TWI746701B

TWI746701B - 用於治療異位性皮膚炎的方法和組成物

Info

Publication number: TWI746701B
Application number: TW106139823A
Authority: TW
Inventors: 劉勝勇; 陳志銘
Original assignee: 國鼎生物科技股份有限公司
Priority date: 2016-11-18
Filing date: 2017-11-17
Publication date: 2021-11-21
Also published as: PL3541777T3; KR20190086506A; WO2018094122A8; JP7104989B2; TW201825083A; EP3541777A4; CN110088073A; US11364209B2; AU2017363153B2; ES2941463T3; KR102433721B1; DK3541777T3; EP3541777B1; AU2017363153A1; JP2019535697A; US20190282515A1; EP3541777A1; WO2018094122A1; CN110088073B; JP2022116021A

Abstract

本發明提供了利用環己烯酮化合物治療異位性皮膚炎的方法和組成物。

Description

用於治療異位性皮膚炎的方法和組成物

本發明關於利用環己烯酮化合物治療異位性皮膚炎的方法和組成物。

異位性皮膚炎（AD），也被稱為過敏性濕疹，是一種皮膚炎症（皮炎）。它會導致瘙癢、發紅、腫脹和皮膚龜裂。AD患者也許除了尿布區外，常常具有遍佈全身的乾燥且鱗狀的皮膚，並且在臂或腿彎曲處、面部和頸部形成強烈瘙癢、發紅、斑狀、凸起的病變。這種狀況通常始于兒童期，其嚴重程度隨著年齡而變化。在一歲以下的兒童中，身體的很多部分可能會受到影響。隨著年齡增長，膝蓋背側和肘前部是最常見的患病區域。在成人中，手和足是最常受到影響的區域。其病因未知，但據認為涉及遺傳學、免疫系統功能障礙、環境暴露以及皮膚通透性困難。

診斷通常基於病徵和症狀。診斷前必須排除的其他疾病包括接觸性皮炎、銀屑病和脂溢性皮炎。目前還沒有已知的治癒AD的方法，儘管治療方法可以降低紅腫的嚴重程度和頻率。治療包括避開使狀況惡化的因素，之後每天使用保濕霜進行沐浴，當發生紅腫時塗抹類固醇乳膏，以及使用有助於處理瘙癢的藥物。

在一個態樣中，本案提供了治療或減輕一個體中異位性皮膚炎的症狀的方法，其包括向所述個體施用治療有效量的具有以下結構的環己烯酮化合物，或其藥學上可接受的鹽、代謝物、溶劑化物或前藥：

其中X和Y中的每一個獨立地為氧、NR₅ 或硫； R為氫或C(=O)C₁ -C₈ 烷基； R₁ 、R₂ 和R₃ 中的每一個獨立地為氫、任選取代的甲基或(CH₂ )_m —CH₃ ； R₄ 為NR₅ R₆ 、OR₅ 、OC(=O)R₇ 、C(=O)OR₅ 、C(=O)R₅ 、C(=O)NR₅ R₆ 、鹵素、5或6元內酯、C₁ -C₈ 烷基、C₂ -C₈ 烯基、C₂ -C₈ 炔基、芳基、葡糖基，其中該5或6元內酯、C₁ -C₈ 烷基、C₂ -C₈ 烯基、C₂ -C₈ 炔基、芳基和葡糖基任選地被一個或多個取代基取代，該取代基選自NR₅ R₆ 、OR₅ 、OC(=O)R₇ 、C(=O)OR₅ 、C(=O)R₅ 、C(=O)NR₅ R₆ 、C₁ -C₈ 烷基、C₂ -C₈ 烯基、C₂ -C₈ 炔基、C₃ -C₈ 環烷基和C₁ -C₈ 鹵代烷基； R₅ 和R₆ 中的每一個獨立地為氫或C₁ -C₈ 烷基； R₇ 為C₁ -C₈ 烷基、OR₅ 或NR₅ R₆ ； m = 1-12；且 n=1-12。援引併入

本說明書中所提到的所有出版物、專利和專利申請均通過引用併入本文，其程度等同於特别地且單獨地指出每個單獨的出版物、專利或專利申請通過引用而併入。

異位性皮膚炎（AD）的特徵在於皮膚炎症，皮膚屏障功能受損，以及IgE刺激的對環境變應原的致敏。異位性皮膚炎（AD）的免疫反應可分為急性和慢性期。在急性期，臨床表現顯示出劇烈瘙癢、紅斑丘疹、擦傷及體液滲出。AD的發病機理是由外而內，然後回到外部的，並且主要是由於T輔助細胞1（Th1）TH1/TH2細胞失調的調節異常。

表皮中的樹突細胞主要是朗格漢斯細胞（LC），其為髓樣樹突細胞。

朗格漢斯細胞的表面具有IgE和受體FceRI。在急性期，它們可能暴露於呈遞給T淋巴細胞的環境刺激物，從而觸發TH2途徑，並且朗格漢斯細胞也可以誘導單核細胞進入表皮，轉移到炎性樹突狀表皮細胞（IDEC），使得IgE和受體FceRI產生變應性免疫反應，分泌炎性細胞激素IL-1、IL-6和TNF-a（Mudde GC等人，1992；Inagaki N等人，1997）。在慢性期，炎性樹突狀表皮細胞（IDEC）將TH2轉移到TH1和TH0途徑，引起細胞激素IFN-g、IL-12、IL-5和GM-CSF（粒細胞巨噬細胞集落刺激因數）的分泌。

如Leung DY等人所報導的，在AD患者外周血中迴圈的Th2細胞導致血清IgE和嗜酸性粒細胞升高。這些T細胞表達皮膚歸巢受體CLA，並通過未受影響的AD皮膚再迴圈，在該皮膚處它們可以參與促進Th2細胞發育的變應原觸發的IgE⁺ LC和肥大細胞（MC）。當皮膚受到擦傷、環境變應原或微生物毒素的損傷時，會啟動角質形成細胞以釋放促炎細胞激素和趨化因數，這些因數促進炎症細胞滲入皮膚內。胸腺基質淋巴細胞生成素（TSLP）和IL-10也增強Th2細胞分化。AD炎症引起急性皮膚損傷中Th2細胞的增加。然而，在慢性AD期，其導致炎性IDEC、嗜酸性粒細胞和巨噬細胞（Mj）的浸潤，這些細胞產生IL-12，導致切換到與IFN-g表達增加相關的Th1型細胞激素環境。（參見“New insights into atopic dermatitis,” Leung等人,J. Clin. Invest., 2004年3月1日; 113(5): 651-657）。

在一些具體例中，本案提供了通過將本文所述的環己烯酮化合物施用於個體（例如哺乳動物，如大鼠、狗、貓、人等）來治療或減輕個體中異位性皮膚炎的症狀的方法。

本發明發現，通過飼喂某些環己烯酮化合物（如化合物1，以低、中或高劑量），具有AD的小鼠的狀況顯著改善。所述改善包括，例如，皮膚炎症減輕、皮膚生理功能和保濕效果恢復、發炎皮膚的表皮和真皮層厚度減小以及嗜酸性白細胞和朗格漢斯細胞浸潤現象減少的表現。基於組織染色方法，通過向具有AD狀況的小鼠飼喂化合物1，引起AD炎症的TSLP和總IgE的量以劑量依賴性方式降低。基於刺激脾細胞和淋巴結細胞的實驗，示例性化合物還可以調節某些細胞激素，如提高IFN-g和IL-12的濃度，降低IL-4和TNF-a的濃度。因此，本文所述的環己烯酮化合物對正在治療AD的個體提供治療益處（參見實施例1-4）。

在一些具體例中，所述環己烯酮化合物是從天然產物的提取物獲得的或以合成或半合成方式製備的。在一些具體例中，本發明提供了示例性環己烯酮化合物（例如，化合物1 ）在治療或減輕異位性皮膚炎的症狀中的治療和預防潛力。

在一些具體例中，提供了治療或減輕個體中異位性皮膚炎的症狀的方法，其包括向所述個體施用治療有效量的具有以下結構的環己烯酮化合物，或其藥學上可接受的鹽、代謝物、溶劑化物或前藥：

其中X和Y中的每一個獨立地為氧、NR₅ 或硫； R為氫或C(=O)C₁ -C₈ 烷基； R₁ 、R₂ 和R₃ 中的每一個獨立地為氫、任選取代的甲基或(CH₂ )_m —CH₃ ； R₄ 為NR₅ R₆ 、OR₅ 、OC(=O)R₇ 、C(=O)OR₅ 、C(=O)R₅ 、C(=O)NR₅ R₆ 、鹵素、5或6元內酯、C₁ -C₈ 烷基、C₂ -C₈ 烯基、C₂ -C₈ 炔基、芳基、葡糖基，其中該5或6元內酯、C₁ -C₈ 烷基、C₂ -C₈ 烯基、C₂ -C₈ 炔基、芳基和葡糖基任選地被一個或多個取代基取代，該取代基選自NR₅ R₆ 、OR₅ 、OC(=O)R₇ 、C(=O)OR₅ 、C(=O)R₅ 、C(=O)NR₅ R₆ 、C₁ -C₈ 烷基、C₂ -C₈ 烯基、C₂ -C₈ 炔基、C₃ -C₈ 環烷基和C₁ -C₈ 鹵代烷基； R₅ 和R₆ 中的每一個獨立地為氫或C₁ -C₈ 烷基； R₇ 為C₁ -C₈ 烷基、OR₅ 或NR₅ R₆ ； m = 1-12；且 n=1-12。

在一些具體例中，提供了藥學組成物，其包含治療有效量的具有以下結構的環己烯酮化合物，或其藥學上可接受的鹽、代謝物、溶劑化物或前藥：

其中X和Y中的每一個獨立地為氧、NR₅ 或硫； R為氫或C(=O)C₁ -C₈ 烷基； R₁ 、R₂ 和R₃ 中的每一個獨立地為氫、任選取代的甲基或(CH₂ )_m —CH₃ ； R₄ 為NR₅ R₆ 、OR₅ 、OC(=O)R₇ 、C(=O)OR₅ 、C(=O)R₅ 、C(=O)NR₅ R₆ 、鹵素、5或6元內酯、C₁ -C₈ 烷基、C₂ -C₈ 烯基、C₂ -C₈ 炔基、芳基、葡糖基，其中該5或6元內酯、C₁ -C₈ 烷基、C₂ -C₈ 烯基、C₂ -C₈ 炔基、芳基和葡糖基任選地被一個或多個取代基取代，該取代基選自NR₅ R₆ 、OR₅ 、OC(=O)R₇ 、C(=O)OR₅ 、C(=O)R₅ 、C(=O)NR₅ R₆ 、C₁ -C₈ 烷基、C₂ -C₈ 烯基、C₂ -C₈ 炔基、C₃ -C₈ 環烷基和C₁ -C₈ 鹵代烷基； R₅ 和R₆ 中的每一個獨立地為氫或C₁ -C₈ 烷基； R₇ 為C₁ -C₈ 烷基、OR₅ 或NR₅ R₆ ； m = 1-12；且 n=1-12; 該藥學組成物用於治療或減輕個體中異位性皮膚炎的症狀。

在一些具體例中，提供了治療有效量的具有以下結構的環己烯酮化合物或其藥學上可接受的鹽、代謝物、溶劑化物或前藥在製備用於治療或減輕個體中異位性皮膚炎的症狀的藥物中的用途，其中X和Y中的每一個獨立地為氧、NR₅ 或硫； R為氫或C(=O)C₁ -C₈ 烷基； R₁ 、R₂ 和R₃ 中的每一個獨立地為氫、任選取代的甲基或(CH₂ )_m —CH₃ ； R₄ 為NR₅ R₆ 、OR₅ 、OC(=O)R₇ 、C(=O)OR₅ 、C(=O)R₅ 、C(=O)NR₅ R₆ 、鹵素、5或6元內酯、C₁ -C₈ 烷基、C₂ -C₈ 烯基、C₂ -C₈ 炔基、芳基、葡糖基，其中該5或6元內酯、C₁ -C₈ 烷基、C₂ -C₈ 烯基、C₂ -C₈ 炔基、芳基和葡糖基任選地被一個或多個取代基取代，該取代基選自NR₅ R₆ 、OR₅ 、OC(=O)R₇ 、C(=O)OR₅ 、C(=O)R₅ 、C(=O)NR₅ R₆ 、C₁ -C₈ 烷基、C₂ -C₈ 烯基、C₂ -C₈ 炔基、C₃ -C₈ 環烷基和C₁ -C₈ 鹵代烷基； R₅ 和R₆ 中的每一個獨立地為氫或C₁ -C₈ 烷基； R₇ 為C₁ -C₈ 烷基、OR₅ 或NR₅ R₆ ； m = 1-12；且 n=1-12。

在一些具體例中，所述減輕AD的症狀是皮膚炎症減輕、皮膚生理功能恢復、皮膚保濕效果恢復、發炎皮膚的表皮和真皮層厚度減小、嗜酸性白細胞和朗格漢斯細胞浸潤現象減少等表現。在一些具體例中，所述減輕AD的症狀是個體中的TSLP或總IgE濃度降低、個體中的IFN-γ或IL-12濃度升高或IL-4或TNF-a濃度降低。參見實施例2-3。

在一些具體例中，具有結構

的環己烯酮化合物由任何合適的起始材料以合成或半合成方式製備。在其他實施方案中，該環己烯酮化合物通過發酵等製備。例如，化合物1 和3-7 從有機溶劑提取物中分離。以下示出了非限制性的示例化合物。

在其他具體例中，具有結構

的環己烯酮化合物從牛樟芝（Antrodia camphorata ）的有機溶劑提取物中分離得到。在一些具體例中，該有機溶劑選自：醇類（例如，甲醇、乙醇、丙醇等）、酯類（例如，乙酸甲酯、乙酸乙酯等）、烷烴（例如，戊烷、己烷、庚烷等）、鹵代烷烴（例如，氯甲烷、氯乙烷、氯仿、二氯甲烷等），等等。例如，示例性化合物1-7 從有機溶劑提取物中分離得到。在某些實施方案中，該有機溶劑是醇。在某些實施方案中，該醇是乙醇。在一些具體例中，該環己烯酮化合物從牛樟芝的水性提取物中分離得到。在某些實施方案中，本文公開的環己烯酮化合物以合成或半合成方式製備。

在一些具體例中，X和Y中的每一個獨立地為氧或硫。本領域中已知，其中每個X和Y獨立地為硫的化合物可以與其中每個X和Y獨立地為氧的化合物類似地或通過相同的途徑來製備，因為氧和硫在結構上共有類似的化學性質。在一些具體例中，通過使用適當的保護基團，其中每個X和Y獨立地為NR₅ 的化合物可以通過與其中每個X和Y獨立地為氧或硫的化合物類似的途徑來製備。

在一些具體例中，R為氫、C(=O)C₃ H₈ 、C(=O)C₂ H₅ 或C(=O)CH₃ 。在一些具體例中，R₁ 為氫、甲基、乙基、丙基、丁基、戊基或己基。在某些實施方案中，R₁ 為氫或甲基。在一些具體例中，R₂ 為氫、甲基、乙基、丙基、丁基、戊基或己基。在某些實施方案中，R₂ 為氫或甲基。在一些具體例中，R₃ 為氫、甲基、乙基、丙基、丁基、戊基或己基。在一些具體例中，R₄ 為鹵素、NH₂ 、NHCH₃ 、N(CH₃ )₂ 、OCH₃ 、OC₂ H₅ 、C(=O)CH₃ 、C(=O)C₂ H₅ 、C(=O)OCH₃ 、C(=O)OC₂ H₅ 、C(=O)NHCH₃ 、C(=O)NHC₂ H₅ 、C(=O)NH₂ 、OC(=O)CH₃ 、OC(=O)C₂ H₅ 、OC(=O)OCH₃ 、OC(=O)OC₂ H₅ 、OC(=O)NHCH₃ 、OC(=O)NHC₂ H₅ 或OC(=O)NH₂ 。在一些具體例中，R₄ 為C₂ H₅ C(CH₃ )₂ OH、C₂ H₅ C(CH₃ )₂ OCH₃ 、CH₂ COOH、C₂ H₅ COOH、CH₂ OH、C₂ H₅ OH、CH₂ Ph、C₂ H₅ Ph、CH₂ CH=C(CH₃ )(CHO)、CH₂ CH=C(CH₃ )(C(=O)CH₃ )、5或6元內酯、C₂ -C₈ 烯基、C₂ -C₈ 炔基、芳基和葡糖基，其中5或6元內酯、C₂ -C₈ 烯基、C₂ -C₈ 炔基、芳基和葡糖基任選地被一個或多個取代基取代，該取代基選自NR₅ R₆ 、OR₅ 、OC(=O)R₇ 、C(=O)OR₅ 、C(=O)R₅ 、C(=O)NR₅ R₆ 、C₁ -C₈ 烷基、C₂ -C₈ 烯基、C₂ -C₈ 炔基、C₃ -C₈ 環烷基和C₁ -C₈ 鹵代烷基。在某些實施方案中，R₄ 為5或6元內酯、C₂ -C₈ 烯基、C₂ -C₈ 炔基、芳基和葡糖基，其任選地被一個或多個取代基取代，該取代基選自NR₅ R₆ 、OR₅ 、OC(=O)R₇ 、C(=O)OR₅ 、C(=O)R₅ 、C(=O)NR₅ R₆ 、C₁ -C₈ 烷基、C₂ -C₈ 烯基、C₂ -C₈ 炔基、C₃ -C₈ 環烷基和C₁ -C₈ 鹵代烷基。在某些實施方案中，R₄ 為CH₂ CH=C(CH₃ )₂ 。在某些實施方案中，該化合物為

。某些藥學和醫學術語

除非另有說明，否則本案（包括說明書和申請專利範圍）中使用的以下術語具有以下給出的定義。必須指出，除非上下文另外明確指出，否則如在本說明書和所附申請專利範圍中使用的，單數形式“一個”、“一種”和“該”包括複數的指示物件。除非另有說明，否則採用質譜法、NMR、HPLC、蛋白質化學、生物化學、重組DNA技術和藥理學的常規方法。在本申請中，除非另有說明，否則“或”或“和”的使用意指“和/或”。此外，術語“包括”以及其他形式如“包含”、“含有”和“包括”的使用並非限制性的。本文所用的章節標題僅僅是為了組織編排目的，而不應理解為限制所描述的主題。

“烷基”是指脂肪族烴基。烷基可以是飽和烷基（意味著其不含任何碳-碳雙鍵或碳-碳三鍵），或者烷基可以是不飽和烷基（意味著其含有至少一個碳-碳雙鍵或碳-碳三鍵）。烷基部分不管是飽和的還是不飽和的，都可以具有分支或為直鏈。

“烷基”可具有1-12個碳原子（數值範圍如“1-12”在本文中無論何時出現，均指所給定的範圍內的每個整數；例如，“1-12個碳原子”意指烷基可由1個碳原子、2個碳原子、3個碳原子等、直至且包括12個碳原子組成，但本定義也涵蓋了未指明數值範圍的術語“烷基”的存在）。本文所述化合物的烷基可以被指定為“C₁ -C₈ 烷基”或相似的指定。僅舉例來說，“C₁ -C₈ 烷基”表示在烷基鏈中有1、2、3、4、5、6、7或8個碳原子。在一個方面，所述烷基選自甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基和叔丁基。典型的烷基包括但絕不限於甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、新戊基、己基、烯丙基、丁-2-烯基、丁-3-烯基、環丙基甲基、環丁基甲基、環戊基甲基、環己基甲基等。在一個方面，烷基是C₁ -C₈ 烷基。

術語“亞烷基”是指二價的烷基基團。任何上述單價烷基都可以通過從烷基中抽離第二個氫原子而成為亞烷基。在一個方面，亞烷基是C₁ -C₁₂ 亞烷基（例如，-(CH₂ )_m -CH₃ ）。在另一方面，亞烷基是C₁ -C₈ 亞烷基。典型的亞烷基包括但不限於-CH₂ -、-CH(CH₃ )-、-C(CH₃ )₂ -、-CH₂ CH₂ -、-CH₂ CH(CH₃ )-、-CH₂ C(CH₃ )₂ -、-CH₂ CH₂ CH₂ -、-CH₂ CH₂ CH₂ CH₂ -等。

如本文使用的術語“烯基”是指含有2-10個碳且含有至少一個通過脫去兩個氫而形成的碳-碳雙鍵的直鏈、支鏈或環狀（在這種情況下，其也被稱為“環烯基”）烴。在一些具體例中，根據結構的不同，烯基是單價的或二價的（即亞烯基）。在一些具體例中，烯基任選地被取代。烯基的說明性實例包括但不限於乙烯基、2-丙烯基、2-甲基-2-丙烯基、3-丁烯基、4-戊烯基、5-己烯基、2-庚烯基、2-甲基-1-庚烯基和3-癸烯基（3-cecenyl）。

如本文所用的，術語“芳基”是指其中形成環的每個原子都是碳原子的芳香環。芳基環由五、六、七、八、九個或超過九個碳原子構成。芳基任選地被取代。在一個方面，芳基是苯基或萘基。在一個方面，芳基為苯基。在一個方面，芳基為C₆ -C₁₀ 芳基。根據結構，芳基可以是單價基團或雙價基團（即亞芳基）。在一個方面，亞芳基為C₆ -C₁₀ 亞芳基。示例性亞芳基包括但不限於苯基-1,2-亞基、苯基-1,3-亞基和苯基-1,4-亞基。

術語“芳香族”是指具有包含4n+2個π電子的離域π電子體系的平面環，其中n為整數。芳環可以由五、六、七、八、九、十個或超過十個原子構成。芳香環任選地被取代。術語“芳香族”包括碳環芳基（“芳基”，例如，苯基）和雜環芳基（或“雜芳基”或“雜芳香族”）基團（例如，吡啶）。該術語包括單環或稠環多環（即，共用相鄰碳原子對的環）基團。

術語“鹵代”或可替代的“鹵素”或“鹵”意指氟、氯、溴或碘。

術語“內酯”是指可被視為同一分子中的羥基-OH和羧酸基團-COOH的縮合產物的環酯。其特徵在於由兩個或更多個碳原子與一個氧原子組成的、在鄰近另一個氧的一個碳原子上具有酮基=O的閉環。

術語“雜環”或“雜環的”是指環中含有1-4個雜原子的芳香雜環（也被稱為雜芳基）和雜環烷基環（也被稱為雜脂環基團），其中環中的每個雜原子選自O、S和N，其中每個雜環基團在其環系中具有4-10個原子，並且條件是任何環都不含兩個相鄰的O或S原子。非芳香族雜環基團（也被稱為雜環烷基）包括在其環系中僅含有3個原子的基團，而芳香族雜環基團在其環系中必須含有至少5個原子。雜環基團包括苯並稠合的環系。3元雜環基團的一個實例是吖丙啶基。4元雜環基團的一個實例是氮雜環丁基。5元雜環基團的一個實例是噻唑基。6元雜環基團的一個實例是吡啶基，而10元雜環基團的一個實例是喹啉基。非芳香族雜環基團的實例有吡咯烷基、四氫呋喃基、二氫呋喃基、四氫噻吩基、噁唑烷酮基、四氫吡喃基、二氫吡喃基、四氫噻喃基、呱啶基、嗎啉基、硫代嗎啉基、噻噁烷基、呱嗪基、吖丙啶基、氮雜環丁基、氧雜環丁基（oxetanyl）、硫雜環丁基（thietanyl）、高呱啶基、氧雜環庚基（oxepanyl）、硫雜環庚基（thiepanyl）、氧氮雜䓬基、二氮雜䓬基、硫氮雜䓬基、1,2,3,6-四氫吡啶基、吡咯啉-2-基、吡咯啉-3-基、二氫吲哚基、2H-吡喃基、4H-吡喃基、二氧雜環己基（dioxanyl）、1,3-二氧雜環戊基、吡唑啉基、二噻烷基、二硫雜環戊基、二氫吡喃基、二氫噻吩基、二氫呋喃基、吡唑烷基、咪唑啉基、咪唑烷基、3-氮雜雙環[3.1.0]己烷基、3-氮雜雙環[4.1.0]庚烷基、3H-吲哚基和喹嗪基（quinolizinyl）。芳香族雜環基團的實例有吡啶基、咪唑基、嘧啶基、吡唑基、三唑基、吡嗪基、四唑基、呋喃基、噻吩基、異噁唑基、噻唑基、噁唑基、異噻唑基、吡咯基、喹啉基、異喹啉基、吲哚基、苯並咪唑基、苯並呋喃基、噌啉基、吲唑基、吲嗪基、酞嗪基、噠嗪基、三嗪基、異吲哚基、蝶啶基、嘌呤基、噁二唑基、噻二唑基、呋咱基、苯並呋咱基、苯並噻吩基、苯並噻唑基、苯並噁唑基、喹唑啉基、喹喔啉基、萘啶基和呋喃並吡啶基。只要可能的話，前述基團可以是C連接的或N-連接的。例如，由吡咯衍生的基團可以是吡咯-1-基（N-連接的）或吡咯-3-基（C-連接的）。此外，由咪唑衍生的基團可以是咪唑-1-基或咪唑-3-基（均為N-連接的）或咪唑-2-基、咪唑-4-基或咪唑-5-基（均為C-連接的）。雜環基團包括苯並稠合的環系。非芳香族雜環可以被一個或兩個氧代（=O）部分取代，例如吡咯烷-2-酮。

如本文使用的術語“炔基”是指含有2-10個碳且含有至少一個通過脫去四個氫而形成的碳-碳三鍵的直鏈、支鏈或環狀（在這種情況下，其也被稱為“環炔基”）烴。在一些具體例中，根據結構的不同，炔基是單價的或二價的（即亞炔基）。在一些具體例中，炔基任選地被取代。炔基的說明性實例包括但不限於乙炔基、丙炔基、丁炔基、戊炔基、己炔基、庚炔基等。

如本文使用的術語“烷氧基”是指通過氧原子與母體分子部分連接的本文所定義的烷基。烷氧基的說明性實例包括但不限於甲氧基、乙氧基、丙氧基、2-丙氧基、丁氧基、叔丁氧基、戊氧基和己氧基。

如本文使用的術語“環烷基”是指單環或多環基團，其僅含有碳和氫，並且包括飽和的、部分不飽和的或完全不飽和的基團。環烷基基團包括具有3至10個環原子的基團。環的代表性實例包括但不限於以下部分：

。在一些具體例中，根據結構，環烷基基團是單價或雙價的（即，亞環烷基基團）。

如本文使用的術語“鹵代烷基”、“鹵代烯基”、“鹵代炔基”和“鹵代烷氧基”包括其中的至少一個氫被替換成鹵素原子的烷基、烯基、炔基和烷氧基結構。在其中的兩個或更多個氫原子被替換成鹵素原子的某些實施方案中，鹵素原子全是彼此相同的。在其中的兩個或更多個氫原子被替換成鹵素原子的其他實施方案中，鹵素原子不全是彼此相同的。術語“氟代烷基”和“氟代烷氧基”分別包括其中鹵代為氟的鹵代烷基和鹵代烷氧基基團。在某些實施方案中，鹵代烷基是任選取代的。

如本文使用的術語“葡糖基”包括D-或L-形式的葡糖基，其中該葡糖基經由葡萄糖環上的任何羥基連接。

如本文使用的，關於製劑、組成物或成分的術語“可接受的”意指對所治療的個體的一般健康沒有持續的不利影響。

薄孔菌屬（Antrodia ）是薄孔菌科（Meripilaceae）真菌的一個屬。薄孔菌屬的種的子實體一般在生長的表面上平置或展開，其子實層暴露於外部；其邊緣可能會捲起，從而形成小括弧狀（narrow brackets）。大多數的種可見於溫帶和北方森林中，且導致褐腐病（brown rot）。

牛樟芝，也被稱為牛樟真菌Ganoderma camphoratum ，是臺灣特有的薄孔菌屬真菌的一個種，僅在本地樹種牛樟樹（Cinnamomum kanehirae ）上生長，引起心腐病。這種臺灣獨有的菇類已經被用作對抗不同疾病狀況的傳統藥物。

本領域中已知，從牛樟芝的不同部分中分離的活性成分因不同的培養基和方法而異。例如，本文公開的某些環己烯酮化合物可以從用來培育牛樟芝的獨特固態發酵過程中分離，該過程不同於其他已知的方法。

如本文使用的，術語“載體”是指促進化合物被引入細胞或組織中的相對無毒的化學化合物或試劑。

如本文使用的，術語“共同施用”或類似用語意在包括對一名患者施用多種選定的治療劑，並且旨在包括通過相同或不同的給藥途徑或者在相同或不同的時間施用多種藥劑的治療方案。

術語“稀釋劑”是指用於在遞送前稀釋目的化合物的化學化合物。稀釋劑也可用於穩定化合物，因為它們可提供更穩定的環境。本領域中利用溶解於緩衝的溶液（其也可以提供pH控制或維持）中的鹽作為稀釋劑，包括但不限於磷酸鹽緩衝鹽水溶液。

如本文使用的，術語“有效量”或“治療有效量”是指足以在一定程度上緩解所治療的疾病或狀況的一種或多種症狀的藥劑或化合物的給藥量。結果可以是疾病的指征、症狀或病因的減輕和/或緩解，或者是生物系統的任何其他期望的變化。例如，用於治療性應用的“有效量”是包含本文公開的化合物的組成物的量，該量是導致疾病症狀的臨床上顯著的減輕所需要的。在任何單獨情況下，適當的“有效”量可以使用諸如劑量遞增研究等技術來確定。

如本文使用的，術語“增強”意指所需效果的效力或持續時間的提高或延長。因此，關於增強治療劑的效果，術語“增強”是指在效力或持續時間上提高或延長其他治療劑對系統的效果的能力。如本文使用的，“增強有效量”是指足以增強另一種治療劑在所需系統中的效果的量。

本案所揭化合物的“代謝物”是在化合物代謝時形成的該化合物的衍生物。術語“活性代謝物”是指在化合物代謝時形成的該化合物的生物活性衍生物。如本文使用的，術語“代謝”是指特定物質被生物體改變的過程（包括但不限於水解反應和酶催化的反應）的總和。因此，酶可以對化合物產生特定的結構改變。例如，細胞色素P450催化多種氧化和還原反應，而尿苷二磷酸葡糖醛酸基轉移酶催化活化的葡糖醛酸分子向芳香醇、脂肪醇、羧酸、胺和游離巰基的轉移。任選地通過對宿主施用化合物並分析來自該宿主的組織樣品，或者通過使化合物與肝細胞一起在體外溫育並分析所得到的化合物，來鑒別本文公開的化合物的代謝物。

如本文使用的術語“藥物組合”意指通過混合或組合超過一種活性成分而得到的產物，並且包括活性成分的固定和非固定組合。術語“固定組合”意指將活性成分例如化合物（即本文所述的環己烯酮化合物）和聯合藥劑以單一實體或劑量的形式同時施用于患者。術語“非固定組合”意指將活性成分例如化合物（即本文所述的環己烯酮化合物）和聯合藥劑作為單獨的實體同時、並行地或順序地施用于患者，而沒有具體的間隔時間限制，其中這樣的施用在患者體內提供這兩種化合物的有效水準。後者也應用於雞尾酒療法，例如三種或更多種活性成分的施用。

術語“藥學組成物”是指化合物（即本文所述的環己烯酮化合物）與諸如載體、穩定劑、稀釋劑、分散劑、懸浮劑、增稠劑和/或賦形劑等其他化學組分的混合物。藥學組成物有利於將化合物施用於生物體。本領域中存在多種施用化合物的技術，包括但不限於：靜脈內、口服、氣霧劑、腸胃外、經眼、經肺和局部給藥。

術語“個體”或“患者”包括哺乳動物。哺乳動物的例子包括但不限於哺乳綱的任何成員：人，非人靈長類動物，例如黑猩猩以及其他猿和猴物種；農場動物，例如牛、馬、綿羊、山羊、豬；家畜，例如兔、狗和貓；實驗動物，包括齧齒動物，例如大鼠、小鼠和豚鼠等等。在一個具體例中，該哺乳動物是人。

如本文使用的，術語“治療”或“處理”包括預防性地和/或治療性地緩解、消除或改善疾病或狀況的至少一種症狀，預防另外的症狀，抑制疾病或狀況，例如阻止疾病或狀況的發展、緩解疾病或狀況、使疾病或狀況消退、緩解由疾病或狀況引起的病狀，或者終止疾病或狀況的症狀。給藥途徑

合適的給藥途徑包括但不限於口服、靜脈內、直腸、氣霧劑、腸胃外、經眼、經肺、經粘膜、透皮、經陰道、經耳、經鼻和局部給藥。另外，僅舉例來說，腸胃外遞送包括肌肉內、皮下、靜脈內、髓內注射以及鞘內、直接心室內、腹膜內、淋巴內和鼻內注射。

在某些具體例中，如本文所述的化合物通常在貯庫型製劑（depot preparation）或持續釋放製劑中，以局部而不是全身方式給藥，例如，通過將化合物直接注射到器官中來給藥。在特定具體例中，通過植入（例如皮下或肌肉內）或通過肌肉內注射來施用長效製劑。此外，在其他具體例中，在靶向藥物遞送系統中，例如，在用器官專一性抗體包被的脂質體中遞送藥物。在這樣的具體例中，脂質體靶向至器官並且被器官選擇性吸收。在另外的具體例中，如本文所述的化合物以快速釋放製劑形式、以延長釋放製劑形式或以立即釋放製劑形式提供。在另外的具體例中，局部施用本文所述的化合物。

在一些具體例中，所述環己烯酮化合物或其藥學上可接受的鹽、代謝物、溶劑化物或前藥經腸胃外或靜脈內給藥。在其他具體例中，所述環己烯酮化合物或其藥學上可接受的鹽、代謝物、溶劑化物或前藥通過注射給藥。在一些具體例中，所述環己烯酮化合物或其藥學上可接受的鹽、代謝物、溶劑化物或前藥經口服給藥。

在患者的狀況沒有改善的情況下，根據醫生的判斷，化合物的施用可以長期進行，即持續一段延長的時間，包括在患者的整個生命期內，以便改善或以其他方式控制或限制患者疾病或狀況的症狀。在患者的狀態確實改善的情況下，根據醫生的判斷，化合物的施用可以連續給予，或者暫時中止某段時間（即“休藥期”）。

前述範圍僅是建議性的，因為關於個體治療方案的變數數目很大，並且距離這些推薦值的相當大的偏離也並非不常見的。此類劑量可以根據許多變數而改變，這些變數不限於所使用的化合物的活性、所治療的疾病或狀況、給藥方式、受試個體的需求、所治療的疾病或狀況的嚴重程度，以及從業醫生的判斷。

此類治療方案的毒性和治療效果可以通過標準藥學程式在細胞培養物或實驗動物中確定，包括但不限於用於確定LD₅₀ （群體的50%致死劑量）和ED₅₀ （群體的50%治療有效劑量）。毒性與治療效果之間的劑量比是治療指數，並且它可以表示成LD₅₀ 與ED₅₀ 之間的比值。顯示出高治療指數的化合物是優選的。從細胞培養試驗和動物研究中獲得的資料可以用於制定在人體中使用的劑量範圍。此類化合物的劑量優選地處於包括ED₅₀ 且具有最小毒性的迴圈濃度的範圍內。劑量可以在該範圍內變化，這取決於所使用的劑型和所使用的給藥途徑。藥物製劑

在一些具體例中提供了藥學組成物，其包含治療有效量的具有以下結構的環己烯酮化合物，或其藥學上可接受的鹽、代謝物、溶劑化物或前藥：

其中X和Y中的每一個獨立地為氧、NR₅ 或硫； R為氫或C(=O)C₁ -C₈ 烷基； R₁ 、R₂ 和R₃ 中的每一個獨立地為氫、任選取代的甲基或(CH₂ )_m —CH₃ ； R₄ 為NR₅ R₆ 、OR₅ 、OC(=O)R₇ 、C(=O)OR₅ 、C(=O)R₅ 、C(=O)NR₅ R₆ 、鹵素、5或6元內酯、C₁ -C₈ 烷基、C₂ -C₈ 烯基、C₂ -C₈ 炔基、芳基、葡糖基，其中該5或6元內酯、C₁ -C₈ 烷基、C₂ -C₈ 烯基、C₂ -C₈ 炔基、芳基和葡糖基任選地被一個或多個取代基取代，該取代基選自NR₅ R₆ 、OR₅ 、OC(=O)R₇ 、C(=O)OR₅ 、C(=O)R₅ 、C(=O)NR₅ R₆ 、C₁ -C₈ 烷基、C₂ -C₈ 烯基、C₂ -C₈ 炔基、C₃ -C₈ 環烷基和C₁ -C₈ 鹵代烷基； R₅ 和R₆ 中的每一個獨立地為氫或C₁ -C₈ 烷基； R₇ 為C₁ -C₈ 烷基、OR₅ 或NR₅ R₆ ； m = 1-12；且n=1-12；以及藥學上可接受的賦形劑。

在一些具體例中，所述藥學組成物的環己烯酮化合物具有以下結構：

其中X和Y中的每一個獨立地為氧、NR₅ 或硫； R為氫或C(=O)C₁ -C₈ 烷基； R₁ 、R₂ 和R₃ 中的每一個獨立地為氫、任選取代的甲基或(CH₂ )_m —CH₃ ； R₄ 為NR₅ R₆ 、OR₅ 、OC(=O)R₇ 、C(=O)OR₅ 、C(=O)R₅ 、C(=O)NR₅ R₆ 、鹵素、5或6元內酯、C₁ -C₈ 烷基、C₂ -C₈ 烯基、C₂ -C₈ 炔基、芳基、葡糖基，其中該5或6元內酯、C₁ -C₈ 烷基、C₂ -C₈ 烯基、C₂ -C₈ 炔基、芳基和葡糖基任選地被一個或多個取代基取代，該取代基選自NR₅ R₆ 、OR₅ 、OC(=O)R₇ 、C(=O)OR₅ 、C(=O)R₅ 、C(=O)NR₅ R₆ 、C₁ -C₈ 烷基、C₂ -C₈ 烯基、C₂ -C₈ 炔基、C₃ -C₈ 環烷基和C₁ -C₈ 鹵代烷基； R₅ 和R₆ 中的每一個獨立地為氫或C₁ -C₈ 烷基； R₇ 為C₁ -C₈ 烷基、OR₅ 或NR₅ R₆ ； m = 1-12；且n=1-12；或其藥學上可接受的鹽、代謝物、溶劑化物或前藥。

在一些具體例中，R為氫、C(=O)C₃ H₈ 、C(=O)C₂ H₅ 或C(=O)CH₃ 。在一些具體例中，R₁ 、R₂ 和R₃ 中的每一個獨立地為氫、甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、庚基或辛基。在某些實施方案中，R₁ 為氫或甲基。在某些實施方案中，R₂ 為氫、甲基、乙基、丙基、丁基、戊基或己基。在某些實施方案中，R₃ 為氫、甲基、乙基、丙基、丁基、戊基或己基。在一些具體例中，R₄ 為鹵素、NH₂ 、NHCH₃ 、N(CH₃ )₂ 、OCH₃ 、OC₂ H₅ 、C(=O)CH₃ 、C(=O)C₂ H₅ 、C(=O)OCH₃ 、C(=O)OC₂ H₅ 、C(=O)NHCH₃ 、C(=O)NHC₂ H₅ 、C(=O)NH₂ 、OC(=O)CH₃ 、OC(=O)C₂ H₅ 、OC(=O)OCH₃ 、OC(=O)OC₂ H₅ 、OC(=O)NHCH₃ 、OC(=O)NHC₂ H₅ 或OC(=O)NH₂ 。在某些實施方案中，R₄ 為C₂ H₅ C(CH₃ )₂ OH、C₂ H₅ C(CH₃ )₂ OCH₃ 、CH₂ COOH、C₂ H₅ COOH、CH₂ OH、C₂ H₅ OH、CH₂ Ph、C₂ H₅ Ph、CH₂ CH=C(CH₃ )(CHO)、CH₂ CH=C(CH₃ )(C(=O)CH₃ )、5或6元內酯、芳基或葡糖基，其中該5或6元內酯、芳基和葡糖基任選地被一個或多個取代基取代，該取代基選自NR₅ R₆ 、OR₅ 、OC(=O)R₇ 、C(=O)OR₅ 、C(=O)R₅ 、C(=O)NR₅ R₆ 、C₁ -C₈ 烷基、C₂ -C₈ 烯基、C₂ -C₈ 炔基、C₃ -C₈ 環烷基和C₁ -C₈ 鹵代烷基。在某些實施方案中，R₄ 為CH₂ COOH、C₂ H₅ COOH、CH₂ OH、C₂ H₅ OH、CH₂ Ph、C₂ H₅ Ph、CH₂ CH=C(CH₃ )(CHO)、CH₂ CH=C(CH₃ )(C(=O)CH₃ )、5或6元內酯、芳基或葡糖基，其中5或6元內酯、芳基和葡糖基任選地被一個或多個取代基取代，該取代基選自NR₅ R₆ 、OR₅ 、OC(=O)R₇ 、C(=O)OR₅ 、C(=O)R₅ 、C(=O)NR₅ R₆ 、C₁ -C₈ 烷基、C₂ -C₈ 烯基、C₂ -C₈ 炔基、C₃ -C₈ 環烷基和C₁ -C₈ 鹵代烷基。在某些實施方案中，R₄ 為5或6元內酯、芳基或葡糖基，其任選地被一個或多個取代基取代，該取代基選自NR₅ R₆ 、OR₅ 、OC(=O)R₇ 、C(=O)OR₅ 、C(=O)R₅ 、C(=O)NR₅ R₆ 、C₁ -C₈ 烷基、C₂ -C₈ 烯基、C₂ -C₈ 炔基、C₃ -C₈ 環烷基和C₁ -C₈ 鹵代烷基。

在某些具體例中，所述化合物選自

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在某些具體例中，所述化合物選自

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在一些具體例中，將本文所述的化合物配製成藥學組成物。在特定實施方案中，使用一種或多種生理學上可接受的載體以常規方式配製藥學組成物，該生理學上可接受的載體包括賦形劑和輔劑，其有助於將活性化合物加工為可以藥用的製劑。合適的製劑取決於選定的給藥途徑。任何藥學上可接受的技術、載體和賦形劑均可適當地用於配製本文所述的藥學組成物：Remington: The Science and Practice of Pharmacy , 第十九版(Easton, Pa.: Mack Publishing Company, 1995)；Hoover, John E.,Remington’s Pharmaceutical Sciences , Mack Publishing Co., Easton, Pennsylvania 1975；Liberman, H.A.和Lachman, L.編,Pharmaceutical Dosage Forms , Marcel Decker, New York, N.Y., 1980；以及Pharmaceutical Dosage Fo rmsand Drug Delivery Systems, 第七版(Lippincott Williams & Wilkins 1999)。

本文提供了包含化合物（即本文所述的環己烯酮化合物）和藥學上可接受的稀釋劑、賦形劑或載體的藥學組成物。在某些實施方案中，如同在聯合治療中一樣，所述化合物以藥學組成物形式給藥，在該藥學組成物中化合物（即本文所述的環己烯酮化合物）與其他活性成分相混合。本文包括在以下聯合治療章節中和整個公開內容中所闡述的活性成分的所有組合。在特定實施方案中，該藥學組成物包含一種或多種化合物（即本文所述的環己烯酮化合物）。

本文使用的，藥學組成物是指化合物（即本文所述的環己烯酮化合物）與其他化學組分如載體、穩定劑、稀釋劑、分散劑、懸浮劑、增稠劑和/或賦形劑的混合物。在某些實施方案中，藥學組成物有助於將化合物施用於生物體。在一些具體例中，為實施本文提供的治療或使用方法，將治療有效量的化合物（即本文所述的環己烯酮化合物）以藥學組成物的形式施用於患有待治療的疾病或狀況的哺乳動物。在特定實施方案中，該哺乳動物是人。在某些實施方案中，治療有效量根據疾病的嚴重程度、個體的年齡及相對健康狀況、所使用的化合物的效力以及其他因素而變化。此外，本文所述的化合物單獨使用，或與一種或多種作為混合物組分的治療劑聯合使用。

在一個實施方案中，化合物（即本文所述的環己烯酮化合物）被配製成水溶液。在特定實施方案中，僅舉例來說，水溶液選自生理學上相容的緩衝液，如漢克氏溶液、林格氏溶液或生理鹽水緩衝液。在其他實施方案中，化合物（即本文所述的環己烯酮化合物）被配製為用於經粘膜給藥。在特定實施方案中，經粘膜製劑包括適合於待滲透的屏障的滲透劑。在配製本文所述的化合物以供其他腸胃外注射的其他實施方案中，合適的製劑包括水溶液或非水溶液。在特定實施方案中，這類溶液包括生理學上相容的緩衝液和/或賦形劑。

在另一些具體例中，本文所述的化合物被配製為用於口服給藥。包括化合物（即本文所述的環己烯酮化合物）在內的本文所述的化合物通過將活性化合物與例如藥學上可接受的載體或賦形劑混合而配製。在各種具體例中，本文所述的化合物被配製成口服劑型，僅舉例來說，其包括片劑、粉末、丸劑、糖錠劑、膠囊、液體、凝膠、糖漿、酏劑、漿劑、懸浮液等。

在某些具體例中，供口服使用的藥物製劑通過以下步驟獲得：將一種或多種固體賦形劑與一種或多種本文所述的化合物混合，任選地研磨獲得的混合物，並且在加入合適的輔料（如果需要）後，加工顆粒的混合物，從而獲得片劑或糖錠劑芯。特別地，合適的賦形劑是：填充劑，如糖類，包括乳糖、蔗糖、甘露醇或山梨糖醇；纖維素製劑，例如玉米澱粉、小麥澱粉、米澱粉、馬鈴薯澱粉、明膠、黃蓍膠、甲基纖維素、微晶纖維素、羥丙甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉；或其他物質，如聚乙烯吡咯烷酮（PVP或聚維酮）或磷酸鈣。在特定具體例中，任選地添加崩解劑。僅舉例來說，崩解劑包括交聯羧甲纖維素鈉、聚乙烯吡咯烷酮、瓊脂或藻酸或其鹽如藻酸鈉。

在一些具體例中，諸如糖錠劑芯和片劑等劑型具有一層或多層合適的包衣。在特定具體例中，使用濃縮糖溶液來包覆該劑型。糖溶液任選地含有額外的成分，僅舉例來說，例如阿拉伯膠、滑石、聚乙烯吡咯烷酮、卡波姆凝膠（carbopol gel）、聚乙二醇和/或二氧化鈦、漆溶液以及合適的有機溶劑或溶劑混合物。染料和/或色素也任選地添加至包衣中以供辨識目的。另外，任選地使用染料和/或色素來標示活性化合物劑量的不同組合。

在某些具體例中，治療有效量的至少一種本文所述的化合物被配製成其他口服劑型。口服劑型包括由明膠製成的推入配合式膠囊以及由明膠和塑化劑（如甘油或山梨糖醇）製成的密封軟膠囊。在特定具體例中，推入配合式膠囊含有與一種或多種填充劑混合的活性成分。僅舉例來說，填充劑包括乳糖，諸如澱粉的粘合劑，和/或諸如滑石或硬脂酸鎂的潤滑劑，以及任選的穩定劑。在其他具體例中，軟膠囊含有一種或多種溶解或懸浮在合適的液體中的活性化合物。僅舉例來說，合適的液體包括一種或多種脂肪油、液體石臘或液態聚乙二醇。此外，任選地添加穩定劑。

在其他具體例中，治療有效量的至少一種本文所述的化合物被配製為用於頰部或舌下給藥。僅舉例來說，適合頰部或舌下給藥的製劑包括片劑、錠劑或凝膠。在另外其他的具體例中，本文所述的化合物被配製為用於腸胃外注射，包括適合濃注（bolus injection）或連續輸注的製劑。在特定的具體例中，注射用製劑在單位劑型（例如，在安瓶中）或多劑量容器中提供。任選地向注射製劑中添加防腐劑。在另外其他的具體例中，化合物（即本文所述的環己烯酮化合物）的藥學組成物以適合於腸胃外注射的形式被配製為在油性或水性載體中的無菌懸浮液、溶液或乳液。腸胃外注射製劑任選地含有配製用劑，如懸浮劑、穩定劑和/或分散劑。在特定具體例中，用於腸胃外給藥的藥物製劑包括水溶性形式的活性化合物的水溶液。在另外的具體例中，將活性化合物的懸浮液製備成合適的油性注射懸浮液。僅舉例來說，用於本文所述的藥學組成物中的合適的親脂性溶劑或載體包括諸如芝麻油的脂肪油，或諸如油酸乙酯或甘油三酯的合成脂肪酸酯，或脂質體。在某些特定具體例中，水性注射懸浮液含有可增加懸浮液粘度的物質，如羧甲基纖維素鈉、山梨糖醇或葡聚糖。任選地，該懸浮液含有合適的穩定劑或增加化合物的溶解度以便允許製備高度濃縮的溶液的試劑。或者，在其他具體例中，活性成分為粉末形式，以供在使用前用合適的載體（例如無菌無熱原水）重建。

在一些方面，將化合物（即本文所述的環己烯酮化合物）製備為如本文所述的或本領域已知的用於腸胃外注射的溶液，並且使用自動注射器來施用。自動注射器是已知的，例如在美國專利第4,031,893號、第5,358,489號、第5,540,664號、第5,665,071號、第5,695,472號和WO/2005/087297（其各自通過引用這些公開內容而併入本文）中所公開的自動注射器。通常，所有自動注射器都含有一定體積的包含化合物（即本文所述的環己烯酮化合物）的待注射溶液。通常，自動注射器包括：用於容納溶液的儲器，該儲器與針頭流體連通以供遞送藥物；以及用於自動部署針頭、將針頭插入患者並將劑量遞送至患者體內的機構。示例性的注射器提供約0.3 mL、0.6 mL、1.0 mL或其他適當體積的溶液，其濃度約為每1 mL溶液0.5 mg至50 mg的化合物（即本文所述的環己烯酮化合物）。每個注射器能夠僅遞送一個劑量的化合物。

在另外其他的具體例中，局部施用所述化合物（即本文所述的環己烯酮化合物）。本文所述的化合物被配製成多種可局部給藥的組成物，如溶液、懸浮液、洗液、凝膠、糊劑、藥棒、香膏、乳膏或軟膏。此類藥學組成物任選地含有增溶劑、穩定劑、張力增強劑、緩衝液和防腐劑。

在另外其他的具體例中，所述化合物（即本文所述的環己烯酮化合物）被配製為用於透皮給藥。在特定具體例中，透皮製劑採用透皮遞送裝置和透皮遞送貼劑，並且可以是溶解和/或分散於聚合物或粘合劑中的親脂性乳液或水性緩衝溶液。在各種具體例中，構建這樣的貼劑，以供藥物製劑的連續、脈衝式或按需遞送。在另外的具體例中，化合物（即本文所述的環己烯酮化合物）的透皮遞送通過離子電滲貼劑及類似方式來完成。在某些具體例中，透皮貼劑提供化合物（即本文所述的環己烯酮化合物）的受控遞送。在特定具體例中，通過使用速率控制膜或通過將化合物捕獲在聚合物基質或凝膠中來減緩吸收速率。在備選的具體例中，使用吸收促進劑來增強吸收。吸收促進劑或載體包括幫助穿過皮膚的可吸收的藥學上可接受的溶劑。例如，在一個具體例中，透皮裝置為繃帶的形式，其包含：背襯部件，含有化合物以及任選的載體的儲器，任選的用於在延長的一段時間內以受控和預定的速率將化合物遞送至宿主皮膚的速率控制屏障，以及將該裝置固定於皮膚上的工具。

本文所述的透皮製劑可使用多種本領域已經描述的裝置進行給藥。例如，此類裝置包括但不限於美國專利第3,598,122號、第3,598,123號、第3,710,795號、第3,731,683號、第3,742,951號、第3,814,097號、第3,921,636號、第3,972,995號、第3,993,072號、第3,993,073號、第3,996,934號、第4,031,894號、第4,060,084號、第4,069,307號、第4,077,407號、第4,201,211號、第4,230,105號、第4,292,299號、第4,292,303號、第5,336,168號、第5,665,378號、第5,837,280號、第5,869,090號、第6,923,983號、第6,929,801號和第6,946,144號中描述的裝置。

本文所述的透皮劑型可摻有某些本領域中常規的、藥學上可接受的賦形劑。在一些具體例中，本文所述的透皮製劑包含至少三種成分：(1)化合物（即本文所述的環己烯酮化合物)的製劑；(2)滲透促進劑；和(3)水性佐劑。此外，透皮製劑還可包含其他成分，例如但不限於膠凝劑、乳膏和軟膏基質等。在一些具體例中，透皮製劑進一步包含織造或非織造的背襯材料，用以增強吸收並防止透皮製劑從皮膚上脫落。在其他具體例中，本文所述的透皮製劑維持飽和或過飽和狀態，以便促進向皮膚內的擴散。

在其他具體例中，所述化合物（即本文所述的環己烯酮化合物）被配製為用於通過吸入給藥。各種適合通過吸入給藥的形式包括但不限於氣霧劑、薄霧劑（mist）或粉末。化合物（即本文所述的環己烯酮化合物）的藥學組成物方便地利用合適的推進劑（例如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、二氧化碳或其他合適的氣體）從加壓包或霧化器以氣霧噴霧形式遞送。在特定具體例中，加壓的氣霧劑的劑量單位通過設置用來遞送計量的量的閥來確定。在特定具體例中，僅舉例來說，配製在吸入器或吹藥器中使用的例如明膠的膠囊和藥筒，其含有所述化合物和合適的粉末基質如乳糖或澱粉的粉末混合物。

鼻內製劑是本領域已知的，並且在例如美國專利第4,476,116號、第5,116,817號和第6,391,452號（各自特別地通過引用併入本文）中描述。使用苯甲醇或本領域已知的其他合適的防腐劑、氟碳化合物和/或其他增溶劑或分散劑，將根據這些和其他本領域公知技術製備的、包含化合物（即本文所述的環己烯酮化合物）的製劑在鹽水中製備成溶液。例如，參見Ansel, H.C等人, Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery System, 第六版(1995)。優選地，這些組成物和製劑用合適的藥學上可接受的無毒成分製備。這些成分可見於許多資料中，如本領域中的標準參考書REMINGTON: THE SCIENCE AND PRACTICE OF PHARMACY, 第21版, 2005。合適的載體的選擇高度取決於期望的經鼻劑型例如溶液、懸浮液、軟膏或凝膠的確切性質。經鼻劑型除活性成分外通常含有大量的水。也可存在少量的其他成分，如pH調節劑、乳化劑或分散劑、防腐劑、表面活性劑、膠凝劑或緩衝劑及其他穩定劑和增溶劑。優選地，經鼻劑型應當與鼻分泌物等滲。

對於吸入給藥，本文所述的化合物可以是氣霧劑、薄霧劑或粉末的形式。本文所述的藥學組成物方便地利用合適的推進劑（例如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、二氧化碳或其他合適的氣體）從加壓包或霧化器以氣霧噴霧形式遞送。在加壓的氣霧劑的情況下，可以通過設置用來遞送計量的量的閥來確定劑量單位。僅舉例來說，可以配製在吸入器或吹藥器中使用的例如明膠的膠囊和藥筒，其含有本文所述的化合物和合適的粉末基質如乳糖或澱粉的粉末混合物。

在另外其他的具體例中，所述化合物（即本文所述的環己烯酮化合物）被配製為直腸組成物，如含有常規栓劑基質如可哥脂或其他甘油酯以及合成聚合物如聚乙烯吡咯烷酮、PEG等的灌腸劑、直腸凝膠劑、直腸泡沫劑、直腸氣霧劑、栓劑、膠狀栓劑或保留灌腸劑。在組成物的栓劑形式中，低熔點蠟，（例如但不限於任選地與可可脂組合的脂肪酸甘油酯的混合物）首先熔化。

在某些具體例中，使用一種或多種包含有助於將活性化合物加工成可藥用製劑的賦形劑和助劑的生理學上可接受的載體，以任何常規方式配製藥學組成物。合適的製劑取決於選定的給藥途徑。適當地且如本領域所理解的，任選地使用任何藥學上可接受的技術、載體和賦形劑。包含化合物（即本文所述的環己烯酮化合物）的藥學組成物可以以常規的方式生產，例如，僅舉例來說，通過常規混合、溶解、制粒、制錠、磨細、乳化、膠囊化、捕獲或壓制工藝生產。

藥學組成物包含至少一種藥學上可接受的載體、稀釋劑或賦形劑以及作為活性成分的至少一種本文所述的化合物（即本文所述的環己烯酮化合物）。活性成分為游離酸或游離鹼的形式，或為藥學上可接受的鹽的形式。此外，本文所述的方法和藥學組成物包括使用晶形（也被稱為多晶型物）以及這些化合物的具有相同活性類型的活性代謝物。本文所述化合物的所有互變異構體也包括在本文提出的化合物的範圍內。此外，本文所述的化合物包括非溶劑化的形式以及用藥學上可接受的溶劑如水、乙醇等溶劑化的形式。本文提出的化合物的溶劑化形式也被認為在此公開。此外，藥學組成物任選地包含其他醫用或藥用試劑、載體、佐劑，如防腐劑、穩定劑、潤濕劑或乳化劑、溶液促進劑、用以調節滲透壓的鹽、緩衝液和/或其他具有治療價值的物質。

用於製備包含本文所述化合物的組成物的方法包括將該化合物與一種或多種惰性的、藥學上可接受的賦形劑或載體一起配製，以形成固體、半固體或液體。固體組成物包括但不限於粉末、片劑、可分散顆粒、膠囊、扁囊劑和栓劑。液體組成物包括化合物溶解於其中的溶液、包含化合物的乳液，或包含含有如本文公開的化合物的脂質體、膠束或納米顆粒的溶液。半固體組成物包括但不限於凝膠、懸浮液和乳膏。本文所述的藥學組成物的形式包括液體溶液或懸浮液，適於使用前在液體中製成溶液或懸浮液的固體形式，或作為乳液。這些組成物任選地也含有少量的無毒的輔助物質，如潤濕劑或乳化劑、pH緩衝劑等。

在一些具體例中，包含至少一種化合物（即本文所述的環己烯酮化合物）的藥學組成物說明性地採用液體形式，其中藥劑存在於溶液中、懸浮液中或兩者中。一般而言，當組成物作為溶液或懸浮液給藥時，藥劑的第一部分存在於溶液中，而藥劑的第二部分則以顆粒形式懸浮存在於液態基質中。在一些具體例中，液體組成物包括凝膠製劑。在其他具體例中，液體組成物是水性的。

在某些具體例中，水性藥物懸浮液包含一種或多種聚合物作為懸浮劑。聚合物包括諸如纖維質聚合物（例如，羥丙甲基纖維素）的水溶性聚合物以及諸如交聯的含羧基聚合物的非水溶性聚合物。本文所述的某些藥學組成物包含粘膜粘附聚合物，其選自例如：羧甲基纖維素、卡波姆（carbomer）（丙烯酸聚合物）、聚(甲基丙烯酸甲酯)、聚丙烯醯胺、聚卡波非、丙烯酸/丙烯酸丁酯共聚物、藻酸鈉和葡聚糖。

藥學組成物也任選地包含增溶劑，以有助於化合物（即本文所述的環己烯酮化合物）的溶解度。術語“增溶劑”通常包括導致形成藥劑的膠束溶液或真溶液的試劑。某些可接受的非離子型表面活性劑，例如聚山梨酯80，可用作增溶劑，也可使用眼部可接受的二醇、聚二醇（例如聚乙二醇400）和二醇醚。

此外，藥學組成物任選地包含一種或多種pH調節劑或緩衝劑，包括：酸，如乙酸、硼酸、檸檬酸、乳酸、磷酸和鹽酸；鹼，如氫氧化鈉、磷酸鈉、硼酸鈉、檸檬酸鈉、乙酸鈉、乳酸鈉和三羥甲基氨基甲烷；和緩衝液，如檸檬酸鹽/右旋糖、碳酸氫鈉和氯化銨。以維持組成物的pH處於可接受範圍內所需的量包含這樣的酸、鹼和緩衝液。

此外，藥學組成物任選地以使組成物的摩爾滲透壓濃度處於可接受範圍內所需的量包含一種或多種鹽。這樣的鹽包括含有鈉、鉀或銨陽離子以及氯離子、檸檬酸根、抗壞血酸根、硼酸根、磷酸根、碳酸氫根、硫酸根、硫代硫酸根或亞硫酸氫根陰離子的鹽；合適的鹽包括氯化鈉、氯化鉀、硫代硫酸鈉、亞硫酸氫鈉和硫酸銨。

其他藥學組成物任選地包含一種或多種防腐劑，用以抑制微生物的活性。合適的防腐劑包括：含汞物質，如硼酸苯汞（merfen）和硫柳汞（thiomersal）；穩定化的二氧化氯；以及季銨化合物，如苯紮氯銨、西曲溴銨和西吡氯銨。

另外的其他藥學組成物包含一種或多種表面活性劑，用以增強物理穩定性或用於其他目的。合適的非離子型表面活性劑包括：聚氧乙烯脂肪酸甘油酯和植物油，例如聚氧乙烯(60)氫化蓖麻油；以及聚氧乙烯烷基醚和烷基苯基醚，例如辛苯昔醇10（octoxynol 10）、辛苯昔醇40。

另外其他的藥學組成物可包含一種或多種抗氧化劑，用以在需要時增強化學穩定性。僅舉例來說，合適的抗氧化劑包括抗壞血酸和焦亞硫酸鈉。

在某些具體例中，藥學組成物水性懸浮液被包裝于不可重新封閉的單劑量容器中。或者，使用可重新封閉的多劑量容器，在這種情況下，通常在組成物中包含防腐劑。

在備選的具體例中，使用其他用於疏水性藥物化合物的遞送系統。脂質體和乳液是本文的遞送媒介物或載體的實例。在某些具體例中，也使用有機溶劑如N-甲基吡咯烷酮。在另外的具體例中，使用持續釋放系統，如含有治療劑的固態疏水性聚合物的半滲透性基質，來遞送本文所述的化合物。各種持續釋放材料在此處是有用的。在一些具體例中，持續釋放膠囊釋放化合物數小時，最多經24小時。根據治療劑的化學性質及生物穩定性，可使用另外的蛋白質穩定策略。

在某些具體例中，本文所述的製劑包含一種或多種抗氧化劑、金屬螯合劑、含巰基化合物和/或其他普通穩定劑。這樣的穩定劑的實例包括但不限於：(a) 約0.5%至約2% w/v的甘油，(b) 約0.1%至約1% w/v的甲硫氨酸，(c) 約0.1%至約2% w/v的單硫代甘油，(d) 約1 mM至約10 mM的EDTA，(e) 約0.01%至約2% w/v的抗壞血酸，(f) 0.003%至約0.02% w/v的聚山梨酯80，(g) 0.001%至約0.05% w/v的聚山梨酯20，(h) 精氨酸，(i) 肝素，(j) 硫酸葡聚糖，(k) 環糊精，(l) 多硫酸戊聚糖酯及其他類肝素，(m) 二價陽離子如鎂離子和鋅離子；或(n) 它們的組合。聯合治療

通常，本文所述的組成物和（在採用聯合治療的具體例中）其他藥劑無需在同一藥學組成物中進行施用，並且在一些具體例中，由於物理及化學特性不同，它們通過不同的途徑給藥。在一些具體例中，根據確立的方案進行初始給藥，而後由熟練的臨床醫生基於所觀察到的效果改變劑量、給藥方式及給藥時間。

在一些具體例中，當藥物在治療組合中使用時，治療有效劑量發生變化。聯合治療進一步包括在不同的時間開始和結束的定期治療，以便幫助對患者的臨床處理。對於本文所述的聯合治療，共同施用的化合物的劑量根據所使用的聯合藥物的類型，所使用的具體藥物，所治療的疾病、病症或狀況等而變化。

應當理解，在一些具體例中，根據多種因素改變用於治療、預防或改善尋求緩解的狀況的劑量方案。這些因素包括個體所患的病症，以及個體的年齡、體重、性別、飲食及醫療狀況。因此，在其他具體例中，實際使用的劑量方案變化很大，且因此偏離本文所述的劑量方案。意在涵蓋化合物（即本文所述的環己烯酮化合物）與其他AD治療劑的組合。在一些具體例中，所述環己烯酮化合物與本文所述的其他AD治療劑的組合包括使用其他藥劑的額外的療法和治療方案。在一些具體例中，此類額外的療法和治療方案可包括另一種AD療法。或者，在其他實施方案中，額外的療法和治療方案包括用來治療與AD相關的附加狀況或由聯合治療中的這種藥劑所導致的副作用的其他藥劑。在進一步的實施方案中，佐劑或增強劑與本文所述的聯合治療一起施用。

在一些具體例中提供了用於治療或減輕AD的症狀的組成物，其包含治療有效量的具有以下結構的環己烯酮化合物，或其藥學上可接受的鹽、代謝物、溶劑化物或前藥：

其中X和Y中的每一個獨立地為氧、NR₅ 或硫； R為氫或C(=O)C₁ -C₈ 烷基； R₁ 、R₂ 和R₃ 中的每一個獨立地為氫、任選取代的甲基或(CH₂ )_m —CH₃ ； R₄ 為NR₅ R₆ 、OR₅ 、OC(=O)R₇ 、C(=O)OR₅ 、C(=O)R₅ 、C(=O)NR₅ R₆ 、鹵素、5或6元內酯、C₁ -C₈ 烷基、C₂ -C₈ 烯基、C₂ -C₈ 炔基、芳基、葡糖基，其中該5或6元內酯、C₁ -C₈ 烷基、C₂ -C₈ 烯基、C₂ -C₈ 炔基、芳基和葡糖基任選地被一個或多個取代基取代，該取代基選自NR₅ R₆ 、OR₅ 、OC(=O)R₇ 、C(=O)OR₅ 、C(=O)R₅ 、C(=O)NR₅ R₆ 、C₁ -C₈ 烷基、C₂ -C₈ 烯基、C₂ -C₈ 炔基、C₃ -C₈ 環烷基和C₁ -C₈ 鹵代烷基； R₅ 和R₆ 中的每一個獨立地為氫或C₁ -C₈ 烷基； R₇ 為C₁ -C₈ 烷基、OR₅ 或NR₅ R₆ ； m = 1-12；以及一種或多種AD治療劑。實施例 實施例1. 示例性的環己烯酮化合物的製備

將100克的牛樟芝的菌絲體、子實體或二者的混合物置於燒瓶中。將適量的水和乙醇(70%~100%乙醇溶液)加入該燒瓶中，並於20-25℃下攪拌至少1小時。通過濾器和0.45 μm濾膜過濾該溶液並收集濾液作為提取液。在一些具體例中，例如，通過Lee, T-H.等人, Planta Med 2007; 73:1412-1415中公開的固態發酵菌絲體條件和組成製備提取物。

對牛樟芝的濾液進行高效液相層析(HPLC)分析。以1 ml/min的流速，在RP18柱上進行分離，流動相由甲醇(A)和0.3%的乙酸(B)組成，梯度條件為在 95%-20%的B中0-10分鐘，在20%-10%的B中10-20分鐘，在10%-10%的B中20-35分鐘，在10%-95%的B中35-40分鐘。用紫外線-可見光檢測器監測柱流出液。

對在21.2至21.4 min時收集的級分進行收集並濃縮，以得到化合物5 ，一種淡黃色液體產物。化合物5 經分析為4-羥基-5-(11-羥基-3,7,11-三甲基十二碳-2,6-二烯基)-2,3-二甲氧基-6-甲基環己-2-烯酮，其分子量為408（分子式：C₂₄ H₄₀ O₅ ）。¹ H-NMR (CDCl₃ ) δ (ppm)= 1.21, 1.36, 1.67, 1.71, 1.75, 1.94, 2.03, 2.07, 2.22, 2.25, 3.68, 4.05, 5.71和5.56。¹³ C-NMR(CDCl₃ )δ(ppm): 12.31, 16.1, 16.12, 17.67, 25.67, 26.44, 26.74, 27.00, 30.10, 40.27, 43.34, 59.22, 60.59, 71.8, 120.97, 123.84, 124.30, 131.32, 134.61, 135.92, 138.05, 160.45和197.11。

化合物5 ：4-羥基-5-(11-羥基-3,7,11-三甲基十二碳-2,6-二烯基)-2,3-二甲氧基-6-甲基環己-2-烯酮

對在23.7至24.0 min時收集的級分進行收集並濃縮，以得到化合物7 ，一種淡黃色液體產物。化合物7 經分析為4-羥基-2,3-二甲氧基-5-(11-甲氧基-3,7,11-三甲基十二碳-2,6-二烯基)-6-甲基環己-2-烯酮，其分子量為422（C₂₅ H₄₂ O₅ ）。¹ H-NMR (CDCl₃ ) δ (ppm) = 1.21, 1.36, 1.71, 1.75, 1.94, 2.03, 2.07, 2.22, 2.25, 3.24, 3.68, 4.05, 5.12, 5.50和5.61。¹³ C-NMR(CDCl₃ )δ(ppm): 12.31, 16.1, 16.12, 17.67, 24.44, 26.44, 26.74, 27.00, 37.81, 39.81, 40.27, 43.34, 49.00, 59.22, 60.59, 120.97, 123.84, 124.30, 135.92, 138.05, 160.45和197.12。

化合物7 ：4-羥基-2,3-二甲氧基-5-(11-甲氧基-3,7,11-三甲基十二碳-2,6-二烯基)-6-甲基環己-2-烯酮

收集25至30分鐘的級分並濃縮，得到淡黄棕色液體產物，即4-羥基-2,3-二甲氧基-6-甲基-5-(3,7,11-三甲基十二碳-2,6,10-三烯基)環己-2-烯酮(化合物1 )。對化合物1 的分析顯示分子式為C₂₄ H₃₈ O₄ ，分子量為390，熔點為48至52℃。NMR譜顯示：¹ H-NMR (CDCl₃ ) δ (ppm)=1.51, 1.67, 1.71, 1.75, 1.94, 2.03, 2.07, 2.22, 2.25, 3.68, 4.05, 5.07和5.14；¹³ C-NMR (CDCl₃ ) δ (ppm)=12.31, 16.1, 16.12, 17.67, 25.67, 26.44, 26.74, 27.00, 39.71, 39.81, 40.27, 43.34, 59.22, 60.59, 120.97, 123.84, 124.30, 131.32, 135.35, 135.92, 138.05, 160.45和197.12。

化合物1 ：4-羥基-2,3-二甲氧基-6-甲基-5-(3,7,11-三甲基十二碳-2,6,10-三烯基)環己-2-烯酮

在動物研究中，從飼喂化合物1 的大鼠的尿液樣品中獲得化合物27 ，即化合物1 的代謝物。化合物27 被確定為4-羥基-2,3-二甲氧基-6-甲基-5-(3-甲基-2-己烯酸)環己-2-烯酮，其分子量為312（C₁₆ H₂₄ O₆ ）。化合物25 從純化過程獲得，其被確定為2,3-二甲氧基-5-甲基-6-((2E,6E)-3,7,11-三甲基十二碳-2,6,10-三烯基)環己-2,5-二烯-1,4-二酮（分子量為386.52，C₂₄ H₃₄ O₄ ）。

化合物26 ，即4-羥基-2-甲氧基-6-甲基-5-((2E,6E)-3,7,11-三甲基十二碳-2,6,10-三烯基)環己-2-烯酮，也通過純化過程製備，其分子量為350.53（C₂₃ H₃₆ O₃ ）。還製備了化合物28 。

或者，示例性的化合物可以由4-羥基-2,3-二甲氧基-6-甲基環己-2,5-二烯酮等製備。例如，參見美國專利第9365481號和美國專利公開案第2016-0237012號的實施例。類似地，具有結構

的環己烯酮化合物從牛樟芝中分離或由適合的起始材料經合成或半合成方式製備。本領域普通技術人員將會容易地利用合適的條件進行這樣的合成。實施例 2 ：由外而內的動物模型研究

使用6-8周齡的BALC/c雌性大鼠。每組有6-8只大鼠。致敏前從大鼠面頰獲取血液樣品。在第1天和第8天，向小鼠腹膜內注射50 μg/小鼠的OVA-氫氧化鋁（1:1 v/v）。在第15天用OVA貼劑使小鼠皮膚致敏。製備於PBS中的OVA（100 μg）包含在2 × 2 cm的無菌紗布貼劑中，該貼劑放置在小鼠剃毛的背部上，並用3M Tegader膜、隨後用3M Coban膠帶固定至皮膚，以固定紗布。3天后，移除紗布並再次應用。該過程重複三次。在第27天，處死研究中的所有小鼠並進行檢查。

時間表：空白組N：空白。

致敏組O：在第1天和第8天注射OVA（致敏），在第15天應用OVA紗布持續3天（激發）並休息一天。應用OVA紗布的程式重複3次。從第14天開始，向該組中的小鼠喂水。

組 L ：與組O程式相同，但向小鼠飼喂低劑量（5 mg/kg體重）的示例性化合物1 。

組 M ：與組O程式相同，但向小鼠飼喂中等劑量（15 mg/kg體重）的示例性化合物1 。

組 H ：與組O程式相同，但向小鼠飼喂高劑量（45 mg/kg體重）的示例性化合物1 。

程式總結於下表中。

實施例 3 ：皮膚表面研究和組織切片

對於組織學檢查，在處死小鼠後從小鼠具有貼劑的背部皮膚獲得皮膚樣本（0.5x0.5cm），並拍照（參見圖2A-2E）。還從小鼠獲取血液樣品。分離皮膚樣本的肌肉層和脂肪層。在6孔盤中用含10%福馬林的中性緩衝溶液固定皮膚樣本，並在乾燥後包埋在石蠟中。

血清免疫球蛋白分析。測量採用夾心ELISA。在具有包被緩衝液（pH 9.6）的96孔Nunc-Immuno板中製備適量的抗小鼠IgE抗體。在4℃下過夜後，用PBST緩衝液洗滌該板以去除未綴合的抗體，然後用200 μl/孔的封閉緩衝液（1% BSA/PBS）在室溫下封閉30分鐘。然後用PBST緩衝液洗滌該板，並添加100 μl的50倍稀釋的小鼠血清或具有已知濃度的IgG、IgA、IgE標準參照物。

使含有測試溶液或IgE標準的孔在室溫下反應1小時，並用PBST緩衝液洗滌，並添加100 μl/孔的合適的濃縮HRP綴合的抗IgE第二抗體。使板在室溫下反應1小時，隨後用PBST緩衝液洗滌，然後與TMB底物反應。5分鐘後，用100 μl 2N H₂ SO₄ 終止反應，然後在450 nm波長下測量以確定吸光度值。該值被用於確定血清中的抗體濃度。

遲發性過敏反應。將OVA注入小鼠的腹腔內。6天后，通過皮下注射將OVA應用於小鼠的右後肢，或應用於小鼠的耳朵內部和外部。在應用24小時後，測量後肢或耳朵與未加應用時（即對照組）相比的腫脹厚度作為遲發性過敏反應的基礎。

皮膚生理學的測定。麻醉後，通過Tewameter TM210測量小鼠皮膚的經表皮失水和相對濕度。還測量皮膚的pH值。參見圖3A-3C。

小鼠脾細胞的收集。無菌移取小鼠脾臟，並將其放入RPMI培養基（10% FBS）中。使用20 mL注射器的管來研磨脾臟。使所得脾懸浮液傾倒穿過無菌金屬細胞篩檢程式（70 μm），並在4℃下以300xg離心5分鐘。除去上清液，並將沉澱物溶於5 ml RBC裂解緩衝液中。將溶液用冰冷卻10分鐘，然後添加相同體積的cRPMI培養基以終止反應。所得懸浮液在4℃下以300xg離心5分鐘。除去上清液，將沉澱物溶於10 ml cRPMI培養基中，然後對細胞數進行計數。用cRPMI培養基將所得溶液的濃度調節至1 x 10⁶ /ml。將所得細胞接種至12孔盤中，並向每孔添加50 μg/ml OVA、5 μg/ml ConA和10 μg/ml PHA-L。每孔激發72小時，然後在4℃下以300xg離心5分鐘。收集每孔的上清液並儲存於-80℃。

小鼠淋巴結的收集。無菌移取小鼠淋巴結，並將其放入RPMI培養基（10% FBS）中。使用20 mL注射器的管來研磨淋巴結。使所得懸浮液傾倒穿過無菌金屬細胞篩檢程式（70 μm），並在4℃下以300xg離心5分鐘。除去上清液，並將沉澱物溶於5ml RBC裂解緩衝液中。將溶液用冰冷卻10分鐘，然後添加相同體積的cRPMI培養基以終止反應。所得懸浮液在4℃下以300xg離心5分鐘。除去上清液，將沉澱物溶於10ml cRPMI培養基中，然後對細胞數進行計數。用cRPMI培養基將所得溶液的濃度調節至1 x 10⁶ /ml。將所得細胞接種至12孔盤中，並向每孔添加50 μg/ml OVA、5 μg/ml ConA和10 μg/ml PHA-L。每孔激發72小時，然後在4℃下以300xg離心5分鐘。收集每孔的上清液並儲存於-80℃。

細胞激素產生的定量對於定義若干病理過程的標準免疫學分析是有價值的輔助手段。細胞激素水準的測量已經產生了關於AD的病理過程的有用資訊。

細胞激素分泌測試。將分離的淋巴細胞的濃度調節為1 x 10⁶ /ml並置於24孔板中。向該板施加定量的PHA、ConA或OVA以刺激脾細胞或淋巴細胞。將盤培養24小時或72小時，並收集每孔的上清液以測量細胞激素分泌的量。通過夾心ELISA測量細胞激素。處理ELISA板以應用抗體並在4℃下溫育過夜。測試前用1% PBS-BSA洗滌該板。將樣本添加至該板並在室溫下保持2小時，然後添加生物素連接的抗細胞激素抗體。在室溫下保持2小時後，向該板添加抗生物素蛋白連接的過氧化物酶。再過兩小時，使用TMB進行酶/底物讀出。使用自動化微量培養板ELISA讀取器在450 nm處測量顯色。上述程式中使用的每種試劑的濃度應在測試之前通過參考具有已知濃度的淋巴培養基來確定。

皮膚角質形成細胞凋亡。從小鼠切下皮膚樣本。棄去皮膚樣本的肌肉層和脂肪層，然後將皮膚放入含有10%抗生素的PBS中5分鐘。然後取出皮膚樣本並放入37℃的0.25%胰蛋白酶溶液中30分鐘。取出皮膚樣本並放在10 cm的盤上。用刀片刮出皮膚角質形成細胞，然後用胰蛋白酶洗滌，離心，將沉澱物重懸浮於PBS中至2 x 10⁵ /ml的濃度。在螢光啟動細胞分選（FACS）分析中使用異硫氰酸螢光素（FITC）和藻紅蛋白（PE）綴合的抗體來確定（a）表皮角質形成細胞的凋亡狀態。統計分析

實施例的結果表示為平均值±SEM，並通過非配對t檢驗進行分析。雙尾P值小於0.05被認為具有顯著性。結果

如圖1中所示，所有施用口服劑量的化合物1的小鼠在整個研究期間均未發生任何體重減輕或任何觀察到的臨床體徵，並且所有治療組之間的體重變化沒有顯著差異。

如圖2A-2E中所示，組O中的小鼠比組N中的小鼠顯示更嚴重的腫脹和炎症。低劑量組L和中劑量組M與組O相比沒有顯著差異。值得注意的是，與組O小鼠相比，組H（高劑量化合物1 ）中的小鼠皮膚狀況較好，腫脹和炎症情況較少。皮膚也更光滑。因此，顯然用高劑量的示例性化合物1 飼喂的小鼠具有改善的AD狀況。

如經表皮失水率（TEWL）所示，TEWL值越小，來自皮膚表面的水分損失越少，這意味著表皮保護層的狀況更好。TEWL值越大，水分損失越大，表皮保護層的損傷越嚴重。

如圖3A中所示，在向小鼠的背部皮膚應用OVA貼劑的第14天之前，各組的TEWL值非常相似。在第27天，組O的TEWL值顯著高於組N的TEWL值，這表明OVA誘導的AD導致皮膚表面的水分損失。組L、組M和組H的TEWL值與組O相比在統計上顯著更低，表明在這些組中表皮損傷得到改善。資料還顯示，這種改善是劑量依賴性的，更高的劑量提供更好的改善。

如相對濕度（RH）所示，當RH值較小時，意味著皮膚具有更好的保水性，且皮膚結構更加健康。當RH值較大時，意味著皮膚更乾燥，且皮膚結構更不完善。

如圖3B中所示，在向小鼠的背部皮膚應用OVA貼劑的第14天之前，各組的RH值非常相似。在第27天，組O的RH值在統計學上顯著高於組N的RH值，這表明OVA誘導的AD導致皮膚乾燥和皮膚結構損傷。組L、組M和組H的RH值與組O相比在統計上顯著更低，表明在這些組中表皮損傷得到改善。資料還顯示，這種改善是劑量依賴性的，更高的劑量提供更好的改善。

如圖3C中所示，在向小鼠的背部皮膚應用OVA貼劑的第14天，以及在第27天，各組的pH值非常相似。

因此，通過服用有效量的示例性化合物，可改善AD中的皮膚生理功能反應，如通過TEWL和RH值的結果所證明的。

蘇木精/伊紅染色或蘇木素/伊紅染色（H＆E染色或HE染色）是組織學中的主要染色之一。這種染色方法基於細胞組分對染料的親和力。樣品結構差異導致染色差異。蘇木精將嗜鹼性結構染為藍紫色，而血黑質（hematin）將嗜酸性結構染為紅色、粉色或橙色。

如圖4A-4E中所示，H＆E染色結果表明，組O中皮膚樣本的表皮和真皮層與組N相比均顯著增厚。這些層也顯示炎性細胞浸潤數目增加。與組O的結果相比，組L、組M和組H的表皮和真皮層明顯更薄，且具有降低的炎性細胞浸潤。

特別地，如圖4F和圖4G所示，組O的表皮和真皮層在統計學上顯著厚於組N的表皮和真皮層，這表明OVA誘導炎性細胞的大量浸潤，產生較厚的層。與組O相比，組L、組M和組H的表皮和真皮層的厚度在統計上顯著更小。資料還顯示表皮和真皮厚度的減少呈劑量依賴性方式。

因此，通過服用有效量的示例性化合物，可改善AD中的皮膚表皮狀況，如通過H&E染色的皮膚樣本的結果所證明的。

嗜酸性粒細胞（嗜酸性白細胞）是在造血過程中在骨髓中發育隨後遷移到血液中的粒細胞。它們主要在炎症和寄生蟲感染期間生成。已顯示它們可用於監測多種活動性炎性疾病，包括支氣管哮喘、異位性皮膚炎、鼻炎、變應性眼炎、變應性耳炎、寄生蟲和細菌感染、自身免疫病和慢性疲憊（burnout）。

如圖5A-5E中所示，將組O嗜酸性粒細胞染色結果與組N相比，組O中皮膚樣本的真皮中的嗜酸性粒細胞顯著增加。組L、組M和組H的真皮中的嗜酸性粒細胞與組O的結果相比顯著減少。

圖5F示出了真皮中嗜酸性粒細胞的細胞數計數的結果。

組O的真皮中嗜酸性粒細胞的數目與組N中的數目相比在統計學上顯著增加，表明OVA誘導的AD導致嗜酸性粒細胞數目的增加。組L、組M、組H的真皮中嗜酸性粒細胞的數目與組O相比減少。特別地，組M和組H中的數目減少是統計上顯著的。

因此，通過服用有效量的示例性化合物，可改善AD中的真皮狀況，如通過嗜酸性粒細胞染色的細胞的結果所證明的。

異位性皮膚炎引起瘙癢感，因為皮膚損傷會啟動表皮產生胸腺基質淋巴細胞生成素（Thymic stromal lymphopoietin，TSLP）。

如圖6A-6E中所示，將組O的TSLP染色結果與組N相比，組O中皮膚樣本的真皮中的TSLP顯著增加。組L、組M和組H的真皮中的TSLP染色與組O的結果相比顯著減少。

圖6F示出了小鼠表皮中TSLP細胞染色的定量細胞計數結果。致敏組O中TSLP染色細胞的數目在統計學上顯著高於組N中的數目，表明OVA誘導的AD導致TSLP染色細胞數目的增加。

組L、組M和組H中表皮中TSLP染色細胞的數目低於組O中的數目。特別地，組M和組H中的數目減少是統計上顯著的。

因此，通過服用有效量的示例性化合物，可改善AD中的表皮狀況，如通過TSLP染色細胞的結果所證明的。

朗格漢斯細胞可用於檢測皮膚屏障狀況。當皮膚受損時，朗格漢斯細胞將會大量分泌，以吞下並破壞（吞噬）外部病毒。朗格漢斯細胞也可刺激一些淋巴細胞的產生。

如提供朗格漢斯細胞染色結果的圖7A-7E中所示，致敏組O中的朗格漢斯細胞染色量顯著高於組N中的染色量。組L、組M和組H中的朗格漢斯染色量與組O中的染色量相比明顯減少。

圖7F示出了朗格漢斯細胞染色的定量細胞計數結果。致敏組O中朗格漢斯染色細胞的數目在統計學上顯著高於組N中的數目，表明OVA誘導的AD導致朗格漢斯染色細胞數目的增加。組L、組M和組H中朗格漢斯染色細胞計數的數目在統計上顯著低於組O中的數目。

因此，通過服用有效量的示例性化合物，可改善AD中的皮膚屏障狀況，如通過朗格漢斯染色細胞的結果所證明的。

當身體具有變態反應時，血清免疫球蛋白E（Immunoglobulin E，IgE）將會增加。

圖8A示出了各組的總IgE量。在第0天，各組之間沒有差異。在第14天，在向小鼠背部皮膚上應用OVA貼劑之前，除了組N小鼠之外，其他組中的小鼠均進行腹腔內OVA注射。組O、組L、組M和組H中的總IgE均在統計上高於組N中的總IgE，表明OVA注射導致體內的變態反應。在第27天，組O中的總IgE在統計學上顯著高於組N中的總IgE，表明OVA貼劑對組O的小鼠成功建立了AD模型。組L、組M和組H中的總IgE的量在統計上顯著低於組O中的量，並且該降低呈劑量依賴性。

圖8B示出了OVA專一性IgE量。在第0天，各組之間沒有差異。在第14天，在向小鼠背部皮膚上應用OVA貼劑之前，除了組N小鼠之外，其他組中的小鼠均進行腹腔內OVA注射。組O、組L、組M和組H中的OVA專一性IgE量均在統計上高於組N中的OVA專一性IgE量，表明OVA注射導致體內的變態反應。在第27天，組O中的OVA專一性IgE在統計學上顯著高於組N中的OVA專一性IgE，表明OVA貼劑對組O的小鼠成功建立了AD模型。組L、組M和組H中的OVA專一性IgE的量在統計上顯著低於組O中的量。

因此，通過服用有效量的示例性化合物，可減少AD中的總IgE和OVA專一性IgE，如通過血清IgE測量的結果所證明的。

如圖9A中所示，在第27天，致敏組O中的耳厚度與組N中的耳厚度相比未增厚。組L、組M和組H中的耳厚度與組O中的耳厚度沒有差異。

如圖9B中所示，組O中的後肢厚度在統計學上顯著厚於組N中的後肢厚度。組L、組M和組H中的後肢厚度明顯小於組O中的後肢厚度，其中組L中的後肢厚度是統計學上顯著的。

因此，通過服用有效量的示例性化合物，可改善異位性皮膚炎中對耳和腿的遲髮型變態反應。用 PHA 、 ConA 和 OVA 刺激 24 小時的脾細胞的激素分泌結果。

在第27天后處死各組中的小鼠並收集脾細胞。將含有脾細胞的溶液的濃度調節至1 x 10⁶ /ml，然後用PHA、ConA和OVA進行24小時的刺激。測量脾細胞中生成的IFN-γ、IL-4、IL-12和TNF-α的量。

如圖10A中所示，在24小時的PHA刺激後，組O和組N中的IFN-γ分泌量大致相同。組L、組M和組H中的IFN-γ分泌量略高於組O中的量，但不具有統計學意義。在24小時的ConA刺激後的IFN-γ分泌量方面，組O中的IFN-γ分泌量在統計學上顯著低於組N中的量。組L、組M和組H中的IFN-γ分泌量在統計學上顯著高於組O中的量。在24小時的OVA刺激後，各組中的IFN-γ分泌量大致相同，沒有顯示出差異。

如圖10B中所示，在24小時的PHA刺激後，組O和組N中的IL-4分泌量大致相同。在24小時的ConA刺激後，組O中的IL-4分泌量在統計上顯著高於組N中的量。組L、組M和組H中的IL-4分泌量低於組O中的量，特別地，在組L和組M中是統計上顯著的。在24小時的OVA刺激後，各組中的IL-4分泌量大致相同，沒有顯示出任何差異。

如圖10C中所示，在24小時的PHA刺激後，各組中的IL-12分泌量大致相同。在24小時的ConA刺激後，組O中的IL-12分泌量略低於組N中的量，但不具有統計學意義。組L、組M和組H中的IL-12分泌量高於組O中的量，特別地，在組L和組M中是統計上顯著的。在24小時的OVA刺激後，各組中的IL-12分泌量大致相同，沒有顯示出差異。

如圖10D中所示，在24小時的PHA刺激後，各組中的TNF-α分泌量大致相同。在24小時的ConA刺激後，組O中的TNF-α分泌量在統計學上顯著高於組N中的量。組L、組M和組H中的TNF-α分泌量在統計學上顯著低於組O中的量。在24小時的OVA刺激後，組O中的TNF-α分泌量略高於組N中的量，但不具有統計顯著性。組L、組M和組H中的TNF-α分泌量略低於組O中的量，但不是統計學上顯著的。

因此，有效量的示例性化合物可影響某些生物標誌物從AD中的脾細胞的分泌。用 PHA 、 ConA 和 OVA 刺激 72 小時的脾細胞的激素分泌結果。

在第27天后處死各組中的小鼠。將含有脾細胞的溶液的濃度調節至1 x 10⁶ /ml，然後用PHA、ConA和OVA進行72小時的刺激。測量脾細胞中生成的IFN-γ、IL-4、IL-12和TNF-α的量。

如圖11A中所示，在72小時的PHA刺激後，組O和組N在IFN-γ分泌量方面大致相同。組L和組M中的IFN-γ分泌量與組O中的分泌量大致相同。組H中的量略高於組O中的量，但不具有統計學意義。在72小時的ConA刺激後的IFN-γ分泌量方面，組O中的IFN-γ分泌量與組N中的量大致相同。組L、組M和組H中的IFN-γ分泌量略高於組O中的量，特別地，組M中的量是統計學上顯著的。在72小時的OVA刺激後，組O和組N中的IFN-γ分泌量大致相同。組L和組M中的量與組O中的量大致相同。組H中的量略高於組O中的量，但未顯示出統計學意義。

如圖11B中所示，在72小時的PHA刺激後，組O和組N中的IL-4分泌量大致相同。在72小時的ConA刺激後，組O中的IL-4分泌量在統計上顯著高於組N中的量。組L、組M和組H中的IL-4分泌量在統計上顯著低於組O中的量。在72小時的OVA刺激後，各組中的IL-4分泌量大致相同，沒有顯示出任何差異。

如圖11C中所示，在72小時的PHA、ConA或OVA刺激後，各組中的IL-12分泌量大致相同。

如圖11D中所示，在72小時的PHA刺激後，各組中的TNF-α分泌量大致相同。在72小時的ConA刺激後，組O中的TNF-α分泌量在統計學上顯著高於組N中的量。組L、組M和組H中的TNF-α分泌量在統計學上顯著低於組O中的量。在72小時的OVA刺激後，各組中的TNF-α分泌量大致相同，沒有顯示出差異。用 PHA 、 ConA 和 OVA 刺激 24 小時的淋巴細胞的細胞激素分泌結果。

在第27天后處死各組中的小鼠並收集淋巴細胞。將含有淋巴細胞的溶液的濃度調節至1 x 10⁶ /ml，然後用PHA、ConA和OVA進行24小時的刺激。測量淋巴細胞中生成的IFN-γ、IL-4、IL-12和TNF-α的量。

如圖12A中所示，在24小時的PHA刺激後，各組中的IFN-γ分泌量大致相同。在24小時的ConA刺激後的IFN-γ分泌量方面，組O中的IFN-γ分泌量在統計學上顯著高於組N中的量。組L、組M和組H中的IFN-γ分泌量在統計學上顯著高於組O中的量。在24小時的OVA刺激後，各組中的IFN-γ分泌量大致相同，沒有顯示出差異。

如圖12B中所示，在24小時的PHA刺激後，各組中的IL-4分泌量大致相同。在24小時的ConA刺激後，組O中的IL-4分泌量在統計上顯著高於組N中的量。組L、組M和組H中的IL-4分泌量在統計學上顯著低於組O中的量。在24小時的OVA刺激後，各組中的IL-4分泌量大致相同，沒有顯示出任何差異。

如圖12C中所示，在24小時的PHA、ConA或OVA刺激後，各組中的IL-12分泌量大致相同。

如圖12D中所示，在24小時的PHA刺激後，各組中的TNF-α分泌量大致相同。在24小時的ConA刺激後，組O中的TNF-α分泌量在統計學上顯著高於組N中的量。組L、組M和組H中的TNF-α分泌量在統計學上顯著低於組O中的量。在24小時的OVA刺激後，各組中的TNF-α分泌量大致相同，沒有顯示出任何差異。用 PHA 、 ConA 和 OVA 刺激 72 小時的淋巴細胞的細胞激素分泌結果。

在第27天后處死各組中的小鼠並收集淋巴細胞。將含有淋巴細胞的溶液的濃度調節至1 x 10⁶ /ml，然後用PHA、ConA和OVA進行72小時的刺激。測量淋巴細胞中生成的IFN-γ、IL-4、IL-12和TNF-α的量。

如圖13A中所示，在72小時的PHA刺激後，各組中的IFN-γ分泌量大致相同。在72小時的ConA刺激後的IFN-γ分泌量方面，組O中的IFN-γ分泌量與組N中的量大致相同。組L、組M和組H中的IFN-γ分泌量略高於組O中的量，但未顯示出統計學意義。在72小時的OVA刺激後，各組中的IFN-γ分泌量大致相同，沒有顯示出差異。

如圖13B中所示，在72小時的PHA刺激後，各組中的IL-4分泌量大致相同。在72小時的ConA刺激後，組O中的IL-4分泌量在統計上顯著高於組N中的量。組L、組M和組H中的IL-4分泌量低於組O中的量，特別地，組M和組H中的量具有統計顯著性。在24小時的OVA刺激後，各組中的IL-4分泌量大致相同，沒有顯示出任何差異。

如圖13C中所示，在72小時的PHA、ConA或OVA刺激後，各組中的IL-12分泌量大致相同。

如圖13D中所示，在72小時的PHA刺激後，各組中的TNF-α分泌量大致相同。在72小時的ConA刺激後，組O中的TNF-α分泌量在統計學上顯著高於組N中的量。組L、組M和組H中的TNF-α分泌量在統計學上顯著低於組O中的量。在24小時的OVA刺激後，各組中的TNF-α分泌量大致相同，沒有顯示出任何差異。實施例 4 ：化合物 1 用於治療異位性皮膚炎患者的臨床試驗研究

用來研究本文所述的環己烯酮化合物如化合物1 在治療異位性皮膚炎患者中的有效性的臨床試驗。

研究設計：隨機化、三組、雙盲、劑量變化、帶安慰劑對照的試驗。

主要目的：本研究將會比較化合物1 （例如50 mg、100 mg和200 mg）與安慰劑在中度異位性皮膚炎患者中的安全性和療效。研究目標：

主要目標 ：評價化合物1 在中度至重度異位性皮膚炎患者中的活性。

次要目標： 評估安卓奎諾爾（Antroquinonol）在異位性皮膚炎患者中的機制和細胞激素變化。

探索性目標： 探索安卓奎諾爾暴露與安全性和療效終點之間的潛在關係。

概述：招募共60名患者的樣本量，每組20名患者。患者在第0天接受安卓奎諾爾50 mg、100 mg或安慰劑，每天一次（QD），持續12周或直到有記錄的證據顯示不可接受的毒性、患者不依從或撤回同意，或者研究人員決定中斷治療，以先到者為准。研究藥物施用時間應記錄在患者日記中。在篩查時、第0天、第28天、第56天和第84天進行評分評估，包括EASI評分、SCORAD、sIGA評分。主要終點是基線與第12周之間的濕疹面積和嚴重程度指數（EASI）的改善百分比。入選標準

研究的合格年齡：12歲至65歲之間且具有中度至重度異位性皮膚炎（使用Hanifin和Rajka診斷標準）。

體重≥35 kg且≤120 kg的患者。

為了有資格參與，要求患者具有 a.在濕疹面積和嚴重程度指數（EASI）上至少為10分的評分，該評分範圍為0至72，分數越高表示疾病越嚴重； b.在視覺類比量表上至少為30 mm的瘙癢評分，該評分範圍為0（無瘙癢）至100 mm（能想像到的最癢的情況）； c.在靜態研究者全域評估（sIGA）上至少為3分的評分，該評分範圍為0（無疾病）至4（嚴重疾病）； d.受影響的BSA或PSAI ≥ 5%。排除標準

1. 伴有異位性皮膚炎的活動性皮膚疾病患者。 2. 具有研究人員認為應禁止參與該研究的嚴重醫療狀況的患者。 3. 具有Netherton綜合征或引起表皮屏障缺陷的其他遺傳性皮膚病的個體。 4. 免疫功能低下或具有惡性病史的任何個體。這些資訊將從患者口頭收集，同時從患者獲得病史，而不會進行進一步測試如HIV測試。 5. 具有會干擾遵守該研究方案的能力的精神病史或者酒精或藥物濫用史的個體。 6. 任一手臂上皮膚的任何明顯破裂或開裂，包括提示活動性感染或易感染性增加的皮膚嚴重脫落或者具有開放性或滲出性傷口的皮膚。 7. 正在參與另一項調查性試驗。 8. 在治療就診或活動性感染之前使用研究人員認為會損害患者耐受治療的能力的任何口服或局部用抗生素長達四周。 9. 在治療就診的四周內使用任何全身免疫抑制療法（例如CsA、MTX等）。 10. 參與者具有或處於研究人員認為可使患者具有重大風險或可顯著干擾患者參與該研究的狀況或情況。 11. 具有人工心臟瓣膜、起搏器、血管內導管或其他外來或假體裝置的個體。 12. 食品或藥物相關的嚴重類過敏或過敏反應史。 13. 妊娠或哺乳。 14. 癲癇、嚴重神經疾病、腦血管病或局部缺血的病史或存在。 15. 需要藥物治療的心肌梗死或心律失常的病史或存在。 16. 無法完成紙質問卷的患者。 17. 臨床上重要的實驗室異常。 18. 經治療或未經治療的任何器官系統的惡性病史。

主要研究終點：基線與第12周之間的濕疹面積和嚴重程度指數的改善百分比。

次要研究終點：第12周和每個時間點（第4、8和12周）的次要終點包括以下方面與基線相比的改善 1. EASI評分； 2. 異位性皮膚炎評分（SCORAD），範圍為0至103，分數越高表示疾病越嚴重； 3. sIGA評分，範圍為0至4； 4. 受異位性皮膚炎影響的體表面積； 5. 瘙癢口頭等級評定量表，其描述每日從0（無）至10（非常嚴重）的瘙癢強度； 6. 睡眠障礙視覺類比量表，每日從0（無睡眠障礙）至10（完全無法入睡）； 7. 瘙癢視覺類比評分、EASI和SCORAD評分改善25%、50%和75%的患者比例； 8. 在sIGA和瘙癢口頭等級評定量表上改善至少2分的患者比例。

其他療效終點：血清細胞激素（包括TARC/CCL17、IFN-γ、TNF-α、IL-18、IL-6、IL-1β）在基線與第12周之間的變化百分比。實施例 5 ：口服製劑

為了製備用於口服遞送的藥學組成物，將等重量的示例性化合物1與等重量的玉米油（例如，25 mg、50 mg、100 mg、200 mg）混合。將該混合物引入到適合口服給藥的膠囊中的口服劑量單位中。

在一些情況下，將100 mg本文所述的化合物與750 mg澱粉混合。將該混合物引入到適合口服給藥的口服劑量單位如硬明膠膠囊中。實施例 6 ：舌下（硬錠劑）製劑

為了製備用於頰部遞送的藥學組成物，如硬錠劑，將一份本文所述的化合物與4至5份糖粉混合，該糖粉與適量的低度玉米糖漿、蒸餾水和薄荷提取物混合。將該混合物輕輕摻混並倒入模具中以形成適合頰部給藥的錠劑。實施例 7 ：吸入組成物

為了製備用於吸入遞送的藥學組成物，將20 mg本文所述的化合物與50 mg無水檸檬酸和100 mL的0.9%氯化鈉溶液混合。將該混合物引入到適合吸入給藥的吸入遞送單元如霧化器中。

雖然本文已經顯示並描述了本發明的較佳具體例，但是對本領域技術人員而言明顯的是，這些具體例僅作為示例提供。在不背離本發明的情况下，本領域技術人員現在將會想到許多變化、改變和替代。應當理解，在實施本發明時，可以採用本文所述的本發明具體例的各種替代方案。旨在用下列申請專利範圍限定本發明的範圍，由此也涵蓋這些申請專利範圍之範疇內的方法和結構及其等效物。

無

本發明的新穎特徵在隨附之申請專利範圍中具體闡述。藉由參考以下對在其中利用到本發明原理的說明性具體例加以闡述的實施方式和附隨圖式，將會更理解本發明的特徵和優點，在附圖中：

圖1示出了在動物研究過程中飼喂各劑量化合物1的各組小鼠的體重記錄。p 值為通過Studentt -檢驗與組N比較而得。（*p ＜0.05；**p ＜0.01；***p ＜0.001）

圖2A-E示出了代表性小鼠背部上的說明性皮膚狀況變化。圖2A示出了組N小鼠的照片，圖2B示出了致敏組（組O）小鼠的照片。圖2C示出了組L小鼠的照片（向該小鼠飼喂低劑量的示例性化合物1 ）。圖 2D示出了組M小鼠的照片（向該小鼠飼喂中等劑量的示例性化合物1）。圖2E示出了組H小鼠的照片（向該小鼠飼喂高劑量的示例性化合物1）。p 值為通過Studentt -檢驗與組N比較而得。（*p ＜0.05；**p ＜0.01；***p ＜0.001）

圖3A-C示出了各組皮膚狀況的說明性研究結果：相對經表皮失水（3A）、相對濕度（3B）、pH（3C）。p 值為通過Studentt -檢驗與組N比較而得。（*p ＜0.05；**p ＜0.01；***p ＜0.001）

圖4A-G示出了來自各組的皮膚樣本的H&E染色結果。圖4A：組N，4B：組O，4C：組L，4D：組M，4E：組H。圖4F提供了各組的表皮計數。圖4G提供了各組的真皮計數。p 值為通過Studentt -檢驗與組N比較而得。（*p ＜0.05；**p ＜0.01；***p ＜0.001）

圖5A-F示出了來自各組的皮膚樣本的嗜酸性粒細胞染色結果。5A：組N，5B：組O，5C：組L，5D：組M，5E：組H。圖5F提供了各組的嗜酸性粒細胞計數。p 值為通過Studentt -檢驗與組N比較而得。（*p ＜0.05；**p ＜0.01；***p ＜0.001）

圖6A-F示出了來自各組的皮膚樣本的TSLP染色結果。6A：組N，6B：組O，6C：組L，6D：組M，6E：組H。圖6F提供了各組的TSLP計數。p 值為通過Studentt -檢驗與組N比較而得。（*p ＜0.05；**p ＜0.01；***p ＜0.001）

圖7A-F示出了來自各組的皮膚樣本的朗格漢斯細胞染色（Langerin stain ）結果。7A：組N，7B：組O，7C：組L，7D：組M，7E：組H。圖7F提供了各組的朗格漢斯細胞計數。p 值為通過Studentt -檢驗與組N比較而得。（*p ＜0.05；**p ＜0.01；***p ＜0.001）

圖8A/B示出了來自各組的血清免疫球蛋白和OVA專一性免疫球蛋白計數的結果。8A：總IgE與天數。8B：專一性IgE與天數。p 值為通過Studentt -檢驗與組N比較而得。（*p ＜0.05；**p ＜0.01；***p ＜0.001）

圖9A/B示出了來自各組的遲髮型致敏反應的結果。圖9A示出了耳厚度的測量值。圖9B示出了足厚度。p 值為通過Studentt -檢驗與組N比較而得。（*p ＜0.05；**p ＜0.01；***p ＜0.001）

圖10A-D示出了用PHA、ConA和OVA刺激24小時的脾細胞的激素分泌結果。p 值為通過Studentt -檢驗與組N比較而得。（*p ＜0.05；**p ＜0.01；***p ＜0.001）

圖11A-D示出了用PHA、ConA和OVA刺激72小時的脾細胞的激素分泌結果。p 值為通過Studentt -檢驗與組N比較而得。（*p ＜0.05；**p ＜0.01；***p ＜0.001）

圖12A-D示出了用PHA、ConA和OVA刺激24小時的淋巴細胞的細胞激素分泌結果。p 值為通過Studentt -檢驗與組N比較而得。（*p ＜0.05；**p ＜0.01；***p ＜0.001）

圖13A-D示出了用PHA、ConA和OVA刺激72小時的淋巴細胞的細胞激素分泌結果。p 值為通過Studentt -檢驗與組N比較而得。（*p ＜0.05；**p ＜0.01；***p ＜0.001）

無

Claims

一種治療有效量的環己烯酮化合物的用途，其用於製備供治療或減輕個體中異位性皮膚炎的症狀的藥物，該環己烯酮化合物具有以下結構，或其藥學上可接受的鹽：
其中X和Y中的每一個獨立地為氧、NR₅或硫；R為氫或C(=O)C₁-C₈烷基；R₁、R₂和R₃中的每一個獨立地為氫、任選取代的甲基或(CH₂)_m-CH₃；R₄為NR₅R₆、OR₅、OC(=O)R₇、C(=O)OR₅、C(=O)R₅、C(=O)NR₅R₆、鹵素、5或6元內酯、C₁-C₈烷基、C₂-C₈烯基、C₂-C₈炔基、芳基、葡糖基，其中該5或6元內酯、C₁-C₈烷基、C₂-C₈烯基、C₂-C₈炔基、芳基和葡糖基任選地被一個或多個取代基取代，該取代基選自NR₅R₆、OR₅、OC(=O)R₇、C(=O)OR₅、C(=O)R₅、C(=O)NR₅R₆、C₁-C₈烷基、C₂-C₈烯基、C₂-C₈炔基、C₃-C₈環烷基和C₁-C₈鹵代烷基；R₅和R₆中的每一個獨立地為氫或C₁-C₈烷基；R₇為C₁-C₈烷基、OR₅或NR₅R₆；m=1-12；且n=1-12。
如請求項1所述的用途，其中所述減輕異位性皮膚炎的症狀包含皮膚炎症減輕的表現、皮膚生理功能恢復、皮膚保濕效果恢復、發炎皮膚的表皮和真皮層厚度減小，或嗜酸性白細胞和朗格漢斯細胞浸潤現象減少。
如請求項1所述的用途，其中所述減輕異位性皮膚炎的症狀是所述個體中的TSLP或總IgE濃度降低、IFN-γ或IL-12濃度升高，或IL-4或TNF-_α濃度降低。
如請求項1所述的用途，其中所述環己烯酮化合物或其藥學上可接受的鹽通過口服、腸胃外或靜脈內施用。
如請求項1所述的用途，其中所述環己烯酮化合物或其藥學上可接受的鹽通過注射施用。
如請求項1所述的用途，其中所述環己烯酮化合物或其藥學上可接受的鹽通過口服施用。
如請求項1所述的用途，其中所述個體是人。
如請求項1所述的用途，其中所述化合物從牛樟芝中分離，或以合成或半合成方式製備。
如請求項1所述的用途，其中R為氫、C(=O)C₃H₈、C(=O)C₂H₅或C(=O)CH₃。
如請求項1所述的用途，其中R₁、R₂和R₃中的每一個獨立地為氫、甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、庚基或辛基。
如請求項10所述的用途，其中R₁為氫或甲基。
如請求項10所述的用途，其中R₂為氫或甲基。
如請求項1所述的用途，其中R₄為鹵素、NH₂、NHCH₃、N(CH₃)₂、OCH₃、OC₂H₅、C(=O)CH₃、C(=O)C₂H₅、C(=O)OCH₃、C(=O)OC₂H₅、C(=O)NHCH₃、C(=O)NHC₂H₅、C(=O)NH₂、OC(=O)CH₃、OC(=O)C₂H₅、OC(=O)OCH₃、OC(=O)OC₂H₅、OC(=O)NHCH₃、OC(=O)NHC₂H₅或OC(=O)NH₂。
如請求項1所述的用途，其中R₄為C₂H₅C(CH₃)₂OH、C₂H₅C(CH₃)₂OCH₃、CH₂COOH、C₂H₅COOH、CH₂OH、C₂H₅OH、CH₂Ph、C₂H₅Ph、CH₂CH=C(CH₃)(CHO)、CH₂CH=C(CH₃)(C(=O)CH₃)、5或6元內酯、芳基或葡糖基，其中該5或6元內酯、芳基和葡糖基任選地被一個或多個取代基取代，該取代基選自NR₅R₆、OR₅、OC(=O)R₇、C(=O)OR₅、C(=O)R₅、C(=O)NR₅R₆、C₁-C₈烷基、C₂-C₈烯基、C₂-C₈炔基、C₃-C₈環烷基和C₁-C₈鹵代烷基。
如請求項1所述的用途，其中R₄為任選地被一個或多個取代基取代的C₁-C₈烷基，該取代基選自NR₅R₆、OR₅、OC(=O)R₇、C(=O)OR₅、C(=O)R₅、C(=O)NR₅R₆、C₁-C₈烷基、C₂-C₈烯基、C₂-C₈炔基、C₃-C₈環烷基和C₁-C₈鹵代烷基。
如請求項15所述的用途，其中R₄為CH₂CH=C(CH₃)₂。
如請求項1所述的用途，其中所述化合物為