CN104535664B - 一种同时检测芝麻酱中多种霉菌毒素的方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种检测芝麻酱中多种霉菌毒素的方法，尤其涉及一种采用优化的分散固相萃取方法（QuEChERS）进行前处理以及采用超高效液相色谱-串联质谱（UHPLC-MS/MS）同时检测芝麻酱中26种霉菌毒素的方法，具体包括：用含酸的不同浓度的乙腈-水溶液对样品进行两次提取，在样品提取液中加入硫酸镁和氯化钠进行盐析，离心，在所得上清液中加入正己烷，旋涡振荡，除脂，通过C18和硫酸镁净化，真空浓缩，再先后用甲醇、水复溶残渣，得样品分析液，利用高效液相色谱串联质谱的多反应监测模式进行检测，提高了检测效率，节省了检测成本，灵敏度高，重复性好，加标回收率高，同时可以扩展到其他高脂含量样品的检测。

Description

一种同时检测芝麻酱中多种霉菌毒素的方法

技术领域

本发明涉及一种检测芝麻酱中多种霉菌毒素的方法，尤其涉及一种采用分散固相萃取方法（QuEChERS）进行前处理以及采用超高效液相色谱-串联质谱（UHPLC-MS/MS）同时检测芝麻酱中26种霉菌毒素的方法，属于食品安全检测领域。

背景技术

霉菌毒素是由产毒霉菌在适宜的环境条件下产生的有毒代谢产物，从古至今一直对人类、动物和植物具有巨大的潜在威胁。1960年，英国发生了10万多只火鸡中毒死亡事件，研究发现，饲料中有从巴西进口的霉变的花生饼粉，用这种花生饼粉喂养大白鼠能诱发肝癌，诱发肝癌的物质被证实为黄曲霉的代谢产物，命名为黄曲霉毒素（Aflatoxins）。随后引发了科技界对霉菌毒素广泛、系统的研究。霉菌毒素目前已发现有200多种，对人类危害大的霉菌毒素有十几种，一般由青霉属、曲霉属以及镰刀菌属的霉菌产生，具有毒性强和污染频率高的特点，其中包括黄曲霉毒素、赭曲霉毒素A、杂色曲霉毒素、展青霉素、玉米赤霉烯酮、串珠镰刀菌素、T-2毒素、HT-2毒素，脱氧雪腐镰刀菌烯醇、二乙酸镳草镰刀菌烯醇等。

由于霉菌毒素的低浓度高危害性，目前全世界很多国家都对霉菌毒素规定了其在食品中的残留限量。我国国家标准（GB2761-2011）规定了食品中黄曲霉毒素B1、黄曲霉毒素M1、赭曲霉毒素A、展青霉素、玉米赤霉烯酮、脱氧镰刀雪腐菌烯醇等6类霉菌毒素的限量，限量范围从0.5ug/kg到1000ug/kg不等。

芝麻酱是广受我国及亚洲人民喜爱的一种调味料，主要由芝麻及花生制作而成，水分和油脂含量高，含有蛋白、糖类、色素等化合物。由于霉菌在自然界分布极为广泛，芝麻酱原料从种植、采收到贮藏的过程中易被霉菌污染，并在不利的环境下大量产生毒素，同时芝麻酱的生产工艺过程中不能对霉菌毒素的污染进行消除或降低，这些霉菌毒素会在人体中蓄积，降解缓慢，因此对人健康危害极大。

目前常用的针对食品中霉菌毒素残留量的检测技术主要有酶联免疫试剂盒（ELISA）、薄层色谱（TLC）、高效液相色谱法（HPLC）以及超高效液相色谱串联质谱法（UPLC-MS/MS）等。酶联免疫法原理是利用抗体与酶复合物结合，然后通过显色来检测；薄层色谱法是根据与适宜的对照物按同法所得的色谱图的比移值（Rf）作对比，进行含量测定的方法，这两者均为半定量方法，多用于一种或少数几种毒素的初步筛查；高效液相色谱法是采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析，此法定量准确，但对于同时检测多组分的霉菌毒素，以及对样品基质净化不完全时，目标化合物在色谱柱上无法实现基线分离，无法对目标化合物进行准确定量。超高效液相色谱串联质谱是在色谱分离的基础上，利用质谱的高灵敏性和高选择性对化合物进行定性和定量检测，结果更加准确。

随着仪器检测技术的发展，前处理净化技术也在不断更新，目前受到广泛研究的集中在免疫亲和（Immunoaffinity）、固相萃取（SolidPhaseExtraction）以及分散固相萃取（QuEChERS）方法。免疫亲和层析技术是以抗原抗体中的一方作为配基亲和吸附另一方的分离系统，用此技术对样品进行前处理，专一性强，样品净化程度高，但目前研制出的免疫亲和抗体种类较少，除少数几种化合物（黄曲霉毒素类）无法对多组分化合物同时进行净化，且成本高，目前有免疫亲和抗体的毒素有黄曲霉毒素、赭曲霉毒素A、玉米赤霉烯酮、T-2毒素、HT-2毒素等少数几种毒素；固相萃取技术是基于液-固相色谱理论，采用选择性吸附、选择性洗脱的方式对样品进行富集、分离、净化，是一种包括液相和固相的物理萃取过程；也可以将其近似地看作一种简单的色谱过程，此技术选择性吸附和净化程度不如免疫亲和技术，可用于一种或几种结构相似毒素的同时净化，但无法对复杂基质中多种毒素进行同时进行吸附和净化，常用于食品中伏马霉素、黄曲霉毒素B1以及赭曲霉素A检测的前处理。分散固相萃取方法（QuEChERS）是由英文快速（Quick）、简便（Easy）、低廉（Cheap）、高效（Effective）、耐用（Rugged）以及安全（Safe）的首字母缩写，此技术由提取，盐析、净化、浓缩等及步骤组成，最先由美国科学家发明，用于多农药残留的检测，后扩大应用于兽药残留以及生物毒素检测的前处理。该方法的优点正如所组成的缩写词一样，灵活性强，可以进行改进后对不同结构极性的多种毒素进行同时提取和净化。芝麻酱的基质复杂，用现有技术方法无法全部检测多种霉菌毒素，且目前尚未有同时检测芝麻酱中多种霉菌毒素的方法。

本发明基于上述情况，为了保证食品安全，利用最新发展的QuEChERS方法，结合超高效液相色谱串联质谱法（UHPLC-MS/MS）开发了芝麻酱中26种霉菌毒素的检测方法，完善了食品的安全监控的手段，避免消费者的健康受到损害。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术中的缺点，提供了一种结合改进的分散固相萃取方法和超高效液相色谱串联质谱法对芝麻酱中26种霉菌毒素进行同时检测的方法，该方法灵敏度高，重复性好，回收率高。

本发明利用优化的QuEChERS对样品进行前处理后进入超高效液相色谱串联质谱仪进行分析。前处理步骤包括称量、提取、盐析、除脂、净化、浓缩和复溶步骤；仪器分析包括利用超高效液相色谱对目标化合物进行分离和质谱检测器对真菌毒素进行定性定量分析。

本发明检测的霉菌毒素包括：黄曲霉毒素（AFB1、AFB2、AFG1、AFG2、AFM1、AFM2）、伏马毒素（FB1、FB2、FB3）、新茄病镰刀菌烯醇(NEO)、二乙酰蔗草镰刀菌烯醇(DAS)、烟曲霉素(FUM)、胶霉毒素(GLT)、杂色曲霉（ST）、T2毒素（T2）、HT2毒素（HT2）、疣孢漆斑菌原（VER）、赭曲霉素A（OTA）、玉米赤霉烯酮（ZEN）、脱氧镰刀雪腐菌烯醇（DON）、镰刀菌烯酮（FUS-X）、去环氧-脱氧镰刀雪腐菌烯醇（DOM-1）、霉酚酸（MPA）、微囊藻毒素（PAX）、3-乙酰基脱氧镰刀雪腐菌烯醇（3-ADON）以及15-乙酰基脱氧镰刀雪腐菌烯醇（15-ADON）。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

一种同时检测芝麻酱中多种霉菌毒素的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：（1）对待测芝麻酱样品进行提取，先后用含酸的不同浓度的乙腈-水溶液对样品分两次进行振荡提取、离心，合并两次提取液，得样品提取液；（2）对样品提取液进行盐析、除脂，在所述样品提取液中加入硫酸镁和氯化钠进行盐析，离心，在所得上清液中加入正己烷，旋涡振荡，除脂；（3）对盐析、除脂后的样品进行净化、浓缩、复溶，将盐析、除脂后的样品离心，在所得的下层乙腈层加入C18(十八烷基硅烷键合硅胶)和硫酸镁旋涡振荡进行净化，离心，对所得上清液进行真空浓缩后，先用甲醇对残渣复溶（即对残渣进行溶解），再用水对剩余的残渣复溶，合并两次复溶所得的复溶液，进行滤膜过滤，得样品分析液；（4）利用超高效液相色谱串联质谱方法检测样品分析液中的多种霉菌毒素。

优选所述步骤（1）中的含酸的不同浓度的乙腈-水溶液为含0.1%(体积比)甲酸的乙腈-水溶液。更优选不同浓度的乙腈-水溶液是：体积比为70-90：30-10的乙腈-水溶液和体积比为10-40：90-60的乙腈-水溶液。

进一步优选所述步骤（1）对待测芝麻酱样品进行提取包括：先用含0.1%（体积比）甲酸的80%（体积比）的乙腈-水溶液对样品进行振荡提取、离心，得提取液1，再对提取后的剩余物用含0.1%（体积比）甲酸的20%（体积比）的乙腈-水溶液进行振荡提取、离心，得提取液2，合并所述提取液1和所述提取液2，得样品提取液。

优选所述步骤（2）中的盐析、除脂包括：在所述样品提取液中加入硫酸镁、氯化钠、柠檬酸钠、柠檬酸氢二钠进行盐析，离心，在所得上清液中加入正己烷，旋涡振荡，除脂。

本发明涉及的一种同时检测芝麻酱中多种霉菌毒素的方法，更详尽的描述包括以下步骤：（1）称量2.5g待测芝麻酱样品，先用20ml含0.1%（体积比）甲酸的80%（体积比）的乙腈-水溶液对样品进行振荡提取30min、离心，得提取液1，再对提取后的剩余物用5ml含0.1%（体积比）甲酸的20%（体积比）的乙腈-水溶液进行振荡提取30min、离心，得提取液2，合并所述提取液1和所述提取液2，得样品提取液；（2）在所述样品提取液中加入1.0g柠檬酸钠、4.0g硫酸镁、1.0g氯化钠、0.5g柠檬酸氢二钠进行盐析，离心后转移上清液，向其中加入20mL正己烷，旋涡振荡1min除去脂肪；（3）将盐析、除脂后的样品离心，转移下层乙腈层至离心管中，加入150mgC18和900mg硫酸镁后旋涡振荡进行净化，离心，用5mL乙腈洗涤，离心，合并所述净化、所述洗涤两次离心后的上清液，进行真空浓缩；先用1.5mL甲醇复溶残渣，再用大于等于1mL的水复溶残渣，合并两次复溶所得的复溶液，用0.22um滤膜进行过滤后得样品分析液；（4）利用超高效液相色谱串联质谱方法检测样品分析液中的多种霉菌毒素。

优选所述步骤（4）的高效液相色谱条件为：流动相A为含0.1%甲酸的甲醇，流动相B为含0.1%甲酸的水，流动相A和流动相B的体积比为：70-20:30-80，梯度洗脱，或者流动相A为甲醇，流动相B为水，流动相A和流动相B的体积比为：90-10:10-90，梯度洗脱；色谱柱以十八烷基硅烷建和硅胶为填料。

进一步优选所述步骤（4）的质谱条件为：采用电喷雾离子源（ESI），正离子模式（ESI+）和负离子模式（ESI-）进行扫描后，利用多反应监测模式（MRM）检测。

所述的流动相为含0.1%甲酸的甲醇和含0.1%甲酸的水时，所对应的电离模式为正离子模式；流动相为甲醇和水时，所对应的电离模式为负离子模式。

在正离子模式下，芝麻酱中可检出的霉菌毒素包括：新茄病镰刀菌烯醇(NEO)、黄曲霉毒素（AFB1、AFB2、AFG1、AFG2、AFM1、AFM2）、伏马毒素（FB1、FB2、FB3）、二乙酰蔗草镰刀菌烯醇(DAS)、杂色曲霉（ST）、HT2毒素（HT2）、胶霉毒素(GLT)、T2毒素（T2）、烟曲霉素(FUM)。

在负离子模式下，芝麻酱中可检出的霉菌毒素包括：疣孢漆斑菌原（VER）、赭曲霉素A（OTA）、玉米赤霉烯酮（ZEN）、脱氧镰刀雪腐菌烯醇（DON）、镰刀菌烯酮（FUS-X）、去环氧-脱氧镰刀雪腐菌烯醇（DOM-1）、霉酚酸（MPA）、微囊藻毒素（PAX）、3-乙酰基脱氧镰刀雪腐菌烯醇（3-ADON）、15-乙酰基脱氧镰刀雪腐菌烯醇（15-ADON）。

霉菌毒素采用多反应监控模式（MRM）对毒素进行定性和定量。根据欧盟关于分析方法要求的法令2002/657/EU，采用液相色谱质谱方法分析，必须达到4分的要求，本方法选择1个母离子（2分），2个子离子（1分）对目标化合物进行定性，满足了4分的要求。定量方式采用了基质曲线定量，每条曲线由5个点构成，线性相关系数（r2）大于0.995，满足了定量的要求。

本发明采用改进的QuEChERS方法对芝麻酱进行前处理后，利用超高效液相色谱串联质谱法对提取出的26种霉菌毒素同时进行检测。用含酸的不同浓度的乙腈水溶液对样品进行两次提取，对样品提取液进行盐析、除脂、净化、浓缩、复溶，利用高效液相色谱串联质谱的多反应监测模式进行检测，提高了检测效率，节省了检测成本，灵敏度高，重复性好，加标回收率高，同时可以扩展到其他高脂含量样品的检测。

附图说明

图1芝麻酱样品前处理步骤图；

图2芝麻酱样品的基质加标总离子流图，其中a表示正离子模式，b表示负离子模式，横坐标RetentionTime表示保留时间，纵坐标ResponseIntensity表示响应强度，Martix表示芝麻酱样品基质，Matrix-Standard表示添加26种霉菌毒素标准品的芝麻酱样品。

具体实施方式

本实施方式涉及的测试分析设备、试剂和条件为：

仪器与设备：Agilent1290超高效液相色谱仪（配有四元泵；脱气机和自动进样器），6460质谱检测器（配有电喷雾离子源）。

色谱柱：AgilentZorbaxEclipsePlusC18色谱柱(1.8μm,100mmx2.1mm)；

流动相：采用含0.1%甲酸的甲醇/水用于检测正离子模式下霉菌毒素，采用甲醇/水用于检测负离子模式下霉菌毒素，其梯度洗脱的程序见表1。

表1液相色谱流动相的梯度洗脱程序

离子源条件：采用正离子模式（ESI+）和负离子模式（ESI-），毛细管电压3.5kV(+/-)；喷嘴电压0V(+)/2000V(-)；雾化气压力(N2)，45psi(+/-)；干燥气温度(N2)300℃(+)/350℃(-)；干燥器流速6Lmin-1(+)/10Lmin-1(-)；鞘气温度(N2)：300℃(+)/350℃(-)；鞘气流速12Lmin-1(+)/7Lmin-1(-)。

其余质谱参数如表2所示。

实施例1芝麻酱中26种标准霉菌毒素的加标回收率的检测

包括：（1）样品制备：在芝麻酱中分别添加以下26种霉菌毒素标准物质：黄曲霉毒素（AFB1、AFB2、AFG1、AFG2、AFM1、AFM2）、伏马毒素（FB1、FB2、FB3）、新茄病镰刀菌烯醇(NEO)、二乙酰蔗草镰刀菌烯醇(DAS)、烟曲霉素(FUM)、胶霉毒素(GLT)、杂色曲霉（ST）、T2毒素（T2）、HT2毒素（HT2）、疣孢漆斑菌原（VER）、赭曲霉素A（OTA）、玉米赤霉烯酮（ZEN）、脱氧镰刀雪腐菌烯醇（DON）、镰刀菌烯酮（FUS-X）、去环氧-脱氧镰刀雪腐菌烯醇（DOM-1）、霉酚酸（MPA）、微囊藻毒素（PAX）、3-乙酰基脱氧镰刀雪腐菌烯醇（3-ADON）以及15-乙酰基脱氧镰刀雪腐菌烯醇（15-ADON），制得单加标的霉菌毒素样品，其中芝麻酱为2.5g，26种霉菌毒素中的每一种霉菌毒素的添加量，即加标水平（Spikedlevel）见下表3所示；另外在芝麻酱中同时添加26种霉菌毒素标准物质，制得总加标的霉菌毒素样品。

（2）样品处理：处理过程如图1所示。将单加标的霉菌毒素样品、总加标的霉菌毒素样品分别进行以下处理过程：先用20ml含0.1%（体积比）甲酸的80%（体积比）的乙腈水溶液对样品进行振荡提取30min、离心，得提取液1，再对提取后的剩余物用5ml含0.1%（体积比）甲酸的20%（体积比）的乙腈水溶液进行振荡提取30min、离心，得提取液2，合并所述提取液1和所述提取液2，得样品提取液；在所述样品提取液中加入1.0g柠檬酸钠、4.0g硫酸镁、1.0g氯化钠、0.5g柠檬酸氢二钠进行盐析，离心后转移上清液，向其中加入20ml正己烷，旋涡振荡1min除脂；将盐析、除脂后的样品离心，转移下层乙腈层至离心管中，加入150mgC18和900mg硫酸镁后旋涡振荡进行净化，离心，用5mL乙腈洗涤，离心，合并所述净化、洗涤两次离心后的上清液，进行真空浓缩；先用1.5mL甲醇复溶残渣，再用大于等于1mL的水复溶残渣，合并两次复溶所得的复溶液，用0.22um滤膜进行过滤后得样品分析液；

（3）样品分析液的检测，利用超高效液相色谱串联质谱方法检测样品分析液中的多种霉菌毒素，其中流动相在正离子模式、负离子模式下的梯度洗脱程序见表1所示，质谱的检测模式及参数见表2所示，同时表2给出了各种单加标的霉菌毒素的定性离子（单位为m/z）、定量离子（单位为m/z）及其所对应的碰撞能量（单位为V）、检出限（3S/N，根据3倍性噪比计算得出）、定量限（10S/N，根据10倍性噪比计算得出）、线性回归方程相关系数（r2）、线性范围等，另外总加标的霉菌毒素样品的样品分析液的总离子流图如图2所示，可看出芝麻酱样品中26种霉菌毒素标准物质的分离度好，对提高灵敏度有很大帮助，又根据表2结果可知，本发明的检出限低，由表2的结果计算26种霉菌毒素的加标回收率和标准偏差，结果见表3所示，根据表3的结果可以看出，26种霉菌毒素的回收率（Recovery）在66%~116%之间，相对标准偏差（RSD）在0~14.6%，符合《出口商品中农药、兽药残留量及生物毒素生物学检验方法标准编写的基本规定》（SN/T0005-1996）中关于回收率、灵敏度等的要求。

本发明采用改进的QuEChERS方法对芝麻酱进行前处理后，利用超高效液相色谱串联质谱在多反应监测模式（MRM）下进行检测，提高了检测效率，节省了检测成本，检出限低，灵敏度高，重复性好，加标回收率高，同时可以扩展到其他高脂含量样品的检测。

以上实施例的说明只是用于帮助理解本发明的方法及其核心思想。应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以对本发明进行若干改进和修饰，这些改进和修饰也落入本发明权利要求的保护范围内。

表3.芝麻酱中霉菌毒素的3个添加水平回收率和精度

Claims (7)

1.一种同时检测芝麻酱中多种霉菌毒素的方法，其中多种霉菌毒素包括黄曲霉毒素AFB1、AFB2、AFG1、AFG2、AFM1、AFM2，伏马毒素FB1、FB2、FB3，新茄病镰刀菌烯醇(NEO)，二乙酰蔗草镰刀菌烯醇(DAS)，烟曲霉素(FUM)，胶霉毒素(GLT)，杂色曲霉（ST），T2毒素（T2），HT2毒素（HT2），疣孢漆斑菌原（VER），赭曲霉素A（OTA），玉米赤霉烯酮（ZEN），脱氧镰刀雪腐菌烯醇（DON），镰刀菌烯酮（FUS-X），去环氧-脱氧镰刀雪腐菌烯醇（DOM-1），霉酚酸（MPA），微囊藻毒素（PAX），3-乙酰基脱氧镰刀雪腐菌烯醇（3-ADON），15-乙酰基脱氧镰刀雪腐菌烯醇（15-ADON），其特征在于，该方法包括以下步骤：（1）对待测芝麻酱样品进行提取，先后用含酸的体积比为80：20的乙腈-水溶液和含酸的体积比为20：80的乙腈-水溶液对样品分两次进行振荡提取、离心，合并两次提取液，得样品提取液；（2）对样品提取液进行盐析、除脂，在所述样品提取液中加入硫酸镁和氯化钠进行盐析，离心，在所得上清液中加入正己烷，旋涡振荡，除脂；（3）对盐析、除脂后的样品进行净化、浓缩、复溶，将盐析、除脂后的样品离心，在所得的下层乙腈层加入C18(十八烷基硅烷键合硅胶)和硫酸镁旋涡振荡进行净化，离心，对所得上清液进行真空浓缩后，先用甲醇对残渣复溶，再用水对剩余的残渣复溶，合并两次复溶所得的复溶液，进行滤膜过滤，得样品分析液；（4）利用超高效液相色谱串联质谱方法检测样品分析液中的多种霉菌毒素。

2.根据权利要求1所述的一种同时检测芝麻酱中多种霉菌毒素的方法，其特征在于，所述步骤（1）中的含酸的体积比为80：20的乙腈-水溶液和含酸的体积比为20：80的乙腈-水溶液为含0.1%(体积比)甲酸的体积比为80：20的乙腈-水溶液和含0.1%(体积比)甲酸的体积比为20：80的乙腈-水溶液。

3.根据权利要求1所述的一种同时检测芝麻酱中多种霉菌毒素的方法，其特征在于，所述步骤（2）中的盐析、除脂包括：在所述样品提取液中加入硫酸镁、氯化钠、柠檬酸钠、柠檬酸氢二钠进行盐析，离心，在所得上清液中加入正己烷，旋涡振荡，除脂。

4.根据权利要求1所述的一种同时检测芝麻酱中多种霉菌毒素的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：（1）称量2.5g待测芝麻酱样品，先用20ml含0.1%（体积比）甲酸的80%（体积比）的乙腈-水溶液对样品进行振荡提取30min、离心，得提取液1，再对提取后的剩余物用5ml含0.1%（体积比）甲酸的20%（体积比）的乙腈-水溶液进行振荡提取30min、离心，得提取液2，合并所述提取液1和所述提取液2，得样品提取液；（2）在所述样品提取液中加入1.0g柠檬酸钠、4.0g硫酸镁、1.0g氯化钠、0.5g柠檬酸氢二钠进行盐析，离心后转移上清液，向其中加入20ml正己烷，旋涡振荡1min除去脂肪；（3）将盐析、除脂后的样品离心，转移下层乙腈层至离心管中，加入150mgC18和900mg硫酸镁后旋涡振荡进行净化，离心，用5mL乙腈洗涤，离心，合并所述净化和洗涤两次离心后的上清液，进行真空浓缩；先用1.5mL甲醇复溶残渣，再用大于等于1mL的水复溶残渣，合并两次复溶所得的复溶液，用0.22um滤膜进行过滤后得样品分析液；（4）利用超高效液相色谱串联质谱方法检测样品分析液中的多种霉菌毒素。

5.根据权利要求1所述的一种同时检测芝麻酱中多种霉菌毒素的方法，其特征在于，所述步骤（4）的超高效液相色谱条件为：流动相A为含0.1%甲酸的甲醇，流动相B为含0.1%甲酸的水，流动相A和流动相B的体积比为：70-20:30-80，梯度洗脱，或者流动相A为甲醇，流动相B为水，流动相A和流动相B的体积比为：90-10:10-90，梯度洗脱；色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填料。

6.根据权利要求1所述的一种同时检测芝麻酱中多种霉菌毒素的方法，其特征在于，所述步骤（4）的质谱条件为：采用电喷雾离子源（ESI），正离子模式（ESI+）和负离子模式（ESI-）进行扫描后，利用多反应监测模式（MRM）检测。

7.根据权利要求1所述的一种同时检测芝麻酱中多种霉菌毒素的方法，其特征在于，所述步骤（4）的超高效液相色谱条件为：流动相为含0.1%甲酸的甲醇-含0.1%甲酸的水时，所对应的质谱电离模式为正离子模式；流动相为甲醇-水时，所对应的电离模式为负离子模式。