CN110772629A - 治疗妇科炎症及提高免疫力的益生菌复方植物药及制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种治疗妇科炎症及提高免疫力的益生菌复方植物药，按重量份计，其包括：可溶性淀粉3‑5份，L‑阿拉伯糖2‑3份、水苏糖5‑8份，大豆多肽粉12‑18份，黑木耳粉10‑12粉，黄芪3‑5份，冬瓜籽粉8‑10份，蒲公英5‑8份，金银花5‑8份，植物乳杆菌1‑2份，长双歧杆菌2‑3份，保加利亚乳杆菌1‑2份，唾液乳杆菌1‑2份，苦参2‑3份、嗜乳酸菌1‑2份，酵母3‑5份，干酪乳杆菌1‑2份，大蒜粉0.3‑0.5份，酒石酸2‑3份，重瓣玫瑰花提取物10‑20份，蔓越莓粉15‑20份。其通过特殊的制备工艺制备大豆肽粉、重瓣玫瑰花和蔓越莓粉，进一步通过与益生菌等组分的合理配伍，以起到在妇科炎症治疗期间或恢复期间，能帮助女性患者补充营养、提高免疫力、抗菌消炎、调理肠道菌群以及平衡体内酸碱环境等效果。

Description

治疗妇科炎症及提高免疫力的益生菌复方植物药及制备方法
技术领域
本发明涉及药品开发领域。更具体地说，本发明涉及一种治疗妇科炎症及提高免疫力的益生菌复方植物药及制备方法。
背景技术
由于女性相对特殊的生理结构，很容易感染各种细菌、真菌和霉菌等从而诱发妇科炎症。妇科炎症主要是指女性生殖器官的炎症，包括各种原因引起的阴道炎、宫颈炎、盆腔炎，常出现外阴瘙痒、灼热肿痛、阴道充血、白带量多、尿频、尿急、尿痛、下腹坠胀等症状，严重时影响女性的生活质量，炎症反复感染也会侵害女性生殖其他器官，甚至可能导致某些部位的恶性病变。
对于妇科炎症的治疗，目前西医一般用抗生素治疗本病，由于抗生素难以渗入局部发挥作用，对消除纤维组织和结缔组织炎症效果较差，且抗生素不具备缓解粘连及止痛作用，故慢性盆腔炎单纯用抗生素，疗效不尽如人意，且造成病情反复，耐药性增加难以根治等缺陷。而中医药治疗该病有较大的优势和特色，且抗生素本身不具备补充机体营养的功效。且经过局部用药治疗后，症状会很快改善或消失，但这并不说明炎症已痊愈，而是病原体暂时受到了抑制。
因此，开发出一种既能提高患者的机体功能，加强机体营养，提高机体免疫力，又能杀菌抗炎的药品显得尤为重要。
发明内容
为解决上述技术问题，本发明提供了一种治疗妇科炎症及提高免疫力的益生菌复方植物药及其制备方法，其通过特殊的制备工艺制备大豆肽粉、重瓣玫瑰花和蔓越莓粉，可大幅提高这几者活性成本的产量，进一步通过与其他组分(如副干酪乳杆菌等益生菌)的合理配伍，以起到在妇科炎症治疗期间，能杀菌抗炎的同时帮助女性患者补充营养、提高免疫力、调理肠道菌群以及平衡体内酸碱环境等效果。
为了实现根据本发明的这些目的和其它优点，提供了一种治疗妇科炎症及提高免疫力的益生菌复方植物药，按重量份计，其包括：可溶性淀粉3-5份，L-阿拉伯糖2-3份、水苏糖5-8份，大豆多肽粉12-18份，黑木耳粉10-12粉，黄芪3-5份，冬瓜籽粉8-10份，蒲公英5-8份，金银花5-8份，植物乳杆菌1-2份，长双歧杆菌2-3份，保加利亚乳杆菌1-2份，唾液乳杆菌1-2份，苦参2-3份、嗜乳酸菌1-2份，酵母3-5份，干酪乳杆菌1-2份，大蒜粉0.3-0.5份，酒石酸2-3份，重瓣玫瑰花提取物10-20份，蔓越莓粉15-20份。
优选的，所述大豆多肽粉的制备方法包括如下步骤：
S11、将黑曲霉菌种以及米曲霉菌种分别接种于独立的马铃薯葡萄糖琼脂培养基上，再分别放入培养箱中，均于28-35℃条件下活化48-72h，以获得活化的黑曲霉菌种以及米曲霉菌种；
采用配制好的第一液体培养基培养活化的黑曲霉菌种，以获得液态黑曲霉种子液，以及采用配制好的第二液体培养基培养活化的米曲霉菌种，以获得液态米曲霉种子液；
再将所述液态黑曲霉种子液接种到发酵罐中的第一发酵培养基内进行扩大培养，扩大培养温度30-35℃，扩大培养pH6.5-7.0，转速500-800rpm搅拌，培养时间为1-2d，以获得黑曲霉孢子悬浮液；以及将所述液态米曲霉种子液接种到发酵罐中的第二发酵培养基内进行扩大培养，扩大培养温度30-40℃，扩大培养pH6.5-7.0，转速400-600rpm搅拌，培养时间为1-2d，以获得液态米曲霉孢子悬浮液；
S12、按重量份计，在反应釜中加入大豆蛋白粉30-45份、去离子水250-350份、黑曲霉孢子悬浮液20-25份、米曲霉孢子悬浮液15-20份、La(NO3)3.6H2O 0.5-0.6份、NH4Cl1.5-2.5份、KNO3 1-2份，以获得发酵体系，并调节所述发酵体系的pH至6.8-7.0；
对所述发酵体系依次进行三阶段的发酵处理：
第一发酵阶段处理中，发酵温度为30-35℃，并在转速300-400rpm条件下对发酵体系进行搅拌，同时对发酵体系进行第一光照处理和第一磁场处理，处理时间为1-2d；所述第一光照处理为：采用光强为25-30μmol.m-2.s-1的红光以及光强为30-35μmol.m-2.s-1的蓝光照射发酵体系，照射处理时间为45-60min；所述第一磁场处理为：采用50Hz、磁场强度为0.45-0.55mT的交变磁场对发酵体系进行磁场处理，磁场处理时间为45-60min；
第二发酵阶段处理中，发酵温度为25-35℃，并在转速500-600rpm条件下对发酵体系进行搅拌，同时对发酵体系进行第二光照处理和第二磁场处理，处理时间为1-2d；所述第二光照处理为：采用光强为20-24μmol.m-2.s-1的红光以及光强为24-28μmol.m-2.s-1的蓝光照射发酵体系，照射处理时间为35-45min；所述第二磁场处理为；采用50Hz、磁场强度为0.35-0.45mT的交变磁场对发酵体系进行处理磁场处理，磁场处理时间为35-45min；
第三发酵阶段处理中，发酵温度为25-35℃，并在转速300-400rpm条件下对发酵体系进行搅拌，同时对发酵体系进行第三光照处理和第三磁场处理，处理时间为1-2d；所述第三光照处理为：采用光强为16-20μmol.m-2.s-1的红光以及光强为20-22μmol.m-2.s-1的蓝光照射发酵体系，照射处理时间为25-35min；所述第三磁场处理为：采用50Hz、磁场强度为0.2-0.3mT的交变磁场对发酵体系进行处理磁场处理，磁场处理时间为25-35min；
S13、将经步骤S22中发酵处理的发酵体系升温至85℃，维持10min，以完成灭酶活过程，获得大豆肽酶解液；
S14、将所述大豆肽酶解液分散于其质量5-6倍的体积分数为95％的乙醇溶液中，且同时进行超声处理及搅拌，超声功率为600-800W，超声处理时间为10-15min，搅拌转速为100-120转/min；
S15、对经步骤S14处理后的反应体系进行过滤，过滤压力控制在0.3-0.4MPa，过滤温度为50-60℃，弃滤渣，以获得大豆肽清液；
S16、对大豆肽清液进行冷冻干燥，以获得所述大豆肽粉。
优选的，按重量比计，所述第一液体培养基包括：茶多酚1％、蔗糖1.5％、葡萄糖2.5％、麦芽提取物5％、CoCl.6H2O 0.1％、CuSO4.5H2O 0.05％、FeNaEDTA 2％、H3BO30.25％、Na2MoO4.2H2O 0.15％、ZnSO4.7H2O 0.1％、MgSO4 0.1％、KNO3 0.1％、KNO3 0.1％、MnSO4.H2O0.2％、去离子水86.85％；
所述第一发酵培养基包括：番茄汁10％、可溶性淀粉2％、蔗糖2％、葡萄糖2％、玉米粉2.5％、酵母粉0.5％、FeSO4.7H2O 0.1％、MgSO4 0.05％、KNO3 0.05％、CuCl2.2H2O0.1％、(NH4)6Mo7O24.7H2O 0.15％、MnSO4.H2O 0.1％、去离子水80.45％。
优选的，按重量比计，所述第二液体培养基包括：豆芽汁8％、蔗糖1.5％、葡萄糖2.5％、蛋白胨2％、FeNaEDTA 2％、H3BO30.25％、Na2MoO4.2H2O 0.15％、MgSO4 0.1％、KNO30.1％、MnSO4.H2O 0.2％去离子水83.2％；所述第二发酵培养基包括：麦芽糊精5％、玉米粉8％、木糖2％、酵母膏1.5％、MgSO4 0.05％、KNO3 0.1％、NH4NO3 0.15％、MnSO4.H2O 0.1％、去离子水83.1％。
优选的，步骤S11中，对液态黑曲霉种子液和/或液态米曲霉种子液进行扩大培养时，每天对接种有黑曲霉种子液或液态米曲霉种子液的对应发酵培养基进行超声处理，且超声处理频率为20-40Khz，处理时间为30min。
优选的，所述重瓣玫瑰花提取物的制备方法包括如下步骤：
S21、取重瓣玫瑰花鲜花于0—-20℃条件下冷冻干燥，粉碎打浆后获得重瓣玫瑰花物料，并将其加入反应釜中；对所述反应釜内的重瓣玫瑰花物料进行超临界二氧化碳萃取，萃取压力为15Mpa、萃取温度为35℃、CO2流速为30L/h、萃取时间为3-5小时；再通入所述重瓣玫瑰花物料重量3-5％的、体积分数为95％的乙醇作为携带剂，再萃取1小时；再经二级降压分离，且一级降压分离压力为8Mpa，温度45℃，二级降压分离压力为7Mpa，温度40℃，由此得到萃取物；再将萃取物在12000-15000rpm条件下离心，得上清液和底部沉淀；
对所述上清液进行减压升温，再经分子蒸馏分离纯化后得到第一提取物，所述的分子蒸馏条件为：进料温度为50-60℃，进料流速1.0-1.5mL/min，蒸馏温度为80-100℃，真空压力50-60Pa，转速200-300r/min；
S23、取所述底部沉淀，并在其中加入其重量5-8倍的去离子水，以获得酶解原料，并通过对所述酶解原料进行酶解获得酶解体系；其中，所述酶解过程包括：
第一次酶解：将所述酶解原料的pH值调节至8.5，按酶解原料重量的2.5％加入胰蛋白酶，充分搅拌，且搅拌的同时升温至42℃，保温35min后得到第一酶解体系；
第二次酶解：待第一酶解体系温度降至20-25℃后，再调整其pH值至4.0，按第一次酶解体系重量的3％加入果胶酶，充分搅拌，且搅拌的同时升温至45℃，保温30min后得到第二酶解体系；
第三次酶解：待第二酶解体系温度降至20-25℃后，再调整其pH值至5.0，按第二次酶解体系重量的4％加入纤维素酶，充分搅拌，且搅拌的同时升温至60℃，保温25min后得到第三酶解体系；
S24、待酶解完成后，对获得的第三酶解体系升温至85℃，维持10min，以完成灭酶活过程；
S25、将完成灭酶活的第三酶解体系经截留分子量为100-600Da的纳滤膜过滤，以得到玫瑰花浓缩液；
用大孔吸附树脂装柱，分别用纯水、质量分数5％的氢氧化钠溶液和体积分数5％的盐酸溶液洗涤处理树脂，洗涤处理完毕后将5-6倍柱体积的、完成灭酶活的第三酶解体系上柱；用1-2个柱体积的体积分数5％的盐酸洗柱，再用纯水洗至pH 6.8-7.0；再用体积分数10％的甲醇洗脱，收集洗脱液；洗脱液在50℃条件下减压浓缩至甲醇全部脱除；再在脱除甲醇的洗脱液中加入水饱和正丁醇萃取3次，以除去水溶性杂质，且按体积比计，所述水饱和正丁醇：洗脱液＝2:1；回收水饱和正丁醇后得的第二提取物；
S26、合并第一提取物以及第二提取物，在65℃下保温65-85min后离心，去沉渣后的液相再经硅藻土过滤，得到重瓣玫瑰花提取液，且过滤压力控制在0.25-0.35MPa；
S27、将重瓣玫瑰花提取液浓缩至干，得粗结晶物；将得到的粗结晶物用无水乙醇溶解，冷却后放置于4-5℃温度下重结晶，12h后减压抽滤，得到重瓣玫瑰花提取物晶体；重复上述无水乙醇溶解、重结晶步骤2-3次；最后干燥并粉碎晶体，以获得重瓣玫瑰花提取物。
优选的，所述蔓越莓粉的制备方法包括：
S31、称取蔓越莓果实，浸泡24-36h后，去离子水冲洗2-3遍，干燥粉碎，并过筛，以获得蔓越莓粉末；
S32、在所述蔓越莓粉末中加入其重量1-2倍的提取液进行混合反应，所述提取液由体积分数70％的丙酮、体积分数85％的乙醇以及质量分数0.1-0.2％的柠檬酸溶液组成，且所述丙酮、乙醇以及柠檬酸溶液的体积比为1:1:2；于150-200rpm转速条件以及25℃下搅拌，混合反应0.5-1h后离心过滤，以获得上清液与沉淀物；并在上清液中加入其体积1-2倍的石油醚进行脱脂处理，以获得第一提取物；
S34、取所述沉淀物、缓冲液以及去离子水进行混合，按重量比计，沉淀物：缓冲液：去离子水＝1:(2-3)：(8-10)，以获得混合体系，记录混合体系总体积数值，以及将pH值调节为6.8-7；再对混合体系升温至50-60℃，保温60-75min，以获得浸提体系；
对所述浸提体系进行酶解，以获得酶解体系；其中，所述酶解过程包括：
第一次酶解：将浸提体系的pH值调节至8.5，按浸提体系重量的3％加入胰蛋白酶，充分搅拌，且搅拌的同时升温至55℃，保温35min后得到第一酶解体系；
第二次酶解：待第一酶解体系降温至20-25℃后，再调整其pH值至3.5，按第一次酶解体系重量的4％加入果胶酶，充分搅拌，且搅拌的同时升温至45℃，保温30min后得到第二酶解体系；
第三次酶解：待第二酶解体系降温至20-25℃后，再调整其pH值至4.5，按第二次酶解体系重量的3％加入纤维素酶，充分搅拌，且搅拌的同时升温至55℃，保温20min后得到第三酶解体系；
S35、用大孔吸附树脂装柱，分别用纯水、5％氢氧化钠溶液和5％盐酸溶液洗涤处理树脂，洗涤处理完毕后将3-5倍柱体积的、完成灭酶活的第三酶解体系上柱；用1.5-2个柱体积的体积分数为50％的乙醇溶液洗柱，再用纯水洗至pH 6.8-7.0；再用3-5个柱体积的体积分数为60％的丙酮洗脱，收集洗脱液；洗脱液在50℃条件下减压浓缩至丙酮全部脱除；再在脱除丙酮的洗脱液中加入水饱和正丁醇萃取3次，以除去水溶性杂质，且按体积比计，所述水饱和正丁醇：洗脱液＝2:1；回收水饱和正丁醇后得第二提取物；
S36、将所述第二提取物与第一提取物混合混合，并经过微滤陶瓷膜进行过滤，操作温度控制在55-65℃，以获得微滤膜透过液；将微滤膜透过液经过卷式超滤膜进行过滤，操作温度控制在55-65℃，以获得超滤膜透过液；将超滤膜截留液经过卷式高压反渗透膜进行浓缩，控制操作温度在30-40℃，得到浓缩液；对所述浓缩液进行冷冻干燥，粉碎过筛后即获得所述蔓越莓粉。
8、如权利要求4所述的复方植物药，其特征在于，所述缓冲液为磷酸盐缓冲液。
9、如权利要求4所述的复方植物药，其特征在于，进行第一次酶解和/或第二次酶解和/或第三次酶解的同时进行超声处理，所述超声功率为200-400W，超声处理时间为10-15min。
还提供一种治疗妇科炎症及提高免疫力的益生菌复方植物药的制备方法，其包括如下步骤：
S100、按权利要求1中的组分用量称取各组分，充分混匀，将混匀后的混合物置于真空干燥器内干燥，使混合物含水量为3-5％；
S300、制备空心胶囊，按重量百分比计，所述空心胶囊由如下重量百分比的原料制成：羟丙甲纤维素30-32％、果胶8-10％、表面活性剂0.4-0.5％、助凝剂2-3％、着色剂0.03-0.05％、甘氨酸0.03-0.05％、二氧化钛2-3％、甘油0.2-0.4％、无水乙醇10-12％、半胱氨酸1-1.5％、余量为水；
所述空心胶囊的制备方法包括：
(5)称取上述对应比例的空心胶囊制备原料，先在溶胶罐内加入水，加热至85-90℃后加入对应比例的羟丙甲纤维素和果胶，以获得初始胶液，且对所述初始胶液进行超声处理及抽真空处理，所述超声处理频率为120kHZ，所述抽真空处理的真空度为-0.05Mpa，且超声处理及抽真空处理过程中于100转/min条件下对初始胶液进行搅拌；
(6)将初始胶液冷却至50±1℃温度，保温、静置8小时；再降温至35±1℃，于100转/min搅拌条件下加入对应比例的表面活性剂、甘氨酸、甘油、无水乙醇、半胱氨酸，继续搅拌均匀，以获得胶囊胶液；
(7)在所述胶囊胶液中加入对应比例的着色剂和二氧化钛，搅拌均匀后，于温度为55℃条件下蘸胶，且于25℃条件下定型，以获得胶囊胚体；
(8)将所述胶囊胚体进行干燥，使其含水量为4％；再对所述胶囊胚体进行脱模、切割，以获得所述空心胶囊；
S400、将步骤S200中的原料填充至所述空心胶囊中，即得所述治疗妇科炎症及提高免疫力的益生菌复方植物药。
本发明至少包括以下有益效果：
本发明通过采用黑曲霉菌种以及米曲霉菌种作为发酵菌种，分别用特定的培养基活化、扩大培养后，再在含有La(NO3)3.6H2O的培养基中对含有大分子蛋白质的大豆蛋白粉进行酶解发酵，同时结合红光、蓝光、交变磁场处理，由此保证黑曲霉和米曲霉始终处于较强的生长活力中，以此持续高效产生多种高活力酶类，进一步分解纤维素、淀粉、蛋白质等大分子，促进大豆蛋白粉中活性成分(如小分子多肽等)的释放。同时，其采用独特的低温萃取方式制备重瓣玫瑰花提取物和蔓越莓粉，以此提高其中黄酮、花色苷、维生素C、蛋白质、花青素等营养元素的含量。进一步的，上述组分通过与其他组分(如副干酪乳杆菌等益生菌)的合理配伍，以起到在妇科炎症治疗期间或恢复期间，能帮助女性患者补充营养、提高免疫力、抗菌消炎、调理肠道菌群以及平衡体内酸碱环境等效果。
本发明的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现，部分还将通过对本发明的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。
具体实施方式
下面结合实例对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。
应当理解，本文所使用的诸如“具有”、“包含”以及“包括”术语并不配出一个或多个其它元件或其组合的存在或添加。
需要说明的是，下述实施方案中所述试验方法，如无特殊说明，均为常规方法，所述试剂和材料，如无特殊说明，均可从商业途径获得。
<实施例1>
按重量份计，本实施例中的治疗妇科炎症及提高免疫力的益生菌复方植物药包括：可溶性淀粉3份，L-阿拉伯糖2份、水苏糖5份，大豆多肽粉12份，黑木耳粉10粉，黄芪3份，冬瓜籽粉8份，蒲公英5份，金银花5份，植物乳杆菌1份，长双歧杆菌2份，保加利亚乳杆菌1份，唾液乳杆菌1份，苦参2份、嗜乳酸菌1份，酵母3份，干酪乳杆菌1份，大蒜粉0.3份，酒石酸2份，重瓣玫瑰花提取物10份，蔓越莓粉15份。
同时，大豆多肽为小分子蛋白质，易被人体吸收，适合蛋白质消化吸收不佳的人群食用，此外，大豆多肽还具有提高免疫力、增强体力、缓解疲劳、降三高等功效。因此，本实施例还提供了一种大豆多肽粉的制备方法，其包括如下步骤：
S11、将黑曲霉菌种以及米曲霉菌种分别接种于独立的马铃薯葡萄糖琼脂培养基上，再分别放入培养箱中，均于28-35℃(优选为32℃)条件下活化48-72h(优选60h)，以获得活化的黑曲霉菌种以及米曲霉菌种；
采用配制好的第一液体培养基培养活化的黑曲霉菌种，以获得液态黑曲霉种子液，以及采用配制好的第二液体培养基培养活化的米曲霉菌种，以获得液态米曲霉种子液；其中，按重量比计，所述第一液体培养基包括：茶多酚1％、蔗糖1.5％、葡萄糖2.5％、麦芽提取物5％、CoCl.6H2O 0.1％、CuSO4.5H2O 0.05％、FeNaEDTA 2％、H3BO0.25％、Na2MoO4.2H2O0.15％、ZnSO4.7H2O 0.1％、MgSO4 0.1％、KNO3 0.1％、KNO3 0.1％、MnSO4.H2O 0.2％、去离子水86.85％，所述第二液体培养基包括：豆芽汁8％、蔗糖1.5％、葡萄糖2.5％、蛋白胨2％、FeNaEDTA 2％、H3BO30.25％、Na2MoO4.2H2O 0.15％、MgSO40.1％、KNO3 0.1％、MnSO4.H2O0.2％、去离子水83.2％；
再将所述液态黑曲霉种子液接种到发酵罐中的第一发酵培养基内进行扩大培养，扩大培养温度30-35℃(优选32℃)，扩大培养pH6.5-7.0，转速500-800rpm(优选650rpm)搅拌，培养时间为1-2d，以获得黑曲霉孢子悬浮液；以及将所述液态米曲霉种子液接种到发酵罐中的第二发酵培养基内进行扩大培养，扩大培养温度30-40℃(优选35℃)，扩大培养pH6.5-7.0，转速400-600rpm(优选500rpm)搅拌，培养时间为1-2d，以获得液态米曲霉孢子悬浮液；其中，按重量比计，所述第一发酵培养基包括：番茄汁10％、可溶性淀粉2％、蔗糖2％、葡萄糖2％、玉米粉2.5％、酵母粉0.5％、FeSO4.7H2O 0.1％、MgSO40.05％、KNO30.05％、CuCl2.2H2O 0.1％、(NH4)6Mo7O24.7H2O 0.15％、MnSO4.H2O 0.1％、去离子水80.45％，所述第二发酵培养基包括：麦芽糊精5％、玉米粉8％、木糖2％、酵母膏1.5％、MgSO4 0.05％、KNO3 0.1％、NH4NO3 0.15％、MnSO4.H2O 0.1％、去离子水83.1％；
优选的，为促进黑曲霉和/或米曲霉的生长和提高产酶效率，对液态黑曲霉种子液和/或液态米曲霉种子液进行扩大培养时，每天对接种有黑曲霉种子液或液态米曲霉种子液的对应发酵培养基进行超声处理，且超声处理频率为20-40Khz(优选30Khz)，处理时间为30min；
S12、按重量份计，在反应釜中加入大豆蛋白粉30-45份(优选35份)、去离子水250-350份(优选280份)、黑曲霉孢子悬浮液20-25份(优选22.5份)、米曲霉孢子悬浮液15-20份(优选10份)、La(NO3)3.6H2O 0.5-0.6份(优选0.55份)、NH4Cl 1.5-2.5份(优选2.0份)、KNO31-2份(优选1.5份)，以获得发酵体系，并调节所述发酵体系的pH至6.8-7.0；本步骤中，所述大豆蛋白粉由非转基因大豆制成，且其中分子量≥8000Da的多肽含量≥45％；
对所述发酵体系依次进行三阶段的发酵处理：
第一发酵阶段处理中，发酵温度为30-35℃(优选32℃)，并在转速300-400rpm(优选350rpm)条件下对发酵体系进行搅拌，同时对发酵体系进行第一光照处理和第一磁场处理，处理时间为1-2d；所述第一光照处理为：采用光强为25-30μmol.m-2.s-1(优选28μmol.m-2.s-1)的红光以及光强为30-35μmol.m-2.s-1(优选32μmol.m-2.s-1)的蓝光照射发酵体系，照射处理时间为45-60min(优选50min)；所述第一磁场处理为：采用50Hz、磁场强度为0.45-0.55mT(优选0.5mT)的交变磁场对发酵体系进行处理磁场处理，磁场处理时间为45-60min(优选50min)；
第二发酵阶段处理中，发酵温度为25-35℃(优选30℃)，并在转速500-600rpm(优选550rpm)条件下对发酵体系进行搅拌，同时对发酵体系进行第二光照处理和第二磁场处理，处理时间为1-2d；所述第二光照处理为：采用光强为20-24μmol.m-2.s-1(优选22μmol.m-2.s-1)的红光以及光强为24-28μmol.m-2.s-1(优选25μmol.m-2.s-1)的蓝光照射发酵体系，照射处理时间为35-45min(优选40min)；所述第二磁场处理为；采用50Hz、磁场强度为0.35-0.45mT(优选0.4mT)的交变磁场对发酵体系进行磁场处理，磁场处理时间为35-45min(优选40min)；
第三发酵阶段处理中，发酵温度为25-35℃(优选30℃)，并在转速300-400rpm优选350rpm)条件下对发酵体系进行搅拌，同时对发酵体系进行第三光照处理和第三磁场处理，处理时间为1-2d；所述第三光照处理为：采用光强为16-20μmol.m-2.s-1(优选18μmol.m-2.s-1)的红光以及光强为20-22μmol.m-2.s-1(优选21μmol.m-2.s-1)的蓝光照射发酵体系，照射处理时间为25-35min(优选30min)；所述第三磁场处理为：采用50Hz、磁场强度为0.2-0.3mT(优选0.25mT)的交变磁场对发酵体系进行处理磁场处理，磁场处理时间为25-35min(优选30min)；
S13、将经步骤S22中发酵处理的发酵体系升温至85℃，维持10min，以完成灭酶活过程，获得大豆肽酶解液；
S14、将所述大豆肽酶解液分散于其质量5-6倍的体积分数为95％的乙醇溶液中，且同时进行超声处理及搅拌，超声功率为600-800W(优选为750W)，超声处理时间为10-15min，搅拌转速为100-120转/min；
S15、对经步骤S24处理后的反应体系进行过滤，过滤压力控制在0.3-0.4MPa(优选为0.35Mpa)，过滤温度为50-60℃(优选55℃)，弃滤渣，以获得大豆肽清液；
S16、对大豆肽清液进行冷冻干燥，以获得所述大豆肽粉。
黑曲霉菌种和米曲霉菌种可产生β-葡萄糖苷酶、淀粉酶、中性蛋白酶、酸性蛋白酶、碱性蛋白酶、糖化酶、纤维素酶等多种酶类，进一步可用于分解大豆蛋白粉中的纤维素、乳糖、大分子蛋白质、淀粉等原料，将其分解成更容易被胃肠吸收的小分子营养成分，改善胃肠免疫功能。因此本步骤中采用黑曲霉菌种以及米曲霉菌种作为发酵菌种，分别用特定的培养基活化、扩大培养后，再在含有La(NO3)3.6H2O的培养基中对含有大分子蛋白质的大豆蛋白粉进行酶解发酵，其中La3+对黑曲霉和米曲霉的生长代谢起到促进作用，提高两者的生长效率，并提高两者各种酶的产量和酶活力，由此可有效分解大豆蛋白粉中的纤维素、淀粉、蛋白等大分子物质。进一步的，三阶段发酵处理中，红光以及蓝光也能通过调节细胞质膜的通透性来促进其同化作用，并提高酶活，交变磁场则通过细胞膜上钙离子的释放来促进黑曲霉和米曲霉生物量的生长，进一步提高酶的产量。同时，为避免红光、蓝光以及交变磁场长期在恒定数值而对黑曲霉和米曲霉的生长产生不良影响，本步骤中采用三阶段发酵处理，且每一阶段红光、蓝光的光强、交变磁场的强度均逐步递减，由此保证黑曲霉和米曲霉始终处于较强的生长活力中，以此持续高效产生多种高活力酶类，进一步分解纤维素、淀粉、蛋白质等大分子，促进大豆蛋白粉中活性成分(如小分子多肽等)的释放。
此外，本实施例还提供了一种重瓣玫瑰花提取物的制备方法包括如下步骤：
取重瓣玫瑰花鲜花于0—-20℃(优选-10℃)条件下冷冻干燥，粉碎打浆后获得重瓣玫瑰花物料，并将其加入反应釜中；对所述反应釜内的重瓣玫瑰花物料进行超临界二氧化碳萃取，萃取压力为15Mpa、萃取温度为35℃、CO2流速为30L/h、萃取时间为3-5小时(优选4小时)；再通入所述重瓣玫瑰花物料重量3-5％(优选4％)的体积分数95％的乙醇作为携带剂，再萃取1小时；再经二级降压分离，且一级降压分离压力为8Mpa，温度45℃，二级降压分离压力为7Mpa，温度40℃，由此得到萃取物；再将萃取物在12000-15000rpm(优选13000rpm)条件下离心，得上清液和底部沉淀；
对所述上清液进行减压升温，再经分子蒸馏分离纯化后得到第一提取物，所述的分子蒸馏条件为：进料温度为50-60℃(优选55℃)，进料流速1.0-1.5mL/min(优选1.2mL/min)，蒸馏温度为80-100℃(优选90℃)，真空压力50-60Pa，转速200-300r/min(优选250r/min)；
S23、取所述底部沉淀，并在其中加入其重量5-8倍的去离子水，以获得酶解原料，并通过对所述酶解原料进行酶解获得酶解体系；其中，所述酶解过程包括：
第一次酶解：将所述酶解原料的pH值调节至8.5，按酶解原料重量的2.5％加入胰蛋白酶，充分搅拌，且搅拌的同时升温至42℃，保温35min后得到第一酶解体系；
第二次酶解：待第一酶解体系温度降至20-25℃后，再调整其pH值至4.0，按第一次酶解体系重量的3％加入果胶酶，充分搅拌，且搅拌的同时升温至45℃，保温30min后得到第二酶解体系；
第三次酶解：待第二酶解体系温度降至20-25℃后，再调整其pH值至5.0，按第二次酶解体系重量的4％加入纤维素酶，充分搅拌，且搅拌的同时升温至60℃，保温25min后得到第三酶解体系；
S24、待酶解完成后，对获得的第三酶解体系升温至85℃，维持10min，以完成灭酶活过程；
S25、将完成灭酶活的第三酶解体系经截留分子量为100-600Da的纳滤膜过滤，以得到玫瑰花浓缩液；
用D101大孔吸附树脂装柱，分别用纯水、质量分数5％氢氧化钠溶液和体积分数5％的盐酸溶液洗涤处理树脂，洗涤处理完毕后将5-6倍柱体积的、完成灭酶活的第三酶解体系上柱；用1-2个(优选1.5个)柱体积的体积分数5％的5％盐酸洗柱，再用纯水洗至pH6.8-7.0；再用体积分数10％的甲醇洗脱，收集洗脱液；洗脱液在50℃条件下减压浓缩至甲醇全部脱除；再在脱除甲醇的洗脱液中加入水饱和正丁醇萃取3次，以除去水溶性杂质，且按体积比计，所述水饱和正丁醇：洗脱液＝2:1；回收水饱和正丁醇后得的第二提取物；
S26、合并第一提取物以及第二提取物，在65℃下保温65-85min(优选75min)后离心，去沉渣后的液相再经硅藻土过滤，得到重瓣玫瑰花提取液，且过滤压力控制在0.25-0.35MPa(优选0.30MPa)；
S27、将重瓣玫瑰花提取液浓缩至干，得粗结晶物；将得到的粗结晶物用无水乙醇溶解，冷却后放置于4-5℃温度下重结晶，12h后减压抽滤，得到重瓣玫瑰花提取物晶体；重复上述无水乙醇溶解、重结晶步骤2-3次；最后干燥并粉碎晶体，以获得重瓣玫瑰花提取物。
进一步的，原花青素(Proanthocyanidins，PACs)是广泛存在的一大类多酚化合物的总称，现已被证实具有多种生物学功能，如抗细菌黏附性、抗氧化性、抗肿瘤性等，具有广阔的应用前景。原花青素广泛存在于天然植物中，如葡萄、沙棘、松树皮及越橘类植物中。其中蔓越莓虽原产于北美，但目前已在我国培育成功，其产业化种植指日可待；另外我国也有其他越橘类植物的天然资源，因此从越橘类植物，尤其是蔓越莓中提取原花青素有广阔的市场前景。因此，本发明还提供了一种蔓越莓粉的制备方法包括：
S31、称取蔓越莓果实，浸泡24-36h后，去离子水冲洗2-3遍，干燥粉碎，并过筛，以获得蔓越莓粉末；
S32、在所述蔓越莓粉末中加入其重量1-2倍的提取液进行混合反应，所述提取液由体积分数70％的丙酮、体积分数85％的乙醇以及质量分数0.1-0.2％的柠檬酸溶液组成，且所述丙酮、乙醇以及柠檬酸溶液的体积比为1:1:2；于150-200rpm转速条件下搅拌，混合反应0.5-1h后离心过滤，以获得上清液与沉淀物；并在上清液中加入其体积1-2倍的石油醚进行脱脂处理，以获得第一提取物；
S34、取所述沉淀物、缓冲液以及去离子水进行混合，按重量比计，沉淀物：缓冲液：去离子水＝1:(2-3)：(8-10)(优选1:2.5:9)，以获得混合体系，记录混合体系总体积数值，以及将pH值调节为6.8-7；再对混合体系升温至50-60℃，保温60-75min(优选70min)，以获得浸提体系；
对所述浸提体系进行酶解，以获得酶解体系；其中，所述酶解过程包括：
第一次酶解：将浸提体系的pH值调节至8.5，按浸提体系重量的3％加入胰蛋白酶，充分搅拌，且搅拌的同时升温至55℃，保温35min后得到第一酶解体系；
第二次酶解：待第一酶解体系降温至20-25℃后，再调整其pH值至3.5，按第一次酶解体系重量的4％加入果胶酶，充分搅拌，且搅拌的同时升温至45℃，保温30min后得到第二酶解体系；
第三次酶解：待第二酶解体系降温至20-25℃后，再调整其pH值至4.5，按第二次酶解体系重量的3％加入纤维素酶，充分搅拌，且搅拌的同时升温至55℃，保温20min后得到第三酶解体系；
S35、用D101大孔吸附树脂装柱，分别用纯水、质量分数5％氢氧化钠溶液和体积分数5％盐酸溶液洗涤处理树脂，洗涤处理完毕后将3-5倍(优选4倍)柱体积的、完成灭酶活的第三酶解体系上柱；用1.5-2个柱体积的体积分数为50％的乙醇溶液洗柱，再用纯水洗至pH6.8-7.0；再用3-5个(优选4个)柱体积的体积分数为60％的丙酮洗脱，收集洗脱液；洗脱液在50℃条件下减压浓缩至丙酮全部脱除；再在脱除丙酮的洗脱液中加入水饱和正丁醇萃取3次，以除去水溶性杂质，且按体积比计，所述水饱和正丁醇：洗脱液＝2:1；回收水饱和正丁醇后得第二提取物；
S36、将所述第二提取物与第一提取物混合混合，并经过微滤陶瓷膜进行过滤，操作温度控制在55-65℃(优选60℃)，以获得微滤膜透过液；将微滤膜透过液经过卷式超滤膜进行过滤，操作温度控制在55-65℃(优选60℃)，以获得超滤膜透过液；将超滤膜截留液经过卷式高压反渗透膜进行浓缩，控制操作温度在30-40℃(优选35℃)，得到浓缩液；对所述浓缩液进行冷冻干燥，粉碎过筛后即获得所述蔓越莓粉。
<实施例2>
与实施例1相比，本实施例中的治疗妇科炎症及提高免疫力的益生菌复方植物药的不同之处仅在于，其由以下组分组成：可溶性淀粉5份，L-阿拉伯糖3份、水苏糖8份，大豆多肽粉18份，黑木耳粉12份，黄芪5份，冬瓜籽粉10份，蒲公英8份，金银花8份，植物乳杆菌2份，长双歧杆菌3份，保加利亚乳杆菌2份，唾液乳杆菌2份，苦参3份、嗜乳酸菌2份，酵母5份，干酪乳杆菌2份，大蒜粉0.5份，酒石酸3份，重瓣玫瑰花提取物20份，蔓越莓粉20份。
<实施例3>
与实施例1相比，本实施例中的治疗妇科炎症及提高免疫力的益生菌复方植物药的不同之处仅在于，其由以下组分组成：可溶性淀粉4份，L-阿拉伯糖2.5份、水苏糖7份，大豆多肽粉15份，黑木耳粉11份，黄芪4份，冬瓜籽粉9份，蒲公英7份，金银花6份，植物乳杆菌1.5份，长双歧杆菌2.5份，保加利亚乳杆菌1.5份，唾液乳杆菌1.5份，苦参2.5份、嗜乳酸菌1.5份，酵母4份，干酪乳杆菌1.5份，大蒜粉0.4份，酒石酸2.5份，重瓣玫瑰花提取物15份，蔓越莓粉18份。
<大豆肽分子量检测结果>
首先以申请号201310478523.2(“一种提高低分子量大豆肽产量的方法”)的发明专利申请中实施例1所述方案制备的大豆肽粉作为对比例2。将其与通过本发明实施例1-3中的制备方法制备获得的大豆肽粉进行高效凝胶过滤色谱法检测，以获得大豆肽分子量大小及分布范围，其结果如表2所示
表1大豆肽分子量大小及分布范围
Figure BDA0002247271310000141
从表2中可以看出，本发明的大豆多肽粉制备方法中，可通过接种黑曲霉菌种以及米曲霉菌种产生β-葡萄糖苷酶、淀粉酶、中性蛋白酶、酸性蛋白酶、碱性蛋白酶、糖化酶、纤维素酶等多种酶类，进一步可用于分解大豆蛋白粉中的纤维素、乳糖、大分子蛋白质、淀粉等原料，将其分解成更容易被胃肠吸收的小分子营养成分(如小分子多肽等)，由此改善胃肠免疫功能，提高机体免疫力。其中，本发明制备获得的大豆肽粉中，蛋白肽平均分子量约为500Da，其中1000Da以下的多肽占85％，500Da以下的多肽占37％，由此可便于人体胃肠快速、高效吸收，使其充分发挥其增强机体免疫力的功效，有助于妇科炎症治疗或恢复。
<重瓣玫瑰花提取物检测结果>
将玫瑰鲜花采摘收集，加入其重量5倍的纯水，超声波提取4小时，离心后获得第一提取液和第一沉淀；再将第一沉淀采用微波加热在25℃的低温下进行萃取，提取时间为3小时，提取温度50℃，将饱和气体进行冷凝后产生油水混后物再经油水分离器得到第二提取液；最后将经油水分离器得到后的第二沉淀、废水进行循环萃取提取第三提取液，合并所述第一提取液、第二提取液以及第三提取液，得到作为对比例2的玫瑰花提取物。将其与通过本发明实施例1-3中的制备方法制备获得的重瓣玫瑰花提取物进行检测，以获得总黄酮、花色苷、维生素C以及蛋白质含量，其结果如表2所示。
表2重瓣玫瑰花提取物总黄酮、花色苷、维生素C以及蛋白质含量
Figure BDA0002247271310000151
从表2中可以看出，本发明的制备方法获得的重瓣玫瑰花提取物中，其总黄酮、花色苷、维生素C以及蛋白质含量显著高于对比例2，最高分别提高14.8％、17.2％、111％和41％。由此说明本发明的制备方法中，通过超临界二氧化碳低温萃取、降压分离、反复酶解以及大孔吸附树脂洗脱等过程有效去除杂质，大幅提高总黄酮、花色苷、维生素C以及蛋白质等营养元素的含量，使其发挥提高免疫力、清除自由基以及延缓衰老等作用，有效辅助妇科炎症的治疗以及恢复过程。
<蔓越莓粉检测结果>
取蔓越莓鲜果进行压榨，制备得到蔓越莓果渣；并将所述蔓越莓果渣低温干燥；在所述果渣中加入水，所述果渣与所述水的料液比为1:5(g/ml)，利用功率为1.8KW的超声波超声提取15分钟，过滤，得蔓越莓提取液；对所述蔓越莓提取液进行超滤分离，得到滤出液，超滤条件：压力0.5Mpa，温度35℃，膜通量为250升/小时；将所述滤出液浓缩，真空干燥、粉碎后即得作为对比例3的蔓越莓粉。将其与通过本发明实施例1-3中的制备方法制备获得的蔓越莓粉原花青素含量和得率进行检测，其结果如表3所示。
表3蔓越莓粉原花青素含量和得率
原花青素含量(mg/100g) 原花青素得率(％)
对比例3 52.14±5.15 0.07
实施例1 68.79±3.79 0.12
实施例2 69.43±8.12 0.13
实施例3 70.22±7.15 0.15
从表3中可以看出，本发明的制备方法获得的蔓越莓粉中，其原花青素含量和得率显著高于对比例3，最高分别提高34.6％、114％。由此说明本发明的制备方法中，通过有机溶剂组成的高效提取液进行低温萃取、同时结合反复酶解以及大孔吸附树脂洗脱等过程有效去除杂质，大幅提高原花青素含量和得率，使其在妇科炎症的治疗以及恢复过程中充分发挥杀菌抗炎等功效。
<实施例4>
本实施例还提供了一种治疗妇科炎症及提高免疫力的益生菌复方植物药的制备方法，包括如下步骤：
S100、按实施例1-3之一中的组分用量称取各组分，充分混匀，将混匀后的混合物置于真空干燥器内干燥，使混合物含水量为3-5％；
S300、制备空心胶囊，按重量百分比计，所述空心胶囊由如下重量百分比的原料制成：羟丙甲纤维素30-32％(优选31％)、果胶8-10％(优选9％)、表面活性剂0.4-0.5％(优选0.45％)、助凝剂2-3％(优选2.5％)、着色剂0.03-0.05％(优选0.04％)、甘氨酸0.03-0.05％(优选0.04％)、二氧化钛2-3％(优选2.5％)、甘油0.2-0.4％(优选0.3％)、无水乙醇10-12％(优选11％)、半胱氨酸1-1.5％(优选1.2％)、余量为水；
所述空心胶囊的制备方法包括：
(1)称取上述对应比例的空心胶囊制备原料，先在溶胶罐内加入水，加热至85-90℃后加入对应比例的羟丙甲纤维素和果胶，以获得初始胶液，且对所述初始胶液进行超声处理及抽真空处理，所述超声处理频率为120kHZ，所述抽真空处理的真空度为-0.05Mpa，且超声处理及抽真空处理过程中于100转/min条件下对初始胶液进行搅拌；
(2)将初始胶液冷却至50±1℃温度，保温、静置8小时；再降温至35±1℃，于100转/min搅拌条件下加入对应比例的表面活性剂、甘氨酸、甘油、无水乙醇、半胱氨酸，继续搅拌均匀，以获得胶囊胶液；
(3)在所述胶囊胶液中加入对应比例的着色剂和二氧化钛，搅拌均匀后，于温度为55℃条件下蘸胶，且于25℃条件下定型，以获得胶囊胚体；
(4)将所述胶囊胚体进行干燥，使其含水量为4％；再对所述胶囊胚体进行脱模、切割，以获得所述空心胶囊；
S400、将步骤S200中的原料填充至所述空心胶囊中，即得所述提高免疫力及抗疲劳的治疗妇科炎症及提高免疫力的益生菌复方植物药。
<提高免疫力功效评价试验>
实验选取1月龄雌性小鼠，按体重分为4组，每组20只。本发明的益生菌复方植物药(以下均为“复方植物药”)的人体推荐剂量为0.4g/d·kg体重的定型产品，小鼠的等效剂量相当于人体推荐剂量的10倍。分别以本发明复方植物药的人体推荐剂量5倍、10倍和30倍作为低、中、高剂量组。采取灌胃法，每日灌胃一次，对照组灌蒸馏水。各组小鼠连续给予复方植物药30天后，测定各项指标，结果如表4-6所示。
1.1安全性实验
表4复方植物药对小鼠胸腺、脾脏质量的影响
组别 小鼠数量(只) 胸腺/体重(mg/g) 脾脏/体重(mg/g)
空白对照组 20 2.41±0.36 5.41±0.48
低剂量组 20 2.57±0.43 5.51±0.33
中剂量组 20 2.48±0.29 5.49±0.46
高剂量组 20 2.54±0.28 5.53±0.16
从表4中可以看出，本发明的复方植物药服用后，小鼠的胸腺基极脾脏质量未发生显著变化，说明本发明的复方植物药服用后无明显不良影响，安全性较高。
1.2复方植物药对小鼠体液免疫的影响
表5益生菌复方植物药对小鼠体液免疫的影响
Figure BDA0002247271310000171
Figure BDA0002247271310000181
从表5中可以看出，本发明的复方植物药服用后，相对于空白对照组，低、中、高剂量组小鼠的半数溶血值(HC50)均有显著提高，其中高剂量组最多可提高116％。由此可说明本发明中的复方植物药可显著提高机体的免疫力，进一步有助于妇科炎症治疗期间患者的身体恢复。
1.3复方植物药对小鼠吞噬细胞吞噬功能的影响
表6复方植物药对小鼠吞噬细胞吞噬功能的影响
Figure BDA0002247271310000182
由表6可见，经口给予小鼠不同剂量的受试物30天后，与对照组相比，各剂量组中，高剂量组的吞噬率和吞噬指数与对照组相比有显著性差异(p<0.05)。说明本发明复方植物药可显著提高机体免疫力，有助于女性妇科炎症患者的治疗和恢复。
<抗菌消炎功效评价试验>
选取1月龄小鼠，按体重匹配随机分成阴性对照组(生理盐水)、本发明复方植物药低、中、高剂量(0.4、0.8、1.6g/kg)组，每组各20只。各组小鼠按0.2ml/10g灌胃给药，1次/d，连续3d。末次给药后1h，将二甲苯(0.03ml)涂抹在小鼠右耳的前后两侧致炎，左耳不涂作为对照。在致炎后30min，将小鼠脱颈处死，用打孔器(直径6mm)分别在左右耳同一部位沿耳廓线打下圆耳片，用电子天平称重，求左右耳片重量之差，作为耳肿胀度，结果如表7所示。
与二甲苯小鼠耳肿胀试验处理相同。末次给药后1h，小鼠尾静脉注射伊文氏蓝溶液(0.5％)0.1ml/10g，同时腹腔注射醋酸溶液(0.8％)0.2ml/只。20min后脱颈处死小鼠，用6ml生理盐水冲洗小鼠腹腔，收集冲洗液，3 000r/min离心15min，取上清液用紫外分光光度计于波长590nm处测其吸光度值(OD)。根据小鼠腹腔液中的伊文氏蓝含量判断小鼠腹腔毛细血管通透性。
表7复方植物药对小鼠耳肿胀及小鼠腹腔毛细血管通透性的影响
Figure BDA0002247271310000191
与阴性对照组相比，本发明复方植物药的高、中、低剂量组组对小鼠耳肿胀度均有较明显的抑制作用且能够较明显的降低小鼠腹腔毛细血管通透性(P＜0.01)。说明本发明的复方植物药具有良好对的杀菌消炎作用。
<体外抑菌评价试验>
取灭菌小试管若干支，每支试管装相应浓度的益生菌复方植物药低、中、高剂量(0.05、0.1、0.2g/mL)2mL，分别加入不同菌种的新鲜菌液0.1mL，置于37℃培养18小时观察有无细菌生产。
表8复方植物药的体外抑菌实验
Figure BDA0002247271310000201
注：-无菌生长，+有菌生长。
从上表数据可以看出，随着剂量的增大，本发明的复方植物药能够有效的抑制多种细菌的生长。由此可适用于妇科炎症的治疗中去，达到消炎抑菌、防止感染的功效。。
需要说明的是，上述实施例1至4中的技术方案可进行任意组合，且组合后获得的技术方案均属于本发明的保护范围。
综上所述，本发明通过采用黑曲霉菌种以及米曲霉菌种作为发酵菌种，分别用特定的培养基活化、扩大培养后，再在含有La(NO3)3.6H2O的培养基中对含有大分子蛋白质的大豆蛋白粉进行酶解发酵，同时结合红光、蓝光、交变磁场处理，由此保证黑曲霉和米曲霉始终处于较强的生长活力中，以此持续高效产生多种高活力酶类，进一步分解纤维素、淀粉、蛋白质等大分子，促进大豆蛋白粉中活性成分(如小分子多肽等)的释放。同时，其采用独特的低温萃取方式制备重瓣玫瑰花提取物和蔓越莓粉，以此提高其中黄酮、花色苷、维生素C、蛋白质、花青素等营养元素的含量。进一步的，上述组分通过与其他组分(如副干酪乳杆菌等益生菌)的合理配伍，以起到在妇科炎症治疗期间或恢复期间，能帮助女性患者补充营养、提高免疫力、抗菌消炎、调理肠道菌群以及平衡体内酸碱环境等效果。
这里说明的设备数量和处理规模是用来简化本发明的说明的。对本发明的应用、修改和变化对本领域的技术人员来说是显而易见的。
尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用，它完全可以被适用于各种适合本发明的领域，对于熟悉本领域的人员而言，可容易地实现另外的修改，因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本发明并不限于特定的细节和这里示出与描述的实例。

Claims (10)

1.治疗妇科炎症及提高免疫力的益生菌复方植物药，其特征在于，按重量份计，其包括：可溶性淀粉3-5份，L-阿拉伯糖2-3份、水苏糖5-8份，大豆多肽粉12-18份，黑木耳粉10-12粉，黄芪3-5份，冬瓜籽粉8-10份，蒲公英5-8份，金银花5-8份，植物乳杆菌1-2份，长双歧杆菌2-3份，保加利亚乳杆菌1-2份，唾液乳杆菌1-2份，苦参2-3份、嗜乳酸菌1-2份，酵母3-5份，干酪乳杆菌1-2份，大蒜粉0.3-0.5份，酒石酸2-3份，重瓣玫瑰花提取物10-20份，蔓越莓粉15-20份。
2.如权利要求1所述的复方植物药，其特征在于，所述大豆多肽粉的制备方法包括如下步骤：
S11、将黑曲霉菌种以及米曲霉菌种分别接种于独立的马铃薯葡萄糖琼脂培养基上，再分别放入培养箱中，均于28-35℃条件下活化48-72h，以获得活化的黑曲霉菌种以及米曲霉菌种；
采用配制好的第一液体培养基培养活化的黑曲霉菌种，以获得液态黑曲霉种子液，以及采用配制好的第二液体培养基培养活化的米曲霉菌种，以获得液态米曲霉种子液；
再将所述液态黑曲霉种子液接种到发酵罐中的第一发酵培养基内进行扩大培养，扩大培养温度30-35℃，扩大培养pH6.5-7.0，转速500-800rpm搅拌，培养时间为1-2d，以获得黑曲霉孢子悬浮液；以及将所述液态米曲霉种子液接种到发酵罐中的第二发酵培养基内进行扩大培养，扩大培养温度30-40℃，扩大培养pH6.5-7.0，转速400-600rpm搅拌，培养时间为1-2d，以获得液态米曲霉孢子悬浮液；
S12、按重量份计，在反应釜中加入大豆蛋白粉30-45份、去离子水250-350份、黑曲霉孢子悬浮液20-25份、米曲霉孢子悬浮液15-20份、La(NO3)3.6H2O 0.5-0.6份、NH4Cl 1.5-2.5份、KNO3 1-2份，以获得发酵体系，并调节所述发酵体系的pH至6.8-7.0；
对所述发酵体系依次进行三阶段的发酵处理：
第一发酵阶段处理中，发酵温度为30-35℃，并在转速300-400rpm条件下对发酵体系进行搅拌，同时对发酵体系进行第一光照处理和第一磁场处理，处理时间为1-2d；所述第一光照处理为：采用光强为25-30μmol.m-2.s-1的红光以及光强为30-35μmol.m-2.s-1的蓝光照射发酵体系，照射处理时间为45-60min；所述第一磁场处理为：采用50Hz、磁场强度为0.45-0.55mT的交变磁场对发酵体系进行磁场处理，磁场处理时间为45-60min；
第二发酵阶段处理中，发酵温度为25-35℃，并在转速500-600rpm条件下对发酵体系进行搅拌，同时对发酵体系进行第二光照处理和第二磁场处理，处理时间为1-2d；所述第二光照处理为：采用光强为20-24μmol.m-2.s-1的红光以及光强为24-28μmol.m-2.s-1的蓝光照射发酵体系，照射处理时间为35-45min；所述第二磁场处理为；采用50Hz、磁场强度为0.35-0.45mT的交变磁场对发酵体系进行处理磁场处理，磁场处理时间为35-45min；
第三发酵阶段处理中，发酵温度为25-35℃，并在转速300-400rpm条件下对发酵体系进行搅拌，同时对发酵体系进行第三光照处理和第三磁场处理，处理时间为1-2d；所述第三光照处理为：采用光强为16-20μmol.m-2.s-1的红光以及光强为20-22μmol.m-2.s-1的蓝光照射发酵体系，照射处理时间为25-35min；所述第三磁场处理为：采用50Hz、磁场强度为0.2-0.3mT的交变磁场对发酵体系进行处理磁场处理，磁场处理时间为25-35min；
S13、将经步骤S22中发酵处理的发酵体系升温至85℃，维持10min，以完成灭酶活过程，获得大豆肽酶解液；
S14、将所述大豆肽酶解液分散于其质量5-6倍的体积分数为95％的乙醇溶液中，且同时进行超声处理及搅拌，超声功率为600-800W，超声处理时间为10-15min，搅拌转速为100-120转/min；
S15、对经步骤S14处理后的反应体系进行过滤，过滤压力控制在0.3-0.4MPa，过滤温度为50-60℃，弃滤渣，以获得大豆肽清液；
S16、对大豆肽清液进行冷冻干燥，以获得所述大豆肽粉。
3.如权利要求2所述的复方植物药，其特征在于，按重量比计，所述第一液体培养基包括：茶多酚1％、蔗糖1.5％、葡萄糖2.5％、麦芽提取物5％、CoCl.6H2O 0.1％、CuSO4.5H2O0.05％、FeNaEDTA 2％、H3BO30.25％、Na2MoO4.2H2O 0.15％、ZnSO4.7H2O 0.1％、MgSO40.1％、KNO3 0.1％、KNO3 0.1％、MnSO4.H2O 0.2％、去离子水86.85％；所述第一发酵培养基包括：番茄汁10％、可溶性淀粉2％、蔗糖2％、葡萄糖2％、玉米粉2.5％、酵母粉0.5％、FeSO4.7H2O 0.1％、MgSO4 0.05％、KNO3 0.05％、CuCl2.2H2O 0.1％、(NH4)6Mo7O24.7H2O0.15％、MnSO4.H2O 0.1％、去离子水80.45％。
4.如权利要求2所述的复方植物药，其特征在于，按重量比计，所述第二液体培养基包括：豆芽汁8％、蔗糖1.5％、葡萄糖2.5％、蛋白胨2％、FeNaEDTA 2％、H3BO30.25％、Na2MoO4.2H2O 0.15％、MgSO4 0.1％、KNO3 0.1％、MnSO4.H2O 0.2％去离子水83.2％；所述第二发酵培养基包括：麦芽糊精5％、玉米粉8％、木糖2％、酵母膏1.5％、MgSO40.05％、KNO30.1％、NH4NO3 0.15％、MnSO4.H2O 0.1％、去离子水83.1％。
5.如权利要求2所述的复方植物药，其特征在于，步骤S11中，对液态黑曲霉种子液和/或液态米曲霉种子液进行扩大培养时，每天对接种有黑曲霉种子液或液态米曲霉种子液的对应发酵培养基进行超声处理，且超声处理频率为20-40Khz，处理时间为30min。
6.如权利要求1所述的复方植物药，其特征在于，所述重瓣玫瑰花提取物的制备方法包括如下步骤：
S21、取重瓣玫瑰花鲜花于0—-20℃条件下冷冻干燥，粉碎打浆后获得重瓣玫瑰花物料，并将其加入反应釜中；对所述反应釜内的重瓣玫瑰花物料进行超临界二氧化碳萃取，萃取压力为15Mpa、萃取温度为35℃、CO2流速为30L/h、萃取时间为3-5小时；再通入所述重瓣玫瑰花物料重量3-5％的、体积分数为95％的乙醇作为携带剂，再萃取1小时；再经二级降压分离，且一级降压分离压力为8Mpa，温度45℃，二级降压分离压力为7Mpa，温度40℃，由此得到萃取物；再将萃取物在12000-15000rpm条件下离心，得上清液和底部沉淀；
对所述上清液进行减压升温，再经分子蒸馏分离纯化后得到第一提取物，所述的分子蒸馏条件为：进料温度为50-60℃，进料流速1.0-1.5mL/min，蒸馏温度为80-100℃，真空压力50-60Pa，转速200-300r/min；
S23、取所述底部沉淀，并在其中加入其重量5-8倍的去离子水，以获得酶解原料，并通过对所述酶解原料进行酶解获得酶解体系；其中，所述酶解过程包括：
第一次酶解：将所述酶解原料的pH值调节至8.5，按酶解原料重量的2.5％加入胰蛋白酶，充分搅拌，且搅拌的同时升温至42℃，保温35min后得到第一酶解体系；
第二次酶解：待第一酶解体系温度降至20-25℃后，再调整其pH值至4.0，按第一次酶解体系重量的3％加入果胶酶，充分搅拌，且搅拌的同时升温至45℃，保温30min后得到第二酶解体系；
第三次酶解：待第二酶解体系温度降至20-25℃后，再调整其pH值至5.0，按第二次酶解体系重量的4％加入纤维素酶，充分搅拌，且搅拌的同时升温至60℃，保温25min后得到第三酶解体系；
S24、待酶解完成后，对获得的第三酶解体系升温至85℃，维持10min，以完成灭酶活过程；
S25、将完成灭酶活的第三酶解体系经截留分子量为100-600Da的纳滤膜过滤，以得到玫瑰花浓缩液；
用大孔吸附树脂装柱，分别用纯水、质量分数5％的氢氧化钠溶液和体积分数5％的盐酸溶液洗涤处理树脂，洗涤处理完毕后将5-6倍柱体积的、完成灭酶活的第三酶解体系上柱；用1-2个柱体积的体积分数5％的盐酸洗柱，再用纯水洗至pH 6.8-7.0；再用体积分数10％的甲醇洗脱，收集洗脱液；洗脱液在50℃条件下减压浓缩至甲醇全部脱除；再在脱除甲醇的洗脱液中加入水饱和正丁醇萃取3次，以除去水溶性杂质，且按体积比计，所述水饱和正丁醇：洗脱液＝2:1；回收水饱和正丁醇后得的第二提取物；
S26、合并第一提取物以及第二提取物，在65℃下保温65-85min后离心，去沉渣后的液相再经硅藻土过滤，得到重瓣玫瑰花提取液，且过滤压力控制在0.25-0.35MPa；
S27、将重瓣玫瑰花提取液浓缩至干，得粗结晶物；将得到的粗结晶物用无水乙醇溶解，冷却后放置于4-5℃温度下重结晶，12h后减压抽滤，得到重瓣玫瑰花提取物晶体；重复上述无水乙醇溶解、重结晶步骤2-3次；最后干燥并粉碎晶体，以获得重瓣玫瑰花提取物。
7.如权利要求1所述的复方植物药，其特征在于，所述蔓越莓粉的制备方法包括：
S31、称取蔓越莓果实，浸泡24-36h后，去离子水冲洗2-3遍，干燥粉碎，并过筛，以获得蔓越莓粉末；
S32、在所述蔓越莓粉末中加入其重量1-2倍的提取液进行混合反应，所述提取液由体积分数70％的丙酮、体积分数85％的乙醇以及质量分数0.1-0.2％的柠檬酸溶液组成，且所述丙酮、乙醇以及柠檬酸溶液的体积比为1:1:2；于150-200rpm转速条件以及25℃下搅拌，混合反应0.5-1h后离心过滤，以获得上清液与沉淀物；并在上清液中加入其体积1-2倍的石油醚进行脱脂处理，以获得第一提取物；
S34、取所述沉淀物、缓冲液以及去离子水进行混合，按重量比计，沉淀物：缓冲液：去离子水＝1:(2-3)：(8-10)，以获得混合体系，记录混合体系总体积数值，以及将pH值调节为6.8-7；再对混合体系升温至50-60℃，保温60-75min，以获得浸提体系；
对所述浸提体系进行酶解，以获得酶解体系；其中，所述酶解过程包括：
第一次酶解：将浸提体系的pH值调节至8.5，按浸提体系重量的3％加入胰蛋白酶，充分搅拌，且搅拌的同时升温至55℃，保温35min后得到第一酶解体系；
第二次酶解：待第一酶解体系降温至20-25℃后，再调整其pH值至3.5，按第一次酶解体系重量的4％加入果胶酶，充分搅拌，且搅拌的同时升温至45℃，保温30min后得到第二酶解体系；
第三次酶解：待第二酶解体系降温至20-25℃后，再调整其pH值至4.5，按第二次酶解体系重量的3％加入纤维素酶，充分搅拌，且搅拌的同时升温至55℃，保温20min后得到第三酶解体系；
S35、用大孔吸附树脂装柱，分别用纯水、5％氢氧化钠溶液和5％盐酸溶液洗涤处理树脂，洗涤处理完毕后将3-5倍柱体积的、完成灭酶活的第三酶解体系上柱；用1.5-2个柱体积的体积分数为50％的乙醇溶液洗柱，再用纯水洗至pH 6.8-7.0；再用3-5个柱体积的体积分数为60％的丙酮洗脱，收集洗脱液；洗脱液在50℃条件下减压浓缩至丙酮全部脱除；再在脱除丙酮的洗脱液中加入水饱和正丁醇萃取3次，以除去水溶性杂质，且按体积比计，所述水饱和正丁醇：洗脱液＝2:1；回收水饱和正丁醇后得第二提取物；
S36、将所述第二提取物与第一提取物混合混合，并经过微滤陶瓷膜进行过滤，操作温度控制在55-65℃，以获得微滤膜透过液；将微滤膜透过液经过卷式超滤膜进行过滤，操作温度控制在55-65℃，以获得超滤膜透过液；将超滤膜截留液经过卷式高压反渗透膜进行浓缩，控制操作温度在30-40℃，得到浓缩液；对所述浓缩液进行冷冻干燥，粉碎过筛后即获得所述蔓越莓粉。
8.如权利要求4所述的复方植物药，其特征在于，所述缓冲液为磷酸盐缓冲液。
9.如权利要求4所述的复方植物药，其特征在于，进行第一次酶解和/或第二次酶解和/或第三次酶解的同时进行超声处理，所述超声功率为200-400W，超声处理时间为10-15min。
10.治疗妇科炎症及提高免疫力的益生菌复方植物药的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
S100、按权利要求1中的组分用量称取各组分，充分混匀，将混匀后的混合物置于真空干燥器内干燥，使混合物含水量为3-5％；
S300、制备空心胶囊，按重量百分比计，所述空心胶囊由如下重量百分比的原料制成：羟丙甲纤维素30-32％、果胶8-10％、表面活性剂0.4-0.5％、助凝剂2-3％、着色剂0.03-0.05％、甘氨酸0.03-0.05％、二氧化钛2-3％、甘油0.2-0.4％、无水乙醇10-12％、半胱氨酸1-1.5％、余量为水；
所述空心胶囊的制备方法包括：
(1)称取上述对应比例的空心胶囊制备原料，先在溶胶罐内加入水，加热至85-90℃后加入对应比例的羟丙甲纤维素和果胶，以获得初始胶液，且对所述初始胶液进行超声处理及抽真空处理，所述超声处理频率为120kHZ，所述抽真空处理的真空度为-0.05Mpa，且超声处理及抽真空处理过程中于100转/min条件下对初始胶液进行搅拌；
(2)将初始胶液冷却至50±1℃温度，保温、静置8小时；再降温至35±1℃，于100转/min搅拌条件下加入对应比例的表面活性剂、甘氨酸、甘油、无水乙醇、半胱氨酸，继续搅拌均匀，以获得胶囊胶液；
(3)在所述胶囊胶液中加入对应比例的着色剂和二氧化钛，搅拌均匀后，于温度为55℃条件下蘸胶，且于25℃条件下定型，以获得胶囊胚体；
(4)将所述胶囊胚体进行干燥，使其含水量为4％；再对所述胶囊胚体进行脱模、切割，以获得所述空心胶囊；
S400、将步骤S200中的原料填充至所述空心胶囊中，即得所述治疗妇科炎症及提高免疫力的益生菌复方植物药。
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