CN114796248A - 白头翁皂苷组合物及其在制备治疗皮肤病的药物中的应用 - Google Patents
白头翁皂苷组合物及其在制备治疗皮肤病的药物中的应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN114796248A CN114796248A CN202210533063.8A CN202210533063A CN114796248A CN 114796248 A CN114796248 A CN 114796248A CN 202210533063 A CN202210533063 A CN 202210533063A CN 114796248 A CN114796248 A CN 114796248A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- group
- hsc
- saponin
- cream
- skin
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 239000003814 drug Substances 0.000 title claims abstract description 48
- 239000001397 quillaja saponaria molina bark Substances 0.000 title claims abstract description 30
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 title claims abstract description 30
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 title claims abstract description 29
- 208000017520 skin disease Diseases 0.000 title claims abstract description 18
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 16
- 239000009806 pulsatillae Substances 0.000 title claims description 12
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 8
- 206010012438 Dermatitis atopic Diseases 0.000 claims abstract description 63
- 201000008937 atopic dermatitis Diseases 0.000 claims abstract description 63
- 201000004681 Psoriasis Diseases 0.000 claims abstract description 27
- 241000123887 Pulsatilla chinensis Species 0.000 claims abstract description 18
- 229930184121 pulsatilla saponin Natural products 0.000 claims abstract description 9
- 239000006071 cream Substances 0.000 claims description 80
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 8
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 claims description 6
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 6
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 6
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 3
- 239000006187 pill Substances 0.000 claims description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N Methanesulfonic acid Chemical compound CS(O)(=O)=O AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 claims description 2
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 claims description 2
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 claims description 2
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 claims description 2
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 claims description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 claims description 2
- 239000006184 cosolvent Substances 0.000 claims description 2
- 239000003431 cross linking reagent Substances 0.000 claims description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 claims description 2
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 claims description 2
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 claims description 2
- 239000006196 drop Substances 0.000 claims description 2
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 claims description 2
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000000499 gel Substances 0.000 claims description 2
- 239000008187 granular material Substances 0.000 claims description 2
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 claims description 2
- VLTRZXGMWDSKGL-UHFFFAOYSA-M perchlorate Inorganic materials [O-]Cl(=O)(=O)=O VLTRZXGMWDSKGL-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 2
- VLTRZXGMWDSKGL-UHFFFAOYSA-N perchloric acid Chemical compound OCl(=O)(=O)=O VLTRZXGMWDSKGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 2
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 claims description 2
- 239000007921 spray Substances 0.000 claims description 2
- 239000000829 suppository Substances 0.000 claims description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 2
- 239000003826 tablet Substances 0.000 claims description 2
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 claims description 2
- 150000003467 sulfuric acid derivatives Chemical class 0.000 claims 1
- LOTKRQAVGJMPNV-UHFFFAOYSA-N 1-fluoro-2,4-dinitrobenzene Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC=C(F)C([N+]([O-])=O)=C1 LOTKRQAVGJMPNV-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 30
- SJHPCNCNNSSLPL-CSKARUKUSA-N (4e)-4-(ethoxymethylidene)-2-phenyl-1,3-oxazol-5-one Chemical compound O1C(=O)C(=C/OCC)\N=C1C1=CC=CC=C1 SJHPCNCNNSSLPL-CSKARUKUSA-N 0.000 abstract description 29
- JLUQTCXCAFSSLD-NXEZZACHSA-N Anemonin Chemical compound C1=CC(=O)O[C@]11[C@@]2(C=CC(=O)O2)CC1 JLUQTCXCAFSSLD-NXEZZACHSA-N 0.000 abstract description 9
- JLUQTCXCAFSSLD-UHFFFAOYSA-N Anemonin Natural products C1=CC(=O)OC11C2(C=CC(=O)O2)CC1 JLUQTCXCAFSSLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 9
- 229960002751 imiquimod Drugs 0.000 abstract description 7
- DOUYETYNHWVLEO-UHFFFAOYSA-N imiquimod Chemical compound C1=CC=CC2=C3N(CC(C)C)C=NC3=C(N)N=C21 DOUYETYNHWVLEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 7
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 abstract description 7
- 238000000034 method Methods 0.000 abstract description 5
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 abstract description 4
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 abstract description 3
- 210000003995 blood forming stem cell Anatomy 0.000 description 112
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 60
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 35
- 206010040882 skin lesion Diseases 0.000 description 23
- 231100000444 skin lesion Toxicity 0.000 description 23
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 22
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 22
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 20
- 229960003957 dexamethasone Drugs 0.000 description 15
- UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N dexamethasone Chemical compound C1CC2=CC(=O)C=C[C@]2(C)[C@]2(F)[C@@H]1[C@@H]1C[C@@H](C)[C@@](C(=O)CO)(O)[C@@]1(C)C[C@@H]2O UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N 0.000 description 15
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 15
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 14
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 13
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 13
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 13
- 201000004624 Dermatitis Diseases 0.000 description 12
- 102000004388 Interleukin-4 Human genes 0.000 description 12
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 description 12
- 102000003814 Interleukin-10 Human genes 0.000 description 11
- 108090000174 Interleukin-10 Proteins 0.000 description 11
- 102000013691 Interleukin-17 Human genes 0.000 description 11
- 108050003558 Interleukin-17 Proteins 0.000 description 11
- ADEBPBSSDYVVLD-UHFFFAOYSA-N donepezil Chemical compound O=C1C=2C=C(OC)C(OC)=CC=2CC1CC(CC1)CCN1CC1=CC=CC=C1 ADEBPBSSDYVVLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 10
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 10
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 206010015150 Erythema Diseases 0.000 description 8
- 102100037850 Interferon gamma Human genes 0.000 description 8
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 8
- 208000003251 Pruritus Diseases 0.000 description 8
- 102000004887 Transforming Growth Factor beta Human genes 0.000 description 8
- 108090001012 Transforming Growth Factor beta Proteins 0.000 description 8
- 231100000321 erythema Toxicity 0.000 description 8
- ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N tgfbeta Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCSC)C(C)C)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N 0.000 description 8
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 7
- 238000006748 scratching Methods 0.000 description 7
- 230000002393 scratching effect Effects 0.000 description 7
- 210000001541 thymus gland Anatomy 0.000 description 7
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 6
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 6
- 230000000770 proinflammatory effect Effects 0.000 description 6
- 230000037380 skin damage Effects 0.000 description 6
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 6
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 5
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 5
- 229960003530 donepezil Drugs 0.000 description 5
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 5
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 5
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 5
- 210000004969 inflammatory cell Anatomy 0.000 description 5
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 5
- 210000003289 regulatory T cell Anatomy 0.000 description 5
- 208000010201 Exanthema Diseases 0.000 description 4
- 206010040867 Skin hypertrophy Diseases 0.000 description 4
- 208000028990 Skin injury Diseases 0.000 description 4
- 210000000068 Th17 cell Anatomy 0.000 description 4
- OUHBKBTZUPLIIA-OTEDBJMHSA-N [(2s,3r,4s,5s,6r)-6-[[(2r,3r,4r,5s,6r)-3,4-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)-5-[(2s,3r,4r,5r,6s)-3,4,5-trihydroxy-6-methyloxan-2-yl]oxyoxan-2-yl]oxymethyl]-3,4,5-trihydroxyoxan-2-yl] (1r,3as,5ar,5br,7ar,8r,9s,11ar,11br,13ar,13br)-9-[(2s,3r,4s,5s)-4,5-dihydroxy- Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@@H](OC[C@@H]2[C@H]([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](OC(=O)[C@@]34[C@H]([C@@H](CC3)C(C)=C)[C@@H]3[C@@]([C@]5(C)CC[C@H]6[C@](C)(CO)[C@@H](O[C@H]7[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)CO7)O[C@H]7[C@@H]([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O7)O)CC[C@]6(C)[C@H]5CC3)(C)CC4)O2)O)[C@H](O)[C@H]1O OUHBKBTZUPLIIA-OTEDBJMHSA-N 0.000 description 4
- 230000008859 change Effects 0.000 description 4
- 210000004207 dermis Anatomy 0.000 description 4
- WBGKWQHBNHJJPZ-LECWWXJVSA-N desonide Chemical compound C1CC2=CC(=O)C=C[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1C[C@H]3OC(C)(C)O[C@@]3(C(=O)CO)[C@@]1(C)C[C@@H]2O WBGKWQHBNHJJPZ-LECWWXJVSA-N 0.000 description 4
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 4
- 201000005884 exanthem Diseases 0.000 description 4
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 4
- 230000007803 itching Effects 0.000 description 4
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 4
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 4
- 206010037844 rash Diseases 0.000 description 4
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 4
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 4
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 3
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010070834 Sensitisation Diseases 0.000 description 3
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 3
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 3
- 229960003662 desonide Drugs 0.000 description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 3
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 3
- 210000001508 eye Anatomy 0.000 description 3
- 230000006058 immune tolerance Effects 0.000 description 3
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 3
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 3
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 3
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 description 3
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 description 3
- 230000008313 sensitization Effects 0.000 description 3
- 230000008591 skin barrier function Effects 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 2
- 206010020649 Hyperkeratosis Diseases 0.000 description 2
- -1 IFN-. gamma. Proteins 0.000 description 2
- 229930040373 Paraformaldehyde Natural products 0.000 description 2
- 208000005775 Parakeratosis Diseases 0.000 description 2
- 206010040844 Skin exfoliation Diseases 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 210000000683 abdominal cavity Anatomy 0.000 description 2
- 238000009534 blood test Methods 0.000 description 2
- 210000005252 bulbus oculi Anatomy 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 210000005069 ears Anatomy 0.000 description 2
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 2
- 230000006870 function Effects 0.000 description 2
- 238000003304 gavage Methods 0.000 description 2
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 2
- 210000003714 granulocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 229920002866 paraformaldehyde Polymers 0.000 description 2
- 238000013309 psoriasis mouse model Methods 0.000 description 2
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 2
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 2
- LDVVTQMJQSCDMK-UHFFFAOYSA-N 1,3-dihydroxypropan-2-yl formate Chemical compound OCC(CO)OC=O LDVVTQMJQSCDMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010173 Alzheimer-disease mouse model Methods 0.000 description 1
- YHBNVRGUYZBJJF-UHFFFAOYSA-N Anemoside B4 Natural products CC1OC(OC2C(O)C(O)C(OCC3OC(OC(=O)C4CC(C5C4CCC6(C)C5CCC7C8(C)CCC(OC9OCC(O)C(O)C9OC%10OC(C)C(O)C(O)C%10O)C(C)(CO)C8CCC67C)C(=C)C)C(O)C(O)C3O)OC2CO)C(O)C(O)C1O YHBNVRGUYZBJJF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 1
- 238000011725 BALB/c mouse Methods 0.000 description 1
- 102000019034 Chemokines Human genes 0.000 description 1
- 108010012236 Chemokines Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 208000019028 Epidermal thickening Diseases 0.000 description 1
- 241000208341 Hedera Species 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- 206010024438 Lichenification Diseases 0.000 description 1
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 description 1
- 206010037083 Prurigo Diseases 0.000 description 1
- 241000442474 Pulsatilla vulgaris Species 0.000 description 1
- 241000218201 Ranunculaceae Species 0.000 description 1
- 206010039509 Scab Diseases 0.000 description 1
- 235000021355 Stearic acid Nutrition 0.000 description 1
- 208000007271 Substance Withdrawal Syndrome Diseases 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 230000033540 T cell apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 206010043189 Telangiectasia Diseases 0.000 description 1
- 210000000447 Th1 cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000004241 Th2 cell Anatomy 0.000 description 1
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 1
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 1
- GSEJCLTVZPLZKY-UHFFFAOYSA-N Triethanolamine Chemical compound OCCN(CCO)CCO GSEJCLTVZPLZKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010000496 acne Diseases 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- SHGAZHPCJJPHSC-YCNIQYBTSA-N all-trans-retinoic acid Chemical compound OC(=O)\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C SHGAZHPCJJPHSC-YCNIQYBTSA-N 0.000 description 1
- 239000013566 allergen Substances 0.000 description 1
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 230000003092 anti-cytokine Effects 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 238000009175 antibody therapy Methods 0.000 description 1
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 1
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 1
- 229940125715 antihistaminic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000000739 antihistaminic agent Substances 0.000 description 1
- 239000008430 aponin Substances 0.000 description 1
- 208000010668 atopic eczema Diseases 0.000 description 1
- 230000005549 barrier dysfunction Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 238000004159 blood analysis Methods 0.000 description 1
- 230000036765 blood level Effects 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 1
- 239000004359 castor oil Substances 0.000 description 1
- 235000019438 castor oil Nutrition 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 230000027288 circadian rhythm Effects 0.000 description 1
- 230000002301 combined effect Effects 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 239000003246 corticosteroid Substances 0.000 description 1
- 229960001334 corticosteroids Drugs 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000002951 depilatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000035618 desquamation Effects 0.000 description 1
- 229960002344 dexamethasone sodium phosphate Drugs 0.000 description 1
- PLCQGRYPOISRTQ-FCJDYXGNSA-L dexamethasone sodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].C1CC2=CC(=O)C=C[C@]2(C)[C@]2(F)[C@@H]1[C@@H]1C[C@@H](C)[C@@](C(=O)COP([O-])([O-])=O)(O)[C@@]1(C)C[C@@H]2O PLCQGRYPOISRTQ-FCJDYXGNSA-L 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 230000002500 effect on skin Effects 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 238000003912 environmental pollution Methods 0.000 description 1
- 210000002615 epidermis Anatomy 0.000 description 1
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N glycerol triricinoleate Natural products CCCCCC[C@@H](O)CC=CCCCCCCCC(=O)OC[C@@H](COC(=O)CCCCCCCC=CC[C@@H](O)CCCCCC)OC(=O)CCCCCCCC=CC[C@H](O)CCCCCC ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N 0.000 description 1
- 230000005484 gravity Effects 0.000 description 1
- 210000002443 helper t lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000007490 hematoxylin and eosin (H&E) staining Methods 0.000 description 1
- 210000003630 histaminocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 230000007124 immune defense Effects 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 230000007365 immunoregulation Effects 0.000 description 1
- 229940125721 immunosuppressive agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003018 immunosuppressive agent Substances 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 210000001503 joint Anatomy 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 230000003340 mental effect Effects 0.000 description 1
- 230000003020 moisturizing effect Effects 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Natural products CCCCCCCC(C)CCCCCCCCC(O)=O OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001543 one-way ANOVA Methods 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 150000002966 pentacyclic triterpenoids Chemical class 0.000 description 1
- 230000010412 perfusion Effects 0.000 description 1
- 230000002085 persistent effect Effects 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 238000001126 phototherapy Methods 0.000 description 1
- 239000000902 placebo Substances 0.000 description 1
- 229940068196 placebo Drugs 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- OUHBKBTZUPLIIA-UHFFFAOYSA-N pulchinenoside B Natural products OC1C(O)C(O)C(C)OC1OC1C(CO)OC(OCC2C(C(O)C(O)C(OC(=O)C34C(C(CC3)C(C)=C)C3C(C5(C)CCC6C(C)(CO)C(OC7C(C(O)C(O)CO7)OC7C(C(O)C(O)C(C)O7)O)CCC6(C)C5CC3)(C)CC4)O2)O)C(O)C1O OUHBKBTZUPLIIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000306 recurrent effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 230000001235 sensitizing effect Effects 0.000 description 1
- 231100000314 skin damage score Toxicity 0.000 description 1
- 239000008354 sodium chloride injection Substances 0.000 description 1
- 230000003393 splenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 239000008117 stearic acid Substances 0.000 description 1
- 238000013517 stratification Methods 0.000 description 1
- 210000000434 stratum corneum Anatomy 0.000 description 1
- 210000004003 subcutaneous fat Anatomy 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
- 201000004595 synovitis Diseases 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 208000009056 telangiectasis Diseases 0.000 description 1
- 229940126585 therapeutic drug Drugs 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 229960001727 tretinoin Drugs 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7028—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages
- A61K31/7034—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages attached to a carbocyclic compound, e.g. phloridzin
- A61K31/704—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages attached to a carbocyclic compound, e.g. phloridzin attached to a condensed carbocyclic ring system, e.g. sennosides, thiocolchicosides, escin, daunorubicin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/06—Antipsoriatics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
本发明公开了一种白头翁皂苷组合物，包括重量比为3‑9:1的白头翁皂苷B4和白头翁皂苷B5。本发明还公开了包含所述的白头翁皂苷组合物的药物及其应用。本发明分别利用噁唑酮和2,4‑二硝基氟苯(DNFB)方法制备两种特异性皮炎小鼠模型(Atopicdermatitis，AD)，用咪喹莫特制备小鼠银屑病模型，探讨白头翁皂苷B4、白头翁皂苷B5对皮肤病的保护作用及可能的机制，为治疗皮肤病提供理论依据。
Description
技术领域
本发明涉及药物技术领域。更具体地说，本发明涉及一种白头翁皂苷组合物及其在制备治疗皮肤病的药物中的应用。
背景技术
皮肤病是一种具有遗传倾向、反复发作、瘙痒性特点的炎症性皮肤疾病，其瘙痒剧烈的临床症状严重影响患者及家属的生活质量。目前认为，遗传、环境、免疫及皮肤屏障的破坏参与了多种皮肤病的发生机制。临床治疗从改善皮肤屏障和调节免疫为主要原则，但目前尚缺乏安全有效的药物，多采用保湿制剂或抗生素、激素类药物缓解症状。皮肤病主要有特异性皮炎、银屑病等皮肤炎症疾病。其中特异性皮炎(AD)发病机制非常复杂，目前并未完全清楚。银屑病是一种免疫介导的慢性炎症性皮肤病，影响着全球2％-3％的人口，其主要特征为红斑、鳞屑、皮肤增厚，易反复发作，严重影响患者生活质量。目前对轻度局部性银屑病患者可使用局部治疗，对中、重度患者，则使用光疗或全身药物(如：地奈德、维A酸等)，近年来，生物制剂发展迅速，对银屑病的治疗有巨大帮助，但是生物制剂价格昂贵，并且有可能会产生不必要的副作用。因此安全、有效、稳定、经济已成为治疗银屑病的核心问题。白头翁皂苷是从毛茛科多年生草本植物白头翁中提取具有药理活性的五环三萜类皂苷，其中白头翁皂苷B4(Anemoside B4，B4)和白头翁皂苷B5(Hederasaponin C，HSC)是其主要有效成分，但关于白头翁在皮肤病中是否发挥皮肤屏障保护的作用尚不明确。
发明内容
本发明提供一种白头翁皂苷组合物及其在制备治疗皮肤病的药物中的应用，分别利用噁唑酮和2,4-二硝基氟苯(DNFB)方法制备两种特异性皮炎小鼠模型(Atopicdermatitis，AD)，用咪喹莫特制备小鼠银屑病模型，探讨白头翁皂苷B4、白头翁皂苷B5对皮肤病的保护作用及可能的机制，为治疗皮肤病提供理论依据。
为了实现根据本发明的这些目的和其它优点，提供了一种白头翁皂苷组合物，包括重量比为3-9:1的白头翁皂苷B4和白头翁皂苷B5。
优选的是，所述药物含有所述白头翁皂苷组合物和药学上可接受的载体，白头翁皂苷B4、白头翁皂苷B5纯度不低于60％。
优选的是，所述药物含有治疗有效量的白头翁皂苷的盐酸盐、高氯酸盐、甲磺酸盐、磷酸盐、柠檬酸盐或硫酸盐和药学上可接受的载体。
优选的是，药学上可接受的载体包括稀释剂、增溶剂、潜溶剂、崩解剂、分散剂、润滑剂、矫味剂、抗氧剂、粘合剂、吸收剂、湿润剂、缓冲剂、交联剂。
优选的是，所述药物被制成药学上允许的剂型。
优选的是，所述剂型包括丸剂、片剂、粉剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、滴丸、滴剂、喷雾剂、注射剂、混悬液、凝胶剂、栓剂。
优选的是，所述剂型为乳膏剂。
所述的白头翁皂苷组合物在制备治疗皮肤病的药物中的应用。
优选的是，所述皮肤病为特异性皮炎或银屑病。
优选的是，白头翁皂苷组合物的给药剂量为不低于1mg/kg·d。
本发明至少包括以下有益效果：
本发明分别利用噁唑酮和2,4-二硝基氟苯(DNFB)方法制备两种特异性皮炎小鼠模型(Atopic dermatitis，AD)，用咪喹莫特制备小鼠银屑病模型，探讨白头翁皂苷B4、白头翁皂苷B5及白头翁皂苷B4、白头翁皂苷B5联合用药对皮肤病的保护作用及可能的机制，为治疗皮肤病提供理论依据，白头翁皂苷B4+HSC灌胃和乳膏给药对AD小鼠和银屑病小鼠具有显著的治疗作用，且白头翁皂苷B4+HSC联合用药效果优于单独使用。
本发明的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现，部分还将通过对本发明的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。
附图说明
图1为本发明的B4+HSC对AD小鼠皮损伤评分以及瘙痒次数的影响；
图2为本发明的B4+HSC对AD小鼠皮损伤组织病理学的影响；
图3为本发明的B4+HSC对AD小鼠血清及免疫器官的影响；
图4为本发明的B4+HSC对AD小鼠血清中IgE、IL-4、IL-10、IFN-γ、IL-17和TGF-β的影响；
图5为本发明的B4+HSC对银屑病模型小鼠皮损影响；
图6为本发明的B4+HSC对银屑病模型小鼠脾脏系数与免疫细胞的影响。
具体实施方式
下面结合附图对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。
应当理解，本文所使用的诸如“具有”、“包含”以及“包括”术语并不排除一个或多个其它元件或其组合的存在或添加。
需要说明的是，下述实施方案中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法，所述试剂和材料，如无特殊说明，均可从商业途径获得。
1试验材料
1.1试验动物
SPF级健康雄性BALB/C小鼠，体重19-21g，8-9周，购买于北京维通利华实验动物技术有限公司，所有实验动物均饲养于可控环境中，室温18-24℃、湿度40％-50％，实验期间动物自由进食、饮水，昼夜节律正常。
1.2主要药品和试剂
白头翁皂苷提取物，其中白头翁皂苷B4+白头翁皂苷B5(以下简称B4+HSC)的含量在60％以上，经测试重量比为4:1；地塞米松磷酸钠注射液(河南润弘制药股份有限公司，国药准字H41020330)；噁唑酮、橄榄油、丙酮(深圳市瑞沃德生命科技有限公司)；2,4-二硝基氟苯(DNFB，上海宝曼生物科技有效公司)；多聚甲醛(国药分析纯)；0.9％氯化钠注射液(四川科伦药业股份有限公司)；5％咪喹莫特乳膏(四川明欣药业有限责任公司，批号为40210904)；地奈德(重庆华邦制药有限公司，批号为210220017)；IgE、IL-4、IL-10、TGF-β、IFN-γ、IL-17ELISA试剂盒(酶免生物科技有限公司)。
1.3溶液配制
(1)噁唑酮液配制方法：将80％丙酮和20％橄榄油混合物作为溶剂，与2％噁唑酮按一定比例混合，分别配制成0.5％、0.2％致敏液；
(2)0.5％DNFB(丙酮：橄榄油＝3：1)；
(3)B4+HSC、B4、HSC乳膏配制：分别称取白头翁皂苷B4+HSC粉末、B4粉末或HSC粉末0.13g、硬脂酸2.4g、单硬甘油酯0.8g、蓖麻油、4.0g、甘油2.0g、三乙醇胺0.3mL、蒸馏水100mL，均匀混合得到B4+HSC乳膏；
(4)B4+HSC溶液配制：称取白头翁皂苷B4+HSC粉末，用蒸馏水溶解，混合均匀。
1.4主要仪器设备
Mindray血常规检测仪(深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司，型号：BC-5000vet)；1/1000精密天平(梅特勒-托利多仪器上海有限公司，型号：ME204E)；低温高速离心机(Eppendorf公司,型号：5425R)；病理图像分析仪(日本OLYMPUS，型号：BX-60)；高速低温组织研磨机(武汉赛维尔生物科技有限公司，型号：KZ-III-F)。
2动物造模及给药
2.1噁唑酮液诱导小鼠特异性皮炎
70只小鼠随机分为空白对照组(附图1-4中简述为空白组)、AD模型对照组(附图1-4中简述为噁唑酮组)、地塞米松阳性药组0.1mg/kg(附图1-4中简述为DEX组)、B4+HSC灌胃组20mg/kg(附图1-4中简述为B4+HSC灌胃组)、B4+HSC乳膏组20mg/kg(附图1-4中简述为B4+HSC乳膏组)、B4乳膏组20mg/kg(附图1-4中简述为B4乳膏组)、HSC乳膏组20mg/kg(附图1-4中简述为HSC乳膏组)，每组10只。
实验前1d剃毛刀除去背部毛发，确定皮损区域面积约为2.5cm×3cm。第1天，空白对照组小鼠背部剃毛部位均匀涂抹溶剂150μL致敏，各个AD造模组(AD模型对照组、地塞米松阳性药组、B4+HSC灌胃组、B4+HSC乳膏组、B4乳膏组、HSC乳膏组)小鼠均匀涂抹0.5％噁唑酮液150μL致敏，每组2次。第3天，空白对照组小鼠取溶剂50、20μL分别均匀涂抹于背部和右侧耳部，各个AD造模组小鼠取0.2％噁唑酮液50、20μL分别均匀涂抹于背部和右侧耳部。实验第7、11、14天分别刺激1次(空白对照组小鼠取溶剂50、20μL，各个AD造模组小鼠取0.2％噁唑酮液50、20μL均匀涂抹于背部和右侧耳部)以维持皮损持续存在。造模第1天，地塞米松阳性药组腹腔注射DEX(0.1mg/kg)、空白对照组和AD模型对照组小鼠灌胃20mg/kg生理盐水、B4+HSC灌胃组给药20mg/kg、B4+HSC乳膏组、B4乳膏组、HSC乳膏组分别涂抹20mg/kg在皮损处，各组连续给药14天。
2.2 2,4-二硝基氟苯(DNFB)诱导小鼠特异性皮炎
70只小鼠随机分为空白对照组(附图1-4中简述为空白组)、AD模型对照组(附图1-4中简述为DNFB组)、地塞米松阳性药组0.1mg/kg(附图1-4中简述为DEX组)、B4+HSC灌胃组20mg/kg(附图1-4中简述为B4+HSC灌胃组)、B4+HSC乳膏组20mg/kg(附图1-4中简述为B4+HSC乳膏组)、B4乳膏组20mg/kg(附图1-4中简述为B4乳膏组)、HSC乳膏组20mg/kg(附图1-4中简述为HSC乳膏组)，每组10只。
实验前1d剃毛刀除去背部毛发，确定皮损区域面积约为2.5cm×3cm。第1天，除空白对照组，各个AD造模组(AD模型对照组、地塞米松阳性药组、B4+HSC灌胃组、B4+HSC乳膏组、B4乳膏组、HSC乳膏组)均在脱毛区域涂抹100μL0.5％DNFB进行致敏，第3天加强致敏，实验第7、11、14天，在小鼠背部外涂0.5％DNFB溶液50μL诱发皮炎，空白对照组背部皮肤涂抹等体积的丙酮橄榄油基质。造模第1天，地塞米松阳性药组腹腔注射DEX(0.1mg/kg)、空白对照组和AD模型对照组小鼠灌胃20mg/kg生理盐水、B4+HSC灌胃组给药20mg/kg、B4+HSC乳膏组、B4乳膏组、HSC乳膏组分别涂抹20mg/kg在皮损处，各组连续给药14天。
2.3咪喹莫特诱导小鼠银屑病模型
60只小鼠随机分为空白对照组(附图5-6中简述为空白组)、模型对照组(附图5-6中简述为模型组)、地奈德阳性药组(附图5-6中简述为地奈德组)、B4+HSC乳膏组20mg/kg(附图5-6中简述为B4+HSC组)、B4乳膏组20mg/kg(附图5-6中简述为B4组)、HSC乳膏组20mg/kg(附图5-6中简述为HSC组)，每组10只。
实验前1d剃毛刀除去背部毛发，确定皮损区域面积约为2.5cm×3cm，用温和型脱毛膏脱去毳毛。第1天，除空白对照组，各个造模组(模型对照组、地奈德阳性药组、B4+HSC乳膏组、B4乳膏组、HSC乳膏组)在剃毛部位给予5％咪喹莫特乳膏(62.5mg/d)建立银屑病样皮损模型，出现皮肤增厚、红斑和鳞片状银屑即为造模成功。5％咪喹莫特造模每天1次，连续给药14天造模。第三天造模开始同时给药，地奈德阳性药组(62.5mg)和B4+HSC乳膏组(20mg/kg)、B4乳膏组(20mg/kg)、HSC乳膏组(20mg/kg)，每天涂抹一次，连续给药12天。
2.4检测指标
2.4.1特异性皮炎小鼠检测指标：
(1)皮损评分、搔抓次数测定
肉眼观察并记录小鼠背部及耳部皮损症状，采用皮损严重程度评分进行评价，包括红斑、渗出、脱屑、苔藓样变，0～3分分别表示无皮疹、轻度皮疹、中度皮疹、重度皮疹。实验结束后，记录每只小鼠10min内对自身耳部及背部的搔抓次数，连续搔抓计为1次。
(2)小鼠胸腺指数、脾脏指数测定和组织病理学观察
第15天处死小鼠，解剖取胸腺组织、脾脏组织，用滤纸吸去残血后，立即称重，计算脏器系数：脏器系数(g/g)＝脏器湿重/小鼠体质量。分离皮损处皮肤，去除皮下脂肪，取一部分用4％多聚甲醛固定，包埋，切片，伊红-苏木精(HE)染色，光镜下观察皮肤组织病理学改变。
(3)血常规检测
摘眼球取血，迅速吸取25μL全血与5μL抗凝剂EDTA-K2充分混匀，采用血常规检测仪检测血液中中性粒细胞(Neutrophil，NEU 109/L)和白细胞(White blood cell，WBC，109/L)水平。
(4)血清中IgE，IL-4，IL-10，TGF-β，IFN-γ、IL-17的测定
小鼠摘眼球取血，待析出上清时，放在离心机中(4℃，3000rpm/min)离心15min，取上清液。严格按照ELISA操作说明检测血清IgE、IL-4、IL-10、TGF-β、IFN-γ和IL-17水平。
2.4.2银屑病小鼠检测指标：
(1)银屑病皮损面积及严重程度指数(PASI)：每天观察并拍照记录小鼠的皮损变化，参照PASI评分标准对小鼠皮损处红斑、鳞屑、皮肤增厚程度进行评分。0：无症状；1：轻度；2：中度；3：重度4：极其严重，三项总和即为PASI总分。
(2)血液分析：于最后一天摘眼球取血，采用血常规检测仪检测血液中白细胞(White blood cell，WBC)、中性粒细胞(Neutrophilicgranulocyte，Neu)和淋巴细胞(Lymphocyte，Lym)水平。
(3)脾脏系数比较：小鼠采血结束后，脱颈椎处死，迅速分离脾脏，称重，即为脾脏湿重，记录，计算脾脏系数。脾脏系数(％)＝(脾脏湿重/体重)×100％。
(4)皮肤组织观察拍照
2.5统计学分析
采用GraphPad Prism 6.0软件进行统计学分析，通过单因素方差分析进行组间比较。P<0.05为显著性事件。
3实验结果
3.1B4+HSC联用对AD小鼠皮损伤评分以及瘙痒次数的影响
第15天，各组小鼠背部皮肤变化、各组小鼠皮损部位评分和各组小鼠10min内瘙痒次数如图1所示，与空白对照组相比，###P＜0.001；与AD模型对照组(噁唑酮组、DNFB组)相比，**P＜0.01。
第15天，拍照观察小鼠皮损处变化。与空白对照组比较，AD模型对照组(噁唑酮组、DNFB组)小鼠皮肤肉眼可见皮损明显增厚，伴有不同程度抓痕伴结痂鳞屑，说明造模成功。而地塞米松阳性药组、B4+HSC灌胃组、B4+HSC乳膏组、B4乳膏组、HSC乳膏组的小鼠皮损症状明显减轻(图1A)。剧烈瘙痒是AD病人显著的临床特征，而频繁搔抓导致的皮肤抓伤，导致痒疹、湿疹和苔藓化等继发性皮肤损害，同时搔抓后的皮肤破损更有利于过敏原进入人体，加重病情。第15天，观察小鼠皮损程度进行评分、记录小鼠10min内抓瘙次数。结果发现，AD模型对照组(噁唑酮组、DNFB组)小鼠背部皮肤损伤及炎症明显、小鼠抓瘙次数增加，而地塞米松阳性药组、B4+HSC灌胃组、B4+HSC乳膏组、B4乳膏组、HSC乳膏组降低了皮损及炎症程度和抓瘙次数，且B4+HSC联用组效果优于单独给药组(图1B、C)。以上结果说明，B4和HSC联用能够显著缓解AD小鼠皮损及瘙痒。
3.2B4+HSC对AD小鼠皮损伤组织病理学的影响
如图2A所示，噁唑酮液诱导小鼠背部皮损的病理学结果显示，AD模型对照组(噁唑酮组)与空白对照组比较，皮肤组织具有炎症细胞浸润、棘层肥厚、颗粒层变薄或消失、角质层过度角化或角化不全、真皮层毛细血管扩张，而地塞米松阳性药组、B4+HSC灌胃组、B4+HSC乳膏组、B4乳膏组、HSC乳膏组，能够明显改善噁唑酮液诱导诱导的小鼠皮肤损伤，且B4+HSC联用组效果最好。
如图2B所示，DNFB诱导小鼠背部皮损的病理学结果显示，在HE染色下(200×)，空白对照组皮肤各层结构完整，真皮与表皮交界，界限清楚，无明显炎症细胞浸润。与空白对照组相比，AD模型对照组(DNFB组)表皮角化不全及角化过度，棘层明显肥厚，真皮上部浅层存在大量的炎性细胞浸润。地塞米松阳性药组、B4+HSC灌胃组、B4+HSC乳膏组、B4乳膏组、HSC乳膏组皮肤组织中真皮层炎性细胞浸润明显减少，表皮增厚现象也明显减轻，且B4+HSC联用组效果最好。
3.3B4+HSC对AD小鼠血清及免疫器官的影响
小鼠血液中中性粒细胞(Neu)数量、白细胞(WBC)数量、脾脏指数、胸腺指数如图3所示，与空白对照组相比，###P<0.001；与AD模型对照组(噁唑酮组、DNFB组)相比，*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001。
与空白对照组比较，AD模型对照组(噁唑酮组、DNFB组)血常规结果显示，血浆中中性粒细胞(Neu)和白细胞数(WBC)较正常组明显升高(图3A、B)，符合过敏性疾病的血检现象。与AD模型对照组相比，地塞米松阳性药组、B4+HSC灌胃组、B4+HSC乳膏组、B4乳膏组、HSC乳膏组能够显著降低Neu和WBC水平(图3A、B)，且B4+HSC联用组效果最好。
与空白对照组比较，AD模型对照组(噁唑酮组、DNFB组)小鼠脾指数(脾脏指数＝脾质量/小鼠质量)和胸腺指数(胸腺指数＝胸腺质量/小鼠质量)升高(图3C、D)，与AD模型对照组比较，地塞米松阳性药组、B4+HSC灌胃组、B4+HSC乳膏组、B4乳膏组、HSC乳膏组能够显著降低小鼠脾指数和胸腺指数，且B4+HSC联用组效果最好(图3C、D)。说明B4+HSC给药后可能通过调节免疫发挥治疗小鼠特异性皮炎。
3.4B4+HSC对AD小鼠IgE、IL-4、IL-10、IFN-γ、IL-17和TGF-β的影响
血清中IgE的大量生成已被公认为是AD患者的标志物。ELISA检测血清中IgE、IL-4、IL-10、IFN-γ、IL-17和TGF-β水平如图4所示，与空白对照组相比，###P＜0.001；与AD模型对照组(噁唑酮组、DNFB组)相比，*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001。局部应用噁唑酮液和DNFB致敏小鼠后，AD模型对照组(噁唑酮组、DNFB组)小鼠的血清中IgE水平显著性升高，地塞米松阳性药组、B4+HSC灌胃组、B4+HSC乳膏组、B4乳膏组、HSC乳膏组显著降低小鼠血清中IgE水平，且B4+HSC效果最显著(图4A)。同时，AD模型对照组(噁唑酮组、DNFB组)血清中Th2型炎症因子IL-4以及Th1型炎症因子IFN-γ水平显著上升，表明IL-4和IFN-γ均参与了AD的发病过程。与AD模型对照组(噁唑酮组、DNFB组)相比，地塞米松阳性药组、B4+HSC灌胃组、B4+HSC乳膏组、B4乳膏组、HSC乳膏组小鼠血清中IL-4和IFN-γ水平明显下降，且B4+HSC效果最显著(图4B、C)。Th17细胞具有明显的促炎活性，主要分泌IL-17等促炎因子发挥作用。而Treg细胞能够抑制机体炎症反应，通过调节IL-10和TGF-β等维持人体的免疫耐受功能。与空白对照组比较，AD模型对照组(噁唑酮组、DNFB组)血清中IL-10水平降低，IL-17和TGF-β水平显著升高，而地塞米松阳性药组、B4+HSC灌胃组、B4+HSC乳膏组、B4乳膏组、HSC乳膏组升高了噁唑酮液或DNFB诱导血清中IL-10水平，降低了血清中IL-17和TGF-β水平，且B4+HSC效果最显著(图4D、E、F)。以上结果提示，B4+HSC灌胃或涂抹给药可通过调节免疫发挥治疗AD的作用。
3.5B4+HSC对银屑病模型小鼠皮损的影响
各组小鼠背部皮肤变化即皮损影响如图5所示，与模型对照组相比，*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001。
空白对照组小鼠皮肤光滑，无银屑病样病变，模型对照组小鼠皮肤增厚隆起，出现红斑，鳞屑成层的银屑病典型特征，地奈德阳性药组、B4+HSC乳膏组、B4乳膏组、HSC乳膏组小鼠的皮肤损伤明显改善，红斑消退，皮肤增厚情况改善，鳞屑脱落，且B4+HSC效果最显著(图5A)。
模型对照组小鼠重度皮损，PASI评分均值达到6分，而地奈德阳性药组、B4+HSC乳膏组、B4乳膏组、HSC乳膏组的皮损程度得到显著改善，且B4+HSC效果最显著(图5B)。
3.6B4+HSC对银屑病模型小鼠脾脏系数和免疫细胞的影响
脾脏是重要的免疫器官，脾脏系数一定程度上能够反映脾脏中免疫细胞的增加或减少。白头翁皂苷B4对BALB/c小鼠脾脏系数与免疫细胞WBC、Neu、Lym的影响如图6所示，与模型对照组相比，*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001。
与正常对照组相比，模型对照组小鼠脾脏明显肿大，脾脏指数增大(图6A)，并且血液中的白细胞WBC(图6B)、中性粒细胞Neu(图6C)、淋巴细胞Lym(图6D)增加；与模型对照组小鼠相比，地奈德阳性药组、B4+HSC乳膏组、B4乳膏组、HSC乳膏组小时脾脏肿大现象明显缓解，脾脏系数显著降低，且血液中的白细胞、中性粒细胞、淋巴细胞显著减少，B4+HSC联用组效果优于单独使用组。
4结论
AD是以湿疹样皮疹和剧烈瘙痒为特征的炎症性皮肤病，病因和发病机制不清，一般认为是在一定的遗传背景或环境因素作用下，造成机体皮肤屏障功能障碍或机体免疫反应失调。而且，随着经济和现代工业化的发展、环境污染的加重，AD发病率逐年增高。目前，针对AD的治疗药物主要包括抗组胺药物、皮质类固醇、免疫抑制剂、抗细胞因子的抗体治疗等，但长期使用副作用较多，撤药后易复发。中药的多靶点、调节免疫、低毒副作用等特点，在开发治疗特异性皮炎具有显著的优势。经过前期研究发现白头翁皂苷具有显著的抗炎、抗氧化及调节免疫的作用。因此，本发明探讨了白头翁皂苷B4+B5成分提取物抗AD的作用。实验结果发现，采用噁唑酮液或者DNFB诱导AD小鼠模型，小鼠背部皮肤出现明显的红斑、丘疹、结痂等现象，小鼠抓瘙次数增加，血清中IgE水平升高，血浆中中性粒细胞、白细胞增加，证明AD造模的成功。B4+HSC灌胃组、B4+HSC乳膏组、B4乳膏组、HSC乳膏组对于AD小鼠的红斑、水肿、结痂等皮损症状均有明显的改善作用，同时能够减少小鼠抓瘙次数。病理切片显示，B4+HSC灌胃组、B4+HSC乳膏组、B4乳膏组、HSC乳膏组给药后显著减少真皮层炎症细胞的浸润，且B4+HSC效果优于单独使用组。
CD4+T淋巴细胞在人体免疫防御中发挥关键作用，根据受转录因子调控的类型可分为辅助性T细胞Th1、Th2、Th17、调节性T细胞(Treg)。IFN-γ是Th1细胞因子的典型代表，在巨噬细胞活化中发挥重要作用，能够促进IgG生成，抑制白细胞介素IL-4介导的IgE生成。IL-4是Th2的特异性细胞因子，能够促进免疫球蛋白向IgG、IgE转换，还能够与其他炎症因子共同作用引发滑膜炎，进而造成特应性皮炎相关的关节损伤。Th17细胞具有明显的促炎症活性，主要分泌IL-17、IL-21、IL-23发挥作用，其中IL-17的促炎作用较强，可通过上调促炎因子、趋化因子表达，浸润并破坏组织。Treg细胞能够抑制机体炎症反应，通过TGF-β、IL-10维持人体的免疫耐受功能；与Th17细胞的促炎活性不同，Treg细胞能够明显抑制炎症反应，诱导T细胞凋亡，还能够抑制肥大细胞脱颗粒的发生，在维持人体免疫耐受中发挥重要作用。可见CD4+辅助性T细胞(Th1、Th2、Th17、Treg)能够通过分泌多种细胞因子维持动态免疫平衡状态，当发生自身免疫性疾病是，上述平衡逐渐被破坏。本实验结果发现，B4+HSC灌胃组、B4+HSC乳膏组、B4乳膏组、HSC乳膏组升高了噁唑酮液或DNFB诱导血清中IL-10水平，降低了血清中IgE、IL-4、IFN-γ、IL-17和TGF-β水平，B4+HSC联用组优于单独给药组。
银屑病作为一种慢性炎症皮肤疾病，病程长，反复发作，使患者身体状况和精神状况饱受折磨，目前，生物制剂是治疗银屑病最有效的药物，但其长期使用会产生不良反应，所以寻找一种安全有效的抗银屑病药物迫在眉睫，中医药具有靶点多，成分广，不良反应小，在防治银屑病方面具有一定优势。白头翁皂苷B4在免疫调节和抗炎方面有着良好的作用，而对于银屑病的治疗作用及可能的机制尚未阐明。本实验以5％咪喹莫特诱导的银屑病小鼠模型所产生的皮损状态、组织病理学变化与人类银屑病相似，是国内外公认的研究银屑病的动物模型，本研究发现，B4+HSC乳膏组、B4乳膏组、HSC乳膏组能够明显减轻小鼠的皮损症状和PASI评分，减轻皮肤组织的受损情况，降低了脾脏系数及血液中免疫细胞的数量，且B4+HSC联用组效果优于单独给药组。
综上所述，白头翁皂苷B4+HSC提取物灌胃和乳膏给药对AD小鼠和银屑病小鼠具有显著的治疗作用，且B4+HSC联用组效果优于单独使用组。
这里说明的设备数量和处理规模是用来简化本发明的说明的。对本发明的应用、修改和变化对本领域的技术人员来说是显而易见的。
尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用，它完全可以被适用于各种适合本发明的领域，对于熟悉本领域的人员而言，可容易地实现另外的修改，因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本发明并不限于特定的细节和这里示出与描述的图例。
Claims (10)
1.白头翁皂苷组合物，其特征在于，包括重量比为3-9:1的白头翁皂苷B4和白头翁皂苷B5。
2.包含权利要求1所述的白头翁皂苷组合物的药物，其特征在于，所述药物含有所述白头翁皂苷组合物和药学上可接受的载体，白头翁皂苷B4、白头翁皂苷B5纯度不低于60％。
3.如权利要求2所述的药物，其特征在于，所述药物含有治疗有效量的白头翁皂苷的盐酸盐、高氯酸盐、甲磺酸盐、磷酸盐、柠檬酸盐或硫酸盐和药学上可接受的载体。
4.如权利要求3所述的药物，其特征在于，药学上可接受的载体包括稀释剂、增溶剂、潜溶剂、崩解剂、分散剂、润滑剂、矫味剂、抗氧剂、粘合剂、吸收剂、湿润剂、缓冲剂、交联剂。
5.如权利要求4所述的药物，其特征在于，所述药物被制成药学上允许的剂型。
6.如权利要求5所述的药物，其特征在于，所述剂型包括丸剂、片剂、粉剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、滴丸、滴剂、喷雾剂、注射剂、混悬液、凝胶剂、栓剂。
7.如权利要求4所述的药物，其特征在于，所述剂型为乳膏剂。
8.如权利要求1所述的白头翁皂苷组合物在制备治疗皮肤病的药物中的应用。
9.如权利要求8所述的应用，其特征在于，所述皮肤病为特异性皮炎或银屑病。
10.如权利要求8所述的应用，其特征在于，白头翁皂苷组合物的给药剂量为不低于1mg/kg·d。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210533063.8A CN114796248B (zh) | 2022-05-16 | 2022-05-16 | 白头翁皂苷组合物及其在制备治疗皮肤病的药物中的应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210533063.8A CN114796248B (zh) | 2022-05-16 | 2022-05-16 | 白头翁皂苷组合物及其在制备治疗皮肤病的药物中的应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN114796248A true CN114796248A (zh) | 2022-07-29 |
| CN114796248B CN114796248B (zh) | 2024-04-12 |
Family
ID=82515360
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202210533063.8A Active CN114796248B (zh) | 2022-05-16 | 2022-05-16 | 白头翁皂苷组合物及其在制备治疗皮肤病的药物中的应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN114796248B (zh) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114159453A (zh) * | 2021-12-24 | 2022-03-11 | 广西馨海药业科技有限公司 | 白头翁皂苷b4在制备治疗或预防银屑病的药物的用途 |
| WO2023168948A1 (zh) * | 2022-03-09 | 2023-09-14 | 苏州大学 | 白头翁皂苷b4在制备外用治疗银屑病药物中的应用 |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20160019772A (ko) * | 2014-08-12 | 2016-02-22 | 주식회사 엘지생활건강 | 풀키네노시드 b4를 포함하는 피부 미백 또는 항염증용 화장료 또는 약학 조성물 |
| CN110200981A (zh) * | 2019-06-06 | 2019-09-06 | 中国药科大学 | 五环三萜皂苷的医药用途及其药物组合物 |
| CN111110728A (zh) * | 2020-02-14 | 2020-05-08 | 广西英路维特药物有限公司 | 一种白头翁提取物及其在制备预防和/或治疗奶牛乳房炎中的用途 |
| CN114159453A (zh) * | 2021-12-24 | 2022-03-11 | 广西馨海药业科技有限公司 | 白头翁皂苷b4在制备治疗或预防银屑病的药物的用途 |
-
2022
- 2022-05-16 CN CN202210533063.8A patent/CN114796248B/zh active Active
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20160019772A (ko) * | 2014-08-12 | 2016-02-22 | 주식회사 엘지생활건강 | 풀키네노시드 b4를 포함하는 피부 미백 또는 항염증용 화장료 또는 약학 조성물 |
| CN110200981A (zh) * | 2019-06-06 | 2019-09-06 | 中国药科大学 | 五环三萜皂苷的医药用途及其药物组合物 |
| CN111110728A (zh) * | 2020-02-14 | 2020-05-08 | 广西英路维特药物有限公司 | 一种白头翁提取物及其在制备预防和/或治疗奶牛乳房炎中的用途 |
| CN114159453A (zh) * | 2021-12-24 | 2022-03-11 | 广西馨海药业科技有限公司 | 白头翁皂苷b4在制备治疗或预防银屑病的药物的用途 |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114159453A (zh) * | 2021-12-24 | 2022-03-11 | 广西馨海药业科技有限公司 | 白头翁皂苷b4在制备治疗或预防银屑病的药物的用途 |
| WO2023168948A1 (zh) * | 2022-03-09 | 2023-09-14 | 苏州大学 | 白头翁皂苷b4在制备外用治疗银屑病药物中的应用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN114796248B (zh) | 2024-04-12 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN114796248A (zh) | 白头翁皂苷组合物及其在制备治疗皮肤病的药物中的应用 | |
| RU2533458C2 (ru) | Композиции, содежащие берберин или его аналоги для лечения кожных заболеваний, связанных с розацеа или с покраснением лица | |
| US11865129B2 (en) | Application of anemoside B4 in preparation of a drug for treatment or prevention of psoriasis | |
| Fan et al. | Effects and mechanism of action of Huang-Lian-Jie-Du-Tang in atopic dermatitis-like skin dysfunction in vivo and in vitro | |
| Jeon et al. | Effects of Ixeris dentata water extract and caffeic acid on allergic inflammation in vivo and in vitro | |
| He et al. | Pulvis Fellis Suis extract attenuates ovalbumin-induced airway inflammation in murine model of asthma | |
| US20100040714A1 (en) | Asthma/Allergy Therapy that Targets T-lymphoctyes and/or Eosinophils | |
| TWI619507B (zh) | 治療或預防過敏性疾病的有效成分 | |
| CN116173101A (zh) | 一种中药乳膏及其应用 | |
| CN102319272B (zh) | 银杏酚酸在制备治疗皮肤病的外用制剂中的用途 | |
| CN114010700A (zh) | 一种含有中药有效成分的无创真皮渗透技术透皮吸收剂的制备方法与应用 | |
| CN114558017A (zh) | Cx5461在制备治疗特异性皮炎或银屑病的药物中的应用 | |
| CN113908149A (zh) | 刺芒柄花素在制备防治急性肺损伤药物中的用途 | |
| TWI746701B (zh) | 用於治療異位性皮膚炎的方法和組成物 | |
| CN107998116B (zh) | 乙酰胺在抗银屑病药物中的应用 | |
| CN114712399B (zh) | 一种外泌体软膏组合物、一种外泌体软膏及其制备方法和应用 | |
| Al-juhaishi et al. | Effects of estradiol on imiquimod-induced model of psoriasis in mice | |
| CN116850236B (zh) | 一种治疗银屑病的外用中药组合物及其制剂与应用 | |
| CN109646436B (zh) | Ampk激动剂mk-8722在制备治疗过敏性疾病的药物中的应用 | |
| Yang et al. | Anti-inflammatory and anti-pruritic effects of Chi-Huang Solution in a murine model of allergic contact dermatitis | |
| Shabaka et al. | Zinc Deficiency and Oral Zinc Sulphate Treatment in Patients With Persistent Viral Wart | |
| WO2023092768A1 (zh) | Serpinb3/b4作为靶点在玫瑰痤疮等炎症性皮肤病治疗药物中的应用 | |
| Kim et al. | Bee Venom Within Liposomes Synergistically Inhibit Atopic Dermatitis in Mice | |
| KR101717477B1 (ko) | 사향쥐로부터 얻은 사향추출물(서사향)을 포함하는 인터페론-감마 억제제, 사향쥐로부터 얻은 사향추출물(서사향)을 포함하는 인터루킨-4 억제제, 사향쥐로부터 얻은 사향추출물(서사향)을 포함하는 핵인자 카파 비 억제제 및 사향쥐로부터 얻은 사향추출물(서사향)을 포함하고 인터페론-감마 억제효과, 인터루킨-4 억제효과, 핵인자 카파 비 억제효과를 갖는 면역 억제제 | |
| Goenharto et al. | The effect of Eucalyptol on SOD and IL-10 expression in mice exposed to Methyl methacrylate vapor |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |