CN110988193B - 一种检测水产品中晚期糖基化终末产物的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提出一种利用液相色谱串联质谱检测水产品中晚期糖基化终末产物(AGEs)的方法，包括如下步骤，步骤1：AGEs的提取；步骤2：制作标准曲线：以标准品的浓度值为横坐标，以标准品面积*(内标品浓度/内标品面积)作为纵坐标绘制标准曲线，得到方程；步骤3：将处理后的样品进行HPLC‑MS/MS检测，检测模式为MRM，得到样品中AGEs峰面积，求得样品中AGEs浓度。本发明目的在于建立一种液相色谱串联质谱方法，该方法可一次性检测3种AGEs(羧甲基赖氨酸CML、羧乙基赖氨酸CEL、甲基乙二醛氢咪唑酮MG‑H1)，具有分离度好、线性关系好、线性范围广等优点。

Description

一种检测水产品中晚期糖基化终末产物的方法
技术领域
本发明属于食品有害物质检测领域，尤其涉及一种检测水产品中晚期糖基化终末产物的方法。
背景技术
晚期糖基化终末产物(Advanced Glycation End-products，AGEs)是在非酶条件下，蛋白质、脂类或核酸等大分子物质的游离氨基与还原糖的醛基发生一系列反应生成的一种稳定化合物。医学研究结果表明，AGEs与人类诸多疾病的发生有密切关系，而膳食摄入是体内AGEs的重要来源。由于食品样难处理和AGEs种类繁多，结构复杂等原因，对于食品中AGEs的检测缺乏通用有效的方法。目前国内外测定AGEs的方法分为仪器法和免疫化学法，前者主要有荧光光谱法和色谱分析法，后者主要是酶联免疫法(ELISA)。荧光光谱法只适用于测定具有荧光性AGEs和单个AGEs组分的定量，酶联免疫法ELISA法对抗体的特异性和样品基质的特异性要求很高。色谱分析法具有高效、高灵敏度、高分辨率的特点，在检测生物样品和食品中的AGEs时与质谱仪串联使用，其灵敏度、选择性和速度会大大提高。色谱分析法中气相色谱-质谱法(GC-MS)需要复杂的衍生过程，因此液相色谱-质谱-质谱法(LC-MS/MS)成为了广大科研工作者的首选。现有技术中利用LC-MS/MS检测AGEs的方法仅能检测一种或两种AGEs组分，效率较低。
发明内容
本发明针对上述的技术问题，提出一种一次性检测水产品中3种AGEs组分(羧甲基赖氨酸CML、羧乙基赖氨酸CEL、甲基乙二醛氢咪唑酮MG-H1)的方法，进而对样品中AGEs做出较为全面准确的分析。
为了达到上述目的，本发明采用的技术方案为：
一种检测水产品中晚期糖基化终末产物的方法，包括以下步骤：
步骤1：AGEs的提取；
1.1将样品溶于硼酸盐缓冲液和硼氢化钠溶液，防止后续处理过程导致样品发生还原反应产生AGEs；
1.2将样品进行酸解，使与蛋白结合的AGEs解离，转变成游离态AGEs；
1.3向样品中加入内标品以校正误差；
1.4将样品过固相萃取柱，纯化AGEs；
1.5将样品过滤膜以除掉杂质；
步骤2：制作标准曲线：以标准品的浓度值为横坐标，以标准品面积*(内标品浓度/内标品面积)作为纵坐标绘制标准曲线，得到方程；
步骤3：将处理后的样品进行HPLC-MS/MS检测，检测模式为MRM，得到样品中AGEs峰面积，求得样品中AGEs浓度。
作为优选，步骤1.1为每克冻干样品中加入20-25mL0.2 mol/LpH9.2的硼酸盐缓冲液和4-5mL2 mol/L用0.1mol/L氢氧化钠溶液配制的硼氢化钠溶液，4℃条件下反应8-10h。
作为优选，步骤1.2酸解条件为每克冻干样品中加入40-45mL6mol/LHCl，110℃酸解24-26h，氮吹浓缩至近干。
作为优选，步骤1.4为用3-6mL甲醇活化MCX固相萃取柱，用3-6mL含2％甲酸的水溶液平衡MCX固相萃取柱，将样品溶液过MCX固相萃取柱，用3-6mL含2％甲酸的水溶液和3-6mL甲醇依次除杂，真空抽干后用2-3mL含5％氨水的甲醇溶液洗脱，真空抽干后收集洗脱液，并用氮吹浓缩至近干。
作为优选，液相色谱条件为：
色谱柱：BEH Amide 100mm×2.1mm 1.7μm；
流动相A：含有0.25mol/L乙酸铵和1％甲酸的水溶液；
流动相B：乙腈；
流速：0.3mL/min；
柱温：35℃；
进样体积：3μL；
梯度洗脱程序：
采用上述的梯度洗脱使CML、CEL、MG-H1具有极短的检测时长，极好的分离效果，保留时间分别为8.23min、7.90min、6.53min，有利于提高分析定量的准确度和精确性；而且在此洗脱梯度下，分析物保留值适宜且峰形较好。
作为优选，质谱条件为：
离子源：电离子喷雾；
扫描方式：正离子扫描；
检测方式：MRM；
干燥器温度：350℃；
干燥气流量：10L/min；
雾化器压力：20psi；
毛细管电压：4000V；
碎裂电压：135V。
作为优选，确定m/z＝205为CML的母离子，选择子离子m/z＝130为CML的定性离子，以子离子m/z＝84为CML的定量离子；确定m/z＝209为CML-d4的母离子，选择子离子m/z＝88为CML-d4的定量离子；确定m/z＝219为CEL的母离子，选择子离子m/z＝130为CEL的定性离子，以子离子m/z＝84为CEL的定量离子；确定m/z＝223为CEL-d4的母离子，选择子离子m/z＝88为CEL-d4的定量离子；确定m/z＝229为MG-H1的母离子，选择子离子m/z＝114为MG-H1的定性离子，以子离子m/z＝70为MG-H1的定量离子；确定m/z＝232为MG-H1-d3的母离子，选择子离子m/z＝70为MG-H1-d3的定量离子。
作为优选，样品为鱼类制品，其CML的标准曲线为Y＝9.88214X，CEL的标准曲线为Y＝17.4349X，MG-H1的标准曲线为Y＝9.38507X，其中标准品浓度的范围为0.01～0.20μg/mL，X为标准品的浓度值，Y为标准品面积*(内标品浓度/内标品面积)。
与现有技术相比，本发明的优点和积极效果在于：
1.该方法可一次性检测CML、CEL、MG-H1 3种AGEs，且3种AGEs得到了较好的分离，保留时间分别为8.23min、7.90min、6.53min。
2.该法通过优化色谱柱、流动相、流动梯度等液相色谱条件，缩短了检测时间，3种AGEs可在10min内完成检测，提高了检测效率；
3.该法线性关系好，线性范围广，CML、CEL、MG-H1在0-0.2μg/mL范围内具有较好的线性相关性，R2分别为0.999、0.996、0.997。
附图说明
图1为本发明CML的标准曲线；
图2为本发明CEL的标准曲线；
图3为本发明MG-H1的标准曲线；
图4为本发明章鱼片中CML离子色谱图；
图5为本发明章鱼片中CEL离子色谱图；
图6为本发明章鱼片中MG-H1离子色谱图；
具体实施方式
为了更好的理解本发明，下面结合附图和实施例做具体说明。
实施例：
1、仪器和试剂
6410Triple Quad质谱仪美国Agilent Technologies
1260Infinity液相色谱仪美国Agilent Technologies
分析天平北京赛多利斯科学仪器有限公司
XW-80A微型涡旋混合仪上海沪西分析仪器厂有限公司
KQ-300VDE型双频数控超声波清洗器昆山市超声仪器有限公司
N-20多功能氮吹仪山东云网数据科技有限公司
BCD-190TMPK冰箱青岛海尔股份有限公司
CML标准品、CEL标准品、CML-d4标准品、CEL-d4标准品加拿大Toronto ResearchChemicals
MG-H1标准品美国International Laboratory
MG-H1-d3标准品美国BIOBERRY
Poly-Sery CNW MCX固相萃取柱上海安谱实验科技股份有限公司
LC-CQ-24F固相萃取装置上海力辰邦西仪器科技有限公司
硼酸、硼砂、硼氢化钠、氢氧化钠、盐酸、甲醇、甲酸、氨水国药集团化学试剂有限公司
安瓿瓶、0.22μm滤膜、2.5mL注射器、2mL离心管、5mL离心管、进样瓶青岛金贝欧实验科技用品有限公司
2、提取AGEs
2.1、取20mg冻干样品于安瓿瓶中，加入0.4mL0.2mol/L pH9.2的硼酸盐缓冲液和0.08mL2mol/L用0.1mol/L氢氧化钠溶液配制的硼氢化钠溶液，4℃条件下反应8h；
2.2、加入0.8mL6mol/L HCl，110℃酸解24h；
2.3、氮吹浓缩至近干后加4mL超纯水复溶；
2.4、取1mL复溶液于2mL离心管，加入20μl 5μg/mLCML-d4、CEL-d4、MG-H1-d3标准品溶液后过0.22μm滤膜；
2.5、用3mL甲醇活化MCX固相萃取柱，用3mL含2％甲酸的水溶液平衡MCX固相萃取柱，将样品溶液过MCX固相萃取柱，用3mL含2％甲酸的水溶液和3mL甲醇依次除杂，真空抽干后用2mL含5％氨水的甲醇溶液洗脱，真空抽干后收集洗脱液，并用氮吹浓缩至近干后溶于2mL超纯水；
2.6、取1mL复溶液过0.22μm滤膜，取700-1000μL溶液于进样瓶中。
3、制作标准曲线
3.1、标准液配置
用5μg/mL CML-d4、5μg/mL CEL-d4、5μg/mL MG-H1-d3、5μg/mL CML、5μg/mL CEL、5μg/mL MG-H1配制2mL含0.05μg/mL内标品的0.01、0.05、0.10、0.15、0.20μg/mL标准品溶液，标准溶液配制条件如表1。
表1标准溶液配制条件
3.2、以标准品的浓度值为横坐标，以标准品面积*(内标品浓度/内标品面积)作为纵坐标绘制标准曲线，得到方程。
如图1-3分别为CML标准曲线、CEL标准曲线、MG-H1标准曲线，从图中可以看出CML、CEL、MG-H1在0-0.2μg/mL范围内具有较好的线性相关性，CML的标准曲线为Y＝9.88214X，R2为0.999；CEL的标准曲线为Y＝17.4349X，R2为0.996；MG-H1的标准曲线为Y＝9.38507X，R2为0.997
4、HPLC-MS/MS检测
4.1、LC-MS条件：
柱型：BEH Amide(100mm×2.1mm；1.7μm)；
柱温：35℃；
流动相A：含有0.25mol/L乙酸铵和1％甲酸的水溶液；
流动相B：乙腈；
流速：0.3mL/min；
进样体积：3uL；
洗脱阶梯如表2。
表2梯度洗脱条件
4.2、质谱条件：
离子源：电离子喷雾；
扫描方式：正离子扫描；
检测方式：MRM；
干燥器温度：350℃；
干燥气流量：10L/min；
雾化器压力：20psi；
毛细管电压：4000V；
碎裂电压：135V。
4.3、MRM质谱参数如表3：
表3 MRM质谱参数
表中定量离子对标注“*”。
4.4、将处理后的样品进行HPLC-MS/MS检测，检测模式为MRM，得到样品中AGEs峰面积，求得样品中AGEs浓度。
如图4为章鱼片中CML离子色谱图，峰面积为1593.097，根据标准曲线求得CML浓度为0.133μg/mL；图5为章鱼片中CEL离子色谱图，峰面积为2751.878，根据标准曲线求得CML浓度为0.070μg/mL；图6为章鱼片中MG-H1离子色谱图，峰面积为28154.414，根据标准曲线求得CML浓度为0.571μg/mL。
以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非是对本发明作其它形式的限制，任何熟悉本专业的技术人员可能利用上述揭示的技术内容加以变更或改型为等同变化的等效实施例应用于其它领域，但是凡是未脱离本发明技术方案内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与改型，仍属于本发明技术方案的保护范围。

Claims (8)

1.一种检测水产品中晚期糖基化终末产物的方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤1：AGEs的提取：
1.1将样品溶于硼酸盐缓冲液和硼氢化钠溶液，防止后续处理过程导致样品发生还原反应产生AGEs；
1.2将样品进行酸解，使与蛋白结合的AGEs解离，转变成游离态AGEs；
1.3向样品中加入内标品以校正误差；
1.4将样品过固相萃取柱，纯化AGEs，其中采用甲醇活化MCX固相萃取柱，用含5%氨水的甲醇溶液洗脱；
1.5将样品过滤膜以除掉杂质；
步骤2：制作标准曲线：以标准品的浓度值为横坐标，以标准品面积*（内标品浓度/内标品面积）作为纵坐标绘制标准曲线，得到方程；
步骤3：将处理后的样品进行HPLC-MS/MS检测，检测模式为MRM，得到样品中AGEs峰面积，求得样品中AGEs浓度；
液相色谱条件为：
色谱柱：BEH Amide 100mm×2.1mm 1.7μm；
流动相A：含有0.25mol/L乙酸铵和1%甲酸的水溶液；
流动相B：乙腈；
梯度洗脱程序：
时间（min） 0 1 6.5 9 10 A 15% 15% 35% 35% 15% B 85% 85% 65% 65% 85%
；
AGEs组分包括羧甲基赖氨酸CML、羧乙基赖氨酸CEL、甲基乙二醛氢咪唑酮MG-H1三种。
2.根据权利要求1所述的一种检测水产品中晚期糖基化终末产物的方法，其特征在于：所述步骤1.1为每克冻干样品中加入20-25mL 0.2 mol/L pH9.2的硼酸盐缓冲液和4-5mL 2mol/L用0.1mol/L氢氧化钠溶液配制的硼氢化钠溶液，4℃条件下反应8-10h。
3.根据权利要求1所述的一种检测水产品中晚期糖基化终末产物的方法，其特征在于：所述步骤1.2中酸解条件为每克冻干样品中加入40-45mL 6mol/L HCl，110℃酸解24-26h，氮吹浓缩至近干。
4.根据权利要求1所述的一种检测水产品中晚期糖基化终末产物的方法，其特征在于：所述步骤1.3中的内标品为CML-d4、CEL-d4、MG-H1-d3。
5.根据权利要求1所述的一种检测水产品中晚期糖基化终末产物的方法，其特征在于：所述步骤1.4为用3-6mL甲醇活化MCX固相萃取柱，用3-6mL含2%甲酸的水溶液平衡MCX固相萃取柱，将样品溶液过MCX固相萃取柱，用3-6mL含2%甲酸的水溶液和3-6mL甲醇依次除杂，真空抽干后用2-3mL含5%氨水的甲醇溶液洗脱，真空抽干后收集洗脱液，并用氮吹浓缩至近干。
6.根据权利要求1所述的一种检测水产品中晚期糖基化终末产物的方法，其特征在于，所述步骤3中液相色谱条件还包括流速：0.3mL/min；柱温：35℃；进样体积：3μL。
7.据权利要求1所述的检测水产品中晚期糖基化终末产物的方法，其特征在于，所述步骤3中质谱条件为：
离子源：电离子喷雾；
扫描方式：正离子扫描；
检测方式：MRM；
干燥器温度：350℃；
干燥气流量：10L/min;
雾化器压力：20psi;
毛细管电压：4000V；
碎裂电压：135V。
8.根据权利要求1所述的检测水产品中晚期糖基化终末产物的方法，其特征在于：样品为鱼类制品，其CML的标准曲线为Y＝9.88214X，CEL的标准曲线为Y＝17.4349X，MG-H1的标准曲线为Y＝9.38507X，其中标准品浓度的范围为0.01～0.20μg/mL，X为标准品的浓度值，Y为标准品面积*（内标品浓度/内标品面积）。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112881581B (zh) * 2021-01-15 2022-04-01 中国海洋大学 一种定量检测水产品中吡咯素和甲基乙二醛氢咪唑酮的方法
CN113702546A (zh) * 2021-09-09 2021-11-26 浙江工商大学 一种检测乳制品中多种晚期糖基化终末产物的方法
CN115015429A (zh) * 2022-06-20 2022-09-06 哈尔滨商业大学 一种同步检测黄精中晚期糖基化终末产物的方法
CN117907461A (zh) * 2023-12-11 2024-04-19 中国农业科学院农产品加工研究所 肉制品中晚期糖基化终末产物和杂环胺的同时定量检测方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104634897A (zh) * 2015-02-14 2015-05-20 中国烟草总公司郑州烟草研究院 一种检测卷烟主流烟气中晚期糖基化终末产物的方法
CN106124641A (zh) * 2016-05-13 2016-11-16 中华全国供销合作总社杭州茶叶研究所 一种同步检测绿茶中羧甲基赖氨酸和羧乙基赖氨酸的方法
JP2017049024A (ja) * 2015-08-31 2017-03-09 学校法人東海大学 最終糖化産物分析のための試料の調製方法及び最終糖化産物の分析方法

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20030013746A1 (en) * 1996-09-10 2003-01-16 University Of Kansas Medical Center. Advanced glycation end-product intermediaries and post-amadori inhibition

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104634897A (zh) * 2015-02-14 2015-05-20 中国烟草总公司郑州烟草研究院 一种检测卷烟主流烟气中晚期糖基化终末产物的方法
JP2017049024A (ja) * 2015-08-31 2017-03-09 学校法人東海大学 最終糖化産物分析のための試料の調製方法及び最終糖化産物の分析方法
CN106124641A (zh) * 2016-05-13 2016-11-16 中华全国供销合作总社杭州茶叶研究所 一种同步检测绿茶中羧甲基赖氨酸和羧乙基赖氨酸的方法

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Analysis of advanced glycation endproducts in selected food items by ultraperformance liquid chromatography tandem mass spectrometry:presentation of a dietary AGE database;Jean L.J.M. Scheijen 等;Food Chemistry;第190卷;1145-1150 *
细胞膜固相色谱法筛查奶粉中AGEs特异结合成分;朱毛毛 等;食品工业科技;第39卷(第22期);257-261,269 *
绿茶中两种晚期糖基化终末产物同步检测研究;刘婧 等;食品工业;第38卷(第01期);398-302 *

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