CN114924003B - 一种氟尿嘧啶口服乳中氟尿嘧啶含量的检测方法 - Google Patents
一种氟尿嘧啶口服乳中氟尿嘧啶含量的检测方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN114924003B CN114924003B CN202210522403.7A CN202210522403A CN114924003B CN 114924003 B CN114924003 B CN 114924003B CN 202210522403 A CN202210522403 A CN 202210522403A CN 114924003 B CN114924003 B CN 114924003B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- fluorouracil
- sample
- solution
- content
- oral
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N Fluorouracil Chemical compound FC1=CNC(=O)NC1=O GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 109
- 229960002949 fluorouracil Drugs 0.000 title claims abstract description 109
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 37
- 239000008267 milk Substances 0.000 title claims abstract description 36
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 title claims abstract description 36
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 title claims abstract description 36
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims abstract description 40
- OFBQJSOFQDEBGM-UHFFFAOYSA-N Pentane Chemical compound CCCCC OFBQJSOFQDEBGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 35
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims abstract description 17
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 claims abstract description 12
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims abstract description 9
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 claims abstract description 9
- 238000007865 diluting Methods 0.000 claims abstract description 6
- 238000010812 external standard method Methods 0.000 claims abstract description 4
- 239000000523 sample Substances 0.000 claims description 50
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 21
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 claims description 21
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- 239000013558 reference substance Substances 0.000 claims description 14
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical group [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 12
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 claims description 7
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 5
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 5
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 claims description 5
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 claims description 4
- 238000004885 tandem mass spectrometry Methods 0.000 claims description 4
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 3
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims description 3
- 238000009210 therapy by ultrasound Methods 0.000 claims description 3
- 239000003643 water by type Substances 0.000 claims description 3
- 238000000889 atomisation Methods 0.000 claims description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 2
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 claims description 2
- 238000004704 ultra performance liquid chromatography Methods 0.000 claims description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 claims 1
- 238000001195 ultra high performance liquid chromatography Methods 0.000 claims 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 abstract description 5
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 abstract description 2
- 238000004895 liquid chromatography mass spectrometry Methods 0.000 abstract description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 11
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 11
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 11
- 239000000463 material Substances 0.000 description 9
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 7
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 7
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 238000002203 pretreatment Methods 0.000 description 4
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 3
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 3
- 239000004519 grease Substances 0.000 description 3
- 238000003672 processing method Methods 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 3
- 239000012086 standard solution Substances 0.000 description 3
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 3
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 3
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 3
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 2
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 description 2
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 2
- 230000022131 cell cycle Effects 0.000 description 2
- 230000036571 hydration Effects 0.000 description 2
- 238000006703 hydration reaction Methods 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 2
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 239000012085 test solution Substances 0.000 description 2
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000018199 S phase Effects 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 229960000074 biopharmaceutical Drugs 0.000 description 1
- 239000012490 blank solution Substances 0.000 description 1
- 231100000357 carcinogen Toxicity 0.000 description 1
- 239000003183 carcinogenic agent Substances 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 238000003113 dilution method Methods 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- ODKNJVUHOIMIIZ-RRKCRQDMSA-N floxuridine Chemical class C1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(F)=C1 ODKNJVUHOIMIIZ-RRKCRQDMSA-N 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 1
- 238000010829 isocratic elution Methods 0.000 description 1
- 238000012417 linear regression Methods 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 1
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 1
- 230000004147 pyrimidine metabolism Effects 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 230000000630 rising effect Effects 0.000 description 1
- 238000005185 salting out Methods 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 229910001415 sodium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 230000009897 systematic effect Effects 0.000 description 1
- 229910021642 ultra pure water Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012498 ultrapure water Substances 0.000 description 1
- 238000000870 ultraviolet spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
- G01N30/06—Preparation
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/50—Conditioning of the sorbent material or stationary liquid
- G01N30/52—Physical parameters
- G01N30/54—Temperature
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/62—Detectors specially adapted therefor
- G01N30/72—Mass spectrometers
Landscapes
- Physics & Mathematics (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Other Investigation Or Analysis Of Materials By Electrical Means (AREA)
Abstract
本发明提供一种氟尿嘧啶口服乳中氟尿嘧啶含量的检测方法，涉及药物分析技术领域，所述方法采用超高效液相三重四级杆串联质谱法测定，所述方法中还包括对氟尿嘧啶口服乳的样品处理方法。所述方法包括如下步骤：用破乳剂对氟尿嘧啶口服乳样品进行破乳，得到破乳后样品；将所述破乳后样品与正戊烷混合振摇，进行萃取，得到待测样品储备液，用流动相稀释至合适浓度得到待测样品溶液，然后进行UPLC‑QQQ‑MS液质联用检测，采用外标法定量。本发明适用于氟尿嘧啶口服乳制剂中氟尿嘧啶的含量测定，所述方法对该制剂现有检测技术存在的基质干扰严重问题以及专属性差、准确性低等问题进行了优化改进，所述方法具有专属性强，准确性高，方法重现性好、操作简便的优点。
Description
技术领域
本发明涉及药物分析技术领域，具体涉及一种氟尿嘧啶口服乳中氟尿嘧啶含量的检测方法，所述检测方法采用超高效液相三重四级杆串联质谱法测定，所述检测方法中还包括对氟尿嘧啶口服乳的样品处理方法。
背景技术
氟尿嘧啶(5-Fluorouracil，5-FU)属于抑制嘧啶类代谢的抗肿瘤药，是第一个人工设计、合成并在临床获得广泛应用的抗嘧啶类药物。本品需在体内经过酶转化成为5-氟脱氧尿嘧啶核苷酸才能发挥细胞毒活性，主要作用于细胞周期的S期，为非典型细胞周期特异性药。5-FU不仅对DNA有抑制作用，对RNA也有一定的抑制作用。目前主要用来治疗消化道癌，是世界卫生组织(WHO)国际癌症研究机构划定为三类致癌物。
氟尿嘧啶的化学结构如下所示：
氟尿嘧啶口服乳为均质乳状液，若直接进行HPLC测定则植物油的干扰严重，无法准确定量。国家药品标准化学药品地方标准上升国家标准第七册及第十六册、国家药典委员会国药典化发[2012]571号发布的关于氟尿嘧啶口服乳含量测定方法为紫外可见分光光度法。该方法前处理步骤比较繁琐，前处理过程中用到的破乳剂对含量测定仍存在一定的基质干扰，且上述方法的专属性不好，影响结果准确性，不利于对氟尿嘧啶口服乳的质量进行严格把控。
发明内容
(一)解决的技术问题
针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种准确度高、专属性好的UPLC-QQQ-MS法测定氟尿嘧啶口服乳中氟尿嘧啶含量检测方法，所述检测方法中还包括对氟尿嘧啶口服乳样品的处理方法。本发明提供的样品处理方法简便快速、没有基质干扰问题，且用于UPLC-QQQ-MS法时，可实现快速高通量的氟尿嘧啶的定量检测。
(二)技术方案
为实现以上目的，本发明通过以下技术方案予以实现：
一方面，本发明提供了氟尿嘧啶口服乳样品处理方法，包括以下步骤：将破乳剂和氟尿嘧啶口服乳混合并对混合物依次进行超声和振摇，振摇后得到的混合溶液为破乳后样品；将破乳后样品与正戊烷混合在分液漏斗中进行振摇后，静置，下层水溶液即为待测样品储备液；进一步用流动相流动相为3mmol/L的三乙胺溶液：乙腈体积比＝98:2的溶液稀释得到待测样品溶液。
优选地，所述破乳剂为饱和氯化钠溶液；所述饱和氯化钠溶液与氟尿嘧啶口服乳样品的混合体积比为8～12mL：3～7mL。
优选地，所述超声的功率为100～150W，时间为10～20min；所述振摇的转速为130～170rpm，时间为35～45min。
优选地，所述破乳后样品与正戊烷的混合体积比为1mL：35～33mL。
优选地，所述破乳后样品于正戊烷在分液漏斗中振摇的次数为80～120次，时间为4～6min。
优选地，所述待测样品溶液浓度为100ng/mL。
另一方面，本发明还提供了一种氟尿嘧啶口服乳中氟尿嘧啶含量的检测方法，所述检测方法采用超高效液相三重四级杆串联质谱法，具体包括以下步骤：分别配制氟尿嘧啶对照品溶液和待测样品溶液；将氟尿嘧啶对照品溶液和待测样品溶液分别进行测定，分别记录氟尿嘧啶对照品溶液和待测样品溶液的峰面积，采用外标法对氟尿嘧啶进行定量。
优选地，所述UPLC条件为：色谱柱Waters CORTECS T3 C18柱，流动相为3mmol/L的三乙胺溶液：乙腈体积比＝98:2，流速0.3mL·min-1；柱温：35℃；进样量：3μL；其中所述色谱柱的规格为：2.1mm×100mm，2.7μm；所述3mmol/L的三乙胺溶液用甲酸调节pH值至3.5。
优选地，所述质谱的条件为：ESI源(+)；MRM监测；气帘气压力35psi；碰撞气中等；雾化气压力50psi；辅助加热气压力50psi；离子化电压+5500V；离子源温度500℃；其中MRM参数如表1所述：
表1氟尿嘧啶的MRM质谱参数
优选地，所述的采用外标法对氟尿嘧啶进行定量，具体为：以氟尿嘧啶对照品溶液的浓度为横坐标，以氟尿嘧啶的峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，得到线性方程；将供试品溶液检测的峰面积代入线性方程中，计算获得供试品溶液中氟尿嘧啶的含量。
优选地，在将氟尿嘧啶对照品溶液和待测样品溶液注入UPLC-QQQ-MS进行测定时需先将上述溶液使用孔径为0.22μm的滤膜过滤到液质进样瓶中。
(三)有益效果
本发明提供了一种氟尿嘧啶口服乳中氟尿嘧啶含量的检测方法。所述检测方法包括基于超高效液相三重四级杆串联质谱法测定氟尿嘧啶口服乳中氟尿嘧啶含量及氟尿嘧啶样品处理方法。所述样品处理方法包括如下步骤：用破乳剂对氟尿嘧啶口服乳样品进行破乳，得到破乳后样品；所述破乳剂为饱和氯化钠溶液；将所述破乳后样品与正戊烷在分液漏斗中振摇、静置，得到下层待测样品储备液，再用流动相进行稀释，即得到待测样品溶液。本发明所用破乳剂能够将氟尿嘧啶口服乳样品的乳状液充分破坏，萃取过程所用的正戊烷能够将混合溶液中脂溶性成分完全提取分离，且不会影响目标物氟尿嘧啶，最终所得待测样品储备液中的目标物的量保留比较完整。尤其是相对于目前标准中氟尿嘧啶口服乳含量测定的前处理方法，本发明对其基质干扰严重以及专属性差等问题进行了改进，操作简单，所需试剂价廉易得，专属性强，结果准确，方法的线性关系、精密度和回收率均符合检验方法的有关要求，可作为一种氟尿嘧啶口服乳中氟尿嘧啶含量测定的快速简便方法。
附图说明
图1为UPLC-QQQ-MS谱图(m/z131.0→113.9；A.空白溶液；B.空白辅料溶液；C.氟尿嘧啶对照品溶液；D.氟尿嘧啶待测样品溶液)。
图2为按实施例1所得氟尿嘧啶标准溶液线性关系图。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
1仪器与试药
液质联用仪AB SCIEX QTRAP6500+；水为超纯水；正戊烷为色谱纯；其他试剂为分析纯。氟尿嘧啶对照品(中国食品药品检定研究院，批号100187-201203，含量99.6％)；氟尿嘧啶口服乳(上海安丁生物药业有限公司提供，批号:211001)。
2方法与结果
2.1试液的制备
空白溶剂：3mmol/L的三乙胺溶液(用甲酸调节pH值至3.5)：乙腈体积比＝98:2
空白辅料：取处方量的辅料，按照供试品前处理方法得到空白辅料溶液。
对照品贮备液：取氟尿嘧啶对照品约10mg，精密称定，置100ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀。浓度为100μg·mL-1。
对照品溶液：精密量取对照品贮备液1mL，置100ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，精密量取5mL，置50mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀。浓度为100ng·mL-1。
待测样品溶液：精密量取供试品5mL，置100mL具塞锥形瓶中，加氯化钠饱和水溶液10mL，超声、振摇，用200mL正戊烷萃取，振摇，静置，取下层液，置250ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，精密量取mL，置100mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，精密量取5mL，置50mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，浓度为100ng·mL-1。其中所述超声的功率为100W，时间为20min；所述振摇的转速为130rpm，时间为45min。
2.2检测条件的建立
2.2.1色谱条件
色谱柱Waters CORTECS T3 C18(2.1×100mm，2.7μm)，流动相为3mmol/L的三乙胺溶液(用甲酸调节pH值至3.5)：乙腈体积比＝98:2，等度洗脱，流速为0.3mL·min-1，柱温35℃，进样量：3μL。该色谱条件下，空白溶剂对主成分峰检测无干扰，氟尿嘧啶保留时间约为1.53min，理论板数按氟尿嘧啶峰计为4576。
2.2.2质谱条件
ESI源(+)，气帘气压力35psi；碰撞气中等；喷雾气压力50psi；辅助加热气压力50psi；离子化电压+5500V；离子源温度500℃；MRM模式，母离子m/z131.0、目标离子m/z58.0、113.9，二者的CE电压分别为33V和22V，其中，m/z113.9为定量离子，驻留时间为100ms，流路0-0.2min切废液，0.2min后进质谱。定量子离子[131.0→113.9]的MRM质谱图见图1。
2.3方法学验证
2.3.1专属性试验
空白溶剂及空白辅料对本品测定无干扰。
2.3.2精密度试验
精密量取3μl对照品溶液，连续重复进样6次，记录氟尿嘧啶峰面积分别为2100166、2107870、2107704、2108307、2109853、2107481，RSD为0.16％(n＝6)，结果表明精密度良好。
2.3.3线性试验
分别精密量取氟尿嘧啶对照品贮备液适量，采取逐级稀释的方法，配制含有氟尿嘧啶对照品浓度为19.9、39.8、59.8、79.7、99.6、119.5、139.4、159.4ng·mL-1的溶液，吸取上述不同浓度的溶液各3μL，分别注入液质联用仪，记录峰面积。以氟尿嘧啶浓度x(ng·mL-1)为横坐标，以氟尿嘧啶峰面积y为纵坐标，进行线性回归，得回归方程：y＝6075.50559x+542.67857(r＝0.999995)。实验结果表明，氟尿嘧啶在19.9～159.4ng·mL-1的浓度范围内，峰面积-浓度呈良好线性关系。标准溶液线性关系图见图2。
在本发明中，所述氟尿嘧啶口服乳样品中氟尿嘧啶的含量(X)通过式1所示公式计算得到：
其中C为由标准曲线得到的供试品中氟尿嘧啶的浓度，V为供试品中氟尿嘧啶的稀释倍数，m为氟尿嘧啶口服乳样品的质量。
2.3.4回收率试验
样品加标溶液的配制：精密量取已知含量的氟尿嘧啶口服乳2.5ml，共9份，每3份为1组，每组分别加入氟尿嘧啶对照品10mg、12.5mg及15mg，照前处理方法制备供试品溶液，共得9份待测样品溶液。
按照含量测方法测定上述三种溶液，以氟尿嘧啶峰面积计算氟尿嘧啶的回收率及相对标准偏差。
表2氟尿嘧啶口服乳中氟尿嘧啶回收率(m/z131.0→113.9)
2.3.5重复性试验
取供试品，按含量测定前处理方法制备6份供试溶液，按含量测定项下液质条件测定，记录氟尿嘧啶峰面积分别为1991223、1991506、1991791、1991688、1992252、1991252，RSD为0.02％(n＝6)，结果表明重复性良好。
2.3.6检测限与定量限
以信噪比约为3时计算检测限，测得氟尿嘧啶的检测限为0.1705ng/mL；以信噪比约为10时计算定量限，测得氟尿嘧啶的定量限为0.5682ng/mL。
2.3.7含量测定
用上述UPLC-QQQ-MS测定法对供试品溶液及对照品溶液进行测定，计算含量，结果样品中氟尿嘧啶含量为100.01％。
待测样品处理步骤的原理
乳状液油相外表的表面活性剂的亲水基团亲和大量的水，该水层阻止了微小乳化颗粒互相碰撞而发生的融合，从而形成稳定的乳状液。饱和氯化钠中大量的氯离子和钠离子具有强亲水性,与乳液外面的水化层中的水分子迅速水合，从而导致乳状液外水化层变薄，进而消失，促使乳液颗粒迅速融合变大，达到破乳的目的；在研究中，我们发现在氟尿嘧啶口服乳样品体积为3mL，饱和氯化钠溶液的体积不小于8mL时所产生的破乳作用提取出的主要成分含量测定值与样品的理论含量值趋于一致；在氟尿嘧啶口服乳样品体积为7mL，饱和氯化钠溶液的体积不大于12mL时所产生的破乳作用提取出的主要成分含量测定值与样品的理论含量值趋于一致，基于以上实验结果，本申请将氟尿嘧啶口服乳样品体积定为3～7mL，相应的饱和氯化钠溶液体积为8～12mL，样品体积若过小则系统误差影响较大，若样品体积过大则产生物料浪费。正戊烷为非极性有机溶剂，对多种脂溶性成分具有良好的相融性，破乳后样品中只需使用少量的正戊烷即可在短时间内实现水油分离；在研究中，我们发现当1mL破乳后样品与35mL正戊烷进行萃取是，所提取出的主成分氟尿嘧啶的含量值与55mL正戊烷所提取出的氟尿嘧啶的含量值趋于相似，35mL为正戊烷萃取体积拐点，小于35mL则主要成分氟尿嘧啶无法完全提取，大于55mL则会造成物料浪费，因此，正戊烷最佳萃取的体积范围为35～55mL，其中，破乳样品与正戊烷体积比1:40萃取效果最好。将上述饱和氯化钠破乳和正戊烷萃取两种方法结合使用，破乳、萃取效果良好，且不会影响目标物氟尿嘧啶，对后续检测也不会产生干扰。由于本产品辅料中含有植物油脂，因此前处理步骤中需要考察制剂的辅料比如植物油脂是否会损坏色谱柱及质谱系统。本实验采用的盐析破乳及有机相萃取油脂，较好的处理掉辅料中的植物油脂，避免植物油进入质谱系统造成污染，同时在满足检测灵敏度的情况下尽量降低进样量，且采用MRM检测模式，多举措避免基质对质谱系统的污染，可实现日常对氟尿嘧啶口服乳快速高通量地检测。
以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的精神和范围。
Claims (4)
1.一种氟尿嘧啶口服乳中氟尿嘧啶含量的检测方法，其特征在于，所述检测方法采用超高效液相色谱三重四级杆串联质谱法，所述检测方法包括以下步骤：分别配制氟尿嘧啶对照品溶液和待测样品溶液；将氟尿嘧啶对照品溶液和待测样品溶液分别注入UPLC-QQQ-MS进行测定，分别记录氟尿嘧啶对照品溶液和待测样品溶液的峰面积，采用外标法对氟尿嘧啶进行定量，具体为：以氟尿嘧啶对照品溶液的浓度为横坐标，以氟尿嘧啶的峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，得到线性方程；将供试品溶液检测的峰面积代入线性方程中，计算获得供试品溶液中氟尿嘧啶的含量；UPLC-QQQ-MS的UPLC条件为：色谱柱Waters CORTECS T3C18柱，流动相为3mmol/L的三乙胺溶液：乙腈体积比＝98:2，流速0.3mL/min；柱温：35℃；进样量：3μL；其中所述色谱柱的规格为：2.1mm× 100mm，2.7μm；所述3mmol/L的三乙胺溶液用甲酸调节pH值至3.5；所述质谱的条件为：ESI源(+)；MRM监测；气帘气压力35psi；碰撞气中等；雾化气压力50psi；辅助加热气压力50psi；离子化电压+5500V；离子源温度500℃；所述检测方法中还包括氟尿嘧啶口服乳样品处理方法；所述氟尿嘧啶口服乳样品处理方法包括以下步骤：将破乳剂和氟尿嘧啶口服乳混合并对混合物依次进行超声和振摇，振摇后得到的混合溶液为破乳后样品；将破乳后样品与正戊烷混合在分液漏斗中进行振摇后，静置，下层水溶液即为待测样品储备液；进一步用流动相稀释得到待测样品溶液；所述破乳剂为饱和氯化钠溶液；所述饱和氯化钠溶液与氟尿嘧啶口服乳样品的混合体积比为8～12mL：3～7mL；所述破乳后样品与正戊烷的混合体积比为1mL：35～55mL。
2.根据权利要求1所述的一种氟尿嘧啶口服乳中氟尿嘧啶含量的检测方法，其特征在于，氟尿嘧啶口服乳样品处理方法中的超声功率为100～150W，时间为10～20min；所述振摇的转速为130～170rpm，时间为35～45min。
3.根据权利要求1所述的一种氟尿嘧啶口服乳中氟尿嘧啶含量的检测方法，其特征在于，氟尿嘧啶口服乳样品处理方法中破乳后样品于正戊烷在分液漏斗中振摇的次数为80～120次，时间为4～6min。
4.根据权利要求1所述的一种氟尿嘧啶口服乳中氟尿嘧啶含量的检测方法，其特征在于，用流动相将待测样品溶液稀释至浓度为100ng/mL。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210522403.7A CN114924003B (zh) | 2022-05-13 | 2022-05-13 | 一种氟尿嘧啶口服乳中氟尿嘧啶含量的检测方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210522403.7A CN114924003B (zh) | 2022-05-13 | 2022-05-13 | 一种氟尿嘧啶口服乳中氟尿嘧啶含量的检测方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN114924003A CN114924003A (zh) | 2022-08-19 |
| CN114924003B true CN114924003B (zh) | 2023-11-24 |
Family
ID=82809028
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202210522403.7A Active CN114924003B (zh) | 2022-05-13 | 2022-05-13 | 一种氟尿嘧啶口服乳中氟尿嘧啶含量的检测方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN114924003B (zh) |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2010051667A1 (zh) * | 2008-11-10 | 2010-05-14 | 复旦大学 | 一种环肽纳米管药物组合物及其应用 |
| EP4036569A1 (en) * | 2019-09-26 | 2022-08-03 | Shimadzu Corporation | Method for analyzing 5-fluorouracil and 5-fluorodihydrouracil |
-
2022
- 2022-05-13 CN CN202210522403.7A patent/CN114924003B/zh active Active
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2010051667A1 (zh) * | 2008-11-10 | 2010-05-14 | 复旦大学 | 一种环肽纳米管药物组合物及其应用 |
| EP4036569A1 (en) * | 2019-09-26 | 2022-08-03 | Shimadzu Corporation | Method for analyzing 5-fluorouracil and 5-fluorodihydrouracil |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| HPLC法测定复方氟尿嘧啶多相脂质体口服液中氟尿嘧啶含量;侯晓虹 等;《药物分析杂志》;第24卷(第2期);第203-204页 * |
| In vitro and in vivo evaluation of cubosomes containing 5-fluorouracil for liver targeting;Mohamed Nasr et al.;《Acta Pharmaceutica Sinica B》;第5卷(第1期);摘要，第82页左栏 * |
| 均匀设计法考察不同制备方法对氟尿嘧啶脂质体包封率的影响;叶鹏;宋金春;陈莉;;医药导报(第01期);全文 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN114924003A (zh) | 2022-08-19 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN111175394A (zh) | 一种液相色谱串联质谱检测血浆儿茶酚胺及其代谢物的方法 | |
| CN107449841B (zh) | 一种基于衍生化测定单胺类神经递质的检测方法 | |
| CN106814153B (zh) | 基于凝血酶和凝血因子的双靶点抗凝活性物质的液相色谱-质谱筛选方法 | |
| CN111289637B (zh) | 一种检测苹果汁中展青霉素的方法 | |
| CN113390992B (zh) | 一种水溶性发酵药物中微量黄曲霉毒素分析检测方法 | |
| CN114674961A (zh) | 一种非衍生化同步检测血清中17种类固醇激素的试剂盒及其应用 | |
| CN110988193B (zh) | 一种检测水产品中晚期糖基化终末产物的方法 | |
| CN113176364A (zh) | 一种同时检测氧化三甲胺和苯乙酰谷氨酰胺的方法及其检测试剂盒和应用 | |
| CN112748198A (zh) | 一种液相色谱串联质谱技术检测血清中抗真菌药物的方法装置 | |
| CN109828071B (zh) | 一种同时检测猪肉中9种注水类药物残留的方法 | |
| CN108072712B (zh) | 一种sd大鼠血浆中新化合物wsj-557的血药浓度定量分析方法 | |
| CN112014509A (zh) | 同步测定样品中血管紧张素i和醛固酮的方法 | |
| CN113720946A (zh) | 检测血液中多种类固醇激素的方法及试剂盒 | |
| CN114924003B (zh) | 一种氟尿嘧啶口服乳中氟尿嘧啶含量的检测方法 | |
| CN116148401B (zh) | 一种同步高效检测污泥中36种抗抑郁药物残留量的方法 | |
| CN105334282B (zh) | 一种地表水体中环境雌激素的共检测方法 | |
| Yang et al. | Determination of palonosetron in human plasma by ultra performance liquid chromatography–tandem mass spectrometry and its application to a pharmacokinetic study | |
| CN114740127A (zh) | 一种基于lc-ms/ms检测5种抗肿瘤药物的试剂盒和方法 | |
| CN110007023B (zh) | 鱼体内磺胺类药物的高分辨质谱筛查方法及其与蛋白大分子相互作用的分析方法 | |
| CN114624362A (zh) | 一种检测血清中晚期糖基化终末产物的试剂盒及其应用 | |
| CN113866315A (zh) | 液质联用技术检测大鼠血浆yg-18血药浓度的定量分析方法 | |
| CN106248825B (zh) | 盐酸兰地洛尔原料药物中起始物料a的检测方法 | |
| CN105699575A (zh) | 高效液相色谱串联质谱技术检测唾液中皮质醇的方法及试剂盒 | |
| CN115060819B (zh) | 基于hplc-ms/ms单峰法同时测定人血浆中sun及su12662的方法 | |
| Wei et al. | A Review on Pretreatment and Analysis Methods of Polyether Antibiotics in Complex Samples |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| CB03 | Change of inventor or designer information |
Inventor after: Wu Yuexia Inventor after: Feng Lichun Inventor after: Yang Qiuhong Inventor after: Yang Benxia Inventor after: Chen Jie Inventor after: Zhang Qian Inventor after: Hui Jiajia Inventor before: Wu Yuexia Inventor before: Feng Lichun Inventor before: Yang Qiuhong Inventor before: Hui Jiajia Inventor before: Zhang Qian Inventor before: Yang Benxia Inventor before: Chen Jie |
|
| CB03 | Change of inventor or designer information | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |