CN110794060B - 红花药材中亚精胺含量的测定方法及亚精胺的富集方法 - Google Patents

红花药材中亚精胺含量的测定方法及亚精胺的富集方法 Download PDF

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Abstract

本申请涉及检测分析领域，具体而言，涉及一种红花药材中亚精胺含量的测定方法及亚精胺的富集方法。红花药材中亚精胺含量的测定方法包括以下步骤：采用尼龙66吸附红花药材溶液中的亚精胺得到富集物；溶剂溶解富集物然后过滤；采用高效液相色谱测定滤液中的亚精胺。其中，溶剂包括体积分数为70‑100％的甲醇水溶液或者体积分数为70‑100％的乙醇水溶液。对于亚精胺含量较低的红花药材溶液(例如0.15μg/mL左右的红花注射液)，尼龙66具有富集浓缩的作用；为高效液相色谱测定提供良好的测试条件；为低浓度的亚精胺的含红花的药材提供测试方法。

Description

红花药材中亚精胺含量的测定方法及亚精胺的富集方法
技术领域
本申请涉及检测分析领域，具体而言，涉及一种红花药材中亚精胺含量的测定方法及亚精胺的富集方法。
背景技术
红花是菊科红花属植物红花，能活血通经、散瘀止痛、降血压和降血脂，用于治疗经闭、痛经、心绞痛、高血压、跌打损伤、冠心病等。红花中含有亚精胺类化合物，亚精胺类化合物是指具有H2N(CH2)3NH(CH2)4NH2结构单元的多胺类化合物。
现有技术中未提供对亚精胺类化合物含量较少的红花药物的可靠的检测方法。
发明内容
本申请实施例的目的在于提供一种红花药材中亚精胺含量的测定方法及亚精胺的富集方法，其旨在提供一种面对亚精胺类化合物含量较少的红花药物的可靠的检测方法。
本申请第一方面提供一种红花药材中亚精胺含量的测定方法，红花药材中亚精胺含量的测定方法包括以下步骤：
采用尼龙66吸附红花药材溶液中的亚精胺得到富集物；
采用溶剂溶解富集物然后过滤；采用高效液相色谱测定滤液中的亚精胺。
其中，溶剂包括体积分数为70-100％的甲醇水溶液或者体积分数为70-100％的乙醇水溶液。
尼龙66中的聚酰胺结构的胺基具有1个孤对电子，具有较强的电负性，亚精胺的电负性也较强，可以采用尼龙66吸附富集亚精胺。对于亚精胺含量较低的红花药材溶液(例如0.15μg/mL左右的红花注射液)，尼龙66具有富集浓缩的作用；为高效液相色谱测定提供良好的测试条件；为低浓度的亚精胺的含红花的药材提供测试方法。
本申请第二方面提供一种亚精胺的富集方法，亚精胺的富集方法包括：
采用尼龙66富集溶液中的亚精胺。
具有较强电负性的尼龙66能与电负性也较强的亚精胺温相互吸附，达到富集的目的，且吸附之后尼龙66与亚精胺也可以较好地脱附，例如采用甲醇作为溶剂使两者脱附。
附图说明
为了更清楚地说明本申请实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本申请的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
图1为本申请实施例1提供的对照品色谱图；
图2为本申请实施例1提供的供试品溶液色谱图；
图3为本申请对比例1得到的色谱图；
图4为本申请试验例2得到的线性图；
图5为Waters symmetry shieldTM RP18色谱柱的亚精胺成分分离色谱图；
图6为AcclaimTM 120 C18色谱柱的亚精胺成分分离色谱图；
图7为Phenomenex Gemini-C18色谱柱的亚精胺成分分离色谱图。
具体实施方式
为使本申请实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本申请实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
下面对本申请实施例的红花药材中亚精胺含量的测定方法及亚精胺的富集方法进行具体说明。
红花药材中亚精胺含量的测定方法包括以下步骤：
采用尼龙66吸附红花药材溶液中的亚精胺得到富集物；
采用溶剂溶解所述富集物然后过滤；溶剂为甲醇或者体积分数为70-100％的乙醇水溶液。
采用高效液相色谱测定滤液中的亚精胺。
在本申请中，红花药材中亚精胺主要包括以下四个成分：
Nl,N5,N10-(Z)-tri-p-coumaroylspermidine (1)；
Nl,N5-(Z)-N10-(E)-tri-p-coumaroylspermidine (2)；
N1,N5-(Z)-N10-(E)-tri-p-coumaroylspermidine (3)；
N1,N5,N10-(E)-tri-p-coumaroylspermidine (4)。
分子结构式如下：
Figure BDA0002270116490000031
在本实施例中，检测上述四种物质之和。
亚精胺类化合物的主要成分主要由亚精胺和对羟基桂皮酸两个残基组成。其中亚精胺残基中含有3个氮原子，氮原子上具有1个孤对电子，因此亚精胺电负性较强，本申请采用吸附法富集该成分。
尼龙66，又名聚己二酰己二胺；聚酰胺结构的胺基也具有1个孤对电子，因此也具有较强的电负性，可以采用尼龙材质吸附亚精胺成分。达到富集亚精胺的目的。
再采用溶剂溶解富集物然后过滤；溶剂为溶剂包括体积分数为70-100％的甲醇水溶液或者体积分数为70-100％的乙醇水溶液；采用溶剂包括体积分数为70-100％的甲醇水溶液或者体积分数为70-100％的乙醇水溶液溶解富集物，能够将富集物中的亚精胺与尼龙66进行脱附，使亚精胺进入甲醇或者体积分数为70-100％的乙醇中，过滤将尼龙66去除，再采用高效液相色谱法测定滤液中的亚精胺。
溶剂可以为溶剂包括体积分数为70-100％的甲醇水溶液或者体积分数为70-100％的乙醇水溶液；溶剂可以为纯甲醇或者纯乙醇，也可以为体积含量大于等于70％的甲醇(或乙醇)水溶液，例如，体积分数为70％、72％、78％、80％、90％、95％、99％等的甲醇水溶液；或者体积分数为70％、72％、78％、80％、90％、95％、99％等的乙醇水溶液。
在本实施例中，溶剂采用甲醇作为示例进行描述。
本申请提供的红花药材中亚精胺含量的测定方法可以检测出亚精胺含量较少的红花药材中的亚精胺含量，例如，可以测出亚精胺含量为0.15μg/mL左右的红花注射液。
申请人采用CN201510492420.0示出的“同时快速测定红花中四种亚精胺成分含量的方法”由于未对亚精胺进行富集，该方法不能检测出红花注射液中亚精胺的含量。
进一步地，在本申请的一些实施例中，红花药材溶液为红花注射液。红花注射液中亚精胺含量较少，采用本申请实施例提供的检测方法，可以检测出红花注射液中亚精胺的含量；为红花注射液的质量控制提供方法。
在本申请的一些其他实施例中，红花药材溶液也可以为其他溶液，例如，直接采用红花药材水提或者醇提得到的红花药材溶液；或者其余含有红花药材的药物组合物。本申请不对红花药材溶液中除了亚精胺之外的其余成分进行限定。
在本申请的实施例中，采用孔径为45-55mm的材质为尼龙66的滤膜过滤红花药材溶液；且滤液采用同一张滤膜过滤多次。采用尼龙66的滤膜进行过滤，可以使红花药材溶液与尼龙66充分接触。滤膜的孔径可以为45mm、48mm、50mm、52mm或者55mm等。所述的多次是指2次及2次以上，例如，过滤3次、4次、5次或者多次。使几乎全部的亚精胺被尼龙66的滤膜吸附。
在本申请的其他实施例中，尼龙66的滤膜可以为其他孔径，例如，孔径较大时可以多过滤几次，孔径较小时，可以少过滤几次，增加过滤。或者，在本申请的其他实施例中，尼龙66也可以不为滤膜的形式，例如，可以为吸附纸等。
作为示例性地，在本实施例中，尼龙66吸附红花药材溶液的步骤包括：取红花注射液50mL，用材质为尼龙
Figure BDA0002270116490000051
50mm的微孔滤膜过滤，滤液再次用同一张微孔滤膜反复过滤3次-4次，保证药液中亚精胺充分吸附于微孔滤膜上。
在一些实施例中，采用溶剂溶解富集物然后过滤的步骤包括：采用溶剂溶解破碎后的所述富集物，称定重量，超声提取8-12min后再称定重量，再用溶剂补足减失的重量；过滤后取滤液。
例如，破碎富集物，然后采用溶剂溶解，溶解后称量为第一重量，超声提取8-12min后再次称重为第二重量，加入溶剂至溶液为第一重量，过滤后取滤液定容。
在本申请的其他实施例中，溶剂溶解富集物之后可以不采用超声提取，例如以增加浸泡时间和搅拌时间以使尼龙66与亚精胺分离。
进一步地，过滤之后，定容之前，还包括采用氮气吹滤液以蒸发部分溶剂。
氮气吹滤液以蒸发部分溶剂可以避免亚精胺成分结构发生变化。在其他实施例中，也可以采用真空蒸发等方式蒸发部分溶剂。
作为示例性地，采用溶剂溶解富集物然后过滤的步骤包括：将过滤完成后的滤膜(富集物)用剪刀剪碎，置于具塞三角瓶中，加入30mL甲醇，密塞，称定重量，超声提取10min，再称定重量，用甲醇补足减失的重量。用滤纸过滤。取续滤液20mL，用氮气吹至小于2mL时，转移至2mL容量瓶，用甲醇定容至刻度，摇匀后，用PVDF(聚偏氟乙烯)材质的微孔(0.2μm)滤膜过滤，即得。
需要说明的是，上述的2mL容量瓶等也可以根据实际选用其他规格的定容仪器。
PVDF(聚偏氟乙烯)材质的微孔(0.2μm)滤膜主要用于过滤其他杂质，本申请的其他实施例中，可以采用其他材质的滤膜股过滤。
在本实施例中，高效液相色谱的操作条件为：流动相为甲醇、乙腈中的一种或两种与水形成的混合物；柱温为27-32℃；检测波长为270-300nm。甲醇、乙腈中的一种或两种之和与水的体积比为18-22：78-82。高效液相色谱的色谱柱填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶。
流动相为甲醇、乙腈中的一种或两种与水形成的混合物；其中，甲醇、乙腈或者甲醇与乙腈的混合物占流动相体积的18％-22％；例如可以为18％、19％、20％或者22％等。
作为示例性地，采用高效液相色谱测定滤液中的亚精胺包括以下步骤：
对照品溶液制备：取红花亚精胺对照品适量，精密称定，用甲醇溶解制成每1mL含10μL的溶液，溶液经PVDF微孔滤膜过滤。
色谱条件：照高效液相色谱法(通则0512)测定。以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积比为20:80的乙腈-水溶液为流动相；柱温为30℃；检测波长为290nm。理论板数按四种亚精胺香豆素成分计算均不低于5000。
检测：精密吸取供试品溶液和对照品溶液各10μL，注入气相色谱仪，测定，按四种亚精胺成分峰面积和进行计算，即得。
本申请实施例还提供一种亚精胺的富集方法，亚精胺的富集方法包括：
采用尼龙66富集溶液中的亚精胺。
承上所述，采用尼龙66可以使亚精胺被富集，使亚精胺与其余成分易分离。
进一步地，上述的溶液含有红花，例如可以为红花注射液。需要说明的是，本申请不对上述溶液中除了亚精胺之外的其余成分进行限定。
进一步地，采用尼龙66富集溶液中的亚精胺之后，再采用溶剂将亚精胺与尼龙66脱附，过滤去除尼龙66；可选地，过滤去除尼龙66后可以再采用氮气吹滤液挥发溶剂。其中，溶剂为甲醇或者体积分数为70-100％的乙醇水溶液。
以下结合实施例对本申请的特征和性能作进一步的详细描述。
实施例1
本实施例提供一种红花注射液中亚精胺的富集方法，以及红花注射液中亚精胺的测定方法。
红花注射液中亚精胺的富集方法包括以下步骤：
取红花注射液50mL，采用孔径为0.2μm的尼龙66微孔滤膜过滤；过滤后滤膜剪碎，加入30mL甲醇超声提取，经滤纸过滤取滤液即可。
红花注射液中亚精胺的测定方法包括以下步骤：
采用本实施例提供的红花注射液中亚精胺的富集方法富集红花注射液中的亚精胺。
取滤液20mL，用氮气吹至溶液小于2mL，转移至2mL容量瓶，用甲醇定容至刻度，摇匀后，用PVDF材质的微孔(0.2μm)滤膜过滤，取滤液即得供试品。
对照品溶液制备：取红花亚精胺成分对照品适量，精密称定，用甲醇溶解制成每1mL含10μL的溶液，溶液经PVDF微孔滤膜过滤；取滤液。
取供试品溶液和对照品溶液各10μL分别注入高效液相色谱仪，色谱条件如下：以乙腈-水溶液(体积比20:80)为流动相；柱温为30℃；检测波长为290nm。理论板数不低于5000。记录色谱图；对照品色谱图如图1所示；供试品溶液色谱图如图2所示。
取10批红花注射液，按上述红花药材中亚精胺含量的测定方法检测亚精胺含量，结果见表1。
表1红花注射液亚精胺香豆素成分含量检测结果
样品编号 含量(μg/mL) 样品编号 含量(μg/mL)
KY181901 0.1824 KY181906 0.1632
KY181902 0.1864 KY181906 0.148
KY181903 0.203 KY181908 0.195
KY181904 0.2222 KY181909 0.3426
KY181905 0.1426 KY181910 0.2626
对比例1
本对比例提供一种红花注射液中亚精胺的测定方法。
本对比例的方法与实施例1的方法不同之处在于红花注射液中亚精胺的富集方法采用的材料不同，滤膜的孔径尺寸均相同；实施例1采用尼龙66，对比例1采用聚醚砜。
本对比例得到的色谱图如图3所示。
从图2以及图3可以看出，采用尼龙66微孔滤膜富集的样品，存在显著的对照品色谱峰，采用聚醚砜微孔滤膜富集的样品中，未发现有对照品色谱峰。说明尼龙66材质微孔滤膜能富集亚精胺；而同样具有聚酰胺结构的聚醚砜不能富集亚精胺。
试验例1
尼龙66吸附能力的考察
供试品制备：取4份50mL红花注射液，样品编号为I、II、III、IV，分别用尼龙66微孔滤膜(孔径0.2μm)进行吸附过滤，其中样品I过滤1次，样品II过滤2次，样品III过滤3次，样品IV过滤4次。各样品的最终滤过液，再用新的尼龙66微孔滤膜(孔径0.2μm)过滤1次。
新的尼龙66微孔滤膜过滤后，取出，用剪刀剪碎，置于具塞三角瓶中，加入30mL甲醇，密塞，称定重量，超声提取10min，再称定重量，用甲醇补足减失的重量。用滤纸过滤。取续滤液20mL，用氮气吹至滤液小于2mL时，转移至2mL容量瓶，然后用甲醇定容，摇匀后，用PVDF材质的微孔(0.2μm)滤膜过滤，即得供试品I、II、III、IV。
对照品溶液制备：取红花亚精胺成分对照品适量，精密称定，用甲醇溶解制成每1mL含10μL的溶液，溶液经PVDF微孔滤膜过滤；取滤液。
采用实施例1中的色谱条件将上述四种供试品和参照物溶液分别注入高效液相色谱仪，记录色谱图。计算亚精胺成分的总面积。结果见表2所示。
表2红花注射液过滤吸附次数的考察
样品编号 色谱峰总面积(μAU*min)
I 201732
II 11203
III 0
IV 0
从表2中可以看出，供试品III和IV中亚精胺成分均未检出，说明红花注射液经两次直径为0.2μm的尼龙66微孔滤膜过滤吸附后，亚精胺成分就能被完全吸附。
试验例2
精密度考察
精密吸取亚精胺成分对照品溶液，10μL，连续进样6次，记录四种亚精胺香豆素成分总峰面积，计算RSD为0.8％。说明仪器精密度良好。
重复性考察
取同一批号红花注射液，按实施例1提供的测定方法测定6次。记录供试品亚精胺成分总峰面积，计算RSD为3.2％。说明方法重复性良好。
稳定性考察
取同一供试品溶液，按实施例1提供的测定方法，分别在0小时、2小时、4小时、8小时、16小时、24小时进样(10μL)，记录供试品亚精胺成分总峰面积，计算RSD为1.5％。说明方法重复性良好。
线性考察
取亚精胺成分适量，用检测配制每1mL含亚精胺成分为1.15μg/mL、2.3μg/mL、4.6μg/mL、9.2μg/mL、18.4μg/mL、36.8μg/mL的对照品溶液，分别精密吸取10μL，注入高效液相色谱仪，采用实施例1中的色谱条件，记录亚精胺成分总峰面积。以亚精胺成分进样量为横坐标(X)，以总峰面积为纵坐标(Y)，绘制线性图；线性图如图4所示。线性回归的Y＝17162×X+1.95(r＝0.9995)，线性范围：0.0115～0.368μg。研究显示亚精胺香豆素成分在进样量为0.0115～0.368μg范围内，线性良好。
加样回收率
精密吸取红花注射液6份，每份50mL(亚精胺成分含量为0.369μg/mL)，分别加入1mL实施例1制备的对照品溶液(18.4μg/mL)，按照实施例1中的供试品制备法制备供试品。照实施例1提供的色谱方法进行检测，计算回收率，得平均回收率为103.9％，RSD＝4.6％。见表3。
表3红花注射液亚精胺成分检测回收率实验结果
Figure BDA0002270116490000111
从表3中可知，实施例1提供的亚精胺含量检测方法准确性良好。
耐用性试验
色谱柱采用Phenomenex Gemini-C18(4.6mm×250mm，5.0μm)、AcclaimTM 120 C18(4.6mm×250mm，5.0μm)和Waters symmetry shieldTM RP18(4.6mm×250mm，5.0μm)三种色谱柱对同一红花注射液供试品进行含量测定，结果见表4。Waters symmetry shieldTM RP18色谱柱的亚精胺成分分离色谱图如图5所示，AcclaimTM 120 C18色谱柱的亚精胺成分分离色谱图如图6所示，Phenomenex Gemini-C18色谱柱的亚精胺成分分离色谱图如图7所示。
表4亚精胺成分HPLC检测色谱柱耐用性考察结果
Figure BDA0002270116490000121
从表4以及图5-图7中可以看出，三种色谱柱检测所得含量稳定，RSD为1.59％。4种亚精胺成分色谱峰分离度均良好。
从试验例1与试验例2可以看出：本申请实施例提供的红花药材中亚精胺含量的测定方法耐用性高、检测准确性良好、稳定性佳、重复性良好。
以上所述仅为本申请的优选实施例而已，并不用于限制本申请，对于本领域的技术人员来说，本申请可以有各种更改和变化。凡在本申请的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本申请的保护范围之内。

Claims (9)

1.一种红花药材溶液中亚精胺含量的测定方法，其特征在于，所述红花药材溶液中亚精胺含量的测定方法包括以下步骤：
采用尼龙66吸附所述红花药材溶液中的亚精胺得到富集物；
采用溶剂溶解所述富集物然后过滤；采用高效液相色谱测定滤液中的亚精胺；
其中，所述溶剂为体积分数为70-100%的甲醇水溶液或者体积分数为70-100%的乙醇水溶液。
2.根据权利要求1所述的红花药材溶液中亚精胺含量的测定方法，其特征在于，所述采用尼龙66吸附所述红花药材溶液中的亚精胺得到富集物的步骤包括：
采用孔径为0.2μm的材质为尼龙66的滤膜过滤所述红花药材溶液；且滤液采用同一张滤膜过滤多次。
3.根据权利要求1所述的红花药材溶液中亚精胺含量的测定方法，其特征在于，所述红花药材溶液为红花注射液。
4.根据权利要求1-3任一项所述的红花药材溶液中亚精胺含量的测定方法，其特征在于，所述高效液相色谱的条件为：流动相为甲醇、乙腈中的一种或两种与水形成的混合物；
柱温为27-32℃；
检测波长为270-300nm。
5.根据权利要求4所述的红花药材溶液中亚精胺含量的测定方法，其特征在于，所述甲醇、乙腈中的一种或两种之和与水的体积比为18-22：78-82。
6.根据权利要求1-3任一项所述的红花药材溶液中亚精胺含量的测定方法，其特征在于，所述高效液相色谱的色谱柱填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶。
7.根据权利要求1-3任一项所述的红花药材溶液中亚精胺含量的测定方法，其特征在于，所述采用溶剂溶解所述富集物然后过滤的步骤包括：
采用溶剂溶解破碎后的所述富集物，称定重量，超声提取8-12min后再称定重量，再用溶剂补足减失的重量；过滤后取滤液。
8.根据权利要求1-3任一项所述的红花药材溶液中亚精胺含量的测定方法，其特征在于，过滤之后，定容之前，还包括采用氮气吹所述滤液以蒸发部分溶剂。
9.根据权利要求1-3任一项所述的红花药材溶液中亚精胺含量的测定方法，其特征在于，将亚精胺成分所对应的峰面积带入以下公式计算亚精胺成分进样量：Y=17162X+1.95；
其中，X为所述亚精胺成分进样量；Y为所述亚精胺成分所对应的峰面积。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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CN114236028B (zh) * 2021-12-23 2023-09-08 华润三九（雅安）药业有限公司 一种供试品的制备方法以及银杏叶制剂中游离黄酮含量的测定方法

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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5334513A (en) * 1988-05-17 1994-08-02 Syntex (U.S.A.) Inc. Method for immunochromatographic analysis
US7332345B2 (en) * 1998-01-22 2008-02-19 California Institute Of Technology Chemical sensor system
EP1783220A1 (de) * 2005-11-07 2007-05-09 Qiagen GmbH Verfahren zur selektiven, reversiblen Adsorption von Nukleinsäuren an ein Trägermaterial
CN102650628B (zh) * 2012-05-18 2014-10-29 中国农业大学 一种快速检测生物胺的方法
WO2014075086A1 (en) * 2012-11-12 2014-05-15 Nagare Membranes, Llc Methods for reducing ion exchange and reverse salt flux phenomena in membranes for osmotically driven membrane processes
CN105158355B (zh) * 2015-08-12 2017-01-18 山西大学 一种同时快速测定红花中四种亚精胺成分含量的方法
CN109212010A (zh) * 2018-09-05 2019-01-15 东南大学 一种简便快速高通量的样品检测方法

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