LSAIWSGIKSLF-3;SEQ ID NO:222)、D3(5’-LWGKLWEGVKSLI-3’;SEQ IDNO:223)、和D10(5’-FPFLKLSLKIPKSAIKSAIKRL-3’;SEQ ID NO:224)、Uy17(5’-ILSAIWSGIKGLL-3’;SEQ ID NO:225)、或其组合。AMP的其他非限制性实例列于表6中。
表6:抗微生物肽的实例
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AMP可以针对任何数量的靶微生物具有活性。在一些情况下,该AMP可具有抗细菌和/或抗真菌活性。在一些情况下,该AMP可具有窄谱生物活性或广谱生物活性。例如,一些AMP仅靶向并杀死很少数种类的细菌或真菌,而其他AMP则针对革兰氏阴性和革兰氏阳性细菌两者以及真菌都具有活性。
此外,该AMP可以通过许多已知的作用机制起作用。例如,细胞质膜是AMP的常见靶,但AMP也可以干扰DNA和蛋白质合成、蛋白质折叠和细胞壁合成。在一些情况下,具有净阳离子电荷和两亲性质的AMP破坏细菌膜,导致细胞裂解。在一些情况下,AMP可进入细胞并与细胞内靶相互作用以干扰DNA、RNA、蛋白质或细胞壁合成。除杀死微生物外,AMP已证明还具有许多免疫调节功能,这些功能与感染的清除有关,包括以下的能力:改变宿主基因表达、充当趋化因子和/或诱导趋化因子产生、抑制脂多糖诱导的促炎细胞因子产生、促进伤口愈合、并调节树突细胞和适应性免疫应答细胞的反应。
在一些情况下,该AMP是本文所述的AMP的功能活性变体。在一些情况下,该AMP的变体例如在指定区域或整个序列上与本文所述的AMP或天然衍生的AMP的序列具有至少70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或99%的同一性。
在一些情况下,该AMP可以被生物工程化以调节其生物活性(例如,增加或减少或调节)或指定其靶微生物。在一些情况下,该AMP是由细胞的翻译机制(例如核糖体等)产生的。在一些情况下,该AMP是化学合成的。在一些情况下,该AMP衍生自多肽前体。该多肽前体可以经历切割(例如,通过蛋白酶加工)以产生AMP本身的多肽。因此,在一些情况下,该AMP由前体多肽产生。在一些情况下,该AMP包括已经历翻译后修饰(例如切割,或添加一个或多个官能团)的多肽。
可以在用于本文所述的任何用途的组合物中配制本文所述的AMP。本文披露的组合物可以包括任何数量或类型(例如,类别)的AMP,如至少约1种AMP、2、3、4、5、10、15、20、或更多种AMP中的任一者。例如,组合物可以包括AMP的混合物(例如,蝎肽(例如UyCT3、D3、D10和Uy17)的混合物)。组合物中每种AMP的合适的浓度取决于如功效、AMP的稳定性、组合物中不同AMP的数量、配制品和组合物的施用方法等因素。在一些情况下,液体组合物中每种AMP是从约0.1ng/mL至约100mg/mL。在一些情况下周体组合物中每种AMP是从约0.1ng/g至约100mg/g。在一些情况下,其中该组合物包括至少两种类型的AMP,每种类型的AMP的浓度可以相同或不同。
包括如本文所述的AMP的调节剂可以按足以实现以下的量和时间与靶宿主接触:(a)达到靶宿主内AMP浓度的靶水平(例如,预定或阈值水平);(b)达到靶宿主肠内AMP浓度的靶水平(例如,预定或阈值水平);(c)达到靶宿主含菌细胞内AMP浓度的靶水平(例如,预定或阈值水平);(d)调节靶宿主中一种或多种微生物(例如内共生体)的水平或活性;或/和(e)调节靶宿主的适合度。
(d)根瘤富含半胱氨酸肽
本文所述的调节剂可以包括根瘤富含半胱氨酸肽(NCR肽)。NCR肽在某些豆科植物中产生,并且在植物与来自根瘤菌科(Rhizobiaceae,rhizobia)的细菌的互利、固氮共生中起重要作用,导致根瘤的形成,其中植物细胞含有数千个细胞内的内共生体。NCR肽具有抗微生物剂特性,其导致细菌的不可逆的终末分化过程,例如,使细菌膜透化、破坏细胞分裂或抑制蛋白质合成。例如,在感染了苜蓿中华根瘤菌(Sinorhizobium meliloti)的蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)根瘤细胞中,产生了数百种NCR肽,其导致细菌不可逆地分化成大的多倍体固氮拟杆菌。NCR肽的非限制性实例列于表7中。
表7:NCR肽的实例
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本领域已知的任何NCR肽都适用于在本文所述的方法或组合物中使用。产生NCR肽的植物包括但不限于碗豆(Pisum sativum,pea)、紫云英(Astragalus sinicus)(IRLC豆类)、菜豆(Phaseolus vulgaris)(豆(bean))、豇豆(Vigna unguiculata,cowpea)、蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)(桶形三叶草(barrel clover))、和百脉根(Lotusjaponicus)。例如,从蒺藜状苜蓿(M truncatula)基因组序列中预测了600多种潜在的NCR肽,并且已经在通过质谱法在从根瘤分离的细胞中检测到近150种不同的NCR肽。
本文描述的NCR肽可以是成熟或未成熟的NCR肽。未成熟的NCR肽具有易位到内质网中所需的并且在易位后裂解的C-末端信号肽。NCR肽的N-末端包括可以是可裂解的信号肽,用于靶向分泌途径。NCR肽通常是具有稳定其结构的二硫桥的小肽。成熟的NCR肽具有在约20至约60个氨基酸、约25至约55个氨基酸、约30至约50个氨基酸、约35至约45个氨基酸、或其间任何范围的范围内的长度。NCR肽可以包括半胱氨酸残基的保守序列,其中肽序列的其余部分高度可变。NCR肽通常具有约四个或八个半胱氨酸。
NCR肽可以是阴离子的、中性的或阳离子的。在一些情况下,具有pI大于约八的合成阳离子NCR肽具有抗微生物活性。例如,NCR247(pI=10.15)(RNGCIVDPRCPYQQCRRPLYCRRR;SEQ ID NO:198)和NCR335(pI=11.22)(MAQFLLFVYSLIIFLSLFFGEAAFERTETRMLTIPCTSDDNCPKVISPCHTKCFDGFCGWYIEGSYEGP;SEQ ID NO:199)针对革兰氏阴性和革兰氏阳性细菌以及真菌均有效。在一些情况下,中性和/或阴离子NCR肽(例如NCR001)在pI大于约8时不具有抗微生物活性。
在一些情况下,该NCR肽可有效杀死细菌。在一些情况下,该NCR肽可有效杀死S.meliloti、致病杆菌属物种(Xenorhabdus spp)、发光杆菌属物种(Photorhabdus spp)、暂定属物种(Candidatus spp)、布赫纳氏菌属物种(Buchnera spp)、布拉特杆菌属物种(Blattabacterium spp)、鲍曼属物种(Baumania spp)、威格尔斯沃思氏菌属物种(Wigglesworthia spp)、沃尔巴克氏体属物种(Wolbachia spp)、立克次体属物种(Rickettsia spp)、东方体属物种(Orientia spp)、伴突属物种(Sodalis spp)、伯克霍尔德氏菌属物种(Burkholderia spp)、贪铜菌属物种(Cupriavidus spp)、弗兰克氏菌属物种(Frankia spp)、中华根瘤菌属物种(Snirhizobium spp)、链球菌属物种(Streptococcusspp)、沃廉菌属物种(Wolinella spp)、木杆菌属物种(Xylella spp)、欧氏杆菌属物种(Erwinia spp)、农杆菌属物种(Agrobacterium spp)、芽孢杆菌属物种(Bacillus spp)、类芽孢杆菌属物种(Paenibacillus spp)、链霉菌属物种(Streptomyces spp)、微球菌属物种(Micrococcus spp)、棒状杆菌属物种(Corynebacterium spp)、醋杆菌属物种(Acetobacter spp)、蓝细菌属物种(Cyanobacteria spp)、沙门氏菌属物种(Salmonellaspp)、红球菌属物种(Rhodococcus spp)、假单胞菌属物种(Pseudomonas spp)、乳杆菌属物种(Lactobacillus spp)、肠球菌属(Enterococcus spp)、产碱杆菌属物种(Alcaligenesspp)、克雷伯氏菌属物种(Klebsiella spp)、类芽孢杆菌属物种(Paenibacillus spp)、节杆菌属物种(Arthrobacter spp)、棒状杆菌属物种(Corynebacterium spp)、短杆菌属物种(Brevibacterium spp)、栖热菌属物种(Thermus spp)、假单胞菌属物种(Pseudomonasspp)、梭菌属物种(Clostridium spp)、或埃希氏杆菌属物种(Escherichia spp)。
在一些情况下,该NCR肽是本文所述的NCR肽的功能活性变体。在一些情况下,该NCR肽的变体例如在指定区域或整个序列上与本文所述的NCR肽或天然衍生的NCR肽的序列具有至少70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或99%的同一性。
在一些情况下,该NCR肽可以被生物工程化以调节其生物活性(例如,增加或减少或调节)或指定其靶微生物。在一些情况下,该NCR肽是由细胞的翻译机制(例如核糖体等)产生的。在一些情况下,该NCR肽是化学合成的。在一些情况下,该NCR肽衍生自多肽前体。该多肽前体可以经历切割(例如,通过蛋白酶加工)以产生NCR肽本身。因此,在一些情况下,该NCR肽由前体多肽产生。在一些情况下,该NCR肽包括已经历翻译后修饰(例如切割,或添加一个或多个官能团)的多肽。
可以在用于本文所述的任何用途的组合物中配制本文所述的NCR肽。本文披露的组合物可以包括任何数量或类型的NCR肽,如至少约1种NCR肽、2、3、4、5、10、15、20、30、40、50、100、或更多种NCR肽中的任一者。组合物中每种NCR肽的合适的浓度取决于如功效、NCR肽的稳定性、不同NCR肽的数量、配制品和组合物的施用方法等因素。在一些情况下,液体组合物中每种NCR肽是从约0.1ng/mL至约100mg/mL。在一些情况下,固体组合物中每种NCR肽是从约0.1ng/g至约100mg/g。在一些情况下,其中该组合物包括至少两种类型的NCR肽,每种类型的NCR肽的浓度可以相同或不同。
包括如本文所述的NCR肽的调节剂可以按足以实现以下的量和时间与靶宿主接触:(a)达到靶宿主内NCR肽浓度的靶水平(例如,预定或阈值水平);(b)达到靶宿主肠内NCR肽浓度的靶水平(例如,预定或阈值水平);(c)达到靶宿主含菌细胞内NCR肽浓度的靶水平(例如,预定或阈值水平);(d)调节靶宿主中一种或多种微生物(例如内共生体)的水平或活性;或/和(e)调节靶宿主的适合度。
(e)含菌细胞调节肽
本文所述的调节剂可以包括含菌细胞调节肽(BRP)。BRP是在昆虫的含菌细胞中表达的肽。这些基因首先在与共生体的掺入一致的发育时间点表达,并且在整个昆虫的生命中维持它们的含菌细胞特异性表达。在一些情况下,该BRP具有预测为信号肽的疏水氨基末端结构域。此外,一些BRP具有富含半胱氨酸的结构域。在一些情况下,该含菌细胞调节肽是含菌细胞特异性富含半胱氨酸(BCR)的蛋白质。含菌细胞调节肽具有在约40至150个之间的氨基酸的长度。在一些情况下,该含菌细胞调节肽具有在约45至约145、约50至约140、约55至约135、约60至约130、约65至约125、约70至约120、约75至约115、约80至约110、约85至约105、或其间任何范围的范围内的长度。BRP的非限制性实例及其活性列于表8中。
表8:含菌细胞调节肽的实例
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在一些情况下,该BRP改变寄宿于宿主的含菌细胞中一种或多种细菌的生长和/或活性。在一些情况下,该BRP可以被生物工程化以调节其生物活性(例如,增加、减少或调节)或指定其靶微生物。在一些情况下,该BRP是由细胞的翻译机制(例如核糖体等)产生的。在一些情况下,该BRP是化学合成的。在一些情况下,该BRP衍生自多肽前体。该多肽前体可以经历切割(例如,通过蛋白酶加工)以产生BRP本身的多肽。因此,在一些情况下,该BRP由前体多肽产生。在一些情况下,该BRP包括已经历翻译后修饰(例如切割,或添加一个或多个官能团)的多肽。
如本文所述的BRP的功能活性变体也可用于本文所述的组合物和方法中。在一些情况下,该BRP的变体例如在指定区域或整个序列上与本文所述的BRP或天然衍生的BRP的序列具有至少70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或99%的同一性。
可以在用于本文所述的任何用途的组合物中配制本文所述的BRP。本文披露的组合物可以包括任何数量或类型(例如,类别)的BRP,如至少约1种BRP、2、3、4、5、10、15、20、或更多种BRP中的任一者。组合物中每种BRP的合适的浓度取决于如功效、BRP的稳定性、不同BRP的数量、配制品和组合物的施用方法等因素。在一些情况下,液体组合物中每种BRP是从约0.1ng/mL至约100mg/mL。在一些情况下,固体组合物中每种BRP是从约0.1ng/g至约100mg/g。在一些情况下,其中该组合物包括至少两种类型的BRP,每种类型的BRP的浓度可以相同或不同。
包括如本文所述的BRP的调节剂可以按足以实现以下的量和时间与靶宿主接触:(a)达到靶宿主内BRP浓度的靶水平(例如,预定或阈值水平);(b)达到靶宿主肠内BRP浓度的靶水平(例如,预定或阈值水平);(c)达到靶宿主含菌细胞内BRP浓度的靶水平(例如,预定或阈值水平);(d)调节靶宿主中一种或多种微生物(例如内共生体)的水平或活性;或/和(e)调节靶宿主的适合度。
iii.小分子
许多种小分子(例如,抗生素或代谢物)可用于本文所述的组合物和方法中。在一些情况下,本文所述的任何小分子的有效浓度可以改变寄宿于宿主中的一种或多种微生物(如本文所述)的水平、活性或代谢,该改变导致该宿主的适合度提高。
包括如本文所述的小分子的调节剂可以按足以实现以下的量和时间与靶宿主接触:(a)达到靶宿主内小分子浓度的靶水平(例如,预定或阈值水平);(b)达到靶宿主肠内小分子浓度的靶水平(例如,预定或阈值水平);(c)达到靶宿主含菌细胞内小分子浓度的靶水平(例如,预定或阈值水平);(d)调节靶宿主中一种或多种微生物(例如内共生体)的水平或活性;或/和(e)调节靶宿主的适合度。
(a)抗生素
本文所述的调节剂可以包括抗生素。可以使用本领域已知的任何抗生素。抗生素通常根据其作用机制、化学结构或活性谱进行分类。
本文所述的抗生素可以靶向任何细菌的功能或生长过程,并且可以是抑细菌的(例如,减缓或阻止细菌生长)或杀细菌的(例如,杀死细菌)。在一些情况下,该抗生素是杀细菌抗生素。在一些情况下,该杀细菌抗生素是靶向细菌细胞壁的杀细菌抗生素(例如,青霉素和头孢菌素);靶向细胞膜的杀细菌抗生素(例如,多粘菌素);或者抑制必需细菌酶的杀细菌抗生素(例如,利福霉素、闰年霉素(lipiarmycins)、喹诺酮类和磺胺类)。在一些情况下,该杀细菌抗生素是氨基糖苷类。在一些情况下,该抗生素是抑细菌抗生素。在一些情况下,该抑细菌抗生素靶向蛋白质合成(例如,大环内酯类、林可胺类和四环素类)。本文使用的另外类的抗生素包括环脂肽(如达托霉素)、甘氨酰环素(如替加环素)、噁唑烷酮类(如利奈唑胺)、或闰年霉素(lipiarmycins)(如非达霉素)。抗生素的实例包括土霉素、强力霉素、利福平、环丙沙星、氨苄青霉素、和多粘菌素B。抗生素的其他非限制性实例见表9。
表9:抗生素的实例
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本文描述的抗生素可具有任何水平的靶特异性(例如,窄谱或广谱)。在一些情况下,该抗生素是窄谱抗生素,并且因此靶向特异性类型的细菌,如革兰氏阴性细菌或革兰氏阳性细菌。可替代地,该抗生素可以是靶向宽范围的细菌的广谱抗生素。
可以在用于本文所述的任何用途的组合物中配制本文所述的抗生素。本文披露的组合物可以包括任何数量或类型(例如,类别)的抗生素,如至少约1种抗生素、2、3、4、5、10、15、20、或更多种抗生素(例如,利福平和强力霉素的组合,或氨苄青霉素和利福平的组合)中的任一者。组合物中每种抗生素的合适的浓度取决于如功效、抗生素的稳定性、不同抗生素的数量、配制品和组合物的施用方法等因素。在一些情况下,其中该组合物包括至少两种类型的抗生素,每种类型的抗生素的浓度可以相同或不同。
包括如本文所述的抗生素的调节剂可以按足以实现以下的量和时间与靶宿主接触:(a)达到靶宿主内抗生素浓度的靶水平(例如,预定或阈值水平);(b)达到靶宿主肠内抗生素浓度的靶水平(例如,预定或阈值水平);(c)达到靶宿主含菌细胞内抗生素浓度的靶水平(例如,预定或阈值水平);(d)调节靶宿主中一种或多种微生物(例如内共生体)的水平或活性;或/和(e)调节靶宿主的适合度。
(b)次生代谢物
在一些情况下,本文所述的组合物和方法的调节剂包括次生代谢物。次生代谢物衍生自由生物产生的有机分子。次生代谢物可以充当(i)用于抗细菌、真菌、变形虫、植物、昆虫和大型动物的竞争剂;(ii)金属输送剂(metal transporting agent);(iii)微生物与植物、昆虫和高等动物之间共生的药剂;(iv)性激素;以及(v)区分效应器。次生代谢物的非限制性实例见表10。
表10:次生代谢物的实例
Figure BDA0002140302770001481
Figure BDA0002140302770001491
本文使用的次生代谢物可以包括来自任何已知的次生代谢物组的代谢物。例如,次生代谢物可分类为以下几组:生物碱类、萜类、类黄酮类、糖苷类、天然酚类(例如,棉酚乙酸)、二烯醛类(例如,反式-肉桂醛)、吩嗪类、联苯酚类和氧芴类、聚酮类、脂肪酸合酶肽类、非核糖体肽类、核糖体合成和翻译后修饰肽类、多酚类、多糖类(例如,壳聚糖)和生物聚合物。有关次生代谢物的深入审查,参见例如,Vining,Annu.Rev.Microbiol.[微生物学年鉴]44:395-427,1990。有用于本文所述的组合物和方法的次生代谢物包括改变内共生体(例如,原生内共生体或次生内共生体)、含菌细胞或细胞外共生体的天然功能的那些次生代谢物。在一些情况下,本文所述的一种或多种次生代谢物是从抗微生物化合物的高通量筛选(HTS)中分离的。例如,HTS筛选鉴定了49种抗细菌提取物,这些提取物对来自生长于一个特定区域的不同生态系统中的生物的39,000多种粗提取物中的革兰氏阳性细菌和革兰氏阴性细菌具有特异性。在一些情况下,该次生代谢物在含菌细胞内运输。
在一些情况下,小分子是维生素合成的抑制剂。在一些情况下,维生素合成抑制剂是维生素前体类似物。在某些情况下,维生素前体类似物是泛醇。
在一些情况下,小分子是氨基酸类似物。在某些情况下,氨基酸类似物是L-刀豆氨酸、D-精氨酸、D-缬氨酸、D-甲硫氨酸、D-苯丙氨酸、D-组氨酸、D-色氨酸、D-苏氨酸、D-亮氨酸、L-NG-硝基精氨酸或其组合。
在一些情况下,小分子是天然抗微生物化合物,如丙酸、乙酰丙酸、反式-肉桂醛、乳链菌肽或低分子量壳聚糖。
可以在用于本文所述的任何用途的组合物中配制本文所述的次生代谢物。本文披露的组合物可以包括任何数量或类型(例如,类别)的次生代谢物,如至少约1种次生代谢物、2、3、4、5、10、15、20、或更多种次生代谢物中的任一者。组合物中每种次生代谢物的合适的浓度取决于如功效、次生代谢物的稳定性、不同次生代谢物的数量、配制品和组合物的施用方法等因素。在一些情况下,其中该组合物包括至少两种类型的次生代谢物,每种类型的次生代谢物的浓度可以相同或不同。
包括如本文所述的次生代谢物的调节剂可以按足以实现以下的量和时间与靶宿主接触:(a)达到靶宿主内次生代谢物浓度的靶水平(例如,预定或阈值水平);(b)达到靶宿主肠内次生代谢物浓度的靶水平(例如,预定或阈值水平);(c)达到靶宿主含菌细胞内次生代谢物浓度的靶水平(例如,预定或阈值水平);(d)调节靶宿主中一种或多种微生物(例如内共生体)的水平或活性;或/和(e)调节靶宿主的适合度。
iv.细菌作为调节剂
在一些情况下,本文所述的调节剂包括一种或多种细菌。许多种细菌在本文所述的组合物和方法中是有用的。在一些情况下,该药剂是在宿主中内源发现的细菌物种。在一些情况下,该细菌调节剂是内共生细菌物种。可用作调节剂的细菌的非限制性实例包括具体实施方式的部分II中本文所述的所有细菌物种和表1中列出的那些细菌物种。例如,该调节剂可以是来自昆虫肠和/或血腔中存在的任何细菌门的细菌物种,包括γ变形菌门(Gammaproteobacteria)、α变形菌门(Alphaproteobacteria)、β变形菌门(Betaproteobacteria)、拟杆菌门(Bacteroidetes)、厚壁菌门(Firmicutes)(例如,乳杆菌(Bacillus)和芽孢杆菌(Bacillus)属物种)、梭菌属(Clostridia)、放线菌属(Actinomycetes)、螺旋体属(Spirochetes)、疣微菌门(Verrucomicrobia)、和放线菌门(Actinobacteria)。
在一些情况下,该调节剂是促进微生物多样性或以有利的方式改变该宿主的微生物区系的细菌。在一种情况下,可以提供细菌以促进昆虫中的微生物组发育。
本文所讨论的细菌调节剂可用于改变靶微生物的水平、活性或代谢,如在提高昆虫(如,蟋蟀、蚱蜢、或蝗虫)的适合度的部分所指示的。
在一些情况下,此类细菌调节剂是能够产生营养物(包括氨基酸(例如,甲硫氨酸))的细菌。该产营养物的细菌可以是天然存在的细菌,例如,对于该昆虫宿主是外源的天然存在的细菌。此类细菌可以分离自细菌群体,如在环境样品中发现的细菌群体。可以分离细菌,以相对于没有被给予产氨基酸细菌的宿主提高宿主中的氨基酸产量的方式产生一种或多种氨基酸。可以通过宿主中的细菌产生的氨基酸包括甲硫氨酸、丙氨酸、精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸、谷氨酸盐、甘氨酸、组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、丝氨酸、苏氨酸、色氨酸、酪氨酸、或缬氨酸。在某些情况下,该产氨基酸的细菌是产甲硫氨酸细菌。
在一些情况下,该产营养物的细菌(例如,产氨基酸的细菌,例如,产甲硫氨酸细菌)处于以下浓度:至少100,000个细胞/ml(例如,至少约100,000个细胞/ml、至少约150,000个细胞/ml、至少约200,000个细胞/ml、至少约250,000个细胞/ml、至少约300,000个细胞/ml、至少约350,000个细胞/ml、至少约400,000个细胞/ml、至少约450,000个细胞/ml、或至少约500,000个细胞/ml)。
实例1至实例4和实例8描述了如何可以鉴定产甲硫氨酸微生物,该产甲硫氨酸微生物然后可在昆虫宿主(如蟋蟀)中或在模式生物果蝇属(Drosophila)中用作调节剂以提高该宿主的适合度(例如,提高氨基酸含量(例如,甲硫氨酸含量)。例如,在某些情况下,在使用该宿主制造食物或饲料之前,宿主中的营养物含量提高了。
在一些情况下,此类细菌调节剂是能够降解如表12中列出的杀有害生物剂(包括杀昆虫剂)的细菌。此类杀昆虫剂包括新烟碱,如吡虫啉、或有机磷杀昆虫剂,如杀螟松。在一些情况下,该代谢杀有害生物剂的细菌处于以下浓度:至少100,000个细胞/ml(例如,至少约100,000个细胞/ml、至少约150,000个细胞/ml、至少约200,000个细胞/ml、至少约250,000个细胞/ml、至少约300,000个细胞/ml、至少约350,000个细胞/ml、至少约400,000个细胞/ml、至少约450,000个细胞/ml、或至少约500,000个细胞/ml)。
实例5和实例6描述了如何可以鉴定降解吡虫啉和杀螟松的微生物,该降解吡虫啉和杀螟松的微生物然后可在昆虫宿主(如蟋蟀)中用作调节剂,给予处理的昆虫宿主竞争优势。将此类降解杀有害生物剂的微生物(例如,降解吡虫啉或杀螟松的微生物)给予至昆虫宿主(如蜜蜂)被理解为被以下涵盖:改变寄宿于该宿主中一种或多种微生物的水平、活性或代谢。
v.对调节剂的修饰
(a)融合
本文所述的任何调节剂可以与另外的部分融合或连接。在一些情况下,该调节剂包括一种或多种另外的部分(例如,1种另外的部分、2、3、4、5、6、7、8、9、10、或更多种另外的部分)的融合。在一些情况下,该另外的部分是本文所述的调节剂(例如,肽、多肽、小分子、或抗生素)中的任一者。可替代地,该另外的部分本身可以不充当调节剂,而是可以起辅助作用。例如,另外的部分可以帮助调节剂在宿主中的靶位点(例如,宿主肠或宿主含菌细胞)处或在寄宿于该宿主(例如,蟋蟀、蚱蜢、或蝗虫)中的靶微生物处接近、结合或变得活化。
在一些情况下,该另外的部分可以帮助调节剂渗透寄宿于宿主中的靶宿主细胞或靶微生物。例如,该另外的部分可以包括细胞穿透肽。细胞穿透肽(CPP)可以是衍生自以下的天然序列:蛋白质;通过两个天然序列的融合形成的嵌合肽;或合成的CPP,它们是基于结构-活性研究的合成设计的序列。在一些情况下,CPP具有普遍穿过具有有限毒性的细胞膜(例如,原核细胞膜和真核细胞膜)的能力。此外,CPP可以具有经由能量依赖性和/或独立机制,同时不需要特异性受体的手性识别而穿过细胞膜的能力。CPP可以与本文所述的任何调节剂结合。例如,CPP可以与抗微生物肽(AMP)(例如,蝎肽,例如与细胞穿透肽融合的UY192(例如,YGRKKRRQRRRFLSTIWNGIKGLLFAM;SEQ ID NO:226))结合。CPP的非限制性实例列于表11中。
表11:细胞穿透肽(CPP)的实例
Figure BDA0002140302770001541
在其他情况下,该另外的部分帮助调节剂结合寄宿于宿主的靶微生物(例如,真菌或细菌)。该另外的部分可以包括一个或多个靶向结构域。在一些情况下,该靶向结构域可以将调节剂靶向寄宿于宿主肠中的一种或多种微生物(例如,细菌或真菌)。在一些情况下,该靶向结构域可以将调节剂靶向宿主的特异性区域(例如,宿主肠或含菌细胞)以接近通常存在于所述宿主区域中的微生物。例如,该靶向结构域可以将调节剂靶向宿主的前肠、中肠或后肠。在其他情况下,该靶向结构域可以将调节剂靶向宿主中的含菌细胞和/或寄宿于宿主含菌细胞中的一种或多种特异性细菌。
(b)前结构域(Pre-domain或Pro-domain)
在一些情况下,该调节剂可以包括前氨基酸序列(pre-amino acid sequence或pro-amino acid sequence)。例如,该调节剂可以是可以通过前序列(pre-sequence或pro-sequence)的切割或翻译后修饰来激活的无活性蛋白质或肽。在一些情况下,该调节剂是用失活的前序列(pre-sequence或pro-sequence)工程化的。例如,该前序列(pre-sequence或pro-sequence)可以模糊调节剂上的激活位点(例如受体结合位点),或可以诱导调节剂的构象变化。因此,在切割前序列(pre-sequence或pro-sequence)后,该调节剂被激活。
可替代地,该调节剂可以包括前小分子(pre-small molecule或pro-smallmolecule),例如抗生素。该调节剂可以是可以在宿主内的靶环境中被激活的本文所述的无活性小分子。例如,该小分子可在宿主肠中达到一定pH时被激活。例如,该靶向结构域可以是与本文所述的调节剂(例如AMP,例如蝎肽,如Uy192)结合的雪钟花(Galanthus nivalis)植物凝集素(lectin)或凝集素(agglutinin)(GNA)。
(c)接头
在调节剂与另外的部分连接的情况下,该调节剂可以进一步包括接头。例如,该接头可以是化学键,例如一个或多个共价键或非共价键。在一些情况下,该接头可以是肽接头(例如,2、3、4、5、6、8、10、12、14、16、20、25、30、35、40、或更多个氨基酸长)。该接头可以包括本文所述的任何柔性、刚性或可裂解的接头。
柔性肽接头可以包括本领域常用的任何接头,包括具有主要具有Gly和Ser残基的序列的接头(“GS”接头)。柔性接头可以有用于连接需要一定程度的移动或相互作用的结构域,并且可以包括小的、非极性的(例如Gly)或极性的(例如Ser或Thr)氨基酸。
可替代地,肽接头可以是刚性接头。刚性接头有用于保持各部分之间的固定距离并维持它们的独立功能。当结构域的空间分离对于保持融合中一种或多种组分的稳定性或生物活性至关重要时,刚性接头也可以是有用的。例如,刚性接头可以具有α螺旋结构或富含脯氨酸的序列(Pro-rich sequence)、(XP)n,其中X表示任何氨基酸,优选Ala、Lys或Glu。
在又其他情况下,肽接头可以是可裂解的接头。在一些情况下,接头可以在特异性条件下(例如在还原剂或蛋白酶的存在下)裂解。体内可裂解接头可利用二硫键的可逆性质。一个实例包括两个Cys残基之间的凝血酶敏感性序列(例如,PRS)。CPRSC的体外凝血酶处理导致凝血酶敏感性序列的切割,而可逆的二硫键保持完整。此类接头是已知的并且描述于,例如,Chen等人,Adv.Drug Deliv.Rev.[先进药物输送评论]65(10):1357-1369,2013。融合中接头的切割也可以通过在宿主或寄宿于宿主中的微生物的特异性细胞或组织的条件下体内表达的蛋白酶进行。在一些情况下,接头的切割可在到达靶位点或细胞时释放游离的功能调节剂。
本文所述的融合可以可替代地通过连接分子连接,这些连接分子包括疏水接头,如带负电荷的磺酸酯基团;脂质,如聚(--CH2--)烃链,如聚乙二醇(PEG)基团,其不饱和变体,其羟基化变体,其酰胺化或其他含N的变体,非碳接头;碳水化合物接头;磷酸二酯接头,或能够共价连接两个或多个分子(例如两种调节剂)的其他分子。可以使用非共价接头(如调节剂与之连接的疏水性脂质小球)例如通过调节剂的疏水区域或调节剂的疏水延伸,如富含亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、或者也可以是丙氨酸、苯丙氨酸、或甚至酪氨酸、甲硫氨酸、甘氨酸的一系列残基或其他疏水残基。该调节剂可以使用基于电荷的化学连接,使得调节剂的带正电荷的部分与另一种调节剂或另外的部分的带负电荷的部分连接。
IV.配制品和组合物
可以将本文所述的组合物以纯的形式(例如,组合物仅含有调节剂)配制或与一种或多种另外的药剂(如赋形剂、递送媒介物、载体、稀释剂、稳定剂等)一起配制以促进组合物的施用或递送。合适的赋形剂和稀释剂的实例包括但不限于:乳糖、右旋糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露醇、淀粉、阿拉伯树胶、磷酸钙、藻酸盐、黄蓍胶、明胶、硅酸钙、微晶纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、纤维素、水、盐水溶液、糖浆、甲基纤维素、羟基苯甲酸甲酯和羟基苯甲酸丙酯、滑石、硬脂酸镁和矿物油。
在一些情况下,该组合物包括递送媒介物或载体。在一些情况下,该递送媒介物包括赋形剂。示例性赋形剂包括但不限于:固体或液体载体材料、溶剂、稳定剂、缓释赋形剂、色素和表面活性物质(表面活性剂)。在一些情况下,该递送媒介物是稳定性媒介物。在一些情况下,该稳定性媒介物包括稳定赋形剂。示例性稳定赋形剂包括但不限于:环氧化植物油、消泡剂(例如硅油)、防腐剂、粘度调节剂、粘合剂和增粘剂。在一些情况下,该稳定性媒介物是适用于调节剂的缓冲液。在一些情况下,将组合物微囊包封在聚合物珠递送媒介物中。在一些情况下,该稳定性媒介物保护调节剂免受UV和/或酸性条件的影响。在一些情况下,该递送媒介物含有pH缓冲液。在一些情况下,将组合物配制为具有在约4.5至约9.0的范围内的pH,包括例如范围在5.0至约8.0、约6.5至约7.5、或约6.5至约7.0中的任一者的pH。
取决于预期的目的和当时环境,可以将组合物配制为可乳化的浓缩物、悬浮浓缩物、可直接喷雾的溶液或可稀释的溶液、可涂覆的膏剂、稀释的乳液、喷雾粉剂、可溶性粉剂、可分散性粉剂、可湿性粉剂、尘剂、粒剂、聚合物质中的包封物、微胶囊、泡沫、气溶胶、二氧化碳气体制剂、片剂、树脂制剂、纸制剂、非织造织物制剂、或针织织物制剂或机织织物制剂。在一些情况下,该组合物是液体。在一些情况下,该组合物是固体。在一些情况下,该组合物是气溶胶,如在加压气溶胶罐中。在一些情况下,该组合物存在于有害生物的废物(如粪便)中。在一些情况下,该组合物存在于活有害生物中或活有害生物上。
在一些情况下,该递送媒介物是宿主的食物或水。在其他情况下,该递送媒介物是宿主的食物来源。在一些情况下,该递送媒介物是宿主的食物诱饵。在一些情况下,该组合物是被宿主食用的可食用试剂。在一些情况下,该组合物通过宿主被递送至第二宿主,并被第二宿主食用。在一些情况下,该组合物被宿主或第二宿主食用,并且该组合物经由宿主或第二宿主的废物(如粪便)释放到宿主或第二宿主的周围。在一些情况下,该调节剂包括于旨在由宿主食用或携带回其集落的食物诱饵中。
在一些情况下,该调节剂可占该组合物的约0.1%至约100%,如约0.01%至约100%、约1%至约99.9%、约0.1%至约10%、约1%至约25%、约10%至约50%、约50%至约99%、或约0.1%至约90%的活性成分(如噬菌体、溶素或细菌素)中的任一者。在一些情况下,该组合物包括0.1%、0.5%、1%、5%、10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%或更多活性成分(如噬菌体、溶素或细菌素)中至少任一者。在一些情况下,优选浓缩剂作为商业产品,最终使用者通常使用稀释药剂(具有显著较低浓度的活性成分)。
本文所述的任何配制品能以诱饵、蚊香、电蚊香片、烟制剂、熏剂或片剂的形式使用。
i.液体配制品
本文提供的组合物可以是液体配制品的形式。液体配制品通常与水混合,但在一些情况下可与作物油、柴油燃料、煤油或其他轻油一起用作载体。活性成分的量的范围通常为按重量计从约0.5%至约80%。
可乳化的浓缩物配制品可含有液体活性成分,一种或多种基于石油的溶剂,和允许配制品与水混合形成乳液的药剂。此类浓缩物可用于农业、观赏植物和草坪、林业、建筑业、食品加工、畜牧业、和公共卫生有害生物配制品。这些可适用于从小型便携式喷雾器到液压喷雾器、小容量地面喷雾器、弥雾器弥雾机和小容量飞机喷雾器的施用设备。一些活性成分易溶于液体载体中。当与载体混合时,它们形成不会沉淀或分离的溶液,例如均相溶液。这些类型的配制品可以包括活性成分、载体和一种或多种其他成分。溶液可用于室内和室外任何类型的喷雾器。
在一些情况下,可以将该组合物可以配制为逆乳液。逆乳液是分散在油载体中的水溶性活性成分。逆乳液需要乳化剂,其允许活性成分与大量基于石油的载体(通常为燃料油)混合。逆乳液有助于减少漂移。对于其他配制品,当水滴在到达靶表面之前开始蒸发时会产生一些喷雾漂移;结果,液滴变得非常小且重量轻。由于油的蒸发速度比水慢,因此逆乳液液滴收缩较少,并且更多的活性成分到达靶。油进一步有助于减少径流并改善抗雨性。它还通过改善表面覆盖和吸收作为粘展剂。由于液滴相对较大且较重,因此难以在叶子的下侧进行彻底覆盖。最常沿着路域(rights-of-way)(其中漂移到易受影响的非靶区域)使用的逆乳液可能是一个问题。
可流动或液体配制品结合了可乳化浓缩物和可湿性粉剂的许多特征。当活性成分是不溶于水或油的固体时,制造商使用这些配制品。将浸渍在如黏土的物质上的活性成分研磨成非常细的粉剂。然后将粉剂悬浮在少量液体中。得到的液体产品很稠。可流动物和液体具有可乳化浓缩物的许多特征,并且它们具有类似的缺点。它们需要适度的搅拌以使它们保持悬浮并留下可见的残留物,类似于可湿性粉剂中的那些。
可流动物/液体易于处理和施用。因为它们是液体,所以它们会溢出和溅出。它们含有固体颗粒,因此会导致喷嘴和泵的磨损。可流动物和液体悬浮液在其容器中沉淀。由于可流动物和液体配制品倾向于沉淀,因此在五加仑或更少的容器中包装使得更容易再混合。
气溶胶配制品含有一种或多种活性成分和溶剂。大多数气溶胶含有低百分比的活性成分。有两种类型的气溶胶配制品-通常可在加压密封容器中使用的即用型,和用于电动或汽油动力气溶胶发生器(将配制品释放为烟或雾)的那些产品。
即用型气溶胶配制品通常是小型的独立单元,在喷嘴阀被触发时释放配制品。在压力下通过惰性气体驱动配制品穿过细孔,产生细小液滴。这些产品用于温室、建筑物内的小区域或小范围的室外区域。具有五至5磅的活性成分的商业模型通常是可再填充的。
烟或雾气溶胶配制品不在压力条件下。它们用于使用快速旋转盘或加热表面将液体配制品破碎成细水雾或雾(气溶胶)的机器中。
ii.干配制品或固体配制品
干配制品可分为两种类型:即用型和必须与水混合以作为喷雾施用的浓缩物。大多数尘剂配制品都可以即刻使用,并且含有低百分比的活性成分(按重量计小于约10%),加上由滑石、白垩、黏土、坚果壳或火山灰制成的非常细的干惰性载体。单个尘剂颗粒的大小各不相同。一些尘剂配制品是浓缩物,并且含有高百分比的活性成分。在施用前将它们与干惰性载体混合。尘剂总是干燥使用,并且很容易漂移到非靶位点。
iii.粒剂或丸剂配制品
在一些情况下,将该组合物配制为粒剂。粒剂配制品类似于尘剂配制品,除了粒剂颗粒更大更重。粗颗粒可以由如黏土、玉米芯或胡桃壳之类的材料制成。活性成分涂覆在粒剂外面或被吸收进其中。活性成分的量可以相对较低,通常范围为按重量计从约0.5%至约15%。粒剂配制品最常用于施用于土壤、生活在土壤中的昆虫、或通过根吸收到植物中。粒剂配制品有时通过飞机或直升机施用,以最小化漂移或以渗透茂密的植被。一旦施用,粒剂可缓慢释放活性成分。一些粒剂需要土壤水分来释放活性成分。粒剂配制品也用于控制幼虫蚊子和其他水生有害生物。粒剂用于农业、建筑业、观赏植物、草坪、水生动物、道路和公共卫生(咬虫)有害生物控制操作。
在一些情况下,将该组合物配制为丸剂。大多数丸剂配制品与粒剂配制品非常相似;这些术语可互换使用。然而,在丸剂配制品中,所有颗粒具有相同的重量和形状。颗粒的均匀性允许与精密施用设备一起使用。
iv.粉剂
在一些情况下,将该组合物配制为粉剂。在一些情况下,将该组合物配制为可湿性粉剂。可湿性粉剂是干燥的,精细研磨的配制品,看起来像尘剂。它们通常必须与水混合用于作为喷雾施用。然而,一些产品可以作为尘剂或可湿性粉剂施用-选择取决于上涂装置。可湿性粉剂含有按重量计约1%至约95%的活性成分;在一些情况下超过约50%。这些颗粒不溶于水。它们很快沉淀,除非经常搅拌以使其悬浮。它们可用于大多数有害生物问题,并且也可用于大多数可以搅拌的喷雾设备。可湿性粉剂具有优异的残留活性。由于它们的物理特性,大多数配制品保留在经处理的多孔材料(例如混凝土)、石膏和未经处理的木材的表面上。在此类情况下,只有水渗透材料。
在一些情况下,将该组合物配制为可溶性粉剂。可溶性粉剂配制品看起来像可湿性粉剂。然而,当与水混合时,可溶性粉剂容易溶解并形成真溶液。将它们彻底混合后,不需要另外的搅拌。可溶性粉剂中活性成分的量通常范围为按重量计从约15%至约95%,在一些情况下超过约50%。可溶性粉剂具有可湿性粉剂的所有优点,并且除了混合期间的吸入危害外,不具有可湿性粉剂的任何缺点。
在一些情况下,将该组合物配制为水可分散性粒剂。水可分散性粒剂,也称为干可流动物,就像可湿性粉剂(除了不是尘剂样外),它们被配制为易于测量的粒剂。水可分散性粒剂必须与水混合才能施用。一旦进入水中,粒剂就会分解成类似于可湿性粉剂的细颗粒。该配制品需要恒定搅拌以使其悬浮在水中。活性成分的百分比很高,通常按重量计高达90%。水可分散性粒剂(除了它们更容易测量和混合)具有许多与可湿性粉剂相同的优点和缺点。由于尘剂较少,因此在处理期间对上涂装置的吸入危害较小。
v.诱饵
在一些情况下,该组合物包括诱饵。诱饵可以处于任何合适的形式,如固体、膏剂、丸剂或粉剂形式。诱饵也可以被宿主带回到所述宿主的群体(例如,集落或蜂巢)。然后诱饵可以充当该集落的其他成员的食物来源,从而为大量宿主和潜在的整个宿主集落提供有效的调节剂。
诱饵可以提供于合适的“壳体”或“捕获器”中。此类壳体和捕获器是可商购的,并且现有的捕获器可以被调适成包括本文所述的组合物。壳体或捕获器可以是例如盒形的,并且可以在预成型条件下提供,或者可以例如由可折叠纸板形成。用于壳体或捕获器的合适材料包括塑料和纸板,特别是瓦楞纸板。捕获器的内表面可以内衬有粘性物质,以限制宿主一旦在捕获器内的移动。壳体或捕获器可以内部含有合适的槽,它可以将诱饵保持在适当位置。捕获器与壳体是有区别的,因为宿主在进入后不能容易地离开捕获器,而壳体充当“进食站”,其为宿主提供优选的环境,在该环境中它们可以进食并且远离捕食者而感到安全。
vi.引诱剂
在一些情况下,该组合物包括引诱剂(例如,化学引诱剂)。引诱剂可以将成虫宿主或未成熟宿主(例如,幼虫)吸引到组合物的附近。引诱剂包括信息素,一种由动物(尤其是昆虫)分泌的化学物质,其影响同一物种的其他个体的行为或发育。其他引诱剂包括糖和蛋白水解产物糖浆、酵母和腐肉。引诱剂还可以与活性成分组合并喷雾到处理区域中的叶子或其他物品上。
已知各种引诱剂影响宿主行为,例如宿主对食物、产卵或交配地点或配偶的搜索。可用于本文所述方法和组合物的引诱剂包括,例如,丁香酚、丙酸苯乙酯、乙基二甲基异丁基环丙烷羧酸酯、丙基苯并二噁烷羧酸酯、顺式-7,8-环氧-2-甲基十八烷、反式-8、反式-0-十二碳二烯醇、顺式-9-十四烯醛(具有顺式-11-十六烯醛)、反式-11-十四烯醛、顺式-11-十六烯醛、(Z)-11,12-十六碳二烯醛、顺式-7-十二烯基乙酸酯、顺式-8-十二烯基乙酸酯、顺式-9-十二烯基乙酸酯、顺式-9-十四碳烯基乙酸酯、顺式-11-十四碳烯基乙酸酯、反式-11-十四碳烯基乙酸酯(具有顺式-11)、顺式-9、反式-11-十四碳二烯基乙酸酯(具有顺式-9、反式-12)、顺式-9、反式-12-十四碳二烯基乙酸酯、顺式-7、顺式-11-十六碳双烯乙酸酯(具有顺式-7、反式-11)、顺式-3、顺式-13-十八碳二烯基乙酸酯、反式-3、顺式-13-十八碳二烯基乙酸酯、茴香脑和异戊基水杨酸盐。
除化学引诱剂之外的其他方法也可用于吸引昆虫,包括各种波长或颜色的光。
vii.纳米胶囊/微胶囊/脂质体
在一些情况下,将组合物以微胶囊化配制品提供。将微胶囊化配制品与水混合并以与其他可喷雾配制品相同的方式喷雾。喷雾后,塑料涂层破裂并缓慢释放活性成分。
viii.载体
可配制本文所述的任何组合物以包括本文所述的调节剂和惰性载体。此类载体可以是固体载体、液体载体、凝胶载体和/或气体载体。在某些情况下,该载体可以是种子涂层。种子涂层是任何非天然存在的配制品,其全部或部分地粘附于种子表面。该配制品可以进一步包含佐剂或表面活性剂。该配制品还可以包含一种或多种调节剂以扩大作用光谱。
用于配制品的固体载体包括黏土(例如高岭土、硅藻土、膨润土、Fubasami黏土、酸性黏土等)、合成水合氧化硅、滑石、陶瓷、其他无机矿物质(例如,绢云母、石英、硫磺、活性炭、碳酸钙、水合二氧化硅等)、可以升华并在室温下呈固体形式的物质(例如,2,4,6-三异丙基-1,3,5-三氧杂环己烷、萘、对二氯苯、樟脑(camphor)、刚烷等)的细粉剂或粒剂;羊毛;蚕丝;棉花;大麻;纸浆;合成树脂(例如,聚乙烯树脂,如低密度聚乙烯、直低密度聚乙烯和高密度聚乙烯;乙烯-乙烯酯共聚物,如乙烯-乙酸乙烯酯共聚物;乙烯-甲基丙烯酸酯共聚物,如乙烯-甲基丙烯酸甲酯共聚物和乙烯-甲基丙烯酸乙酯共聚物;乙烯-丙烯酸酯共聚物,如乙烯-丙烯酸甲酯共聚物和乙烯-丙烯酸乙酯共聚物;乙烯-乙烯基羧酸共聚物,如乙烯-丙烯酸共聚物;乙烯-四环十二烯共聚物;聚丙烯树脂,如丙烯均聚物和丙烯-乙烯共聚物;聚-4-甲基戊烯-1、聚丁烯-1、聚丁二烯、聚苯乙烯;丙烯腈-苯乙烯树脂;苯乙烯类弹性体,如丙烯腈-丁二烯-苯乙烯树脂、苯乙烯-共轭二烯嵌段共聚物、和苯乙烯-共轭二烯嵌段共聚物氢化物;氟树脂;丙烯酸树脂,如聚(甲基丙烯酸甲酯);聚酰胺树脂,如尼龙6和尼龙66;聚酯树脂,如聚乙烯对苯二甲酸酯、聚萘二甲酸乙二醇酯、聚丁烯对苯二甲酸酯、和聚对苯二甲酸亚环己基二亚甲酯;聚碳酸酯、聚缩醛、聚丙烯酰砜、聚芳酯、羟基苯甲酸聚酯、聚醚酰亚胺、聚酯碳酸酯、聚苯醚树脂、聚氯乙烯、聚偏二氯乙烯、聚氨酯、和有孔树脂(如发泡聚氨酯、发泡聚丙烯、或发泡乙烯等))、玻璃、金属、陶瓷、纤维、布料、针织物、片材、纸张、纱线、泡沫、有孔物质和复丝。
液体载体可以包括,例如,芳香族或脂肪族碳氢化合物(例如,二甲苯、甲苯、烷基萘、苯基二甲苯基乙烷、煤油、瓦斯油、己烷、环己烷等)、卤代烃(例如,氯苯、二氯甲烷、二氯乙烷、三氯乙烷等)、醇类(例如,甲醇、乙醇、异丙醇、丁醇、己醇、苄基醇、乙二醇等)、醚类(例如,乙醚、乙二醇二甲醚、二甘醇单甲醚、二甘醇单乙醚、丙二醇单甲醚、四氢呋喃、二噁烷等)、酯类(例如,乙酸乙酯、乙酸丁酯等)、酮类(例如,丙酮、甲基乙基酮、甲基异丁基酮、环己酮等)、腈类(例如,乙腈、异丁腈等)、亚砜(例如,二甲亚砜等)、酰胺(例如,N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺)、环状亚胺(例如N-甲基吡咯烷酮)、亚烷基碳酸酯(例如,碳酸丙烯酯等)、蔬菜油(例如,大豆油、棉花籽油等)、植物精油(例如,橙油、海索油、柠檬油等)、或水。
气体载体可以包括,例如丁烷气、氟里昂气、液化石油气(LPG)、二甲醚和二氧化碳气体。
ix.佐剂
在一些情况下,本文提供的组合物可以包括佐剂。佐剂是不具有活性的化学物质。将佐剂在配制品中预混合或添加至喷雾罐中以改善混合或改善施用或提高性能。它们广泛用于为叶子施用而设计的产品中。佐剂可用于为特异性需要而定制配制品并补偿局部条件。佐剂可以设计用于执行特异性功能,包括润湿、涂抹、粘附、减少蒸发、减少挥发、缓冲、乳化、分散、减少喷雾漂移和减少发泡。没有单一佐剂可以执行所有这些功能,但是通常可以组合相容的佐剂以同时执行多种功能。
包含于配制品中的佐剂的非限制性实例包括:粘合剂、分散剂和稳定剂,具体为例如,酪蛋白、明胶、多糖(例如,淀粉、阿拉伯树胶、纤维素衍生物、海藻酸等)、木质素衍生物、膨润土、糖、合成水溶性聚合物(例如,聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、聚丙烯酸等)、PAP(酸性异丙基磷酸酯)、BHT(2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚)、BHA(2-叔丁基-4-甲氧基苯酚和3-叔丁基-4-甲氧基苯酚的混合物)、植物油、矿物油、脂肪酸和脂肪酸酯。
x.表面活性剂
在一些情况下,本文提供的组合物包括表面活性剂。表面活性剂,也称为润湿剂和涂布剂,在物理上改变喷雾液滴的表面张力。为了使配制品能够正常发挥其功能,喷雾液滴必须能够润湿叶子并均匀地散布在叶上。表面活性剂扩大了配制品的覆盖面积,从而增加了有害生物对化学物质的暴露。当将配制品施用于蜡质或多毛的叶时,表面活性剂特别重要。如果没有适当的润湿和涂布,喷雾液滴通常会流失或无法充分覆盖叶表面。然而,过多的表面活性剂会导致过多的径流并降低功效。
表面活性剂按其电离或分裂成称为离子的带电荷的原子或分子的方式分类。带负电荷的表面活性剂是阴离子的。带正电荷的表面活性剂是阳离子的,而不带电荷的表面活性剂是非离子的。在非离子表面活性剂存在下的配制品活性可以与在阳离子或阴离子表面活性剂存在下的活性完全不同。选择错误的表面活性剂会降低杀有害生物剂产品的功效并损害靶植物。当与接触杀有害生物剂(通过直接接触而不是系统吸收来控制有害生物的杀有害生物剂)一起使用时,阴离子表面活性剂是最有效的。阳离子表面活性剂绝不能用作独立的表面活性剂,因为它们通常具有植物毒性。
通常与系统杀有害生物剂一起使用的非离子表面活性剂有助于杀有害生物剂喷雾渗透植物角质层。非离子表面活性剂与大多数杀有害生物剂相容,并且大多数需要表面活性剂的EPA注册的杀有害生物剂推荐使用非离子型。佐剂包括但不限于黏着剂、增量剂、植物渗透剂、相容剂、缓冲液或pH改性剂、漂移控制添加剂、消泡剂、和增稠剂。
本文所述的组合物中包括的表面活性剂的非限制性实例包括烷基硫酸酯盐、烷基磺酸酯、烷基芳基磺酸酯、烷基芳基醚及其聚氧乙烯化产物、聚乙二醇醚、多元醇酯和糖醇衍生物。
xi.组合
在配制品和由这些配制品制备的使用形式中,调节剂可以处于含有其他活性化合物(例如杀有害生物剂(例如杀昆虫剂、杀菌剂、杀螨剂、杀线虫剂、杀软体动物剂或杀真菌剂;参见例如,列于表12中的杀有害生物剂)、引诱剂、生长调节物质或除草剂)的混合物中。如本文所用的,术语“杀有害生物剂”是指旨在用于预防、破坏、抵制或减轻任何有害生物的任何物质或物质的混合物。杀有害生物剂可以是用于对抗有害生物(包括与人竞争食物、破坏财产、传播疾病或是令人讨厌的昆虫、病原体、杂草和微生物)的化学物质或生物制剂。术语“杀有害生物剂”可以进一步涵盖其他生物活性分子,如抗生素、抗病毒杀有害生物剂、抗真菌剂、抗蠕虫剂、营养物、花粉、蔗糖和/或使昆虫运动减弱或减缓的药剂。
在将调节剂施用于植物的情况下,也可以使用含有其他已知化合物(例如除草剂、肥料、生长调节剂、安全剂、化学信息素)或用于改善植物特性的药剂的混合物。
V.递送
本文所述的宿主能以允许将组合物递送或给予至昆虫的任何合适方式而暴露于本文所述的任何组合物。调节剂可以单独递送或与其他活性或非活性物质组合递送,并且可以通过例如喷雾、显微注射、通过植物、倾倒、浸渍,以配制以递送有效浓度的调节剂的浓缩液体、凝胶、溶液、悬浮液、喷雾、粉剂、丸剂、块剂、砖剂等形式施用。施用本文所述的组合物的量和位置通常取决于宿主的习性、宿主微生物可被调节剂靶向的生命周期阶段、将施用的位置、以及调节剂的物理和功能特征。本文所述的调节剂可通过经口摄取给予至昆虫,但也可通过允许穿透角质层或穿透昆虫呼吸系统的方式给予。
在一些情况下,可以用包括调节剂的溶液简单地“浸泡”或“喷雾”昆虫。可替代地,调节剂可以与昆虫的食物组分(例如,可食用组分)连接以便于递送和/或为了增加昆虫对调节剂的摄取。用于经口引入的方法包括,例如将调节剂与昆虫的食物直接混合,将调节剂喷雾在昆虫的生境或田地中,以及工程化方法,其中将用作食物的物种工程化以表达调节剂,然后向有待被影响的昆虫饲喂该物种。在一些情况下,例如,该调节剂组合物可以掺入昆虫的饮食中或覆盖在昆虫的饮食的顶部。例如,可以将该调节剂组合物喷雾到昆虫栖息的作物田地上。
在一些情况下,通过例如背包喷雾、空中喷雾、作物喷雾/尘剂等将组合物直接喷雾到植物(例如作物)上。在将调节剂递送至植物的情况下,接受调节剂的植物可以处于植物生长的任何阶段。例如,配制的调节剂可以在植物生长的早期阶段作为种子涂层或根处理施用,或者在作物周期的后期作为总植物处理施用。在一些情况下,该调节剂可以作为局部制剂施用于植物,使得宿主昆虫在摄取或以其他方式与植物接触时与植物相互作用。
此外,可以将调节剂(例如,在植物生长的土壤中,或在用于浇灌植物的水中)作为通过植物的组织(例如茎或叶)或动物宿主而吸收和分布的内吸剂(systemic agent)施用,使得其上进食的昆虫将获得有效剂量的调节剂。在一些情况下,可以对植物或食物生物进行遗传转化以表达调节剂,使得以植物或饵料生物为食的宿主摄取调节剂。
延迟或持续释放也可以通过将调节剂或含有一种或多种调节剂的组合物涂覆有可溶解或生物可侵蚀涂层(例如明胶)(该涂层在使用环境中溶解或侵蚀,以使得该调节剂可用)或通过将药剂分散在可溶解或可侵蚀的基质中来实现。此类持续释放和/或分配方式装置可有利地用于在特异性宿主生境中始终维持本文所述的一种或多种调节剂的有效浓度。
调节剂也可以掺入昆虫生长、生活、繁殖、进食或侵染的培养基中。例如,调节剂可以掺入食物容器、进食站、保护性包装或蜂巢中。对于一些施用,该调节剂可以与固体支持物结合,用于以粉剂形式或于“捕获器”或“进食站”中施用。例如,对于其中组合物用于捕获器或作为特定宿主昆虫的诱饵的施用,组合物也可以与固体支持物结合或包封在定时释放材料中。例如,可以通过向该昆虫生长、生活、繁殖或进食的至少一个生境中递送该组合物,给予本文所述的组合物。
VI.筛选
本文包括了用于鉴定该调节剂的筛选测定,其中该调节剂有效改变宿主的微生物区系并且从而提高了宿主适合度(例如,昆虫适合度)。例如,筛选测定可以用于鉴定一种或多种调节剂,该一种或多种调节剂靶向具体的微生物和/或具体的宿主。此外,筛选测定可以用于鉴定具有增强的功能性的一种或多种微生物。例如,筛选测定可以有效分离具有增强的能力的一种或多种微生物,该能力是代谢(例如降解)杀有害生物剂(例如,杀昆虫剂,例如,新烟碱)或植物化感物质(例如,咖啡因、大豆半胱氨酸蛋白酶抑制剂N、单萜类、二萜酸、或酚类化合物)。分离的微生物在宿主中的递送和定殖可以增加该宿主对杀有害生物剂或植物化感物质的抗性,由此增加宿主适合度。对于分离具有在本文所述的宿主中的任一种中增强的定殖能力的微生物,这些方法也是有用的。
例如,为了筛选提高宿主对杀有害生物剂抗性的微生物,可以使用包括微生物(例如,细菌)和高浓度的杀有害生物剂(例如,表12中列出的杀有害生物剂或本领域已知的杀有害生物剂,例如新烟碱)的初始培养物。在一些情况下,能以富集杀有害生物剂的环境样品(例如,土壤样品)形式提供杀有害生物剂。可替代地,能以纯的形式或与其他载体组合提供杀有害生物剂(例如,表12中列出的杀有害生物剂)。此外,一种或多种微生物分离物可直接接种在培养基(例如,从实验室菌株中)或可以是包括一种或多种微生物物种的环境样品。该生长培养基可以是液体或固体的。在一些情况下,感兴趣的杀有害生物剂是培养基中微生物的唯一碳源或氮源。该培养物可以进行任何次数的传代培养(例如,和高水平的杀有害生物剂一起接种到新鲜的培养基中)以富集和/或分离能够代谢杀有害生物剂的微生物菌株(例如,细菌菌株)。可以使用本领域已知的任何方法来评估初始培养物或传代培养物,以测试(例如,使用HPLC)样品中杀有害生物剂水平的改变(例如,降低)。可以分离降低杀有害生物剂(例如,表12中列出的杀有害生物剂或本领域已知的杀有害生物剂,例如新烟碱)的浓度的分离物在本文所述的任何方法或组合物中用作调节剂。
该方法可用于进一步选择具有增强的在宿主(例如,昆虫)中定殖和存活的能力的本文所述的微生物,包括从筛选测定中分离的那些。例如,宿主可以接种细菌分离物(例如,具有降解杀有害生物剂的能力的细菌分离物)。然后可以定期测试该宿主中细菌分离物的存在(例如,通过培养或从该宿主中分离的肠中的16s RNA)。可以分离在宿主(例如,昆虫的中肠)中存活的细菌分离物用作本文所述的任何方法或组合物中的调节剂。
表12.杀有害生物剂
Figure BDA0002140302770001711
Figure BDA0002140302770001721
Figure BDA0002140302770001731
实例
以下是本发明的方法的实例。应理解,鉴于以上提供的一般性描述,可以实践各种其他的实施例。
实例1:产生天然微生物的文库
此实例证明了从土壤中分离天然产生氨基酸(甲硫氨酸)的细菌。
用于分离微生物的培养基是淀粉-酪蛋白-硝酸盐琼脂(淀粉,10.0g;酪蛋白,0.003g;KNO3,0.02g;NaCl,0.02g;MgSO4,0.5mg;CaCO3,0.2mg;FeSO4,0.1mg;琼脂,12.0g;H2O,1L;pH 7.0)(Kuster和Williams,1964)。将每个环境土壤样品(1.0g)悬浮在9ml无菌水中,并且将1ml悬浮液在无菌蒸馏水中连续稀释十倍。将一毫升10-5稀释液接种在琼脂培养基上并且在30℃孵育7天。在这一阶段结束时,观察板上的生长。挑选白色的离散和革质的集落并在新的淀粉-酪蛋白-硝酸盐琼脂板上生长以产生分离物文库。在30℃生长7天后,将板保持在4℃。
实例2:筛选产生甲硫氨酸的分离物
此实例证明了来自天然产生氨基酸(甲硫氨酸)的实例1的分离物的筛选测定。
筛选甲硫氨酸产量:
含有蔗糖(20.0g)和NH4Cl(10.0g)的改良的基础培养基(K2HPO4,0.3g;KH2PO4,0.7g;Na2CO3,1.0g;CaCl2,5.0mg;MgSO4,0.3g;FeSO4,1.0mg;H2O,1L)用于发酵(Chay,B.P.,Galvez,F.C.F.和Padolina,W.G.P.U.L.B.P.(1992).Methionine production by batchfermentation from various carbohydrates.[通过从各种碳水化合物分批发酵生产甲硫氨酸]ASEAN Food Journal(Malaysia)[东盟食品杂志(马来西亚)])。该培养基的pH是7.2。
培养条件:将实例1的7天分离物培养物的两个环接种到含有30ml发酵培养基的250ml锥形瓶中。将烧瓶在旋转式摇床(160rpm)上在30℃孵育5天后,测定甲硫氨酸产量。准备双份的烧瓶并且在所有实验中将未接种的烧瓶用作对照。
通过纸层析法随后按照Khanna和Nag(Khanna等人,“Production of amino acidsin vitro tissue culture[体外组织培养生产氨基酸]”,Indian Journal ofExperimental Biology[印度实验生物学](1973))的改良的方法检查分离物的培养物肉汤中甲硫氨酸的存在。将肉汤培养物以5000x g离心20分钟并且将2μL的上清液施用于尺寸为18em x 22cm的沃特曼(Whatman)1号滤纸一边正上方1.5cm。将1μL体积的标准甲硫氨酸溶液(0.1mg/mL)沿着上清液施用,并且将色谱图在正丁醇、乙酸和水(4∶1∶1)的溶剂混合物中显色18小时。将色谱图在室温风干,用在丁醇中的0.15%茚三酮溶液喷雾并且再次干燥,然后在60℃在烘箱中加热5分钟。与标准甲硫氨酸溶液的值相对应的上清液的茚三酮-阳性斑点(蓝紫色)的值指示肉汤培养物中甲硫氨酸的存在。如下评估分离物的肉汤培养物中产生的甲硫氨酸的浓度。将色谱图上的分离物的上清液的茚三酮-阳性斑点稀释在10%乙醇中并且记录在520nm处的洗脱液的光谱光度测量读数。从标准曲线确定上清液中的甲硫氨酸浓度。将光密度值对甲硫氨酸溶液的改变的浓度(0.1至0.9mg/ml)的图作为标准甲硫氨酸曲线。
将产生甲硫氨酸的分离物保持在新鲜琼脂板上并且通过将两环的微生物悬浮在一等分试样的50%甘油溶液中产生储备溶液。
实例3:给予产甲硫氨酸分离物以提高蟋蟀的氨基酸含量
此实例证明了用产甲硫氨酸细菌处理蟋蟀以提高它们的营养含量的能力。
全世界对肉类的需求正在增长,并且动物饲料的生产对土地和水的压力也越来越大。昆虫能以更低的环境成本提供大部分蛋白动物;许多昆虫物种可以粪肥为食(如格兰特蛆虫(Grant’s maggot)),或以其他类型的有机废物(如隔夜菜、内脏和啤酒厂丢弃的谷物)为食。昆虫以惊人的速率产生体质量,部分是因为作为冷血动物,它们不会消耗能量用来调节它们的体温。蟋蟀(例如,家蟋蟀(Acheta domesticus))仅仅需要1.7千克饲料来获得一千克的体重;典型的美国鸡消耗2.5千克,猪消耗5千克,和牛消耗10千克。另一个优势:大多数昆虫可以被完整地食用。鸡或猪只有一半是可食用的;对于牛来说,这个分数甚至更小。因此,饲养一公斤昆虫蛋白产生的CO2比饲养猪或牛少,而且只占土地的十分之一。
昆虫粉可取代动物饲料中在25%与100%之间的豆粕或鱼粉而没有不良影响,但是大多数昆虫粉缺乏氨基酸-甲硫氨酸和赖氨酸。甲硫氨酸的合成产生需要危险化学品并且其使用在有机农场中是被禁止的。通过将产甲硫氨酸细菌引入蟋蟀的微生物组,预期蟋蟀天然地提高它们的营养含量。
治疗性设计:针对蟋蟀,将在实例2中鉴定为产甲硫氨酸的分离的细菌和混合有饲养底物(例如,家禽幼雏饲料和米糠(家禽饲料-PF))的107细胞/mL溶液一起配制。
实验设计:
蟋蟀繁殖的实验单位是改良的盖洛德(gaylord)运输箱,其具有标准国际运输托台的面积(1.2m(L)x1.0m(W)x0.61m(H))。每个围隔的内部衬有4mm透明塑料衬里,并覆盖122cm x 137cm的尼龙蚊帐用作入口或出口的物理屏障。为防止同类相食和应激相关死亡率,将96个尺寸为30em x 30em的蛋品包装纸盒放在每个盒子周边的边缘。这提供了大约172800cm2的可爬行表面积。由2夸脱大小的家禽饮水机来提供水,其中棉花和碎石插入分配池以防止新孵化的蛹淹死。对饮水机的侧面进行打磨,以便为蟋蟀垂直爬行提供支点。将带有止回阀以防止滴水的雾化尖端固定在每个围隔的内部的顶部。为了维持可接受的湿度并为大量蟋蟀提供分散的替代水源,这些尖端以自动间隔提供瞄准围隔中心的水脉冲。在实验过程中,将温室内的温度(T)和相对湿度(RH)分别维持在29.0±2.1标准偏差(SD)℃和67.2±14.7SD%。以24小时/天提供光。
将来自林线渔业(Timberline Fisheries
Figure BDA0002140302770001761
http://timberlinefresh.com)的由大约50,000个家蟋蟀卵(孵化率为70%)组成的卵底物放入每个围隔中。将卵底物维持在80%-90%的湿度直至它们孵化。一旦观察到孵化,每天将底物雾化两次,直到蛹完全出现。通过对来自每个实验单元的70个个体的随机样品进行计数和称重,每3天至4天监测群体生长。
从孵化后14天直到它们收获或经历完全死亡,对家蟋蟀群体给予如下:2个自由采食处理:1)5∶1比率的非药物家禽幼雏饲料和米糠(家禽饲料-PF)作为对照;2)5∶1比率的非药物家禽幼雏饲料和米糠(家禽饲料-PF),其喷洒了稀释在本文所述的生长培养基中的实例2中描述的100mL的109细胞/ml的分离的细菌的溶液。
每周进行一次培养,持续五周,收获昆虫。将昆虫在-50℃的冰箱中储存半小时。接下来,将冷冻的昆虫浸没在液氮中,并且随后使用搅拌器(博朗(Braun)Multiquick5,600W,德国克龙贝格)研磨15分钟。根据Yi,L.等人(2013)的技术,按照国际标准ISO 13903:2005,使用离子交换层析法分析冷冻干燥的昆虫粉剂的氨基酸组成。
实例2中鉴定的以产甲硫氨酸微生物饲喂的蟋蟀预期含有比用对照饲料饲喂的蟋蟀更多的甲硫氨酸含量。
实例4:将细菌的产甲硫氨酸菌株给予至用缺乏甲硫氨酸的食物饲养的黑腹果蝇以提高它们的体质量、发育率、和存活
此实例证明了用产甲硫氨酸细菌处理用缺乏甲硫氨酸的饲料饲养的黑腹果蝇以提高体质量、发育率和存活的能力。此实验设计还适用于提高其他昆虫(如蟋蟀)的营养含量,这些昆虫如蟋蟀可用于产生富含甲硫氨酸的动物饲料。
实验设计:
实例2中产生甲硫氨酸的分离的细菌菌株、以及不产生甲硫氨酸的菌株在营养物肉汤中在30℃生长。
如Nature[自然],第11卷,第1期,100-105,2014中所述制备化学定义的(CD)蝇食物。制备缺乏甲硫氨酸的CD食物,并将其称为CD-M。将蝇食物配制品用于本实例中所述的所有实验。
发育率和体质量测定
在第1天,将如实例1中所述的109的产甲硫氨酸细菌、或不产生甲硫氨酸(对照)的细菌重新悬浮在100μl的磷酸盐缓冲盐水中并且添加至CD-M蝇食物中。让这两个组群在25℃干燥24小时。
在第2天,将从蝇中收集的受精的胚用2%次氯酸盐溶液处理5分钟并且然后用无菌水洗涤以从胚中去除任何细胞外微生物。将10μl的在水中的胚悬浮液(1∶3胚:水悬浮液)添加至细菌接种的样品和对照样品中。在该实验的其余部分,将含有胚的蝇食物组群维持在25℃,伴随12小时光照和12小时黑暗的循环。
测量每个组群的蛹壳形成时间和形成的蛹的数量。测量每个样品中的成虫出现时间和出现率。从第一只成虫从蛹中出现时,每12小时计数出现的成年蝇的数量,并计算出现率。
对于体质量测定,从两个组群中收集十只幼虫并且测量它们的质量、区域和总蛋白含量。
实例2中鉴定的用产甲硫氨酸细菌接种的CD-M蝇食物中的胚预期比用非产甲硫氨酸细菌接种的CD-M蝇食物上的胚发育更快并且具有更高的蛋白含量。
存活测定
在第一天前12天,如前所述产生无菌胚并且用无菌CD蝇食物饲养。当在25℃伴随12小时光照和12小时黑暗的循环中饲养时,从收集了胚之后11天,无菌成虫开始从它们的蛹中出现。
在第1天,将109的产甲硫氨酸细菌、或不产生甲硫氨酸(对照)的细菌重新悬浮在100μl磷酸盐缓冲盐水中并且添加至CD-M蝇食物中。让这两个组群在25℃干燥24小时。
在实验的第二天,将10只新出现的无菌雄性和雌性成虫引入具有产甲硫氨酸细菌的CD-M蝇食物或对照中。在该实验的其余部分,将含有蝇的蝇食物维持在25℃,伴随12小时光照和12小时黑暗的循环。每天计算存活的雄性和雌性蝇的数量,直到所有蝇都死亡。进行存活分析以评估产甲硫氨酸细菌对蝇存活的适合度益处。
用接种了实例2中鉴定的产甲硫氨酸微生物的CD-M蝇食物饲养的蝇预期比对照存活更久。
实例5:降解杀螟松(有机磷杀昆虫剂)的微生物的分离
此实例证明了获得能够降解杀螟松(有机磷杀昆虫剂)的微生物文库。
实验设计
从先前使用杀螟松用于昆虫控制的不同区域获得土壤样品。将从如(MicrobesEnviron.[微生物和环境]第21卷,第1期,58-64,2006)中所述的土壤样品中分离降解杀螟松的细菌。简言之,将1g的土壤样品与9ml的无菌蒸馏水充分混合。然后将土壤颗粒在1000rcf离心5分钟,并且然后将100μl的上清液铺板在具有矿物质盐介质的杀螟松中(0.4g/l酵母提取物,0.4g/l杀螟松,15g/l细菌学琼脂)。在制备时,该板是浑浊的,因为杀螟松是乳状液。
在周围出现透明区的集落可以降解或代谢杀螟松,并且这些集落在LB琼脂、营养物琼脂、酵母葡萄糖琼脂、TSA琼脂、BHI琼脂、或MRS琼脂上分离和重新生长。一旦鉴定出独特的细菌集落,就使用基因组DNA提取试剂盒(凯杰公司(Qiagen),DNeasy血液和组织试剂盒)根据制造商的方案,提取它们的基因组。
使用通用细菌引物27F-(5’-AGAGTTTGATCMTGGCTCAG-3’;SEQ ID NO:227)和1492R(5’-TACCTTGTTACGACTT-3’;SEQ ID NO:228),并且使用PCR条件:94℃持续2分钟;94℃持续1分钟、56℃持续1分钟和72℃持续2分钟的30个循环;和72℃持续5分钟的最终延伸,扩增16S rRNA基因。凝胶电泳用于确认扩增子具有正确尺寸(约1500bp),并且将产物从凝胶上切除并使用凝胶提取试剂盒(凯杰公司,QIAquick)按照制造商的方案进行纯化。正确尺寸的扩增子是桑格测序的并且BLAST用于使序列与16s rRNA基因序列的各种储存库匹配以鉴定细菌。
为了确定分离的细菌是否降解杀螟松,将约107的细菌细胞在含有1mM杀螟松的1ml的20mM磷酸钠-钾缓冲液(pH 7)中孵育,如在PNAS[美国国家科学院院刊],第109卷,第22期,8618-8622,2012中所述。在30℃孵育30分钟后,通过添加等体积的甲醇停止该反应。然后通过HPLC分析杀螟松和其代谢物(3-甲基-4-硝基酚)。将HPLC曲线的保留时间和峰面积与已知标准相比。
然后将具有降解杀螟松能力的独特细菌分离物作为冷冻的甘油在-80℃储存。
实例6:通过给予降解杀螟松的细菌提高黑腹果蝇对杀螟松的抗性
此实例证明产生如下的昆虫模型的能力:对它们的饲料中的杀昆虫剂(更具体地是杀螟松)的一种或多种负面作用具有抗性的黑腹果蝇,从而产生了更强壮的昆虫。以下方法是对于其他昆虫(如蟋蟀或本文所披露的其他昆虫,例如有用于产生富含蛋白质的动物饲料的昆虫来源)的替代方法。包括杀螟松的许多杀昆虫剂已示出对蟋蟀的毒性。
实验设计:
治疗性设计:在含有和不含杀螟松的100μl蝇食物培养基中以109的生物配制实例5中选择的细菌分离物。
用于饲养蝇的培养基是玉米粉、糖蜜和酵母培养基(11g/l酵母、54g/l黄色玉米粉、5g/l琼脂、66ml/l糖蜜、和4.8ml/l丙酸)。对于实验程序,将0、10和100p.p.m.的杀螟松或作为阴性对照的磷酸盐缓冲盐水灌注到无菌蝇食物培养基中。
发育率测定
在第1天,将实例5中所述的109的降解杀螟松的细菌悬浮在100μl的磷酸盐缓冲盐水中或者将等体积的盐水(阴性对照)添加至含有或不含杀螟松的无菌蝇食物培养基中。将全部在25℃干燥一天,如在Appl.Environ.Microbiol.[应用与环境微生物学]第82卷,第20期,6204-6213,2016中所述。
在第2天,将从蝇中收集的受精的胚用2%次氯酸盐溶液处理5分钟并且然后用无菌水洗涤以从胚中去除任何细胞外微生物。将10μl的在水中的胚悬浮液(1∶3胚:水悬浮液)添加至含有或不含杀螟松的细菌接种的蝇食物或阴性对照蝇食物中。在该实验的其余部分,将含有胚的蝇食物组群维持在25℃,伴随12小时光照和12小时黑暗的循环。
测量每个组群的蛹壳形成时间和形成的蛹的数量。测量每个样品中的成虫出现时间和出现率。从第一只成虫从蛹中出现时,每12小时计数出现的成蝇的数量,并计算出现率。
在接种了降解杀螟松的细菌的杀螟松灌注的蝇食物中的胚预期比不含降解杀螟松的细菌的杀螟松灌注的食物上的胚发育更快。
存活测定
在第一天前约12天,如前所述产生无菌胚并且用无菌蝇食物饲养。当在不含杀螟松的无菌蝇食物中在25℃伴随12小时光照和12小时黑暗的循环中饲养时,在胚收集后11天成虫开始从它们的蛹中出现。
在第1天,将在磷酸盐缓冲盐水中的109的降解杀螟松的细菌添加至无菌蝇食物培养基中,如在先前实例中所述。
在第2天,将10只新出现的无菌雄性和雌性成虫引入含有或不含杀螟松的细菌接种的蝇食物或阴性对照蝇食物中。在该实验的其余部分,将含有蝇的蝇食物维持在25℃,伴随12小时光照和12小时黑暗的循环。每天计算存活的雄性和雌性蝇的数量,直到所有蝇都死亡。进行存活分析以评估降解杀螟松的细菌对蝇存活的适合度益处。
在接种了降解杀螟松的细菌的杀螟松灌注的蝇食物上饲养的蝇预期比在不含降解杀螟松的细菌的杀螟松灌注的食物上饲养的蝇存活更久。
实例7:使用天然存在的噬菌体从黑腹果蝇中消除昆虫病原细菌
此实例证明了使用天然存在的噬菌体从黑腹果蝇中消除昆虫细菌病原体(如黏质沙雷氏菌、软腐欧氏杆菌(Erwinia carotovora)、和喜昆虫假单胞菌(Pseudomonasentomophila))的能力。该程序可用作消除在其他昆虫物种中(如在蜜蜂中)的细菌的替代测定。
实验设计:
治疗性设计:使用了具有如下噬菌体科的噬菌体文库集合:肌尾噬菌体科(Myoviridae)、长尾噬菌体科(Siphoviridae)、短尾噬菌体科(Podoviridae)、脂毛噬菌体科(Lipothrixviridae)、古噬菌体科(Rudiviridae)、Ampullaviridae、Bicaudaviridae、Clavaviridae、覆盖噬菌体科(Corticoviridae)、囊状噬菌科(Cystoviridae)、纺锤形噬菌体科(Fuselloviridae)、Gluboloviridae、滴状病毒科(Guttaviridae)、丝状噬菌体科(Inoviridae)、光滑噬菌体科(Leviviridae)、微小噬菌体科(Microviridae)、芽生噬菌体科(Plasmaviridae)、复层病毒科(Tectiviridae)。
经2周在无菌1L烧瓶中收集多个环境样品(土壤、池塘沉积物、和污水),并在收集后立即进行处理,然后在4℃储存。将固体样品在无菌双倍强度difco公司卢里亚肉汤(Luria Broth,LB)中或补充有2mM CaCl2至最终体积100mL的胰蛋白酶大豆肉汤(TSB)中进行匀浆。使用磷酸盐测试条测量pH和磷酸盐水平。为了纯化,将所有样品在4℃以3000-6000g离心10-15分钟,并通过0.2-μm低蛋白质过滤器过滤以去除所有剩余的细菌细胞。然后将含有噬菌体文库的上清液在氯仿存在下在4℃储存于玻璃瓶中。
将20-30ml的噬菌体文库用LB-肉汤稀释至30-40ml的体积。添加靶细菌菌株(例如,黏质沙雷氏菌、软腐欧氏杆菌和喜昆虫假单胞菌)(50-200μl在LB-肉汤中生长的过夜培养物)以富集靶向培养物中的该特异性细菌菌株的噬菌体。将该培养物在37℃孵育过夜,以230rpm振荡。通过离心(3000-6000g,15-20分钟,4℃)去除来自该富集培养物的细菌,并过滤(0.2μm或0.45μm过滤器)。将2.5ml无菌培养物添加至2.5ml的LB-肉汤中并且将50-100μl靶细菌添加回该培养物中以进一步富集噬菌体。将富集培养物如上生长过夜。将来自该富集培养物的样品在室温下以13,000g离心15分钟,并将10μl上清液以及100-300μl靶细菌和3ml熔化的0.7%软琼脂铺板在LB-琼脂的培养皿上。将板在37℃过夜孵育。
挑选在细菌菌苔上观察到的每个噬斑并将其转移到500μl的LB肉汤中。将来自该噬斑原液的样品进一步铺板在靶细菌上。对所有发现的噬菌体进行三次噬斑纯化,以从异质噬菌体混合物中分离单个同质噬菌体。
通过收获表现出融合裂解的宿主细菌菌株的覆盖板制备来自具有高滴度噬菌体(>1x 10^10PFU/ml)的平板的裂解物。在用5ml缓冲液充满后,将软琼脂覆盖物浸软,通过离心澄清,并过滤灭菌。将得到的裂解物储存在4℃。通过等密度CsCl离心进一步纯化高滴度噬菌体裂解物,如在(Summer等人,J.Bacteriol.[细菌学杂志]192:179-190,2010)中所述的。
如在Summer,Methods Mol.Biol.[分子生物学方法]502:27-46,2009中所述的,从CsCl纯化的噬菌体悬浮液中分离DNA。通过使用454焦磷酸测序方法将个体分离的噬菌体测序为两个噬菌体基因组库的一部分。简言之,将噬菌体基因组DNA以等摩尔量混合至最终浓度为约100ng/L。将合并的DNA剪切,与对每个合并具有特异性的多重标识符(MID)标签连接,并根据制造商的方案,使用在测序仪(罗氏公司(Roche))上的全板反应通过焦磷酸测序法进行测序。将合并的噬菌体DNA存在于两个测序反应中。通过使用软件(454生命科学公司(Life Sciences)),通过调整设置以仅包括每个组件具有单个MID的读数,将对应于每个合并的输出单独组装。使用针对重叠群序列产生的引物和作为模板的个体噬菌体基因组DNA制备物,通过PCR确定个体重叠群的同一性。使用测序软件(基因编码公司(Gene CodesCorporation))进行序列组装和编辑。
通过实验确定噬菌体染色体端结构。通过对噬菌体基因组端进行测序以及对通过扩增(通过环化基因组DNA的连接的接点)衍生的PCR产物进行测序来确定噬菌体的粘性(cos)端,如在Summer,Methods Mol.Biol.[分子生物学方法]502:27-46,2009中所述的。蛋白质编码区最初使用基因预测软件来预测(Lukashin等人,NucleicAcids Res.[核酸研究]26:1107-1115,1998),通过Artemis中的人工分析进行精化(Rutherford等人,Bioinformatics[生物信息学]16:944-945,2000.),并通过使用BLAST(E值截止值为0.005)进行分析(Camacho等,BMC Bioinformatics[BMC生物信息学]10:421,2009)。通过序列检索软件另外分析了特别感兴趣的蛋白质(Hunter等人,Nucleic Acids Res.[核酸研究]40:D306-D312,2012)。
通过用胰蛋白酶大豆肉汤缓冲液稀释噬菌体原液,进行裂解果蝇属的致病细菌物种的CsCl纯化的噬菌体(>1x10^11PFU/ml)的电子显微镜检查。将噬菌体施用到薄的400目碳涂覆的网格上,用2%(wt/vol)乙酸铀酰染色,并风干。在以100kV的加速电压操作的透射电子显微镜上观察试样。测量每个噬菌体的五个病毒粒子以在适当时计算衣壳和尾的尺寸的平均值和标准偏差。
将噬菌体掺入粉中
用于饲养蝇的培养基是玉米粉、糖蜜和酵母培养基(11g/l酵母、54g/l黄色玉米粉、5g/l琼脂、66ml/l糖蜜、和4.8ml/l丙酸)。将噬菌体溶液灌注到蝇食物中以获得最终浓度在0与108pfu/ml之间的噬菌体。
将黏质沙雷氏菌、软腐欧氏杆菌和喜昆虫假单胞菌细菌在30℃在营养物肉汤中或LB肉汤中生长。
通过将从蝇中收集的受精的胚用2%次氯酸盐溶液处理5分钟,并且然后用无菌水洗涤以去除任何细胞外微生物,产生无菌蝇胚。通过将109CFU的细菌接种在无菌蝇食物中并且将无菌蝇胚添加到该食物中,产生具有靶细胞的蝇幼虫。2天后,将用十只黏质沙雷氏菌感染的第一龄蝇幼虫添加到具有范围为(0-108pfu/ml)的噬菌体浓度的蝇食物中。让幼虫在含有噬菌体的食物中生长3天,直到它们达到第三龄。然后收集幼虫并且在营养物肉汤或LB肉汤中单独匀浆,并且铺板在营养物琼脂板或LB琼脂板上,并且在30℃孵育。记录了从具有不同噬菌体浓度的蝇食物中的幼虫中获得的黏质沙雷氏菌的CFU的数量。这显示在蝇中存在的活细菌的数量。
在含有针对该细菌的噬菌体的蝇食物上生长的幼虫中,预期活细菌的数量减少。
实例8:通过饲料将细菌的产氨基酸菌株给予至黑腹果蝇以提高它们的发育率
此实例证明了用产氨基酸的细菌处理该昆虫黑腹果蝇以改善它们的营养含量的能力。此实验设计可以延长以减少生长时间并产生更多生物量的可以用于产生富含蛋白质的动物饲料的其他昆虫,例如蟋蟀。
全世界对肉类的需求正在增长,并且动物饲料的生产对土地和水的压力也越来越大。昆虫能以更低的环境成本提供人和动物需要的大部分蛋白;许多昆虫物种可以粪肥为食(如格兰特蛆虫(Grant’s maggot)),或以其他类型的有机废物(如隔夜菜、内脏和啤酒厂丢弃的谷物)为食。昆虫以惊人的速率产生体质量,部分是因为作为冷血动物,它们不会消耗能量用来调节它们的体温。蟋蟀(例如,家蟋蟀)仅仅需要1.7千克饲料来获得一千克的体重;典型的美国鸡消耗2.5千克,猪消耗5千克,和牛消耗10千克。另一个优势:大多数昆虫可以被完整地食用。鸡或猪只有一半是可食用的;对于牛来说,这个分数甚至更小。因此,饲养一公斤昆虫蛋白产生的CO2此饲养猪或牛少,而且只占土地的十分之一。
昆虫粉可取代动物饲料中在25%与100%之间的豆粕或鱼粉,而没有不良影响。然而,大部分昆虫粉中缺乏氨基酸-甲硫氨酸和赖氨酸。甲硫氨酸的合成产生需要危险化学品并且其使用在有机农场中是被禁止的。在此实例中,将产甲硫氨酸细菌引入昆虫的微生物组中天然地提高了它们的营养含量。
治疗性设计:
将产谷氨酸或甲硫氨酸的分离的细菌谷氨酸棒状杆菌与和果蝇属蝇的饲喂底物混合的109个菌落形成单位(CFU)的溶液一起配制。
实验设计:
将产生谷氨酸盐或甲硫氨酸的谷氨酸棒状杆菌菌株在营养物肉汤中在30℃生长。
用于饲养蝇的培养基是玉米粉、糖蜜和酵母培养基(11g/l酵母、54g/l黄色玉米粉、5g/l琼脂、66ml/l糖蜜、和4.8ml/l丙酸)。将除丙酸外的所有饲料组分在去离子水中一起加热至80℃(伴随30分钟恒定混合),然后冷却至60℃。然后混合进丙酸,并将50ml饲料等分到各个瓶中,并允许其冷却并固化。将蝇在26℃、16∶8小时光照:黑暗循环、在约60%湿度下饲养。
对于测量幼虫生长速率的实验装置,使用了确定的饲料(Piper等人,2014,NatureMethods[自然方法])。确定的饲料消除了用于基于玉米粉的饲料的成分中批次间变化的影响。此外,确定的饲料允许排除单个组分以测试它们对蝇发育的作用。
发育率测定
在第1天,将由109的菌落形成单位(CFU)组成的100ul的在营养物肉汤中的谷氨酸棒状杆菌悬浮液添加至蝇食物的五个重复中。作为对照,将不含细菌的营养物肉汤添加至蝇食物的另外五个瓶中。将从果蝇中收集的受精的胚用2%次氯酸盐溶液处理五分钟并且然后用无菌水处理以从胚中去除任何细胞外微生物。将10ul在水中的胚悬浮液(1∶3胚:水悬浮液)添加至所有细菌接种的蝇食物瓶和对照蝇食物瓶中。在该实验的其余部分,将含有胚的蝇食物维持在26℃、16∶8小时光照:黑暗循环、约60%湿度中。测量每个重复中的成虫出现时间和出现率。从第一只成虫从蛹中出现时,每12小时计数出现的成蝇数量,并计算出现率。
幼虫质量测定
为了测试产细菌的氨基酸的存在是否可提高在确定的饲料上饲养的发育幼虫的体质量,我们生产了无外来菌并且与单个细菌菌株单一相关的幼虫。对于这些测定,使用了三种不同的细菌,即谷氨酸棒状杆菌(一种产生谷氨酸盐的菌株)、谷氨酸棒状杆菌(一种产生甲硫氨酸的菌株)和大肠杆菌。
首先,产生了无外来菌的胚。在6小时的时间段里,在含有酵母的葡萄汁琼脂板上收集来自果蝇的受精的胚。为了消除任何细菌污染,将胚用2%次氯酸盐溶液处理五分钟并且然后用无菌水洗涤三次。然后将一体积的胚悬浮在3体积的水中。
将确定的饲料等分到小瓶中,并且对于每种测试条件使用9个重复。这些条件为:
1.不向食物中添加细菌
2.含有谷氨酸棒状杆菌(产谷氨酸盐(谷氨酸棒状杆菌谷氨酸盐(C.glu-Glu))的菌株)的食物
3.含有谷氨酸棒状杆菌(产甲硫氨酸(谷氨酸棒状杆菌甲硫氨酸(C.glu-Met))的菌株)的食物
4.含有大肠杆菌的食物
向在条件2、3和4中的每瓶食物中添加100ul过夜固定相培养物。
向在每个条件中的九个重复中的每一个中添加10ul无菌胚+水悬浮液。然后将这些小瓶在26℃、60%湿度、16∶8光照:黑暗循环中孵育。
13天后,对每个重复的10-15个随机选择的幼虫进行取样,并测量它们的区域,作为其生物量和重量的替代指示。用无菌刮刀将幼虫从食物中挖出,用水冲洗以将食物从它们的身体上清理掉,并单独获得在每种条件下的每个重复的取样的每只幼虫的图像。将图像J脚本(Image J script)用于鉴定,描绘和测量每张图像中幼虫的区域。
产氨基酸细菌处理提高了昆虫发育率。
在接种了产氨基酸的细菌菌株的饲料上发育的胚到达成虫期比在无菌饲料中饲养的那些显著更快(图1)。此外,在雌性蝇中的这种作用略强于雄性蝇(图2A和2B)。
产氨基酸细菌处理提高了幼虫体质量。
补充了谷氨酸棒状杆菌甲硫氨酸的饲料中的幼虫平均体重最大,其次是具有谷氨酸棒状杆菌谷氨酸盐、大肠杆菌和没有细菌的饲料的那些(图3)。这显示昆虫的饲料中增加产生氨基酸的细菌比未补充的饲料更快地产生昆虫生物量。
总之,这些数据证明,在昆虫的饲料中增加能够产生氨基酸的细菌比未补充的饲料更快地产生昆虫生物量。将其扩展到其他昆虫(如蟋蟀),用能够产生甲硫氨酸的细菌补充它们的饲料可以提高它们的生物量和蛋白含量。
实例9:用纯化的噬菌体溶液处理昆虫
此实例证明了从靶向特异性昆虫细菌的环境样品中分离和纯化噬菌体。此实例还通过噬斑测定,通过测量其氧消耗率和细胞外酸化率,证明了分离的噬菌体在体外针对靶细菌的功效。最后,此实例通过测量噬菌体对来自蝇的靶细菌的能力(通过用针对细菌分离的噬菌体来处理靶细菌)证明了噬菌体在体内的功效。此实例证明了可以使用噬菌体靶向细菌来清除降低昆虫适合度的致病细菌。具体而言,可以使用从花园堆肥中分离的噬菌体清除作为蝇中的致病细菌的黏质沙雷氏菌。
存在若干种有益的和商业上有用的昆虫,它们受到天然存在的细菌病原体的影响。
实验设计
从天然样品中分离特异性细菌噬菌体:
从环境来源材料中分离出针对靶细菌的细菌噬菌体。简言之,将黏质沙雷氏菌(Serratia marcescens)的饱和培养物稀释进新鲜的双倍强度胰蛋白酶大豆肉汤(TSB)中,并在24℃-26℃生长约120分钟至早期对数期,或者稀释进双倍强度的卢里亚-贝尔塔尼(Luria-Bertani,LB)中并在37℃生长约90分钟。通过在PBS中均质化来制备花园堆肥,并将其通过0.2μm过滤来进行灭菌。通过0.2μm过滤对未处理的污水进行灭菌。将一体积过滤的源材料添加至对数期细菌培养物中并继续孵育24小时。通过沉淀培养物并通过0.45μm膜对上清液进行过滤来制备富集的源材料。
通过将样品铺板到双琼脂细菌菌苔上来分离噬菌体。将固定的细菌培养物与熔融的0.6%琼脂LB或TSB组合并倾倒入1.5%琼脂LB或TSB板上。凝固后,将2.5μL噬菌体样品稀释液点样在双琼脂板上并允许其吸收。然后将板包裹并在25℃(TSA)或37℃(LB)孵育过夜,然后对可见噬斑的形成进行评估。将新分离的噬斑通过在靶菌株上连续传代单个噬斑(通过将噬斑挑取到SM缓冲液(50mM Tris-HCl[pH 7.4]、10mM MgSO4、100mM NaCl)中并在55℃孵育15分钟)进行纯化,然后使用噬斑悬浮液重复上文的双琼脂点样方法。
如上详述,成功地从污水和堆肥中分离出细菌噬菌体。在将样品点样到用于富集的黏质沙雷氏菌细菌的菌苔上之后,噬斑形成是非常明显的。
细菌噬菌体的传代、定量、和繁殖:
使用如上分离和纯化的细菌噬菌体进行用于后续实验的噬菌体裂解物的繁殖和产生。简言之,将饱和细菌培养物稀释100倍至新鲜培养基中并生长60-120分钟以实现用于有效噬菌体感染的早期对数生长状态。将噬菌体悬浮液或裂解物添加至早期对数期培养物中并继续孵育直至观察到肉汤清除(指示噬菌体繁殖和细菌裂解),或直至感染后24小时。通过以7,197x g沉淀细胞20分钟,然后通过0.45或0.2μm膜过滤上清液来收获裂解物。将过滤的裂解物储存在4℃。
使用双琼脂点样法进行感染性噬菌体颗粒的计数。简言之,在PBS中进行样品的1∶10稀释系列,并将稀释液点样在用如上的宿主细菌制备的固化双琼脂板上。在孵育过夜后计数噬斑形成单位(PFU)以确定样品的近似滴度。
测量细菌呼吸的分离噬菌体的体外分析:
通过监测感染期间的氧消耗率(OCR)和细胞外酸化率(ECAR),使用海马(Seahorse)XFe96分析仪(安捷伦公司(Agilent))测量噬菌体对细菌的作用。在实验前一天,将XFe96板通过每孔15μL的1mg/mL聚-L-赖氨酸原液涂覆并在28℃干燥过夜,并且将XFe96探针通过放置在含有200μL的校准液(XF Calibrant)的孔中平衡并在黑暗中在室温孵育。第二天将用聚-L-赖氨酸涂覆的板用ddH2O洗涤两次。将大肠杆菌BL21(LB,37℃)或黏质沙雷氏菌(TSB,25℃)的过夜饱和培养物以1∶100继代培养到相同的培养基并在30℃通风培养约2.5小时。然后使用相同的培养基将培养物稀释至O.D.600nm~0.02。通过以10x最终浓度将原液稀释到SM缓冲液中并将20μL的10x溶液加载到探针板的适当注射口中来制备处理物。当探针在XFe96Flux分析仪中平衡时,通过添加90μL细菌悬浮液或培养基对照来制备细菌板并以3,000rpm旋转10分钟。离心后,将另外的90μL适当的培养基轻轻地添加至孔中,以便不干扰细菌粘附,使每孔的总体积达到180μL。
XFe96 Flux分析仪在约30℃运行,按照1∶00、0∶30、3∶00的混合、等待、读数循环。完成四个循环以允许细菌的平衡/标准化,然后注射20μL处理物并如上继续循环,持续总共大约6小时。使用海马(Seahorse)XFe96 Wave软件包分析数据。
用海马(Seahorse)XFe96分析仪,通过测量细菌的氧消耗率(OCR)和细胞外酸化率(ECAR)测定分离的细菌噬菌体的作用。当用噬菌体T7感染大肠杆菌并用新分离的ΦSmVL-C1感染黏质沙雷氏菌时,在该速率短暂爆发后观察到OCR显著降低(图4)。对于具有这两种宿主生物的这两种噬菌体,海马(Seahorse)测定允许检测成功的噬菌体感染而无需噬斑测定。因此,此方法适用于检测不适合传统噬菌体检测方法的宿主生物的噬菌体感染。
用于感染鉴定的SYBR Gold转导测定:
通过用核酸酶预处理来除去可以干扰荧光信号说明的额外病毒核酸(extraviralnucleic acid),来制备细菌噬菌体制剂用于染色。简言之,将MgCl2添加至10mL的噬菌体裂解物(10mM最终浓度),并且添加RNA酶A(凯杰公司)和DNA酶I(西格玛公司)两者至10μg/mL的最终浓度。将样品在室温孵育1小时。核酸酶处理后,将5mL的裂解物与1μL的SYBR Gold(赛默公司(Thermo),10,000x)合并,并且在室温孵育约1.5小时。随后使用米康(Amicon)超滤柱从样品中去除过量的染料。简言之,通过添加10mL的SM缓冲液并在5,000x g、4℃旋转5分钟来洗涤米康(Amicon)柱(15mL,10k MWCO)。然后将标记的噬菌体样品以5,000x g、4℃旋转通过柱,直至体积减少大约10倍(15-30分钟)。为了洗涤样品,将5mL SM缓冲液添加至每个贮存器并重复旋转,然后再洗涤两次。在第三次洗涤后,将保留的样品从米康(Amicon)贮存器中用移液管移出,并使用SM缓冲液使其达到大约1mL。为了除去较大的污染物,将洗涤过的和标记的噬菌体样品以10,000x g离心2分钟,随后将上清液通过0.2μm膜过滤到黑色微管中并在4℃储存。
通过减速旋转1mL等分试样并用1mL PBS洗涤一次,然后使用1mL PBS最终重悬来制备饱和细菌培养物(在37℃在LB中生长的大肠杆菌MG1655,在26℃在TSB中生长的黏质沙雷氏菌和共生沙雷氏菌(S.symbiotica))。通过将500μL洗涤过的细菌与1μL的SYBR Gold组合并在室温在黑暗中孵育1小时来染色阳性对照标记的细菌。将细菌通过以8.000x g旋转5分钟沉淀,并用等体积的PBS洗涤两次,然后重悬于最终体积为500μL的PBS中。将体积为25μL的染色的细菌与黑色微管中的25μL的SM缓冲液合并,向其中添加50μL的10%福尔马林(5%最终体积,约2%甲醛)并通过轻弹混合。将样品在室温固定约3小时,然后使用米康(Amicon)超滤柱洗涤。简言之,将500μL的picopure水添加至米康(Amicon)柱(0.5mL,100kMWCO)上,并以14,000xg旋转5分钟以洗涤膜。将固定的样品通过添加400μL的PBS进行稀释,然后转移至预洗涤的旋转柱并以14,000x g旋转10分钟。将柱转移到新鲜的收集管中,然后添加500μL的PBS以稀释保留在渗余物中的固定剂。随后,进行另外两次PBS稀释,总共洗涤三次。将最终的渗余物稀释至约100μL,然后将柱倒入新鲜的收集管中并以1,000x g旋转2分钟以收集样品。将洗涤过的样品转移到黑色微管中并储存在4℃。
对于转导实验和对照,将25μL的细菌(或PBS)和25μL的SYBR Gold标记的噬菌体(或SM缓冲液)在黑色微管中合并,并在室温静置孵育15-20分钟以允许噬菌体吸附和注射到受体细菌中。孵育后立即向样品中添加50μL的10%福尔马林,并在室温下固定约4小时。如上,使用米康(Amicon)柱用PBS洗涤样品。
细菌噬菌体核酸的注射需要噬菌体成功地感染宿主细菌细胞。用SYBR Gold标记的并与黏质沙雷氏菌共孵育的大肠杆菌噬菌体Plkc通过显微镜检查显示荧光细菌的存在,这验证了在噬菌体分离管道中该测定的用途。与海马(Seahorse)测定一样,这种方法提供了传统噬菌体方法的替代方案,以允许扩增到不适合噬斑测定的生物中。另外地,SYBRGold转导测定不需要细菌生长,因此适用于分析靶向困难或甚至不可培养的生物(包括内共生体,如布赫纳氏菌)的噬菌体。。
测试针对黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)蝇中黏质沙雷氏菌的噬菌体的体内功效
黏质沙雷氏菌培养物在30℃在胰蛋白酶大豆肉汤(TSB)中生长,伴随200rpm恒定振荡。
用于饲养蝇原种的培养基是玉米粉、糖蜜和酵母培养基(11g/l酵母、54g/l黄玉米粉、5g/l琼脂、66ml/l糖蜜、和4.8ml/l丙酸)。将除丙酸外的所有饲料组分在去离子水中一起加热至80℃(伴随30分钟恒定混合),然后冷却至60℃。然后混合进丙酸,并将50ml饲料等分到各个瓶中,并允许其冷却并固化。将蝇在26℃、16∶8小时光照:黑暗循环、在约60%湿度下饲养。
为了用黏质沙雷氏菌感染蝇,将细针(约10um宽的尖端)浸入密集的过夜静止期培养物中并刺破蝇的胸腔。对于此实验,使用针穿刺法,用黏质沙雷氏菌感染10只雄性和10只雌性的四个重复,作为蝇死亡率的阳性对照。对于处理组,将四个重复(每个重复中10只雄性和10只雌性)用黏质沙雷氏菌和含有约108个噬菌体颗粒/ml的噬菌体溶液针刺。最后,将没有针刺或没有任何处理的两个重复(每个重复中10只雄性和10只雌性)用作死亡率的阴性对照。
将所有条件下的蝇置于食品瓶中并在26℃、16∶8光照:黑暗循环、60%湿度下孵育。在针刺后每天计数活蝇和死蝇的数量,持续四天。所有用单独的黏质沙雷氏菌针刺的蝇都在治疗后24小时内死亡。相比之下,噬菌体处理组中超过60%的蝇和未经处理的对照组中的所有蝇在该时间点都存活(图5)。此外,当实验终止时,噬菌体处理组和阴性对照组中的大多数蝇继续存活四天。
为了确定蝇死亡的原因,将来自黏质沙雷氏菌和黏质沙雷氏菌+噬菌体两者针刺的蝇中的死蝇进行匀浆并铺板。将来自黏质沙雷氏菌和黏质沙雷氏菌+噬菌体处理的四个重复中的每一个的四只死蝇在100ul的TSB中匀浆。还通过在TSB中稀释匀浆产生1∶100稀释液。将10ul浓缩的匀浆以及1∶100稀释液铺板在TSA板上,并在30℃孵育过夜。在检查用于细菌生长的板时,来自黏质沙雷氏菌针刺的死蝇的所有板都有在其上生长的细菌的菌苔,而来自黏质沙雷氏菌+噬菌体针刺的死蝇的板上没有细菌。这显示在不存在噬菌体时,黏质沙雷氏菌可以在蝇中诱导感染性休克,导致其死亡。然而,在噬菌体的存在下,死亡率可以是由于用针刺引起的损伤。
其他实施例
尽管出于清楚理解的目的,已经通过说明和实例详细地描述了前述发明,但是描述和实例不应被解释为限制本发明的范围。本文引用的所有专利和科学文献的披露都明确地通过引用以其全文并入。
序列表
<110> 旗舰创业股份有限公司(Flagship Pioneering, Inc.)
<120> 用于制造食物和饲料的方法和相关组合物
<130> 51215-007WO3
<150> US 62/584,011
<151> 2017-11-09
<150> US 62/450,038
<151> 2017-01-24
<160> 228
<170> PatentIn版本3.5
<210> 1
<211> 1526
<212> DNA
<213> Carsonella ruddii
<400> 1
tatccagcca caggttcccc tacagctacc ttgttacgac ttcaccccag ttacaaatca 60
taccgttgta atagtaaaat tacttatgat acaatttact tccatggtgt gacgggcggt 120
gtgtacaagg ctcgagaacg tattcaccgt aacattctga tttacgatta ctagcgattc 180
caacttcatg aaatcgagtt acagatttca atccgaacta agaatatttt ttaagattag 240
cattatgttg ccatatagca tataactttt tgtaatactc attgtagcac gtgtgtagcc 300
ctacttataa gggccatgat gacttgacgt cgtcctcacc ttcctccaat ttatcattgg 360
cagtttctta ttagttctaa tatattttta gtaaaataag ataagggttg cgctcgttat 420
aggacttaac ccaacatttc acaacacgag ctgacgacag ccatgcagca cctgtctcaa 480
agctaaaaaa gctttattat ttctaataaa ttctttggat gtcaaaagta ggtaagattt 540
ttcgtgttgt atcgaattaa accacatgct ccaccgcttg tgcgagcccc cgtcaattca 600
tttgagtttt aaccttgcgg tcgtaatccc caggcggtca acttaacgcg ttagcttttt 660
cactaaaaat atataacttt ttttcataaa acaaaattac aattataata tttaataaat 720
agttgacatc gtttactgca tggactacca gggtatctaa tcctgtttgc tccccatgct 780
ttcgtgtatt agtgtcagta ttaaaataga aatacgcctt cgccactagt attctttcag 840
atatctaagc atttcactgc tactcctgaa attctaattt cttcttttat actcaagttt 900
ataagtatta atttcaatat taaattactt taataaattt aaaaattaat ttttaaaaac 960
aacctgcaca ccctttacgc ccaataattc cgattaacgc ttgcacccct cgtattaccg 1020
cggctgctgg cacgaagtta gccggtgctt cttttacaaa taacgtcaaa gataatattt 1080
ttttattata aaatctcttc ttactttgtt gaaagtgttt tacaacccta aggccttctt 1140
cacacacgcg atatagctgg atcaagcttt cgctcattgt ccaatatccc ccactgctgc 1200
cttccgtaaa agtttgggcc gtgtctcagt cccaatgtgg ttgttcatcc tctaagatca 1260
actacgaatc atagtcttgt taagctttta ctttaacaac taactaattc gatataagct 1320
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acatttctat atacttttct aatactaata ggtagattct tatatattac tcacccgttc 1440
gctgctaatt atttttttaa taattcgcac aacttgcatg tgttaagctt atcgctagcg 1500
ttcaatctga gctatgatca aactca 1526
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<212> DNA
<213> 粉虱(Portiera aleyrodidarum)BT-B
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cggcatcata caggttggca agcggcgcac gggtgagtaa tacatgtaaa tatacctaaa 120
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<212> DNA
<213> 蚜虫内共生菌(Buchnera aphidicola)菌株APS(豌豆长管蚜(Acyrthosiphonpisum))
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agagtttgat catggctcag attgaacgct ggcggcaagc ctaacacatg caagtcgagc 60
ggcagcgaga agagagcttg ctctctttgt cggcaagcgg caaacgggtg agtaatatct 120
ggggatctac ccaaaagagg gggataacta ctagaaatgg tagctaatac cgcataatgt 180
tgaaaaacca aagtggggga ccttttggcc tcatgctttt ggatgaaccc agacgagatt 240
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gcaacgcgaa aaaccttacc tggtcttgac atccacagaa ttctttagaa ataaagaagt 1020
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<211> 1552
<212> DNA
<213> 蚜虫内共生菌(Buchnera aphidicola)菌株Sg(麦二叉蚜(Schizaphisgraminum))
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gtcgagcggc agcgaaaaga aagcttgctt tcttgtcggc gagcggcaaa cgggtgagta 120
atatctgggg atctgcccaa aagaggggga taactactag aaatggtagc taataccgca 180
taaagttgaa aaaccaaagt gggggacctt ttttaaaggc ctcatgcttt tggatgaacc 240
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ctgagaggat aaccagccac actggaactg agacacggtc cagactccta cgggaggcag 360
cagtggggaa tattgcacaa tgggcgaaag cctgatgcag ctatgccgcg tgtatgaaga 420
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acggagggtg cgagcgttaa tcagaattac tgggcgtaaa gagcacgtag gtggtttttt 600
aagtcagatg tgaaatccct aggcttaacc taggaactgc atttgaaact gaaatgctag 660
agtatcgtag agggaggtag aattctaggt gtagcggtga aatgcgtaga tatctggagg 720
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ggagcaaaca ggattagata ccctggtagt ccatgccgta aacgatgtcg acttggaggt 840
tgtttccaag agaagtgact tccgaagcta acgcgttaag tcgaccgcct ggggagtacg 900
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caagtcatca tggcccttac gaccagggct acacacgtgc tacaatggtt tatacaaaga 1260
gaagcaaatc tgtaaagaca agcaaacctc ataaagtaaa tcgtagtccg gactggagtc 1320
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gaagtcgtaa caaggtaacc gtaggggaac ctgcggttgg atcacctcct ta 1552
<210> 5
<211> 1566
<212> DNA
<213> 蚜虫内共生菌(Buchnera aphidicola)菌株Bp(黄莲木瘿蚜(Baizongiapistaciae))
<400> 5
acttaaaatt gaagagtttg atcatggctc agattgaacg ctggcggcaa gcttaacaca 60
tgcaagtcga gcggcatcga agaaaagttt acttttctgg cggcgagcgg caaacgggtg 120
agtaacatct ggggatctac ctaaaagagg gggacaacca ttggaaacga tggctaatac 180
cgcataatgt ttttaaataa accaaagtag gggactaaaa tttttagcct tatgctttta 240
gatgaaccca gacgagatta gcttgatggt aaggtaatgg cttaccaagg cgacgatctc 300
tagctggtct gagaggataa ccagccacac tggaactgag atacggtcca gactcctacg 360
ggaggcagca gtggggaata ttgcacaatg ggctaaagcc tgatgcagct atgccgcgtg 420
tatgaagaag gccttagggt tgtaaagtac tttcagcggg gaggaaagaa ttatgtctaa 480
tatacatatt ttgtgacgtt acccgaagaa gaagcaccgg ctaactccgt gccagcagcc 540
gcggtaatac ggagggtgcg agcgttaatc agaattactg ggcgtaaaga gcacgtaggc 600
ggtttattaa gtcagatgtg aaatccctag gcttaactta ggaactgcat ttgaaactaa 660
tagactagag tctcatagag ggaggtagaa ttctaggtgt agcggtgaaa tgcgtagata 720
tctagaggaa tacccgtggc gaaagcgacc tcctaaatga aaactgacgc tgaggtgcga 780
aagcgtgggg agcaaacagg attagatacc ctggtagtcc atgctgtaaa cgatgtcgac 840
ttggaggttg tttcctagag aagtggcttc cgaagctaac gcattaagtc gaccgcctgg 900
ggagtacggt cgcaaggcta aaactcaaat gaattgacgg gggcccgcac aagcggtgga 960
gcatgtggtt taattcgatg caacgcgaag aaccttacct ggtcttgaca tccatagaat 1020
tttttagaga taaaagagtg ccttagggaa ctatgagaca ggtgctgcat ggctgtcgtc 1080
agctcgtgtt gtgaaatgtt gggttaagtc ccgcaacgag cgcaacccct atcctttgtt 1140
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actggagtct gcaactcgac tccacgaagt aggaatcgct agtaatcgtg gatcagaatg 1380
ccacggtgaa tacgttcccg ggccttgtac acaccgcccg tcacaccatg ggagtgggtt 1440
gcaaaagaag caggtagctt aaccagatta ttttattgga gggcgcttac cactttgtga 1500
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tcctta 1566
<210> 6
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<212> DNA
<213> 蚜虫内共生菌(Buchnera aphidicola)BCc
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cagaataaag aaattattaa tcagataatt aatttaataa atattaataa aaatgataat 120
attattgaaa taggatcagg attaggagcg ttaacttttc ctatttgtag aatcattaaa 180
aaaatgatag tattagaaat tgatgaagat cttgtgtttt ttttaactca aagtttattt 240
attaaaaaat tacaaattat aattgctgat attataaaat ttgatttttg ttgttttttt 300
tctttacaga aatataaaaa atataggttt attggtaatt taccatataa tattgctact 360
atattttttt taaaaacaat taaatttctt tataatataa ttgatatgca ttttatgttt 420
caaaaagaag tagcaaagag attattagct actcctggta ctaaagaata tggtagatta 480
agtattattg cacaatattt ttataagata gaaactgtta ttaatgttaa taaatttaat 540
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agtaaatata aaatagataa acatttttct gttttagaat taattactag attttctttt 660
caacatagaa gaaaattttt aaataataat ttaatatctt tattttctac aaaagaatta 720
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<210> 7
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<212> DNA
<213> 蚜虫内共生菌(Buchnera aphidicola)(柏大蚜(Cinara tujafilina))
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caattcagta ataggaagtt ttttaggtat atttggataa ttactgtaat tcttaataaa 180
gttttttaca atcctatctt caatagaatg aaaactaata atagcaattt ttgatccgga 240
atgtaatatg ttaataataa tttttaatat tttatgtaat tcatttattt cttggttaat 300
atatattcga aaagcttgaa atgttctcgt agctggatgt ttaaatttgt catattttgg 360
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ttgtaatatg atggctcggg atattttttt tgcgtatttt tcttcgccaa aattttttat 480
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atttttttct ttttttaata ttttttcaat attagaaaat ttacctaaaa atattttaaa 720
tcgcgaatct tttatttttt ttccgatttt tatagattgt gggtcttgat caatactata 780
taactttcca ttaaccccta attcttgaag aattgctttt gaatgaccac cacctccaaa 840
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<212> DNA
<213> 蚜虫内共生菌(Buchnera aphidicola)菌株G002(桃蚜(Myzus persicae))
<400> 8
atgaaaagta taaaaacttt taaaaaacac tttcctgtga aaaaatatgg acaaaatttt 60
cttattaata aagagatcat aaaaaatatt gttaaaaaaa ttaatccaaa tatagaacaa 120
acattagtag aaatcggacc aggattagct gcattaactg agcccatatc tcagttatta 180
aaagagttaa tagttattga aatagactgt aatctattat attttttaaa aaaacaacca 240
ttttattcaa aattaatagt tttttgtcaa gatgctttaa actttaatta tacaaattta 300
ttttataaaa aaaataaatt aattcgtatt tttggtaatt taccatataa tatctctaca 360
tctttaatta tttttttatt tcaacacatt agagtaattc aagatatgaa ttttatgctt 420
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ttttggccta ttccgagagt tcattctata tttgtaaatt taacacctca tcataattct 600
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<211> 822
<212> DNA
<213> 蚜虫内共生菌(Buchnera aphidicola)菌株Ak(苜蓿无网长管蚜(Acyrthosiphon kondoi))
<400> 9
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aatacaaaaa ctattcaaaa gataattaat ataattaatc caaacaccaa acaaacatta 120
gtggaaattg gacctggatt agctgcatta acaaaaccaa tttgtcaatt attagaagaa 180
ttaattgtta ttgaaataga tcctaattta ttgtttttat taaaaaaacg ttcattttat 240
tcaaaattaa cagtttttta tcaagacgct ttaaatttca attatacaga tttgttttat 300
aagaaaaatc aattaattcg tgtttttgga aacttgccat ataatatttc tacatcttta 360
attatttctt tattcaatca tattaaagtt attcaagata tgaattttat gttacagaaa 420
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atttctcagt attattgtaa aattaaaata ttattaaatg ttgtacctga agattttcga 540
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aaaattttgc gtcatagttt aaaaaattta ttttctgaaa aagaactaat tcaattagaa 720
attaatccaa atttacgagc tgaaaatatt tctatctttc agtattgtca attagctgat 780
tatttatata aaaaattaaa taatcttgta aaaatcaatt aa 822
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<211> 822
<212> DNA
<213> 蚜虫内共生菌(Buchnera aphidicola)菌株Ua(Uroleucon ambrosiae)
<400> 10
atgatactaa ataaatataa aaaatttatt cctttaaaaa gatacggaca aaattttctt 60
gtaaatagag aaataatcaa aaatattatc aaaataatta atcctaaaaa aacgcaaaca 120
ttattagaaa ttggaccggg tttaggtgcg ttaacaaaac ctatttgtga atttttaaat 180
gaacttatcg tcattgaaat agatcctaat atattatctt ttttaaagaa atgtatattt 240
tttgataaat taaaaatata ttgtcataat gctttagatt ttaattataa aaatatattc 300
tataaaaaaa gtcaattaat tcgtattttt ggaaatttac catataatat ttctacatct 360
ttaataatat atttatttcg gaatattgat attattcaag atatgaattt tatgttacaa 420
caagaagtgg ctaaaagatt agttgctatt cctggtgaaa aactttatgg tcgtttaagt 480
attatatctc aatattattg taatattaaa atattattac atattcgacc tgaaaatttt 540
caacctattc ctaaagttaa ttcaatgttt gtaaatttaa ctccgcatat tcattctcct 600
tattttgttt atgatattaa tttattaact agtattacaa aacatgcttt tcaacataga 660
agaaaaatat tgcgtcatag tttaagaaat tttttttctg agcaagattt aattcattta 720
gaaattaatc caaatttaag agctgaaaat gtttctatta ttcaatattg tcaattggct 780
aataatttat ataaaaaaca taaacagttt attaataatt aa 822
<210> 11
<211> 816
<212> DNA
<213> 蚜虫内共生菌(Buchnera aphidicola)(大豆蚜(Aphis glycines))
<400> 11
atgaaaaagc atattcctat aaaaaaattt agtcaaaatt ttcttgtaga tttgagtgtg 60
attaaaaaaa taattaaatt tattaatccg cagttaaatg aaatattggt tgaaattgga 120
ccgggattag ctgctatcac tcgacctatt tgtgatttga tagatcattt aattgtgatt 180
gaaattgata aaattttatt agatagatta aaacagttct cattttattc aaaattaaca 240
gtatatcatc aagatgcttt agcatttgat tacataaagt tatttaataa aaaaaataaa 300
ttagttcgaa tttttggtaa tttaccatat catgtttcta cgtctttaat attgcattta 360
tttaaaagaa ttaatattat taaagatatg aattttatgc tacaaaaaga agttgctgaa 420
cgtttaattg caactccagg tagtaaatta tatggtcgtt taagtattat ttctcaatat 480
tattgtaata taaaagtttt attgcatgtg tcttcaaaat gttttaaacc agttcctaaa 540
gtagaatcaa tttttcttaa tttgacacct tatactgatt atttccctta ttttacttat 600
aatgtaaacg ttcttagtta tattacaaat ttagcttttc aaaaaagaag aaaaatatta 660
cgtcatagtt taggtaaaat attttctgaa aaagttttta taaaattaaa tattaatccc 720
aaattaagac ctgagaatat ttctatatta caatattgtc agttatctaa ttatatgata 780
gaaaataata ttcatcagga acatgtttgt atttaa 816
<210> 12
<211> 1463
<212> DNA
<213> Annandia pinicola
<400> 12
agattgaacg ctggcggcat gccttacaca tgcaagtcga acggtaacag gtcttcggac 60
gctgacgagt ggcgaacggg tgagtaatac atcggaacgt gcccagtcgt gggggataac 120
tactcgaaag agtagctaat accgcatacg atctgaggat gaaagcgggg gaccttcggg 180
cctcgcgcga ttggagcggc cgatggcaga ttaggtagtt ggtgggataa aagcttacca 240
agccgacgat ctgtagctgg tctgagagga cgaccagcca cactggaact gagatacggt 300
ccagactctt acgggaggca gcagtgggga atattgcaca atgggcgcaa gcctgatgca 360
gctatgtcgc gtgtatgaag aagaccttag ggttgtaaag tactttcgat agcataagaa 420
gataatgaga ctaataattt tattgtctga cgttagctat agaagaagca ccggctaact 480
ccgtgccagc agccgcggta atacgggggg tgctagcgtt aatcggaatt actgggcgta 540
aagagcatgt aggtggttta ttaagtcaga tgtgaaatcc ctggacttaa tctaggaact 600
gcatttgaaa ctaataggct agagtttcgt agagggaggt agaattctag gtgtagcggt 660
gaaatgcata gatatctaga ggaatatcag tggcgaaggc gaccttctgg acgataactg 720
acgctaaaat gcgaaagcat gggtagcaaa caggattaga taccctggta gtccatgctg 780
taaacgatgt cgactaagag gttggaggta taacttttaa tctctgtagc taacgcgtta 840
agtcgaccgc ctggggagta cggtcgcaag gctaaaactc aaatgaattg acgggggcct 900
gcacaagcgg tggagcatgt ggtttaattc gatgcaacgc gtaaaacctt acctggtctt 960
gacatccaca gaattttaca gaaatgtaga agtgcaattt gaactgtgag acaggtgctg 1020
catggctgtc gtcagctcgt gttgtgaaat gttgggttaa gtcccgcaac gagcgcaacc 1080
cttgtccttt gttaccataa gatttaagga actcaaagga gactgccggt gataaactgg 1140
aggaaggcgg ggacgacgtc aagtcatcat ggcccttatg accagggcta cacacgtgct 1200
acaatggcat atacaaagag atgcaatatt gcgaaataaa gccaatctta taaaatatgt 1260
cctagttcgg actggagtct gcaactcgac tccacgaagt cggaatcgct agtaatcgtg 1320
gatcagcatg ccacggtgaa tatgtttcca ggccttgtac acaccgcccg tcacaccatg 1380
gaagtggatt gcaaaagaag taagaaaatt aaccttctta acaaggaaat aacttaccac 1440
tttgtgactc ataactgggg tga 1463
<210> 13
<211> 1554
<212> DNA
<213> Moranella endobia
<400> 13
tctttttggt aaggaggtga tccaaccgca ggttccccta cggttacctt gttacgactt 60
caccccagtc atgaatcaca aagtggtaag cgccctccta aaaggttagg ctacctactt 120
cttttgcaac ccacttccat ggtgtgacgg gcggtgtgta caaggcccgg gaacgtattc 180
accgtggcat tctgatccac gattactagc gattcctact tcatggagtc gagttgcaga 240
ctccaatccg gactacgacg cactttatga ggtccgctaa ctctcgcgag cttgcttctc 300
tttgtatgcg ccattgtagc acgtgtgtag ccctactcgt aagggccatg atgacttgac 360
gtcatcccca ccttcctccg gtttatcacc ggcagtctcc tttgagttcc cgaccgaatc 420
gctggcaaaa aaggataagg gttgcgctcg ttgcgggact taacccaaca tttcacaaca 480
cgagctgacg acagccatgc agcacctgtc tcagagttcc cgaaggtacc aaaacatctc 540
tgctaagttc tctggatgtc aagagtaggt aaggttcttc gcgttgcatc gaattaaacc 600
acatgctcca ccgcttgtgc gggcccccgt caattcattt gagttttaac cttgcggccg 660
tactccccag gcggtcgatt taacgcgtta actacgaaag ccacagttca agaccacagc 720
tttcaaatcg acatagttta cggcgtggac taccagggta tctaatcctg tttgctcccc 780
acgctttcgt acctgagcgt cagtattcgt ccagggggcc gccttcgcca ctggtattcc 840
tccagatatc tacacatttc accgctacac ctggaattct acccccctct acgagactct 900
agcctatcag tttcaaatgc agttcctagg ttaagcccag ggatttcaca tctgacttaa 960
taaaccgcct acgtactctt tacgcccagt aattccgatt aacgcttgca ccctccgtat 1020
taccgcggct gctggcacgg agttagccgg tgcttcttct gtaggtaacg tcaatcaata 1080
accgtattaa ggatattgcc ttcctcccta ctgaaagtgc tttacaaccc gaaggccttc 1140
ttcacacacg cggcatggct gcatcagggt ttcccccatt gtgcaatatt ccccactgct 1200
gcctcccgta ggagtctgga ccgtgtctca gttccagtgt ggctggtcat cctctcagac 1260
cagctaggga tcgtcgccta ggtaagctat tacctcacct actagctaat cccatctggg 1320
ttcatctgaa ggtgtgaggc caaaaggtcc cccactttgg tcttacgaca ttatgcggta 1380
ttagctaccg tttccagcag ttatccccct ccatcaggca gatccccaga ctttactcac 1440
ccgttcgctg ctcgccggca aaaaagtaaa cttttttccg ttgccgctca acttgcatgt 1500
gttaggcctg ccgccagcgt tcaatctgag ccatgatcaa actcttcaat taaa 1554
<210> 14
<211> 1539
<212> DNA
<213> Ishikawaella capsulata Mpkobe
<400> 14
aaattgaaga gtttgatcat ggctcagatt gaacgctagc ggcaagctta acacatgcaa 60
gtcgaacggt aacagaaaaa agcttgcttt tttgctgacg agtggcggac gggtgagtaa 120
tgtctgggga tctacctaat ggcgggggat aactactgga aacggtagct aataccgcat 180
aatgttgtaa aaccaaagtg ggggacctta tggcctcaca ccattagatg aacctagatg 240
ggattagctt gtaggtgggg taaaggctca cctaggcaac gatccctagc tggtctgaga 300
ggatgaccag ccacactgga actgagatac ggtccagact cctacgggag gcagcagtgg 360
ggaatcttgc acaatgggcg caagcctgat gcagctatgt cgcgtgtatg aagaaggcct 420
tagggttgta aagtactttc atcggggaag aaggatatga gcctaatatt ctcatatatt 480
gacgttacct gcagaagaag caccggctaa ctccgtgcca gcagccgcgg taacacggag 540
ggtgcgagcg ttaatcggaa ttactgggcg taaagagcac gtaggtggtt tattaagtca 600
tatgtgaaat ccctgggctt aacctaggaa ctgcatgtga aactgataaa ctagagtttc 660
gtagagggag gtggaattcc aggtgtagcg gtgaaatgcg tagatatctg gaggaatatc 720
agaggcgaag gcgaccttct ggacgaaaac tgacactcag gtgcgaaagc gtggggagca 780
aacaggatta gataccctgg tagtccacgc tgtaaacaat gtcgactaaa aaactgtgag 840
cttgacttgt ggtttttgta gctaacgcat taagtcgacc gcctggggag tacggccgca 900
aggttaaaac tcaaatgaat tgacgggggt ccgcacaagc ggtggagcat gtggtttaat 960
tcgatgcaac gcgaaaaacc ttacctggtc ttgacatcca gcgaattata tagaaatata 1020
taagtgcctt tcggggaact ctgagacgct gcatggctgt cgtcagctcg tgttgtgaaa 1080
tgttgggtta agtcccgcaa cgagcgccct tatcctctgt tgccagcggc atggccggga 1140
actcagagga gactgccagt attaaactgg aggaaggtgg ggatgacgtc aagtcatcat 1200
ggcccttatg accagggcta cacacgtgct acaatggtgt atacaaagag aagcaatctc 1260
gcaagagtaa gcaaaactca aaaagtacat cgtagttcgg attagagtct gcaactcgac 1320
tctatgaagt aggaatcgct agtaatcgtg gatcagaatg ccacggtgaa tacgttctct 1380
ggccttgtac acaccgcccg tcacaccatg ggagtaagtt gcaaaagaag taggtagctt 1440
aacctttata ggagggcgct taccactttg tgatttatga ctggggtgaa gtcgtaacaa 1500
ggtaactgta ggggaacctg tggttggatt acctcctta 1539
<210> 15
<211> 1561
<212> DNA
<213> Baumannia cicadellinicola
<400> 15
ttcaattgaa gagtttgatc atggctcaga ttgaacgctg gcggtaagct taacacatgc 60
aagtcgagcg gcatcggaaa gtaaattaat tactttgccg gcaagcggcg aacgggtgag 120
taatatctgg ggatctacct tatggagagg gataactatt ggaaacgata gctaacaccg 180
cataatgtcg tcagaccaaa atgggggacc taatttaggc ctcatgccat aagatgaacc 240
cagatgagat tagctagtag gtgagataat agctcaccta ggcaacgatc tctagttggt 300
ctgagaggat gaccagccac actggaactg agacacggtc cagactccta cgggaggcag 360
cagtggggaa tcttgcacaa tgggggaaac cctgatgcag ctataccgcg tgtgtgaaga 420
aggccttcgg gttgtaaagc actttcagcg gggaagaaaa tgaagttact aataataatt 480
gtcaattgac gttacccgca aaagaagcac cggctaactc cgtgccagca gccgcggtaa 540
gacggagggt gcaagcgtta atcggaatta ctgggcgtaa agcgtatgta ggcggtttat 600
ttagtcaggt gtgaaagccc taggcttaac ctaggaattg catttgaaac tggtaagcta 660
gagtctcgta gaggggggga gaattccagg tgtagcggtg aaatgcgtag agatctggaa 720
gaataccagt ggcgaaggcg cccccctgga cgaaaactga cgctcaagta cgaaagcgtg 780
gggagcaaac aggattagat accctggtag tccacgctgt aaacgatgtc gatttgaagg 840
ttgtagcctt gagctatagc tttcgaagct aacgcattaa atcgaccgcc tggggagtac 900
gaccgcaagg ttaaaactca aatgaattga cgggggcccg cacaagcggt ggagcatgtg 960
gtttaattcg atacaacgcg aaaaacctta cctactcttg acatccagag tataaagcag 1020
aaaagcttta gtgccttcgg gaactctgag acaggtgctg catggctgtc gtcagctcgt 1080
gttgtgaaat gttgggttaa gtcccgcaac gagcgcaacc cttatccttt gttgccaacg 1140
attaagtcgg gaactcaaag gagactgccg gtgataaacc ggaggaaggt gaggataacg 1200
tcaagtcatc atggccctta cgagtagggc tacacacgtg ctacaatggt gcatacaaag 1260
agaagcaatc tcgtaagagt tagcaaacct cataaagtgc atcgtagtcc ggattagagt 1320
ctgcaactcg actctatgaa gtcggaatcg ctagtaatcg tggatcagaa tgccacggtg 1380
aatacgttcc cgggccttgt acacaccgcc cgtcacacca tgggagtgta ttgcaaaaga 1440
agttagtagc ttaactcata atacgagagg gcgcttacca ctttgtgatt cataactggg 1500
gtgaagtcgt aacaaggtaa ccgtagggga acctgcggtt ggatcacctc cttacactaa 1560
a 1561
<210> 16
<211> 1464
<212> DNA
<213> 伴突属(Sodalis)样
<400> 16
attgaacgct ggcggcaggc ctaacacatg caagtcgagc ggcagcggga agaagcttgc 60
ttctttgccg gcgagcggcg gacgggtgag taatgtctgg ggatctgccc gatggagggg 120
gataactact ggaaacggta gctaataccg cataacgtcg caagaccaaa gtgggggacc 180
ttcgggcctc acaccatcgg atgaacccag gtgggattag ctagtaggtg gggtaatggc 240
tcacctaggc gacgatccct agctggtctg agaggatgac cagtcacact ggaactgaga 300
cacggtccag actcctacgg gaggcagcag tggggaatat tgcacaatgg gggaaaccct 360
gatgcagcca tgccgcgtgt gtgaagaagg ccttcgggtt gtaaagcact ttcagcgggg 420
aggaaggcga tggcgttaat agcgctatcg attgacgtta cccgcagaag aagcaccggc 480
taactccgtg ccagcagccg cggtaatacg gagggtgcga gcgttaatcg gaattactgg 540
gcgtaaagcg tacgcaggcg gtctgttaag tcagatgtga aatccccggg ctcaacctgg 600
gaactgcatt tgaaactggc aggctagagt ctcgtagagg ggggtagaat tccaggtgta 660
gcggtgaaat gcgtagagat ctggaggaat accggtggcg aaggcggccc cctggacgaa 720
gactgacgct caggtacgaa agcgtgggga gcaaacagga ttagataccc tggtagtcca 780
cgctgtaaac gatgtcgatt tgaaggttgt ggccttgagc cgtggctttc ggagctaacg 840
tgttaaatcg accgcctggg gagtacggcc gcaaggttaa aactcaaatg aattgacggg 900
ggcccgcaca agcggtggag catgtggttt aattcgatgc aacgcgaaga accttaccta 960
ctcttgacat ccagagaact tggcagagat gctttggtgc cttcgggaac tctgagacag 1020
gtgctgcatg gctgtcgtca gctcgtgttg tgaaatgttg ggttaagtcc cgcaacgagc 1080
gcaaccctta tcctttattg ccagcgattc ggtcgggaac tcaaaggaga ctgccggtga 1140
taaaccggag gaaggtgggg atgacgtcaa gtcatcatgg cccttacgag tagggctaca 1200
cacgtgctac aatggcgcat acaaagagaa gcgatctcgc gagagtcagc ggacctcata 1260
aagtgcgtcg tagtccggat tggagtctgc aactcgactc catgaagtcg gaatcgctag 1320
taatcgtgga tcagaatgcc acggtgaata cgttcccggg ccttgtacac accgcccgtc 1380
acaccatggg agtgggttgc aaaagaagta ggtagcttaa ccttcgggag ggcgcttacc 1440
actttgtgat tcatgactgg ggtg 1464
<210> 17
<211> 1465
<212> DNA
<213> Hartigia pinicola
<400> 17
agatttaacg ctggcggcag gcctaacaca tgcaagtcga gcggtaccag aagaagcttg 60
cttcttgctg acgagcggcg gacgggtgag taatgtatgg ggatctgccc gacagagggg 120
gataactatt ggaaacggta gctaataccg cataatctct gaggagcaaa gcaggggaac 180
ttcggtcctt gcgctatcgg atgaacccat atgggattag ctagtaggtg aggtaatggc 240
tcccctaggc aacgatccct agctggtctg agaggatgat cagccacact gggactgaga 300
cacggcccag actcctacgg gaggcagcag tggggaatat tgcacaatgg gcgaaagcct 360
gatgcagcca tgccgcgtgt atgaagaagg ctttagggtt gtaaagtact ttcagtcgag 420
aggaaaacat tgatgctaat atcatcaatt attgacgttt ccgacagaag aagcaccggc 480
taactccgtg ccagcagccg cggtaatacg gagggtgcaa gcgttaatcg gaattactgg 540
gcgtaaagcg cacgcaggcg gttaattaag ttagatgtga aagccccggg cttaacccag 600
gaatagcata taaaactggt caactagagt attgtagagg ggggtagaat tccatgtgta 660
gcggtgaaat gcgtagagat gtggaggaat accagtggcg aaggcggccc cctggacaaa 720
aactgacgct caaatgcgaa agcgtgggga gcaaacagga ttagataccc tggtagtcca 780
tgctgtaaac gatgtcgatt tggaggttgt tcccttgagg agtagcttcc gtagctaacg 840
cgttaaatcg accgcctggg ggagtacgac tgcaaggtta aaactcaaat gaattgacgg 900
gggcccgcac aagcggtgga gcatgtggtt taattcgatg caacgcgaaa aaccttacct 960
actcttgaca tccagataat ttagcagaaa tgctttagta ccttcgggaa atctgagaca 1020
ggtgctgcat ggctgtcgtc agctcgtgtt gtgaaatgtt gggttaagtc ccgcaacgag 1080
cgcaaccctt atcctttgtt gccagcgatt aggtcgggaa ctcaaaggag actgccggtg 1140
ataaaccgga ggaaggtggg gatgacgtca agtcatcatg gcccttacga gtagggctac 1200
acacgtgcta caatggcata tacaaaggga agcaacctcg cgagagcaag cgaaactcat 1260
aaattatgtc gtagttcaga ttggagtctg caactcgact ccatgaagtc ggaatcgcta 1320
gtaatcgtag atcagaatgc tacggtgaat acgttcccgg gccttgtaca caccgcccgt 1380
cacaccatgg gagtgggttg caaaagaagt aggtaactta accttatgga aagcgcttac 1440
cactttgtga ttcataactg gggtg 1465
<210> 18
<211> 1571
<212> DNA
<213> Tremblaya phenacola
<400> 18
aggtaatcca gccacacctt ccagtacggc taccttgtta cgacttcacc ccagtcacaa 60
cccttacctt cggaactgcc ctcctcacaa ctcaaaccac caaacacttt taaatcaggt 120
tgagagaggt taggcctgtt acttctggca agaattattt ccatggtgtg acgggcggtg 180
tgtacaagac ccgagaacat attcaccgtg gcatgctgat ccacgattac tagcaattcc 240
aacttcatgc actcgagttt cagagtacaa tccgaactga ggccggcttt gtgagattag 300
ctcccttttg caagttggca actctttggt ccggccattg tatgatgtgt gaagccccac 360
ccataaaggc catgaggact tgacgtcatc cccaccttcc tccaacttat cgctggcagt 420
ctctttaagg taactgacta atccagtagc aattaaagac aggggttgcg ctcgttacag 480
gacttaaccc aacatctcac gacacgagct gacgacagcc atgcagcacc tgtgcactaa 540
ttctctttca agcactcccg cttctcaaca ggatcttagc catatcaaag gtaggtaagg 600
tttttcgcgt tgcatcgaat taatccacat catccactgc ttgtgcgggt ccccgtcaat 660
tcctttgagt tttaaccttg cggccgtact ccccaggcgg tcgacttgtg cgttagctgc 720
accactgaaa aggaaaactg cccaatggtt agtcaacatc gtttagggca tggactacca 780
gggtatctaa tcctgtttgc tccccatgct ttagtgtctg agcgtcagta acgaaccagg 840
aggctgccta cgctttcggt attcctccac atctctacac atttcactgc tacatgcgga 900
attctacctc cccctctcgt actccagcct gccagtaact gccgcattct gaggttaagc 960
ctcagccttt cacagcaatc ttaacaggca gcctgcacac cctttacgcc caataaatct 1020
gattaacgct cgcaccctac gtattaccgc ggctgctggc acgtagtttg ccggtgctta 1080
ttctttcggt acagtcacac caccaaattg ttagttgggt ggctttcttt ccgaacaaaa 1140
gtgctttaca acccaaaggc cttcttcaca cacgcggcat tgctggatca ggcttccgcc 1200
cattgtccaa gattcctcac tgctgccttc ctcagaagtc tgggccgtgt ctcagtccca 1260
gtgtggctgg ccgtcctctc agaccagcta ccgatcattg ccttgggaag ccattacctt 1320
tccaacaagc taatcagaca tcagccaatc tcagagcgca aggcaattgg tcccctgctt 1380
tcattctgct tggtagagaa ctttatgcgg tattaattag gctttcacct agctgtcccc 1440
cactctgagg catgttctga tgcattactc acccgtttgc cacttgccac caagcctaag 1500
cccgtgttgc cgttcgactt gcatgtgtaa ggcatgccgc tagcgttcaa tctgagccag 1560
gatcaaactc t 1571
<210> 19
<211> 1535
<212> DNA
<213> Tremblaya princeps
<400> 19
agagtttgat cctggctcag attgaacgct agcggcatgc attacacatg caagtcgtac 60
ggcagcacgg gcttaggcct ggtggcgagt ggcgaacggg tgagtaacgc ctcggaacgt 120
gccttgtagt gggggatagc ctggcgaaag ccagattaat accgcatgaa gccgcacagc 180
atgcgcggtg aaagtggggg attctagcct cacgctactg gatcggccgg ggtctgatta 240
gctagttggc ggggtaatgg cccaccaagg cttagatcag tagctggtct gagaggacga 300
tcagccacac tgggactgag acacggccca gactcctacg ggaggcagca gtggggaatc 360
ttggacaatg ggcgcaagcc tgatccagca atgccgcgtg tgtgaagaag gccttcgggt 420
cgtaaagcac ttttgttcgg gatgaagggg ggcgtgcaaa caccatgccc tcttgacgat 480
accgaaagaa taagcaccgg ctaactacgt gccagcagcc gcggtaatac gtagggtgcg 540
agcgttaatc ggaatcactg ggcgtaaagg gtgcgcgggt ggtttgccaa gacccctgta 600
aaatcctacg gcccaaccgt agtgctgcgg aggttactgg taagcttgag tatggcagag 660
gggggtagaa ttccaggtgt agcggtgaaa tgcgtagata tctggaggaa taccgaaggc 720
gaaggcaacc ccctgggcca tcactgacac tgaggcacga aagcgtgggg agcaaacagg 780
attagatacc ctggtagtcc acgccctaaa ccatgtcgac tagttgtcgg ggggagccct 840
ttttcctcgg tgacgaagct aacgcatgaa gtcgaccgcc tggggagtac gaccgcaagg 900
ttaaaactca aaggaattga cggggacccg cacaagcggt ggatgatgtg gattaattcg 960
atgcaacgcg aaaaacctta cctacccttg acatggcgga gattctgccg agaggcggaa 1020
gtgctcgaaa gagaatccgt gcacaggtgc tgcatggctg tcgtcagctc gtgtcgtgag 1080
atgttgggtt aagtcccata acgagcgcaa cccccgtctt tagttgctac cactggggca 1140
ctctatagag actgccggtg ataaaccgga ggaaggtggg gacgacgtca agtcatcatg 1200
gcctttatgg gtagggcttc acacgtcata caatggctgg agcaaagggt cgccaactcg 1260
agagagggag ctaatcccac aaacccagcc ccagttcgga ttgcactctg caactcgagt 1320
gcatgaagtc ggaatcgcta gtaatcgtgg atcagcatgc cacggtgaat acgttctcgg 1380
gtcttgtaca caccgcccgt cacaccatgg gagtaagccg catcagaagc agcctcccta 1440
accctatgct gggaaggagg ctgcgaaggt ggggtctatg actggggtga agtcgtaaca 1500
aggtagccgt accggaaggt gcggctggat tacct 1535
<210> 20
<211> 1450
<212> DNA
<213> Nasuia deltocephalinicola
<400> 20
agtttaatcc tggctcagat ttaacgcttg cgacatgcct aacacatgca agttgaacgt 60
tgaaaatatt tcaaagtagc gtataggtga gtataacatt taaacatacc ttaaagttcg 120
gaataccccg atgaaaatcg gtataatacc gtataaaagt atttaagaat taaagcgggg 180
aaaacctcgt gctataagat tgttaaatgc ctgattagtt tgttggtttt taaggtaaaa 240
gcttaccaag actttgatca gtagctattc tgtgaggatg tatagccaca ttgggattga 300
aataatgccc aaacctctac ggagggcagc agtggggaat attggacaat gagcgaaagc 360
ttgatccagc aatgtcgcgt gtgcgattaa gggaaactgt aaagcacttt tttttaagaa 420
taagaaattt taattaataa ttaaaatttt tgaatgtatt aaaagaataa gtaccgacta 480
atcacgtgcc agcagtcgcg gtaatacgtg gggtgcgagc gttaatcgga tttattgggc 540
gtaaagtgta ttcaggctgc ttaaaaagat ttatattaaa tatttaaatt aaatttaaaa 600
aatgtataaa ttactattaa gctagagttt agtataagaa aaaagaattt tatgtgtagc 660
agtgaaatgc gttgatatat aaaggaacgc cgaaagcgaa agcatttttc tgtaatagaa 720
ctgacgctta tatacgaaag cgtgggtagc aaacaggatt agataccctg gtagtccacg 780
ccctaaacta tgtcaattaa ctattagaat tttttttagt ggtgtagcta acgcgttaaa 840
ttgaccgcct gggtattacg atcgcaagat taaaactcaa aggaattgac ggggaccagc 900
acaagcggtg gatgatgtgg attaattcga tgatacgcga aaaaccttac ctgcccttga 960
catggttaga attttattga aaaataaaag tgcttggaaa agagctaaca cacaggtgct 1020
gcatggctgt cgtcagctcg tgtcgtgaga tgttgggtta agtcccgcaa cgagcgcaac 1080
ccctactctt agttgctaat taaagaactt taagagaaca gctaacaata agtttagagg 1140
aaggagggga tgacttcaag tcctcatggc ccttatgggc agggcttcac acgtcataca 1200
atggttaata caaaaagttg caatatcgta agattgagct aatctttaaa attaatctta 1260
gttcggattg tactctgcaa ctcgagtaca tgaagttgga atcgctagta atcgcggatc 1320
agcatgccgc ggtgaatagt ttaactggtc ttgtacacac cgcccgtcac accatggaaa 1380
taaatcttgt tttaaatgaa gtaatatatt ttatcaaaac aggttttgta accggggtga 1440
agtcgtaaca 1450
<210> 21
<211> 1536
<212> DNA
<213> Zinderia insecticola CARI
<400> 21
atataaataa gagtttgatc ctggctcaga ttgaacgcta gcggtatgct ttacacatgc 60
aagtcgaacg acaatattaa agcttgcttt aatataaagt ggcgaacggg tgagtaatat 120
atcaaaacgt accttaaagt gggggataac taattgaaaa attagataat accgcatatt 180
aatcttagga tgaaaatagg aataatatct tatgctttta gatcggttga tatctgatta 240
gctagttggt agggtaaatg cttaccaagg caatgatcag tagctggttt tagcgaatga 300
tcagccacac tggaactgag acacggtcca gacttctacg gaaggcagca gtggggaata 360
ttggacaatg ggagaaatcc tgatccagca ataccgcgtg agtgatgaag gccttagggt 420
cgtaaaactc ttttgttagg aaagaaataa ttttaaataa tatttaaaat tgatgacggt 480
acctaaagaa taagcaccgg ctaactacgt gccagcagcc gcggtaatac gtagggtgca 540
agcgttaatc ggaattattg ggcgtaaaga gtgcgtaggc tgttatataa gatagatgtg 600
aaatacttaa gcttaactta agaactgcat ttattactgt ttaactagag tttattagag 660
agaagtggaa ttttatgtgt agcagtgaaa tgcgtagata tataaaggaa tatcgatggc 720
gaaggcagct tcttggaata atactgacgc tgaggcacga aagcgtgggg agcaaacagg 780
attagatacc ctggtagtcc acgccctaaa ctatgtctac tagttattaa attaaaaata 840
aaatttagta acgtagctaa cgcattaagt agaccgcctg gggagtacga tcgcaagatt 900
aaaactcaaa ggaattgacg gggacccgca caagcggtgg atgatgtgga ttaattcgat 960
gcaacacgaa aaaccttacc tactcttgac atgtttggaa ttttaaagaa atttaaaagt 1020
gcttgaaaaa gaaccaaaac acaggtgctg catggctgtc gtcagctcgt gtcgtgagat 1080
gttgggttaa gtcccgcaac gagcgcaacc cttgttatta tttgctaata aaaagaactt 1140
taataagact gccaatgaca aattggagga aggtggggat gacgtcaagt cctcatggcc 1200
cttatgagta gggcttcaca cgtcatacaa tgatatatac aatgggtagc aaatttgtga 1260
aaatgagcca atccttaaag tatatcttag ttcggattgt agtctgcaac tcgactacat 1320
gaagttggaa tcgctagtaa tcgcggatca gcatgccgcg gtgaatacgt tctcgggtct 1380
tgtacacacc gcccgtcaca ccatggaagt gatttttacc agaaattatt tgtttaacct 1440
ttattggaaa aaaataatta aggtagaatt catgactggg gtgaagtcgt aacaaggtag 1500
cagtatcgga aggtgcggct ggattacatt ttaaat 1536
<210> 22
<211> 1423
<212> DNA
<213> Hodgkinia
<400> 22
aatgctggcg gcaggcctaa cacatgcaag tcgagcggac aacgttcaaa cgttgttagc 60
ggcgaacggg tgagtaatac gtgagaatct acccatccca acgtgataac atagtcaaca 120
ccatgtcaat aacgtatgat tcctgcaaca ggtaaagatt ttatcgggga tggatgagct 180
cacgctagat tagctagttg gtgagataaa agcccaccaa ggccaagatc tatagctggt 240
ctggaaggat ggacagccac attgggactg agacaaggcc caaccctcta aggagggcag 300
cagtgaggaa tattggacaa tgggcgtaag cctgatccag ccatgccgca tgagtgattg 360
aaggtccaac ggactgtaaa actcttttct ccagagatca taaatgatag tatctggtga 420
tataagctcc ggccaacttc gtgccagcag ccgcggtaat acgaggggag cgagtattgt 480
tcggttttat tgggcgtaaa gggtgtccag gttgctaagt aagttaacaa caaaatcttg 540
agattcaacc tcataacgtt cggttaatac tactaagctc gagcttggat agagacaaac 600
ggaattccga gtgtagaggt gaaattcgtt gatacttgga ggaacaccag aggcgaaggc 660
ggtttgtcat accaagctga cactgaagac acgaaagcat ggggagcaaa caggattaga 720
taccctggta gtccatgccc taaacgttga gtgctaacag ttcgatcaag ccacatgcta 780
tgatccagga ttgtacagct aacgcgttaa gcactccgcc tgggtattac gaccgcaagg 840
ttaaaactca aaggaattga cggagacccg cacaagcggt ggagcatgtg gtttaattcg 900
aagctacacg aagaacctta ccagcccttg acataccatg gccaaccatc ctggaaacag 960
gatgttgttc aagttaaacc cttgaaatgc caggaacagg tgctgcatgg ctgttgtcag 1020
ttcgtgtcgt gagatgtatg gttaagtccc aaaacgaaca caaccctcac ccatagttgc 1080
cataaacaca attgggttct ctatgggtac tgctaacgta agttagagga aggtgaggac 1140
cacaacaagt catcatggcc cttatgggct gggccacaca catgctacaa tggtggttac 1200
aaagagccgc aacgttgtga gaccgagcaa atctccaaag accatctcag tccggattgt 1260
actctgcaac ccgagtacat gaagtaggaa tcgctagtaa tcgtggatca gcatgccacg 1320
gtgaatacgt tctcgggtct tgtacacgcc gcccgtcaca ccatgggagc ttcgctccga 1380
tcgaagtcaa gttacccttg accacatctt ggcaagtgac cga 1423
<210> 23
<211> 1504
<212> DNA
<213> 沃尔巴克氏体属物种(Wolbachia sp.)wPip
<400> 23
aaatttgaga gtttgatcct ggctcagaat gaacgctggc ggcaggccta acacatgcaa 60
gtcgaacgga gttatattgt agcttgctat ggtataactt agtggcagac gggtgagtaa 120
tgtataggaa tctacctagt agtacggaat aattgttgga aacgacaact aataccgtat 180
acgccctacg ggggaaaaat ttattgctat tagatgagcc tatattagat tagctagttg 240
gtggggtaat agcctaccaa ggtaatgatc tatagctgat ctgagaggat gatcagccac 300
actggaactg agatacggtc cagactccta cgggaggcag cagtggggaa tattggacaa 360
tgggcgaaag cctgatccag ccatgccgca tgagtgaaga aggcctttgg gttgtaaagc 420
tcttttagtg aggaagataa tgacggtact cacagaagaa gtcctggcta actccgtgcc 480
agcagccgcg gtaatacgga gagggctagc gttattcgga attattgggc gtaaagggcg 540
cgtaggctgg ttaataagtt aaaagtgaaa tcccgaggct taaccttgga attgctttta 600
aaactattaa tctagagatt gaaagaggat agaggaattc ctgatgtaga ggtaaaattc 660
gtaaatatta ggaggaacac cagtggcgaa ggcgtctatc tggttcaaat ctgacgctga 720
agcgcgaagg cgtggggagc aaacaggatt agataccctg gtagtccacg ctgtaaacga 780
tgaatgttaa atatggggag tttactttct gtattacagc taacgcgtta aacattccgc 840
ctggggacta cggtcgcaag attaaaactc aaaggaattg acggggaccc gcacaagcgg 900
tggagcatgt ggtttaattc gatgcaacgc gaaaaacctt accacttctt gacatgaaaa 960
tcatacctat tcgaagggat agggtcggtt cggccggatt ttacacaagt gttgcatggc 1020
tgtcgtcagc tcgtgtcgtg agatgttggg ttaagtcccg caacgagcgc aaccctcatc 1080
cttagttgcc atcaggtaat gctgagtact ttaaggaaac tgccagtgat aagctggagg 1140
aaggtgggga tgatgtcaag tcatcatggc ctttatggag tgggctacac acgtgctaca 1200
atggtgtcta caatgggctg caaggtgcgc aagcctaagc taatccctaa aagacatctc 1260
agttcggatt gtactctgca actcgagtac atgaagttgg aatcgctagt aatcgtggat 1320
cagcatgcca cggtgaatac gttctcgggt cttgtacaca ctgcccgtca cgccatggga 1380
attggtttca ctcgaagcta atggcctaac cgcaaggaag gagttattta aagtgggatc 1440
agtgactggg gtgaagtcgt aacaaggtag cagtagggga atctgcagct ggattacctc 1500
ctta 1504
<210> 24
<211> 1532
<212> DNA
<213> Uzinura diaspidicola
<400> 24
aaaggagata ttccaaccac accttccggt acggttacct tgttacgact tagccctagt 60
catcaagttt accttaggca gaccactgaa ggattactga cttcaggtac ccccgactcc 120
catggcttga cgggcggtgt gtacaaggtt cgagaacata ttcaccgcgc cattgctgat 180
gcgcgattac tagcgattcc tgcttcatag agtcgaattg cagactccaa tccgaactga 240
gactggtttt agagattagc tcctgatcac ccagtggctg ccctttgtaa ccagccattg 300
tagcacgtgt gtagcccaag gcatagaggc catgatgatt tgacatcatc cccaccttcc 360
tcacagttta caccggcagt tttgttagag tccccggctt tacccgatgg caactaacaa 420
taggggttgc gctcgttata ggacttaacc aaacacttca cagcacgaac tgaagacaac 480
catgcagcac cttgtaatac gtcgtataga ctaagctgtt tccagcttat tcgtaataca 540
tttaagcctt ggtaaggttc ctcgcgtatc atcgaattaa accacatgct ccaccgcttg 600
tgcgaacccc cgtcaattcc tttgagtttc aatcttgcga ctgtacttcc caggtggatc 660
acttatcgct ttcgctaagc cactgaatat cgtttttcca atagctagtg atcatcgttt 720
agggcgtgga ctaccagggt atctaatcct gtttgctccc cacgctttcg tgcactgagc 780
gtcagtaaag atttagcaac ctgccttcgc tatcggtgtt ctgtatgata tctatgcatt 840
tcaccgctac accatacatt ccagatgctc caatcttact caagtttacc agtatcaata 900
gcaattttac agttaagctg taagctttca ctactgactt aataaacagc ctacacaccc 960
tttaaaccca ataaatccga ataacgcttg tgtcatccgt attgccgcgg ctgctggcac 1020
ggaattagcc gacacttatt cgtatagtac cttcaatctc ctatcacgta agatatttta 1080
tttctataca aaagcagttt acaacctaaa agaccttcat cctgcacgcg acgtagctgg 1140
ttcagagttt cctccattga ccaatattcc tcactgctgc ctcccgtagg agtctggtcc 1200
gtgtctcagt accagtgtgg aggtacaccc tcttaggccc cctactgatc atagtcttgg 1260
tagagccatt acctcaccaa ctaactaatc aaacgcaggc tcatcttttg ccacctaagt 1320
tttaataaag gctccatgca gaaactttat attatggggg attaatcaga atttcttctg 1380
gctatacccc agcaaaaggt agattgcata cgtgttactc acccattcgc cggtcgccga 1440
caaattaaaa atttttcgat gcccctcgac ttgcatgtgt taagctcgcc gctagcgtta 1500
attctgagcc aggatcaaac tcttcgttgt ag 1532
<210> 25
<211> 1470
<212> DNA
<213> Sulcia muelleri
<400> 25
ctcaggataa acgctagcgg agggcttaac acatgcaagt cgaggggcag caaaaataat 60
tatttttggc gaccggcaaa cgggtgagta atacatacgt aactttcctt atgctgagga 120
atagcctgag gaaacttgga ttaatacctc ataatacaat tttttagaaa gaaaaattgt 180
taaagtttta ttatggcata agataggcgt atgtccaatt agttagttgg taaggtaatg 240
gcttaccaag acgatgattg gtagggggcc tgagaggggc gttcccccac attggtactg 300
agacacggac caaacttcta cggaaggctg cagtgaggaa tattggtcaa tggaggaaac 360
tctgaaccag ccactccgcg tgcaggatga aagaaagcct tattggttgt aaactgcttt 420
tgtatatgaa taaaaaattc taattataga aataattgaa ggtaatatac gaataagtat 480
cgactaactc tgtgccagca gtcgcggtaa gacagaggat acaagcgtta tccggattta 540
ttgggtttaa agggtgcgta ggcggttttt aaagtcagta gtgaaatctt aaagcttaac 600
tttaaaagtg ctattgatac tgaaaaacta gagtaaggtt ggagtaactg gaatgtgtgg 660
tgtagcggtg aaatgcatag atatcacaca gaacaccgat agcgaaagca agttactaac 720
cctatactga cgctgagtca cgaaagcatg gggagcaaac aggattagat accctggtag 780
tccatgccgt aaacgatgat cactaactat tgggttttat acgttgtaat tcagtggtga 840
agcgaaagtg ttaagtgatc cacctgagga gtacgaccgc aaggttgaaa ctcaaaggaa 900
ttgacggggg cccgcacaat cggtggagca tgtggtttaa ttcgatgata cacgaggaac 960
cttaccaaga cttaaatgta ctacgaataa attggaaaca atttagtcaa gcgacggagt 1020
acaaggtgct gcatggttgt cgtcagctcg tgccgtgagg tgtaaggtta agtcctttaa 1080
acgagcgcaa cccttattat tagttgccat cgagtaatgt caggggactc taataagact 1140
gccggcgcaa gccgagagga aggtggggat gacgtcaaat catcacggcc cttacgtctt 1200
gggccacaca cgtgctacaa tgatcggtac aaaagggagc gactgggtga ccaggagcaa 1260
atccagaaag ccgatctaag ttcggattgg agtctgaaac tcgactccat gaagctggaa 1320
tcgctagtaa tcgtgcatca gccatggcac ggtgaatatg ttcccgggcc ttgtacacac 1380
cgcccgtcaa gccatggaag ttggaagtac ctaaagttgg ttcgctacct aaggtaagtc 1440
taataactgg ggctaagtcg taacaaggta 1470
<210> 26
<211> 1761
<212> DNA
<213> Symbiotaphrina buchneri
<220>
<221> 尚未归类的特征
<222> (30)..(30)
<223> n是a、g、c或t
<220>
<221> 尚未归类的特征
<222> (40)..(40)
<223> n是a、g、c或t
<400> 26
agattaagcc atgcaagtct aagtataagn aatctatacn gtgaaactgc gaatggctca 60
ttaaatcagt tatcgtttat ttgatagtac cttactacat ggataaccgt ggtaattcta 120
gagctaatac atgctaaaaa ccccgacttc ggaaggggtg tatttattag ataaaaaacc 180
aatgcccttc ggggctcctt ggtgattcat gataacttaa cgaatcgcat ggccttgcgc 240
cggcgatggt tcattcaaat ttctgcccta tcaactttcg atggtaggat agtggcctac 300
catggtttta acgggtaacg gggaattagg gttcgattcc ggagagggag cctgagaaac 360
ggctaccaca tccaaggaag gcagcaggcg cgcaaattac ccaatcccga cacggggagg 420
tagtgacaat aaatactgat acagggctct tttgggtctt gtaattggaa tgagtacaat 480
ttaaatccct taacgaggaa caattggagg gcaagtctgg tgccagcagc cgcggtaatt 540
ccagctccaa tagcgtatat taaagttgtt gcagttaaaa agctcgtagt tgaaccttgg 600
gcctggctgg ccggtccgcc taaccgcgtg tactggtccg gccgggcctt tccttctggg 660
gagccgcatg cccttcactg ggtgtgtcgg ggaaccagga cttttacttt gaaaaaatta 720
gagtgttcaa agcaggccta tgctcgaata cattagcatg gaataataga ataggacgtg 780
cggttctatt ttgttggttt ctaggaccgc cgtaatgatt aatagggata gtcgggggca 840
tcagtattca attgtcagag gtgaaattct tggatttatt gaagactaac tactgcgaaa 900
gcatttgcca aggatgtttt cattaatcag tgaacgaaag ttaggggatc gaagacgatc 960
agataccgtc gtagtcttaa ccataaacta tgccgactag ggatcgggcg atgttattat 1020
tttgactcgc tcggcacctt acgagaaatc aaagtctttg ggttctgggg ggagtatggt 1080
cgcaaggctg aaacttaaag aaattgacgg aagggcacca ccaggagtgg agcctgcggc 1140
ttaatttgac tcaacacggg gaaactcacc aggtccagac acattaagga ttgacagatt 1200
gagagctctt tcttgattat gtgggtggtg gtgcatggcc gttcttagtt ggtggagtga 1260
tttgtctgct taattgcgat aacgaacgag accttaacct gctaaatagc ccggtccgct 1320
ttggcgggcc gctggcttct tagagggact atcggctcaa gccgatggaa gtttgaggca 1380
ataacaggtc tgtgatgccc ttagatgttc tgggccgcac gcgcgctaca ctgacagagc 1440
caacgagtaa atcaccttgg ccggaaggtc tgggtaatct tgttaaactc tgtcgtgctg 1500
gggatagagc attgcaatta ttgctcttca acgaggaatt cctagtaagc gcaagtcatc 1560
agcttgcgct gattacgtcc ctgccctttg tacacaccgc ccgtcgctac taccgattga 1620
atggctcagt gaggccttcg gactggcaca gggacgttgg caacgacgac ccagtgccgg 1680
aaagttggtc aaacttggtc atttagagga agtaaaagtc gtaacaaggt ttccgtaggt 1740
gaacctgcgg aaggatcatt a 1761
<210> 27
<211> 1801
<212> DNA
<213> Symbiotaphrina kochii
<220>
<221> 尚未归类的特征
<222> (1753)..(1755)
<223> n是a、g、c或t
<400> 27
tacctggttg attctgccag tagtcatatg cttgtctcaa agattaagcc atgcaagtct 60
aagtataagc aatctatacg gtgaaactgc gaatggctca ttaaatcagt tatcgtttat 120
ttgatagtac cttactacat ggataaccgt ggtaattcta gagctaatac atgctaaaaa 180
cctcgacttc ggaaggggtg tatttattag ataaaaaacc aatgcccttc ggggctcctt 240
ggtgattcat gataacttaa cgaatcgcat ggccttgcgc cggcgatggt tcattcaaat 300
ttctgcccta tcaactttcg atggtaggat agtggcctac catggtttca acgggtaacg 360
gggaattagg gttcgattcc ggagagggag cctgagaaac ggctaccaca tccaaggaag 420
gcagcaggcg cgcaaattac ccaatcccga cacggggagg tagtgacaat aaatactgat 480
acagggctct tttgggtctt gtaattggaa tgagtacaat ttaaatccct taacgaggaa 540
caattggagg gcaagtctgg tgccagcagc cgcggtaatt ccagctccaa tagcgtatat 600
taaagttgtt gcagttaaaa agctcgtagt tgaaccttgg gcctggctgg ccggtccgcc 660
taaccgcgtg tactggtccg gccgggcctt tccttctggg gagccgcatg cccttcactg 720
ggtgtgtcgg ggaaccagga cttttacttt gaaaaaatta gagtgttcaa agcaggccta 780
tgctcgaata cattagcatg gaataataga ataggacgtg tggttctatt ttgttggttt 840
ctaggaccgc cgtaatgatt aatagggata gtcgggggca tcagtattca attgtcagag 900
gtgaaattct tggatttatt gaagactaac tactgcgaaa gcatttgcca aggatgtttt 960
cattaatcag tgaacgaaag ttaggggatc gaagacgatc agataccgtc gtagtcttaa 1020
ccataaacta tgccgactag ggatcgggcg atgttattat tttgactcgc tcggcacctt 1080
acgagaaatc aaagtctttg ggttctgggg ggagtatggt cgcaaggctg aaacttaaag 1140
aaattgacgg aagggcacca ccaggagtgg agcctgcggc ttaatttgac tcaacacggg 1200
gaaactcacc aggtccagac acattaagga ttgacagatt gagagctctt tcttgattat 1260
gtgggtggtg gtgcatggcc gttcttagtt ggtggagtga tttgtctgct taattgcgat 1320
aacgaacgag accttaacct gctaaatagc ccggtccgct ttggcgggcc gctggcttct 1380
tagagggact atcggctcaa gccgatggaa gtttgaggca ataacaggtc tgtgatgccc 1440
ttagatgttc tgggccgcac gcgcgctaca ctgacagagc caacgagtac atcaccttgg 1500
ccggaaggtc tgggtaatct tgttaaactc tgtcgtgctg gggatagagc attgcaatta 1560
ttgctcttca acgaggaatt cctagtaagc gcaagtcatc agcttgcgct gattacgtcc 1620
ctgccctttg tacacaccgc ccgtcgctac taccgattga atggctcagt gaggccttcg 1680
gactggcaca gggacgttgg caacgacgac ccagtgccgg aaagttcgtc aaacttggtc 1740
atttagagga agnnnaagtc gtaacaaggt ttccgtaggt gaacctgcgg aaggatcatt 1800
a 1801
<210> 28
<211> 1490
<212> DNA
<213> 伯克霍尔德氏菌属物种(Burkholderia sp)SFA1
<400> 28
agtttgatcc tggctcagat tgaacgctgg cggcatgcct tacacatgca agtcgaacgg 60
cagcacgggg gcaaccctgg tggcgagtgg cgaacgggtg agtaatacat cggaacgtgt 120
cctgtagtgg gggatagccc ggcgaaagcc ggattaatac cgcatacgac ctaagggaga 180
aagcggggga tcttcggacc tcgcgctata ggggcggccg atggcagatt agctagttgg 240
tggggtaaag gcctaccaag gcgacgatct gtagctggtc tgagaggacg accagccaca 300
ctgggactga gacacggccc agactcctac gggaggcagc agtggggaat tttggacaat 360
gggggcaacc ctgatccagc aatgccgcgt gtgtgaagaa ggcttcgggt tgtaaagcac 420
ttttgtccgg aaagaaaact tcgtccctaa tatggatgga ggatgacggt accggaagaa 480
taagcaccgg ctaactacgt gccagcagcc gcggtaatac gtagggtgcg agcgttaatc 540
ggaattactg ggcgtaaagc gtgcgcaggc ggtctgttaa gaccgatgtg aaatccccgg 600
gcttaacctg ggaactgcat tggtgactgg caggctttga gtgtggcaga ggggggtaga 660
attccacgtg tagcagtgaa atgcgtagag atgtggagga ataccgatgg cgaaggcagc 720
cccctgggcc aactactgac gctcatgcac gaaagcgtgg ggagcaaaca ggattagata 780
ccctggtagt ccacgcccta aacgatgtca actagttgtt ggggattcat ttccttagta 840
acgtagctaa cgcgtgaagt tgaccgcctg gggagtacgg tcgcaagatt aaaactcaaa 900
ggaattgacg gggacccgca caagcggtgg atgatgtgga ttaattcgat gcaacgcgaa 960
aaaccttacc tacccttgac atggtcggaa ccctgctgaa aggtgggggt gctcgaaaga 1020
gaaccggcgc acaggtgctg catggctgtc gtcagctcgt gtcgtgagat gttgggttaa 1080
gtcccgcaac gagcgcaacc cttgtcctta gttgctacgc aagagcactc taaggagact 1140
gccggtgaca aaccggagga aggtggggat gacgtcaagt cctcatggcc cttatgggta 1200
gggcttcaca cgtcatacaa tggtcggaac agagggttgc caagccgcga ggtggagcca 1260
atcccagaaa accgatcgta gtccggatcg cagtctgcaa ctcgactgcg tgaagctgga 1320
atcgctagta atcgcggatc agcatgccgc ggtgaatacg ttcccgggtc ttgtacacac 1380
cgcccgtcac accatgggag tgggtttcac cagaagtagg tagcctaacc gcaaggaggg 1440
cgcttaccac ggtgggattc atgactgggg tgaagtcgta acaaggtagc 1490
<210> 29
<211> 1408
<212> DNA
<213> 伯克霍尔德氏菌属物种(Burkholderia sp)KM-A
<400> 29
gcaaccctgg tggcgagtgg cgaacgggtg agtaatacat cggaacgtgt cctgtagtgg 60
gggatagccc ggcgaaagcc ggattaatac cgcatacgat ctacggaaga aagcggggga 120
tccttcggga cctcgcgcta taggggcggc cgatggcaga ttagctagtt ggtggggtaa 180
aggcctacca aggcgacgat ctgtagctgg tctgagagga cgaccagcca cactgggact 240
gagacacggc ccagactcct acgggaggca gcagtgggga attttggaca atgggggcaa 300
ccctgatcca gcaatgccgc gtgtgtgaag aaggccttcg ggttgtaaag cacttttgtc 360
cggaaagaaa acgtcttggt taatacctga ggcggatgac ggtaccggaa gaataagcac 420
cggctaacta cgtgccagca gccgcggtaa tacgtagggt gcgagcgtta atcggaatta 480
ctgggcgtaa agcgtgcgca ggcggtctgt taagaccgat gtgaaatccc cgggcttaac 540
ctgggaactg cattggtgac tggcaggctt tgagtgtggc agaggggggt agaattccac 600
gtgtagcagt gaaatgcgta gagatgtgga ggaataccga tggcgaaggc agccccctgg 660
gccaacactg acgctcatgc acgaaagcgt ggggagcaaa caggattaga taccctggta 720
gtccacgccc taaacgatgt caactagttg ttggggattc atttccttag taacgtagct 780
aacgcgtgaa gttgaccgcc tggggagtac ggtcgcaaga ttaaaactca aaggaattga 840
cggggacccg cacaagcggt ggatgatgtg gattaattcg atgcaacgcg aaaaacctta 900
cctacccttg acatggtcgg aagtctgctg agaggtggac gtgctcgaaa gagaaccggc 960
gcacaggtgc tgcatggctg tcgtcagctc gtgtcgtgag atgttgggtt aagtcccgca 1020
acgagcgcaa cccttgtcct tagttgctac gcaagagcac tctaaggaga ctgccggtga 1080
caaaccggag gaaggtgggg atgacgtcaa gtcctcatgg cccttatggg tagggcttca 1140
cacgtcatac aatggtcgga acagagggtt gccaagccgc gaggtggagc caatcccaga 1200
aaaccgatcg tagtccggat cgcagtctgc aactcgactg cgtgaagctg gaatcgctag 1260
taatcgcgga tcagcatgcc gcggtgaata cgttcccggg tcttgtacac accgcccgtc 1320
acaccatggg agtgggtttc accagaagta ggtagcctaa ccgcaaggag ggcgcttacc 1380
acggtgggat tcatgactgg ggtgaagt 1408
<210> 30
<211> 1383
<212> DNA
<213> 伯克霍尔德氏菌属物种(Burkholderia sp)KM-G
<400> 30
gcaaccctgg tggcgagtgg cgaacgggtg agtaatacat cggaacgtgt cctgtagtgg 60
gggatagccc ggcgaaagcc ggattaatac cgcatacgac ctaagggaga aagcggggga 120
tcttcggacc tcgcgctata ggggcggccg atggcagatt agctagttgg tggggtaaag 180
gcctaccaag gcgacgatct gtagctggtc tgagaggacg accagccaca ctgggactga 240
gacacggccc agactcctac gggaggcagc agtggggaat tttggacaat gggggcaacc 300
ctgatccagc aatgccgcgt gtgtgaagaa ggccttcggg ttgtaaagca cttttgtccg 360
gaaagaaaac ttcgaggtta atacccttgg aggatgacgg taccggaaga ataagcaccg 420
gctaactacg tgccagcagc cgcggtaata cgtagggtgc gagcgttaat cggaattact 480
gggcgtaaag cgtgcgcagg cggtctgtta agaccgatgt gaaatccccg ggcttaacct 540
gggaactgca ttggtgactg gcaggctttg agtgtggcag aggggggtag aattccacgt 600
gtagcagtga aatgcgtaga gatgtggagg aataccgatg gcgaaggcag ccccctgggc 660
caacactgac gctcatgcac gaaagcgtgg ggagcaaaca ggattagata ccctggtagt 720
ccacgcccta aacgatgtca actagttgtt ggggattcat ttccttagta acgtagctaa 780
cgcgtgaagt tgaccgcctg gggagtacgg tcgcaagatt aaaactcaaa ggaattgacg 840
gggacccgca caagcggtgg atgatgtgga ttaattcgat gcaacgcgaa aaaccttacc 900
tacccttgac atggtcggaa gtctgctgag aggtggacgt gctcgaaaga gaaccggcgc 960
acaggtgctg catggctgtc gtcagctcgt gtcgtgagat gttgggttaa gtcccgcaac 1020
gagcgcaacc cttgtcctta gttgctacgc aagagcactc taaggagact gccggtgaca 1080
aaccggagga aggtggggat gacgtcaagt cctcatggcc cttatgggta gggcttcaca 1140
cgtcatacaa tggtcggaac agagggttgc caagccgcga ggtggagcca atcccagaaa 1200
accgatcgta gtccggatcg cagtctgcaa ctcgactgcg tgaagctgga atcgctagta 1260
atcgcggatc agcatgccgc ggtgaatacg ttcccgggtc ttgtacacac cgcccgtcac 1320
accatgggag tgggtttcac cagaagtagg tagcctaacc tgcaaaggag ggcgcttacc 1380
acg 1383
<210> 31
<400> 31
000
<210> 32
<400> 32
000
<210> 33
<211> 1505
<212> DNA
<213> Snodgrassella alvi
<400> 33
gagagtttga tcctggctca gattgaacgc tggcggcatg ccttacacat gcaagtcgaa 60
cggcagcacg gagagcttgc tctctggtgg cgagtggcga acgggtgagt aatgcatcgg 120
aacgtaccga gtaatggggg ataactgtcc gaaaggatgg ctaataccgc atacgccctg 180
agggggaaag cgggggatcg aaagacctcg cgttatttga gcggccgatg ttggattagc 240
tagttggtgg ggtaaaggcc taccaaggcg acgatccata gcgggtctga gaggatgatc 300
cgccacattg ggactgagac acggcccaaa ctcctacggg aggcagcagt ggggaatttt 360
ggacaatggg gggaaccctg atccagccat gccgcgtgtc tgaagaaggc cttcgggttg 420
taaaggactt ttgttaggga agaaaagccg ggtgttaata ccatctggtg ctgacggtac 480
ctaaagaata agcaccggct aactacgtgc cagcagccgc ggtaatacgt agggtgcgag 540
cgttaatcgg aattactggg cgtaaagcga gcgcagacgg ttaattaagt cagatgtgaa 600
atccccgagc tcaacttggg acgtgcattt gaaactggtt aactagagtg tgtcagaggg 660
aggtagaatt ccacgtgtag cagtgaaatg cgtagagatg tggaggaata ccgatggcga 720
aggcagcctc ctgggataac actgacgttc atgctcgaaa gcgtgggtag caaacaggat 780
tagataccct ggtagtccac gccctaaacg atgacaatta gctgttggga cactagatgt 840
cttagtagcg aagctaacgc gtgaaattgt ccgcctgggg agtacggtcg caagattaaa 900
actcaaagga attgacgggg acccgcacaa gcggtggatg atgtggatta attcgatgca 960
acgcgaagaa ccttacctgg tcttgacatg tacggaatct cttagagata ggagagtgcc 1020
ttcgggaacc gtaacacagg tgctgcatgg ctgtcgtcag ctcgtgtcgt gagatgttgg 1080
gttaagtccc gcaacgagcg caacccttgt cattagttgc catcattaag ttgggcactc 1140
taatgagact gccggtgaca aaccggagga aggtggggat gacgtcaagt cctcatggcc 1200
cttatgacca gggcttcaca cgtcatacaa tggtcggtac agagggtagc gaagccgcga 1260
ggtgaagcca atctcagaaa gccgatcgta gtccggattg cactctgcaa ctcgagtgca 1320
tgaagtcgga atcgctagta atcgcaggtc agcatactgc ggtgaatacg ttcccgggtc 1380
ttgtacacac cgcccgtcac accatgggag tgggggatac cagaattggg tagactaacc 1440
gcaaggaggt cgcttaacac ggtatgcttc atgactgggg tgaagtcgta acaaggtagc 1500
cgtag 1505
<210> 34
<211> 1541
<212> DNA
<213> Gilliamella apicola
<400> 34
ttaaattgaa gagtttgatc atggctcaga ttgaacgctg gcggcaggct taacacatgc 60
aagtcgaacg gtaacatgag tgcttgcact tgatgacgag tggcggacgg gtgagtaaag 120
tatggggatc tgccgaatgg agggggacaa cagttggaaa cgactgctaa taccgcataa 180
agttgagaga ccaaagcatg ggaccttcgg gccatgcgcc atttgatgaa cccatatggg 240
attagctagt tggtagggta atggcttacc aaggcgacga tctctagctg gtctgagagg 300
atgaccagcc acactggaac tgagacacgg tccagactcc tacgggaggc agcagtgggg 360
aatattgcac aatgggggaa accctgatgc agccatgccg cgtgtatgaa gaaggccttc 420
gggttgtaaa gtactttcgg tgatgaggaa ggtggtgtat ctaataggtg catcaattga 480
cgttaattac agaagaagca ccggctaact ccgtgccagc agccgcggta atacggaggg 540
tgcgagcgtt aatcggaatg actgggcgta aagggcatgt aggcggataa ttaagttagg 600
tgtgaaagcc ctgggctcaa cctaggaatt gcacttaaaa ctggttaact agagtattgt 660
agaggaaggt agaattccac gtgtagcggt gaaatgcgta gagatgtgga ggaataccgg 720
tggcgaaggc ggccttctgg acagatactg acgctgagat gcgaaagcgt ggggagcaaa 780
caggattaga taccctggta gtccacgctg taaacgatgt cgatttggag tttgttgcct 840
agagtgatgg gctccgaagc taacgcgata aatcgaccgc ctggggagta cggccgcaag 900
gttaaaactc aaatgaattg acgggggccc gcacaagcgg tggagcatgt ggtttaattc 960
gatgcaacgc gaagaacctt acctggtctt gacatccaca gaatcttgca gagatgcggg 1020
agtgccttcg ggaactgtga gacaggtgct gcatggctgt cgtcagctcg tgttgtgaaa 1080
tgttgggtta agtcccgcaa cgagcgcaac ccttatcctt tgttgccatc ggttaggccg 1140
ggaactcaaa ggagactgcc gttgataaag cggaggaagg tggggacgac gtcaagtcat 1200
catggccctt acgaccaggg ctacacacgt gctacaatgg cgtatacaaa gggaggcgac 1260
ctcgcgagag caagcggacc tcataaagta cgtctaagtc cggattggag tctgcaactc 1320
gactccatga agtcggaatc gctagtaatc gtgaatcaga atgtcacggt gaatacgttc 1380
ccgggccttg tacacaccgc ccgtcacacc atgggagtgg gttgcaccag aagtagatag 1440
cttaaccttc gggagggcgt ttaccacggt gtggtccatg actggggtga agtcgtaaca 1500
aggtaaccgt aggggaacct gcggttggat cacctcctta c 1541
<210> 35
<211> 1528
<212> DNA
<213> 蜂球巴尔通氏体菌(Bartonella apis)
<400> 35
aagccaaaat caaattttca acttgagagt ttgatcctgg ctcagaacga acgctggcgg 60
caggcttaac acatgcaagt cgaacgcact tttcggagtg agtggcagac gggtgagtaa 120
cgcgtgggaa tctacctatt tctacggaat aacgcagaga aatttgtgct aataccgtat 180
acgtccttcg ggagaaagat ttatcggaga tagatgagcc cgcgttggat tagctagttg 240
gtgaggtaat ggcccaccaa ggcgacgatc catagctggt ctgagaggat gaccagccac 300
attgggactg agacacggcc cagactccta cgggaggcag cagtggggaa tattggacaa 360
tgggcgcaag cctgatccag ccatgccgcg tgagtgatga aggccctagg gttgtaaagc 420
tctttcaccg gtgaagataa tgacggtaac cggagaagaa gccccggcta acttcgtgcc 480
agcagccgcg gtaatacgaa gggggctagc gttgttcgga tttactgggc gtaaagcgca 540
cgtaggcgga tatttaagtc aggggtgaaa tcccggggct caaccccgga actgcctttg 600
atactggata tcttgagtat ggaagaggta agtggaattc cgagtgtaga ggtgaaattc 660
gtagatattc ggaggaacac cagtggcgaa ggcggcttac tggtccatta ctgacgctga 720
ggtgcgaaag cgtggggagc aaacaggatt agataccctg gtagtccacg ctgtaaacga 780
tgaatgttag ccgttggaca gtttactgtt cggtggcgca gctaacgcat taaacattcc 840
gcctggggag tacggtcgca agattaaaac tcaaaggaat tgacgggggc ccgcacaagc 900
ggtggagcat gtggtttaat tcgaagcaac gcgcagaacc ttaccagccc ttgacatccc 960
gatcgcggat ggtggagaca ccgtctttca gttcggctgg atcggtgaca ggtgctgcat 1020
ggctgtcgtc agctcgtgtc gtgagatgtt gggttaagtc ccgcaacgag cgcaaccctc 1080
gcccttagtt gccatcattt agttgggcac tctaagggga ctgccggtga taagccgaga 1140
ggaaggtggg gatgacgtca agtcctcatg gcccttacgg gctgggctac acacgtgcta 1200
caatggtggt gacagtgggc agcgagaccg cgaggtcgag ctaatctcca aaagccatct 1260
cagttcggat tgcactctgc aactcgagtg catgaagttg gaatcgctag taatcgtgga 1320
tcagcatgcc acggtgaata cgttcccggg ccttgtacac accgcccgtc acaccatggg 1380
agttggtttt acccgaaggt gctgtgctaa ccgcaaggag gcaggcaacc acggtagggt 1440
cagcgactgg ggtgaagtcg taacaaggta gccgtagggg aacctgcggc tggatcacct 1500
cctttctaag gaagatgaag aattggaa 1528
<210> 36
<211> 1390
<212> DNA
<213> Parasaccharibacter apium
<220>
<221> 尚未归类的特征
<222> (643)..(756)
<223> n是a、g、c或t
<400> 36
ctaccatgca agtcgcacga aacctttcgg ggttagtggc ggacgggtga gtaacgcgtt 60
aggaacctat ctggaggtgg gggataacat cgggaaactg gtgctaatac cgcatgatgc 120
ctgagggcca aaggagagat ccgccattgg aggggcctgc gttcgattag ctagttggtt 180
gggtaaaggc tgaccaaggc gatgatcgat agctggtttg agaggatgat cagccacact 240
gggactgaga cacggcccag actcctacgg gaggcagcag tggggaatat tggacaatgg 300
gggcaaccct gatccagcaa tgccgcgtgt gtgaagaagg tcttcggatt gtaaagcact 360
ttcactaggg aagatgatga cggtacctag agaagaagcc ccggctaact tcgtgccagc 420
agccgcggta atacgaaggg ggctagcgtt gctcggaatg actgggcgta aagggcgcgt 480
aggctgtttg tacagtcaga tgtgaaatcc ccgggcttaa cctgggaact gcatttgata 540
cgtgcagact agagtccgag agagggttgt ggaattccca gtgtagaggt gaaattcgta 600
gatattggga agaacaccgg ttgcgaaggc ggcaacctgg ctnnnnnnnn nnnnnnnnnn 660
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn 720
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnngagc taacgcgtta agcacaccgc 780
ctggggagta cggccgcaag gttgaaactc aaaggaattg acgggggccc gcacaagcgg 840
tggagcatgt ggtttaattc gaagcaacgc gcagaacctt accagggctt gcatggggag 900
gctgtattca gagatggata tttcttcgga cctcccgcac aggtgctgca tggctgtcgt 960
cagctcgtgt cgtgagatgt tgggttaagt cccgcaacga gcgcaaccct tgtctttagt 1020
tgccatcacg tctgggtggg cactctagag agactgccgg tgacaagccg gaggaaggtg 1080
gggatgacgt caagtcctca tggcccttat gtcctgggct acacacgtgc tacaatggcg 1140
gtgacagagg gatgctacat ggtgacatgg tgctgatctc aaaaaaccgt ctcagttcgg 1200
attgtactct gcaactcgag tgcatgaagg tggaatcgct agtaatcgcg gatcagcatg 1260
ccgcggtgaa tacgttcccg ggccttgtac acaccgcccg tcacaccatg ggagttggtt 1320
tgaccttaag ccggtgagcg aaccgcaagg aacgcagccg accaccggtt cgggttcagc 1380
gactggggga 1390
<210> 37
<211> 1583
<212> DNA
<213> 昆仑乳杆菌(Lactobacillus kunkeei)
<400> 37
ttccttagaa aggaggtgat ccagccgcag gttctcctac ggctaccttg ttacgacttc 60
accctaatca tctgtcccac cttagacgac tagctcctaa aaggttaccc catcgtcttt 120
gggtgttaca aactctcatg gtgtgacggg cggtgtgtac aaggcccggg aacgtattca 180
ccgtggcatg ctgatccacg attactagtg attccaactt catgcaggcg agttgcagcc 240
tgcaatccga actgagaatg gctttaagag attagcttga cctcgcggtt tcgcgactcg 300
ttgtaccatc cattgtagca cgtgtgtagc ccagctcata aggggcatga tgatttgacg 360
tcgtccccac cttcctccgg tttatcaccg gcagtctcac tagagtgccc aactaaatgc 420
tggcaactaa taataagggt tgcgctcgtt gcgggactta acccaacatc tcacgacacg 480
agctgacgac aaccatgcac cacctgtcat tctgtccccg aagggaacgc ccaatctctt 540
gggttggcag aagatgtcaa gagctggtaa ggttcttcgc gtagcatcga attaaaccac 600
atgctccacc acttgtgcgg gcccccgtca attcctttga gtttcaacct tgcggtcgta 660
ctccccaggc ggaatactta atgcgttagc tgcggcactg aagggcggaa accctccaac 720
acctagtatt catcgtttac ggcatggact accagggtat ctaatcctgt tcgctaccca 780
tgctttcgag cctcagcgtc agtaacagac cagaaagccg ccttcgccac tggtgttctt 840
ccatatatct acgcatttca ccgctacaca tggagttcca ctttcctctt ctgtactcaa 900
gttttgtagt ttccactgca cttcctcagt tgagctgagg gctttcacag cagacttaca 960
aaaccgcctg cgctcgcttt acgcccaata aatccggaca acgcttgcca cctacgtatt 1020
accgcggctg ctggcacgta gttagccgtg gctttctggt taaataccgt caaagtgtta 1080
acagttactc taacacttgt tcttctttaa caacagagtt ttacgatccg aaaaccttca 1140
tcactcacgc ggcgttgctc catcagactt tcgtccattg tggaagattc cctactgctg 1200
cctcccgtag gagtctgggc cgtgtctcag tcccaatgtg gccgattacc ctctcaggtc 1260
ggctacgtat catcgtcttg gtgggctttt atctcaccaa ctaactaata cggcgcgggt 1320
ccatcccaaa gtgatagcaa agccatcttt caagttggaa ccatgcggtt ccaactaatt 1380
atgcggtatt agcacttgtt tccaaatgtt atcccccgct tcggggcagg ttacccacgt 1440
gttactcacc agttcgccac tcgctccgaa tccaaaaatc atttatgcaa gcataaaatc 1500
aatttgggag aactcgttcg acttgcatgt attaggcacg ccgccagcgt tcgtcctgag 1560
ccaggatcaa actctcatct taa 1583
<210> 38
<211> 1395
<212> DNA
<213> Lactobacillus Firm-4
<400> 38
acgaacgctg gcggcgtgcc taatacatgc aagtcgagcg cgggaagtca gggaagcctt 60
cgggtggaac tggtggaacg agcggcggat gggtgagtaa cacgtaggta acctgcccta 120
aagcggggga taccatctgg aaacaggtgc taataccgca taaacccagc agtcacatga 180
gtgctggttg aaagacggct tcggctgtca ctttaggatg gacctgcggc gtattagcta 240
gttggtggag taacggttca ccaaggcaat gatacgtagc cgacctgaga gggtaatcgg 300
ccacattggg actgagacac ggcccaaact cctacgggag gcagcagtag ggaatcttcc 360
acaatggacg caagtctgat ggagcaacgc cgcgtggatg aagaaggtct tcggatcgta 420
aaatcctgtt gttgaagaag aacggttgtg agagtaactg ctcataacgt gacggtaatc 480
aaccagaaag tcacggctaa ctacgtgcca gcagccgcgg taatacgtag gtggcaagcg 540
ttgtccggat ttattgggcg taaagggagc gcaggcggtc ttttaagtct gaatgtgaaa 600
gccctcagct taactgagga agagcatcgg aaactgagag acttgagtgc agaagaggag 660
agtggaactc catgtgtagc ggtgaaatgc gtagatatat ggaagaacac cagtggcgaa 720
ggcggctctc tggtctgtta ctgacgctga ggctcgaaag catgggtagc gaacaggatt 780
agataccctg gtagtccatg ccgtaaacga tgagtgctaa gtgttgggag gtttccgcct 840
ctcagtgctg cagctaacgc attaagcact ccgcctgggg agtacgaccg caaggttgaa 900
actcaaagga attgacgggg gcccgcacaa gcggtggagc atgtggttta attcgaagca 960
acgcgaagaa ccttaccagg tcttgacatc tcctgcaagc ctaagagatt aggggttccc 1020
ttcggggaca ggaagacagg tggtgcatgg ttgtcgtcag ctcgtgtcgt gagatgttgg 1080
gttaagtccc gcaacgagcg caacccttgt tactagttgc cagcattaag ttgggcactc 1140
tagtgagact gccggtgaca aaccggagga aggtggggac gacgtcaaat catcatgccc 1200
cttatgacct gggctacaca cgtgctacaa tggatggtac aatgagaagc gaactcgcga 1260
ggggaagctg atctctgaaa accattctca gttcggattg caggctgcaa ctcgcctgca 1320
tgaagctgga atcgctagta atcgcggatc agcatgccgc ggtgaatacg ttcccgggcc 1380
ttgtacacac cgccc 1395
<210> 39
<211> 1549
<212> DNA
<213> 肠球菌属(Enterococcus)
<400> 39
aggtgatcca gccgcacctt ccgatacggc taccttgtta cgacttcacc ccaatcatct 60
atcccacctt aggcggctgg ctccaaaaag gttacctcac cgacttcggg tgttacaaac 120
tctcgtggtg tgacgggcgg tgtgtacaag gcccgggaac gtattcaccg cggcgtgctg 180
atccgcgatt actagcgatt ccggcttcat gcaggcgagt tgcagcctgc aatccgaact 240
gagagaagct ttaagagatt tgcatgacct cgcggtctag cgactcgttg tacttcccat 300
tgtagcacgt gtgtagccca ggtcataagg ggcatgatga tttgacgtca tccccacctt 360
cctccggttt gtcaccggca gtctcgctag agtgcccaac taaatgatgg caactaacaa 420
taagggttgc gctcgttgcg ggacttaacc caacatctca cgacacgagc tgacgacaac 480
catgcaccac ctgtcacttt gtccccgaag ggaaagctct atctctagag tggtcaaagg 540
atgtcaagac ctggtaaggt tcttcgcgtt gcttcgaatt aaaccacatg ctccaccgct 600
tgtgcgggcc cccgtcaatt cctttgagtt tcaaccttgc ggtcgtactc cccaggcgga 660
gtgcttaatg cgtttgctgc agcactgaag ggcggaaacc ctccaacact tagcactcat 720
cgtttacggc gtggactacc agggtatcta atcctgtttg ctccccacgc tttcgagcct 780
cagcgtcagt tacagaccag agagccgcct tcgccactgg tgttcctcca tatatctacg 840
catttcaccg ctacacatgg aattccactc tcctcttctg cactcaagtc tcccagtttc 900
caatgaccct ccccggttga gccgggggct ttcacatcag acttaagaaa ccgcctgcgc 960
tcgctttacg cccaataaat ccggacaacg cttgccacct acgtattacc gcggctgctg 1020
gcacgtagtt agccgtggct ttctggttag ataccgtcag gggacgttca gttactaacg 1080
tccttgttct tctctaacaa cagagtttta cgatccgaaa accttcttca ctcacgcggc 1140
gttgctcggt cagactttcg tccattgccg aagattccct actgctgcct cccgtaggag 1200
tctgggccgt gtctcagtcc cagtgtggcc gatcaccctc tcaggtcggc tatgcatcgt 1260
ggccttggtg agccgttacc tcaccaacta gctaatgcac cgcgggtcca tccatcagcg 1320
acacccgaaa gcgcctttca ctcttatgcc atgcggcata aactgttatg cggtattagc 1380
acctgtttcc aagtgttatc cccctctgat gggtaggtta cccacgtgtt actcacccgt 1440
ccgccactcc tctttccaat tgagtgcaag cactcgggag gaaagaagcg ttcgacttgc 1500
atgtattagg cacgccgcca gcgttcgtcc tgagccagga tcaaactct 1549
<210> 40
<211> 1541
<212> DNA
<213> 戴尔福特菌属(Delftia)
<400> 40
cagaaaggag gtgatccagc cgcaccttcc gatacggcta ccttgttacg acttcacccc 60
agtcacgaac cccgccgtgg taagcgccct ccttgcggtt aggctaccta cttctggcga 120
gacccgctcc catggtgtga cgggcggtgt gtacaagacc cgggaacgta ttcaccgcgg 180
catgctgatc cgcgattact agcgattccg acttcacgca gtcgagttgc agactgcgat 240
ccggactacg actggtttta tgggattagc tccccctcgc gggttggcaa ccctctgtac 300
cagccattgt atgacgtgtg tagccccacc tataagggcc atgaggactt gacgtcatcc 360
ccaccttcct ccggtttgtc accggcagtc tcattagagt gctcaactga atgtagcaac 420
taatgacaag ggttgcgctc gttgcgggac ttaacccaac atctcacgac acgagctgac 480
gacagccatg cagcacctgt gtgcaggttc tctttcgagc acgaatccat ctctggaaac 540
ttcctgccat gtcaaaggtg ggtaaggttt ttcgcgttgc atcgaattaa accacatcat 600
ccaccgcttg tgcgggtccc cgtcaattcc tttgagtttc aaccttgcgg ccgtactccc 660
caggcggtca acttcacgcg ttagcttcgt tactgagaaa actaattccc aacaaccagt 720
tgacatcgtt tagggcgtgg actaccaggg tatctaatcc tgtttgctcc ccacgctttc 780
gtgcatgagc gtcagtacag gtccagggga ttgccttcgc catcggtgtt cctccgcata 840
tctacgcatt tcactgctac acgcggaatt ccatccccct ctaccgtact ctagccatgc 900
agtcacaaat gcagttccca ggttgagccc ggggatttca catctgtctt acataaccgc 960
ctgcgcacgc tttacgccca gtaattccga ttaacgctcg caccctacgt attaccgcgg 1020
ctgctggcac gtagttagcc ggtgcttatt cttacggtac cgtcatgggc cccctgtatt 1080
agaaggagct ttttcgttcc gtacaaaagc agtttacaac ccgaaggcct tcatcctgca 1140
cgcggcattg ctggatcagg ctttcgccca ttgtccaaaa ttccccactg ctgcctcccg 1200
taggagtctg ggccgtgtct cagtcccagt gtggctggtc gtcctctcag accagctaca 1260
gatcgtcggc ttggtaagct tttatcccac caactaccta atctgccatc ggccgctcca 1320
atcgcgcgag gcccgaaggg cccccgcttt catcctcaga tcgtatgcgg tattagctac 1380
tctttcgagt agttatcccc cacgactggg cacgttccga tgtattactc acccgttcgc 1440
cactcgtcag cgtccgaaga cctgttaccg ttcgacttgc atgtgtaagg catgccgcca 1500
gcgttcaatc tgagccagga tcaaactcta cagttcgatc t 1541
<210> 41
<211> 1502
<212> DNA
<213> Pelomonas
<220>
<221> 尚未归类的特征
<222> (192)..(193)
<223> n是a、g、c或t
<220>
<221> 尚未归类的特征
<222> (832)..(833)
<223> n是a、g、c或t
<400> 41
atcctggctc agattgaacg ctggcggcat gccttacaca tgcaagtcga acggtaacag 60
gttaagctga cgagtggcga acgggtgagt aatatatcgg aacgtgccca gtcgtggggg 120
ataactgctc gaaagagcag ctaataccgc atacgacctg agggtgaaag cgggggatcg 180
caagacctcg cnngattgga gcggccgata tcagattagg tagttggtgg ggtaaaggcc 240
caccaagcca acgatctgta gctggtctga gaggacgacc agccacactg ggactgagac 300
acggcccaga ctcctacggg aggcagcagt ggggaatttt ggacaatggg cgcaagcctg 360
atccagccat gccgcgtgcg ggaagaaggc cttcgggttg taaaccgctt ttgtcaggga 420
agaaaaggtt ctggttaata cctgggactc atgacggtac ctgaagaata agcaccggct 480
aactacgtgc cagcagccgc ggtaatacgt agggtgcaag cgttaatcgg aattactggg 540
cgtaaagcgt gcgcaggcgg ttatgcaaga cagaggtgaa atccccgggc tcaacctggg 600
aactgccttt gtgactgcat agctagagta cggtagaggg ggatggaatt ccgcgtgtag 660
cagtgaaatg cgtagatatg cggaggaaca ccgatggcga aggcaatccc ctggacctgt 720
actgacgctc atgcacgaaa gcgtggggag caaacaggat tagataccct ggtagtccac 780
gccctaaacg atgtcaactg gttgttggga gggtttcttc tcagtaacgt anntaacgcg 840
tgaagttgac cgcctgggga gtacggccgc aaggttgaaa ctcaaaggaa ttgacgggga 900
cccgcacaag cggtggatga tgtggtttaa ttcgatgcaa cgcgaaaaac cttacctacc 960
cttgacatgc caggaatcct gaagagattt gggagtgctc gaaagagaac ctggacacag 1020
gtgctgcatg gccgtcgtca gctcgtgtcg tgagatgttg ggttaagtcc cgcaacgagc 1080
gcaacccttg tcattagttg ctacgaaagg gcactctaat gagactgccg gtgacaaacc 1140
ggaggaaggt ggggatgacg tcaggtcatc atggccctta tgggtagggc tacacacgtc 1200
atacaatggc cgggacagag ggctgccaac ccgcgagggg gagctaatcc cagaaacccg 1260
gtcgtagtcc ggatcgtagt ctgcaactcg actgcgtgaa gtcggaatcg ctagtaatcg 1320
cggatcagct tgccgcggtg aatacgttcc cgggtcttgt acacaccgcc cgtcacacca 1380
tgggagcggg ttctgccaga agtagttagc ctaaccgcaa ggagggcgat taccacggca 1440
gggttcgtga ctggggtgaa gtcgtaacaa ggtagccgta tcggaaggtg cggctggatc 1500
ac 1502
<210> 42
<211> 34
<212> PRT
<213> 乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)
<400> 42
Ile Thr Ser Ile Ser Leu Cys Thr Pro Gly Cys Lys Thr Gly Ala Leu
1 5 10 15
Met Gly Cys Asn Met Lys Thr Ala Thr Cys His Cys Ser Ile His Val
20 25 30
Ser Lys
<210> 43
<211> 22
<212> PRT
<213> 表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermis)
<400> 43
Ile Ala Ser Lys Phe Ile Cys Thr Pro Gly Cys Ala Lys Thr Gly Ser
1 5 10 15
Phe Asn Ser Tyr Cys Cys
20
<210> 44
<211> 44
<212> PRT
<213> 乳酸片球菌(Pediococcus acidilactici)
<400> 44
Lys Tyr Tyr Gly Asn Gly Val Thr Cys Gly Lys His Ser Cys Ser Val
1 5 10 15
Asp Trp Gly Lys Ala Thr Thr Cys Ile Ile Asn Asn Gly Ala Met Ala
20 25 30
Trp Ala Thr Gly Gly His Gln Gly Asn His Lys Cys
35 40
<210> 45
<211> 44
<212> PRT
<213> 屎肠球菌(Enterococcus faecium)
<400> 45
Ala Thr Arg Ser Tyr Gly Asn Gly Val Tyr Cys Asn Asn Ser Lys Cys
1 5 10 15
Trp Val Asn Trp Gly Glu Ala Lys Glu Asn Ile Ala Gly Ile Val Ile
20 25 30
Ser Gly Trp Ala Ser Gly Leu Ala Gly Met Gly His
35 40
<210> 46
<211> 39
<212> PRT
<213> 乳酸链球菌(Streptococcus lactis)
<400> 46
Gly Thr Trp Asp Asp Ile Gly Gln Gly Ile Gly Arg Val Ala Tyr Trp
1 5 10 15
Val Gly Lys Ala Met Gly Asn Met Ser Asp Val Asn Gln Ala Ser Arg
20 25 30
Ile Asn Arg Lys Lys Lys His
35
<210> 47
<211> 48
<212> PRT
<213> 约氏乳杆菌(Lactobacillus johnsonii)
<400> 47
Asn Arg Trp Gly Asp Thr Val Leu Ser Ala Ala Ser Gly Ala Gly Thr
1 5 10 15
Gly Ile Lys Ala Cys Lys Ser Phe Gly Pro Trp Gly Met Ala Ile Cys
20 25 30
Gly Val Gly Gly Ala Ala Ile Gly Gly Tyr Phe Gly Tyr Thr His Asn
35 40 45
<210> 48
<211> 70
<212> PRT
<213> 粪肠球菌(Enterococcus faecalis)
<400> 48
Met Ala Lys Glu Phe Gly Ile Pro Ala Ala Val Ala Gly Thr Val Leu
1 5 10 15
Asn Val Val Glu Ala Gly Gly Trp Val Thr Thr Ile Val Ser Ile Leu
20 25 30
Thr Ala Val Gly Ser Gly Gly Leu Ser Leu Leu Ala Ala Ala Gly Arg
35 40 45
Glu Ser Ile Lys Ala Tyr Leu Lys Lys Glu Ile Lys Lys Lys Gly Lys
50 55 60
Arg Ala Val Ile Ala Trp
65 70
<210> 49
<211> 51
<212> PRT
<213> 金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)
<400> 49
Met Ser Trp Leu Asn Phe Leu Lys Tyr Ile Ala Lys Tyr Gly Lys Lys
1 5 10 15
Ala Val Ser Ala Ala Trp Lys Tyr Lys Gly Lys Val Leu Glu Trp Leu
20 25 30
Asn Val Gly Pro Thr Leu Glu Trp Val Trp Gln Lys Leu Lys Lys Ile
35 40 45
Ala Gly Leu
50
<210> 50
<211> 43
<212> PRT
<213> 格氏乳球菌(Lactococcus garvieae)
<400> 50
Ile Gly Gly Ala Leu Gly Asn Ala Leu Asn Gly Leu Gly Thr Trp Ala
1 5 10 15
Asn Met Met Asn Gly Gly Gly Phe Val Asn Gln Trp Gln Val Tyr Ala
20 25 30
Asn Lys Gly Lys Ile Asn Gln Tyr Arg Pro Tyr
35 40
<210> 51
<211> 103
<212> PRT
<213> 大肠杆菌
<400> 51
Met Arg Thr Leu Thr Leu Asn Glu Leu Asp Ser Val Ser Gly Gly Ala
1 5 10 15
Ser Gly Arg Asp Ile Ala Met Ala Ile Gly Thr Leu Ser Gly Gln Phe
20 25 30
Val Ala Gly Gly Ile Gly Ala Ala Ala Gly Gly Val Ala Gly Gly Ala
35 40 45
Ile Tyr Asp Tyr Ala Ser Thr His Lys Pro Asn Pro Ala Met Ser Pro
50 55 60
Ser Gly Leu Gly Gly Thr Ile Lys Gln Lys Pro Glu Gly Ile Pro Ser
65 70 75 80
Glu Ala Trp Asn Tyr Ala Ala Gly Arg Leu Cys Asn Trp Ser Pro Asn
85 90 95
Asn Leu Ser Asp Val Cys Leu
100
<210> 52
<211> 339
<212> PRT
<213> 细菌噬菌体CP-1
<400> 52
Met Val Lys Lys Asn Asp Leu Phe Val Asp Val Ser Ser His Asn Gly
1 5 10 15
Tyr Asp Ile Thr Gly Ile Leu Glu Gln Met Gly Thr Thr Asn Thr Ile
20 25 30
Ile Lys Ile Ser Glu Ser Thr Thr Tyr Leu Asn Pro Cys Leu Ser Ala
35 40 45
Gln Val Glu Gln Ser Asn Pro Ile Gly Phe Tyr His Phe Ala Arg Phe
50 55 60
Gly Gly Asp Val Ala Glu Ala Glu Arg Glu Ala Gln Phe Phe Leu Asp
65 70 75 80
Asn Val Pro Met Gln Val Lys Tyr Leu Val Leu Asp Tyr Glu Asp Asp
85 90 95
Pro Ser Gly Asp Ala Gln Ala Asn Thr Asn Ala Cys Leu Arg Phe Met
100 105 110
Gln Met Ile Ala Asp Ala Gly Tyr Lys Pro Ile Tyr Tyr Ser Tyr Lys
115 120 125
Pro Phe Thr His Asp Asn Val Asp Tyr Gln Gln Ile Leu Ala Gln Phe
130 135 140
Pro Asn Ser Leu Trp Ile Ala Gly Tyr Gly Leu Asn Asp Gly Thr Ala
145 150 155 160
Asn Phe Glu Tyr Phe Pro Ser Met Asp Gly Ile Arg Trp Trp Gln Tyr
165 170 175
Ser Ser Asn Pro Phe Asp Lys Asn Ile Val Leu Leu Asp Asp Glu Glu
180 185 190
Asp Asp Lys Pro Lys Thr Ala Gly Thr Trp Lys Gln Asp Ser Lys Gly
195 200 205
Trp Trp Phe Arg Arg Asn Asn Gly Ser Phe Pro Tyr Asn Lys Trp Glu
210 215 220
Lys Ile Gly Gly Val Trp Tyr Tyr Phe Asp Ser Lys Gly Tyr Cys Leu
225 230 235 240
Thr Ser Glu Trp Leu Lys Asp Asn Glu Lys Trp Tyr Tyr Leu Lys Asp
245 250 255
Asn Gly Ala Met Ala Thr Gly Trp Val Leu Val Gly Ser Glu Trp Tyr
260 265 270
Tyr Met Asp Asp Ser Gly Ala Met Val Thr Gly Trp Val Lys Tyr Lys
275 280 285
Asn Asn Trp Tyr Tyr Met Thr Asn Glu Arg Gly Asn Met Val Ser Asn
290 295 300
Glu Phe Ile Lys Ser Gly Lys Gly Trp Tyr Phe Met Asn Thr Asn Gly
305 310 315 320
Glu Leu Ala Asp Asn Pro Ser Phe Thr Lys Glu Pro Asp Gly Leu Ile
325 330 335
Thr Val Ala
<210> 53
<211> 296
<212> PRT
<213> 细菌噬菌体Dp-1
<400> 53
Met Gly Val Asp Ile Glu Lys Gly Val Ala Trp Met Gln Ala Arg Lys
1 5 10 15
Gly Arg Val Ser Tyr Ser Met Asp Phe Arg Asp Gly Pro Asp Ser Tyr
20 25 30
Asp Cys Ser Ser Ser Met Tyr Tyr Ala Leu Arg Ser Ala Gly Ala Ser
35 40 45
Ser Ala Gly Trp Ala Val Asn Thr Glu Tyr Met His Ala Trp Leu Ile
50 55 60
Glu Asn Gly Tyr Glu Leu Ile Ser Glu Asn Ala Pro Trp Asp Ala Lys
65 70 75 80
Arg Gly Asp Ile Phe Ile Trp Gly Arg Lys Gly Ala Ser Ala Gly Ala
85 90 95
Gly Gly His Thr Gly Met Phe Ile Asp Ser Asp Asn Ile Ile His Cys
100 105 110
Asn Tyr Ala Tyr Asp Gly Ile Ser Val Asn Asp His Asp Glu Arg Trp
115 120 125
Tyr Tyr Ala Gly Gln Pro Tyr Tyr Tyr Val Tyr Arg Leu Thr Asn Ala
130 135 140
Asn Ala Gln Pro Ala Glu Lys Lys Leu Gly Trp Gln Lys Asp Ala Thr
145 150 155 160
Gly Phe Trp Tyr Ala Arg Ala Asn Gly Thr Tyr Pro Lys Asp Glu Phe
165 170 175
Glu Tyr Ile Glu Glu Asn Lys Ser Trp Phe Tyr Phe Asp Asp Gln Gly
180 185 190
Tyr Met Leu Ala Glu Lys Trp Leu Lys His Thr Asp Gly Asn Trp Tyr
195 200 205
Trp Phe Asp Arg Asp Gly Tyr Met Ala Thr Ser Trp Lys Arg Ile Gly
210 215 220
Glu Ser Trp Tyr Tyr Phe Asn Arg Asp Gly Ser Met Val Thr Gly Trp
225 230 235 240
Ile Lys Tyr Tyr Asp Asn Trp Tyr Tyr Cys Asp Ala Thr Asn Gly Asp
245 250 255
Met Lys Ser Asn Ala Phe Ile Arg Tyr Asn Asp Gly Trp Tyr Leu Leu
260 265 270
Leu Pro Asp Gly Arg Leu Ala Asp Lys Pro Gln Phe Thr Val Glu Pro
275 280 285
Asp Gly Leu Ile Thr Ala Lys Val
290 295
<210> 54
<211> 233
<212> PRT
<213> 细菌噬菌体λ
<400> 54
Met Glu Ile Gln Lys Lys Leu Val Asp Pro Ser Lys Tyr Gly Thr Lys
1 5 10 15
Cys Pro Tyr Thr Met Lys Pro Lys Tyr Ile Thr Val His Asn Thr Tyr
20 25 30
Asn Asp Ala Pro Ala Glu Asn Glu Val Ser Tyr Met Ile Ser Asn Asn
35 40 45
Asn Glu Val Ser Phe His Ile Ala Val Asp Asp Lys Lys Ala Ile Gln
50 55 60
Gly Ile Pro Leu Glu Arg Asn Ala Trp Ala Cys Gly Asp Gly Asn Gly
65 70 75 80
Ser Gly Asn Arg Gln Ser Ile Ser Val Glu Ile Cys Tyr Ser Lys Ser
85 90 95
Gly Gly Asp Arg Tyr Tyr Lys Ala Glu Asp Asn Ala Val Asp Val Val
100 105 110
Arg Gln Leu Met Ser Met Tyr Asn Ile Pro Ile Glu Asn Val Arg Thr
115 120 125
His Gln Ser Trp Ser Gly Lys Tyr Cys Pro His Arg Met Leu Ala Glu
130 135 140
Gly Arg Trp Gly Ala Phe Ile Gln Lys Val Lys Asn Gly Asn Val Ala
145 150 155 160
Thr Thr Ser Pro Thr Lys Gln Asn Ile Ile Gln Ser Gly Ala Phe Ser
165 170 175
Pro Tyr Glu Thr Pro Asp Val Met Gly Ala Leu Thr Ser Leu Lys Met
180 185 190
Thr Ala Asp Phe Ile Leu Gln Ser Asp Gly Leu Thr Tyr Phe Ile Ser
195 200 205
Lys Pro Thr Ser Asp Ala Gln Leu Lys Ala Met Lys Glu Tyr Leu Asp
210 215 220
Arg Lys Gly Trp Trp Tyr Glu Val Lys
225 230
<210> 55
<211> 481
<212> PRT
<213> 细菌噬菌体phi MR11
<400> 55
Met Gln Ala Lys Leu Thr Lys Lys Glu Phe Ile Glu Trp Leu Lys Thr
1 5 10 15
Ser Glu Gly Lys Gln Phe Asn Val Asp Leu Trp Tyr Gly Phe Gln Cys
20 25 30
Phe Asp Tyr Ala Asn Ala Gly Trp Lys Val Leu Phe Gly Leu Leu Leu
35 40 45
Lys Gly Leu Gly Ala Lys Asp Ile Pro Phe Ala Asn Asn Phe Asp Gly
50 55 60
Leu Ala Thr Val Tyr Gln Asn Thr Pro Asp Phe Leu Ala Gln Pro Gly
65 70 75 80
Asp Met Val Val Phe Gly Ser Asn Tyr Gly Ala Gly Tyr Gly His Val
85 90 95
Ala Trp Val Ile Glu Ala Thr Leu Asp Tyr Ile Ile Val Tyr Glu Gln
100 105 110
Asn Trp Leu Gly Gly Gly Trp Thr Asp Arg Ile Glu Gln Pro Gly Trp
115 120 125
Gly Trp Glu Lys Val Thr Arg Arg Gln His Ala Tyr Asp Phe Pro Met
130 135 140
Trp Phe Ile Arg Pro Asn Phe Lys Ser Glu Thr Ala Pro Arg Ser Ile
145 150 155 160
Gln Ser Pro Thr Gln Ala Ser Lys Lys Glu Thr Ala Lys Pro Gln Pro
165 170 175
Lys Ala Val Glu Leu Lys Ile Ile Lys Asp Val Val Lys Gly Tyr Asp
180 185 190
Leu Pro Lys Arg Gly Gly Asn Pro Lys Gly Ile Val Ile His Asn Asp
195 200 205
Ala Gly Ser Lys Gly Ala Thr Ala Glu Ala Tyr Arg Asn Gly Leu Val
210 215 220
Asn Ala Pro Leu Ser Arg Leu Glu Ala Gly Ile Ala His Ser Tyr Val
225 230 235 240
Ser Gly Asn Thr Val Trp Gln Ala Leu Asp Glu Ser Gln Val Gly Trp
245 250 255
His Thr Ala Asn Gln Leu Gly Asn Lys Tyr Tyr Tyr Gly Ile Glu Val
260 265 270
Cys Gln Ser Met Gly Ala Asp Asn Ala Thr Phe Leu Lys Asn Glu Gln
275 280 285
Ala Thr Phe Gln Glu Cys Ala Arg Leu Leu Lys Lys Trp Gly Leu Pro
290 295 300
Ala Asn Arg Asn Thr Ile Arg Leu His Asn Glu Phe Thr Ser Thr Ser
305 310 315 320
Cys Pro His Arg Ser Ser Val Leu His Thr Gly Phe Asp Pro Val Thr
325 330 335
Arg Gly Leu Leu Pro Glu Asp Lys Gln Leu Gln Leu Lys Asp Tyr Phe
340 345 350
Ile Lys Gln Ile Arg Val Tyr Met Asp Gly Lys Ile Pro Val Ala Thr
355 360 365
Val Ser Asn Glu Ser Ser Ala Ser Ser Asn Thr Val Lys Pro Val Ala
370 375 380
Ser Ala Trp Lys Arg Asn Lys Tyr Gly Thr Tyr Tyr Met Glu Glu Asn
385 390 395 400
Ala Arg Phe Thr Asn Gly Asn Gln Pro Ile Thr Val Arg Lys Ile Gly
405 410 415
Pro Phe Leu Ser Cys Pro Val Ala Tyr Gln Phe Gln Pro Gly Gly Tyr
420 425 430
Cys Asp Tyr Thr Glu Val Met Leu Gln Asp Gly His Val Trp Val Gly
435 440 445
Tyr Thr Trp Glu Gly Gln Arg Tyr Tyr Leu Pro Ile Arg Thr Trp Asn
450 455 460
Gly Ser Ala Pro Pro Asn Gln Ile Leu Gly Asp Leu Trp Gly Glu Ile
465 470 475 480
Ser
<210> 56
<211> 239
<212> PRT
<213> 链球菌属(Streptococcus)噬菌体B30
<400> 56
Met Val Ile Asn Ile Glu Gln Ala Ile Ala Trp Met Ala Ser Arg Lys
1 5 10 15
Gly Lys Val Thr Tyr Ser Met Asp Tyr Arg Asn Gly Pro Ser Ser Tyr
20 25 30
Asp Cys Ser Ser Ser Val Tyr Phe Ala Leu Arg Ser Ala Gly Ala Ser
35 40 45
Asp Asn Gly Trp Ala Val Asn Thr Glu Tyr Glu His Asp Trp Leu Ile
50 55 60
Lys Asn Gly Tyr Val Leu Ile Ala Glu Asn Thr Asn Trp Asn Ala Gln
65 70 75 80
Arg Gly Asp Ile Phe Ile Trp Gly Lys Arg Gly Ala Ser Ala Gly Ala
85 90 95
Phe Gly His Thr Gly Met Phe Val Asp Pro Asp Asn Ile Ile His Cys
100 105 110
Asn Tyr Gly Tyr Asn Ser Ile Thr Val Asn Asn His Asp Glu Ile Trp
115 120 125
Gly Tyr Asn Gly Gln Pro Tyr Val Tyr Ala Tyr Arg Tyr Ser Gly Lys
130 135 140
Gln Ser Asn Ala Lys Val Asp Asn Lys Ser Val Val Ser Lys Phe Glu
145 150 155 160
Lys Glu Leu Asp Val Asn Thr Pro Leu Ser Asn Ser Asn Met Pro Tyr
165 170 175
Tyr Glu Ala Thr Ile Ser Glu Asp Tyr Tyr Val Glu Ser Lys Pro Asp
180 185 190
Val Asn Ser Thr Asp Lys Glu Leu Leu Val Ala Gly Thr Arg Val Arg
195 200 205
Val Tyr Glu Lys Val Lys Gly Trp Ala Arg Ile Gly Ala Pro Gln Ser
210 215 220
Asn Gln Trp Val Glu Asp Ala Tyr Leu Ile Asp Ala Thr Asp Met
225 230 235
<210> 57
<211> 495
<212> PRT
<213> 细菌噬菌体K
<400> 57
Met Ala Lys Thr Gln Ala Glu Ile Asn Lys Arg Leu Asp Ala Tyr Ala
1 5 10 15
Lys Gly Thr Val Asp Ser Pro Tyr Arg Val Lys Lys Ala Thr Ser Tyr
20 25 30
Asp Pro Ser Phe Gly Val Met Glu Ala Gly Ala Ile Asp Ala Asp Gly
35 40 45
Tyr Tyr His Ala Gln Cys Gln Asp Leu Ile Thr Asp Tyr Val Leu Trp
50 55 60
Leu Thr Asp Asn Lys Val Arg Thr Trp Gly Asn Ala Lys Asp Gln Ile
65 70 75 80
Lys Gln Ser Tyr Gly Thr Gly Phe Lys Ile His Glu Asn Lys Pro Ser
85 90 95
Thr Val Pro Lys Lys Gly Trp Ile Ala Val Phe Thr Ser Gly Ser Tyr
100 105 110
Glu Gln Trp Gly His Ile Gly Ile Val Tyr Asp Gly Gly Asn Thr Ser
115 120 125
Thr Phe Thr Ile Leu Glu Gln Asn Trp Asn Gly Tyr Ala Asn Lys Lys
130 135 140
Pro Thr Lys Arg Val Asp Asn Tyr Tyr Gly Leu Thr His Phe Ile Glu
145 150 155 160
Ile Pro Val Lys Ala Gly Thr Thr Val Lys Lys Glu Thr Ala Lys Lys
165 170 175
Ser Ala Ser Lys Thr Pro Ala Pro Lys Lys Lys Ala Thr Leu Lys Val
180 185 190
Ser Lys Asn His Ile Asn Tyr Thr Met Asp Lys Arg Gly Lys Lys Pro
195 200 205
Glu Gly Met Val Ile His Asn Asp Ala Gly Arg Ser Ser Gly Gln Gln
210 215 220
Tyr Glu Asn Ser Leu Ala Asn Ala Gly Tyr Ala Arg Tyr Ala Asn Gly
225 230 235 240
Ile Ala His Tyr Tyr Gly Ser Glu Gly Tyr Val Trp Glu Ala Ile Asp
245 250 255
Ala Lys Asn Gln Ile Ala Trp His Thr Gly Asp Gly Thr Gly Ala Asn
260 265 270
Ser Gly Asn Phe Arg Phe Ala Gly Ile Glu Val Cys Gln Ser Met Ser
275 280 285
Ala Ser Asp Ala Gln Phe Leu Lys Asn Glu Gln Ala Val Phe Gln Phe
290 295 300
Thr Ala Glu Lys Phe Lys Glu Trp Gly Leu Thr Pro Asn Arg Lys Thr
305 310 315 320
Val Arg Leu His Met Glu Phe Val Pro Thr Ala Cys Pro His Arg Ser
325 330 335
Met Val Leu His Thr Gly Phe Asn Pro Val Thr Gln Gly Arg Pro Ser
340 345 350
Gln Ala Ile Met Asn Lys Leu Lys Asp Tyr Phe Ile Lys Gln Ile Lys
355 360 365
Asn Tyr Met Asp Lys Gly Thr Ser Ser Ser Thr Val Val Lys Asp Gly
370 375 380
Lys Thr Ser Ser Ala Ser Thr Pro Ala Thr Arg Pro Val Thr Gly Ser
385 390 395 400
Trp Lys Lys Asn Gln Tyr Gly Thr Trp Tyr Lys Pro Glu Asn Ala Thr
405 410 415
Phe Val Asn Gly Asn Gln Pro Ile Val Thr Arg Ile Gly Ser Pro Phe
420 425 430
Leu Asn Ala Pro Val Gly Gly Asn Leu Pro Ala Gly Ala Thr Ile Val
435 440 445
Tyr Asp Glu Val Cys Ile Gln Ala Gly His Ile Trp Ile Gly Tyr Asn
450 455 460
Ala Tyr Asn Gly Asn Arg Val Tyr Cys Pro Val Arg Thr Cys Gln Gly
465 470 475 480
Val Pro Pro Asn Gln Ile Pro Gly Val Ala Trp Gly Val Phe Lys
485 490 495
<210> 58
<211> 281
<212> PRT
<213> 细菌噬菌体A118
<400> 58
Met Thr Ser Tyr Tyr Tyr Ser Arg Ser Leu Ala Asn Val Asn Lys Leu
1 5 10 15
Ala Asp Asn Thr Lys Ala Ala Ala Arg Lys Leu Leu Asp Trp Ser Glu
20 25 30
Ser Asn Gly Ile Glu Val Leu Ile Tyr Glu Thr Ile Arg Thr Lys Glu
35 40 45
Gln Gln Ala Ala Asn Val Asn Ser Gly Ala Ser Gln Thr Met Arg Ser
50 55 60
Tyr His Leu Val Gly Gln Ala Leu Asp Phe Val Met Ala Lys Gly Lys
65 70 75 80
Thr Val Asp Trp Gly Ala Tyr Arg Ser Asp Lys Gly Lys Lys Phe Val
85 90 95
Ala Lys Ala Lys Ser Leu Gly Phe Glu Trp Gly Gly Asp Trp Ser Gly
100 105 110
Phe Val Asp Asn Pro His Leu Gln Phe Asn Tyr Lys Gly Tyr Gly Thr
115 120 125
Asp Thr Phe Gly Lys Gly Ala Ser Thr Ser Asn Ser Ser Lys Pro Ser
130 135 140
Ala Asp Thr Asn Thr Asn Ser Leu Gly Leu Val Asp Tyr Met Asn Leu
145 150 155 160
Asn Lys Leu Asp Ser Ser Phe Ala Asn Arg Lys Lys Leu Ala Thr Ser
165 170 175
Tyr Gly Ile Lys Asn Tyr Ser Gly Thr Ala Thr Gln Asn Thr Thr Leu
180 185 190
Leu Ala Lys Leu Lys Ala Gly Lys Pro His Thr Pro Ala Ser Lys Asn
195 200 205
Thr Tyr Tyr Thr Glu Asn Pro Arg Lys Val Lys Thr Leu Val Gln Cys
210 215 220
Asp Leu Tyr Lys Ser Val Asp Phe Thr Thr Lys Asn Gln Thr Gly Gly
225 230 235 240
Thr Phe Pro Pro Gly Thr Val Phe Thr Ile Ser Gly Met Gly Lys Thr
245 250 255
Lys Gly Gly Thr Pro Arg Leu Lys Thr Lys Ser Gly Tyr Tyr Leu Thr
260 265 270
Ala Asn Thr Lys Phe Val Lys Lys Ile
275 280
<210> 59
<211> 341
<212> PRT
<213> 细菌噬菌体A511
<400> 59
Met Val Lys Tyr Thr Val Glu Asn Lys Ile Ile Ala Gly Leu Pro Lys
1 5 10 15
Gly Lys Leu Lys Gly Ala Asn Phe Val Ile Ala His Glu Thr Ala Asn
20 25 30
Ser Lys Ser Thr Ile Asp Asn Glu Val Ser Tyr Met Thr Arg Asn Trp
35 40 45
Lys Asn Ala Phe Val Thr His Phe Val Gly Gly Gly Gly Arg Val Val
50 55 60
Gln Val Ala Asn Val Asn Tyr Val Ser Trp Gly Ala Gly Gln Tyr Ala
65 70 75 80
Asn Ser Tyr Ser Tyr Ala Gln Val Glu Leu Cys Arg Thr Ser Asn Ala
85 90 95
Thr Thr Phe Lys Lys Asp Tyr Glu Val Tyr Cys Gln Leu Leu Val Asp
100 105 110
Leu Ala Lys Lys Ala Gly Ile Pro Ile Thr Leu Asp Ser Gly Ser Lys
115 120 125
Thr Ser Asp Lys Gly Ile Lys Ser His Lys Trp Val Ala Asp Lys Leu
130 135 140
Gly Gly Thr Thr His Gln Asp Pro Tyr Ala Tyr Leu Ser Ser Trp Gly
145 150 155 160
Ile Ser Lys Ala Gln Phe Ala Ser Asp Leu Ala Lys Val Ser Gly Gly
165 170 175
Gly Asn Thr Gly Thr Ala Pro Ala Lys Pro Ser Thr Pro Ala Pro Lys
180 185 190
Pro Ser Thr Pro Ser Thr Asn Leu Asp Lys Leu Gly Leu Val Asp Tyr
195 200 205
Met Asn Ala Lys Lys Met Asp Ser Ser Tyr Ser Asn Arg Asp Lys Leu
210 215 220
Ala Lys Gln Tyr Gly Ile Ala Asn Tyr Ser Gly Thr Ala Ser Gln Asn
225 230 235 240
Thr Thr Leu Leu Ser Lys Ile Lys Gly Gly Ala Pro Lys Pro Ser Thr
245 250 255
Pro Ala Pro Lys Pro Ser Thr Ser Thr Ala Lys Lys Ile Tyr Phe Pro
260 265 270
Pro Asn Lys Gly Asn Trp Ser Val Tyr Pro Thr Asn Lys Ala Pro Val
275 280 285
Lys Ala Asn Ala Ile Gly Ala Ile Asn Pro Thr Lys Phe Gly Gly Leu
290 295 300
Thr Tyr Thr Ile Gln Lys Asp Arg Gly Asn Gly Val Tyr Glu Ile Gln
305 310 315 320
Thr Asp Gln Phe Gly Arg Val Gln Val Tyr Gly Ala Pro Ser Thr Gly
325 330 335
Ala Val Ile Lys Lys
340
<210> 60
<211> 289
<212> PRT
<213> 细菌噬菌体A500
<400> 60
Met Ala Leu Thr Glu Ala Trp Leu Ile Glu Lys Ala Asn Arg Lys Leu
1 5 10 15
Asn Ala Gly Gly Met Tyr Lys Ile Thr Ser Asp Lys Thr Arg Asn Val
20 25 30
Ile Lys Lys Met Ala Lys Glu Gly Ile Tyr Leu Cys Val Ala Gln Gly
35 40 45
Tyr Arg Ser Thr Ala Glu Gln Asn Ala Leu Tyr Ala Gln Gly Arg Thr
50 55 60
Lys Pro Gly Ala Ile Val Thr Asn Ala Lys Gly Gly Gln Ser Asn His
65 70 75 80
Asn Tyr Gly Val Ala Val Asp Leu Cys Leu Tyr Thr Asn Asp Gly Lys
85 90 95
Asp Val Ile Trp Glu Ser Thr Thr Ser Arg Trp Lys Lys Val Val Ala
100 105 110
Ala Met Lys Ala Glu Gly Phe Lys Trp Gly Gly Asp Trp Lys Ser Phe
115 120 125
Lys Asp Tyr Pro His Phe Glu Leu Cys Asp Ala Val Ser Gly Glu Lys
130 135 140
Ile Pro Ala Ala Thr Gln Asn Thr Asn Thr Asn Ser Asn Arg Tyr Glu
145 150 155 160
Gly Lys Val Ile Asp Ser Ala Pro Leu Leu Pro Lys Met Asp Phe Lys
165 170 175
Ser Ser Pro Phe Arg Met Tyr Lys Val Gly Thr Glu Phe Leu Val Tyr
180 185 190
Asp His Asn Gln Tyr Trp Tyr Lys Thr Tyr Ile Asp Asp Lys Leu Tyr
195 200 205
Tyr Met Tyr Lys Ser Phe Cys Asp Val Val Ala Lys Lys Asp Ala Lys
210 215 220
Gly Arg Ile Lys Val Arg Ile Lys Ser Ala Lys Asp Leu Arg Ile Pro
225 230 235 240
Val Trp Asn Asn Ile Lys Leu Asn Ser Gly Lys Ile Lys Trp Tyr Ala
245 250 255
Pro Asn Val Lys Leu Ala Trp Tyr Asn Tyr Arg Arg Gly Tyr Leu Glu
260 265 270
Leu Trp Tyr Pro Asn Asp Gly Trp Tyr Tyr Thr Ala Glu Tyr Phe Leu
275 280 285
Lys
<210> 61
<211> 239
<212> PRT
<213> ΛSa1前噬菌体
<400> 61
Met Val Ile Asn Ile Glu Gln Ala Ile Ala Trp Met Ala Ser Arg Lys
1 5 10 15
Gly Lys Val Thr Tyr Ser Met Asp Tyr Arg Asn Gly Pro Ser Ser Tyr
20 25 30
Asp Cys Ser Ser Ser Val Tyr Phe Ala Leu Arg Ser Ala Gly Ala Ser
35 40 45
Asp Asn Gly Trp Ala Val Asn Thr Glu Tyr Glu His Asp Trp Leu Ile
50 55 60
Lys Asn Gly Tyr Val Leu Ile Ala Glu Asn Thr Asn Trp Asn Ala Gln
65 70 75 80
Arg Gly Asp Ile Phe Ile Trp Gly Lys Arg Gly Ala Ser Ala Gly Ala
85 90 95
Phe Gly His Thr Gly Met Phe Val Asp Pro Asp Asn Ile Ile His Cys
100 105 110
Asn Tyr Gly Tyr Asn Ser Ile Thr Val Asn Asn His Asp Glu Ile Trp
115 120 125
Gly Tyr Asn Gly Gln Pro Tyr Val Tyr Ala Tyr Arg Tyr Ala Arg Lys
130 135 140
Gln Ser Asn Ala Lys Val Asp Asn Gln Ser Val Val Ser Lys Phe Glu
145 150 155 160
Lys Glu Leu Asp Val Asn Thr Pro Leu Ser Asn Ser Asn Met Pro Tyr
165 170 175
Tyr Glu Ala Thr Ile Ser Glu Asp Tyr Tyr Val Glu Ser Lys Pro Asp
180 185 190
Val Asn Ser Thr Asp Lys Glu Leu Leu Val Ala Gly Thr Arg Val Arg
195 200 205
Val Tyr Glu Lys Val Lys Gly Trp Ala Arg Ile Gly Ala Pro Gln Ser
210 215 220
Asn Gln Trp Val Glu Asp Ala Tyr Leu Ile Asp Ala Thr Asp Met
225 230 235
<210> 62
<211> 468
<212> PRT
<213> ΛSa2前噬菌体
<400> 62
Met Glu Ile Asn Thr Glu Ile Ala Ile Ala Trp Met Ser Ala Arg Gln
1 5 10 15
Gly Lys Val Ser Tyr Ser Met Asp Tyr Arg Asp Gly Pro Asn Ser Tyr
20 25 30
Asp Cys Ser Ser Ser Val Tyr Tyr Ala Leu Arg Ser Ala Gly Ala Ser
35 40 45
Ser Ala Gly Trp Ala Val Asn Thr Glu Tyr Met His Asp Trp Leu Ile
50 55 60
Lys Asn Gly Tyr Glu Leu Ile Ala Glu Asn Val Asp Trp Asn Ala Val
65 70 75 80
Arg Gly Asp Ile Ala Ile Trp Gly Met Arg Gly His Ser Ser Gly Ala
85 90 95
Gly Gly His Val Val Met Phe Ile Asp Pro Glu Asn Ile Ile His Cys
100 105 110
Asn Trp Ala Asn Asn Gly Ile Thr Val Asn Asn Tyr Asn Gln Thr Ala
115 120 125
Ala Ala Ser Gly Trp Met Tyr Cys Tyr Val Tyr Arg Leu Lys Ser Gly
130 135 140
Ala Ser Thr Gln Gly Lys Ser Leu Asp Thr Leu Val Lys Glu Thr Leu
145 150 155 160
Ala Gly Asn Tyr Gly Asn Gly Glu Ala Arg Lys Ala Val Leu Gly Asn
165 170 175
Gln Tyr Glu Ala Val Met Ser Val Ile Asn Gly Lys Thr Thr Thr Asn
180 185 190
Gln Lys Thr Val Asp Gln Leu Val Gln Glu Val Ile Ala Gly Lys His
195 200 205
Gly Asn Gly Glu Ala Arg Lys Lys Ser Leu Gly Ser Gln Tyr Asp Ala
210 215 220
Val Gln Lys Arg Val Thr Glu Leu Leu Lys Lys Gln Pro Ser Glu Pro
225 230 235 240
Phe Lys Ala Gln Glu Val Asn Lys Pro Thr Glu Thr Lys Thr Ser Gln
245 250 255
Thr Glu Leu Thr Gly Gln Ala Thr Ala Thr Lys Glu Glu Gly Asp Leu
260 265 270
Ser Phe Asn Gly Thr Ile Leu Lys Lys Ala Val Leu Asp Lys Ile Leu
275 280 285
Gly Asn Cys Lys Lys His Asp Ile Leu Pro Ser Tyr Ala Leu Thr Ile
290 295 300
Leu His Tyr Glu Gly Leu Trp Gly Thr Ser Ala Val Gly Lys Ala Asp
305 310 315 320
Asn Asn Trp Gly Gly Met Thr Trp Thr Gly Gln Gly Asn Arg Pro Ser
325 330 335
Gly Val Thr Val Thr Gln Gly Ser Ala Arg Pro Ser Asn Glu Gly Gly
340 345 350
His Tyr Met His Tyr Ala Ser Val Asp Asp Phe Leu Thr Asp Trp Phe
355 360 365
Tyr Leu Leu Arg Ala Gly Gly Ser Tyr Lys Val Ser Gly Ala Lys Thr
370 375 380
Phe Ser Glu Ala Ile Lys Gly Met Phe Lys Val Gly Gly Ala Val Tyr
385 390 395 400
Asp Tyr Ala Ala Ser Gly Phe Asp Ser Tyr Ile Val Gly Ala Ser Ser
405 410 415
Arg Leu Lys Ala Ile Glu Ala Glu Asn Gly Ser Leu Asp Lys Phe Asp
420 425 430
Lys Ala Thr Asp Ile Gly Asp Gly Ser Lys Asp Lys Ile Asp Ile Thr
435 440 445
Ile Glu Gly Ile Glu Val Thr Ile Asn Gly Ile Thr Tyr Glu Leu Thr
450 455 460
Lys Lys Pro Val
465
<210> 63
<211> 236
<212> PRT
<213> (ATCC700407)前噬菌体
<400> 63
Met Thr Asp Ser Ile Gln Glu Met Arg Lys Leu Gln Ser Ile Pro Val
1 5 10 15
Arg Tyr Asp Met Gly Asp Arg Tyr Gly Asn Asp Ala Asp Arg Asp Gly
20 25 30
Arg Ile Glu Met Asp Cys Ser Ser Ala Val Ser Lys Ala Leu Gly Ile
35 40 45
Ser Met Thr Asn Asn Thr Glu Thr Leu Gln Gln Ala Leu Pro Ala Ile
50 55 60
Gly Tyr Gly Lys Ile His Asp Ala Val Asp Gly Thr Phe Asp Met Gln
65 70 75 80
Ala Tyr Asp Val Ile Ile Trp Ala Pro Arg Asp Gly Ser Ser Ser Leu
85 90 95
Gly Ala Phe Gly His Val Leu Ile Ala Thr Ser Pro Thr Thr Ala Ile
100 105 110
His Cys Asn Tyr Gly Ser Asp Gly Ile Thr Glu Asn Asp Tyr Asn Tyr
115 120 125
Ile Trp Glu Ile Asn Gly Arg Pro Arg Glu Ile Val Phe Arg Lys Gly
130 135 140
Val Thr Gln Thr Gln Ala Thr Val Thr Ser Gln Phe Glu Arg Glu Leu
145 150 155 160
Asp Val Asn Ala Arg Leu Thr Val Ser Asp Lys Pro Tyr Tyr Glu Ala
165 170 175
Thr Leu Ser Glu Asp Tyr Tyr Val Glu Ala Gly Pro Arg Ile Asp Ser
180 185 190
Gln Asp Lys Glu Leu Ile Lys Ala Gly Thr Arg Val Arg Val Tyr Glu
195 200 205
Lys Leu Asn Gly Trp Ser Arg Ile Asn His Pro Glu Ser Ala Gln Trp
210 215 220
Val Glu Asp Ser Tyr Leu Val Asp Ala Thr Glu Met
225 230 235
<210> 64
<211> 481
<212> PRT
<213> 葡萄球菌属(Staphylococcus)细菌噬菌体phi 11
<400> 64
Met Gln Ala Lys Leu Thr Lys Asn Glu Phe Ile Glu Trp Leu Lys Thr
1 5 10 15
Ser Glu Gly Lys Gln Phe Asn Val Asp Leu Trp Tyr Gly Phe Gln Cys
20 25 30
Phe Asp Tyr Ala Asn Ala Gly Trp Lys Val Leu Phe Gly Leu Leu Leu
35 40 45
Lys Gly Leu Gly Ala Lys Asp Ile Pro Phe Ala Asn Asn Phe Asp Gly
50 55 60
Leu Ala Thr Val Tyr Gln Asn Thr Pro Asp Phe Leu Ala Gln Pro Gly
65 70 75 80
Asp Met Val Val Phe Gly Ser Asn Tyr Gly Ala Gly Tyr Gly His Val
85 90 95
Ala Trp Val Ile Glu Ala Thr Leu Asp Tyr Ile Ile Val Tyr Glu Gln
100 105 110
Asn Trp Leu Gly Gly Gly Trp Thr Asp Gly Ile Glu Gln Pro Gly Trp
115 120 125
Gly Trp Glu Lys Val Thr Arg Arg Gln His Ala Tyr Asp Phe Pro Met
130 135 140
Trp Phe Ile Arg Pro Asn Phe Lys Ser Glu Thr Ala Pro Arg Ser Val
145 150 155 160
Gln Ser Pro Thr Gln Ala Pro Lys Lys Glu Thr Ala Lys Pro Gln Pro
165 170 175
Lys Ala Val Glu Leu Lys Ile Ile Lys Asp Val Val Lys Gly Tyr Asp
180 185 190
Leu Pro Lys Arg Gly Ser Asn Pro Lys Gly Ile Val Ile His Asn Asp
195 200 205
Ala Gly Ser Lys Gly Ala Thr Ala Glu Ala Tyr Arg Asn Gly Leu Val
210 215 220
Asn Ala Pro Leu Ser Arg Leu Glu Ala Gly Ile Ala His Ser Tyr Val
225 230 235 240
Ser Gly Asn Thr Val Trp Gln Ala Leu Asp Glu Ser Gln Val Gly Trp
245 250 255
His Thr Ala Asn Gln Ile Gly Asn Lys Tyr Tyr Tyr Gly Ile Glu Val
260 265 270
Cys Gln Ser Met Gly Ala Asp Asn Ala Thr Phe Leu Lys Asn Glu Gln
275 280 285
Ala Thr Phe Gln Glu Cys Ala Arg Leu Leu Lys Lys Trp Gly Leu Pro
290 295 300
Ala Asn Arg Asn Thr Ile Arg Leu His Asn Glu Phe Thr Ser Thr Ser
305 310 315 320
Cys Pro His Arg Ser Ser Val Leu His Thr Gly Phe Asp Pro Val Thr
325 330 335
Arg Gly Leu Leu Pro Glu Asp Lys Arg Leu Gln Leu Lys Asp Tyr Phe
340 345 350
Ile Lys Gln Ile Arg Ala Tyr Met Asp Gly Lys Ile Pro Val Ala Thr
355 360 365
Val Ser Asn Glu Ser Ser Ala Ser Ser Asn Thr Val Lys Pro Val Ala
370 375 380
Ser Ala Trp Lys Arg Asn Lys Tyr Gly Thr Tyr Tyr Met Glu Glu Ser
385 390 395 400
Ala Arg Phe Thr Asn Gly Asn Gln Pro Ile Thr Val Arg Lys Val Gly
405 410 415
Pro Phe Leu Ser Cys Pro Val Gly Tyr Gln Phe Gln Pro Gly Gly Tyr
420 425 430
Cys Asp Tyr Thr Glu Val Met Leu Gln Asp Gly His Val Trp Val Gly
435 440 445
Tyr Thr Trp Glu Gly Gln Arg Tyr Tyr Leu Pro Ile Arg Thr Trp Asn
450 455 460
Gly Ser Ala Pro Pro Asn Gln Ile Leu Gly Asp Leu Trp Gly Glu Ile
465 470 475 480
Ser
<210> 65
<211> 481
<212> PRT
<213> 葡萄球菌属(Staphylococcus)细菌噬菌体phi H5
<400> 65
Met Gln Ala Lys Leu Thr Lys Lys Glu Phe Ile Glu Trp Leu Lys Thr
1 5 10 15
Ser Glu Gly Lys Gln Tyr Asn Ala Asp Gly Trp Tyr Gly Phe Gln Cys
20 25 30
Phe Asp Tyr Ala Asn Ala Gly Trp Lys Ala Leu Phe Gly Leu Leu Leu
35 40 45
Lys Gly Val Gly Ala Lys Asp Ile Pro Phe Ala Asn Asn Phe Asp Gly
50 55 60
Leu Ala Thr Val Tyr Gln Asn Thr Pro Asp Phe Leu Ala Gln Pro Gly
65 70 75 80
Asp Met Val Val Phe Gly Ser Asn Tyr Gly Ala Gly Tyr Gly His Val
85 90 95
Ala Trp Val Ile Glu Ala Thr Leu Asp Tyr Ile Ile Val Tyr Glu Gln
100 105 110
Asn Trp Leu Gly Gly Gly Trp Thr Asp Gly Val Gln Gln Pro Gly Ser
115 120 125
Gly Trp Glu Lys Val Thr Arg Arg Gln His Ala Tyr Asp Phe Pro Met
130 135 140
Trp Phe Ile Arg Pro Asn Phe Lys Ser Glu Thr Ala Pro Arg Ser Val
145 150 155 160
Gln Ser Pro Thr Gln Ala Ser Lys Lys Glu Thr Ala Lys Pro Gln Pro
165 170 175
Lys Ala Val Glu Leu Lys Ile Ile Lys Asp Val Val Lys Gly Tyr Asp
180 185 190
Leu Pro Lys Arg Gly Ser Asn Pro Asn Phe Ile Val Ile His Asn Asp
195 200 205
Ala Gly Ser Lys Gly Ala Thr Ala Glu Ala Tyr Arg Asn Gly Leu Val
210 215 220
Asn Ala Pro Leu Ser Arg Leu Glu Ala Gly Ile Ala His Ser Tyr Val
225 230 235 240
Ser Gly Asn Thr Val Trp Gln Ala Leu Asp Glu Ser Gln Val Gly Trp
245 250 255
His Thr Ala Asn Gln Ile Gly Asn Lys Tyr Gly Tyr Gly Ile Glu Val
260 265 270
Cys Gln Ser Met Gly Ala Asp Asn Ala Thr Phe Leu Lys Asn Glu Gln
275 280 285
Ala Thr Phe Gln Glu Cys Ala Arg Leu Leu Lys Lys Trp Gly Leu Pro
290 295 300
Ala Asn Arg Asn Thr Ile Arg Leu His Asn Glu Phe Thr Ser Thr Ser
305 310 315 320
Cys Pro His Arg Ser Ser Val Leu His Thr Gly Phe Asp Pro Val Thr
325 330 335
Arg Gly Leu Leu Pro Glu Asp Lys Arg Leu Gln Leu Lys Asp Tyr Phe
340 345 350
Ile Lys Gln Ile Arg Ala Tyr Met Asp Gly Lys Ile Pro Val Ala Thr
355 360 365
Val Ser Asn Asp Ser Ser Ala Ser Ser Asn Thr Val Lys Pro Val Ala
370 375 380
Ser Ala Trp Lys Arg Asn Lys Tyr Gly Thr Tyr Tyr Met Glu Glu Ser
385 390 395 400
Ala Arg Phe Thr Asn Gly Asn Gln Pro Ile Thr Val Arg Lys Val Gly
405 410 415
Pro Phe Leu Ser Cys Pro Val Gly Tyr Gln Phe Gln Pro Gly Gly Tyr
420 425 430
Cys Asp Tyr Thr Glu Val Met Leu Gln Asp Gly His Val Trp Val Gly
435 440 445
Tyr Thr Trp Glu Gly Gln Arg Tyr Tyr Leu Pro Ile Arg Thr Trp Asn
450 455 460
Gly Ser Ala Pro Pro Asn Gln Ile Leu Gly Asp Leu Trp Gly Glu Ile
465 470 475 480
Ser
<210> 66
<211> 477
<212> PRT
<213> 葡萄球菌属(Staphylococcus)细菌噬菌体phi WMY
<400> 66
Met Lys Thr Lys Ala Gln Ala Lys Ser Trp Ile Asn Ser Lys Ile Gly
1 5 10 15
Lys Gly Ile Asp Trp Asp Gly Met Tyr Gly Tyr Gln Cys Met Asp Glu
20 25 30
Ala Val Asp Tyr Ile His His Val Thr Asp Gly Lys Val Thr Met Trp
35 40 45
Gly Asn Ala Ile Asp Ala Pro Lys Asn Asn Phe Gln Gly Leu Cys Thr
50 55 60
Val Tyr Thr Asn Thr Pro Glu Phe Arg Pro Ala Tyr Gly Asp Val Ile
65 70 75 80
Val Trp Ser Tyr Gly Thr Phe Ala Thr Tyr Gly His Ile Ala Ile Val
85 90 95
Val Asn Pro Asp Pro Tyr Gly Asp Leu Gln Tyr Ile Thr Val Leu Glu
100 105 110
Gln Asn Trp Asn Gly Asn Gly Ile Tyr Lys Thr Glu Phe Ala Thr Ile
115 120 125
Arg Thr His Asp Tyr Thr Gly Val Ser His Phe Ile Arg Pro Lys Phe
130 135 140
Ala Asp Glu Val Lys Glu Thr Ala Lys Thr Val Asn Lys Leu Ser Val
145 150 155 160
Gln Lys Lys Ile Val Thr Pro Lys Asn Ser Val Glu Arg Ile Lys Asn
165 170 175
Tyr Val Lys Thr Ser Gly Tyr Ile Asn Gly Glu His Tyr Glu Leu Tyr
180 185 190
Asn Arg Gly His Lys Pro Lys Gly Val Val Ile His Asn Thr Ala Gly
195 200 205
Thr Ala Ser Ala Thr Gln Glu Gly Gln Arg Leu Thr Asn Met Thr Phe
210 215 220
Gln Gln Leu Ala Asn Gly Val Ala His Val Tyr Ile Asp Lys Asn Thr
225 230 235 240
Ile Tyr Glu Thr Leu Pro Glu Asp Arg Ile Ala Trp His Val Ala Gln
245 250 255
Gln Tyr Gly Asn Thr Glu Phe Tyr Gly Ile Glu Val Cys Gly Ser Arg
260 265 270
Asn Thr Asp Lys Glu Gln Phe Leu Ala Asn Glu Gln Val Ala Phe Gln
275 280 285
Glu Ala Ala Arg Arg Leu Lys Ser Trp Gly Met Arg Ala Asn Arg Asn
290 295 300
Thr Val Arg Leu His His Thr Phe Ser Ser Thr Glu Cys Pro Asp Met
305 310 315 320
Ser Met Leu Leu His Thr Gly Tyr Ser Met Lys Asn Gly Lys Pro Thr
325 330 335
Gln Asp Ile Thr Asn Lys Cys Ala Asp Tyr Phe Met Lys Gln Ile Asn
340 345 350
Ala Tyr Ile Asp Gly Lys Gln Pro Thr Ser Thr Val Val Gly Ser Ser
355 360 365
Ser Ser Asn Lys Leu Lys Ala Lys Asn Lys Asp Lys Ser Thr Gly Trp
370 375 380
Asn Thr Asn Glu Tyr Gly Thr Leu Trp Lys Lys Glu His Ala Thr Phe
385 390 395 400
Thr Cys Gly Val Arg Gln Gly Ile Val Thr Arg Thr Thr Gly Pro Phe
405 410 415
Thr Ser Cys Pro Gln Ala Gly Val Leu Tyr Tyr Gly Gln Ser Val Asn
420 425 430
Tyr Asp Thr Val Cys Lys Gln Asp Gly Tyr Val Trp Ile Ser Trp Thr
435 440 445
Thr Ser Asp Gly Tyr Asp Val Trp Met Pro Ile Arg Thr Trp Asp Arg
450 455 460
Ser Thr Asp Lys Val Ser Glu Ile Trp Gly Thr Ile Ser
465 470 475
<210> 67
<211> 443
<212> PRT
<213> 细菌噬菌体phi NCTC 11261
<400> 67
Met Ala Thr Tyr Gln Glu Tyr Lys Ser Arg Ser Asn Gly Asn Ala Tyr
1 5 10 15
Asp Ile Asp Gly Ser Phe Gly Ala Gln Cys Trp Asp Gly Tyr Ala Asp
20 25 30
Tyr Cys Lys Tyr Leu Gly Leu Pro Tyr Ala Asn Cys Thr Asn Thr Gly
35 40 45
Tyr Ala Arg Asp Ile Trp Glu Gln Arg His Glu Asn Gly Ile Leu Asn
50 55 60
Tyr Phe Asp Glu Val Glu Val Met Gln Ala Gly Asp Val Ala Ile Phe
65 70 75 80
Met Val Val Asp Gly Val Thr Pro Tyr Ser His Val Ala Ile Phe Asp
85 90 95
Ser Asp Ala Gly Gly Gly Tyr Gly Trp Phe Leu Gly Gln Asn Gln Gly
100 105 110
Gly Ala Asn Gly Ala Tyr Asn Ile Val Lys Ile Pro Tyr Ser Ala Thr
115 120 125
Tyr Pro Thr Ala Phe Arg Pro Lys Val Phe Lys Asn Ala Val Thr Val
130 135 140
Thr Gly Asn Ile Gly Leu Asn Lys Gly Asp Tyr Phe Ile Asp Val Ser
145 150 155 160
Ala Tyr Gln Gln Ala Asp Leu Thr Thr Thr Cys Gln Gln Ala Gly Thr
165 170 175
Thr Lys Thr Ile Ile Lys Val Ser Glu Ser Ile Ala Trp Leu Ser Asp
180 185 190
Arg His Gln Gln Gln Ala Asn Thr Ser Asp Pro Ile Gly Tyr Tyr His
195 200 205
Phe Gly Arg Phe Gly Gly Asp Ser Ala Leu Ala Gln Arg Glu Ala Asp
210 215 220
Leu Phe Leu Ser Asn Leu Pro Ser Lys Lys Val Ser Tyr Leu Val Ile
225 230 235 240
Asp Tyr Glu Asp Ser Ala Ser Ala Asp Lys Gln Ala Asn Thr Asn Ala
245 250 255
Val Ile Ala Phe Met Asp Lys Ile Ala Ser Ala Gly Tyr Lys Pro Ile
260 265 270
Tyr Tyr Ser Tyr Lys Pro Phe Thr Leu Asn Asn Ile Asp Tyr Gln Lys
275 280 285
Ile Ile Ala Lys Tyr Pro Asn Ser Ile Trp Ile Ala Gly Tyr Pro Asp
290 295 300
Tyr Glu Val Arg Thr Glu Pro Leu Trp Glu Phe Phe Pro Ser Met Asp
305 310 315 320
Gly Val Arg Trp Trp Gln Phe Thr Ser Val Gly Val Ala Gly Gly Leu
325 330 335
Asp Lys Asn Ile Val Leu Leu Ala Asp Asp Ser Ser Lys Met Asp Ile
340 345 350
Pro Lys Val Asp Lys Pro Gln Glu Leu Thr Phe Tyr Gln Lys Leu Ala
355 360 365
Thr Asn Thr Lys Leu Asp Asn Ser Asn Val Pro Tyr Tyr Glu Ala Thr
370 375 380
Leu Ser Thr Asp Tyr Tyr Val Glu Ser Lys Pro Asn Ala Ser Ser Ala
385 390 395 400
Asp Lys Glu Phe Ile Lys Ala Gly Thr Arg Val Arg Val Tyr Glu Lys
405 410 415
Val Asn Gly Trp Ser Arg Ile Asn His Pro Glu Ser Ala Gln Trp Val
420 425 430
Glu Asp Ser Tyr Leu Val Asn Ala Thr Asp Met
435 440
<210> 68
<211> 334
<212> PRT
<213> 细菌噬菌体phi FWLLm3
<400> 68
Met Val Lys Tyr Thr Val Glu Asn Lys Ile Ile Ala Gly Leu Pro Lys
1 5 10 15
Gly Lys Leu Lys Gly Ala Asn Phe Val Ile Ala His Glu Thr Ala Asn
20 25 30
Ser Lys Ser Thr Ile Asp Asn Glu Val Ser Tyr Met Thr Arg Asn Trp
35 40 45
Gln Asn Ala Phe Val Thr His Phe Val Gly Gly Gly Gly Arg Val Val
50 55 60
Gln Val Ala Asn Val Asn Tyr Val Ser Trp Gly Ala Gly Gln Tyr Ala
65 70 75 80
Asn Ser Tyr Ser Tyr Ala Gln Val Glu Leu Cys Arg Thr Ser Asn Ala
85 90 95
Thr Thr Phe Lys Lys Asp Tyr Glu Val Tyr Cys Gln Leu Leu Val Asp
100 105 110
Leu Ala Lys Lys Ala Gly Ile Pro Ile Thr Leu Asp Ser Gly Ser Lys
115 120 125
Thr Ser Asp Lys Gly Ile Lys Ser His Lys Trp Val Ala Asp Lys Leu
130 135 140
Gly Gly Thr Thr His Gln Asp Pro Tyr Ala Tyr Leu Ser Ser Trp Gly
145 150 155 160
Ile Ser Lys Ala Gln Phe Ala Ser Asp Leu Ala Lys Val Ser Gly Gly
165 170 175
Gly Asn Thr Gly Thr Ala Pro Ala Lys Pro Ser Thr Pro Ser Thr Asn
180 185 190
Leu Asp Lys Leu Gly Leu Val Asp Tyr Met Asn Ala Lys Lys Met Asp
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Ser Ser Tyr Ser Asn Arg Ala Lys Leu Ala Lys Gln Tyr Gly Ile Ala
210 215 220
Asn Tyr Ser Gly Thr Ala Ser Gln Asn Thr Thr Leu Leu Ser Lys Ile
225 230 235 240
Lys Gly Gly Ala Pro Lys Pro Ser Thr Pro Ala Pro Lys Pro Ser Thr
245 250 255
Ser Thr Ala Lys Lys Ile Tyr Phe Pro Pro Asn Lys Gly Asn Trp Ser
260 265 270
Val Tyr Pro Thr Asn Lys Ala Pro Val Lys Ala Asn Ala Ile Gly Ala
275 280 285
Ile Asn Pro Thr Lys Phe Gly Gly Leu Thr Tyr Thr Ile Gln Lys Asp
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Arg Gly Asn Gly Val Tyr Glu Ile Gln Thr Asp Gln Phe Gly Arg Val
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<400> 69
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Lys Val Ser Arg Lys Glu Phe Asn Asp Ser Lys Val Ile Asn Asn Ala
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165 170 175
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195 200 205
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210 215 220
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225 230 235 240
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245 250 255
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260 265 270
Thr Ala Arg Glu Gly Glu Glu Arg Lys Lys Leu Met Arg Gln Leu Glu
275 280 285
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305 310 315 320
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<400> 71
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Leu Asn Phe Ile Asn Gly Gly Lys
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<212> PRT
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<400> 72
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Gly Asp Leu Val Arg Val Thr Gln Ile Ile Asn Gly Gly Gln Asn Gly
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Leu
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Thr Arg Asp Ala Ile Ala Lys Leu Gly Thr Leu Gln Phe Thr Asp Lys
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Gln Leu Ala Thr Ile Gly Ala Gly Val Lys Pro Ile Asp Glu Ala Ser
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Leu Val Lys Lys Ile Val Asp Gly Val Arg Ala Leu Phe Gly Arg Ala
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Ala Ala
290
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<212> PRT
<213> 细菌噬菌体phi AB2
<400> 74
Met Ile Leu Thr Lys Asp Gly Phe Ser Ile Ile Arg Asn Glu Leu Phe
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Gly Gly Lys Leu Asp Gln Thr Gln Val Asp Ala Ile Asn Phe Ile Val
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Ile Phe Glu Arg Ala Leu Arg Ser Leu
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<213> 细菌噬菌体phi B4
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Met Ala Met Ala Leu Gln Thr Leu Ile Asp Lys Ala Asn Arg Lys Leu
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Tyr Trp Gly Thr Phe Lys
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<211> 274
<212> PRT
<213> 细菌噬菌体phi CTP1
<400> 76
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Asp Phe Ser Tyr Ile Thr Asp Glu Phe Ile Lys Tyr Ile Lys Gly Glu
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245 250 255
Ser Thr Arg Tyr Thr Thr Met Gln Ala Val Leu Asp Tyr Ile Lys Asn
260 265 270
Leu Lys
<210> 77
<211> 628
<212> PRT
<213> 葡萄球菌属(Staphylococcus)病毒187
<400> 77
Met Ala Leu Pro Lys Thr Gly Lys Pro Thr Ala Lys Gln Val Val Asp
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Trp Ala Ile Asn Leu Ile Gly Ser Gly Val Asp Val Asp Gly Tyr Tyr
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325 330 335
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Phe Asn Asp Lys Asp Lys Leu Leu Asn Asn Lys Pro Lys Asp Val Val
355 360 365
Glu Arg Ile Arg Ile Arg Thr Ile Val Lys Glu Asn Thr Lys Phe Val
370 375 380
Pro Ser Glu Leu Lys Pro Arg Asn Asn Ile Arg Asp Lys Gln Asp Ser
385 390 395 400
Lys Ile Asp Arg Val Ile Asn Asn Tyr Thr Leu Lys Gln Ala Leu Asn
405 410 415
Ile Gln Tyr Lys Leu Asn Pro Lys Pro Gln Thr Ser Asn Gly Val Ser
420 425 430
Trp Tyr Asn Ala Ser Val Asn Gln Ile Lys Ser Ala Met Asp Thr Thr
435 440 445
Lys Ile Phe Asn Asn Asn Val Gln Val Tyr Gln Phe Leu Lys Leu Asn
450 455 460
Gln Tyr Gln Gly Ile Pro Val Asp Lys Leu Asn Lys Leu Leu Val Gly
465 470 475 480
Lys Gly Thr Leu Ala Asn Gln Gly His Ala Phe Ala Asp Gly Cys Lys
485 490 495
Lys Tyr Asn Ile Asn Glu Ile Tyr Leu Ile Ala His Arg Phe Leu Glu
500 505 510
Ser Ala Asn Gly Thr Ser Phe Phe Ala Ser Gly Lys Thr Gly Val Tyr
515 520 525
Asn Tyr Phe Gly Ile Gly Ala Phe Asp Asn Asn Pro Asn Asn Ala Met
530 535 540
Ala Phe Ala Arg Ser His Gly Trp Thr Ser Pro Thr Lys Ala Ile Ile
545 550 555 560
Gly Gly Ala Glu Phe Val Gly Lys Gly Tyr Phe Asn Val Gly Gln Asn
565 570 575
Thr Leu Tyr Arg Met Arg Trp Asn Pro Gln Lys Pro Gly Thr His Gln
580 585 590
Tyr Ala Thr Asp Ile Ser Trp Ala Lys Val Gln Ala Gln Met Ile Ser
595 600 605
Ala Met Tyr Lys Glu Ile Gly Leu Thr Gly Asp Tyr Phe Ile Tyr Asp
610 615 620
Gln Tyr Lys Lys
625
<210> 78
<211> 291
<212> PRT
<213> 细菌噬菌体phi P35
<400> 78
Met Ala Arg Lys Phe Thr Lys Ala Glu Leu Val Ala Lys Ala Glu Lys
1 5 10 15
Lys Val Gly Gly Leu Lys Pro Asp Val Lys Lys Ala Val Leu Ser Ala
20 25 30
Val Lys Glu Ala Tyr Asp Arg Tyr Gly Ile Gly Ile Ile Val Ser Gln
35 40 45
Gly Tyr Arg Ser Ile Ala Glu Gln Asn Gly Leu Tyr Ala Gln Gly Arg
50 55 60
Thr Lys Pro Gly Asn Ile Val Thr Asn Ala Lys Gly Gly Gln Ser Asn
65 70 75 80
His Asn Phe Gly Val Ala Val Asp Phe Ala Ile Asp Leu Ile Asp Asp
85 90 95
Gly Lys Ile Asp Ser Trp Gln Pro Ser Ala Thr Ile Val Asn Met Met
100 105 110
Lys Arg Arg Gly Phe Lys Trp Gly Gly Asp Trp Lys Ser Phe Thr Asp
115 120 125
Leu Pro His Phe Glu Ala Cys Asp Trp Tyr Arg Gly Glu Arg Lys Tyr
130 135 140
Lys Val Asp Thr Ser Glu Trp Lys Lys Lys Glu Asn Ile Asn Ile Val
145 150 155 160
Ile Lys Asp Val Gly Tyr Phe Gln Asp Lys Pro Gln Phe Leu Asn Ser
165 170 175
Lys Ser Val Arg Gln Trp Lys His Gly Thr Lys Val Lys Leu Thr Lys
180 185 190
His Asn Ser His Trp Tyr Thr Gly Val Val Lys Asp Gly Asn Lys Ser
195 200 205
Val Arg Gly Tyr Ile Tyr His Ser Met Ala Lys Val Thr Ser Lys Asn
210 215 220
Ser Asp Gly Ser Val Asn Ala Thr Ile Asn Ala His Ala Phe Cys Trp
225 230 235 240
Asp Asn Lys Lys Leu Asn Gly Gly Asp Phe Ile Asn Leu Lys Arg Gly
245 250 255
Phe Lys Gly Ile Thr His Pro Ala Ser Asp Gly Phe Tyr Pro Leu Tyr
260 265 270
Phe Ala Ser Arg Lys Lys Thr Phe Tyr Ile Pro Arg Tyr Met Phe Asp
275 280 285
Ile Lys Lys
290
<210> 79
<211> 342
<212> PRT
<213> 细菌噬菌体phi CP-7
<400> 79
Met Val Lys Lys Asn Asp Leu Phe Val Asp Val Ala Ser His Gln Gly
1 5 10 15
Tyr Asp Ile Ser Gly Ile Leu Glu Glu Ala Gly Thr Thr Asn Thr Ile
20 25 30
Ile Lys Val Ser Glu Ser Thr Ser Tyr Leu Asn Pro Cys Leu Ser Ala
35 40 45
Gln Val Ser Gln Ser Asn Pro Ile Gly Phe Tyr His Phe Ala Trp Phe
50 55 60
Gly Gly Asn Glu Glu Glu Ala Glu Ala Glu Ala Arg Tyr Phe Leu Asp
65 70 75 80
Asn Val Pro Thr Gln Val Lys Tyr Leu Val Leu Asp Tyr Glu Asp His
85 90 95
Ala Ser Ala Ser Val Gln Arg Asn Thr Thr Ala Cys Leu Arg Phe Met
100 105 110
Gln Ile Ile Ala Glu Ala Gly Tyr Thr Pro Ile Tyr Tyr Ser Tyr Lys
115 120 125
Pro Phe Thr Leu Asp Asn Val Asp Tyr Gln Gln Ile Leu Ala Gln Phe
130 135 140
Pro Asn Ser Leu Trp Ile Ala Gly Tyr Gly Leu Asn Asp Gly Thr Ala
145 150 155 160
Asn Phe Glu Tyr Phe Pro Ser Met Asp Gly Ile Arg Trp Trp Gln Tyr
165 170 175
Ser Ser Asn Pro Phe Asp Lys Asn Ile Val Leu Leu Asp Asp Glu Lys
180 185 190
Glu Asp Asn Ile Asn Asn Glu Asn Thr Leu Lys Ser Leu Thr Thr Val
195 200 205
Ala Asn Glu Val Ile Gln Gly Leu Trp Gly Asn Gly Gln Glu Arg Tyr
210 215 220
Asp Ser Leu Ala Asn Ala Gly Tyr Asp Pro Gln Ala Val Gln Asp Lys
225 230 235 240
Val Asn Glu Ile Leu Asn Ala Arg Glu Ile Ala Asp Leu Thr Thr Val
245 250 255
Ala Asn Glu Val Ile Gln Gly Leu Trp Gly Asn Gly Gln Glu Arg Tyr
260 265 270
Asp Ser Leu Ala Asn Ala Gly Tyr Asp Pro Gln Ala Val Gln Asp Lys
275 280 285
Val Asn Glu Ile Leu Asn Ala Arg Glu Ile Ala Asp Leu Thr Thr Val
290 295 300
Ala Asn Glu Val Ile Gln Gly Leu Trp Gly Asn Gly Gln Glu Arg Tyr
305 310 315 320
Asp Ser Leu Ala Asn Ala Gly Tyr Asp Pro Gln Ala Val Gln Asp Lys
325 330 335
Val Asn Glu Leu Leu Ser
340
<210> 80
<211> 328
<212> PRT
<213> 细菌噬菌体phi EFAP-1
<400> 80
Met Lys Leu Lys Gly Ile Leu Leu Ser Val Val Thr Thr Phe Gly Leu
1 5 10 15
Leu Phe Gly Ala Thr Asn Val Gln Ala Tyr Glu Val Asn Asn Glu Phe
20 25 30
Asn Leu Gln Pro Trp Glu Gly Ser Gln Gln Leu Ala Tyr Pro Asn Lys
35 40 45
Ile Ile Leu His Glu Thr Ala Asn Pro Arg Ala Thr Gly Arg Asn Glu
50 55 60
Ala Thr Tyr Met Lys Asn Asn Trp Phe Asn Ala His Thr Thr Ala Ile
65 70 75 80
Val Gly Asp Gly Gly Ile Val Tyr Lys Val Ala Pro Glu Gly Asn Val
85 90 95
Ser Trp Gly Ala Gly Asn Ala Asn Pro Tyr Ala Pro Val Gln Ile Glu
100 105 110
Leu Gln His Thr Asn Asp Pro Glu Leu Phe Lys Ala Asn Tyr Lys Ala
115 120 125
Tyr Val Asp Tyr Thr Arg Asp Met Gly Lys Lys Phe Gly Ile Pro Met
130 135 140
Thr Leu Asp Gln Gly Gly Ser Leu Trp Glu Lys Gly Val Val Ser His
145 150 155 160
Gln Trp Val Thr Asp Phe Val Trp Gly Asp His Thr Asp Pro Tyr Gly
165 170 175
Tyr Leu Ala Lys Met Gly Ile Ser Lys Ala Gln Leu Ala His Asp Leu
180 185 190
Ala Asn Gly Val Ser Gly Asn Thr Ala Thr Pro Thr Pro Lys Pro Asp
195 200 205
Lys Pro Lys Pro Thr Gln Pro Ser Lys Pro Ser Asn Lys Lys Arg Phe
210 215 220
Asn Tyr Arg Val Asp Gly Leu Glu Tyr Val Asn Gly Met Trp Gln Ile
225 230 235 240
Tyr Asn Glu His Leu Gly Lys Ile Asp Phe Asn Trp Thr Glu Asn Gly
245 250 255
Ile Pro Val Glu Val Val Asp Lys Val Asn Pro Ala Thr Gly Gln Pro
260 265 270
Thr Lys Asp Gln Val Leu Lys Val Gly Asp Tyr Phe Asn Phe Gln Glu
275 280 285
Asn Ser Thr Gly Val Val Gln Glu Gln Thr Pro Tyr Met Gly Tyr Thr
290 295 300
Leu Ser His Val Gln Leu Pro Asn Glu Phe Ile Trp Leu Phe Thr Asp
305 310 315 320
Ser Lys Gln Ala Leu Met Tyr Gln
325
<210> 81
<211> 48
<212> PRT
<213> 智人
<400> 81
Ser Ser Leu Leu Glu Lys Gly Leu Asp Gly Ala Lys Lys Ala Val Gly
1 5 10 15
Gly Leu Gly Lys Leu Gly Lys Asp Ala Val Glu Asp Leu Glu Ser Val
20 25 30
Gly Lys Gly Ala Val His Asp Val Lys Asp Val Leu Asp Ser Val Leu
35 40 45
<210> 82
<211> 37
<212> PRT
<213> 刻克罗普斯蚕蛾(Hyalophora cecropia)
<400> 82
Lys Trp Lys Leu Phe Lys Lys Ile Glu Lys Val Gly Gln Asn Ile Arg
1 5 10 15
Asp Gly Ile Ile Lys Ala Gly Pro Ala Val Ala Val Val Gly Gln Ala
20 25 30
Thr Gln Ile Ala Lys
35
<210> 83
<211> 62
<212> PRT
<213> Drosophila teissieri
<400> 83
Met Lys Tyr Phe Ser Val Leu Val Val Leu Thr Leu Ile Leu Ala Ile
1 5 10 15
Val Asp Gln Ser Asp Ala Phe Ile Asn Leu Leu Asp Lys Val Glu Asp
20 25 30
Ala Leu His Thr Gly Ala Gln Ala Gly Phe Lys Leu Ile Arg Pro Val
35 40 45
Glu Arg Gly Ala Thr Pro Lys Lys Ser Glu Lys Pro Glu Lys
50 55 60
<210> 84
<211> 66
<212> PRT
<213> Bombyz mori
<400> 84
Met Asn Ile Leu Lys Phe Phe Phe Val Phe Ile Val Ala Met Ser Leu
1 5 10 15
Val Ser Cys Ser Thr Ala Ala Pro Ala Lys Ile Pro Ile Lys Ala Ile
20 25 30
Lys Thr Val Gly Lys Ala Val Gly Lys Gly Leu Arg Ala Ile Asn Ile
35 40 45
Ala Ser Thr Ala Asn Asp Val Phe Asn Phe Leu Lys Pro Lys Lys Arg
50 55 60
Lys His
65
<210> 85
<211> 71
<212> PRT
<213> 地中海实蝇(Ceratitis capitata)
<400> 85
Met Ala Asn Leu Lys Ala Val Phe Leu Ile Cys Ile Val Ala Phe Ile
1 5 10 15
Ala Leu Gln Cys Val Val Ala Glu Pro Ala Ala Glu Asp Ser Val Val
20 25 30
Val Lys Arg Ser Ile Gly Ser Ala Leu Lys Lys Ala Leu Pro Val Ala
35 40 45
Lys Lys Ile Gly Lys Ile Ala Leu Pro Ile Ala Lys Ala Ala Leu Pro
50 55 60
Val Ala Ala Gly Leu Val Gly
65 70
<210> 86
<211> 53
<212> PRT
<213> 蜜蜂(Apis mellifera)
<400> 86
Met Lys Val Val Ile Phe Ile Phe Ala Leu Leu Ala Thr Ile Cys Ala
1 5 10 15
Ala Phe Ala Tyr Val Pro Leu Pro Asn Val Pro Gln Pro Gly Arg Arg
20 25 30
Pro Phe Pro Thr Phe Pro Gly Gln Gly Pro Phe Asn Pro Lys Ile Lys
35 40 45
Trp Pro Gln Gly Tyr
50
<210> 87
<211> 283
<212> PRT
<213> 蜜蜂(Apis mellifera)
<400> 87
Lys Asn Phe Ala Leu Ala Ile Leu Val Val Thr Phe Val Val Ala Val
1 5 10 15
Phe Gly Asn Thr Asn Leu Asp Pro Pro Thr Arg Pro Thr Arg Leu Arg
20 25 30
Arg Glu Ala Lys Pro Glu Ala Glu Pro Gly Asn Asn Arg Pro Val Tyr
35 40 45
Ile Pro Gln Pro Arg Pro Pro His Pro Arg Leu Arg Arg Glu Ala Glu
50 55 60
Pro Glu Ala Glu Pro Gly Asn Asn Arg Pro Val Tyr Ile Pro Gln Pro
65 70 75 80
Arg Pro Pro His Pro Arg Leu Arg Arg Glu Ala Glu Leu Glu Ala Glu
85 90 95
Pro Gly Asn Asn Arg Pro Val Tyr Ile Ser Gln Pro Arg Pro Pro His
100 105 110
Pro Arg Leu Arg Arg Glu Ala Glu Pro Glu Ala Glu Pro Gly Asn Asn
115 120 125
Arg Pro Val Tyr Ile Pro Gln Pro Arg Pro Pro His Pro Arg Leu Arg
130 135 140
Arg Glu Ala Glu Leu Glu Ala Glu Pro Gly Asn Asn Arg Pro Val Tyr
145 150 155 160
Ile Ser Gln Pro Arg Pro Pro His Pro Arg Leu Arg Arg Glu Ala Glu
165 170 175
Pro Glu Ala Glu Pro Gly Asn Asn Arg Pro Val Tyr Ile Pro Gln Pro
180 185 190
Arg Pro Pro His Pro Arg Leu Arg Arg Glu Ala Glu Pro Glu Ala Glu
195 200 205
Pro Gly Asn Asn Arg Pro Val Tyr Ile Pro Gln Pro Arg Pro Pro His
210 215 220
Pro Arg Leu Arg Arg Glu Ala Glu Pro Glu Ala Glu Pro Gly Asn Asn
225 230 235 240
Arg Pro Val Tyr Ile Pro Gln Pro Arg Pro Pro His Pro Arg Leu Arg
245 250 255
Arg Glu Ala Lys Pro Glu Ala Lys Pro Gly Asn Asn Arg Pro Val Tyr
260 265 270
Ile Pro Gln Pro Arg Pro Pro His Pro Arg Ile
275 280
<210> 88
<211> 228
<212> PRT
<213> Sus scrofa
<400> 88
Met Glu Thr Gln Arg Ala Ser Leu Cys Leu Gly Arg Trp Ser Leu Trp
1 5 10 15
Leu Leu Leu Leu Ala Leu Val Val Pro Ser Ala Ser Ala Gln Ala Leu
20 25 30
Ser Tyr Arg Glu Ala Val Leu Arg Ala Val Asp Arg Leu Asn Glu Gln
35 40 45
Ser Ser Glu Ala Asn Leu Tyr Arg Leu Leu Glu Leu Asp Gln Pro Pro
50 55 60
Lys Ala Asp Glu Asp Pro Gly Thr Pro Lys Pro Val Ser Phe Thr Val
65 70 75 80
Lys Glu Thr Val Cys Pro Arg Pro Thr Arg Arg Pro Pro Glu Leu Cys
85 90 95
Asp Phe Lys Glu Asn Gly Arg Val Lys Gln Cys Val Gly Thr Val Thr
100 105 110
Leu Asp Gln Ile Lys Asp Pro Leu Asp Ile Thr Cys Asn Glu Gly Val
115 120 125
Arg Arg Phe Pro Trp Trp Trp Pro Phe Leu Arg Arg Pro Arg Leu Arg
130 135 140
Arg Gln Ala Phe Pro Pro Pro Asn Val Pro Gly Pro Arg Phe Pro Pro
145 150 155 160
Pro Asn Val Pro Gly Pro Arg Phe Pro Pro Pro Asn Phe Pro Gly Pro
165 170 175
Arg Phe Pro Pro Pro Asn Phe Pro Gly Pro Arg Phe Pro Pro Pro Asn
180 185 190
Phe Pro Gly Pro Pro Phe Pro Pro Pro Ile Phe Pro Gly Pro Trp Phe
195 200 205
Pro Pro Pro Pro Pro Phe Arg Pro Pro Pro Phe Gly Pro Pro Arg Phe
210 215 220
Pro Gly Arg Arg
225
<210> 89
<211> 144
<212> PRT
<213> Bos taurus
<400> 89
Met Gln Thr Gln Arg Ala Ser Leu Ser Leu Gly Arg Trp Ser Leu Trp
1 5 10 15
Leu Leu Leu Leu Gly Leu Val Val Pro Ser Ala Ser Ala Gln Ala Leu
20 25 30
Ser Tyr Arg Glu Ala Val Leu Arg Ala Val Asp Gln Leu Asn Glu Leu
35 40 45
Ser Ser Glu Ala Asn Leu Tyr Arg Leu Leu Glu Leu Asp Pro Pro Pro
50 55 60
Lys Asp Asn Glu Asp Leu Gly Thr Arg Lys Pro Val Ser Phe Thr Val
65 70 75 80
Lys Glu Thr Val Cys Pro Arg Thr Ile Gln Gln Pro Ala Glu Gln Cys
85 90 95
Asp Phe Lys Glu Lys Gly Arg Val Lys Gln Cys Val Gly Thr Val Thr
100 105 110
Leu Asp Pro Ser Asn Asp Gln Phe Asp Leu Asn Cys Asn Glu Leu Gln
115 120 125
Ser Val Ile Leu Pro Trp Lys Trp Pro Trp Trp Pro Trp Arg Arg Gly
130 135 140
<210> 90
<211> 149
<212> PRT
<213> Sus scrofa
<400> 90
Met Glu Thr Gln Arg Ala Ser Leu Cys Leu Gly Arg Trp Ser Leu Trp
1 5 10 15
Leu Leu Leu Leu Ala Leu Val Val Pro Ser Ala Ser Ala Gln Ala Leu
20 25 30
Ser Tyr Arg Glu Ala Val Leu Arg Ala Val Asp Arg Leu Asn Glu Gln
35 40 45
Ser Ser Glu Ala Asn Leu Tyr Arg Leu Leu Glu Leu Asp Gln Pro Pro
50 55 60
Lys Ala Asp Glu Asp Pro Gly Thr Pro Lys Pro Val Ser Phe Thr Val
65 70 75 80
Lys Glu Thr Val Cys Pro Arg Pro Thr Arg Gln Pro Pro Glu Leu Cys
85 90 95
Asp Phe Lys Glu Asn Gly Arg Val Lys Gln Cys Val Gly Thr Val Thr
100 105 110
Leu Asp Gln Ile Lys Asp Pro Leu Asp Ile Thr Cys Asn Glu Val Gln
115 120 125
Gly Val Arg Gly Gly Arg Leu Cys Tyr Cys Arg Arg Arg Phe Cys Val
130 135 140
Cys Val Gly Arg Gly
145
<210> 91
<211> 17
<212> PRT
<213> Tachypleus gigas
<400> 91
Lys Trp Cys Phe Arg Val Cys Tyr Arg Gly Ile Cys Tyr Arg Arg Cys
1 5 10 15
Arg
<210> 92
<211> 102
<212> PRT
<213> Anopheles gambiae
<400> 92
Met Lys Cys Ala Thr Ile Val Cys Thr Ile Ala Val Val Leu Ala Ala
1 5 10 15
Thr Leu Leu Asn Gly Ser Val Gln Ala Ala Pro Gln Glu Glu Ala Ala
20 25 30
Leu Ser Gly Gly Ala Asn Leu Asn Thr Leu Leu Asp Glu Leu Pro Glu
35 40 45
Glu Thr His His Ala Ala Leu Glu Asn Tyr Arg Ala Lys Arg Ala Thr
50 55 60
Cys Asp Leu Ala Ser Gly Phe Gly Val Gly Ser Ser Leu Cys Ala Ala
65 70 75 80
His Cys Ile Ala Arg Arg Tyr Arg Gly Gly Tyr Cys Asn Ser Lys Ala
85 90 95
Val Cys Val Cys Arg Asn
100
<210> 93
<211> 70
<212> PRT
<213> 黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)
<400> 93
Met Met Gln Ile Lys Tyr Leu Phe Ala Leu Phe Ala Val Leu Met Leu
1 5 10 15
Val Val Leu Gly Ala Asn Glu Ala Asp Ala Asp Cys Leu Ser Gly Arg
20 25 30
Tyr Lys Gly Pro Cys Ala Val Trp Asp Asn Glu Thr Cys Arg Arg Val
35 40 45
Cys Lys Glu Glu Gly Arg Ser Ser Gly His Cys Ser Pro Ser Leu Lys
50 55 60
Cys Trp Cys Glu Gly Cys
65 70
<210> 94
<211> 63
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 94
Met Thr Lys Ile Val Val Phe Ile Tyr Val Val Ile Leu Leu Leu Thr
1 5 10 15
Ile Phe His Val Ser Ala Lys Lys Lys Arg Tyr Ile Glu Cys Glu Thr
20 25 30
His Glu Asp Cys Ser Gln Val Phe Met Pro Pro Phe Val Met Arg Cys
35 40 45
Val Ile His Glu Cys Lys Ile Phe Asn Gly Glu His Leu Arg Tyr
50 55 60
<210> 95
<211> 76
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 95
Met Ala Lys Ile Met Lys Phe Val Tyr Asn Met Ile Pro Phe Leu Ser
1 5 10 15
Ile Phe Ile Ile Thr Leu Gln Val Asn Val Val Val Cys Glu Ile Asp
20 25 30
Ala Asp Cys Pro Gln Ile Cys Met Pro Pro Tyr Glu Val Arg Cys Val
35 40 45
Asn His Arg Cys Gly Trp Val Asn Thr Asp Asp Ser Leu Phe Leu Thr
50 55 60
Gln Glu Phe Thr Arg Ser Lys Gln Tyr Ile Ile Ser
65 70 75
<210> 96
<211> 76
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 96
Met Tyr Lys Val Val Glu Ser Ile Phe Ile Arg Tyr Met His Arg Lys
1 5 10 15
Pro Asn Met Thr Lys Phe Phe Lys Phe Val Tyr Thr Met Phe Ile Leu
20 25 30
Ile Ser Leu Phe Leu Val Val Thr Asn Ala Asn Ala His Asn Cys Thr
35 40 45
Asp Ile Ser Asp Cys Ser Ser Asn His Cys Ser Tyr Glu Gly Val Ser
50 55 60
Leu Cys Met Asn Gly Gln Cys Ile Cys Ile Tyr Glu
65 70 75
<210> 97
<211> 64
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 97
Met Val Glu Thr Leu Arg Leu Phe Tyr Ile Met Ile Leu Phe Val Ser
1 5 10 15
Leu Cys Leu Val Val Val Asp Gly Glu Ser Lys Leu Glu Gln Thr Cys
20 25 30
Ser Glu Asp Phe Glu Cys Tyr Ile Lys Asn Pro His Val Pro Phe Gly
35 40 45
His Leu Arg Cys Phe Glu Gly Phe Cys Gln Gln Leu Asn Gly Pro Ala
50 55 60
<210> 98
<211> 67
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 98
Met Ala Lys Ile Val Asn Phe Val Tyr Ser Met Ile Val Phe Leu Phe
1 5 10 15
Leu Phe Leu Val Ala Thr Lys Ala Ala Arg Gly Tyr Leu Cys Val Thr
20 25 30
Asp Ser His Cys Pro Pro His Met Cys Pro Pro Gly Met Glu Pro Arg
35 40 45
Cys Val Arg Arg Met Cys Lys Cys Leu Pro Ile Gly Trp Arg Lys Tyr
50 55 60
Phe Val Pro
65
<210> 99
<211> 96
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 99
Met Gln Ile Gly Lys Asn Met Val Glu Thr Pro Lys Leu Asp Tyr Val
1 5 10 15
Ile Ile Phe Phe Phe Leu Tyr Phe Phe Phe Arg Gln Met Ile Ile Leu
20 25 30
Arg Leu Asn Thr Thr Phe Arg Pro Leu Asn Phe Lys Met Leu Arg Phe
35 40 45
Trp Gly Gln Asn Arg Asn Ile Met Lys His Arg Gly Gln Lys Val His
50 55 60
Phe Ser Leu Ile Leu Ser Asp Cys Lys Thr Asn Lys Asp Cys Pro Lys
65 70 75 80
Leu Arg Arg Ala Asn Val Arg Cys Arg Lys Ser Tyr Cys Val Pro Ile
85 90 95
<210> 100
<211> 65
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 100
Met Leu Arg Leu Tyr Leu Val Ser Tyr Phe Leu Leu Lys Arg Thr Leu
1 5 10 15
Leu Val Ser Tyr Phe Ser Tyr Phe Ser Thr Tyr Ile Ile Glu Cys Lys
20 25 30
Thr Asp Asn Asp Cys Pro Ile Ser Gln Leu Lys Ile Tyr Ala Trp Lys
35 40 45
Cys Val Lys Asn Gly Cys His Leu Phe Asp Val Ile Pro Met Met Tyr
50 55 60
Glu
65
<210> 101
<211> 79
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 101
Met Ala Glu Ile Leu Lys Phe Val Tyr Ile Val Ile Leu Phe Val Ser
1 5 10 15
Leu Leu Leu Ile Val Val Ala Ser Glu Arg Glu Cys Val Thr Asp Asp
20 25 30
Asp Cys Glu Lys Leu Tyr Pro Thr Asn Glu Tyr Arg Met Met Cys Asp
35 40 45
Ser Gly Tyr Cys Met Asn Leu Leu Asn Gly Lys Ile Ile Tyr Leu Leu
50 55 60
Cys Leu Lys Lys Lys Lys Phe Leu Ile Ile Ile Ser Val Leu Leu
65 70 75
<210> 102
<211> 95
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 102
Met Ala Glu Ile Ile Lys Phe Val Tyr Ile Met Ile Leu Cys Val Ser
1 5 10 15
Leu Leu Leu Ile Glu Val Ala Gly Glu Glu Cys Val Thr Asp Ala Asp
20 25 30
Cys Asp Lys Leu Tyr Pro Asp Ile Arg Lys Pro Leu Met Cys Ser Ile
35 40 45
Gly Glu Cys Tyr Ser Leu Tyr Lys Gly Lys Phe Ser Leu Ser Ile Ile
50 55 60
Ser Lys Thr Ser Phe Ser Leu Met Val Tyr Asn Val Val Thr Leu Val
65 70 75 80
Ile Cys Leu Arg Leu Ala Tyr Ile Ser Leu Leu Leu Lys Phe Leu
85 90 95
<210> 103
<211> 100
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 103
Met Ala Glu Ile Leu Lys Asp Phe Tyr Ala Met Asn Leu Phe Ile Phe
1 5 10 15
Leu Ile Ile Leu Pro Ala Lys Ile Arg Gly Glu Thr Leu Ser Leu Thr
20 25 30
His Pro Lys Cys His His Ile Met Leu Pro Ser Leu Phe Ile Thr Glu
35 40 45
Val Phe Gln Arg Val Thr Asp Asp Gly Cys Pro Lys Pro Val Asn His
50 55 60
Leu Arg Val Val Lys Cys Ile Glu His Ile Cys Glu Tyr Gly Tyr Asn
65 70 75 80
Tyr Arg Pro Asp Phe Ala Ser Gln Ile Pro Glu Ser Thr Lys Met Pro
85 90 95
Arg Lys Arg Glu
100
<210> 104
<211> 78
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 104
Met Val Glu Ile Leu Lys Asn Phe Tyr Ala Met Asn Leu Phe Ile Phe
1 5 10 15
Leu Ile Ile Leu Ala Val Lys Ile Arg Gly Ala His Phe Pro Cys Val
20 25 30
Thr Asp Asp Asp Cys Pro Lys Pro Val Asn Lys Leu Arg Val Ile Lys
35 40 45
Cys Ile Asp His Ile Cys Gln Tyr Ala Arg Asn Leu Pro Asp Phe Ala
50 55 60
Ser Glu Ile Ser Glu Ser Thr Lys Met Pro Cys Lys Gly Glu
65 70 75
<210> 105
<211> 72
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 105
Met Phe His Ala Gln Ala Glu Asn Met Ala Lys Val Ser Asn Phe Val
1 5 10 15
Cys Ile Met Ile Leu Phe Leu Ala Leu Phe Phe Ile Thr Met Asn Asp
20 25 30
Ala Ala Arg Phe Glu Cys Arg Glu Asp Ser His Cys Val Thr Arg Ile
35 40 45
Lys Cys Val Leu Pro Arg Lys Pro Glu Cys Arg Asn Tyr Ala Cys Gly
50 55 60
Cys Tyr Asp Ser Asn Lys Tyr Arg
65 70
<210> 106
<211> 78
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 106
Met Gln Met Arg Gln Asn Met Ala Thr Ile Leu Asn Phe Val Phe Val
1 5 10 15
Ile Ile Leu Phe Ile Ser Leu Leu Leu Val Val Thr Lys Gly Tyr Arg
20 25 30
Glu Pro Phe Ser Ser Phe Thr Glu Gly Pro Thr Cys Lys Glu Asp Ile
35 40 45
Asp Cys Pro Ser Ile Ser Cys Val Asn Pro Gln Val Pro Lys Cys Ile
50 55 60
Met Phe Glu Cys His Cys Lys Tyr Ile Pro Thr Thr Leu Lys
65 70 75
<210> 107
<211> 71
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 107
Met Ala Thr Ile Leu Met Tyr Val Tyr Ile Thr Ile Leu Phe Ile Ser
1 5 10 15
Ile Leu Thr Val Leu Thr Glu Gly Leu Tyr Glu Pro Leu Tyr Asn Phe
20 25 30
Arg Arg Asp Pro Asp Cys Arg Arg Asn Ile Asp Cys Pro Ser Tyr Leu
35 40 45
Cys Val Ala Pro Lys Val Pro Arg Cys Ile Met Phe Glu Cys His Cys
50 55 60
Lys Asp Ile Pro Ser Asp His
65 70
<210> 108
<211> 57
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 108
Met Thr Thr Ser Leu Lys Phe Val Tyr Val Ala Ile Leu Phe Leu Ser
1 5 10 15
Leu Leu Leu Val Val Met Gly Gly Ile Arg Arg Phe Glu Cys Arg Gln
20 25 30
Asp Ser Asp Cys Pro Ser Tyr Phe Cys Glu Lys Leu Thr Val Pro Lys
35 40 45
Cys Phe Trp Ser Lys Cys Tyr Cys Lys
50 55
<210> 109
<211> 57
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 109
Met Thr Thr Ser Leu Lys Phe Val Tyr Val Ala Ile Leu Phe Leu Ser
1 5 10 15
Leu Leu Leu Val Val Met Gly Gly Ile Arg Lys Lys Glu Cys Arg Gln
20 25 30
Asp Ser Asp Cys Pro Ser Tyr Phe Cys Glu Lys Leu Thr Ile Ala Lys
35 40 45
Cys Ile His Ser Thr Cys Leu Cys Lys
50 55
<210> 110
<211> 66
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 110
Met Gln Ile Gly Lys Asn Met Val Glu Thr Pro Lys Leu Val Tyr Phe
1 5 10 15
Ile Ile Leu Phe Leu Ser Ile Phe Leu Cys Ile Thr Val Ser Asn Ser
20 25 30
Ser Phe Ser Gln Ile Phe Asn Ser Ala Cys Lys Thr Asp Lys Asp Cys
35 40 45
Pro Lys Phe Gly Arg Val Asn Val Arg Cys Arg Lys Gly Asn Cys Val
50 55 60
Pro Ile
65
<210> 111
<211> 57
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 111
Met Thr Ala Ile Leu Lys Lys Phe Ile Asn Ala Val Phe Leu Phe Ile
1 5 10 15
Val Leu Phe Leu Ala Thr Thr Asn Val Glu Asp Phe Val Gly Gly Ser
20 25 30
Asn Asp Glu Cys Val Tyr Pro Asp Val Phe Gln Cys Ile Asn Asn Ile
35 40 45
Cys Lys Cys Val Ser His His Arg Thr
50 55
<210> 112
<211> 74
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 112
Met Gln Lys Arg Lys Asn Met Ala Gln Ile Ile Phe Tyr Val Tyr Ala
1 5 10 15
Leu Ile Ile Leu Phe Ser Pro Phe Leu Ala Ala Arg Leu Val Phe Val
20 25 30
Asn Pro Glu Lys Pro Cys Val Thr Asp Ala Asp Cys Asp Arg Tyr Arg
35 40 45
His Glu Ser Ala Ile Tyr Ser Asp Met Phe Cys Lys Asp Gly Tyr Cys
50 55 60
Phe Ile Asp Tyr His His Asp Pro Tyr Pro
65 70
<210> 113
<211> 76
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 113
Met Gln Met Arg Lys Asn Met Ala Gln Ile Leu Phe Tyr Val Tyr Ala
1 5 10 15
Leu Leu Ile Leu Phe Thr Pro Phe Leu Val Ala Arg Ile Met Val Val
20 25 30
Asn Pro Asn Asn Pro Cys Val Thr Asp Ala Asp Cys Gln Arg Tyr Arg
35 40 45
His Lys Leu Ala Thr Arg Met Ile Cys Asn Gln Gly Phe Cys Leu Met
50 55 60
Asp Phe Thr His Asp Pro Tyr Ala Pro Ser Leu Pro
65 70 75
<210> 114
<211> 64
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 114
Met Asn His Ile Ser Lys Phe Val Tyr Ala Leu Ile Ile Phe Leu Ser
1 5 10 15
Ile Tyr Leu Val Val Leu Asp Gly Leu Pro Ile Ser Cys Lys Asp His
20 25 30
Phe Glu Cys Arg Arg Lys Ile Asn Ile Leu Arg Cys Ile Tyr Arg Gln
35 40 45
Glu Lys Pro Met Cys Ile Asn Ser Ile Cys Thr Cys Val Lys Leu Leu
50 55 60
<210> 115
<211> 67
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 115
Met Gln Arg Glu Lys Asn Met Ala Lys Ile Phe Glu Phe Val Tyr Ala
1 5 10 15
Met Ile Ile Phe Ile Leu Leu Phe Leu Val Glu Lys Asn Val Val Ala
20 25 30
Tyr Leu Lys Phe Glu Cys Lys Thr Asp Asp Asp Cys Gln Lys Ser Leu
35 40 45
Leu Lys Thr Tyr Val Trp Lys Cys Val Lys Asn Glu Cys Tyr Phe Phe
50 55 60
Ala Lys Lys
65
<210> 116
<211> 61
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 116
Met Ala Gly Ile Ile Lys Phe Val His Val Leu Ile Ile Phe Leu Ser
1 5 10 15
Leu Phe His Val Val Lys Asn Asp Asp Gly Ser Phe Cys Phe Lys Asp
20 25 30
Ser Asp Cys Pro Asp Glu Met Cys Pro Ser Pro Leu Lys Glu Met Cys
35 40 45
Tyr Phe Leu Gln Cys Lys Cys Gly Val Asp Thr Ile Ala
50 55 60
<210> 117
<211> 59
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 117
Met Ala Asn Thr His Lys Leu Val Ser Met Ile Leu Phe Ile Phe Leu
1 5 10 15
Phe Leu Ala Ser Asn Asn Val Glu Gly Tyr Val Asn Cys Glu Thr Asp
20 25 30
Ala Asp Cys Pro Pro Ser Thr Arg Val Lys Arg Phe Lys Cys Val Lys
35 40 45
Gly Glu Cys Arg Trp Thr Arg Met Ser Tyr Ala
50 55
<210> 118
<211> 63
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 118
Met Gln Arg Arg Lys Lys Lys Ala Gln Val Val Met Phe Val His Asp
1 5 10 15
Leu Ile Ile Cys Ile Tyr Leu Phe Ile Val Ile Thr Thr Arg Lys Thr
20 25 30
Asp Ile Arg Cys Arg Phe Tyr Tyr Asp Cys Pro Arg Leu Glu Tyr His
35 40 45
Phe Cys Glu Cys Ile Glu Asp Phe Cys Ala Tyr Ile Arg Leu Asn
50 55 60
<210> 119
<211> 57
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 119
Met Ala Lys Val Tyr Met Phe Val Tyr Ala Leu Ile Ile Phe Val Ser
1 5 10 15
Pro Phe Leu Leu Ala Thr Phe Arg Thr Arg Leu Pro Cys Glu Lys Asp
20 25 30
Asp Asp Cys Pro Glu Ala Phe Leu Pro Pro Val Met Lys Cys Val Asn
35 40 45
Arg Phe Cys Gln Tyr Glu Ile Leu Glu
50 55
<210> 120
<211> 77
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 120
Met Ile Lys Gln Phe Ser Val Cys Tyr Ile Gln Met Arg Arg Asn Met
1 5 10 15
Thr Thr Ile Leu Lys Phe Pro Tyr Ile Met Val Ile Cys Leu Leu Leu
20 25 30
Leu His Val Ala Ala Tyr Glu Asp Phe Glu Lys Glu Ile Phe Asp Cys
35 40 45
Lys Lys Asp Gly Asp Cys Asp His Met Cys Val Thr Pro Gly Ile Pro
50 55 60
Lys Cys Thr Gly Tyr Val Cys Phe Cys Phe Glu Asn Leu
65 70 75
<210> 121
<211> 73
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 121
Met Gln Arg Ser Arg Asn Met Thr Thr Ile Phe Lys Phe Ala Tyr Ile
1 5 10 15
Met Ile Ile Cys Val Phe Leu Leu Asn Ile Ala Ala Gln Glu Ile Glu
20 25 30
Asn Gly Ile His Pro Cys Lys Lys Asn Glu Asp Cys Asn His Met Cys
35 40 45
Val Met Pro Gly Leu Pro Trp Cys His Glu Asn Asn Leu Cys Phe Cys
50 55 60
Tyr Glu Asn Ala Tyr Gly Asn Thr Arg
65 70
<210> 122
<211> 85
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 122
Met Thr Ile Ile Ile Lys Phe Val Asn Val Leu Ile Ile Phe Leu Ser
1 5 10 15
Leu Phe His Val Ala Lys Asn Asp Asp Asn Lys Leu Leu Leu Ser Phe
20 25 30
Ile Glu Glu Gly Phe Leu Cys Phe Lys Asp Ser Asp Cys Pro Tyr Asn
35 40 45
Met Cys Pro Ser Pro Leu Lys Glu Met Cys Tyr Phe Ile Lys Cys Val
50 55 60
Cys Gly Val Tyr Gly Pro Ile Arg Glu Arg Arg Leu Tyr Gln Ser His
65 70 75 80
Asn Pro Met Ile Gln
85
<210> 123
<211> 69
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 123
Met Arg Lys Asn Met Thr Lys Ile Leu Met Ile Gly Tyr Ala Leu Met
1 5 10 15
Ile Phe Ile Phe Leu Ser Ile Ala Val Ser Ile Thr Gly Asn Leu Ala
20 25 30
Arg Ala Ser Arg Lys Lys Pro Val Asp Val Ile Pro Cys Ile Tyr Asp
35 40 45
His Asp Cys Pro Arg Lys Leu Tyr Phe Leu Glu Arg Cys Val Gly Arg
50 55 60
Val Cys Lys Tyr Leu
65
<210> 124
<211> 58
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 124
Met Ala His Lys Leu Val Tyr Ala Ile Thr Leu Phe Ile Phe Leu Phe
1 5 10 15
Leu Ile Ala Asn Asn Ile Glu Asp Asp Ile Phe Cys Ile Thr Asp Asn
20 25 30
Asp Cys Pro Pro Asn Thr Leu Val Gln Arg Tyr Arg Cys Ile Asn Gly
35 40 45
Lys Cys Asn Leu Ser Phe Val Ser Tyr Gly
50 55
<210> 125
<211> 61
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 125
Met Asp Glu Thr Leu Lys Phe Val Tyr Ile Leu Ile Leu Phe Val Ser
1 5 10 15
Leu Cys Leu Val Val Ala Asp Gly Val Lys Asn Ile Asn Arg Glu Cys
20 25 30
Thr Gln Thr Ser Asp Cys Tyr Lys Lys Tyr Pro Phe Ile Pro Trp Gly
35 40 45
Lys Val Arg Cys Val Lys Gly Arg Cys Arg Leu Asp Met
50 55 60
<210> 126
<211> 62
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 126
Met Ala Lys Ile Ile Lys Phe Val Tyr Val Leu Ala Ile Phe Phe Ser
1 5 10 15
Leu Phe Leu Val Ala Lys Asn Val Asn Gly Trp Thr Cys Val Glu Asp
20 25 30
Ser Asp Cys Pro Ala Asn Ile Cys Gln Pro Pro Met Gln Arg Met Cys
35 40 45
Phe Tyr Gly Glu Cys Ala Cys Val Arg Ser Lys Phe Cys Thr
50 55 60
<210> 127
<211> 61
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 127
Met Val Lys Ile Ile Lys Phe Val Tyr Phe Met Thr Leu Phe Leu Ser
1 5 10 15
Met Leu Leu Val Thr Thr Lys Glu Asp Gly Ser Val Glu Cys Ile Ala
20 25 30
Asn Ile Asp Cys Pro Gln Ile Phe Met Leu Pro Phe Val Met Arg Cys
35 40 45
Ile Asn Phe Arg Cys Gln Ile Val Asn Ser Glu Asp Thr
50 55 60
<210> 128
<211> 67
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 128
Met Asp Glu Ile Leu Lys Phe Val Tyr Thr Leu Ile Ile Phe Phe Ser
1 5 10 15
Leu Phe Phe Ala Ala Asn Asn Val Asp Ala Asn Ile Met Asn Cys Gln
20 25 30
Ser Thr Phe Asp Cys Pro Arg Asp Met Cys Ser His Ile Arg Asp Val
35 40 45
Ile Cys Ile Phe Lys Lys Cys Lys Cys Ala Gly Gly Arg Tyr Met Pro
50 55 60
Gln Val Pro
65
<210> 129
<211> 62
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 129
Met Gln Arg Arg Lys Asn Met Ala Asn Asn His Met Leu Ile Tyr Ala
1 5 10 15
Met Ile Ile Cys Leu Phe Pro Tyr Leu Val Val Thr Phe Lys Thr Ala
20 25 30
Ile Thr Cys Asp Cys Asn Glu Asp Cys Leu Asn Phe Phe Thr Pro Leu
35 40 45
Asp Asn Leu Lys Cys Ile Asp Asn Val Cys Glu Val Phe Met
50 55 60
<210> 130
<211> 65
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 130
Met Val Asn Ile Leu Lys Phe Ile Tyr Val Ile Ile Phe Phe Ile Leu
1 5 10 15
Met Phe Phe Val Leu Ile Asp Val Asp Gly His Val Leu Val Glu Cys
20 25 30
Ile Glu Asn Arg Asp Cys Glu Lys Gly Met Cys Lys Phe Pro Phe Ile
35 40 45
Val Arg Cys Leu Met Asp Gln Cys Lys Cys Val Arg Ile His Asn Leu
50 55 60
Ile
65
<210> 131
<211> 74
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 131
Met Ile Ile Gln Phe Ser Ile Tyr Tyr Met Gln Arg Arg Lys Leu Asn
1 5 10 15
Met Val Glu Ile Leu Lys Phe Ser His Ala Leu Ile Ile Phe Leu Phe
20 25 30
Leu Ser Ala Leu Val Thr Asn Ala Asn Ile Phe Phe Cys Ser Thr Asp
35 40 45
Glu Asp Cys Thr Trp Asn Leu Cys Arg Gln Pro Trp Val Gln Lys Cys
50 55 60
Arg Leu His Met Cys Ser Cys Glu Lys Asn
65 70
<210> 132
<211> 58
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 132
Met Asp Glu Val Phe Lys Phe Val Tyr Val Met Ile Ile Phe Pro Phe
1 5 10 15
Leu Ile Leu Asp Val Ala Thr Asn Ala Glu Lys Ile Arg Arg Cys Phe
20 25 30
Asn Asp Ala His Cys Pro Pro Asp Met Cys Thr Leu Gly Val Ile Pro
35 40 45
Lys Cys Ser Arg Phe Thr Ile Cys Ile Cys
50 55
<210> 133
<211> 64
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 133
Met His Arg Lys Pro Asn Met Thr Lys Phe Phe Lys Phe Val Tyr Thr
1 5 10 15
Met Phe Ile Leu Ile Ser Leu Phe Leu Val Val Thr Asn Ala Asn Ala
20 25 30
Asn Asn Cys Thr Asp Thr Ser Asp Cys Ser Ser Asn His Cys Ser Tyr
35 40 45
Glu Gly Val Ser Leu Cys Met Asn Gly Gln Cys Ile Cys Ile Tyr Glu
50 55 60
<210> 134
<211> 69
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 134
Met Gln Met Lys Lys Met Ala Thr Ile Leu Lys Phe Val Tyr Leu Ile
1 5 10 15
Ile Leu Leu Ile Tyr Pro Leu Leu Val Val Thr Glu Glu Ser His Tyr
20 25 30
Met Lys Phe Ser Ile Cys Lys Asp Asp Thr Asp Cys Pro Thr Leu Phe
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Cys Val Leu Pro Asn Val Pro Lys Cys Ile Gly Ser Lys Cys His Cys
50 55 60
Lys Leu Met Val Asn
65
<210> 135
<211> 64
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 135
Met Val Glu Thr Leu Arg Leu Phe Tyr Ile Met Ile Leu Phe Val Ser
1 5 10 15
Leu Tyr Leu Val Val Val Asp Gly Val Ser Lys Leu Ala Gln Ser Cys
20 25 30
Ser Glu Asp Phe Glu Cys Tyr Ile Lys Asn Pro His Ala Pro Phe Gly
35 40 45
Gln Leu Arg Cys Phe Glu Gly Tyr Cys Gln Arg Leu Asp Lys Pro Thr
50 55 60
<210> 136
<211> 63
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 136
Met Thr Thr Phe Leu Lys Val Ala Tyr Ile Met Ile Ile Cys Val Phe
1 5 10 15
Val Leu His Leu Ala Ala Gln Val Asp Ser Gln Lys Arg Leu His Gly
20 25 30
Cys Lys Glu Asp Arg Asp Cys Asp Asn Ile Cys Ser Val His Ala Val
35 40 45
Thr Lys Cys Ile Gly Asn Met Cys Arg Cys Leu Ala Asn Val Lys
50 55 60
<210> 137
<211> 61
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 137
Met Arg Ile Asn Arg Thr Pro Ala Ile Phe Lys Phe Val Tyr Thr Ile
1 5 10 15
Ile Ile Tyr Leu Phe Leu Leu Arg Val Val Ala Lys Asp Leu Pro Phe
20 25 30
Asn Ile Cys Glu Lys Asp Glu Asp Cys Leu Glu Phe Cys Ala His Asp
35 40 45
Lys Val Ala Lys Cys Met Leu Asn Ile Cys Phe Cys Phe
50 55 60
<210> 138
<211> 54
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 138
Met Ala Glu Ile Leu Lys Ile Leu Tyr Val Phe Ile Ile Phe Leu Ser
1 5 10 15
Leu Ile Leu Ala Val Ile Ser Gln His Pro Phe Thr Pro Cys Glu Thr
20 25 30
Asn Ala Asp Cys Lys Cys Arg Asn His Lys Arg Pro Asp Cys Leu Trp
35 40 45
His Lys Cys Tyr Cys Tyr
50
<210> 139
<211> 65
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 139
Met Arg Lys Ser Met Ala Thr Ile Leu Lys Phe Val Tyr Val Ile Met
1 5 10 15
Leu Phe Ile Tyr Ser Leu Phe Val Ile Glu Ser Phe Gly His Arg Phe
20 25 30
Leu Ile Tyr Asn Asn Cys Lys Asn Asp Thr Glu Cys Pro Asn Asp Cys
35 40 45
Gly Pro His Glu Gln Ala Lys Cys Ile Leu Tyr Ala Cys Tyr Cys Val
50 55 60
Glu
65
<210> 140
<211> 58
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 140
Met Asn Thr Ile Leu Lys Phe Ile Phe Val Val Phe Leu Phe Leu Ser
1 5 10 15
Ile Phe Leu Ser Ala Gly Asn Ser Lys Ser Tyr Gly Pro Cys Thr Thr
20 25 30
Leu Gln Asp Cys Glu Thr His Asn Trp Phe Glu Val Cys Ser Cys Ile
35 40 45
Asp Phe Glu Cys Lys Cys Trp Ser Leu Leu
50 55
<210> 141
<211> 64
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 141
Met Ala Glu Ile Ile Lys Phe Val Tyr Ile Met Ile Leu Cys Val Ser
1 5 10 15
Leu Leu Leu Ile Ala Glu Ala Ser Gly Lys Glu Cys Val Thr Asp Ala
20 25 30
Asp Cys Glu Asn Leu Tyr Pro Gly Asn Lys Lys Pro Met Phe Cys Asn
35 40 45
Asn Thr Gly Tyr Cys Met Ser Leu Tyr Lys Glu Pro Ser Arg Tyr Met
50 55 60
<210> 142
<211> 64
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 142
Met Ala Lys Ile Ile Lys Phe Val Tyr Ile Met Ile Leu Cys Val Ser
1 5 10 15
Leu Leu Leu Ile Val Glu Ala Gly Gly Lys Glu Cys Val Thr Asp Val
20 25 30
Asp Cys Glu Lys Ile Tyr Pro Gly Asn Lys Lys Pro Leu Ile Cys Ser
35 40 45
Thr Gly Tyr Cys Tyr Ser Leu Tyr Glu Glu Pro Pro Arg Tyr His Lys
50 55 60
<210> 143
<211> 64
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 143
Met Ala Lys Val Thr Lys Phe Gly Tyr Ile Ile Ile His Phe Leu Ser
1 5 10 15
Leu Phe Phe Leu Ala Met Asn Val Ala Gly Gly Arg Glu Cys His Ala
20 25 30
Asn Ser His Cys Val Gly Lys Ile Thr Cys Val Leu Pro Gln Lys Pro
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Glu Cys Trp Asn Tyr Ala Cys Val Cys Tyr Asp Ser Asn Lys Tyr Arg
50 55 60
<210> 144
<211> 55
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 144
Met Ala Lys Ile Phe Asn Tyr Val Tyr Ala Leu Ile Met Phe Leu Ser
1 5 10 15
Leu Phe Leu Met Gly Thr Ser Gly Met Lys Asn Gly Cys Lys His Thr
20 25 30
Gly His Cys Pro Arg Lys Met Cys Gly Ala Lys Thr Thr Lys Cys Arg
35 40 45
Asn Asn Lys Cys Gln Cys Val
50 55
<210> 145
<211> 69
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 145
Met Thr Glu Ile Leu Lys Phe Val Cys Val Met Ile Ile Phe Ile Ser
1 5 10 15
Ser Phe Ile Val Ser Lys Ser Leu Asn Gly Gly Gly Lys Asp Lys Cys
20 25 30
Phe Arg Asp Ser Asp Cys Pro Lys His Met Cys Pro Ser Ser Leu Val
35 40 45
Ala Lys Cys Ile Asn Arg Leu Cys Arg Cys Arg Arg Pro Glu Leu Gln
50 55 60
Val Gln Leu Asn Pro
65
<210> 146
<211> 69
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 146
Met Ala His Ile Ile Met Phe Val Tyr Ala Leu Ile Tyr Ala Leu Ile
1 5 10 15
Ile Phe Ser Ser Leu Phe Val Arg Asp Gly Ile Pro Cys Leu Ser Asp
20 25 30
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35 40 45
Ile Cys Glu Tyr Asp Leu Gly Glu Met Ser Asp Asp Asp Tyr Tyr Leu
50 55 60
Glu Met Ser Arg Glu
65
<210> 147
<211> 77
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 147
Met Tyr Arg Glu Lys Asn Met Ala Lys Thr Leu Lys Phe Val Tyr Val
1 5 10 15
Ile Val Leu Phe Leu Ser Leu Phe Leu Ala Ala Lys Asn Ile Asp Gly
20 25 30
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35 40 45
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50 55 60
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65 70 75
<210> 148
<211> 56
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 148
Met Ala His Ile Phe Asn Tyr Val Tyr Ala Leu Leu Val Phe Leu Ser
1 5 10 15
Leu Phe Leu Met Val Thr Asn Gly Ile His Ile Gly Cys Asp Lys Asp
20 25 30
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Leu Lys Asn Ile Cys Lys Cys Val
50 55
<210> 149
<211> 77
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 149
Met Ala Glu Ile Leu Lys Cys Phe Tyr Thr Met Asn Leu Phe Ile Phe
1 5 10 15
Leu Ile Ile Leu Pro Ala Lys Ile Arg Glu His Ile Gln Cys Val Ile
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Asp Asp Asp Cys Pro Lys Ser Leu Asn Lys Leu Leu Ile Ile Lys Cys
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65 70 75
<210> 150
<211> 70
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 150
Met Ala Tyr Ile Ser Arg Ile Phe Tyr Val Leu Ile Ile Phe Leu Ser
1 5 10 15
Leu Phe Phe Val Val Ile Asn Gly Val Lys Ser Leu Leu Leu Ile Lys
20 25 30
Val Arg Ser Phe Ile Pro Cys Gln Arg Ser Asp Asp Cys Pro Arg Asn
35 40 45
Leu Cys Val Asp Gln Ile Ile Pro Thr Cys Val Trp Ala Lys Cys Lys
50 55 60
Cys Lys Asn Tyr Asn Asp
65 70
<210> 151
<211> 64
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 151
Met Ala Asn Val Thr Lys Phe Val Tyr Ile Ala Ile Tyr Phe Leu Ser
1 5 10 15
Leu Phe Phe Ile Ala Lys Asn Asp Ala Thr Ala Thr Phe Cys His Asp
20 25 30
Asp Ser His Cys Val Thr Lys Ile Lys Cys Val Leu Pro Arg Thr Pro
35 40 45
Gln Cys Arg Asn Glu Ala Cys Gly Cys Tyr His Ser Asn Lys Phe Arg
50 55 60
<210> 152
<211> 62
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 152
Met Gly Glu Ile Met Lys Phe Val Tyr Val Met Ile Ile Tyr Leu Phe
1 5 10 15
Met Phe Asn Val Ala Thr Gly Ser Glu Phe Ile Phe Thr Lys Lys Leu
20 25 30
Thr Ser Cys Asp Ser Ser Lys Asp Cys Arg Ser Phe Leu Cys Tyr Ser
35 40 45
Pro Lys Phe Pro Val Cys Lys Arg Gly Ile Cys Glu Cys Ile
50 55 60
<210> 153
<211> 61
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 153
Met Gly Glu Met Phe Lys Phe Ile Tyr Thr Phe Ile Leu Phe Val His
1 5 10 15
Leu Phe Leu Val Val Ile Phe Glu Asp Ile Gly His Ile Lys Tyr Cys
20 25 30
Gly Ile Val Asp Asp Cys Tyr Lys Ser Lys Lys Pro Leu Phe Lys Ile
35 40 45
Trp Lys Cys Val Glu Asn Val Cys Val Leu Trp Tyr Lys
50 55 60
<210> 154
<211> 63
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 154
Met Ala Arg Thr Leu Lys Phe Val Tyr Ser Met Ile Leu Phe Leu Ser
1 5 10 15
Leu Phe Leu Val Ala Asn Gly Leu Lys Ile Phe Cys Ile Asp Val Ala
20 25 30
Asp Cys Pro Lys Asp Leu Tyr Pro Leu Leu Tyr Lys Cys Ile Tyr Asn
35 40 45
Lys Cys Ile Val Phe Thr Arg Ile Pro Phe Pro Phe Asp Trp Ile
50 55 60
<210> 155
<211> 66
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 155
Met Ala Asn Ile Thr Lys Phe Val Tyr Ile Ala Ile Leu Phe Leu Ser
1 5 10 15
Leu Phe Phe Ile Gly Met Asn Asp Ala Ala Ile Leu Glu Cys Arg Glu
20 25 30
Asp Ser His Cys Val Thr Lys Ile Lys Cys Val Leu Pro Arg Lys Pro
35 40 45
Glu Cys Arg Asn Asn Ala Cys Thr Cys Tyr Lys Gly Gly Phe Ser Phe
50 55 60
His His
65
<210> 156
<211> 68
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 156
Met Gln Arg Val Lys Lys Met Ser Glu Thr Leu Lys Phe Val Tyr Val
1 5 10 15
Leu Ile Leu Phe Ile Ser Ile Phe His Val Val Ile Val Cys Asp Ser
20 25 30
Ile Tyr Phe Pro Val Ser Arg Pro Cys Ile Thr Asp Lys Asp Cys Pro
35 40 45
Asn Met Lys His Tyr Lys Ala Lys Cys Arg Lys Gly Phe Cys Ile Ser
50 55 60
Ser Arg Val Arg
65
<210> 157
<211> 72
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 157
Met Gln Ile Arg Lys Ile Met Ser Gly Val Leu Lys Phe Val Tyr Ala
1 5 10 15
Ile Ile Leu Phe Leu Phe Leu Phe Leu Val Ala Arg Glu Val Gly Gly
20 25 30
Leu Glu Thr Ile Glu Cys Glu Thr Asp Gly Asp Cys Pro Arg Ser Met
35 40 45
Ile Lys Met Trp Asn Lys Asn Tyr Arg His Lys Cys Ile Asp Gly Lys
50 55 60
Cys Glu Trp Ile Lys Lys Leu Pro
65 70
<210> 158
<211> 54
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 158
Met Phe Val Tyr Asp Leu Ile Leu Phe Ile Ser Leu Ile Leu Val Val
1 5 10 15
Thr Gly Ile Asn Ala Glu Ala Asp Thr Ser Cys His Ser Phe Asp Asp
20 25 30
Cys Pro Trp Val Ala His His Tyr Arg Glu Cys Ile Glu Gly Leu Cys
35 40 45
Ala Tyr Arg Ile Leu Tyr
50
<210> 159
<211> 69
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 159
Met Gln Arg Arg Lys Lys Ser Met Ala Lys Met Leu Lys Phe Phe Phe
1 5 10 15
Ala Ile Ile Leu Leu Leu Ser Leu Phe Leu Val Ala Thr Glu Val Gly
20 25 30
Gly Ala Tyr Ile Glu Cys Glu Val Asp Asp Asp Cys Pro Lys Pro Met
35 40 45
Lys Asn Ser His Pro Asp Thr Tyr Tyr Lys Cys Val Lys His Arg Cys
50 55 60
Gln Trp Ala Trp Lys
65
<210> 160
<211> 140
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 160
Met Phe Val Tyr Thr Leu Ile Ile Phe Leu Phe Pro Ser His Val Ile
1 5 10 15
Thr Asn Lys Ile Ala Ile Tyr Cys Val Ser Asp Asp Asp Cys Leu Lys
20 25 30
Thr Phe Thr Pro Leu Asp Leu Lys Cys Val Asp Asn Val Cys Glu Phe
35 40 45
Asn Leu Arg Cys Lys Gly Lys Cys Gly Glu Arg Asp Glu Lys Phe Val
50 55 60
Phe Leu Lys Ala Leu Lys Lys Met Asp Gln Lys Leu Val Leu Glu Glu
65 70 75 80
Gln Gly Asn Ala Arg Glu Val Lys Ile Pro Lys Lys Leu Leu Phe Asp
85 90 95
Arg Ile Gln Val Pro Thr Pro Ala Thr Lys Asp Gln Val Glu Glu Asp
100 105 110
Asp Tyr Asp Asp Asp Asp Glu Glu Glu Glu Glu Glu Glu Asp Asp Val
115 120 125
Asp Met Trp Phe His Leu Pro Asp Val Val Cys His
130 135 140
<210> 161
<211> 60
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 161
Met Ala Lys Phe Ser Met Phe Val Tyr Ala Leu Ile Asn Phe Leu Ser
1 5 10 15
Leu Phe Leu Val Glu Thr Ala Ile Thr Asn Ile Arg Cys Val Ser Asp
20 25 30
Asp Asp Cys Pro Lys Val Ile Lys Pro Leu Val Met Lys Cys Ile Gly
35 40 45
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50 55 60
<210> 162
<211> 58
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 162
Met Ala His Lys Phe Val Tyr Ala Ile Ile Leu Phe Ile Phe Leu Phe
1 5 10 15
Leu Val Ala Lys Asn Val Lys Gly Tyr Val Val Cys Arg Thr Val Asp
20 25 30
Asp Cys Pro Pro Asp Thr Arg Asp Leu Arg Tyr Arg Cys Leu Asn Gly
35 40 45
Lys Cys Lys Ser Tyr Arg Leu Ser Tyr Gly
50 55
<210> 163
<211> 61
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 163
Met Gln Arg Lys Lys Asn Met Gly Gln Ile Leu Ile Phe Val Phe Ala
1 5 10 15
Leu Ile Asn Phe Leu Ser Pro Ile Leu Val Glu Met Thr Thr Thr Thr
20 25 30
Ile Pro Cys Thr Phe Ile Asp Asp Cys Pro Lys Met Pro Leu Val Val
35 40 45
Lys Cys Ile Asp Asn Phe Cys Asn Tyr Phe Glu Ile Lys
50 55 60
<210> 164
<211> 57
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 164
Met Ala Gln Thr Leu Met Leu Val Tyr Ala Leu Ile Ile Phe Thr Ser
1 5 10 15
Leu Phe Leu Val Val Ile Ser Arg Gln Thr Asp Ile Pro Cys Lys Ser
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35 40 45
Gly Phe Cys Thr Tyr Trp Lys Leu Asp
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<210> 165
<211> 77
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 165
Met Leu Arg Arg Lys Asn Thr Val Gln Ile Leu Met Phe Val Ser Ala
1 5 10 15
Leu Leu Ile Tyr Ile Phe Leu Phe Leu Val Ile Thr Ser Ser Ala Asn
20 25 30
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Tyr Arg Cys Asn Asp Gly Phe Cys Val Tyr Lys Ser Ile Asp Pro Ser
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Thr Ile Pro Gln Tyr Met Thr Asp Leu Ile Phe Pro Arg
65 70 75
<210> 166
<211> 59
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 166
Met Ala Val Ile Leu Lys Phe Val Tyr Ile Met Ile Ile Phe Leu Phe
1 5 10 15
Leu Leu Tyr Val Val Asn Gly Thr Arg Cys Asn Arg Asp Glu Asp Cys
20 25 30
Pro Phe Ile Cys Thr Gly Pro Gln Ile Pro Lys Cys Val Ser His Ile
35 40 45
Cys Phe Cys Leu Ser Ser Gly Lys Glu Ala Tyr
50 55
<210> 167
<211> 62
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 167
Met Asp Ala Ile Leu Lys Phe Ile Tyr Ala Met Phe Leu Phe Leu Phe
1 5 10 15
Leu Phe Val Thr Thr Arg Asn Val Glu Ala Leu Phe Glu Cys Asn Arg
20 25 30
Asp Phe Val Cys Gly Asn Asp Asp Glu Cys Val Tyr Pro Tyr Ala Val
35 40 45
Gln Cys Ile His Arg Tyr Cys Lys Cys Leu Lys Ser Arg Asn
50 55 60
<210> 168
<211> 67
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 168
Met Gln Ile Gly Arg Lys Lys Met Gly Glu Thr Pro Lys Leu Val Tyr
1 5 10 15
Val Ile Ile Leu Phe Leu Ser Ile Phe Leu Cys Thr Asn Ser Ser Phe
20 25 30
Ser Gln Met Ile Asn Phe Arg Gly Cys Lys Arg Asp Lys Asp Cys Pro
35 40 45
Gln Phe Arg Gly Val Asn Ile Arg Cys Arg Ser Gly Phe Cys Thr Pro
50 55 60
Ile Asp Ser
65
<210> 169
<211> 76
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 169
Met Gln Met Arg Lys Asn Met Ala Gln Ile Leu Phe Tyr Val Tyr Ala
1 5 10 15
Leu Leu Ile Leu Phe Ser Pro Phe Leu Val Ala Arg Ile Met Val Val
20 25 30
Asn Pro Asn Asn Pro Cys Val Thr Asp Ala Asp Cys Gln Arg Tyr Arg
35 40 45
His Lys Leu Ala Thr Arg Met Val Cys Asn Ile Gly Phe Cys Leu Met
50 55 60
Asp Phe Thr His Asp Pro Tyr Ala Pro Ser Leu Pro
65 70 75
<210> 170
<211> 77
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 170
Met Tyr Val Tyr Tyr Ile Gln Met Gly Lys Asn Met Ala Gln Arg Phe
1 5 10 15
Met Phe Ile Tyr Ala Leu Ile Ile Phe Leu Ser Gln Phe Phe Val Val
20 25 30
Ile Asn Thr Ser Asp Ile Pro Asn Asn Ser Asn Arg Asn Ser Pro Lys
35 40 45
Glu Asp Val Phe Cys Asn Ser Asn Asp Asp Cys Pro Thr Ile Leu Tyr
50 55 60
Tyr Val Ser Lys Cys Val Tyr Asn Phe Cys Glu Tyr Trp
65 70 75
<210> 171
<211> 67
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 171
Met Ala Lys Ile Val Asn Phe Val Tyr Ser Met Ile Ile Phe Val Ser
1 5 10 15
Leu Phe Leu Val Ala Thr Lys Gly Gly Ser Lys Pro Phe Leu Thr Arg
20 25 30
Pro Tyr Pro Cys Asn Thr Gly Ser Asp Cys Pro Gln Asn Met Cys Pro
35 40 45
Pro Gly Tyr Lys Pro Gly Cys Glu Asp Gly Tyr Cys Asn His Cys Tyr
50 55 60
Lys Arg Trp
65
<210> 172
<211> 62
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 172
Met Val Arg Thr Leu Lys Phe Val Tyr Val Ile Ile Leu Ile Leu Ser
1 5 10 15
Leu Phe Leu Val Ala Lys Gly Gly Gly Lys Lys Ile Tyr Cys Glu Asn
20 25 30
Ala Ala Ser Cys Pro Arg Leu Met Tyr Pro Leu Val Tyr Lys Cys Leu
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Asp Asn Lys Cys Val Lys Phe Met Met Lys Ser Arg Phe Val
50 55 60
<210> 173
<211> 62
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 173
Met Ala Arg Thr Leu Lys Phe Val Tyr Ala Val Ile Leu Phe Leu Ser
1 5 10 15
Leu Phe Leu Val Ala Lys Gly Asp Asp Val Lys Ile Lys Cys Val Val
20 25 30
Ala Ala Asn Cys Pro Asp Leu Met Tyr Pro Leu Val Tyr Lys Cys Leu
35 40 45
Asn Gly Ile Cys Val Gln Phe Thr Leu Thr Phe Pro Phe Val
50 55 60
<210> 174
<211> 65
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 174
Met Ser Asn Thr Leu Met Phe Val Ile Thr Phe Ile Val Leu Val Thr
1 5 10 15
Leu Phe Leu Gly Pro Lys Asn Val Tyr Ala Phe Gln Pro Cys Val Thr
20 25 30
Thr Ala Asp Cys Met Lys Thr Leu Lys Thr Asp Glu Asn Ile Trp Tyr
35 40 45
Glu Cys Ile Asn Asp Phe Cys Ile Pro Phe Pro Ile Pro Lys Gly Arg
50 55 60
Lys
65
<210> 175
<211> 76
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 175
Met Lys Arg Val Val Asn Met Ala Lys Ile Val Lys Tyr Val Tyr Val
1 5 10 15
Ile Ile Ile Phe Leu Ser Leu Phe Leu Val Ala Thr Lys Ile Glu Gly
20 25 30
Tyr Tyr Tyr Lys Cys Phe Lys Asp Ser Asp Cys Val Lys Leu Leu Cys
35 40 45
Arg Ile Pro Leu Arg Pro Lys Cys Met Tyr Arg His Ile Cys Lys Cys
50 55 60
Lys Val Val Leu Thr Gln Asn Asn Tyr Val Leu Thr
65 70 75
<210> 176
<211> 66
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 176
Met Lys Arg Gly Lys Asn Met Ser Lys Ile Leu Lys Phe Ile Tyr Ala
1 5 10 15
Thr Leu Val Leu Tyr Leu Phe Leu Val Val Thr Lys Ala Ser Asp Asp
20 25 30
Glu Cys Lys Ile Asp Gly Asp Cys Pro Ile Ser Trp Gln Lys Phe His
35 40 45
Thr Tyr Lys Cys Ile Asn Gln Lys Cys Lys Trp Val Leu Arg Phe His
50 55 60
Glu Tyr
65
<210> 177
<211> 64
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 177
Met Ala Lys Thr Leu Asn Phe Met Phe Ala Leu Ile Leu Phe Ile Ser
1 5 10 15
Leu Phe Leu Val Ser Lys Asn Val Ala Ile Asp Ile Phe Val Cys Gln
20 25 30
Thr Asp Ala Asp Cys Pro Lys Ser Glu Leu Ser Met Tyr Thr Trp Lys
35 40 45
Cys Ile Asp Asn Glu Cys Asn Leu Phe Lys Val Met Gln Gln Met Val
50 55 60
<210> 178
<211> 59
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 178
Met Ala Asn Thr His Lys Leu Val Ser Met Ile Leu Phe Ile Phe Leu
1 5 10 15
Phe Leu Val Ala Asn Asn Val Glu Gly Tyr Val Asn Cys Glu Thr Asp
20 25 30
Ala Asp Cys Pro Pro Ser Thr Arg Val Lys Arg Phe Lys Cys Val Lys
35 40 45
Gly Glu Cys Arg Trp Thr Arg Met Ser Tyr Ala
50 55
<210> 179
<211> 59
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 179
Met Ala His Phe Leu Met Phe Val Tyr Ala Leu Ile Thr Cys Leu Ser
1 5 10 15
Leu Phe Leu Val Glu Met Gly His Leu Ser Ile His Cys Val Ser Val
20 25 30
Asp Asp Cys Pro Lys Val Glu Lys Pro Ile Thr Met Lys Cys Ile Asn
35 40 45
Asn Tyr Cys Lys Tyr Phe Val Asp His Lys Leu
50 55
<210> 180
<211> 66
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 180
Met Asn Gln Ile Pro Met Phe Gly Tyr Thr Leu Ile Ile Phe Phe Ser
1 5 10 15
Leu Phe Pro Val Ile Thr Asn Gly Asp Arg Ile Pro Cys Val Thr Asn
20 25 30
Gly Asp Cys Pro Val Met Arg Leu Pro Leu Tyr Met Arg Cys Ile Thr
35 40 45
Tyr Ser Cys Glu Leu Phe Phe Asp Gly Pro Asn Leu Cys Ala Val Glu
50 55 60
Arg Ile
65
<210> 181
<211> 61
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 181
Met Arg Lys Asp Met Ala Arg Ile Ser Leu Phe Val Tyr Ala Leu Ile
1 5 10 15
Ile Phe Phe Ser Leu Phe Phe Val Leu Thr Asn Gly Glu Leu Glu Ile
20 25 30
Arg Cys Val Ser Asp Ala Asp Cys Pro Leu Phe Pro Leu Pro Leu His
35 40 45
Asn Arg Cys Ile Asp Asp Val Cys His Leu Phe Thr Ser
50 55 60
<210> 182
<211> 60
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 182
Met Ala Gln Ile Leu Met Phe Val Tyr Phe Leu Ile Ile Phe Leu Ser
1 5 10 15
Leu Phe Leu Val Glu Ser Ile Lys Ile Phe Thr Glu His Arg Cys Arg
20 25 30
Thr Asp Ala Asp Cys Pro Ala Arg Glu Leu Pro Glu Tyr Leu Lys Cys
35 40 45
Gln Gly Gly Met Cys Arg Leu Leu Ile Lys Lys Asp
50 55 60
<210> 183
<211> 56
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 183
Met Ala Arg Val Ile Ser Leu Phe Tyr Ala Leu Ile Ile Phe Leu Phe
1 5 10 15
Leu Phe Leu Val Ala Thr Asn Gly Asp Leu Ser Pro Cys Leu Arg Ser
20 25 30
Gly Asp Cys Ser Lys Asp Glu Cys Pro Ser His Leu Val Pro Lys Cys
35 40 45
Ile Gly Leu Thr Cys Tyr Cys Ile
50 55
<210> 184
<211> 62
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 184
Met Gln Arg Arg Lys Asn Met Ala Gln Ile Leu Leu Phe Ala Tyr Val
1 5 10 15
Phe Ile Ile Ser Ile Ser Leu Phe Leu Val Val Thr Asn Gly Val Lys
20 25 30
Ile Pro Cys Val Lys Asp Thr Asp Cys Pro Thr Leu Pro Cys Pro Leu
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Tyr Ser Lys Cys Val Asp Gly Phe Cys Lys Met Leu Ser Ile
50 55 60
<210> 185
<211> 66
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 185
Met Asn His Ile Ser Lys Phe Val Tyr Ala Leu Ile Ile Phe Leu Ser
1 5 10 15
Val Tyr Leu Val Val Leu Asp Gly Arg Pro Val Ser Cys Lys Asp His
20 25 30
Tyr Asp Cys Arg Arg Lys Val Lys Ile Val Gly Cys Ile Phe Pro Gln
35 40 45
Glu Lys Pro Met Cys Ile Asn Ser Met Cys Thr Cys Ile Arg Glu Ile
50 55 60
Val Pro
65
<210> 186
<211> 86
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 186
Met Lys Ser Gln Asn His Ala Lys Phe Ile Ser Phe Tyr Lys Asn Asp
1 5 10 15
Leu Phe Lys Ile Phe Gln Asn Asn Asp Ser His Phe Lys Val Phe Phe
20 25 30
Ala Leu Ile Ile Phe Leu Tyr Thr Tyr Leu His Val Thr Asn Gly Val
35 40 45
Phe Val Ser Cys Asn Ser His Ile His Cys Arg Val Asn Asn His Lys
50 55 60
Ile Gly Cys Asn Ile Pro Glu Gln Tyr Leu Leu Cys Val Asn Leu Phe
65 70 75 80
Cys Leu Trp Leu Asp Tyr
85
<210> 187
<211> 62
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 187
Met Thr Tyr Ile Ser Lys Val Val Tyr Ala Leu Ile Ile Phe Leu Ser
1 5 10 15
Ile Tyr Val Gly Val Asn Asp Cys Met Leu Val Thr Cys Glu Asp His
20 25 30
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35 40 45
Ile Pro Gln Cys Ile Asn Ser Ile Cys Lys Cys Met Lys Gly
50 55 60
<210> 188
<211> 63
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 188
Met Thr His Ile Ser Lys Phe Val Phe Ala Leu Ile Ile Phe Leu Ser
1 5 10 15
Ile Tyr Val Gly Val Asn Asp Cys Lys Arg Ile Pro Cys Lys Asp Asn
20 25 30
Asn Asp Cys Asn Asn Asn Trp Gln Leu Leu Ala Cys Arg Phe Glu Arg
35 40 45
Glu Val Pro Arg Cys Ile Asn Ser Ile Cys Lys Cys Met Pro Met
50 55 60
<210> 189
<211> 60
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 189
Met Val Gln Thr Pro Lys Leu Val Tyr Val Ile Val Leu Leu Leu Ser
1 5 10 15
Ile Phe Leu Gly Met Thr Ile Cys Asn Ser Ser Phe Ser His Phe Phe
20 25 30
Glu Gly Ala Cys Lys Ser Asp Lys Asp Cys Pro Lys Leu His Arg Ser
35 40 45
Asn Val Arg Cys Arg Lys Gly Gln Cys Val Gln Ile
50 55 60
<210> 190
<211> 77
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 190
Met Thr Lys Ile Leu Met Leu Phe Tyr Ala Met Ile Val Phe His Ser
1 5 10 15
Ile Phe Leu Val Ala Ser Tyr Thr Asp Glu Cys Ser Thr Asp Ala Asp
20 25 30
Cys Glu Tyr Ile Leu Cys Leu Phe Pro Ile Ile Lys Arg Cys Ile His
35 40 45
Asn His Cys Lys Cys Val Pro Met Gly Ser Ile Glu Pro Met Ser Thr
50 55 60
Ile Pro Asn Gly Val His Lys Phe His Ile Ile Asn Asn
65 70 75
<210> 191
<211> 64
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 191
Met Ala Lys Thr Leu Asn Phe Val Cys Ala Met Ile Leu Phe Ile Ser
1 5 10 15
Leu Phe Leu Val Ser Lys Asn Val Ala Leu Tyr Ile Ile Glu Cys Lys
20 25 30
Thr Asp Ala Asp Cys Pro Ile Ser Lys Leu Asn Met Tyr Asn Trp Arg
35 40 45
Cys Ile Lys Ser Ser Cys His Leu Tyr Lys Val Ile Gln Phe Met Val
50 55 60
<210> 192
<211> 72
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 192
Met Gln Lys Glu Lys Asn Met Ala Lys Thr Phe Glu Phe Val Tyr Ala
1 5 10 15
Met Ile Ile Phe Ile Leu Leu Phe Leu Val Glu Asn Asn Phe Ala Ala
20 25 30
Tyr Ile Ile Glu Cys Gln Thr Asp Asp Asp Cys Pro Lys Ser Gln Leu
35 40 45
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50 55 60
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65 70
<210> 193
<211> 57
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 193
Met Ala Ala Thr Arg Lys Phe Ile Tyr Val Leu Ser His Phe Leu Phe
1 5 10 15
Leu Phe Leu Val Thr Lys Ile Thr Asp Ala Arg Val Cys Lys Ser Asp
20 25 30
Lys Asp Cys Lys Asp Ile Ile Ile Tyr Arg Tyr Ile Leu Lys Cys Arg
35 40 45
Asn Gly Glu Cys Val Lys Ile Lys Ile
50 55
<210> 194
<211> 75
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 194
Met Gln Arg Leu Asp Asn Met Ala Lys Asn Val Lys Phe Ile Tyr Val
1 5 10 15
Ile Ile Leu Leu Leu Phe Ile Phe Leu Val Ile Ile Val Cys Asp Ser
20 25 30
Ala Phe Val Pro Asn Ser Gly Pro Cys Thr Thr Asp Lys Asp Cys Lys
35 40 45
Gln Val Lys Gly Tyr Ile Ala Arg Cys Arg Lys Gly Tyr Cys Met Gln
50 55 60
Ser Val Lys Arg Thr Trp Ser Ser Tyr Ser Arg
65 70 75
<210> 195
<211> 102
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 195
Met Lys Phe Ile Tyr Ile Met Ile Leu Phe Leu Ser Leu Phe Leu Val
1 5 10 15
Gln Phe Leu Thr Cys Lys Gly Leu Thr Val Pro Cys Glu Asn Pro Thr
20 25 30
Thr Cys Pro Glu Asp Phe Cys Thr Pro Pro Met Ile Thr Arg Cys Ile
35 40 45
Asn Phe Ile Cys Leu Cys Asp Gly Pro Glu Tyr Ala Glu Pro Glu Tyr
50 55 60
Asp Gly Pro Glu Pro Glu Tyr Asp His Lys Gly Asp Phe Leu Ser Val
65 70 75 80
Lys Pro Lys Ile Ile Asn Glu Asn Met Met Met Arg Glu Arg His Met
85 90 95
Met Lys Glu Ile Glu Val
100
<210> 196
<211> 59
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 196
Met Ala Gln Phe Leu Met Phe Ile Tyr Val Leu Ile Ile Phe Leu Tyr
1 5 10 15
Leu Phe Tyr Val Glu Ala Ala Met Phe Glu Leu Thr Lys Ser Thr Ile
20 25 30
Arg Cys Val Thr Asp Ala Asp Cys Pro Asn Val Val Lys Pro Leu Lys
35 40 45
Pro Lys Cys Val Asp Gly Phe Cys Glu Tyr Thr
50 55
<210> 197
<211> 70
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 197
Met Lys Met Arg Ile His Met Ala Gln Ile Ile Met Phe Phe Tyr Ala
1 5 10 15
Leu Ile Ile Phe Leu Ser Pro Phe Leu Val Asp Arg Arg Ser Phe Pro
20 25 30
Ser Ser Phe Val Ser Pro Lys Ser Tyr Thr Ser Glu Ile Pro Cys Lys
35 40 45
Ala Thr Arg Asp Cys Pro Tyr Glu Leu Tyr Tyr Glu Thr Lys Cys Val
50 55 60
Asp Ser Leu Cys Thr Tyr
65 70
<210> 198
<211> 41
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 198
Thr Arg Met Leu Thr Ile Pro Cys Thr Ser Asp Asp Asn Cys Pro Lys
1 5 10 15
Val Ile Ser Pro Cys His Thr Lys Cys Phe Asp Gly Phe Cys Gly Trp
20 25 30
Tyr Ile Glu Gly Ser Tyr Glu Gly Pro
35 40
<210> 199
<211> 69
<212> PRT
<213> 蒺藜状苜蓿(Medicago truncatula)
<400> 199
Met Ala Gln Phe Leu Leu Phe Val Tyr Ser Leu Ile Ile Phe Leu Ser
1 5 10 15
Leu Phe Phe Gly Glu Ala Ala Phe Glu Arg Thr Glu Thr Arg Met Leu
20 25 30
Thr Ile Pro Cys Thr Ser Asp Asp Asn Cys Pro Lys Val Ile Ser Pro
35 40 45
Cys His Thr Lys Cys Phe Asp Gly Phe Cys Gly Trp Tyr Ile Glu Gly
50 55 60
Ser Tyr Glu Gly Pro
65
<210> 200
<211> 78
<212> PRT
<213> 蚜虫内共生菌(Buchnera aphidicola)
<400> 200
Met Lys Leu Leu His Gly Phe Leu Ile Ile Met Leu Thr Met His Leu
1 5 10 15
Ser Ile Gln Tyr Ala Tyr Gly Gly Pro Phe Leu Thr Lys Tyr Leu Cys
20 25 30
Asp Arg Val Cys His Lys Leu Cys Gly Asp Glu Phe Val Cys Ser Cys
35 40 45
Ile Gln Tyr Lys Ser Leu Lys Gly Leu Trp Phe Pro His Cys Pro Thr
50 55 60
Gly Lys Ala Ser Val Val Leu His Asn Phe Leu Thr Ser Pro
65 70 75
<210> 201
<211> 77
<212> PRT
<213> 蚜虫内共生菌(Buchnera aphidicola)
<400> 201
Met Lys Leu Leu Tyr Gly Phe Leu Ile Ile Met Leu Thr Ile His Leu
1 5 10 15
Ser Val Gln Tyr Phe Glu Ser Pro Phe Glu Thr Lys Tyr Asn Cys Asp
20 25 30
Thr His Cys Asn Lys Leu Cys Gly Lys Ile Asp His Cys Ser Cys Ile
35 40 45
Gln Tyr His Ser Met Glu Gly Leu Trp Phe Pro His Cys Arg Thr Gly
50 55 60
Ser Ala Ala Gln Met Leu His Asp Phe Leu Ser Asn Pro
65 70 75
<210> 202
<211> 86
<212> PRT
<213> 蚜虫内共生菌(Buchnera aphidicola)
<400> 202
Met Ser Val Arg Lys Asn Val Leu Pro Thr Met Phe Val Val Leu Leu
1 5 10 15
Ile Met Ser Pro Val Thr Pro Thr Ser Val Phe Ile Ser Ala Val Cys
20 25 30
Tyr Ser Gly Cys Gly Ser Leu Ala Leu Val Cys Phe Val Ser Asn Gly
35 40 45
Ile Thr Asn Gly Leu Asp Tyr Phe Lys Ser Ser Ala Pro Leu Ser Thr
50 55 60
Ser Glu Thr Ser Cys Gly Glu Ala Phe Asp Thr Cys Thr Asp His Cys
65 70 75 80
Leu Ala Asn Phe Lys Phe
85
<210> 203
<211> 69
<212> PRT
<213> 蚜虫内共生菌(Buchnera aphidicola)
<400> 203
Met Arg Leu Leu Tyr Gly Phe Leu Ile Ile Met Leu Thr Ile Tyr Leu
1 5 10 15
Ser Val Gln Asp Phe Asp Pro Thr Glu Phe Lys Gly Pro Phe Pro Thr
20 25 30
Ile Glu Ile Cys Ser Lys Tyr Cys Ala Val Val Cys Asn Tyr Thr Ser
35 40 45
Arg Pro Cys Tyr Cys Val Glu Ala Ala Lys Glu Arg Asp Gln Trp Phe
50 55 60
Pro Tyr Cys Tyr Asp
65
<210> 204
<211> 77
<212> PRT
<213> 蚜虫内共生菌(Buchnera aphidicola)
<400> 204
Met Arg Leu Leu Tyr Gly Phe Leu Ile Ile Met Leu Thr Ile His Leu
1 5 10 15
Ser Val Gln Asp Ile Asp Pro Asn Thr Leu Arg Gly Pro Tyr Pro Thr
20 25 30
Lys Glu Ile Cys Ser Lys Tyr Cys Glu Tyr Asn Val Val Cys Gly Ala
35 40 45
Ser Leu Pro Cys Ile Cys Val Gln Asp Ala Arg Gln Leu Asp His Trp
50 55 60
Phe Ala Cys Cys Tyr Asp Gly Gly Pro Glu Met Leu Met
65 70 75
<210> 205
<211> 108
<212> PRT
<213> 蚜虫内共生菌(Buchnera aphidicola)
<400> 205
Met Lys Leu Phe Val Val Val Val Leu Val Ala Val Gly Ile Met Phe
1 5 10 15
Val Phe Ala Ser Asp Thr Ala Ala Ala Pro Thr Asp Tyr Glu Asp Thr
20 25 30
Asn Asp Met Ile Ser Leu Ser Ser Leu Val Gly Asp Asn Ser Pro Tyr
35 40 45
Val Arg Val Ser Ser Ala Asp Ser Gly Gly Ser Ser Lys Thr Ser Ser
50 55 60
Lys Asn Pro Ile Leu Gly Leu Leu Lys Ser Val Ile Lys Leu Leu Thr
65 70 75 80
Lys Ile Phe Gly Thr Tyr Ser Asp Ala Ala Pro Ala Met Pro Pro Ile
85 90 95
Pro Pro Ala Leu Arg Lys Asn Arg Gly Met Leu Ala
100 105
<210> 206
<211> 178
<212> PRT
<213> 蚜虫内共生菌(Buchnera aphidicola)
<400> 206
Met Val Ala Cys Lys Val Ile Leu Ala Val Ala Val Val Phe Val Ala
1 5 10 15
Ala Val Gln Gly Arg Pro Gly Gly Glu Pro Glu Trp Ala Ala Pro Ile
20 25 30
Phe Ala Glu Leu Lys Ser Val Ser Asp Asn Ile Thr Asn Leu Val Gly
35 40 45
Leu Asp Asn Ala Gly Glu Tyr Ala Thr Ala Ala Lys Asn Asn Leu Asn
50 55 60
Ala Phe Ala Glu Ser Leu Lys Thr Glu Ala Ala Val Phe Ser Lys Ser
65 70 75 80
Phe Glu Gly Lys Ala Ser Ala Ser Asp Val Phe Lys Glu Ser Thr Lys
85 90 95
Asn Phe Gln Ala Val Val Asp Thr Tyr Ile Lys Asn Leu Pro Lys Asp
100 105 110
Leu Thr Leu Lys Asp Phe Thr Glu Lys Ser Glu Gln Ala Leu Lys Tyr
115 120 125
Met Val Glu His Gly Thr Glu Ile Thr Lys Lys Ala Gln Gly Asn Thr
130 135 140
Glu Thr Glu Lys Glu Ile Lys Glu Phe Phe Lys Lys Gln Ile Glu Asn
145 150 155 160
Leu Ile Gly Gln Gly Lys Ala Leu Gln Ala Lys Ile Ala Glu Ala Lys
165 170 175
Lys Ala
<210> 207
<211> 311
<212> PRT
<213> 蚜虫内共生菌(Buchnera aphidicola)
<400> 207
Met Lys Thr Ser Ser Ser Lys Val Phe Ala Ser Cys Val Ala Ile Val
1 5 10 15
Cys Leu Ala Ser Val Ala Asn Ala Leu Pro Val Gln Lys Ser Val Ala
20 25 30
Ala Thr Thr Glu Asn Pro Ile Val Glu Lys His Gly Cys Arg Ala His
35 40 45
Lys Asn Leu Val Arg Gln Asn Val Val Asp Leu Lys Thr Tyr Asp Ser
50 55 60
Met Leu Ile Thr Asn Glu Val Val Gln Lys Gln Ser Asn Glu Val Gln
65 70 75 80
Ser Ser Glu Gln Ser Asn Glu Gly Gln Asn Ser Glu Gln Ser Asn Glu
85 90 95
Gly Gln Asn Ser Glu Gln Ser Asn Glu Val Gln Ser Ser Glu His Ser
100 105 110
Asn Glu Gly Gln Asn Ser Lys Gln Ser Asn Glu Gly Gln Asn Ser Glu
115 120 125
Gln Ser Asn Glu Val Gln Ser Ser Glu His Ser Asn Glu Gly Gln Asn
130 135 140
Ser Glu Gln Ser Asn Glu Val Gln Ser Ser Glu His Ser Asn Glu Gly
145 150 155 160
Gln Asn Ser Lys Gln Ser Asn Glu Gly Gln Asn Ser Lys Gln Ser Asn
165 170 175
Glu Val Gln Ser Ser Glu His Trp Asn Glu Gly Gln Asn Ser Lys Gln
180 185 190
Ser Asn Glu Asp Gln Asn Ser Glu Gln Ser Asn Glu Gly Gln Asn Ser
195 200 205
Lys Gln Ser Asn Glu Gly Gln Asn Ser Lys Gln Ser Asn Glu Asp Gln
210 215 220
Asn Ser Glu Gln Ser Asn Glu Gly Gln Asn Ser Lys Gln Ser Asn Glu
225 230 235 240
Val Gln Ser Ser Glu Gln Ser Asn Glu Gly Gln Asn Ser Lys Gln Ser
245 250 255
Asn Glu Gly Gln Ser Ser Glu Gln Ser Asn Glu Gly Gln Asn Ser Lys
260 265 270
Gln Ser Asn Glu Val Gln Ser Pro Glu Glu His Tyr Asp Leu Pro Asp
275 280 285
Pro Glu Ser Ser Tyr Glu Ser Glu Glu Thr Lys Gly Ser His Glu Ser
290 295 300
Gly Asp Asp Ser Glu His Arg
305 310
<210> 208
<211> 431
<212> PRT
<213> 蚜虫内共生菌(Buchnera aphidicola)
<400> 208
Met Lys Thr Ile Ile Leu Gly Leu Cys Leu Phe Gly Ala Leu Phe Trp
1 5 10 15
Ser Thr Gln Ser Met Pro Val Gly Glu Val Ala Pro Ala Val Pro Ala
20 25 30
Val Pro Ser Glu Ala Val Pro Gln Lys Gln Val Glu Ala Lys Pro Glu
35 40 45
Thr Asn Ala Ala Ser Pro Val Ser Asp Ala Lys Pro Glu Ser Asp Ser
50 55 60
Lys Pro Val Asp Ala Glu Val Lys Pro Thr Val Ser Glu Val Lys Ala
65 70 75 80
Glu Ser Glu Gln Lys Pro Ser Gly Glu Pro Lys Pro Glu Ser Asp Ala
85 90 95
Lys Pro Val Val Ala Ser Glu Ser Lys Pro Glu Ser Asp Pro Lys Pro
100 105 110
Ala Ala Val Val Glu Ser Lys Pro Glu Asn Asp Ala Val Ala Pro Glu
115 120 125
Thr Asn Asn Asp Ala Lys Pro Glu Asn Ala Ala Ala Pro Val Ser Glu
130 135 140
Asn Lys Pro Ala Thr Asp Ala Lys Ala Glu Thr Glu Leu Ile Ala Gln
145 150 155 160
Ala Lys Pro Glu Ser Lys Pro Ala Ser Asp Leu Lys Ala Glu Pro Glu
165 170 175
Ala Ala Lys Pro Asn Ser Glu Val Pro Val Ala Leu Pro Leu Asn Pro
180 185 190
Thr Glu Thr Lys Ala Thr Gln Gln Ser Val Glu Thr Asn Gln Val Glu
195 200 205
Gln Ala Ala Pro Ala Ala Ala Gln Ala Asp Pro Ala Ala Ala Pro Ala
210 215 220
Ala Asp Pro Ala Pro Ala Pro Ala Ala Ala Pro Val Ala Ala Glu Glu
225 230 235 240
Ala Lys Leu Ser Glu Ser Ala Pro Ser Thr Glu Asn Lys Ala Ala Glu
245 250 255
Glu Pro Ser Lys Pro Ala Glu Gln Gln Ser Ala Lys Pro Val Glu Asp
260 265 270
Ala Val Pro Ala Ala Ser Glu Ile Ser Glu Thr Lys Val Ser Pro Ala
275 280 285
Val Pro Ala Val Pro Glu Val Pro Ala Ser Pro Ser Ala Pro Ala Val
290 295 300
Ala Asp Pro Val Ser Ala Pro Glu Ala Glu Lys Asn Ala Glu Pro Ala
305 310 315 320
Lys Ala Ala Asn Ser Ala Glu Pro Ala Val Gln Ser Glu Ala Lys Pro
325 330 335
Ala Glu Asp Ile Gln Lys Ser Gly Ala Val Val Ser Ala Glu Asn Pro
340 345 350
Lys Pro Val Glu Glu Gln Lys Pro Ala Glu Val Ala Lys Pro Ala Glu
355 360 365
Gln Ser Lys Ser Glu Ala Pro Ala Glu Ala Pro Lys Pro Thr Glu Gln
370 375 380
Ser Ala Ala Glu Glu Pro Lys Lys Pro Glu Ser Ala Asn Asp Glu Lys
385 390 395 400
Lys Glu Gln His Ser Val Asn Lys Arg Asp Ala Thr Lys Glu Lys Lys
405 410 415
Pro Thr Asp Ser Ile Met Lys Lys Gln Lys Gln Lys Lys Ala Asn
420 425 430
<210> 209
<211> 160
<212> PRT
<213> 蚜虫内共生菌(Buchnera aphidicola)
<400> 209
Met Asn Gly Lys Ile Val Leu Cys Phe Ala Val Val Phe Ile Gly Gln
1 5 10 15
Ala Met Ser Ala Ala Thr Gly Thr Thr Pro Glu Val Glu Asp Ile Lys
20 25 30
Lys Val Ala Glu Gln Met Ser Gln Thr Phe Met Ser Val Ala Asn His
35 40 45
Leu Val Gly Ile Thr Pro Asn Ser Ala Asp Ala Gln Lys Ser Ile Glu
50 55 60
Lys Ile Arg Thr Ile Met Asn Lys Gly Phe Thr Asp Met Glu Thr Glu
65 70 75 80
Ala Asn Lys Met Lys Asp Ile Val Arg Lys Asn Ala Asp Pro Lys Leu
85 90 95
Val Glu Lys Tyr Asp Glu Leu Glu Lys Glu Leu Lys Lys His Leu Ser
100 105 110
Thr Ala Lys Asp Met Phe Glu Asp Lys Val Val Lys Pro Ile Gly Glu
115 120 125
Lys Val Glu Leu Lys Lys Ile Thr Glu Asn Val Ile Lys Thr Thr Lys
130 135 140
Asp Met Glu Ala Thr Met Asn Lys Ala Ile Asp Gly Phe Lys Lys Gln
145 150 155 160
<210> 210
<211> 415
<212> PRT
<213> 蚜虫内共生菌(Buchnera aphidicola)
<400> 210
Met His Leu Phe Leu Ala Leu Gly Leu Phe Ile Val Cys Gly Met Val
1 5 10 15
Asp Ala Thr Phe Tyr Asn Pro Arg Ser Gln Thr Phe Asn Gln Leu Met
20 25 30
Glu Arg Arg Gln Arg Ser Ile Pro Ile Pro Tyr Ser Tyr Gly Tyr His
35 40 45
Tyr Asn Pro Ile Glu Pro Ser Ile Asn Val Leu Asp Ser Leu Ser Glu
50 55 60
Gly Leu Asp Ser Arg Ile Asn Thr Phe Lys Pro Ile Tyr Gln Asn Val
65 70 75 80
Lys Met Ser Thr Gln Asp Val Asn Ser Val Pro Arg Thr Gln Tyr Gln
85 90 95
Pro Lys Asn Ser Leu Tyr Asp Ser Glu Tyr Ile Ser Ala Lys Asp Ile
100 105 110
Pro Ser Leu Phe Pro Glu Glu Asp Ser Tyr Asp Tyr Lys Tyr Leu Gly
115 120 125
Ser Pro Leu Asn Lys Tyr Leu Thr Arg Pro Ser Thr Gln Glu Ser Gly
130 135 140
Ile Ala Ile Asn Leu Val Ala Ile Lys Glu Thr Ser Val Phe Asp Tyr
145 150 155 160
Gly Phe Pro Thr Tyr Lys Ser Pro Tyr Ser Ser Asp Ser Val Trp Asn
165 170 175
Phe Gly Ser Lys Ile Pro Asn Thr Val Phe Glu Asp Pro Gln Ser Val
180 185 190
Glu Ser Asp Pro Asn Thr Phe Lys Val Ser Ser Pro Thr Ile Lys Ile
195 200 205
Val Lys Leu Leu Pro Glu Thr Pro Glu Gln Glu Ser Ile Ile Thr Thr
210 215 220
Thr Lys Asn Tyr Glu Leu Asn Tyr Lys Thr Thr Gln Glu Thr Pro Thr
225 230 235 240
Glu Ala Glu Leu Tyr Pro Ile Thr Ser Glu Glu Phe Gln Thr Glu Asp
245 250 255
Glu Trp His Pro Met Val Pro Lys Glu Asn Thr Thr Lys Asp Glu Ser
260 265 270
Ser Phe Ile Thr Thr Glu Glu Pro Leu Thr Glu Asp Lys Ser Asn Ser
275 280 285
Ile Thr Ile Glu Lys Thr Gln Thr Glu Asp Glu Ser Asn Ser Ile Glu
290 295 300
Phe Asn Ser Ile Arg Thr Glu Glu Lys Ser Asn Ser Ile Thr Thr Glu
305 310 315 320
Glu Asn Gln Lys Glu Asp Asp Glu Ser Met Ser Thr Thr Ser Gln Glu
325 330 335
Thr Thr Thr Ala Phe Asn Leu Asn Asp Thr Phe Asp Thr Asn Arg Tyr
340 345 350
Ser Ser Ser His Glu Ser Leu Met Leu Arg Ile Arg Glu Leu Met Lys
355 360 365
Asn Ile Ala Asp Gln Gln Asn Lys Ser Gln Phe Arg Thr Val Asp Asn
370 375 380
Ile Pro Ala Lys Ser Gln Ser Asn Leu Ser Ser Asp Glu Ser Thr Asn
385 390 395 400
Gln Gln Phe Glu Pro Gln Leu Val Asn Gly Ala Asp Thr Tyr Lys
405 410 415
<210> 211
<211> 126
<212> PRT
<213> 玉米象(Sitophilus zeamais)
<400> 211
Met Thr Arg Thr Met Leu Phe Leu Ala Cys Val Ala Ala Leu Tyr Val
1 5 10 15
Cys Ile Ser Ala Thr Ala Gly Lys Pro Glu Glu Phe Ala Lys Leu Ser
20 25 30
Asp Glu Ala Pro Ser Asn Asp Gln Ala Met Tyr Glu Ser Ile Gln Arg
35 40 45
Tyr Arg Arg Phe Val Asp Gly Asn Arg Tyr Asn Gly Gly Gln Gln Gln
50 55 60
Gln Gln Gln Pro Lys Gln Trp Glu Val Arg Pro Asp Leu Ser Arg Asp
65 70 75 80
Gln Arg Gly Asn Thr Lys Ala Gln Val Glu Ile Asn Lys Lys Gly Asp
85 90 95
Asn His Asp Ile Asn Ala Gly Trp Gly Lys Asn Ile Asn Gly Pro Asp
100 105 110
Ser His Lys Asp Thr Trp His Val Gly Gly Ser Val Arg Trp
115 120 125
<210> 212
<211> 220
<212> PRT
<213> 豌豆长管蚜(Acyrthosiphon pisum)
<400> 212
Met Lys Glu Thr Thr Val Val Trp Ala Lys Leu Phe Leu Ile Leu Ile
1 5 10 15
Ile Leu Ala Lys Pro Leu Gly Leu Lys Ala Val Asn Glu Cys Lys Arg
20 25 30
Leu Gly Asn Asn Ser Cys Arg Ser His Gly Glu Cys Cys Ser Gly Phe
35 40 45
Cys Phe Ile Glu Pro Gly Trp Ala Leu Gly Val Cys Lys Arg Leu Gly
50 55 60
Thr Pro Lys Lys Ser Asp Asp Ser Asn Asn Gly Lys Asn Ile Glu Lys
65 70 75 80
Asn Asn Gly Val His Glu Arg Ile Asp Asp Val Phe Glu Arg Gly Val
85 90 95
Cys Ser Tyr Tyr Lys Gly Pro Ser Ile Thr Ala Asn Gly Asp Val Phe
100 105 110
Asp Glu Asn Glu Met Thr Ala Ala His Arg Thr Leu Pro Phe Asn Thr
115 120 125
Met Val Lys Val Glu Gly Met Gly Thr Ser Val Val Val Lys Ile Asn
130 135 140
Asp Arg Lys Thr Ala Ala Asp Gly Lys Val Met Leu Leu Ser Arg Ala
145 150 155 160
Ala Ala Glu Ser Leu Asn Ile Asp Glu Asn Thr Gly Pro Val Gln Cys
165 170 175
Gln Leu Lys Phe Val Leu Asp Gly Ser Gly Cys Thr Pro Asp Tyr Gly
180 185 190
Asp Thr Cys Val Leu His His Glu Cys Cys Ser Gln Asn Cys Phe Arg
195 200 205
Glu Met Phe Ser Asp Lys Gly Phe Cys Leu Pro Lys
210 215 220
<210> 213
<211> 16
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 细胞穿透肽
<400> 213
Arg Gln Ile Lys Ile Trp Phe Gln Asn Arg Arg Met Lys Trp Lys Lys
1 5 10 15
<210> 214
<211> 13
<212> PRT
<213> 人类免疫缺陷病毒1
<400> 214
Gly Arg Lys Lys Arg Arg Gln Arg Arg Arg Pro Pro Gln
1 5 10
<210> 215
<211> 18
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> pVEC
<400> 215
Leu Leu Ile Ile Leu Arg Arg Arg Ile Arg Lys Gln Ala His Ala His
1 5 10 15
Ser Lys
<210> 216
<211> 27
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 运输蛋白
<400> 216
Gly Trp Thr Leu Asn Ser Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Lys Ile Asn Leu
1 5 10 15
Lys Ala Leu Ala Ala Leu Ala Lys Lys Ile Leu
20 25
<210> 217
<211> 27
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> MPG
<400> 217
Gly Ala Leu Phe Leu Gly Phe Leu Gly Ala Ala Gly Ser Thr Met Gly
1 5 10 15
Ala Trp Ser Gln Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val
20 25
<210> 218
<211> 21
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Pep-1
<400> 218
Lys Glu Thr Trp Trp Glu Thr Trp Trp Thr Glu Trp Ser Gln Pro Lys
1 5 10 15
Lys Lys Arg Lys Val
20
<210> 219
<211> 18
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> MAP
<400> 219
Lys Leu Ala Leu Lys Leu Ala Leu Lys Ala Leu Lys Ala Ala Leu Lys
1 5 10 15
Leu Ala
<210> 220
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> R6W3
<400> 220
Arg Arg Trp Trp Arg Arg Trp Arg Arg
1 5
<210> 221
<211> 13
<212> PRT
<213> Pandinum imperator
<400> 221
Phe Leu Ser Thr Ile Trp Asn Gly Ile Lys Gly Leu Leu
1 5 10
<210> 222
<211> 13
<212> PRT
<213> Urodacus yaschenkoi
<400> 222
Ile Leu Ser Ala Ile Trp Ser Gly Ile Lys Ser Leu Phe
1 5 10
<210> 223
<211> 13
<212> PRT
<213> Scorpiops tibetanus
<400> 223
Leu Trp Gly Lys Leu Trp Glu Gly Val Lys Ser Leu Ile
1 5 10
<210> 224
<211> 22
<212> PRT
<213> Apostichopus japonicus
<400> 224
Phe Pro Phe Leu Lys Leu Ser Leu Lys Ile Pro Lys Ser Ala Ile Lys
1 5 10 15
Ser Ala Ile Lys Arg Leu
20
<210> 225
<211> 13
<212> PRT
<213> Urodacus yaschenkoi
<400> 225
Ile Leu Ser Ala Ile Trp Ser Gly Ile Lys Gly Leu Leu
1 5 10
<210> 226
<211> 27
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> Uy192 + 穿膜肽
<400> 226
Tyr Gly Arg Lys Lys Arg Arg Gln Arg Arg Arg Phe Leu Ser Thr Ile
1 5 10 15
Trp Asn Gly Ile Lys Gly Leu Leu Phe Ala Met
20 25
<210> 227
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 通用细菌引物27F
<400> 227
agagtttgat cmtggctcag 20
<210> 228
<211> 16
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 通用细菌引物1492R
<400> 228
taccttgtta cgactt 16

Claims (10)

1.一种用于提高昆虫的营养特征的方法,该方法包括:
向该昆虫递送有效量的产甲硫氨酸细菌。
2.如权利要求1所述的方法,其中该昆虫是蟋蟀、蚱蜢、或蝗虫。
3.如权利要求1-2中任一项所述的方法,其中该昆虫在发育上是胚、幼虫、蛹或成虫。
4.如权利要求1-3中任一项所述的方法,其中该递送包括向该昆虫生长、生活、繁殖或进食的至少一个生境递送组合物。
5.如权利要求1-4中任一项所述的方法,其中将该产甲硫氨酸细菌以昆虫可食用组合物进行递送,从而被该昆虫摄取。
6.如权利要求1-5中任一项所述的方法,其中将该产甲硫氨酸细菌与农业上可接受的载体一起配制为液体、固体、气溶胶、膏剂、凝胶、或气体组合物。
7.如权利要求6所述的方法,其中该载体是种子涂层。
8.一种修饰的昆虫,该修饰的昆虫包含寄宿于该昆虫中的外源性产甲硫氨酸细菌。
9.如权利要求8所述的昆虫,其中该昆虫在发育上是胚、幼虫、蛹或成虫。
10.如权利要求8-9中任一项所述的昆虫,其中该产甲硫氨酸细菌改变该昆虫的肠和/或血腔中的微生物区系。
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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107922954A (zh) * 2015-07-03 2018-04-17 Cj第制糖株式会社 具有l‑赖氨酸生产力的微生物和使用其生产l‑赖氨酸的方法
CN113493791A (zh) * 2021-07-26 2021-10-12 广西壮族自治区兽医研究所 一种牛抗菌肽基因Cath及其制备方法和应用

Families Citing this family (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US12005110B2 (en) * 2019-02-14 2024-06-11 University Of Florida Research Foundation, Incorporated Honeybee commensal Snodgrassella alvi vaccine against pathogenic Neisseriaceae
KR102410164B1 (ko) * 2020-04-06 2022-06-20 이상무 귀뚜라미 사료 조성물 및 이의 제조방법
KR102616263B1 (ko) * 2020-12-23 2023-12-27 농업회사법인 주식회사 엔토모 동애등에 성분을 포함하는 사료 첨가제 및 그 제조방법
KR102575838B1 (ko) * 2021-02-04 2023-09-07 단국대학교 천안캠퍼스 산학협력단 곤충 장관 유래 미생물을 포함하는 사료 첨가용 조성물
KR102462551B1 (ko) * 2021-11-29 2022-11-04 그린테코 주식회사 지방 함량 증대를 위한 갈색거저리용 사료의 제조방법
KR20230114123A (ko) * 2022-01-24 2023-08-01 손태혁 거저리 사육용 사료 조성물
CN115088417B (zh) * 2022-08-01 2023-04-28 绵阳市农业科学研究院 一种用于马铃薯种薯催芽的方法

Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1246893A (zh) * 1996-09-26 2000-03-08 艾可根公司 对鞘翅类昆虫和栉头蚤属种昆虫有毒的苏云金芽孢杆菌CryET29组合物
US20030162267A1 (en) * 1999-06-25 2003-08-28 Markus Pompejus Corynebacterium glutamicum genes encoding regulatory proteins involved in the production of methionine
KR20050090387A (ko) * 2005-05-27 2005-09-13 바스프 악티엔게젤샤프트 메티오닌의 생산 방법
US20090285937A1 (en) * 2008-05-15 2009-11-19 The Bug Company Of Minnesota Combination water and food insect supplement
US20120148712A1 (en) * 2010-12-14 2012-06-14 Dianne Lee Guilfoyle Phylum arthropoda based nutritional supplement
WO2013052536A2 (en) * 2011-10-05 2013-04-11 University Of Florida Research Foundation, Inc. Exploiting host molecules to augment the virulence of mycoinsecticides
WO2013117910A1 (en) * 2012-02-08 2013-08-15 Swansea University Pest and pathogen control
US20140302194A1 (en) * 2013-04-09 2014-10-09 Gasparo Franco Marsala Feeder insect coating composition and method
CN105814190A (zh) * 2013-12-31 2016-07-27 合成基因组股份有限公司 生物质生产率调节剂

Family Cites Families (51)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS51129783A (en) * 1975-04-30 1976-11-11 Toho Beslon Co Artificial silkwormmfeeding stuffs
ATE123528T1 (de) 1986-07-25 1995-06-15 Univ Louisiana State Verfahren zum verleihen bei pflanzen eines widerstands gegen krankheiten und pest sowie neue gene in pflanzen die hierfür kodieren.
JPH02222654A (ja) 1989-02-27 1990-09-05 Bio Chem:Kk 蜜蜂の腸内有用菌を混合した養蜂飼料及びその使用方法
US5580852A (en) 1993-12-17 1996-12-03 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Derivatives of tachyplesin having inhibitory activity towards plant pathogenic fungi
US5631024A (en) 1995-05-22 1997-05-20 Enviroquest, Ltd. Medicaments for beneficial insects and method
JPH09117233A (ja) * 1995-10-25 1997-05-06 Fusouri:Kk 鳥類の飼育方法
US6503881B2 (en) 1996-08-21 2003-01-07 Micrologix Biotech Inc. Compositions and methods for treating infections using cationic peptides alone or in combination with antibiotics
MD1193G2 (ro) 1998-08-21 1999-09-30 Gavril Boian Metoda de corecţie chirurgicală a mobilităţii patologice a colonului
US6660690B2 (en) 2000-10-06 2003-12-09 Monsanto Technology, L.L.C. Seed treatment with combinations of insecticides
WO2005034863A2 (en) 2003-10-03 2005-04-21 Jarikuma Corporation Countermeasures against malaria
US8025552B2 (en) 2004-12-30 2011-09-27 The United States Of America As Represented By The Secretary Of Agriculture Artificial diets for honey bees
RU2305935C1 (ru) 2005-11-30 2007-09-20 Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт экспериментальной ветеринарии им. Я.Р. Коваленко (ВИЭВ) Препарат для повышения резистентности пчел, профилактики отравлений и способ профилактики отравлений пчел ядохимикатами
TW200911131A (en) 2007-01-10 2009-03-16 Blue Limit As Feed composition for aquatic organisms
ZA200905867B (en) 2007-02-23 2010-10-27 Vamtech L L C Coated seeds and methods of making coated seeds
US8609936B2 (en) 2007-04-27 2013-12-17 Monsanto Technology Llc Hemipteran-and coleopteran active toxin proteins from Bacillus thuringiensis
DK2142635T3 (en) 2007-05-03 2018-08-20 Tobias Olofsson HISTORY OF UNKNOWN BACTERIA ISOLATED FROM HONEY BEER'S HONEY-PRODUCING CHANNEL
WO2009108180A2 (en) 2007-12-20 2009-09-03 University Of Georgia Research Foundation, Inc. Plant production and delivery system for recombinant proteins as protein-flour or protein-oil compositions
WO2009111838A1 (en) 2008-03-13 2009-09-17 Agriculture Victoria Services Pty Limited Method of treatment using antimicrobial composition
JP4913117B2 (ja) 2008-12-11 2012-04-11 社団法人 日本養蜂はちみつ協会 新規シュウドモナス属細菌
EP2381953A4 (en) 2009-01-06 2016-06-29 C3 Jian Inc TARGETED ANTIMICROBIAL ELEMENTS
US8334366B1 (en) 2009-04-29 2012-12-18 The United States Of America, As Represented By The Secretary Of Agriculture Mutant lycotoxin-1 peptide sequences for insecticidal and cell membrane altering properties
KR20100125747A (ko) 2009-05-21 2010-12-01 국동호 벌 영양제
AU2009222557B2 (en) 2009-06-17 2015-06-11 Monash University Modified arthropod and method of use
KR101316582B1 (ko) 2011-05-02 2013-10-15 서범구 선옥균과 산야초의 발효 조성물과 꿀벌 사양액 제조방법
EP2711013A4 (en) 2011-05-18 2015-03-04 Ajinomoto Kk IMMUNSTIMULANDS FOR ANIMALS, FEED THEREFOR AND MANUFACTURING PROCESS THEREFOR
FR2985664B1 (fr) 2012-01-18 2014-08-29 Gilles Albert Chanforan Probiotique constitue de bacteries de la classe des bacilli destine aux colonies d'abeilles du genre apis pour la prevention des mortalites hivernales et du syndrome d'effondrement des colonies
JP2013158315A (ja) 2012-02-07 2013-08-19 National Agriculture & Food Research Organization 乳酸菌を用いた蜂病防除剤及び防除方法
KR101384915B1 (ko) 2012-03-05 2014-04-14 영남대학교 산학협력단 유산균이 함유된 양봉 사료 및 이의 제조방법
RU2511304C2 (ru) 2012-07-17 2014-04-10 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "РОССИЙСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ АГРАРНЫЙ ЗАОЧНЫЙ УНИВЕРСИТЕТ" Способ повышения адаптивного статуса пчелиной семьи
WO2014097338A1 (en) 2012-12-11 2014-06-26 Trovo' Stefano Useful composition for the biological control of bee diseases
WO2015020516A1 (en) 2013-08-05 2015-02-12 Sustain B.V. Improved pollen and/or pollen substitute comprising bee food composition
WO2015100432A2 (en) 2013-12-24 2015-07-02 Symbiota, Inc. Method for propagating microorganisms within plant bioreactors and stably storing microorganisms within agricultural seeds
RU2552672C1 (ru) 2014-02-04 2015-06-10 Рашит Габдулхаевич Фархутдинов Состав для стимуляции развития пчелиных семей, профилактики и лечения аскосфероза
RO130298A0 (ro) 2014-05-27 2015-06-30 Teso Spec S.R.L. Supliment nutraceutic pentru familiile de albine şi procedeu de administrare
EP3155089A4 (en) 2014-06-10 2017-11-22 Georgia State University Research Foundation, Inc. Inhibiting or reducing fungal infections
WO2016004312A1 (en) 2014-07-03 2016-01-07 Adm Alliance Nutrition, Inc Insect feeds
RU2579266C1 (ru) 2015-03-23 2016-04-10 Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Всероссийский научно-исследовательский и технологический институт биологической промышленности" Биотрилакт - биопрепарат для повышения жизнедеятельности и активности пчел в закрытом грунте
US10464975B2 (en) 2015-07-02 2019-11-05 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Stabilized anti-microbial peptides
EP3165092A1 (en) 2015-11-09 2017-05-10 Incotec Holding B.V. Seed coating composition
US10086024B2 (en) 2015-11-30 2018-10-02 Joseph E. Kovarik Method and system for protecting honey bees, bats and butterflies from neonicotinoid pesticides
MX2019002978A (es) 2016-09-14 2019-09-18 Grace Breeding Ltd Composiciones que comprenden una bacteria no patogena y metodos para proteger plantas y animales anfitriones contra enfermedades micoticas, bacterianas y virales.
CN106472882A (zh) 2016-09-22 2017-03-08 广西田林县林子蚂蜂养殖科技有限公司 一种蚂蜂饲料及其制作方法
AU2018213284B2 (en) 2017-01-24 2024-03-28 Flagship Pioneering Innovations V, Inc. Compositions and related methods for agriculture
CN106962696A (zh) 2017-05-12 2017-07-21 黄平县海松生态蜂业有限责任公司 蜜蜂饲料及其制备方法和1‑3月份饲喂蜜蜂的方法
CN107028037A (zh) 2017-05-12 2017-08-11 黄平县海松生态蜂业有限责任公司 蜜蜂饲料颗粒及其制备方法和蜜蜂的饲喂方法
US11382989B2 (en) 2017-07-07 2022-07-12 Board Of Regents, The University Of Texas System Engineered microbial population
CN108782465A (zh) 2018-05-14 2018-11-13 孙安心 一种低死亡率的蜜蜂养殖方法
CN108783118A (zh) 2018-05-14 2018-11-13 孙安心 吸收率高的蜜蜂饲料制备方法
CN108813226A (zh) 2018-05-20 2018-11-16 孙安心 用于制备吸收率高的蜜蜂饲料的方法
CN108812552A (zh) 2018-05-20 2018-11-16 孙安心 一种蜂食转换率高的蜜蜂养殖方法
CN109055268B (zh) 2018-08-21 2021-08-31 云南农业大学 一种复合微生态制剂及其在蜜蜂养殖过程中的应用

Patent Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1246893A (zh) * 1996-09-26 2000-03-08 艾可根公司 对鞘翅类昆虫和栉头蚤属种昆虫有毒的苏云金芽孢杆菌CryET29组合物
US20030162267A1 (en) * 1999-06-25 2003-08-28 Markus Pompejus Corynebacterium glutamicum genes encoding regulatory proteins involved in the production of methionine
KR20050090387A (ko) * 2005-05-27 2005-09-13 바스프 악티엔게젤샤프트 메티오닌의 생산 방법
US20090285937A1 (en) * 2008-05-15 2009-11-19 The Bug Company Of Minnesota Combination water and food insect supplement
US20120148712A1 (en) * 2010-12-14 2012-06-14 Dianne Lee Guilfoyle Phylum arthropoda based nutritional supplement
WO2013052536A2 (en) * 2011-10-05 2013-04-11 University Of Florida Research Foundation, Inc. Exploiting host molecules to augment the virulence of mycoinsecticides
WO2013117910A1 (en) * 2012-02-08 2013-08-15 Swansea University Pest and pathogen control
US20140302194A1 (en) * 2013-04-09 2014-10-09 Gasparo Franco Marsala Feeder insect coating composition and method
CN105814190A (zh) * 2013-12-31 2016-07-27 合成基因组股份有限公司 生物质生产率调节剂

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107922954A (zh) * 2015-07-03 2018-04-17 Cj第制糖株式会社 具有l‑赖氨酸生产力的微生物和使用其生产l‑赖氨酸的方法
CN113493791A (zh) * 2021-07-26 2021-10-12 广西壮族自治区兽医研究所 一种牛抗菌肽基因Cath及其制备方法和应用

Also Published As

Publication number Publication date
JP2020505068A (ja) 2020-02-20
BR112019014929A2 (pt) 2020-03-31
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AU2018213301A1 (en) 2019-07-11
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JP7119005B2 (ja) 2022-08-16
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CN111148434B (zh) 2023-11-17
BR112019014929B1 (pt) 2023-03-07
CA3047431A1 (en) 2018-08-02
WO2018140496A1 (en) 2018-08-02
RU2019126302A (ru) 2021-02-26

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