CN111110728A - 一种白头翁提取物及其在制备预防和/或治疗奶牛乳房炎中的用途 - Google Patents
一种白头翁提取物及其在制备预防和/或治疗奶牛乳房炎中的用途 Download PDFInfo
- Publication number
- CN111110728A CN111110728A CN202010093148.XA CN202010093148A CN111110728A CN 111110728 A CN111110728 A CN 111110728A CN 202010093148 A CN202010093148 A CN 202010093148A CN 111110728 A CN111110728 A CN 111110728A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- pulsatilla
- saponin
- extract
- pulsatilla chinensis
- ethanol
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 241000123887 Pulsatilla chinensis Species 0.000 title claims abstract description 76
- 208000004396 mastitis Diseases 0.000 title claims abstract description 69
- 239000000284 extract Substances 0.000 title claims abstract description 57
- 239000003814 drug Substances 0.000 title claims abstract description 18
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 13
- 229940079593 drug Drugs 0.000 title description 9
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 claims abstract description 70
- 239000001397 quillaja saponaria molina bark Substances 0.000 claims abstract description 51
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 claims abstract description 51
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 claims abstract description 51
- 241000612118 Samolus valerandi Species 0.000 claims abstract description 40
- 239000008267 milk Substances 0.000 claims abstract description 40
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 claims abstract description 40
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 claims abstract description 40
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 claims abstract description 22
- 241000206469 Pulsatilla Species 0.000 claims abstract description 19
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 claims abstract description 16
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 claims abstract description 7
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 claims abstract description 7
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 70
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims description 23
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims description 23
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 23
- 229930184121 pulsatilla saponin Natural products 0.000 claims description 14
- 239000003480 eluent Substances 0.000 claims description 12
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 12
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 11
- 239000009806 pulsatillae Substances 0.000 claims description 11
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 9
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 9
- OUHBKBTZUPLIIA-OTEDBJMHSA-N [(2s,3r,4s,5s,6r)-6-[[(2r,3r,4r,5s,6r)-3,4-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)-5-[(2s,3r,4r,5r,6s)-3,4,5-trihydroxy-6-methyloxan-2-yl]oxyoxan-2-yl]oxymethyl]-3,4,5-trihydroxyoxan-2-yl] (1r,3as,5ar,5br,7ar,8r,9s,11ar,11br,13ar,13br)-9-[(2s,3r,4s,5s)-4,5-dihydroxy- Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@@H](OC[C@@H]2[C@H]([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](OC(=O)[C@@]34[C@H]([C@@H](CC3)C(C)=C)[C@@H]3[C@@]([C@]5(C)CC[C@H]6[C@](C)(CO)[C@@H](O[C@H]7[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)CO7)O[C@H]7[C@@H]([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O7)O)CC[C@]6(C)[C@H]5CC3)(C)CC4)O2)O)[C@H](O)[C@H]1O OUHBKBTZUPLIIA-OTEDBJMHSA-N 0.000 claims description 8
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 7
- 238000010576 medium-pressure preparative liquid chromatography Methods 0.000 claims description 6
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 5
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 claims description 5
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 3
- 238000010992 reflux Methods 0.000 claims description 3
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 2
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 claims description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 2
- 238000012856 packing Methods 0.000 claims description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 18
- 208000025865 Ulcer Diseases 0.000 abstract description 5
- 231100000397 ulcer Toxicity 0.000 abstract description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 36
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 36
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 13
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 8
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 8
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 8
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 6
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 description 6
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 5
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 5
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010039509 Scab Diseases 0.000 description 3
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 3
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 3
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 3
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 238000007789 sealing Methods 0.000 description 3
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 3
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 3
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 3
- 241000442474 Pulsatilla vulgaris Species 0.000 description 2
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 2
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 239000000419 plant extract Substances 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 230000036269 ulceration Effects 0.000 description 2
- YWKJNRNSJKEFMK-PQFQYKRASA-N (6r,7r)-7-[[(2z)-2-(2-amino-1,3-thiazol-4-yl)-2-methoxyiminoacetyl]amino]-8-oxo-3-(5,6,7,8-tetrahydroquinolin-1-ium-1-ylmethyl)-5-thia-1-azabicyclo[4.2.0]oct-2-ene-2-carboxylate Chemical compound N([C@@H]1C(N2C(=C(C[N+]=3C=4CCCCC=4C=CC=3)CS[C@@H]21)C([O-])=O)=O)C(=O)\C(=N/OC)C1=CSC(N)=N1 YWKJNRNSJKEFMK-PQFQYKRASA-N 0.000 description 1
- JLUQTCXCAFSSLD-NXEZZACHSA-N Anemonin Chemical compound C1=CC(=O)O[C@]11[C@@]2(C=CC(=O)O2)CC1 JLUQTCXCAFSSLD-NXEZZACHSA-N 0.000 description 1
- JLUQTCXCAFSSLD-UHFFFAOYSA-N Anemonin Natural products C1=CC(=O)OC11C2(C=CC(=O)O2)CC1 JLUQTCXCAFSSLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SPFYMRJSYKOXGV-UHFFFAOYSA-N Baytril Chemical compound C1CN(CC)CCN1C(C(=C1)F)=CC2=C1C(=O)C(C(O)=O)=CN2C1CC1 SPFYMRJSYKOXGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010006298 Breast pain Diseases 0.000 description 1
- 206010059866 Drug resistance Diseases 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 229950009592 cefquinome Drugs 0.000 description 1
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 229960000740 enrofloxacin Drugs 0.000 description 1
- IDGUHHHQCWSQLU-UHFFFAOYSA-N ethanol;hydrate Chemical compound O.CCO IDGUHHHQCWSQLU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 1
- 208000027096 gram-negative bacterial infections Diseases 0.000 description 1
- 244000144980 herd Species 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 1
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 150000003951 lactams Chemical class 0.000 description 1
- 230000006651 lactation Effects 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 244000000010 microbial pathogen Species 0.000 description 1
- 239000012046 mixed solvent Substances 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 230000010412 perfusion Effects 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 230000008733 trauma Effects 0.000 description 1
- 229940126673 western medicines Drugs 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/71—Ranunculaceae (Buttercup family), e.g. larkspur, hepatica, hydrastis, columbine or goldenseal
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7028—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages
- A61K31/7034—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages attached to a carbocyclic compound, e.g. phloridzin
- A61K31/704—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages attached to a carbocyclic compound, e.g. phloridzin attached to a condensed carbocyclic ring system, e.g. sennosides, thiocolchicosides, escin, daunorubicin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
- A61P15/14—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives for lactation disorders, e.g. galactorrhoea
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
- A61K2236/30—Extraction of the material
- A61K2236/33—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones
- A61K2236/333—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones using mixed solvents, e.g. 70% EtOH
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
- A61K2236/30—Extraction of the material
- A61K2236/39—Complex extraction schemes, e.g. fractionation or repeated extraction steps
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
- A61K2236/50—Methods involving additional extraction steps
- A61K2236/55—Liquid-liquid separation; Phase separation
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Gynecology & Obstetrics (AREA)
- Alternative & Traditional Medicine (AREA)
- Mycology (AREA)
- Botany (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Virology (AREA)
- Pregnancy & Childbirth (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Reproductive Health (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
Abstract
本发明提供了一种白头翁提取物及其在制备预防和/或治疗奶牛乳房炎中的用途，具体公开了一种白头翁提取物，所述白头翁提取物中，白头翁皂苷B4和白头翁皂苷B5的总含量大于80wt.％，白头翁皂苷B4和白头翁皂苷B5含量的比例为(2.50‑4.50)：1。实验结果表明，本发明的白头翁提取物能够治疗奶牛乳房红肿，治疗奶牛乳房溃烂，提高奶牛产奶量；本发明的白头翁皂苷提取物能够明显缩短奶牛乳房炎的平均治愈时间，提高奶牛乳房炎的治愈率，其对奶牛乳房炎的治疗效果显著优于单独的白头翁皂苷B4或白头翁皂苷B5，起到了协同增效的作用，在制备预防和/或治疗病毒性和/或细菌性疾病，特别是奶牛乳房炎的药物中具有非常好的应用前景。
Description
技术领域
本发明属于医药领域，具体涉及一种白头翁提取物及其在制备预防和/或治疗奶牛乳房炎中的用途。
背景技术
奶牛乳房炎是世界公认的奶牛三大疾病之一，泌乳期多发，其发生的主要原因是病原微生物感染，此外还有挤奶操作不当、外伤造成的机械性损伤和化学试剂损伤等。乳房炎不仅影响产奶量，造成经济损失，而且影响乳的品质，危害人的健康。
奶牛乳房炎可分为隐性乳房炎和临床型乳房炎两大类。临床型乳房炎可见明显的临床症状和乳汁的肉眼可见变化，根据发病程度又可分为三级：1级乳房炎：牛奶异常；2级乳房炎：牛奶异常，乳房红肿热痛；3级乳房炎，牛奶异常，乳房红肿热痛，奶牛出现全身感染症状。临床型乳房炎是目前临床中主要的治疗对象，当揭发出临床型乳房炎奶牛时，需进行隔离治疗。隐性乳房炎又称为亚临床乳房炎，是奶牛发病最普遍的乳房炎类型，该类型乳房炎一般无临床症状表现，乳汁肉眼不可看出与正常乳汁的区别，需进行实验室试剂检测才可诊断，且该类乳房炎如果在牛群中未达到一定比例，一般不予治疗，正是因为其发病隐蔽，隐性乳房炎对奶牛造成的经济损失十分严重。
目前，对于奶牛乳房炎的治疗多采用乳房灌注、静脉注射等方法，治疗药物多为抗生素类药物，常见有头孢喹肟、恩诺沙星、青霉素、链霉素等。但长期使用抗生素容易产生耐药性，影响治疗效果；同时，使用抗生素治疗时，容易造成抗生素残留，污染奶源，危害人体健康。值得注意的是，若乳房炎为革兰氏阴性菌感染时，使用内酰胺类抗生素治疗，会破坏细胞壁释放内毒素，造成整个乳区的红、肿、热、痛，加重病情。而与西药相比，植物提取物较低的副作用为其在制药领域的应用提供了更多的潜力。因此，寻找一种新的安全且有效的治疗奶牛乳房炎的药物具有重要意义。
发明内容
本发明的目的在于提供一种白头翁提取物及其在制备预防和/或治疗病毒性和/或细菌性疾病，特别是奶牛乳房炎的药物中的用途。
本发明提供了一种白头翁提取物，所述白头翁提取物中，白头翁皂苷B4和白头翁皂苷B5的总含量大于80wt.％，白头翁皂苷B4和白头翁皂苷B5含量的比例为(2.50-4.50)：1。
进一步地，所述白头翁皂苷B4和白头翁皂苷B5含量的比例为(2.76-4.33)：1。
进一步地，所述白头翁提取物中，白头翁皂苷B4的含量为65wt.％-70wt.％，白头翁皂苷B5的含量为15wt.％-25wt.％；
优选地，所述白头翁提取物中，白头翁皂苷B4的含量为69wt.％，白头翁皂苷B5的含量为25wt.％。
本发明还提供了上述白头翁提取物在制备预防和/或治疗病毒性和/或细菌性疾病的药物中的用途。
进一步地，所述病毒性和/或细菌性疾病为奶牛乳房炎。
进一步地，所述奶牛乳房炎为临床型乳房炎或隐性乳房炎，优选为临床型乳房炎。
进一步地，所述药物能够治疗奶牛乳房红肿，治疗奶牛乳房溃烂，和/或提高奶牛产奶量。
本发明还提供了上述白头翁提取物的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：
(1)取白头翁，加入醇类溶剂，提取，得提取液；
(2)将步骤(1)所得提取液经过极性树脂进行梯度洗脱，洗脱剂依次为水、20％乙醇、70％乙醇、95％乙醇，收集70％乙醇的洗脱液；
(3)将步骤(2)收集的液体经过中压制备液相色谱进行洗脱，洗脱剂为水和乙醇的混合溶液，收集洗脱液，浓缩干燥，即得。
进一步地，步骤(1)中，所述白头翁为水分≤13.0％的白头翁饮片；所述醇类溶剂为60％～80％乙醇，优选为70％乙醇；所述白头翁与醇类溶剂的质量体积比为1：(8～12)g/mL，优选为1：10g/mL；所述提取方式为回流提取，提取次数为2～3次，提取时间为每次2～3小时；
和/或，步骤(2)中，所述极性树脂为AB-8大孔树脂或D101大孔树脂；所述水的用量为极性树脂体积的2倍，20％乙醇的用量为极性树脂体积的3倍，70％乙醇的用量为极性树脂体积的3倍，95％乙醇的用量为极性树脂体积的2倍；
和/或，步骤(3)中，所述中压制备液相色谱的填料为ODSC-18；所述水和乙醇的混合溶液中水和乙醇的体积比为2:1；所述洗脱液为第3～5个柱体积的液体。
本发明还提供了一种药物组合物，所述药物组合物是以上述白头翁提取物为活性成分，加上药学上可接受的辅料制得的制剂。
本发明中，BV表示填料的体积，“收集4BV～5BV的液体”表示收集第4～5个柱体积的液体。
本发明中，洗脱剂中混合溶剂的比例均为体积比。
实验结果表明，本发明的白头翁提取物能够治疗奶牛乳房红肿，治疗奶牛乳房溃烂，提高奶牛产奶量；本发明的白头翁皂苷提取物能够明显缩短奶牛乳房炎的平均治愈时间，提高奶牛乳房炎的治愈率，其对奶牛乳房炎的治疗效果显著优于单独的白头翁皂苷B4或白头翁皂苷B5，起到了协同增效的作用，在制备预防和/或治疗病毒性和/或细菌性疾病，特别是奶牛乳房炎的药物中具有非常好的应用前景。
显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。
以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实施例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
附图说明
图1为HPLC色谱图，其中，空白溶剂表示溶剂的HPLC，对照品表示白头翁皂苷B4对照品的HPLC，供试品表示实施例1所得白头翁提取物的HPLC。
具体实施方式
本发明所用原料与设备均为已知产品，通过购买市售产品所得。
实施例1白头翁提取物的制备
1、药材前处理
取白头翁药材，除去杂质，洗净，切薄片，70℃干燥至水分≤13.0％，得白头翁饮片。
2、提取与纯化
(1)取白头翁饮片，加10倍量(质量体积比)70％乙醇回流提取2-3次，每次2-3小时，得提取液。
(2)取步骤(1)所得提取液，经过AB-8大孔树脂进行梯度洗脱，洗脱剂依次为水(2倍树脂体积)、20％乙醇(3倍树脂体积)、70％乙醇(3倍树脂体积)、95％乙醇(2倍树脂体积)，收集70％乙醇洗脱出的液体；
(3)将步骤(2)收集的液体减压回收乙醇，然后经过中压制备液相色谱，以ODSC-18为填料，以水和乙醇的混合溶液(其中水和乙醇体积比为2:1)为洗脱剂进行洗脱，收集4BV～5BV的液体，浓缩，干燥，即得本发明白头翁提取物。
3、所得白头翁提取物的含量检测：
①、测试方法：利用高效液相色谱法，测试上述实施例1所得白头翁提取物中的组成成分。测试仪器：Agilent 1260型高效液相色谱仪、DAD检测器，色谱柱：Agilent 5HC-C18(2)250×4.6mm，流动相：甲醇：水＝64：36，检测波长：201nm，流速：1.0mL/min，进样量：20μL。以空白溶剂、白头翁皂苷B4对照品为对照。
②、测试结果
如图1所示，可以看出本发明实施例1制得的白头翁提取物中含有大量白头翁皂苷B4和白头翁皂苷B5，经过计算，含69wt.％白头翁皂苷B4和25wt.％白头翁皂苷B5。
实施例2白头翁提取物注射液的制备
称取实施例1制备的白头翁提取物5g，加注射用水800mL，使其完全溶解，过滤，调pH至7.0，加注射用水至1000mL，精滤，灌装，封口，100℃灭菌30min，即得5mg/mL的白头翁提取物注射液。
对照例1白头翁皂苷B4注射液的制备
参照中国专利CN 110090222A实施例1中的方法，制得白头翁皂苷B4。
称取白头翁皂苷B4 5g，加注射用水800mL，使其完全溶解，过滤，调pH至7.0，加注射用水至1000mL，精滤，灌装，封口，100℃灭菌30min，即得5mg/mL的白头翁皂苷B4注射液。
对照例2白头翁皂苷B5注射液的制备
按照实施例1中步骤1～2相同的方法，制得白头翁提取物。
然后将白头翁提取物通过动态轴向色谱分离设备，以乙醇水为流动相，分离纯化得到白头翁皂苷B5浓缩液，干燥即得白头翁皂苷B5。
称取白头翁皂苷B5 5g，加注射用水800mL，使其完全溶解，过滤，调pH至7.0，加注射用水至1000mL，精滤，灌装，封口，100℃灭菌30min，即得5mg/mL的白头翁皂苷B5注射液。
以下通过实验例证明本发明的有益效果。
实验例1白头翁提取物对奶牛乳房炎的治疗效果
(1)测试对象：临床型奶牛乳房炎患病样本30例。其中重度患病样本15例(症状：溃烂、不出奶)。轻度患病样本15例(症状：红肿，出奶少且浑浊)。
(2)测试样品：本发明实施例2制得的5mg/mL的白头翁提取物注射液；对照例1和对照例2制得的5mg/mL的白头翁皂苷B4注射液和5mg/mL的白头翁皂苷B5注射液。
(3)给药方法：利用待测注射液对患病乳区进行局部肌内注射，每天早晚各一次，连用每天早晚各一次，每次给药量为30ml/头，连用10天。
(4)评价标准
轻度患病样本治愈标准：奶牛乳房红肿消退，能正常出奶且符合要求。
重度患病样本治愈标准：奶牛乳房溃烂处结痂好转，红肿消退，能正常出奶且符合要求。
根据平均治愈时间，用“+”个数对各注射液的治疗效果进行评价，“+”个数越多，表示治疗效果越好。
(5)实验结果
5.1)对奶牛乳房炎轻度患病样本的治疗效果
注射本发明的白头翁皂苷提取物注射液后，用药第二天红肿消退，可产奶，产奶量增加，且浑浊物减少。第五天能正常出奶且符合要求。注射白头翁皂苷B4注射液后，用药第二天红肿消退，但产奶依旧量少，浑浊。用药第三天，可产奶且产奶量增加，浑浊物减少，第六天能正常出奶且符合要求。注射白头翁皂苷B5注射液后，用药第二天红肿减弱，第三天红肿消退，第四天可产奶，浑浊减少，第七天能正常出奶。
具体统计结果见表1。可以看出，注射本发明的白头翁皂苷提取物能够明显缩短轻度奶牛乳房炎的平均治愈时间。在相同剂量下，本发明的白头翁皂苷提取物对奶牛乳房炎轻度患病样本的治疗效果优于单独的白头翁皂苷B4或白头翁皂苷B5，说明本发明的白头翁皂苷提取物对奶牛乳房炎轻度患病样本具有协同增效的作用。
表1奶牛乳房炎轻度患病样本治疗效果
5.2)对奶牛乳房炎重度患病样本的治疗效果
注射本发明的白头翁皂苷提取物注射液后，用药第二天溃烂处开始结痂好转，用药第三天红肿消退，可产奶，产奶量增加，且浑浊物减少。第5天能正常出奶且符合要求。注射白头翁皂苷B4注射液后，用药第二天溃烂处开始结痂好转，用药第三天红肿消退，但产奶依旧量少，浑浊。用药第四天，可产奶且产奶量增加，浑浊物减少，第八天能正常出奶且符合要求。注射白头翁皂苷B5注射液后，用药第二天无好转迹象，第三天溃烂处开始结痂好转，第四天红肿减弱，第五天红肿消退，第六天可产奶，浑浊减少，第十天能正常出奶。
具体统计结果见表2。可以看出，注射本发明的白头翁皂苷提取物能够明显缩短重度奶牛乳房炎的平均治愈时间，提高重度奶牛乳房炎的治愈率。在相同剂量下，本发明的白头翁皂苷提取物对奶牛乳房炎重度患病样本的治疗效果优于单独的白头翁皂苷B4或白头翁皂苷B5，说明本发明的白头翁皂苷提取物对奶牛乳房炎重度患病样本具有协同增效的作用。
表2奶牛乳房炎重度患病样本治疗效果
实验例2不同提取条件下白头翁提取物对奶牛乳房炎的治疗效果
(1)测试对象：临床型奶牛乳房炎重度患病样本15例。
(2)测试样品：样品1～样品8。先参照本发明实施例1的方法提取，区别在于：“2、提取与纯化”的步骤(2)的AB-8大孔树脂不变或替换为D101大孔树脂(具体见表3)；步骤(3)中经过中压制备液相色谱洗脱后，收集液体的体积如表3所示。在上述条件下，得到8个白头翁提取物，然后按照实施例2的方法分别制备成5mg/mL的白头翁提取物注射液，命名为样品1～样品8。
(3)给药方法：同实验例1。
(4)评价标准
重度患病样本治愈标准：奶牛乳房溃烂处结痂好转，红肿消退，能正常出奶且符合要求。
根据平均治愈时间，用“+”个数对各注射液的治疗效果进行评价，“+”个数越多，表示治疗效果越好。
(5)实验结果
如表3所示，发现样品1～8均能有效缩短重度奶牛乳房炎的平均治愈时间，提高对重度奶牛乳房炎的治疗效果。与表2中白头翁皂苷B4注射液、白头翁皂苷B5注射液的数据对比，样品1～8在相同剂量下对奶牛乳房炎重度患病样本的治疗效果优于单独的白头翁皂苷B4或白头翁皂苷B5，说明本发明的白头翁皂苷提取物对奶牛乳房炎重度患病样本具有协同增效的作用。
表3各样品对奶牛乳房炎重度患病样本治疗效果
综上，本发明提供了一种白头翁提取物，所述白头翁提取物中，白头翁皂苷B4和白头翁皂苷B5的总含量大于80％，白头翁皂苷B4和白头翁皂苷B5含量的比例为(2.50-4.50)：1。该白头翁提取物能够治疗奶牛乳房红肿，治疗奶牛乳房溃烂，提高奶牛产奶量；能够明显缩短奶牛乳房炎的平均治愈时间，提高奶牛乳房炎的治愈率，其对奶牛乳房炎的治疗效果显著优于单独的白头翁皂苷B4或白头翁皂苷B5，起到了协同增效的作用，本发明的白头翁提取物在制备预防和/或治疗病毒性和/或细菌性疾病，特别是奶牛乳房炎的药物中具有非常好的应用前景。
Claims (10)
1.一种白头翁提取物，其特征在于：所述白头翁提取物中，白头翁皂苷B4和白头翁皂苷B5的总含量大于80wt.％，白头翁皂苷B4和白头翁皂苷B5含量的比例为(2.50-4.50)：1。
2.根据权利要求1所述的白头翁提取物，其特征在于：所述白头翁皂苷B4和白头翁皂苷B5含量的比例为(2.76-4.33)：1。
3.根据权利要求2所述的白头翁提取物，其特征在于：所述白头翁提取物中，白头翁皂苷B4的含量为65wt.％-70wt.％，白头翁皂苷B5的含量为15wt.％-25wt.％；
优选地，所述白头翁提取物中，白头翁皂苷B4的含量为69wt.％，白头翁皂苷B5的含量为25wt.％。
4.权利要求1-3任一项所述白头翁提取物在制备预防和/或治疗病毒性和/或细菌性疾病的药物中的用途。
5.根据权利要求4所述的用途，其特征在于：所述病毒性和/或细菌性疾病为奶牛乳房炎。
6.根据权利要求5所述的用途，其特征在于：所述奶牛乳房炎为临床型乳房炎或隐性乳房炎，优选为临床型乳房炎。
7.根据权利要求4所述的用途，其特征在于：所述药物能够治疗奶牛乳房红肿，治疗奶牛乳房溃烂，和/或提高奶牛产奶量。
8.权利要求1-3任一项所述白头翁提取物的制备方法，其特征在于：所述制备方法包括以下步骤：
(1)取白头翁，加入醇类溶剂，提取，得提取液；
(2)将步骤(1)所得提取液经过极性树脂进行梯度洗脱，洗脱剂依次为水、20％乙醇、70％乙醇、95％乙醇，收集70％乙醇的洗脱液；
(3)将步骤(2)收集的液体经过中压制备液相色谱进行洗脱，洗脱剂为水和乙醇的混合溶液，收集洗脱液，浓缩干燥，即得。
9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于：步骤(1)中，所述白头翁为水分≤13.0％的白头翁饮片；所述醇类溶剂为60％～80％乙醇，优选为70％乙醇；所述白头翁与醇类溶剂的质量体积比为1：(8～12)g/mL，优选为1：10g/mL；所述提取方式为回流提取，提取次数为2～3次，提取时间为每次2～3小时；
和/或，步骤(2)中，所述极性树脂为AB-8大孔树脂或D101大孔树脂；所述水的用量为极性树脂体积的2倍，20％乙醇的用量为极性树脂体积的3倍，70％乙醇的用量为极性树脂体积的3倍，95％乙醇的用量为极性树脂体积的2倍；
和/或，步骤(3)中，所述中压制备液相色谱的填料为ODSC-18；所述水和乙醇的混合溶液中水和乙醇的体积比为2:1；所述洗脱液为第3～5个柱体积的液体。
10.一种药物组合物，其特征在于：所述药物组合物是以权利要求1-3任一项所述白头翁提取物为活性成分，加上药学上可接受的辅料制得的制剂。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202010093148.XA CN111110728B (zh) | 2020-02-14 | 2020-02-14 | 一种白头翁提取物及其在制备预防和/或治疗奶牛乳房炎中的用途 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202010093148.XA CN111110728B (zh) | 2020-02-14 | 2020-02-14 | 一种白头翁提取物及其在制备预防和/或治疗奶牛乳房炎中的用途 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN111110728A true CN111110728A (zh) | 2020-05-08 |
| CN111110728B CN111110728B (zh) | 2021-09-17 |
Family
ID=70492251
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202010093148.XA Active CN111110728B (zh) | 2020-02-14 | 2020-02-14 | 一种白头翁提取物及其在制备预防和/或治疗奶牛乳房炎中的用途 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN111110728B (zh) |
Cited By (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114469972A (zh) * | 2022-04-06 | 2022-05-13 | 中国中医科学院中药研究所 | 白头翁皂苷b4和/或白头翁皂苷b5在制备预防或治疗药物性肝损伤药物中的应用 |
| CN114601842A (zh) * | 2022-04-29 | 2022-06-10 | 广西英路维特药物有限公司 | 一种白头翁皂苷精提物在治疗仔猪腹泻的药物中的用途 |
| CN114681474A (zh) * | 2022-05-10 | 2022-07-01 | 广西林洋药业有限公司 | 一种具有消肿止痒作用的组合物 |
| CN114796248A (zh) * | 2022-05-16 | 2022-07-29 | 广西馨海药业科技有限公司 | 白头翁皂苷组合物及其在制备治疗皮肤病的药物中的应用 |
| CN114869899A (zh) * | 2022-03-30 | 2022-08-09 | 广西馨海药业科技有限公司 | 白头翁皂苷组合物及其在制备抗衰老的食品或药物中的应用 |
| CN114931582A (zh) * | 2022-05-11 | 2022-08-23 | 广西馨海药业科技有限公司 | 白头翁皂苷组合物在制备治疗动脉粥样硬化的药物中的应用 |
| CN114948781A (zh) * | 2022-06-02 | 2022-08-30 | 广西馨海药业科技有限公司 | 白头翁皂苷组合物在制备防脱发产品中的应用 |
| CN115192592A (zh) * | 2022-06-21 | 2022-10-18 | 广西馨海药业科技有限公司 | 白头翁皂苷组合物在制备治疗糖尿病肾病的药物中的应用 |
-
2020
- 2020-02-14 CN CN202010093148.XA patent/CN111110728B/zh active Active
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| 丁秀娟: "中药白头翁化学成分研究", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库 医药卫生科技辑》 * |
| 无: "我校教师主持的课题获"中药二类兽药"临床批件", 《HTTPS://ZDSYS.JXUTCM.EDU.CN/INFO/1002/1961.HTM》 * |
| 连姗: "白头翁三萜皂苷的提取分离和体内代谢研究", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库 医药卫生科技辑》 * |
Cited By (14)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114869899A (zh) * | 2022-03-30 | 2022-08-09 | 广西馨海药业科技有限公司 | 白头翁皂苷组合物及其在制备抗衰老的食品或药物中的应用 |
| CN114469972A (zh) * | 2022-04-06 | 2022-05-13 | 中国中医科学院中药研究所 | 白头翁皂苷b4和/或白头翁皂苷b5在制备预防或治疗药物性肝损伤药物中的应用 |
| CN114469972B (zh) * | 2022-04-06 | 2022-07-08 | 中国中医科学院中药研究所 | 白头翁皂苷b4和/或白头翁皂苷b5在制备预防或治疗药物性肝损伤药物中的应用 |
| CN114601842A (zh) * | 2022-04-29 | 2022-06-10 | 广西英路维特药物有限公司 | 一种白头翁皂苷精提物在治疗仔猪腹泻的药物中的用途 |
| CN114681474A (zh) * | 2022-05-10 | 2022-07-01 | 广西林洋药业有限公司 | 一种具有消肿止痒作用的组合物 |
| CN114681474B (zh) * | 2022-05-10 | 2023-11-24 | 广西林洋药业有限公司 | 一种具有消肿止痒作用的组合物 |
| CN114931582A (zh) * | 2022-05-11 | 2022-08-23 | 广西馨海药业科技有限公司 | 白头翁皂苷组合物在制备治疗动脉粥样硬化的药物中的应用 |
| CN114931582B (zh) * | 2022-05-11 | 2024-04-09 | 广西馨海药业科技有限公司 | 白头翁皂苷组合物在制备治疗动脉粥样硬化的药物中的应用 |
| CN114796248A (zh) * | 2022-05-16 | 2022-07-29 | 广西馨海药业科技有限公司 | 白头翁皂苷组合物及其在制备治疗皮肤病的药物中的应用 |
| CN114796248B (zh) * | 2022-05-16 | 2024-04-12 | 广西馨海药业科技有限公司 | 白头翁皂苷组合物及其在制备治疗皮肤病的药物中的应用 |
| CN114948781A (zh) * | 2022-06-02 | 2022-08-30 | 广西馨海药业科技有限公司 | 白头翁皂苷组合物在制备防脱发产品中的应用 |
| CN114948781B (zh) * | 2022-06-02 | 2023-11-24 | 广西馨海药业科技有限公司 | 白头翁皂苷组合物在制备防脱发产品中的应用 |
| CN115192592A (zh) * | 2022-06-21 | 2022-10-18 | 广西馨海药业科技有限公司 | 白头翁皂苷组合物在制备治疗糖尿病肾病的药物中的应用 |
| CN115192592B (zh) * | 2022-06-21 | 2024-02-23 | 广西馨海药业科技有限公司 | 白头翁皂苷组合物在制备治疗糖尿病肾病的药物中的应用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN111110728B (zh) | 2021-09-17 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN111110728B (zh) | 一种白头翁提取物及其在制备预防和/或治疗奶牛乳房炎中的用途 | |
| CN101062128A (zh) | 芍药总苷提取物及其制备方法 | |
| CN101062071A (zh) | 柴胡总皂苷提取物及其制备方法 | |
| Zhang et al. | Isolation, purification, structural characteristics, pharmacological activities, and combined action of Hedyotis diffusa polysaccharides: a review | |
| CN105154478B (zh) | 一种高速逆流色谱和高效液相色谱联用制备高纯度羟基酪醇的方法 | |
| CN101073595A (zh) | 甘草总黄酮和总皂苷提取物及其制备方法 | |
| CN101062078A (zh) | 甜叶菊甜菊苷类和黄酮类提取物及其制备方法 | |
| CN101411745A (zh) | 一种抗菌丹参酮提取物、其制备方法、用途及其产品 | |
| CN105384737B (zh) | 一种从吐根中提取精制生物碱的方法 | |
| CN105859804A (zh) | 一种杜仲提取物及其制备方法和应用 | |
| CN1562994A (zh) | 一种从卷柏中提取穗花杉双黄酮提取物的生产工艺 | |
| CN101073590B (zh) | 木香总内酯提取物及其制备方法 | |
| CN107929544B (zh) | 白及属植物中militarine部位及单体的制备方法及其应用 | |
| CN104000881A (zh) | 一种具有抗菌活性的葎草有效部位及其应用 | |
| CN1726965A (zh) | 芍药苷提取物的制备方法 | |
| CN101982184B (zh) | 一种蒲公英提取物的制备方法 | |
| CN111374247B (zh) | 一种接骨木莓浓缩汁及其制备方法 | |
| CN108704007A (zh) | 一种远志有效成分的制备方法 | |
| CN115453035B (zh) | 一种从三七中提取高含量三七皂苷r1的方法 | |
| CN105535219A (zh) | 文冠木黄酮提取物及其制备方法、质量检测方法和应用 | |
| CN115707482B (zh) | 一种生脉注射液精制方法 | |
| CN1698774A (zh) | 一种清热解毒中药软胶囊及其制备方法 | |
| CN104820029A (zh) | 一种复方鱼腥草合剂的含量检测方法 | |
| CN114276391A (zh) | 一种毛蕊花糖苷的分离纯化方法 | |
| CN105311131A (zh) | 一种具有抗菌消炎的中药组合物及其制备方法和应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| PE01 | Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right | ||
| PE01 | Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right |
Denomination of invention: A Baitouweng extract and its use in the preparation of prevention and/or treatment of mastitis in cows Granted publication date: 20210917 Pledgee: Financing Company limited by guarantee of small and micro enterprises in Guilin Pledgor: Guangxi Yingluweite Pharmaceutical Co.,Ltd. Registration number: Y2024980013432 |