CN110787218A - 一种桂花提取物的提取工艺 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种桂花提取物的提取工艺，涉及植物提取技术领域，解决了因桂花提取物仅通过水或低浓度乙醇提取获得，而导致其抑菌活性大大降低的问题，步骤如下：步骤一，粉碎干燥：将新鲜的桂花真空干燥，粉碎后过筛，得到桂花粉末；步骤二，萃取超声：将桂花粉末浸没在氯仿和乙醇溶液的混合溶液中回流萃取，得到萃取液，再向萃取液中加入乙醇溶液，进行超声处理，离心后取上层清液，得到提取液；步骤三，过滤浓缩：对提取液进行过滤，将过滤去渣后的滤液水浴浓缩，纯化后得到浓缩液；步骤四，灭菌干燥：将浓缩液进行超高压灭菌，再经过冷冻干燥和筛分后，即可得到桂花提取物。本发明提取得到的桂花提取物具有良好的抑菌活性，整体应用性好。

Description

一种桂花提取物的提取工艺
技术领域
本发明涉及植物提取技术领域，更具体地说，它涉及一种桂花提取物的提取工艺。
背景技术
桂花的香味沁人心脾，有助于消除疲劳，使人感到如释重复，且不但有净化空气的作用，而且能抑制大肠杆菌、白色念珠菌、金黄色葡萄球菌的生长繁殖。
在公开号为CN105832603A的中国发明专利申请文件中公开了一种桂花提取物的制备方法，步骤包括：1)选取干桂花为原料，进行粉碎；2)加入步骤1)所得原料质量的5-20倍的溶剂，在25-95℃下，搅拌提取桂花提取液30-180分钟，过滤；3)将步骤2)所得桂花提取液离心，纯化，收集滤过液；4)将滤过液浓缩至浸膏比重为1.10-1.30，得到桂花提取浸膏；5)对所述桂花提取浸膏进行干燥，得到桂花提取物。
上述申请文件中，仅仅使用水或低浓度乙醇作为提取溶剂，完全不需要添加抗氧化剂，使桂花提取物可安全地用于食品、药品、保健品、护理品、化妆品领域，但仅通过水或低浓度乙醇对桂花进行提取，提取杂质较多，后续分离纯化困难，导致桂花提取物的抑菌活性大大降低，整体应用性不佳，因此，需要提出一种新的方案来解决上述问题。
发明内容
针对现有技术中因桂花提取物仅通过水或低浓度乙醇提取获得，而导致其抑菌活性大大降低的问题，本发明的目的在于提供一种桂花提取物的提取工艺，以解决上述技术问题，其具有良好的抑菌活性，整体应用性好。
为实现上述目的一，本发明提供了如下技术方案：
一种桂花提取物的提取工艺，包括以下步骤：
步骤一，粉碎干燥：将新鲜的桂花真空干燥，粉碎后过筛，得到桂花粉末；
步骤二，萃取超声：将桂花粉末浸没在氯仿和乙醇溶液的混合溶液中回流萃取，得到萃取液，再向萃取液中加入乙醇溶液，进行超声处理，离心后取上层清液，得到提取液；
步骤三，过滤浓缩：对步骤二中的提取液进行过滤，将过滤去渣后的滤液水浴浓缩，纯化后得到浓缩液；
步骤四，灭菌干燥：将浓缩液进行超高压灭菌，再经过冷冻干燥和筛分后，即可得到桂花提取物。
通过采用上述技术方案，氯仿和乙醇溶液之间具有良好的相容性，能够形成良好稳定的混合溶液，因乙醇能溶解桂花中更多的干扰物，如硬脂酸、油酸等，而氯仿溶解这些物质的能力并不强，可大大减少提取物中的杂质，不仅有利于后期进行纯化，还能够使桂花提取物具有良好的抑菌活性。同时，在提取过程中，先用氯仿和乙醇溶液的混合溶液萃取多次，再用乙醇溶液单独超声处理，并有利于保证抑菌活性成分整体的活性，且可以挥去有害成分氯仿。过滤浓缩后，在灭菌干燥过程中，进行冷冻干燥，使桂花提取物能够保留良好的抑菌活性，且整体应用性好。
进一步优选为，所述步骤二中，氯仿和乙醇的体积混合比为1：(3-5)。
进一步优选为，所述步骤二中，乙醇溶液选用体积分数为70-90％的乙醇溶液。
通过采用上述技术方案，选用上述体积份数的乙醇溶液，以及采用上述体积混合比的氯仿和乙醇，既能保持桂花中抑菌活性成分的抑菌活性，还能保证抑菌活性成分的析出率，使得到的桂花提取物具有良好的品质。
进一步优选为，所述步骤三具体设置为，过滤浓缩：对步骤二中的提取液进行过滤，将过滤去渣后的滤液水浴浓缩，然后用大孔吸附树脂纯化后，得到浓缩液。
通过采用上述技术方案，大孔吸附树脂具有良好的大孔网状结构和较大的比表面积，它的理化性质稳定，不溶于酸、碱及有机溶剂，不受无机盐类及强离子低分子化合物的影响，能够对水浴浓缩后的提取液起到良好的纯化效果，有利于得到较为纯净的浓缩液，并使浓缩液中的抑菌活性成分能够保持良好的抑菌活性。
进一步优选为，所述步骤三中，大孔吸附树脂的吸附流速为3-5BV/h，洗脱剂为60-70％的乙醇溶液，洗脱流速为1.8-2.4BV/h。
通过采用上述技术方案，选用上述参数控制进行操作，能够起到良好的洗脱效果，保证桂花提取物具有良好的品质。
进一步优选为，所述步骤一具体设置为，粉碎干燥：将新鲜的桂花真空干燥，粉碎后过40-80目筛，得到桂花粉末。
进一步优选为，所述步骤二具体设置为，萃取超声：将桂花粉末浸没在氯仿和乙醇溶液的混合溶液中回流萃取3-5次，每次萃取时间20-30min，萃取温度为30-50℃，得到萃取液，再向萃取液中加入3-5倍的乙醇溶液，进行超声处理，超声处理20-30min，温度为70-90℃，重复处理3-5次，然后离心5-10min，离心后取上层清液，得到提取液。
通过采用上述技术方案，在萃取过程中，控制萃取温度为30-50℃，能够使桂花中的抑菌活性成分稳定析出，且不易受到损伤，并可大大减少提取物中的杂质，而在合并萃取液后，加入乙醇溶液重复超声处理多次，控制温度为70-90℃，能够使萃取液中的氯仿尽可能的析出，在一定程度上保证并提高桂花提取物的抑菌活性，整体应用性好。
进一步优选为，所述步骤二中，超声处理的功率为200-300W，频率为30-50kHz，离心的转速为2000-3000rpm。
进一步优选为，所述步骤三具体设置为，过滤浓缩：对步骤二中的提取液进行过滤，将过滤去渣后的滤液水浴浓缩，水浴温度为60-80℃，浓缩至0.4-0.5mg/mL，得到浓缩液。
通过采用上述技术方案，采用上述参数控制，能够保持整个提取过程中的高效稳定，且不易对抗菌活性成分的抗菌活性造成损害，能够使得到的桂花提取物具有较高的品质。
综上所述，与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
(1)将氯仿和乙醇溶液混合后对桂花进行提取，可大大减少提取物中的杂质，不仅有利于后期进行纯化，还能够使桂花提取物具有良好的抑菌活性，然后再用乙醇溶液单独超声处理，可以挥去有害成分氯仿，并使桂花提取物能够保留良好的抑菌活性，且整体应用性好；
(2)大孔吸附树脂对水浴浓缩后的提取液起到良好的纯化效果，有利于得到较为纯净的浓缩液，并使浓缩液中的抑菌活性成分能够保持良好的抑菌活性。
附图说明
图1为本发明的工艺流程图。
具体实施方式
下面结合附图和实施例，对本发明进行详细描述。
实施例1：一种桂花提取物的提取工艺，具体包括以下步骤：
步骤一，粉碎干燥：将新鲜的桂花真空干燥，粉碎后过60目筛，得到桂花粉末；
步骤二，萃取超声：将桂花粉末浸没在氯仿和乙醇溶液的混合溶液中回流萃取4次，每次萃取时间25min，萃取温度为40℃，得到萃取液，再向萃取液中加入4倍的乙醇溶液，进行超声处理，超声处理25min，温度为80℃，重复处理4次，然后离心7.5min，离心后取上层清液，得到提取液；
步骤三，过滤浓缩：对步骤二中的提取液进行过滤，将过滤去渣后的滤液水浴浓缩，水浴温度为70℃，浓缩至0.45mg/mL，然后用大孔吸附树脂纯化后，大孔吸附树脂的吸附流速为4BV/h，洗脱剂为65％的乙醇溶液，洗脱流速为2.1BV/h，得到浓缩液；
步骤四，灭菌干燥：将浓缩液进行超高压灭菌，再经过冷冻干燥和筛分后，即可得到桂花提取物。
注：步骤二中，氯仿和乙醇的体积混合比为1：4，而乙醇溶液选用体积分数为80％的乙醇溶液；超声处理的功率为250W，频率为40kHz，离心的转速为2500rpm。
实施例2：一种桂花提取物的提取工艺，与实施例1的不同之处在于，具体包括以下步骤：
步骤一，粉碎干燥：将新鲜的桂花真空干燥，粉碎后过40目筛，得到桂花粉末；
步骤二，萃取超声：将桂花粉末浸没在氯仿和乙醇溶液的混合溶液中回流萃取3次，每次萃取时间30min，萃取温度为50℃，得到萃取液，再向萃取液中加入3倍的乙醇溶液，进行超声处理，超声处理30min，温度为90℃，重复处理5次，然后离心5min，离心后取上层清液，得到提取液；
步骤三，过滤浓缩：对步骤二中的提取液进行过滤，将过滤去渣后的滤液水浴浓缩，水浴温度为60℃，浓缩至0.5mg/mL，然后用大孔吸附树脂纯化后，大孔吸附树脂的吸附流速为3BV/h，洗脱剂为70％的乙醇溶液，洗脱流速为2.4BV/h，得到浓缩液；
步骤四，灭菌干燥：将浓缩液进行超高压灭菌，再经过冷冻干燥和筛分后，即可得到桂花提取物。
实施例3：一种桂花提取物的提取工艺，与实施例1的不同之处在于，具体包括以下步骤：
步骤一，粉碎干燥：将新鲜的桂花真空干燥，粉碎后过80目筛，得到桂花粉末；
步骤二，萃取超声：将桂花粉末浸没在氯仿和乙醇溶液的混合溶液中回流萃取5次，每次萃取时间20min，萃取温度为30℃，得到萃取液，再向萃取液中加入5倍的乙醇溶液，进行超声处理，超声处理20min，温度为70℃，重复处理3次，然后离心10min，离心后取上层清液，得到提取液；
步骤三，过滤浓缩：对步骤二中的提取液进行过滤，将过滤去渣后的滤液水浴浓缩，水浴温度为80℃，浓缩至0.4mg/mL，然后用大孔吸附树脂纯化后，大孔吸附树脂的吸附流速为5BV/h，洗脱剂为60％的乙醇溶液，洗脱流速为2.4BV/h，得到浓缩液；
步骤四，灭菌干燥：将浓缩液进行超高压灭菌，再经过冷冻干燥和筛分后，即可得到桂花提取物。
实施例4：一种桂花提取物的提取工艺，与实施例1的不同之处在于，步骤二中，氯仿和乙醇的体积混合比为1：3，而乙醇溶液选用体积分数为70％的乙醇溶液；超声处理的功率为200W，频率为30kHz，离心的转速为2000rpm。
实施例5：一种桂花提取物的提取工艺，与实施例1的不同之处在于，步骤二中，氯仿和乙醇的体积混合比为1：5，而乙醇溶液选用体积分数为90％的乙醇溶液；超声处理的功率为300W，频率为50kHz，离心的转速为3000rpm。
对比例1：一种桂花提取物的提取工艺，与实施例1的不同之处在于，步骤二中，氯仿和乙醇的体积混合比为1：8，而乙醇溶液选用体积分数为80％的乙醇溶液。
对比例2：一种桂花提取物的提取工艺，与实施例1的不同之处在于，步骤二中，氯仿和乙醇的体积混合比为1：7，而乙醇溶液选用体积分数为80％的乙醇溶液。
对比例3：一种桂花提取物的提取工艺，与实施例1的不同之处在于，步骤二中，氯仿和乙醇的体积混合比为1：2，而乙醇溶液选用体积分数为80％的乙醇溶液。
对比例4：一种桂花提取物的提取工艺，与实施例1的不同之处在于，步骤三中，大孔吸附树脂的吸附流速为6BV/h，洗脱剂为80％的乙醇溶液，洗脱流速为2.5BV/h。
对比例5：一种桂花提取物的提取工艺，与实施例1的不同之处在于，步骤三中，大孔吸附树脂的吸附流速为2.5BV/h，洗脱剂为50％的乙醇溶液，洗脱流速为1.5BV/h。
对比例6：一种桂花提取物的提取工艺，与实施例1的不同之处在于，步骤三中，大孔吸附树脂的吸附流速为6BV/h，洗脱剂为80％的乙醇溶液，洗脱流速为1.7BV/h。
对比例7：一种桂花提取物的提取工艺，与实施例1的不同之处在于，步骤二中，将桂花粉末浸没在氯仿和乙醇溶液的混合溶液中回流萃取4次，每次萃取时间25min，萃取温度为60℃，得到萃取液。
对比例8：一种桂花提取物的提取工艺，与实施例1的不同之处在于，步骤二中，将桂花粉末浸没在氯仿和乙醇溶液的混合溶液中回流萃取4次，每次萃取时间25min，萃取温度为20℃，得到萃取液。
对比例9：一种桂花提取物的提取工艺，与实施例1的不同之处在于，步骤二中，将桂花粉末浸没在氯仿和乙醇溶液的混合溶液中回流萃取4次，每次萃取时间25min，萃取温度为25℃，得到萃取液。
对比例10：一种桂花提取物的提取工艺，与实施例1的不同之处在于，步骤二中，超声处理25min，温度为95℃，重复处理4次，然后离心7.5min，离心后取上层清液，得到提取液。
对比例11：一种桂花提取物的提取工艺，与实施例1的不同之处在于，步骤二中，超声处理25min，温度为100℃，重复处理4次，然后离心7.5min，离心后取上层清液，得到提取液。
对比例12：一种桂花提取物的提取工艺，与实施例1的不同之处在于，步骤二中，超声处理25min，温度为65℃，重复处理4次，然后离心7.5min，离心后取上层清液，得到提取液。
对比例13：一种桂花提取物的提取工艺，与实施例1的不同之处在于，步骤二具体设置为，萃取超声：将桂花粉末浸没在乙醇溶液中回流萃取4次，每次萃取时间25min，萃取温度为40℃，得到萃取液，再向萃取液中加入4倍的乙醇溶液，进行超声处理，超声处理25min，温度为80℃，重复处理4次，然后离心7.5min，离心后取上层清液，得到提取液。
对比例14：一种桂花提取物的提取工艺，与实施例1的不同之处在于，步骤二具体设置为，萃取超声：将桂花粉末浸没在水溶液中回流萃取4次，每次萃取时间25min，萃取温度为40℃，得到萃取液，再向萃取液中加入4倍的乙醇溶液，进行超声处理，超声处理25min，温度为80℃，重复处理4次，然后离心7.5min，离心后取上层清液，得到提取液。
性能测试
试验样品：准备1700g鲜桂花，而鲜桂花购自咸宁市华伟苗木种植专业合作社，然后等质量分成17份，分别采用实施例1-5和对比例1-14中所公开的提取工艺对鲜桂花进行提取，对得到的17种桂花提取物对应实施例1-5和对比例1-14进行标记，并将其作为试验样品。
试验方法：分别从对应实施例1-5和对比例1-14的试验样中称取10g的，分别加入到90mL无菌水稀释瓶中，振荡摇匀，当45℃水浴中，30min后取出，取样品稀释混合液5mL，放入无菌平皿中直接进行试验。试验菌株：大肠杆菌(8099)，培养3代、白色念珠菌(ATCC10231)，培养三代、金黄色葡萄球菌(ATCC6538),培养3代，由中国菌种保藏中心提供。培养基选用沙氏琼脂培养基，购自南京便诊生物科技有限公司，牌号为BZW1201K。然后采用琼脂稀释法测抑菌率，分别检测各试验样品作用10min时的对大肠杆菌、白色念珠菌和金黄色葡萄球菌的平均抑菌率。
试验结果：实施例1-5和对比例1-14的测试结果如表1所示。由表1可知，由实施例1-5和对比例13-14的测试结果对比可得，采用将氯仿和乙醇溶液混合比单独采用乙醇溶液或水对桂花进行提取的提取效果更好，使得到的桂花提取物对大肠杆菌、白色念珠菌和金黄色葡萄球菌具有良好较高的抑菌效果。由实施例1和对比例1-3、对比例4-6、对比例7-9、对比例10-12的测试结果分别对比可得，步骤二中控制氯仿和乙醇的体积混合比为1：(3-5)、萃取温度范围为30-50℃、超声处理温度范围为70-90℃以及控制步骤三中洗脱剂乙醇溶液的体积份数范围为60-70％，能够得到品质良好稳定的桂花提取物。
表1实施例1-5和对比例1-14的测试结果
Figure BDA0002273725670000071
以上所述仅是本发明的优选实施方式，本发明的保护范围并不仅局限于上述实施例，凡属于本发明思路下的技术方案均属于本发明的保护范围。应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理前提下的若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (9)

1.一种桂花提取物的提取工艺，其特征在于，包括以下步骤：
步骤一，粉碎干燥：将新鲜的桂花真空干燥，粉碎后过筛，得到桂花粉末；
步骤二，萃取超声：将桂花粉末浸没在氯仿和乙醇溶液的混合溶液中回流萃取，得到萃取液，再向萃取液中加入乙醇溶液，进行超声处理，离心后取上层清液，得到提取液；
步骤三，过滤浓缩：对步骤二中的提取液进行过滤，将过滤去渣后的滤液水浴浓缩，纯化后得到浓缩液；
步骤四，灭菌干燥：将浓缩液进行超高压灭菌，再经过冷冻干燥和筛分后，即可得到桂花提取物。
2.根据权利要求1所述的桂花提取物的提取工艺，其特征在于，所述步骤二中，氯仿和乙醇的体积混合比为1：（3-5）。
3.根据权利要求1所述的桂花提取物的提取工艺，其特征在于，所述步骤二中，乙醇溶液选用体积分数为70-90%的乙醇溶液。
4.根据权利要求1所述的桂花提取物的提取工艺，其特征在于，所述步骤三具体设置为，过滤浓缩：对步骤二中的提取液进行过滤，将过滤去渣后的滤液水浴浓缩，然后用大孔吸附树脂纯化后，得到浓缩液。
5.根据权利要求4所述的桂花提取物的提取工艺，其特征在于，所述步骤三中，大孔吸附树脂的吸附流速为3-5BV/h，洗脱剂为60-70%的乙醇溶液，洗脱流速为1.8-2.4BV/h。
6.根据权利要求1所述的桂花提取物的提取工艺，其特征在于，所述步骤一具体设置为，粉碎干燥：将新鲜的桂花真空干燥，粉碎后过40-80目筛，得到桂花粉末。
7.根据权利要求1所述的桂花提取物的提取工艺，其特征在于，所述步骤二具体设置为，萃取超声：将桂花粉末浸没在氯仿和乙醇溶液的混合溶液中回流萃取3-5次，每次萃取时间20-30min，萃取温度为30-50℃，得到萃取液，再向萃取液中加入3-5倍的乙醇溶液，进行超声处理，超声处理20-30min，温度为70-90℃，重复处理3-5次，然后离心5-10min，离心后取上层清液，得到提取液。
8.根据权利要求7所述的桂花提取物的提取工艺，其特征在于，所述步骤二中，超声处理的功率为200-300W，频率为30-50kHz，离心的转速为2000-3000rpm。
9.根据权利要求1所述的桂花提取物的提取工艺，其特征在于，所述步骤三具体设置为，过滤浓缩：对步骤二中的提取液进行过滤，将过滤去渣后的滤液水浴浓缩，水浴温度为60-80℃，浓缩至0.4-0.5mg/mL，得到浓缩液。
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