CN1106663A

CN1106663A - 噻吩并嘧啶衍生物及其制备方法和用途

Info

Publication number: CN1106663A
Application number: CN94115719A
Authority: CN
Inventors: 古矢修一; 长展生; 大泷彻也; 渡边敏文
Original assignee: Takeda Chemical Industries Ltd
Current assignee: Takeda Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 1993-08-26
Filing date: 1994-08-26
Publication date: 1995-08-16
Also published as: RU94030480A; FI990387A0; EP0640606A1; FI990387A; EP0640606B1; NO943146D0; NO943146L; FI943912A0; HUT71116A; RU2142275C1; TW276256B; KR950005311A; HU218939B; NO307565B1; CA2130859A1; DE69428952D1; ATE208393T1; HU9402453D0; DE69428952T2; FI943912A

Abstract

式(I)的噻吩并嘧啶衍生物或其盐具有强的内皮素拮抗活性。因此，其可用于治疗或预防急性肾机能不全、心肌梗塞、肝机能不全、心绞痛、脑醒塞形成、蛛网膜下出血(SAH)、高血压、肾机能不全、哮喘、绞痛变体、Rayhaud氏综合病、肺性高血压、手术中风、慢性心机能不全、心肥大、动脉硬化、偏头痛等，另外还可治疗或预防由于手术或移植或微循环不足引起的器官(如肝)机能减退，另外还可预防PTCA后的 restenosis。

Description

本发明涉及含噻吩并[2，3-d]嘧啶衍生物的内皮素（endothelin）拮抗剂，噻吩并[2，3-d]嘧啶衍生物和它们的制备方法。

在近年来呈增长趋势的成年人疾病中显示有内皮素的参与，特别是在局部缺血引起的疾病中，如脑梗塞形成、心绞痛、心肌梗塞和肾机能不全。内皮素是由内皮细胞产生的含21个氨基酸的肽，已从中得到了内皮素1、内皮素2和内皮素3。在本说明书中，包括这些内皮素的一组物质被称为“内皮素”。

据报导内皮素在迄今为止已知的天然和合成物质中具有最强并长效的血管收缩作用、升压作用和增强心肌收缩作用。此肽的这种作用被认为是由据认为存在于血管和其它器官平滑肌膜上的内皮素受体引起的。对于内皮素受体，已知内皮素-A受体和内皮素-B受体。以下称之为“内皮素受体”。

因此，与内皮素受体具有亲和力，同时显示内皮素拮抗活性的化合物对由局部缺血引起的疾病如脑梗塞形成、心绞痛、心肌梗塞、肾机能不全和肝机能不全有预防和治疗效果，因而极其希望开发这些化合物。对于由合成方法制备的具有内皮素拮抗作用的化合物，已知的有EP-A-510526和526708及PCT9308799中公开的那些化合物。但是这些化合物的内皮素拮抗作用程度不含人满意。

本发明的目的是提供具有优越的内皮素抗拮作用的含噻吩并嘧啶衍生物的内皮素拮抗剂，提供新的噻吩并嘧啶衍生物和其制备方法。

在上述情形下，本发明者为了发现可用作内皮素拮抗剂的新化合物进行了广泛的研究，发现噻吩并[2，3-d]嘧啶衍生物具有极好的内皮素拮抗作用。在此发现的基础上进行了进一步研究，结果，本发明者完成了本发明。

因此，本发明提供含噻吩并[2，3-d]嘧啶衍生物的拮抗内皮素的药物组合物。本发明还提供新的噻吩并嘧啶衍生物及其盐。本发明进一步提供制备噻吩并[2，3-d]嘧啶衍生物的方法。

更特别地，本发明提供：

1.拮抗内皮素的药物组合物，其包括式（I）化合物或其盐和药用载体、赋形剂或稀释剂，

其中每个R¹和R²为氢或任意取代的烃残基;R³为氢或通过碳原子或氮原子键合的基团;R⁴为任意取代的烃残基;W为一化学键或连结基团;n为1-3的整数;

2.根据1的组合物，其中组合物是用于预防或治疗急性肾机能不全、心肌梗塞和/或肝机能不全的组合物;

3.根据1的组合物，其中组合物是用于预防或治疗由手术或移植引起的器官机能减退的组合物;

4.根据3的组合物衔，其中器官为肝;

5.根据1的组合物，其中R¹为氢或任意取代的烷基;

6.根据1的组合物，其中R¹为下式基团：

-（CH₂）_mQ

其中m为0-3的整数，Q为任意取代的芳基、任意取代的环烷基或任意取代的杂环基;

7.根据6的组合物，其中Q为可被选自（i）卤原子、（ii）硝基、（iii）氰基、（iv）氨基、（v）任意取代的羧基、（vi）低级亚烷基二氧基、（vii）式-A-R⁵基团（其中A为一化学键或连结基团;R⁵为低级烷基）的基团取代的芳基;

8.根据7的组合物，其中芳基为苯基;

9.根据1的组合物，其中R²为氢或烷基;

10.根据1的组合物，其中R²为氢;

11.根据1的组合物，其中R³为氢、烷基、可被烷基或芳基单取代或双取代的氨基;

12.根据1的组合物，其中R³为低级烷基;

13.根据1的组合物，其中R⁴为任意取代的芳基、任意取代的环烷基、任意取代的杂环基或可被烷基酯化的羧基;

14.根据1的组合物，其中R⁴为芳基;

15.根据1的组合物，其中连结基团为式-SO_f-的基团（其中f为0-2的整数）;式-CO-基团;或式-CONR⁶-基团（其中R⁶为低级烷基）;

16.根据1的组合物，其中化合物选自以下各种：

2，4（1H，3H）-二氧化-5-甲基-6-（4-甲氧甲氧基苯基）-1-（2-甲氧苄基）噻吩并[2，3-d]嘧啶-3-乙酸，

2，4（1H，3H）-二氧代-5-甲基-6-（4-甲氧苯基）-1-（2-甲硫基苄基）噻吩并[2，3-d]嘧啶-3-乙酸，

2，4（1H，3H）-二氧代-5-甲基-6-（4-甲氧甲氧基苯基）-1-（2-甲硫基苄基）噻吩并[2，3-d]嘧啶-3-乙酸，

2，4（1H，3H）-二氧代-5-甲基-6-（4-甲硫基中氧基苯基）-1-（2-甲硫基苄基）噻吩并[2，3-d]嘧啶-3-乙酸，

2，4（1H，3H）-二氧代-5-甲基-6-（4-甲硫基甲氧基苯基）-1-（2-甲氧苄基）噻吩并[2，3-d]嘧啶-3-乙酸，

2，4（1H，3H）-二氧代-5-甲基-1-（2-甲硫基苄基）-6-（4-丙氧基苯基）噻吩并[2，3-d]嘧啶-3-乙酸，

2，4（1H，3H）-二氧代-5-甲基-1-（2-甲硫基苄基）-6-[4-（2-氧代丙氧基）苯基]噻吩并[2，3-d]嘧啶-3-乙酸;

17.式（I′）的化合物或基盐：

其中R¹′为氢、低级烷基或式-（CH₂）_mQ′基团，其中m为0-3的整数，Q′为可被（i）卤原子、（ii）硝基、（iii）氰基、（iv）氨基、（v）任意取代的羧基、（vi）低级亚烷基二氧基或（vii）式-A-R⁶（其中A为一化学键或连结基团，R⁶为低级烷基）取代的芳基、任意取代的环烷基或任意取代的杂环基;

R²为氢或任意取代的烃残基;

R³为氢或通过碳原子或氮原子键合的基团;

R⁴′为芳基、环烷基、杂环基或式-cook⁵′基团（其中R⁵′为氢或低级烷基），其中每个都可被取代;

W为一化学键或连结基团及n为1-3的整数;

18.根据17的化合物，其中Q′为式-A-R⁵的基团，其中A为一化学键或一连结基团;R⁵为低级烷基;

19.根据17的化合物，其中R¹′为可被式-A-R⁵基团（其中A为化学键或连结基团;R⁵为低级烷基）取代的苄基;

20.根据17的化合物，其中R²为氢或烷基;

21.根据17的化合物，其中R²为氢;

22.根据17的化合物，其中R³为氢、烷基或可被烷基或芳基单取代或双取代的氨基;

23.根据17的化合物，其中R³为低级烷基;

24.根据17的化合物，其中R⁴′为任意取代的芳基;

25.根据17的化合物，其中R⁴′可被烷氧基或烷硫基取代的芳基;

26.根据17的化合物，其中连结基团为式-SO_f-的基团（其中f为0-2的整数）;式-CO-基团;或式-CONR⁶-基团（其中R⁶为低级烷基）;

27.根据17的化合物，其中化合物选自以下各种：

2，4（1H，3H）-二氧代-5-甲基-6-（4-甲氧甲氧苯基）-1-（2-甲氧苄基）噻吩并[2，3-d]嘧啶-3-乙酸，

2，4（1H，3H）-二氧代-5-甲基-6-（4-甲硫基甲氧基苯基）-1-（2-甲硫基苄基）噻吩并[2，3-d]嘧啶-3-乙酸，

2，4（1H，3H）-二氧代-5-甲基-1-（2-甲硫基苄基）-6-（4-丙氧基苯基）噻吩并[2，3-d]嘧啶-3-乙酸和

28.其中R¹′为氢和R²为任意取代的烃残基的17的化合物的制备方法，其包括将式（Ⅱ）的化合物或其盐与碱反应：

其中R²′为任意取代的烃残基;R³为氢、通过氧原子或氮原子键合的基团;R⁴′为芳基、环烷基、杂环基或式-cooR⁵′基团（其中R⁵′为氢或低级烷基），其中每个都可被取代;R⁷为氢或任意取代的烃残基;W为化学键或连结基团;n为1-3的整数;

29.其中R¹′为氢和R²为任意取代的烃残基的17的化合物的制备方法，其包括将式（Ⅲ）的化合物或其盐与碱反应，并将生成的产物进行亲电取代反应：

其中R²′为任意取代的烃残基;R³氢、通过氧原子或氮原子键合的基团;R⁴′为芳基、环烷基、杂环基或式-cooR⁵′基团（其中R⁵′为氢或低级烷基），其中每个都可被取代;R⁷为氢或任意取代的烃残基;W为化学键或连结基团;n为1-3的整数;

30.根据17的化合物的制备方法，其中R¹′为低级烷基或式-（CH₂）_mQ′基团，其中m为0-3的整数，Q′为可被（i）卤原子、（ii）硝基、（iii）氰基、（iv）氨基、（v）任意取代的羧基、（vi）低级正烷基二氧基或（vii）式-A-R⁶基团（其中A为化学键或连结基团;R⁶为低级烷基）取代的芳基、任意取代的环烷基或任意取代的杂环基;及R²为任意取代的烃残基，

其包括将多（Ⅳ）的化合物或其盐：

其中R²′为任意取代的烃残基;R³为氢、通过氧原子或氮原子键合的基团;R⁴为芳基、环烷基、杂环基或式-cooR⁵′基团（其中R⁵′为氢或低级烷基），其中每个都可被取代;W为化学键或连结基团;n为1-3的整数，

与式（Ⅴ）的化合物或其盐反应：

其中R¹″为低级烷基或式-（CH₂）_mQ′基团，其中m为0-3的整数，Q′为可被（i）卤原子、（ii）硝基、（iii）氰基、（iv）氨基、（v）任意取代的羧基、（vi）低级亚烷基二氧基或（vii）式-A-R⁶基团（其中A为化学键或连结基团，R⁶为低级烷基）取代的芳基、任意取代的环烷基或任意取代的杂环基;X为卤原子;

31.如1中所定义的化合物的用途，其用于制备在患有内皮素相关疾病的哺乳动物上有拮抗内皮素活性的药物组合物;

32.根据31的用途，其中内皮素相关疾病选自急性肾机能不全、心肌梗塞或成肝机能不全;

33.根据31的用途，其中内皮素相关疾病是由手术或移植引起的器官机能减退;

34.根据33的用途，其中器官为肝。

以下将更详细地说明本发明的化合物和用于制备它们的起始原料化合物（以下有时将二者都称为“本申请的化合物”）。

上边提及的n优选为1或2，特别是优选n为1。

上述R¹、R²、R²′、R⁴和R⁷所代表的任意取代的烃残基中，烃残基的例子有烷基（如C_1-6烷基如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、叔丁基、戊基、己基等）、环烷基（如C_3-6环烷基如环丙基、环戊基、环己基等）、烷氧基烷基（如C_1-3烷氧基C_1-6烷基如甲氧基甲基、乙氧基甲基、乙氧基丁基、丙氧基甲基、丙氧基乙基等）、羟烷基（如羟基C_1-6烷基如羟甲基、羟乙基、羟丁基、羟丙基等）、链烯基（如C_2-6链烯基如乙烯基、丁二烯基、己三烯基等）、甲酰基、羧基、烷氧羰基（如C_1-6烷氧羰基如甲氧羰基、乙氧羰基、叔丁氧羰基等）、芳基（如C_6-14芳基如苯基、萘基、蒽基等）、芳烷基（如C_7-20芳烷基如苄基、二苯甲基、三苯甲基等）等。

所述烃残基可能有的取代基的例子有硝基、羟基、氧代、硫代、氰基、氨基甲酰基、羧基、C_1-4烷氧羰基（如甲氧羰基、乙氧羰基等）、磺基、卤原子（如氟、氯、溴和碘）、C_1-6烷氧基（如甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基等）、C_6-12芳氧基（如苯氧基等）、卤代C_6-16芳基（如邻-、间-、或对-氯苯氧基、邻-、间-或对-溴苯氧基等）、C_1-6烷硫基（如甲硫基、乙硫基、正丙硫基、异丙硫基、正丁硫基、叔丁硫基等）、C_6-12芳硫基（如苯硫基等）、C_1-6烷基正硫酰基（如甲基正硫酰基、乙基正硫酰基等）、C_1-6烷磺酰基（如甲磺酰基、乙磺酰基等）、氨基、C_1-6酰氨基（如甲酰氨基、乙酰氨基、丙酰氨基等）、单-或二-C_1-4烷基氨基（如甲基氨基、乙基氨基、正丙基氨基、异丙基氨基、正丁基氨基、二甲氨基、二乙氨基等）、C_1-6酰基（如甲酰基、乙酰基、己酰基等）、C_6-12芳基羰基（如苯甲酰基等）、五元或六元杂环基团，其除碳原子外含有1-4个选自氧、硫、氮等的杂原子，（如2-或3-噻吩基、2-或3-呋喃基、3-、4-或5-吡唑基、2、4-或5-噻唑基、3、4或5-异噻唑基、2-、4-或5-噁唑基、3-、4-或5-异噁唑基、2-、4-或5-咪唑基、1、2、3-或1，2，4-三唑基、1H-或2H-四唑基、2-、3-或4-吡啶基、2、-4-或5嘧啶基、3-或4-pyridanidyl、喹啉基、异喹啉基、吲哚基等），其可被选自（a）卤原子（如氟、氯、溴和碘）、（b）C_1-4烷基（如甲基、乙基、丙基、异丙基等）和（c）卤代苯氧基（如邻、间或对氯苯氧基、邻、间或对溴苯氧基等）的1-4个取代基取代、C_1-10卤代烷基（如二氟甲基、三氟甲基、三氟乙基、三氯乙基等）及类似物。可用选自以上基团的1-5种取代基。当烃基为环烷基、环烯基、芳基或芳烷基时，取代基可为C_1-6烷基（如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基等）。取代基的数目可为1-6，优选为1-3。

上述R³所示的通过碳原子键合的任意取代的基团的例子有烷基（如C_1-6烷基如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、叔丁基、戊基、己基等）、环烷基（如C_3-6环烷基如环丙基、环戊基、环己基等）、烷氧基烷基（如C_1-3烷氧基C_1-6烷基如甲氧甲基、乙氧甲基、乙氧丁基、丙氧甲基、丙氧己基等）、羟烷基（如羟基C_1-6烷基如羟甲基、羟乙基、羟丁基、羟丙基等）、链烯基（如C_2-6链烯基如乙烯基、丁二烯基、己三烯基等）、甲酰基、羧基、烷氧羰基（如C_1-6烷氧羰基如甲氧羰基、乙氧羰基、叔丁氧羰基等）、氰基、酰氨基、单或二烷基氨基羰基（如单或二-C_1-6烷基氨基羰基如甲基氨基羰基、乙基氨基羰基、己基氨基羰基、二甲氨基羰基、甲基乙基氨基羰基等）、脒基、芳基（如C_6-14芳基如苯基、萘基、蒽基等）、芳烷基（如C_7-20芳烷基如苄基、二苯甲基、三苯甲基等）、与碳原子键连的杂环基团{如除碳原子外含1-4个如氧、硫、氮等的杂原子的5-8元环或所述环的稠合环[如除碳原子外含有选自氧、硫、氮等的1-4个杂原子的五元环（如2-或3-噻吩基、2-或3-呋喃基、2-或3-吡咯基、2-、4-或5-噁唑基、2-、4-或5-噻唑基、3-、4-或5-吡唑基、吡咯烷基、2-、4-或5-咪唑基、3-、4-或5-异噁唑基、3-、4-或5-异噻唑基、3-或5-（1，2，4-噁二唑基）、1，3，4-噁二唑基、3-或5-（1，2，4-噻二唑基）、1，3，4-噻二唑基、4-或5-（1，2，3-噻二唑基、1，2，5-噻二唑基、1，2，3-三唑基、1，2，4-三唑基、1H-或2H-四唑基等）;除碳原子外含1-4个选自氧、硫、氮等的杂原子的六元环（如2-、3-或4-吡啶基、N-氧化-2-，3-或4-吡啶基、2-，4-或5-嘧啶基、2-，或3-硫代吗啉基、N-氧化-2，4-或5-嘧啶基、2-或3-硫代吗啉基、2-或3-吗啉基、哌啶基、吡喃基、硫代吡喃基、1、4-噁嗪基、1，4-噻嗪基、1，3-噻嗪基、2-或3-哌嗪基、三嗪基、氧代三嗪基、3-或4-哒嗪基、吡嗪基、N-氧化-3-或4-哒嗪基等）;除碳原子外含1-4个选自氧、硫、氮等的杂原子的稠合双环或三环（如苯并呋喃基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、吡咯并[1，2-b]哒嗪基、吡唑并[1，5-b]吡啶基、咪唑并[1，2-a]吡啶基、三唑并[4，5-b]哒嗪基、咪唑并[1，2-b]哒嗪基、1，2，4-三唑并[4，3-a]吡啶基、苯并咪唑基、喹啉基、异喹啉基、肉啉基、2，3-二氮杂苯基、喹唑啉基、喹喔啉基、正二氢吲哚基（indolidinyl）、喹诺酊基、1，8-正萘基（1，8-naphthylidinyl）、嘌呤基、喋啶基（pteridinyl）、二苯并呋喃基、咔唑基、吖啶基、啡啶基、苯并二氢吡喃基、苯并噁嗪基、吩嗪基、吩噻嗪基、吩噁嗪基、2，3-二氮杂萘基、1，5-二氮杂萘基、phenoxathiinyl、菲咯啉基、噻蒽基等）等]及类似物

上述通过碳原子键合的基团的取代基的例子有C_6-14芳基（如苯基、萘基等），基可被1-4个选自（a）羟基、（b）氨基：（C）单、或二-C_1-6烷基氨基（如甲基氨基、乙基氨基、丙基氨基、二甲氨基、二乙氨基等）、（d）C_1-6烷氧基（如甲氧基、乙氧基、丙氧基、己氧基等）和（e）卤素（如氟、氯、溴和碘）的基团所取代;单-或二-C_1-6烷基氨基（如甲基氨基、乙基氨基、丙基氨基、二甲氨基、二乙氨基等）;C_1-4酰氨基（如甲酰氨基、乙酰氨基等）;羧基;羟基;硝基;C_1-6烷氧基（如甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基等）;C_1-6烷基羰氧基（如乙酰氧基、乙基羰氧基等）;卤素（如氟、氯、溴和碘）;下面将提及的任意取代的含氮基团;等等。取代基的数目为1-6，优选1-3。

上述R³表示的通过氮原子键合的任意取代的基团的例子，有氨基、-NR⁸R⁹[其中R⁸为氢、烷基、环烷基、芳基或杂环基，R⁹为氢或烷基]、在氮原子上有键的杂环基团（如1H-1、吡咯基、1-咪唑啉基、吡唑基、吲哚基、1H-1-吲唑基、7-嘌呤基、1-吡咯烷基、1-吡咯啉基、1-咪唑啉基、吡唑烷基、哌嗪基、吡唑啉基、1-哌啶基、4-吗啉基、4-硫代吗啉基等）等。上述烷基、环烷基、芳基和杂环基与已定义的意义相同。

所述通过氮原子连结的基团的取代基的例子有C_1-6烷基（如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基等）、C_2-6链烯基（如乙烯基、1-甲基乙烯基、1-丙烯基、烯丙基等）、C_2-6炔基（如乙炔基、1-丙炔基、炔丙基等）、C_3-6环烷基（如环丙基、环丁基、环戊基、环己基等）、C_5-7环烯基（如环戊烯基、环己烯基等）、C_7-11芳烷基（如苄基、α-甲基苄基、苯乙基等）、C_6-14芳基（如苯基、萘基等）、C_1-6烷氧基（如甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基等）、C_6-14芳氧基（如苯氧基等）、C_1-6烷酰基（如甲酰基、乙酰基、丙酰基、正丁酰基、异丁酰基等）、C_6-14芳基羰基（如苯甲酰基等）、C_1-6烷酰氧基（如甲酰氧基、乙酰氧基、丙酰氧基、正丁酰氧基、异丁酰氧基等）、C_6-14芳基羰氧基（如苯甲酰氧基等）、羧基、C_1-6烷氧羰基（如甲氧羰基、乙氧羰基、正丙氧羰基、异丙氧羰基、正丁氧羰基、异丁氧羰基、叔丁氧羰基等）、氨基甲酰基、N-单-C_1-4烷基氨基羰基（如N-甲基氨基羰基、N-乙基氨基羰基、N-丙基氨基羰基、N-异丙基氨基羰基、N-丁基氨基羰基等）、N，N-二-C_1-4烷基氨基羰基（如N，N-二甲基氨基羰基、N，N-二乙基氨基羰基、N，N-二丙基氨基羰基、N，N-二丁基氨基羰基等）、环氨基羰基（如1-吖丙啶基羰基、1-氮杂环丁烷基羰基、1-吡咯烷基羰基、1-哌啶基羰基、N-甲基哌嗪基羰基、吗啉代羰基等）、卤原子（如氟、氯溴和碘）、单一、二-或三-卤代 C_1-4烷基（如氯甲基、二氯甲基、三氟甲基、三氟乙基等）、氧代、脒基、亚氨基、氨基、单一或二-C_1-4烷基氨基（如甲基氨基、乙基氨基、丙基氨基、异丙基氨基、丁基氨基、二甲基氨基、二乙基氨基、二丙基氨基、二异丙基氨基、二丁基氨基等）、除碳原子外含1-3个选自氧、硫、氮等的杂原子和一个氮原子的3-6元杂环氨基（如吖丙啶基、氮杂环丁烷基、吡咯烷基、吡咯啉基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、咪唑啉基、哌啶子基、吗啉代、二氢吡啶基、吡啶基、N-甲基哌嗪基、N-乙基哌嗪基等）、C_1-6烷酰氨基（如甲酰氨基、乙酰氨基、三氟乙酰氨基、丙酰氨基、丁酰氨基、异丁酰氨基等）、苯甲酰氨基、氨基甲酰氨基、N-C_1-4烷基氨基甲酰氨基（如N-甲基氨基甲酰氨基、N-乙基氨基甲酰氨基、N-丙基氨基甲酰氨基、N-异丙氨基甲酰氨基、N-丁基氨基甲酰氨基等）、N，N-二-C_1-4烷基氨基甲酰氨基（如N，N-二甲氨基甲酰氨基、N，N-二乙氨基甲酰氨基、N，N-二丙氨基甲酰氨基、N，N-二丁氨基甲酰氨基等）、C_1-3正烷二氧基（如正甲二氧基、正乙二氧基等）、-B（OH）₂、羟基、环氧基（-O-）、硝基、氰基、巯基、磺基、正磺基、膦酰基、二羟硼烷基、氨磺酰基、C_1-6烷基氨磺酰基（如N-甲基氨磺酰基、N-乙基氨磺酰基、N-丙基氨磺酰基、N-异丙基氨磺酰基、N-丁基氨磺酰基等）、二-C_1-6烷基氨磺酰基、（如N，N-二甲基氨磺酰基、N，N-二乙基氨磺酰基、N，N-二丙基氨磺酰基、N，N-二丁基氨磺酰基等）、C_1-6烷硫基（如甲硫基、乙硫基、丙硫基、异丙硫基、正硫基、仲丁硫基、叔丁硫基等）、苯硫基、C_1-6烷基亚硫酰基（如甲基亚硫酰基、乙基亚硫酰基、丙基亚硫酰基、丁基亚硫酰基等）、苯基亚硫酰基、C_1-6烷磺酰基（如甲磺酰基、乙磺酰基、丙磺酰基、丁磺酰基等）、苯磺酰基及类似物。取代基的数目为1-6，优选1-3。

上述R⁴′所示的任意取代的芳基中的芳基的例子，有单环或稠合多环芳香烃基。优选的例子有C_6-14芳基如苯基、萘基、蒽基、菲基、苊基等，其中特别优选的是苯基、1-萘基、2-萘基等。

所述芳基可有一个或多个（优选1-3个）适当的取代基，这种取代基的例子有C_1-3烷基（如甲基、乙基、丙基等）、C_2-4链烯基（如乙烯基、烯丙基、2-丁烯基等）、C_3-4低级炔基（如炔丙基、丁-2-炔基等）、C_3-7环烷基（如环丙基、环丁基、环戊基、环己基等）、芳基（如苯基、萘基等）、含1-4个选自氮、氧和硫的杂原子的5元芳香杂环（如呋喃基、噻吩基、吡咯基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、吡啶基等）、含1-4个选自氮、氧和硫的杂原子的5-9元非芳香杂环（如环氧乙烷基、氮杂环丁烷基、氧杂环丁烷基、硫杂环丁烷基、吡咯烷基、四氢呋喃基、thiolanyl、哌啶基、四氢吡喃基、吗啉基、硫代吗啉基、哌嗪基等）、C_7-10芳烷基（如苄基、苯乙基等）、氨基、N-单取代的氨基（如单C_1-6烷基氨基如甲基氨基、乙基氨基、丙基氨基等）、N，N-二取代的氨基（如N，N-二取代的氨基，其中取代基为C_2-6烷基，如二甲氨基、二乙氨基等）、脒基、酰基（如C_1-8烷基羰基如乙酰基、丙酰基、丁酰基等;C_6-14芳基羰基如苯甲酰基等）、氨基甲酰基、N-单取代的氨基甲酰基（如C_1-6烷基氨基甲酰基如甲基氨基甲酰基、乙基氨基甲酰基、丙基氨基甲酰基等）、M，N-二取代的氨基羰基（如N，N-二-C_1-6烷基氨基羰基如二甲氨基羰基、二乙氨基羰基等）、氨基磺酰基、N-单取代的氨基磺酰基（如N-C_1-6烷基氨基磺酰基如甲基氨基磺酰基、乙基氨基磺酰基、丙基氨磺酰基等）、N，N-二取代的氨磺酰基（如N，N-二-C_1-6烷基氨基磺酰基如二甲基氨磺酰基、二乙基氨磺酰基等）、羧基、C_1-3烷氧羰基（如甲氧羰基、乙氧羰基等）、羟基、任意取代的C_1-3烷氧基，其中取代基为例如C_1-3低级烷基、卤原子、C_1-3烷硫基、羟基等（如甲氧基、乙氧基、丙氧基等）、C_2-4链烯氧基（如乙烯氧基、烯丙氧基等）、环烷氧基（如C_3-7环烷氧基如环丙氧基、环乙氧基等）、芳烷氧基（如C_7-10芳烷氧基如苯甲氧基等）、芳氧基（如苯氧基、萘氧基等）、硫基、C_1-3烷硫基（如甲硫基、乙硫基、丙硫基等）、芳烷硫基（如C_7-10芳烷硫基如苯甲硫基等）、芳硫基（如苯硫基、萘硫基等）、C_1-3低级亚烷二氧基（如亚甲二氧基、亚乙二氧基、亚丙二氧基等）、磺基、氰基、叠氮基、硝基、亚硝基、卤原子（如氟、氯、溴、碘等）等。

在上述R⁴′和Q′中所示任意取代的环烷基中的环烷基的示例如下：C_3-10环烷基和C_3-10双环烷基。其优选例子为环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基、双环[2，2，1]庚烷基、双环[2，2，2]辛烷基、双环[3，2，1]辛烷基、双环[3，2，1]壬烷基、双环[4，2，1]壬烷基、双环[4，3，1]癸烷基等。其中优选环戊基和环己基。

所述环烷基的取代基与上述芳基的取代基相同。

上述R⁴′和Q′所示的任意取代杂环基中的杂环基的例子有含有1-4个（原子在环中）选自O、S和N的杂原子的5-13元芳香杂环或饱和或不饱和的非芳香杂环（脂肪杂环基团）。

芳香杂环的优选例子为芳香单环杂环基团如呋喃基、噻吩基、吡咯基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、咪唑基、吡唑基、1，2，3-噁二唑基、1，2，4-噁二唑基、1，3，4-噁二唑基、呋咱基、1，2，3-噻二唑基、1，2，4-噻二唑基、1，3，4-噻二唑基、1，2，3-三唑基、1，2，4-三唑基、四唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基和三嗪基;和芳香稠合杂环基如苯并呋喃基、异苯并呋喃基、苯并[b]噻吩基、吲哚基、异吲哚基、1H-吲唑基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、1，2-苯并异噁唑基、苯并噻唑基、1，2-苯并异噻唑基、1H-苯并三唑基、喹啉基、异喹啉基、肉啉基、喹唑啉基、喹喔啉基、2，3-二氮杂萘基、亚萘基（naphthylidinyl）、嘌呤基、喋啶基（pteridinyl）、咔唑基、2-咔啉基、β-咔啉基、γ-咔啉基、吖啶基、吩噁嗪基、吩噻嗪基、吩嗪基、phenoxathinyl、噻蒽基、菲啶基、亚二氢吲哚基（indolidinyl）、吡咯并[1，2-b]哒嗪基、吡唑并[1，5-a]吡啶基、咪唑并[1，2-a]吡啶基、咪唑并[1，5-a]吡啶基、咪唑并[1，2-b]哒嗪基、咪唑并[1，2-a]嘧啶基、1，2，4-三唑并[4，3-a]吡啶基和1，2，4-三唑并[4，3-b]哒嗪基，菲咯啉基。

非芳香杂环基团的优选例包括环氧乙烷基、氮杂环丁烷基、氧杂环丁烷基、硫杂环丁烷基、吡咯烷基、四氢呋喃基、thiolanyl、哌啶基、四氢吡喃基、吗啉基、硫代吗啉基和哌嗪基。

所述杂环基团可有一个或多个（优选1-3个）适当的取代基，所述取代基与上述芳基的取代基相同。

示于Q′的上述任意取代的羧基的取代基的例子有，烷基、环烷基、芳基、芳烷基和杂环基，它们的定义如上所述。

示于Q′的上述低级正烷二氧基示例为C_1-6正烷二氧基（如亚甲二氧基、亚乙二氧基、亚丙二氧基和2，3-二甲基亚甲二氧基）。

上述Q′中的芳基与已讨论的定义相同。

示于上述R¹′、R¹″、R⁵、R⁵′和R⁶中的低级烷基的示例有C_1-6烷基（如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、叔丁基、戊基、己基等）。

示于W和A中的所述连结基团的示例为C_1-4正烷基（如亚甲基、亚乙基等）、C_1-6亚烯基（如亚乙烯基、亚丁二烯基等）、-（CH）_CNR¹⁰-（其中C为0-3的整数，R¹⁰为氢或C_1-6烷基如甲基、乙基、丁基等）、-CO-、式-CONR¹⁰-基团（其中R¹⁰如上所定义）、-O-、-S-、式-NR¹⁰SO_e-基团（其中e为0-2的整数，R¹⁰如上所定义）等。

R¹优选为氢或任意取代的烷基。R¹更优选为氢或式（CH₂）_mQ基团（其中m为0-3的整数，Q为任意取代的芳基、任意取代的环烷基或任意取代的杂环基。上述任意取代的烷基中烷基示例为C_1-6烷基（如甲基、乙基、丙基、丁基、叔丁基、己基等）、更优选C_1-3烷基。上述任意取代的芳基、任意取代的环烷基和任意取代的杂环基如上所定义。Q优选为芳基，其可被（i）卤素、（ii）硝基、（iii）氰基、（iv）氨基、（v）任意取代的羧基、（vi）低级亚烷二氧基、（vii）式-A-R⁶基团（其中A和R⁶如上所定义）所取代。任意取代的羧基和低级亚烷二氧基如上所定义。芳基优选为C_6-12芳基（如苯基、萘基等），更优选为苯基。

R²优选为氢或烷基。R²更优选为氢或C_1-6烷基（如甲基、乙基、丙基、丁基、叔丁基、己基等）。R²最优选为氢。

R³优选为氢、烷基、可被烷基或芳基单取代/双取代的氨基。R³更优选为C_1-6烷基（如甲基、乙基、丙基、丁基、叔丁基、己基等）。R³最优选C_1-3烷基（如甲基、乙基、丙基等）。可被烷基或芳基单取代/双取代的氨基中，烷基优选为C_1-4烷基（如甲基、乙基、丙基、丁基等），芳基优选为C_6-12芳基（如苯基、萘基等）。

R⁴优选为任意取代的芳基、任意取代的环烷基、任意取代的杂环基或任意取代的羧基，后者可与烷基（如C_1-6烷基如甲基、乙基、丙基、丁基、己基等）成酯。R⁴更优选为芳基（如C_6-12芳基，苯基、萘基等），其可被烷氧基（如C_1-6烷氧基如甲氧基、乙氧基、丁氧基、己氧基等）或烷硫基（如C_1-6烷硫基如甲硫基、乙硫基、丁硫基、己硫基等）所取代。所述芳基最优选苯基。

W优选为化学键，或选自-SO_f（其中f为0-2的整数）、-CO-、CONR″-[其中R″为低级烷基（如C_1-4烷基如甲基、乙基、丙基、丁基等）]的连结基团。更优选W为一化学键。

优选R¹′为-（CH₂）_mQ″[其中m为0-3的整数，Q″为可被式-A-R⁵基团（其中A和R⁵如上所定义）取代的芳基]。芳基如上所定义，优选为C_6-12芳基（如苯基、萘基等），更优选苯基。

优选R⁴′为任意取代的芳基。更优选R⁴′为可被烷氧基（如C_1-6烷氧基如甲氧基、乙氧基、丁氧基、己氧基等）或烷硫基（如C_1-6烷硫基如甲硫基、乙硫基、丁硫基、己硫基等）取代的芳基（如C_6-12芳基如苯基、萘基等）。所述芳基最优选苯基。

化合物（I）和（I′）或其盐的优选例如下：

2，4（1H，3H）-二氧代-5-甲基-6-（4-甲氧甲氧基苯基）-1-（2-甲氧苄基）噻吩并[2，3-d]嘧啶-3-乙酸，

2，4（1H，3H）-二氧代-5-甲基-1-（2-甲硫基苄基）-6-[4-（2-氧代丙氧基）苯基]噻吩并[2，3-d]嘧啶-3-乙酸或其盐。

下面描述制备化合物（I）、（I′）或其盐的方法。

（a）化合物（Ⅳ′），相当于其中R¹为氢R²为任意取代的烃残基的式（Ⅰ）化合物或其盐，通过式（Ⅱ′）化合物或其盐用碱进行关环反应来制备：

其中R²′、R³、R⁴、R⁷、W和n如上所定义。

关环反应是在不影响反应的溶剂中进行的。溶剂的例子有醇（如甲醇、乙醇、异丙醇等）、醚（如二噁烷、四氢呋喃等）等。

碱的例子有碱金属烷氧化物（如甲醇钠、乙醇钠、异丙醇钠等）等。一摩尔化合物（Ⅱ′）使用约1-5摩尔碱，优选约1.5-3摩尔碱。

反应温度为约10℃到所用溶剂的沸点，优选约25℃到所用溶剂的沸点。

反应时间为数分钟到几天，优选约10分钟到2天。

（b）化合物（Ⅳ′）或其盐通过将化合物（Ⅲ）或其盐用碱进行关环反应，然后用生成的关环产物进行亲电取代反应以引入-WR⁴基团（其中W和R⁴如上所定义）。

关环反应在不影响反应的溶剂中进行。溶剂的例子有醇（如甲醇、乙醇、异丙醇等）、醚（如二噁烷、四氢呋喃等）等。

碱的例子有碱金属烷氧化物（如甲醇钠、乙醇钠、异丙醇钠等）等。一摩尔式（Ⅱ′）化合物使用1-5摩尔，优选1.5-3摩尔碱。

反应温度为10℃到所用溶剂的沸点，优选约25℃到所用溶剂的沸点。

反应时间为几分钟到几天，优选约10分钟到2天。

亲电取代反应的例子为已知的亲电取代反应。亲电取代反应的优选例为硝化（用如发烟硝酸-浓硫酸，硝酸钠-浓硫酸等）、酰化（用如酰氯-氯化铝等）、甲酰化（用如三氯氧化磷-二甲基甲酰胺、N-甲基-N-甲酰苯胺等）、卤代（用如N-溴琥珀酰亚胺、溴-吡啶、磺酰氯等）等。

所述亲电取代反应可通过已知方法进行。例如，硝化在约0-80℃下在发烟硝酸-浓硫酸中或在硝酸钠-浓硫酸中进行。例如，酰化用烷酰氯（如乙酰氯、丙酰氯等）在溶剂中在Lewis酸催化剂（如氯化铝、四氯化钛等）存在下在约0-100℃下进行，其中溶剂不影响酰化，例如硝基苯、硝基甲烷、二硫化碳等。例如，甲酰化使用三氯氧化磷-N，N-二甲基甲酰胺或N-甲基-N-甲酰基苯胺、草酰氯-N，N-二甲基甲酰胺或N-甲基-N-甲酰基苯胺、亚硫酰氯-N，N-二甲基甲酰胺或N-甲基-N-甲酰基苯胺在溶剂中在约15-130℃下进行，其中溶剂不影响甲酰化，如苯、甲苯、二甲苯、四氢呋喃、二噁烷、1，2-二氯乙烷等。例如，卤代反应是用亚硫酰氯、N-氯琥珀酰亚胺、N-溴琥珀酰亚胺、溴、氯、碘等在溶剂中在约15-130℃下进行，其中溶剂不影响卤化反应，如为二氯甲烷、吡啶、苯、甲苯、二甲苯等。

必要时，将通过亲电取代反应引入的基团进行功能团转换反应。功能团转换反应的例子为已知的功能团转换反应如还原、酰化、磺酰化、烷基化、偶氮连结、Wittig反应、卤化、Grignard试剂与卤化物、有机锌试剂、有机硼试剂、有机锡试剂等等。

（c）化合物（Ⅵ），相当于其中R²为任意取代烃残基的式（Ⅰ）化合物或其盐，通过将式（Ⅳ′）化合物或其盐（在上述（a）和（b）中制备）与式（Ⅴ′）化合物或其盐反应：

其中R¹'''为任意取代的烃残基，X为卤原子。

用R¹'''表示的任意取代的烃残基如上所定义。用X表示的卤原子为氟、氯、溴或碘。

反应在不影响反应的溶剂中进行。溶剂示例为醚（如二噁烷、四氢呋喃等）、芳香烃（如苯、甲苯、二甲苯等）、酰胺（如N，N-二甲基甲酰胺、N，N-二甲基乙酰胺等）、二甲正砜等。反应优选在碱（如碳酸钾、氢化钠、氢化钾、叔丁醇钾等）存在下进行。

一摩尔化应（Ⅳ′）使用1-5摩尔，优选1.1-2.5摩尔化合物（Ⅴ′）。当反应中用碱时，一摩尔化合物（Ⅳ′）使用1-5摩尔，优选1.1-3摩尔碱。

反应温度为10℃到所用溶剂的沸点，优选约20℃到130℃。

反应时间为几分钟到几天，优选约10分钟到2天。

（d）化合物（Ⅶ），相当于其中R²为氢的式（Ⅰ）化合物或其盐，通过将化合物（Ⅵ）或其盐（在上述（c）中制得）进行反应使其中的R²′转变为氢来制备。

其中R²′转化为氢的反应示例为水解。

水解是通过化合物（Ⅵ）或其盐与碱在不影响水解的溶剂中进行的。溶剂可示例为醇（如甲醇、乙醇、异丙醇等）、醚（如二噁烷、四氢呋喃等）、芳香烃（如苯、甲苯、二甲苯等）、酰胺（如N，N-二甲基甲酰胺、N，N-二甲基乙酰胺等）、二甲亚砜等。碱的例子为碱金属氢氧化物（如氢氧化锂、氢氧化钠、氢氧化钾等）、碱土金属氢氧化物（如氢氧化钙、氢氧化钡等）、碱金属碳酸盐（如碳酸钾、碳酸钠等）。

一摩尔化合物（Ⅵ）用约1-10摩尔，优选1.5-5摩尔碱。

反应温度为约10℃到所用溶剂的沸点，优选约15℃-130℃。

反应时间为几分钟到几天，优选10分钟到2天。

用于上述制备方法（a）到（d）的原料化合物（Ⅱ）、（Ⅲ）或其盐的制备例如可用下列方法A或B进行。

1.方法A

化合物（Ⅱ）、（Ⅲ）或其盐通过化合物（Ⅷ）或其盐：

其中R³、R⁴、R⁷、W和n如上所定义，

或式（Ⅷ′）化合物或其盐：

其中R³和R⁷如上所定义，

与异氰酸酯衍生物反应来制备。

异氰酸酯衍生物的例子有异氰酸酯衍生物R⁷OOC-（CH₂）_n-NCO（其中R⁷和n如上所定义）。

反应在不影响反应的溶剂中进行。溶剂的例子有四氢呋喃、吡啶、二噁烷、苯、二氯甲烷、1、2-二氯乙烷、甲苯、二甲苯等。

一摩尔化合物（Ⅷ）或（Ⅷ′）用约1-5摩尔，优选1.1-2.5摩尔的异氰酸酯衍生物。

反应温度为约15℃-130℃，优选约25℃-130℃。

反应时间为几分钟到几天，优选10分钟到2天。

2.方法B

化合物（Ⅱ）、（Ⅲ）或其盐通过化合物（Ⅷ）、（Ⅷ′）或其盐与光气或其等价物[如双光气如双（三氯甲基）碳酸酯、三光气如氯甲酸三氯甲基酯等]反应，生成异氰酸酯衍生物，然后该异氰酸酯衍生物与胺反应[如式R⁷OOC-（CH₂）_n-NH₂化合物（其中R⁷如上所定义）]。

化合物（Ⅷ）、（Ⅷ′）或其盐与光气或其等价物的反应是在不影响此反应的溶剂中进行。溶剂的例子有四氢呋喃、吡啶、二噁烷、苯、二氯甲烷、1、2-二氯乙烷、甲苯、二甲苯等。

一摩尔化合物（Ⅷ）或（Ⅷ′）使用约0.5-2摩尔，优选约0.9-1.1摩尔光气或其等价物。反应温度为约15℃-130℃，优选约25℃-130℃。

反应时间为几分钟到几天，优选约10分钟到2天。

异氰酯酸衍生物与胺的反应在不影响反应的溶剂中进行。溶剂的例子有四氢呋喃、吡啶、二噁烷、苯、二氯甲烷、1，2-二氯乙烷、甲苯、二甲苯等。

一摩尔化合物（Ⅷ）或（Ⅷ′）用约1-5摩尔，优选约1.1-3摩尔光气或其等价物。

反应温度为约15℃-130℃，优选约25℃-130℃。

反应时间为几分钟到几天，优选约10分钟到2天。

用于上述反应的化合物（Ⅷ）或其盐通过具有活性亚甲基的酮或醛[如式（Ⅸ）化合物R³-CO-CH₂-WR⁴（其中R³、R⁴和W如上所定义）]与氰基乙酸酯衍生物和硫按照Karl Gewald等的方法反应来制备[K.Gewald，E.Schinde and H.Boetteher：Chem.Ber，99，94-100（1966）]。因此，酮[如化合物（Ⅸ），其中R³为通过氮原子或碳原子键合的基团]与氰基乙酸酯衍生物在乙酸和乙酸铵存在下在溶剂中回流反应，其中溶剂不影响反应，例如为苯、甲苯，生成的亚烷基氰基乙酸酯衍生物在硫和碱（如在机碱如三乙胺、乙基二异丙基胺、二甲氨基吡啶等）存在下在溶剂中加热（如约50-80℃），其中溶剂不影响反应，如为甲醇、乙醇，生成2-氨基噻吩衍生物[化合物（Ⅷ），其中R³为通过氮原子或碳原子键合的基团]。醛[如化合物（Ⅸ），其中R³为氢原子]与氰基酯衍生物在硫和碱（如有机碱如三乙胺、乙基二异丙基胺等）存在下在溶剂中加热，其中溶剂不影响反应，如为二甲基甲酰胺、二甲亚砜，生成2-氨基噻吩衍生物[化合物（Ⅷ），其中R³为氢原子]。

化合物（Ⅷ′）可用Karl Gewald等[K.Gewald：Chem，Ber.98，3571-3577（1965）;和K，Gewald和E.Schinke：Chem，Ber，99，2712-2715（1966）]的方法合成。

在上述制备方法中，优选R¹为R¹′代表的基团，R¹'''为R¹″代表的基团，R⁴为R⁴′代表的基团。

这样也制备了本发明化合物的盐，优选生理可接受的酸加成盐。这种盐的示例为与无机酸（如盐酸、氢溴酸、硝酸、硫酸、磷酸等）的盐和与有机酸（如甲酸、乙酸、三氟乙酸、富马酸、草酸、酒石酸、马来酸、柠檬酸、琥珀酸、苹果酸、甲磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸等）的盐。另外，当本发明化合物（Ⅰ）有酸性基团如-COOH时，化合物（Ⅰ）可与无机碱（如碱金属或碱土金属如钠、钾、钙和镁;及铵或有机碱（如三甲胺、三乙胺、吡啶、甲基吡啶、乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、二环己基胺、N，N′-二苄基乙二胺等）成盐。

如此制备的化合物或其盐可用传统分离方法如重结晶、蒸馏、层析等分离和纯化。当得到醇离态化合物（Ⅰ）时可用已知方法或其相似方法转变为盐，当得到盐的形式时，可转化成游离态或转化成另一种盐。

上述化合物（Ⅱ）-（Ⅸ）的盐可与化合物（Ⅰ）的盐相同。

当本发明化合物或其盐为光学活性物质时，可用传统的光学拆分方法将其分离为d-和l-化合物。

本发明化合物具有内皮素拮抗作用和低毒性，这使这些化合物具有治疗和预防用途。因此，本发明化合物可安全地用于恒温哺乳动物（如大鼠、小鼠、兔、狗、牛、马、人等）作为内皮素拮抗剂，特别是治疗或预防急性肾机能不全、心肌梗塞、肝机能不全、心绞痛、脑梗塞形成、蛛网膜下出血（SAH）、高血压、肾机能不全、哮喘、绞痛变体、Raynand综合症、肺性高血压、手术中风、慢性心机能不全、心肥大、动脉硬化、偏头痛等，另外还治疗或预防由手术或移植引起的器官机能减退（如肝等）、微循环不足，另外，还预防经皮透照冠状血管形成术（PTCA）后的restenosis。更特别是它可用于治疗或预防急性肾机能不全、心肌梗塞、肝机能不全、高血压、肺性高血压;治疗或预防由手术或移植引起的器官（如肝等）机能减退、微循环不足;预防PTCA后的restenosis。

当化合物（Ⅰ）或其盐被如人服用时，它本身或与适当药用载体、稀释剂、赋形剖等混合制得的药物组合物可安全地口服或肠胃外给药。

上述药物组合物的例子有口服药（如稀释粉末、颗粒、胶囊和片剂）、注射剂、滴剂、外用药（如滴鼻制剂、经皮吸收制剂等）、软膏（如直肠软膏、阴道软膏等）等。

这些药物组合物可用已知一般用于制备药物组合物的方法制备。

本发明化合物（Ⅰ）或其盐可制成注射剂，与分散剂[如Tween 80（Atlas Powder，U.S.A）.HCO 80（Nikko Chemicals，Japan）、聚乙二醇、羧甲基纤维素、藻酸钠等]、防腐剂（如对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、苯甲醇等）、等渗剂（如氯化钠、甘露糖醇、山梨糖醇、葡萄糖等）等一起形成水注射液，或者溶解、悬浮或乳化在植物油（如橄榄油、芝麻油、棉籽油、玉米油等）、丙二醇等中形成油注射液。

在制备口服药物组合物时，本发明化合物（Ⅰ）或其盐例如与填充剂（如乳糖、蔗糖等）、崩解剂（如淀粉、碳酸钙等）、粘合剂（如淀粉、阿拉伯树胶、羧甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基纤维素等）或润滑剂（如滑石、硬脂酸镁、聚乙二醇6000等）等一起压制成形。如有必要，此组合物可为了掩盖味道、形成肠衣或者长效作用，用已知方法进行包衣。包衣试剂的示例为羟丙基甲基纤维素、乙基纤维素、羟甲基纤维素、羟丙基纤维素、聚氧亚乙基二醇、Tween 80、pluronic F68、纤维素醋酸邻苯二甲酸酯、羟丙基纤维素邻苯二甲酸酯、羟甲基纤维素醋酸琥珀酸酯、Eudragit（甲基丙烯酸与丙烯酸的共聚物;德国Rohm生产）、红色氧化铁等。在肠衣膜与核之间可用已知方法提供一包衣底层。

在制备外用组合物时，本发明化合物（Ⅰ）本身或其盐可通过已知方法处理形成外用的固体、半固体或液体。因此，化合物（Ⅰ）本身或向其中加入/与之混合上填充剂（如乙二醇、甘露糖醇、淀粉、微晶纤维素等）、增稠剂（如天然胶、纤维素衍生物、丙烯酸聚合物等）及类似物后，制成粉状组合物。关于液体组合物，用与注射液中几乎相同的方法制备油或水悬浮液。对于半固体组合物，优选水或油胶或软膏。每种剂型口都可加入pH调节剂（如碳酸、磷酸、柠檬酸、盐酸、氢氧化钠等）、防腐剂（如对羟基苯甲酸酯、氯代丁醇、氯苄烷铵等）等。

例如制备软膏时，本发明化合物（Ⅰ）或其盐可制成油或水性固体、半固体或流体软膏。可用于上述组合物的油基质材料的例子有高级脂肪酸[如可可脂、Witepsols（Dynamite-Nobel生产）等]甘油酯、脂肪酸介质[如Miglyols（Dynamite-Nobel生产）等]和植物油（如芝麻油、玉米油、棉籽油等）等。水基质材料的例子有聚乙二醇和丙二醇，及水胶的基质材料为天然胶、纤维素衍生物、乙烯聚合物、丙烯酸聚合物等。

日剂量可根据病情;病人的年龄、性别、体重、敏感性差异;服用的时间和相隔;组合物的性质及药物组合物的类型;活性成分的类型;等等而变化，因而没有特别限制。但一般对恒温动物为约0.01-150mg/kg，优选约0.1-100mg/kg，更优选约0.5-50mg/kg。上述剂量一般每天分1-4次服用。

通过下列实施例将进一步说明本发明，尽管本发明不受此限制。

HNMR光谱是用Varian Gemini 200（200Hz）型分光计以四甲基硅烷为内标测定的，所有数值以ppm计。

在参考例和实施例中所用符号的意义如下。

s：单峰，d：二重峰，t：三重峰，q：四重峰，dd：两个二重峰;dt：两个三重峰，m：多重峰，br：宽峰，J：偶合常数。

参考例1

2-氨基-5-苯基噻吩-3-羧酸乙酯的制备

将苯基乙醛（在邻苯二甲酸二乙酯中的50%溶液，12.05g;50mmol）20分钟内滴加到氰基乙酸乙酯（6.1g，50mmol）、硫（1.61g，50mmol）、三乙胺（3.5ml，25mmol）和二甲基甲酰胺（10ml）混合物中。混合物在45℃下搅拌9小时。浓缩反应混合物，得到的残余物用乙酸乙酯萃取。萃取液用氯化钠水溶液洗涤，然后用MgSO₄干燥，真空蒸发。得到的残余物在硅胶上层析，然后从乙醚-己烷中结晶，得到浅黄色片状结晶（5.55g;45%）。

m.p.124.5-125.5℃（文献值：123-124℃）.

元素分析（%）for C₁₃H₁₈NO₃S：

理论值：C 63.13，H 5.30，N 5.66;

实测值：C 62.99，H 5.05，N 5.63.

¹H-NMR（200MHz，CDCL₃）δ：1.37（3H，t，J＝7.1Hz），4.30（2H，d，J＝7.1Hz），5.97（2H，br），7.17-7.46（6H，m）.

IR（KBr）：3448，3320，1667，1590，1549 cm^-1.

参考例2

制备2-氨基-4-甲基-5-（4-甲氧基苯基）-噻吩-3-羧酸乙酯。

4-甲氧基苯乙酮（16.5g，0.10mol）、氰基乙酸乙酯（12.2g，0.10mol）、乙酸铵（1.55g，20mmol）、乙酸（4.6ml，80mmol）和苯（20ml）的混合物回流24小时，同时用Dene-Starke仪从中去除生成的水。冷却后，反应混合物真空浓缩，残余物在二氯甲烷和碳酸氢钠水溶液之间分配。有机层用氯化钠水溶液洗涤，然后用MgSO₄干燥，真空蒸发。向溶液加入硫（3.21g，0.01mol）和二乙胺（10.4ml，0.01mol），混合物在50-60℃搅拌2小时。浓缩反应混合物，残余物用乙酸乙酯提取。提取物用氯化钠水溶液洗涤，然后用MgSO₄干燥，真空蒸发。残余物在硅胶上层析，然后从乙醚-己烷中结晶，得到黄色片晶（11.5g;40%）。

m.p. 79-80℃

元素分析（%）for C₁₅H₁₇NO₃S：

理论值：C 61.83，H 5.88，N 4.81，S 11.01;

实测值：C 61.81，H 5.75，N 4.74，S 10.82.

¹H-NMR（200MHz，CDCl₃）δ：1.37（3H，t，J＝7.1Hz），2.28（3H，s），3.83（3H，s），4.31（2H，q，J＝7.1Hz），6.05（2H，brs），6.91（2H，d，J＝8.8Hz），7.27（2H，d，J＝8.8Hz）

IR（KBr）：3426，3328，1651，1586，1550，1505，1485cm^-1.

FAB-MS m/z：291（M⁺）.

参考例3

制备2-氨基-4-甲基-5-苯基噻吩-3-羧酸乙酯

用苯乙酮（11.6g;86.5mmol）代替4-甲氧基苯乙酮，用氰基乙酸乙酯（10.5g，86.5mmol）、乙酸铵（1.34g，17.4mmol）、乙酸（3.96ml，69.2mmol）、硫（2.78g，86.5mmol）和二乙胺（8.95ml，86.5mmol）进行参考例2中提及的相同操作，得到无色针状结晶（9.95g;40%）。

m.p. 64-65℃（乙醚-己烷中重结晶;文献值75℃）。

元素分析（%）for C₁₄H₁₅NO₂S：

理论值：C 64.34，H 5.79，N 5.36;

实测值：C 64.51，H 5.77，N 5.29.

¹H-NMR（200MHz，CDCL₃）δ：1.37（3H，t，J＝7.1Hz），2.33（3H，s），4.32（2H，q，J＝7.1Hz），6.09（2H，br），7.24-7.42（5H，m）.

IR（KBr）：3388，3278，1665，1584，1549，1481cm^-1.

参考例4

制备2-氨基-4-甲基-5-（3.4-亚甲二氧基苯基）噻吩-3-羧酸乙酯

用3，4-亚甲二氧基苯乙酮（5.34g;30mmol）代替4-甲氧基苯乙酮，用氰基乙酸乙酯（3.65g，30mmol）、乙酸铵（0.46g，6mmol）、乙酸（1.37ml，24mmol）、硫（0.9g，28.25mmol）和二乙胺（2.92ml，28.25mmol）进行参考例2中相同的操作，得到浅黄色粉末（2.90g;34%）。

¹H-NMR（200MHz，CDCl₃）δ：1.37（3H，t，J＝7.1Hz），2.29（3H，s），4.31（2H，q，J＝7.1Hz），5.99（2H，s），6.82（3H，s）.

参考例5

制备2-氨基-4-甲基-5-（3，4-二甲氧基苯基）噻吩-3-羧酸乙酯

用3，4-二甲氧基苯乙酮（5.0ml，28.7mmol）代替4-甲氧基苯乙酮，用氰基乙酸乙酯（0.44g，5.74mmol）、乙酸铵（3.49g，28.7mmol）、乙酸（1.32ml，23.0mmol）、硫（0.90g，28.0mmol）和二乙胺（2.9ml，28.0mmol）进行参考例2中相同的操作，得到浅黄色粉末（3.09g;34%）。

¹H-NMR（200MHz，CDCl₃）δ：1.38（3H，t，J＝7.1Hz），2.30（3H，s），3.89（3H，s），3.91（3H，s），4.32（2H，q，J＝7.1Hz），6.07（2H，s），6.74-6.89（3H，m）.

参考例6

制备2，4（1H，3H）-二氧代-5-甲基噻吩并[2，3-d]嘧啶-3-乙酸乙酯

将异氰酸乙酸乙酯（9.1ml;81.1mmol）在45-50℃下滴加到2-氨基-4-甲基噻吩（10.0g，54.0mmol）在吡啶中的溶液中。搅拌混合物2小时。将反应混合物蒸发至干，残余物在乙酸乙酯和稀盐酸之间分配。水层用乙酸乙酯提取。提取液合并后用氯化钠水溶液洗涤，用MgSO₄干燥，真空蒸发。残余物在乙酸乙酯中重结晶得到无色针晶（16.1g）。将结晶悬浮在乙醇（150ml）中，然后加入乙醇钠[用金属钠（19.5g，84.8mmol）和乙醇（70ml）制得]，混合物在温室搅拌一小时。冰浴冷却下向反应混合物中加入2N盐酸（45ml），真空从中蒸去乙醇。过滤收集分离出的结晶，用水-乙醇洗涤，用五氧化磷真空干燥，在乙醇中重结晶，得无色针状结晶（9.50g，93%）。

m.p.229-230℃

参考例7

制备2，4（1H，3H）-二氧代-4-硝基5-甲基噻吩并[2，3-d]嘧啶-3-乙酸乙酯

向参考例6中制备的化合物（4.0g，14.9mmol）中加入浓硫酸（15ml），然后冰浴下15分钟内滴加硝酸钠（1.33g，15.7mmol）在浓硫酸（25ml）中的溶液。加完后，混合物在冰浴下搅拌一小时。将反应混合物倾入冰水中，用乙酸乙酯和四氢呋喃的混合物提取。提取液用氯化钠水溶液洗涤，用MgSO₄干燥，真空蒸发。残余物用硅胶层析，得到白色固体（4.08g;86%）。固体在乙酸乙酯-己烷中重结晶，得黄色针状结晶。

m.p. 214-215℃

元素分析（%）for C₁₁H₁₁N₃O₆S·0.1H₂O：

理论值：C 41.93，H 3.58，N 13.34;

实测值：C 41.90，H 3.88，N 13.24.

¹H-NMR（200 MHz，DMSO-d₆）δ：1.35（3H，t，J＝7.1Hz），2.95（3H，s），4.30（2H，q，J＝7.1Hz），4.75（2H，s），10.66（1H，brs）.

IR（KBr）：3530，1760，1719，1676，1549，1444，1321 cm^-1.

参考例8

制备2，4（1H，3H）-二氧代-1-（2-甲氧苄基）-5-甲基-6-硝基噻吩并[2，3-d]嘧啶-3-乙酸乙酯

将参考例7制备的化合物（0.912g，5.87mmol）在二甲基甲酰胺（6ml）中的溶液冰浴下氮气流下滴加到氢化钠（0.125g，3.13mmol，用正己烷洗过）在二甲基甲酰胺（2ml）中的悬浮液中。混合物在冰浴冷却下搅拌20分钟，然后向其中滴加2-甲氧基苄基氯（0.92g，5.87mmol）在二甲基甲酰胺（1ml）中的溶液。室温下搅拌混合物12小时，然后在60℃下搅拌24小时。冷却后，浓缩反应混合物，残余物在乙酸乙酯和氯化铵水溶液之间分配。水层用乙酸乙酯提取。提取物合并后用氯化钠水溶液洗涤，用MgSO₄干燥，真空蒸发。残余物用硅胶层析得到浅黄色固体（0.70g;56%），其在乙酸乙酯-己烷中重结晶，得到无色粉末。

m.p. 175-177℃

元素分析（%）for C₁₉H₁₉N₃O₇S：

理论值：C 52.65 H 4.42，N 9.69;

实测值：C 52.87，H 4.33，N 9.50.

¹H-NMR（200MHz，CDCl₃）δ：1.31（3H，t，J＝7.2Hz），2.97（3H，s），3.90（3H，s），4.26（2H，q，J＝7.1Hz），4.79（2H，s），5.24（2H，s），6.90-6.97（2H，m），7.17-7.37（2H，m）.

IR（KBr）：2970，1740，1721，1678，1547，1489 cm^-1.

参考例9

制备2，4（1H，3H）-二氧代-1-（2-甲基硫基苄基）-5-甲基-6-硝基噻吩并[2，3-d]嘧啶-3-乙酸乙酯

用2-甲硫基苄基氯代替2-甲氧苄基氯进行参考例8中同样的操作，得到浅黄色粉末（1.33g，62%）。

¹H-NMR（200MHz，CDCl₃）δ：1.31（3H，t，J＝7.1Hz），2.57（3H，s），2.98（3H，s），4.27（2H，q，J＝7.1Hz），4.82（2H，s），5.36（2H，s），6.99-7.36（4H，m）.

参考例10

制备2，4（1H，3H）-二氧代-1-（2-甲硫基苄基）-5-甲基-6-乙酰氨基噻吩并[2，3-d]嘧啶-3-乙酸乙酯

将参考例9中制备的化合物（1.10g;2.45mmol）溶解在乙酸（50ml）中。向此溶液中加入铁粉（0.72g，12.3mmol），混合物在80℃下搅拌4小时。浓缩反应混合物，残余物在乙酸乙酯和碳酸氢钠饱和水溶液之间分配。水层用乙酸乙酯提取。提取物合并后用氯化钠水溶液洗涤，用MgSO₄干燥，真空蒸发。残余物用硅胶层析，得到浅黄色固体（1.2g），在乙酸乙酯-己烷中重结晶，得到黄色片状晶体（0.79g;70%）

¹H-NMR（200MHz，CDCl₃）δ：1.31（3H，t，J＝7.1Hz），2.16（3H，s），2.37（3H，s），4.26（2H，s），4.82（2H，q，J＝7.1Hz），5.30（2H，s），6.96-7.36（4H，m），7.87（1H，s）.

参考例11

制备2，4（1H，3H）-二氧代-1-（2-甲氧苄基）-5-甲基-6-乙酰氨基噻吩并[2，3-d]嘧啶-3-乙酸乙酯

参考例8中制备的化合物用参考例10中相同方法处理，得到无色粉末（0.09g;29%）。

m.p. 233-234℃

元素分析（%）for C₂₁H₂₃N₃O₆S·0.1H₂O：

理论值：C 56.39，H 5.23，N 9.39;

实测值：C 56.30，H 5.18，N 9.34.

¹H-NMR（200MHz，CDCl₃）δ：1.32（3H，t，J＝7.1Hz），2.16（3H，s），2.34（3H，s），3.91（3H，s），4.27（2H，q，J＝7.1Hz），4.80（2H，s），5.18（2H，s），6.81-6.90（2H，m），7.04-7.08（1H，m），7.20-7.28（1H，m），8.11（1H，s）.

IR（KBr）：3296，1760，1700，1644，1586，1553，1493 cm^-1.

参考例12

制备2，4（1H，3H）-二氧代-6-溴-5-甲基噻吩并[2，3-d]嘧啶-3-乙酸乙酯。

将参考例6制备的化合物（3.50g，13.05mmol）、N-溴琥珀酰正胺（2.55g，14.35mmol）和氯仿（360ml）的混合物回流3小时。冷却后，反应混合物在氯仿和氯化钠水溶液之间分配。水层用氯仿提取，提取物合并后用MgSO₄干燥，真空蒸发。残余物在乙酸乙酯-己烷中重结晶，得到无色晶体（3.15g，67%）。

m.p. 189-190℃

¹H-NMR（200MHz，CDCl₃）δ：1.34（3H，t，J＝7.2Hz），2.40（3H，s），4.28（2H，q，J＝7.2Hz），4.76（2H，s），10.20（1H，s）.

IR（KBr）：1748，1717，1657，1572，1437 cm^-1.

参考例13

制备2，4（1H，3H）-二氧代-6-溴-5-甲基-1-（2-甲硫基苄基）噻吩并[2，3-d]嘧啶-3-乙酸乙酯

向参考例12中制备的化合物（2.00g，5.76mmol）在二甲基甲酰胺（30ml）中的溶液中加入碳酸钾（1.19g，8.64mmol）、碘化钾（0.19g，1.15mmol）和2-甲硫基苄基氯（1.99g，11.52mmol），混合物在室温下搅拌16小时。浓缩反应混合物，残余物在乙酸乙酯和氯化钠水溶液之间分配。水层用乙酸乙酯提取。提取物合并后用MgSO₄干燥，真空蒸发。残余物在硅胶上层析，得到白色粉末（2.12g，76%）。

m.p. 150-151℃

¹H-NMR（200MHz，CDCl₃）δ：1.30（3H，t，J＝7.1Hz），2.44（3H，s），2.55（3H，s），4.24（2H，q，J＝7.1Hz），4.82（2H，s），5.29（2H，s），6.97-7.34（4H，m）.

IR（KBr）：1746，1707，1669，1475 cm^-1.

实施例1

制备2，4（1H，3H）-二氧代-6-苯基噻吩并[2，3-d]嘧啶-3-乙酸乙酯（化合物1）

将异氰基乙酸乙酯（1.4ml;12.5mmol）滴加到参考例1中制备的化合物（2.0g，8.09mmol）在吡啶（8ml）中的溶液中，在45℃搅拌混合物2小时。真空浓缩反应混合物，残余物悬浮在乙醇（20ml）和乙醇钠[由金属钠（0.38g，16.5mmol）和乙醇（15ml）制备]的混合物中。室温搅拌3小时。冰浴冷却下向反应混合物中加入2N盐酸，真空蒸去乙醇。形成的固体用水-乙醇洗涤，五氧化磷干燥，得到无色粉末（2.57g;96%），乙醇中重结晶得到无色结晶。

m.p. 279-280.5℃

元素分析（%）for C₁₆H₁₄N₂O₄S·0.2H₂O：

理论值：C 57.54，H 4.35，N 8.39;

实测值：C 57.56，H 4.32，N 8.36。

¹H-NMR（200MHz CDCl₃-DNSO-d₆）δ：1.29（3H，t，J＝7.2Hz），4.23（2H，q，J＝7.2Hz），4.75（2H，s），7.26-7.55（6H，m），12.08（1H，s）.

IR（KBr）：3140，2986，1745，1725，1659，1566，1547，1483 cm^-1.

实施例2

用实施例1中相同方法，从参考例1、2和3得到的化合物开始制得表1中的化合物。

表1

化合物号 R³R¹²R²n 收率 M.p.

(%) (℃)

2 氢氢乙基 2 65 231-233

3 " " 甲基 3 43 214-215

4 甲基 " 乙基 1 41 119-120

5 " 4-甲氧基 " 1 96 164-165

6 " " " 2 84 185-186

7 " " 甲基 3 81 179-180

8 " 3,4-亚甲二氧基乙基 1 88 204-205

9 " 3,4-二甲氧基 " 1 90 220-221

表1中化合物5还可用下述方法制备。

参考例2中制备的化合物（0.58g，2.00mmol）和三光气（0.42g，1.40mmol）在二噁烷（10ml）中的溶液在100℃下搅拌3小时。浓缩反应混合物至干。向残余物中加入乙基甘氨酸（0.5g，5.00mmol）和吡啶（10ml），室温下搅拌混合物30分钟。浓缩反应混合物，残余物在二氯甲烷和稀盐酸之间分配。水层用二氯甲烷提取。提取相合并后用MgSO₄干燥，真空蒸发。残余物悬乳在乙醇和乙醇钠[用金属钠（0.07g，3.00mmol）和乙醇（3ml）制备]的混合物中。室温下搅拌3小时。冰浴冷却下向反应混合物中加入2N盐酸（4ml），真空蒸去乙醇。生成的结晶用乙醇水洗涤，用五氧化磷干燥，得到无色粉末（0.5g;71%）。

实施例3

制备2，4（1H，3H）-二氧代-5-甲基-6-（4-硝基苯基）噻吩并[2，3-d]嘧啶-3-乙酸乙酯（化合物10）

将硝酸钠（0.125g，1.45mmol）在浓硫酸（3.5ml）中的溶液在冰浴冷却下滴加到实施例2中制备的化合物4（0.50g，1.45mmol）在浓硫酸（3ml）中的溶液中。混合物在冰浴下搅拌一小时。将反应混合物倾入冰水中，混合物用乙酸乙酯提取。提取物用氯化钠水溶液洗涤，用MgSO₄干燥，真空蒸发。残余物在乙酸乙酯中重结晶，得到黄色晶体（0.285g，50%）。

m.p. 276-278℃

元素分析（%）for C₁₇H₁₅N₃O₆S：

理论值：C 52.44，H 3.88，N 10.79;

实测值：C 52.63，H 3.76，N 10.6.

¹H-NMR（200MHz，DMSO-d₆）δ：1.22（3H，t，J＝7.1Hz），2.52（3H，s），4.16（2H，q，J＝7.1Hz），4.61（2H，s），7.77（2H，d，J＝8.9Hz），8.31（2H，d，J＝8.9Hz），12.61（1H，brs）.

IR（KBr）：2928，1748，1721，1659，1597，1568，1520，1460，1348 cm^-1.

实施例4

制备2，4（1H，3H）-二氧代-6-（4-羟基苯基）-5-甲基噻吩并[2，3-d]嘧啶-3-乙酸乙酯（化合物11）。

冰浴冷却下，将实施例2中制备的化合物（2.0g，5.34mmol）在二氯甲烷（40ml）中的溶液滴加到无水氯化铝（2.90g，21.7mmol）、甲硫醚（2.45ml，27.2mmol）和二氯甲烷（60ml）的混合物中。室温搅拌混合物20小时。将反应混合物倾入冰水中，真空蒸发混合物。得到的悬浮液用乙酸乙酯提取。提取物用氯化钠水溶液洗涤、用MgSO₄干燥，真空蒸发。残余物在硅胶上层析，得到无色粉末（1.64g，85%）。生成的粉末在乙酸乙酯中重结晶，得无色结晶。

m.p. 240-242℃

元素分析（%）for C₁₇H₁₆N₂O₅S·0.1H₂O：

理论值：C 56.38，H 4.51，N 7.73;

实测值：C 56.28，H 4.48，N 7.64.

¹H-NMR（200MHz，DMSO-d₆）δ：1.22（3H，t，J＝7.1Hz），2.37（3H，s），4.15（2H，q，J＝7.1Hz），4.59（2H，s），6.85（2H，d，J＝8.6Hz），7.26（2H，d，J＝8.6Hz），9.73（1H，s），12.39（1H，s）.

IR（KBr）：3356，2992，1720，1690，1667，1611，1593，1568，1537，1502 cm^-1.

实施例5

制备2，4（1H，3H）-二氧代-1-（2-甲氧苄基）-6-苯基噻吩并[2，3-d]嘧啶-3-乙酸乙酯（化合物12）

冰浴冷却下氮气氛中，将实施例1制备的化合物1（0.50g，1.51mmol）在二甲基甲酰胺（6ml）中的溶液滴加到氢化钠（61mg，1.53mmol）在二甲基甲酰胺（3ml）中的悬浮液中。冰浴冷却下搅拌混合物20分钟，后混合物中滴加2-甲氧苄基氯（0.72g，4.60mmol）在二甲基甲酰胺（3ml）中的溶液。室温搅拌22小时，然后浓缩。残余物在乙酸乙酯-四氢呋喃和氯化铵水溶液之间分配。水层用乙酸乙酯提取。提取层合并后用氯化钠水溶液洗涤，用MgSO₄干燥，真空蒸发。残余物在硅胶上层析，得到浅黄色粉末（0.463g;68%）。得到的粉末在乙酸乙酯中重结晶，得到无色晶体。

m.p. 182-183.5℃

元素分析（%）for C₂₄H₂₂N₂O₅S：

理论值：C 63.99，H 4.92，N 6.22;

实测值：C 63.82，H 4.96，N 6.25.

¹H-NMR（200MHz，CDCl₃）δ：1.30（3H，t，J＝7.1Hz），3.90（3H，s），4.25（2H，q，J＝7.2Hz），4.83（2H，s），5.27（2H，s），6.88-6.95（2H，m），7.14-7.18（1H，m），7.25-7.51（6H，m），7.53（1H，s）.

IR（KBr）：2996，1750，1709，1667，1557，1526，1499，1473 cm^-1.

实施例6

制备2，4（1H，3H）-二氧代-1-（2，4-二甲氧基苄基）-6-（4-甲氧苯基）-5-甲基噻吩并[2，3-d]嘧啶-3-乙酸乙酯（化合物13）

向实施例2中制备的化合物5（0.73g，1.95mmol）在无水四氢呋喃（THF，25ml）中的溶液中滴加2，4-二甲氧苯甲醇（0.49g，2.91mmol）和三正丁基膦（0.91ml，3.65mmol），搅拌混合物。在氮气流下向此溶液中加入叠氮酰基二哌啶（0.92g，3.55mmol）。室温下氮气流下搅拌混合物6小时，然后60℃下搅拌18小时。冷却后，反应混合物在乙酸乙酯和氯化钠水溶液之间分配。水层用乙酸乙酯提取。提取层合并后再用氯化钠水溶液洗涤，用MgSO₄干燥，真空蒸发。残余物在硅胶上层析，得到无色粉末（0.37g，27%）。得到的粉末在乙醚-正己烷中重结晶，得到无色结晶。

m.p. 110-111℃

元素分析（%）for C₂₇H₂₈N₂O₇S：

理论值：C 61.82，H 5.38，N 5.34;

实测值：C 61.80，H 5.42，N 5.25.

¹H-NMR（200MHz，CDCl₃）δ：1.30（3H，t，J＝7.2Hz），2.48（3H，s），3.77（3H，s），3.83（6H，s），4.25（2H，q，J＝7.2Hz），4.82（2H，s），5.16（2H，s），6.40-6.45（2H，m），6.93（2H，d，J＝8.9H），7.07-7.11（1H，m），7.28（2H，d，J＝8.9HZ）.

IR（KBr）：2974，1754，1711，1663，1613，1589，1528，1510，1477 cm^-1.

实施例7

用实施例5中相同方法，从实施例1、2、3、17、18、19、27和29中制备的化合物开始，制得了表2、3、4和5中所列化合物。

表2

化合物号 R³R¹²R¹R²n 收率 M.p.

(%) (℃)

14 H H 2-(1-甲基吲哚- Et 1 15 226-227.5

3-基)乙基

15 H H 2-喹啉基甲基 Et 1 56 199.5-201.5

16 H H 3,4-亚甲二氧基苄基 Et 1 84 182-184

17 H H 2-甲氧苄基 Et 2 78 142-143

18 H H " Me 3 69 126-127

19 H H 环己基甲基 Et 1 75 169-170

20 H H 3-甲氧苄基 Et 1 64 164-165

21 H H 4-甲氧苄基 Et 1 91 143-145

22 H H 2-甲氧苯乙基 Et 1 63 143-144

23 Me H 2-甲氧苄基 Et 1 89 151-152

24 Me H 2-(1-甲基吲哚- Et 1 91 179-181

3-基)-乙基

25 Me 4-MeO 2-甲氧苄基 Et 1 78 141-142

（Me：甲基;Et：乙基;MeO：甲氧基

表3

化合物号 R³R¹²R¹R²n 收率 M.p.

(%) (℃)

26 Me 4-MeO 2-(1-甲基吲哚-3 Et 1 85 163-164

-基)乙基

27 Me 4-NO₂2-甲氧苄基 Et 1 87 178-179

28 Me 4-MeO 丁基 Et 1 81 134.5-136

29 Me 4-MeO 苄基 Et 1 81 126-128

30 Me 4-MeO 2-甲氧苄基 Et 1 78 127-128.5

31 Me 4-MeO 2-溴苄基 Et 1 94 144-144.5

32 Me 4-MeO 2-硝基苄基 Et 1 62 154-156

33 Me 4-MeO 2-氰基苄基 Et 1 80 176-177

34 Me 4-MeO 2-甲硫苄基 Et 1 88 144-145

35 Me 4-MeO 2-甲氧苯乙基 Et 1 81 113-115

36 Me 4-硝基 2-甲硫苄基 Et 1 79 152-153

（Me：甲基;Et：乙基;MeO：甲氧基

表4

化合物号 R³R¹²R¹R²n 收率 M.p.

(%) (℃)

37 Me 4-MeO 1-萘甲基 Et 1 76 167-170

38 Me 4-MeO 2-萘甲基 Et 1 95 130.5-132

39 Me 2-MeO 2-甲氧苄基 Et 1 90 147-148

40 Me 4-MeO " Et 2 83 156-157

41 Me 4-MeO " Me 3 93 139-140

42 Me 4-MeO 3-甲氧苄基 Et 1 91 144-145

43 Me 4-MeO 4-甲氧苄基 Et 1 87 167-168

44 Me 4-MeO 2,3-二甲氧基苄基 Et 1 86 135-137

45 Me 4-MeO 2,5-二甲氧基苄基 Et 1 76 180-181

46 Me 3,4-亚甲 2-甲硫苄基 Et 1 87 145-147

二氧基

47 Me 3,4-二甲氧基 2-甲硫苄基 Et 1 77 144-145

48 Me 4-MeO 2-羟苄基 Et 1 84 183-184

49 Me 4-MeO 2-乙氧苄基 Et 1 71 138-139

50 Me 4-MeO 2-苄氧苄基 Et 1 76 120-127

51 Me 4-MeO 2'-氰基联苯基甲基 Et 1 93 187-188

52 Me 4-MeO 2-甲氧基甲氧苄基 Et 1 63 108-109

53 Me 4-MeO 2-苯并咪唑甲基 Et 1 82 无定形

54 Me 4-MeO 2-吡啶甲基 Et 1 80 132-133

55 Me 4-MeO 2-氟苄基 Et 1 77 125-127

56 Me 4-丁酰基 2-甲硫苄基 Et 1 91 124-125

57 Me 4-乙硫甲基 " Et 1 76 无定形

（Me：甲基;Et：乙基;MeO：甲氧基

表5

化合物号 R³W R¹²R¹R²n 收率 M.p.

(%) (℃)

58 Me 磺酰基哌嗪基 H 2-甲氧基苄基 Et 1 93 无定形

59 Me 羰基 H 2-甲硫苄基 Et 1 88 127-128

60 Me 羰基 4-MeO 2-甲硫基苄基 Et 1 94 128-129

（Me：甲基;Et：乙基;MeO：甲氧基

实施例8

制备2，4（1H，3H）-二氧代-1-（2-甲基正硫酰基苄基）-6-（4-甲氧基苯基）-5-甲基噻吩并[2，3-d]嘧啶-3-乙酸乙酯（化合物61）

在冰浴冷却下，将间氯过苯甲酸（0.26g，0.753mmol）在二氯甲烷（10ml）中的溶液滴加到实施例7中制备的化合物34（0.35g，0.685mmol）在二氯甲烷（10ml）中的溶液中。加完后，混合物继续在0℃搅拌30分钟。将反应混合物倾入5%的碳酸氢钠水溶液中，水层用乙酸乙酯萃取。有机层合并后用氯化钠水溶液洗涤，MgSO₄干燥，干真蒸发。残余物在硅胶上层析，得到无色无定形晶体（0.26g;72%）。

m.p. 90-95℃

元素分析（%）for C₂₆H₂₆N₂O₆S₂·0.2H₂O：

理论值：C 58.89，H 5.01，N 5.28;

实测值：C 58.89，H 5.04，N 5.22.

¹H-NMR（200MHz，DMSO-d₆）δ：1.31（3H，t，J＝7.1Hz），2.50（3H，s），2.83（3H，s），3.83（3H，s），4.25（2H，q，J＝7.1Hz），4.82（2H，s），5.19（1H，d，J＝16.2Hz），5.49（1H，d，J＝16.2Hz），6.93（2H，d，J＝8.8Hz），7.23-7.57（5H，m），8.05（1H，d，J＝7.8Hz）.

IR（KBr）：1748，1709，1665，1609，1564，1535 cm^-1.

实施例9

制备2，4（1H，3H）-二氧代-1-（2-甲基磺酰基苄基）-6-（4-甲氧苯基）-5-甲基噻吩并[2，3-d]嘧啶-3-乙酸乙酯（化合物62）

在冰浴冷却下，将对氯过苯甲酸（0.52g，1.51mmol）在二氯甲烷（10ml）中的溶液滴加到实施例7制备的化合物34（0.35g，0.685mmol）在二氯甲烷（10ml）中的溶液中。加完成，混合物在0℃搅拌一小时，然后在室温搅拌4小时。将反应混合物倾入5%的碳酸氢钠水溶液中，水层用乙酸乙酯萃取。有机相合并后用氯化钠水溶液洗涤、用MgSO₄干燥，真空蒸发。残余物在硅胶上层析，得到浅黄色固体（0.37g，99%），在乙酸乙酯-己烷中重结晶，得0.25g（67%）无色结晶。

m.p. 141-144℃

元素分析（%）for C₂₆H₂₆N₂O₇S₂·H₂O：

理论值：C 57.55，H 4.83，N 5.16;

实测值：C 57.64，H 4.69，N 5.16.

¹H-NMR（200MHz，DMSO-d₆）δ：1.28（3H，t，J＝7.1Hz），2.53（3H，s），3.26（3H，s），3.84（3H，s），4.23（2H，q，J＝7.1Hz），4.79（2H，s），5.64（2H，s），6.94（2H，d，J＝8.9Hz），7.22-7.32（3H，m），7.48-7.64（2H，m），8.11（1H，d，J＝7.6Hz）.

IR（KBr）：1742，1705，1661，1533，1477，1377 cm^-1.

实施例10

制备5-溴甲基-2，4（1H，3H）-二氧代-1-（2-甲氧苄基）-6-苯基噻吩并[2，3-d]嘧啶-3-乙酸乙酯（化合物63）

实施例7中制备的化合物23（0.20g，0.431mmol）、N-溴琥珀酰亚胺（80g，0.45mmol），α，α＇-偶氮双异丁腈（7mg，0.043mmol）和四氯化碳（5ml）的混合物回流两天。冷却后，滤除不溶物，滤液用二氯甲烷稀释。有机层用氯化钠水溶液洗涤，用MgSO₄干燥，真空蒸发。残余物在硅胶上层析，在乙醚-己烷中结晶，得到无色结晶（0.204g;87%）。

m.p. 123-124℃

元素分析（%）for C₂₅H₂₃N₂O₅SBr：

理论值：C 55.25，H 4.27，N 5.15;

实测值：C 55.04，H 4.21，N 5.01.

¹H-NMR（200MHz，CDCl₃）δ：1.30（3H，t，J＝7.1HZ），3.87（3H，s），4.25（2H，q，J＝7.1Hz），4.80（2H，s），4.86（2H，s），5.26（2H，s），6.88-6.96（2H，m），7.15-7.19（1H，m），7.25-7.58（6，m）.

IR（KBr）：2974，1754，1713，1663，1555，1531，1493，1479 cm^-1.

实施例11

制备2，4（1H，3H）-二氧代-1-（2-甲氧苄基）-5-{（N-甲基-N-苯基）氨基甲基}-6-苯基噻吩并[2，3-d]嘧啶-3-乙酸乙酯（化合物64）

向实施例10中制备的化合物63（0.72g，1.32mmol）在二甲基甲酰胺（6ml）中的溶液中加入三乙胺（0.28ml，2.0mmol），然后加入N-甲基苯胺（0.22ml，2.03mmol）。混合物在室温下搅拌4小时。浓缩反应混合物，残余物在乙酸乙酯和氯化钠水溶液之间分配。水层用乙酸乙酯提取。合并有机相后，用氯化钠水溶液洗涤，用MgSO₄干燥，真空蒸发。残余物在硅胶上层析，得到白色无定形粉末（0.45g;60%）。

¹H-NMR（200MHz，CDCl₃）δ：1.30（3H t，J＝7.2Hz），2.60（3H，s），3.86（3H，s），4.25（2H，q，J＝7.2Hz），4.72（2H，s），4.84（2H，s），5.26（2H，s），6.65-6.72（3H，m），6.88-6.96（2H，m），7.10-7.37（9H，m）.

IR（KBr）：2966，1752，1711，1667，1601，1560，1531，1493，1473 cm^-1.

实施例12

制备2，4（1H，3H）-二氧代-6-（4-羟基苯甲）-1-（2-甲氧苄基）-5-甲基噻吩并[2，3-d]嘧啶-3-乙酸乙酯（化合物65）。

将乙酸酐（3ml，31.8mmol）加入到实施例4中制备的化合物11（0.60g，1.66mmol）在吡啶（8ml）中的溶液中，混合物在室温下搅拌3小时。浓缩反应混合物，残余物在乙酸乙酯和稀盐酸之间分配。水层用乙酸乙酯提取，有机层合并后用氯化钠水溶液洗涤，用MgSO₄干燥，真空蒸发。残余物在硅胶上层析，得到白色无定形粉末（0.57g）。向其在二甲基甲酰胺（5ml）的溶液中加入碳酸钾（0.38g，2.75mmol）和2-甲氧苄基氯（0.65g，4.15mmol）。混合物在室温下搅拌22小时。浓缩反应混合物，残余物在乙酸乙酯和氯化钠水溶液之间分配。水层用乙酸乙酯提取。有机层合并后用氯化钠水溶液洗涤，用MgSO₄干燥、真空蒸发。残余物在硅胶上层析得到无定形粉末（0.60g）。将无定形粉末溶解在甲醇（18ml）和四氢呋喃（12ml）中。向此溶液中滴加碳酸钾（0.313g，2.26mmol）在水（8ml）中的溶液。混合物在室温下搅拌30分钟，然后在冰浴冷却下，加入1N盐酸（5ml）。混合物用乙酸乙酯萃取。萃取液用氯化钠水溶液洗涤，用MgSO₄干燥，真空蒸发。残余物在乙醚中结晶，得到无色晶体（0.496g;62%）

m.p. 207-208℃

元素分析（%）for C₂₅H₂₄N₂O₆S：

理论值：C 62.49，H 5.03，N 5.83;

实测值：C 62.50，H 5.21，N 5.85.

¹H-NMR（200MHz，CDCl₃）δ：1.32（3H，t，J＝7.1Hz），2.43（3H，s），3.85（3H，s），4.27（2H，q，J＝7.1Hz），4.85（2H，s），5.19（2H，s），5.78（1H，s），6.74-6.91（4H，m），7.05-7.11（3H，m），7.21-7.30（1H，m）.

IR（KBr）：3350，2976，1756，1698，1649，1613，1566，1537，1483 cm^-1.

实施例13

制备2，4（1H，3H）-二氧代-6-（4-羟基苯基）-1-（2-甲硫基苄基）-5-甲基-噻吩并[2，3-d]嘧啶-3-乙酸乙酯（化合物66）

将乙酸酐（3ml，31.8mmol）加入到实施例4中制备的化合物11（0.60g，1.66mmol）在吡啶（8ml）中的溶液中，混合物在室温下搅拌3小时。浓缩反应混合物，残余物在乙酸乙酯和稀盐酸之间分配。水层用乙酸乙酯提取。有机层合并后用氯化钠水溶液洗涤，用MgSO₄干燥，真空蒸发。残余物在硅胶上层析，得到白色无定形物（0.57g）。向其在二甲基甲酰胺（5ml）中的溶液中加入碳酸钾（0.38g，2.75mmol）和2-甲硫基苄基氯（0.65g，4.15mmol）。混合物在室温搅拌22小时。浓缩反应混合物，残余物在乙酸乙酯和氯化钠水溶液之间分配。水层用乙酸乙酯提取。有机提取物合并后用MgSO₄干燥，真空蒸发。残余物在硅胶上层析，得到白色无定形物（0.60g）。将其溶解在甲醇（18ml）和四氢呋喃（12ml）的混合物中，并向其中滴加碳酸钾（0.313g，2.26mmol）在水（8ml）中的溶液。混合物在室温下搅拌30分钟。冰溶冷却下向反应混合物中滴加1N盐酸（5ml），混合物用乙酸乙酯萃取。萃取物用氯化钠水溶液洗涤，用MgSO₄干燥，真空蒸发。残余物在乙醚中结晶，得到无色晶体（4.33g，78%）。

m.p. 177-178℃

元素分析（%）for C₂₅H₂₄N₂O₅S₂·1/10 H₂O：

理论值：C 60.25，H 4.89，N 5.62;

实测值：C 60.09，H 4.66，N 5.57.

¹H-NMR（200MHz，CDCl₃）δ：1.32（3H，t，J＝7.2Hz），2.45（3H，s），2.52（3H，s），4.28（2H，q，J＝7.2Hz），4.87（2H，s），5.28（2H，s），5.75（1H，s），6.78（2H，d，J＝8.6Hz），6.97-7.14（4H，m），7.21-7.34（2H，m）.

IR（KBr）：3346，2978，1752，1700，1651，1613，1591，1564，1535，1481 cm^-1.

实施例14

制备2，4（1H，3H）-二氧代-6-（4-乙氧苯基）-1-（2-甲氧苄基）-5-甲基噻吩[2，3-d]嘧啶-3-乙酸乙酯（化合物67）

在冰浴冷却和氮气流下，将实施例12中制备的化合物65（0.15g，0.31mmol）在二甲基甲酰胺（3ml）中的溶液滴加到氢化钠（14mg，0.35mmol）在二甲基甲酰胺（1ml）中的溶液中。混合物在冰浴冷却下搅拌30分钟。向此混合物中滴加碘乙烷（0.13ml，1.63mmol）。混合物在室温下搅拌2.5小时。浓缩反应混合物，残余物在乙酸乙酯和氯化铵水溶液之间分配。水层用乙酸乙酯萃取。合并萃取液，用氯化钠水溶液洗涤，用MgSO₄干燥，真空蒸发。残余物在乙酸乙酯-己烷中重结晶，得到无色结晶（0.19g;75%）。

m.p. 133-134℃

元素分析（%）for C₂₇H₂₈N₂O₆S：

理论值：C 63.76，H 5.55，N 5.51;

实测值：C 63.48，H 5.62，N 5.37.

¹H-NMR（200MHz，CDCl₃）δ：130（3H，t，J＝7.1Hz），1.43（3H，t，J＝7.0Hz），2.49（3H，s），3.87（3H，s），4.05（2H，q，J＝7.0Hz），4.25（2H，q，J＝7.1H），4.83（2H，s），5.24（2H，s），6.86-6.94（4H，m），7.09-7.14（1H，m），7.22-7.31（3H，m）.

IR（KBr）：2984，1758，1707，1665，1607，1562，1535，1477 cm^-1.

实施例15

用实施例14中相同的方法，从实施例12中制得的化合物开始，制备了表6中所列化合物。

表6

化合物号 R²⁰收率(%) M.p.(℃)

68 2-甲氧苄基 92 142-143

69 2-羟乙基 54 116-117

70 异丙基 72 无定形

71 甲氧甲基 92 96-97

72 甲氧乙基 79 134-135

73 甲硫基甲基 75 74-79

74 乙酸 96 147-148

75 苄基 94 60-70

76 氨基甲酰甲基 98 170-171

77 叔丁氧羰基 100 无定形

78 甲酰胺 97 156-157

实施例16

用实施例14中相同的方法，从实施例13中制得的化合物开始，制备了表7中所列化合物。

表7

化合物号 R²⁰收率(%) M.p.(℃)

79 甲氧甲基 85 无定形

80 甲硫甲基 77 110-111

81 正丙基 84 122-123

82 甲氧基甲氧甲基 89 无定形

83 2-氧代丙基 48 127-128

84 正丁基 85 85-88

85 烯丙基 76 115-117

86 乙酰基 67 无定形

实施例17

制备2，4（1H，3H）-二氧代-6-（N-苯基哌嗪基氨磺酰基）-5-甲基噻吩并[2，3-d]嘧啶-3-乙酸乙酯（化合物87）

向参考例6中制备的化合物（0.54g;2.0mmol）中加入氯磺酸（4ml），混合物在70℃下搅拌一小时。冷却后，将反应混合物倾入冰水中，用乙酸乙酯萃取。萃取的有机相合并后用氯化钠水溶液洗涤，用MgSO₄干燥，真空蒸发。将残余物溶解在二甲基甲酰胺（6ml）中。在冰浴冷却下向此溶液中加入三乙胺（0.61g，4.38mmol）和1-苯基哌嗪（0.34ml，2.23mmol），搅拌混合物一小时。浓缩反应混合物，残余物在乙酸乙酯-四氢呋喃和稀盐酸之间分配。水层用乙酸乙酯-四氢呋喃萃取。提取的有机相合并后用氯化钠水溶液洗涤，用MgSO₄干燥，真空蒸发，得到固体（0.38g）。将固体溶解在乙醇（30）中。向此溶液中加入浓硫酸（0.1ml），混合物加流14小时。冷却后，反应混合物在乙酸乙酯和碳酸氢钠饱和水溶液之间分配。水层用乙酸乙酯提取。合并有机层，用氯化钠水溶液洗涤，用MgSO₄干燥，真空蒸发。残余物在硅胶上层析，得到白色固体（0.135g;14%）。在乙酸乙酯中重结晶，得到无色结晶。

m.p. 259-260℃

元素分析（%）for C₂₁H₂₄N₄O₆S₂：

理论值：C 51.21，H 4.91，N 11.37;

实测值：C 51.20，H 5.03，N 11.26.

¹H-NMR（200MHz，CDCl₃）δ：1.21（3H，t，J＝7.2Hz），2.66（3H，s），3.23（8H，s），4.14（2H q，J＝7.1Hz），4.57（2H，s），6.77-6.94（3H，m），7.16-7.25（2H，m）.

IR（KBr）：3138，1740，1721，1680，1651，1603，1564，1520，1497 cm^-1.

实施例18

制备2，4（1H，3H）-二氧代-6-苯甲酰基-5-甲基-噻吩并[2，3-d]嘧啶-3-乙酸乙酯（化合物88）

在氮气流下向参考例6中制得的化合物（0.54g，2.0mmol）在硝基甲烷（10ml）中的悬浮液中加入氯化铝（1.13g，8.47mmol）和苯甲酰氯（10.48ml，4.14mmol），然后搅拌2小时。混合物在40℃下搅拌6小时。冷却后，将反应混合物倾入冰水中，用乙酸乙酯提取。合并有机相，用氯化钠水溶液洗涤，用MgSO₄干燥，真空蒸发。残余物在乙酸乙酯-乙醚中重结晶，得无色结晶（0.56g;74%）。

m.p. 202-203℃

元素分析（%）for C₁₈H₁₆N₂O₅S：

理论值：C 58.06，H 4.33，N 7.52;

实测值：C 57.80，H 4.40，N 7.37.

¹H-NMR（200MHz，CDCl₃）δ：1.22（3H，t，J＝7.2Hz），2.45（3H，s），4.15（2H，q，J＝7.2Hz），4.59（2H，s），7.51-7.74（5H，m）.

IR（KBr）：3190，1734，1709，1678，1609，1557，1553 cm^-1.

实施例19

制备2，4（1H，3H）-二氧代-6-（4-甲氧基苯甲酰基）-5-甲基噻吩并[2，3-d]嘧啶-3-乙酸乙酯（化合物89）

用4-甲氧基苯甲酰氯（0.515g，3.0mmol）代替苯甲酰氯进行实施例18的相同操作，得无色片状结晶（0.34g;42%）。

m.p. 209-211℃

元素分析（%）for C₁₉H₁₈N₂O₆S·0.1H₂O：

理论值：C 56.46，H 4.54，N 6.93;

实测值：C 56.36，H 4.74，N 6.74.

¹H-NMR（200MHz，CDCl₃）δ：1.31（3H，t，J＝7.1Hz），2.51（3H，s），3.90（3H，s），4.26（2H，q，J＝7.1Hz），4.76（2H，s），6.97（2H，d，J＝8.9Hz），7.77（2H，d，J＝8.9Hz）.

IR（KBr）：3124，2972，1734，1669，1593，1562，1543，1510 cm^-1.

实施例20

制备2，4（1H，3H）-二氧代-1-（2-甲硫基苄基）-6-（4-甲氧基苯甲酰氨基）-5-甲基噻吩[2，3-d]嘧啶-3-乙酸乙酯（化合物90）

向参考例10中制备的化合物（0.60g，1.30mmol）在二氯甲烷（35ml）中的溶液中加入4-二甲氨基吡啶（0.027g;0.23mmol）和三乙胺（0.35ml，2.5mmol）。向此溶液中滴加4-甲氧基苯甲酰氯（0.3ml，2.6mmol）在二氯甲烷（5ml）中的溶液。加完后，混合物在室温搅拌1.5小时。反应混合物在二氯甲烷和氯化钠饱和水溶液之间分配。水层用二氯甲烷提取。合并有机相后用氯化钠水溶液洗涤，用MgSO₄干燥，真空蒸发。残余物在硅胶上层析，得到白色粉末（0.46g）。将此粉末（0.3g，0.52mmol）溶解在甲醇（6ml）和四氢呋喃（6ml）的混合物中。向此混合物中加入碳酸钾（0.15g）在水（3ml）中的溶液，在室温搅拌混合物10分钟。0℃下向反应混合物中加入1N盐酸（1.5ml），混合物用乙酸乙酯提取。合并有机相，用氯化钠水溶液洗涤，用MgSO₄干燥，真空蒸发。残余物在硅胶上层析，得白色粉状结晶（0.20g;70%），在乙酸乙酯-己烷中重结晶。

m.p. 199-200℃

元素分析（%）for C₂₇H₂₇N₃O₆S₂：

理论值：C 58.57，H 4.92，N 7.59;

实测值：C 58.58，H 5.06，N 7.36.

¹H-NMR（200MHz，CDCl₃）δ：1.30（3H，t，J＝7.2Hz），2.53（3H，s），2.58（3H，s），3.88（3H，s），4.25（2H，q，J＝7.2Hz），4.84（2H，s），5.34（2H，s），6.94-7.33（7H，m），7.80（1H，d）.

IR（KBr）：3358，2982，1746，1702，1661，1607，1493 cm^-1.

实施例21

制备2，4（1H，3H）-二氧代-1-（2-甲氧苄基）-6-苯甲酰氨基-5-甲基-噻吩并[2，3-d]嘧啶-3-乙酸乙酯（化合物91）。

用参考例11中所得化合物代替4-甲氧苯甲酰氯，进行实施例20中同样的操作，得到无色粉状结晶（0.06g;53%）。

¹H-NMR（200MHz，CDCl₃）δ：1.29（3H，t，J＝7.1Hz），2.51（3H，s），3.91（3H，s），4.24（2H，q，J＝7.1Hz），4.81（2H，s），5.25（2H，s），6.83-6.91（2H，m），7.05-7.09（1H，m）7.21-7.30（1H，m），7.46-7.59（3H，m），7.82-7.87（2H，m），8.05（1H，s）.

实施例22

制备2，4（1H，3H）-二氧代-1-（2-甲氧苄基）-6-苯基-噻吩并[2，3-d]嘧啶-3-乙酸乙酯（化合物92）

将实施例5中制得的化合物12（0.20g;0.44mmol）溶解在甲醇（6ml）和四氢呋喃（12ml）的混合物中，向此溶液中滴加1N氢氧化钠溶液（2ml，2mmol）。室温搅拌混合物3小时后，在冰浴冷却下向反应混合物中加入1N盐酸（3ml），混合物用乙酸乙酯提取。萃取液用氯化钠水溶液洗涤，用MgSO₄干燥，真空蒸发。残余物用乙醇重结晶，得到浅黄色结晶（0.153g;82%）。

m.p. 272-273℃

元素分析（%）for C₂₂H₁₈N₂O₅S：

理论值：C 62.55，H 4.29，N 6.63;

实测值：C 62.52，H 4.37，N 6.89.

¹H-NMR（200MHz，DMSO-d₆）δ：3.88（3H，s），4.62（2H，s），5.18（2H，s），6.86-6.94（1H，m），7.06-7.10（2H，m），7.28-7.45（4H，m），7.62-7.66（2H，m），7.72（1H，s）.

IR（KBr）：3128，1730，1710，1659，1560，1526，1497，1475 cm^-1.

实施例23

用实施例22中相同的方法，从实施例2、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、19、20、21、30、31、33、34、35和36中制得的化合物开始，制备了表8、9、10、11和12中所列化合物。

表8

化合物号 R³R¹²R¹n 收率 M.p.

(%) (℃)

93 H H 2-(1-甲基吲哚-3-基)乙基 1 60 269-271

94 H H 2-喹啉甲基 1 57 >300

95 H H 3,4-二亚甲二氧苄基 1 67 215-218

96 H H 2-甲氧苄基 2 85 240-241

97 H H " 3 59 186-188

98 H H 环己基甲基 1 79 249-251

99 H H 3-甲氧苄基 1 91 240-243

100 H H 4-甲氧苄基 1 90 209-211

101 H H 2-甲氧苯乙基 1 67 220-221

102 甲基 H 2-甲氧苄基 1 79 252-255

表9

化合物号 R³R¹²R¹n 收率 M.p.

(%) (℃)

103 Me H 2-(1-甲基吲哚-3

-基)-乙基 1 75 254-255

104 * H 2-甲氧苄基 1 90 180-185

105 Me 4-MeO " 1 93 216-218

106 Me 4-MeO 2-(1-甲基吲哚-3 1 88 249-251

-基)乙基

107 Me 4-Nitro 2-甲氧苄基 1 78 >300

108 Me 4-MeO H 1 58 271-273.5

109 Me 4-MeO 丁基 1 96 195-197

110 Me 4-MeO 苄基 1 78 194-194.5

111 Me 4-MeO 2-甲氧苄基 1 87 239-240

112 Me 4-MeO 2-溴苄基 1 86 231-233

（Me：甲基 1;MeO：甲氧基;＊：（N-甲基-N-苯基）氨基甲基

表10

化合物号 R³R¹²R¹n 收率 M.p.

(%) (℃)

113 Me 4-MeO 2-硝基苄基 1 58 190-191

114 Me 4-MeO 2-氰基苄基 1 71 260-262

115 Me 4-MeO 2-甲硫苄基 1 87 185-189

116 Me 4-MeO 2-甲氧苯乙基 1 82 201.5-203

117 Me 4-MeO 1-萘甲基 1 83 209-210.5

118 Me 4-MeO 2-萘甲基 1 68 254-258

119 Me 2-MeO 2-甲氧苄基 1 67 216-217.5

120 Me 4-MeO " 2 84 231-233

121 Me 4-MeO " 3 86 190-191

122 Me 4-MeO 3-甲氧苄基 1 54 181-182

表11

化合物号 R³R¹²R¹n 收率 M.p.

(%) (℃)

123 Me 4-甲氧基 4-甲氧苄基 1 81 193-195

124 Me " 2,3-二甲氧苄基 1 59 192-914

125 Me " 2,5-二甲氧苄基 1 73 176-178

126 Me 4-羟基 2-甲氧苄基 1 69 232-234

127 Me 4-(2-甲氧苄氧基) " 1 82 123-124.5

128 Me 4-乙氧基 " 1 66 227-228

129 Me 4-异丙氧基 " 1 80 220-223

130 Me 4-(2-羟基乙氧基) " 1 67 198-200

131 Me 4-甲氧甲氧基 " 1 88 149-151

132 Me 4-甲氧基 2-羟基苄基 1 64 250-254

133 Me " 2-乙氧苄基 1 88 167-170

134 Me " 2-苄氧苄基 1 62 200-202

135 Me " 2'-氰基联苯基甲基 1 84 214-215

136 Me " 2-甲氧基甲氧苄基 1 76 151-153

137 Me " 2-苯并咪唑基甲基 1 54 >300

138 Me " 2-吡啶甲基 1 83 262-265

139 Me 4-甲氧乙氧基 2-甲氧苄基 1 86 192-193

140 Me 4-甲硫甲氧基 " 1 82 164-168

141 Me 4-羟基甲氧基 " 1 65 212-215

142 Me 4-苄氧基 2-甲氧苄基 1 76 206-207

143 Me 4-氨基甲酰甲氧基 " 1 76 243-248

144 Me 4-甲氧甲氧基 2-甲硫苄基 1 79 142-144

145 Me 4-甲硫甲氧基 " 1 79 152-154

146 Me 4-正丙基 " 1 78 185-188

147 Me 4-甲氧乙氧基甲氧基 " 1 86 150-155

148 Me 4-(2-氧代丙氧基) " 1 78 285-290

149 Me 4-甲氧基 2-甲亚硫酰基苄基 1 67 223-224

150 Me " 2-甲磺酰基苄基 1 96 142-145

151 Me 4-正丁氧基 2-甲硫基苄基 1 72 178-180

152 Me 4-甲氧基 2-氟苄基 1 59 196-197

153 Me 4-烯丙氧基 2-甲硫苄基 1 81 198-200

154 Me 4-甲氧基 2-叔丁氧羰基苄基 1 95 140-144

155 Me " 2-羟苄基 1 86 289-291

156 Me 3,4-亚甲二氧基 2-甲硫苄基 1 94 205-210

157 Me 3,4-二甲氧基 " 1 78 203-205

158 Me 4-甲氧基 2,4-二甲氧基苄基 1 82 203-204

159 Me 4-丁酰基 2-甲硫苄基 1 54 197-199

160 Me 4-乙硫基甲基 " 1 43 286-289

161 Me 4-甲氧基 2-氨基苄基 1 48 209-212

162 Me " 2-甲氨基苄 1 58 204-206

163 * 4-甲氧甲氧基 2-甲氧苄基 1 91 220-225

164 Me 4-羟基 2-甲硫苄基 1 72 244-246

165 Me 4-苯基 " 1 53 270-273

166 Me 4-甲氧乙基 " 1 73 186-187

（Me：甲基，＊：羟甲基

表12

化合物号 R³W R¹²R¹n 收率 M.p.

(%) (℃)

167 Me 磺基哌嗪基 H 2-甲氧苄基 1 58 239-242

168 Me 羰基 H 2-甲硫苄基 1 27 214-216

169 Me " 4-MeO " 1 58 202-206

170 Me 酰胺 4-MeO " 1 83 >300

实施例24

制备2，4（1H，3H）-二氧代-1-（2-甲硫基苄基）-6-（4-氨基苯基）-5-甲基噻吩并[2，3-d]嘧啶-3-乙酸乙酯（化合物171）

向实施例7中制备的化合物36（3.0g，6.48mmol）在乙醇（40ml）中的溶液中加入铁粉（1.2g）和浓盐酸（2.0ml）。混合物回流30分钟。冷却后，混合物经cellite（10g）过滤，将滤液浓缩至干。残余物在乙酸乙酯（100ml）和碳酸氢钠饱和水溶液之间分配。水层用乙酸乙酯提取。合并有机相，用氯化钠水溶液洗涤，用MgSO₄干燥，真空蒸发。残余物用乙酸乙酸-异丙基醚重结晶，得到无色棱晶（2.08g，69%）。

m.p. 172-173℃

元素分析（%）for C₂₅H₂₅N₃O₄S₂：

理论值：C 60.59，H 5.08，N 8.48

实测值：C 60.56，H 4.93，N 8.49.

¹H-NMR（500MHz，CDCl₃）δ：1.30（3H，t，J＝7.0Hz），2.49（3H，s），2.52（3H，s），3.80（2H br s），4.25（2H，q，J＝7.1Hz），4.84（2H，s），5.33（2H，s），6.66（2H，d，J＝8.3Hz），7.02（1H，d，J＝7.7Hz），7.12（2H，d，J＝8.3Hz），7.14（1H，t，J＝8.1Hz），7.25（1H，t，J＝8.1Hz），7.33（1H，d，J＝7.8Hz）.

实施例25

制备2，4（1H，3H）-二氧代-6-苯甲酰基-1-（2-苯基苄基）-6-[4-（1-丙基）苯基]-5-甲基噻吩并[2，3-d]嘧啶-3-乙酸乙酯（化合物172）

向实施例6中制备的化合物（0.3g，0.65mmol）在乙酸（5ml）中的悬浮液中加入2.5-二甲氧基四氢呋喃（0.086g）和乙酸钠（53mg），将混合物回流30分钟。浓缩反应混合物，残余物在乙酸乙酯（50ml）和氯化铵饱和水溶液（30ml）之间分配。水层用乙酸乙酯（30ml）萃取。合并有机相，用氯化钠水溶液洗涤，用MgSO₄干燥，真空蒸发。残余物在硅胶上层析，得到白色固体，在乙醚-乙酸乙酯中重结晶得到无色棱晶（0.28g;80%）。

m.p. 156-158℃

元素分析（%）for C₂₉H₂₇N₃O₄S₂：

理论值：C 63.83，H 4.99，N 7.70;

实测值：C 63.64，H 4.99，N 7.59.

¹H-NMR（500MHz，CDCl₃）δ：1.31（3H，t，J＝7.0Hz），2.53（3H，s），2.60（3H，s），4.26（2H，q，J＝7.1Hz），4.85（2H，s），5.35（2H，s），6.36（2H，s），7.03（1H，d，J＝7.7Hz），7.09（2H，d，J＝8.3Hz），7.15（1H，t，J＝7.6Hz），7.28（1H，t，J＝7.4Hz），7.34（1H，d，J＝7.7Hz），7.35-7.50（4H，m）.

实施例26

制备2，4（1H，3H）-二氧代-1-（2-甲硫苄基）-6-[4-（1-丙基）苯基]-5-甲基噻吩并[2，3-d]嘧啶-3-乙酸（化合物173）

向实施例25制备的化合物在甲醇（10ml）和四氢呋喃（10ml）的混合物中的溶液中加入1N氢氧化钠（2ml），并在室温下搅拌溶液3小时。浓缩反应混合物，残余物在乙酸乙酯（50ml）和1N盐酸（3ml）之间分配。水层用乙酸乙酯（30ml）萃取。合并有机相，用氯化钠水溶液洗涤，用MgSO₄干燥，真空蒸发。残余物在硅胶上层析，得到白色固体，在乙醚-乙酸乙酯中重结晶，得到浅黄色晶体（0.05g，53%）。

m.p. 192-197℃

元素分析（%）for C₂₇H₂₃N₃O₄S₂：

理论值：C 59.54，H 4.81，N 7.72;

实测值：C 56.58，H 4.56，N 7.73.

¹H-NMR（500MHz，CDCl₃）δ：2.52（3H，s），2.55（3H，s），4.59（2H，s），5.21（2H，s），6.28（2H，s），7.00（2H，d，J＝7.6Hz），7.14（1H，t，J＝7.0Hz），7.33（1H，t，J＝7.98Hz），7.40（2H，s），7.46（2H，d，J＝8.3Hz），7.46（2H，d，J＝8.3Hz）.

实施例27

制备2，4（1H，3H）-二氧代-6-（4-丁酰苯基）-5-甲基噻吩并[2，3-d]嘧啶-3-乙酸乙酯（化合物174）

在冰浴冷却和氮气流下，向实施例4中制备的化合物（0.39g，1.10mmol）在硝基苯（10ml）中的溶液中加入氯化铝（0.63g，4.75mmol）。冰浴冷却下搅拌30分钟后，向此溶液中滴加丁酰氯（0.21ml，2.20mmol）。混合物在50℃下搅拌3天。将反应混合物倾入冰水中，形成的混合物在乙酸乙酯和氯化钠水溶液之间分配。水层用乙酸乙酯萃取。合并有机相，用氯化钠水溶液洗涤，用MgSO₄干燥，真空蒸发。残余物在硅胶上层析，得到白色无定形粉末（0.05g，11%）。

¹H-NMR（200MHz，CDCl₃）δ：1.03（3H，t，J＝7.2Hz），1.32（3H，t，J＝7.2Hz），1.77（2H，sext，J＝7.2Hz），2.54（3H，s），2.98（2H，t，J＝7.2Hz），4.27（2H，q，J＝7.2Hz），4.78（2H，s），7.51（2H，d，J＝8.4Hz），8.02（2H，d，J＝8.4Hz），10.20（1H，s）.

FAB-MS m/z：415.1（MH）⁺

实施例28

制备2，4（1H，3H）-二氧代-6-（4-氯甲基苯基）-5-甲基噻吩并[2，3-d]嘧啶-3-乙酸乙酯（化合物175）

在冰浴冷却和氮气流下，向实施例4中制备的化合物（1.60g，4.65mmol）在硝基甲烷（40ml）中的溶液中加入氯化铝（2.60g，19.5mmol）。冰浴冷却下搅拌30分钟后，向此溶液中滴加甲氧基乙酰氯（0.64ml，7.00mmol）。混合物在冰浴冷却下搅拌一小时，再在50℃下搅拌24小时。将反应混合物倾入冰水中，形成的混合物在乙酸乙酯和氯化钠水溶液之间分配。水层用乙酸乙酸提取。合并有机相，用氯化钠水溶液洗涤，用MgSO₄干燥，真空蒸发。残余物在硅胶上层析，得到白色固体（0.74g，41%）。

m.p. 177-179℃

¹H-NMR（200MHz，CDCl₃）δ：1.31（3H，t，J＝7.1Hz），2.50（3H，s），4.26（2H，q，J＝7.1Hz），4.63（2H，s），4.78（2H，s），7.39（2H，d，J＝8.1Hz），7.47（2H，d，J＝8.1Hz），9.92（1H，s）.

IR（KBr）：3242，3004，1738，1659，1560，1526，1493 cm^-1.

实施例29

制备2，4（1H，3H）-二氧代-6-（4-乙硫基甲基苯基）-5-甲基噻吩并[2，3-d]嘧啶-3-乙酸乙酯（化合物176）。

在冰浴冷却下，向实施例28中制备的化合物（0.70g，0.76mmol）在二甲基甲酰胺（10ml）中的溶液中加入碘化钾（0.13g，0.76mmol）、乙硫醇（1.00ml，11.9mmol）和乙基二异丙基胺（0.16ml，0.92mmol）。此溶液在冰浴下搅拌30分钟，在室温下搅拌4小时。浓缩反应混合物，残余物在乙酸乙酯和氯化铵水溶液之间分配。水层用乙酸乙酯提取。合并有机相，用氯化钠水溶液洗涤，用MgSO₄干燥，真空蒸发。残余物在硅胶上层析，得到油状物（0.16g，50%）。

¹H-NMR（200MHz，DMSO-d₆）δ：1.21-1.29（6H，m），2.41-2.52（5H，m），3.73（2H，s），4.21（2H，q，J＝7.1Hz），4.78（2H，s），7.29（2H，q，J＝8.5Hz），7.35（2H，d，J＝8.5Hz），11.18（1H，s）.

FAB-MS m/z：419.1（MH）⁺

实施例30

制备2，4（1H，3H）-二氧代-1-（2-氨基苄基）-5-甲基-6-（4-甲氧苯基）噻吩[2，3-d]嘧啶-3-乙酸乙酯（化合物177）

向实施例7中制备的化合物32（0.60g，1.18mmol）在乙酸（25ml）中的溶液中加入铁粉（0.37g，5.89mmol）。80℃下搅拌混合物2小时。冷却后，浓缩反应混合物，残余物在乙酸乙酯和碳酸氢钠饱和水溶液之间分配。水层用乙酸乙酯萃取。合并有相机，用氯化钠水溶液洗涤，用MgSO₄干燥，真空蒸发。残余物在乙酸乙酯-己烷中重结晶，得到无色棱晶（0.45g，80%）。

m.p. 138-140℃

元素分析（%）for C₂₅H₂₅N₃O₅S·0.2C₄H₈O₂：

理论值：C 62.32，H 5.39，N 8.45;

实测值：C 62.36，H 5.21，N 8.25.

¹H-NMR（200MHz，CDCl₃）δ：1.31（3H，t，J＝7.1Hz），2.47（3H，s），3.85（3H，s），4.25（2H，q，J＝7.1Hz），4.77（2H，br s），4.82（2H，s），5.16（2H，s），6.63-6.73（2H，m），6.94-7.36（6H，m）.

IR（KBr）：1754，1705，1636，1562，1528，1502 cm^-1.

FAB-MS m/z：480（MH⁺）

实施例31

制备2，4（1H，3H）-二氧代-1-[2-（N-甲基氨基）苄基]-5-甲基-6-（4-甲氧苯基）噻吩并[2，3-d]嘧啶-3-乙酸乙酯（化合物178）

冰浴冷却下，向乙酸酐（1.00ml，1.06mmol）中滴加甲酸（0.5ml，13.3mmol），混合物在55℃下搅拌2小时，然后冷却至-20℃，加入实施便30制得的化合物（0.30g，0.62mmol），混合物在-20℃搅拌30分钟，反应混合物真空下浓缩，得到白色粉末（0.45g，80%）。冰浴冷却下向此白色粉末（0.30g，0.59mmol）在四氢呋喃（15ml）中的溶液中滴加二甲亚砜-硼酸（0.25ml，2.50mmol）。混合物在冰浴冷却下搅拌30分钟，然后回流2小时。将反应混合物冷却至0℃，并加入甲醇（1ml），然后室温搅拌一小时。向此溶液中加入氯化氢在甲醇中的溶液（10N，0.50ml），回流混合物30分钟。浓缩反应混合物，残余物在乙酸乙酯和碳酸氢钠饱和水溶液之间分配。水层用乙酸乙酯萃取。合并有机相，用氯化钠水溶液洗，用MgSO₄干燥，真空蒸发。残余物在硅胶上层析，得粗品，其在乙酸乙酯-己烷中重结晶，得到白色晶体（0.16g，55%）。

m.p. 188-189℃

元素分析（%）for C₂₆H₂₇N₃O₅S：

理论值：C 63.27，H 5.51，N 8.51;

实测值：C 63.20，H 5.69，N 8.63.

¹H-NMR（200MHz，CDCl₃）δ：1.32（3H，t，J＝7.1Hz），2.46（3H，s），2.82（3H，s），3.85（3H，s），4.26（2H，q，J＝7.1Hz），4.83（2H，s），5.15（2H，s），6.59-6.69（2H，m），6.95（2H，q，J＝8.8Hz），7.21-7.36（4H，m）.

IR（KBr）：1742，1696，1647，1607，1570，1535 cm^-1.

FAB-MS m/z：494（MH⁺）.

实施例32

制备2，4（1H，3H）-二氧代-5-溴甲基-1-（2-甲氧苄基-6-（4-甲氧甲氧基苯基）-噻吩并[2，3-d]嘧啶-3-乙酸乙酯（化合物179）

将实施例15中制得的化合物68（0.69g，1.32mmol），N-溴琥珀酰亚胺（0.234g，1.32mmol）、α，α＇-叠氮双丁腈（22mg，0.13mmol）和四氯化碳（30ml）的混合物回流15小时。冷却后，滤除不溶物，滤液用氯仿稀释，用氯化钠水溶液洗涤，MgSO₄干燥，真空蒸发。残余物在乙酸乙酯-己烷中重结晶，得到白色晶体（0.93g，82%）。

m.p. 102-105℃

元素分析（%）for C₂₇H₂₇N₂O₇SBr·0.2C₄H₈O₂·0.3H₂O：

理论值：C 53.29，H 4.69，N 4.47;

实测值：C 53.13，H 4.43，N 4.19.

¹H-NMR（200MHz，CDCl₃）δ：1.30（3H，t，J＝7.2Hz），3.50（3H，s），3.88（3H，s），4.25（2H，q，J＝7.2Hz），4.79（2H，s），4.86（2H，s），5.22（2H，s），5.25（2H，s），6.88-7.50（8H，m）.

IR（KBr）：1746，1707，1665，1607，1528，1479 cm^-1.

实施例33

制备2，4（1H，3H）-二氧代-5-乙酰氧基甲基-1-（2-甲氧苯基）-6-（4-甲氧苯基）-噻吩并[2，3-d]嘧啶-3-乙酸乙酯（化合物180）

向实施例32中制备的化合物（0.30g，0.50mmol）在二甲基甲酰胺（10ml）中的溶液中加入碳酸钾（0.10g，0.74mmol）和乙酸钾（0.10g，0.99mmol），混合物在室温下搅拌17小时。浓缩反应混合物，残余物在乙酸乙酯和氯化钠水溶液之间分配。水层用乙酸乙酯萃取。合并有机层，用氯化钠水溶液洗涤，用MgSO₄干燥，真空蒸发。残余物用硅胶层析，得到白色无定形粉末（0.24g，83%）。

¹H-NMR（200MHz，CDCl₃）δ：1.30（3H，t，J＝7.1Hz），2.07（3H，s），3.49（3H，s），3.88（3H，s），4.24（2H，q，J＝7.1Hz），4.83（2H，s），5.20（2H，s），5.24（4H，s），6.88-7.30（8H，m）.

IR（KBr）：1744，1711，1667，1539，1483 cm^-1.

实施例34

制备2，4（1H，3H）-二氧代-6-（4-三氟甲磺酰氧基苯基）-5-甲基-1-（2-甲硫基苯基）-噻吩并[2，3-d]嘧啶-3-乙酸乙酯（化合物181）

在冰浴冷却下，向实施例13制备的化合物63（1.00g，2.01mmol）和乙基二异丙基胺（0.42ml，2，41mmol）在二氯甲烷（20ml）中的溶液中加入三氟甲磺酸酐（0.37ml，2.21mmol）。冰浴冷却下搅拌混合物30分钟，然后室温搅拌4小时。反应混合物在二氯甲烷和氯化钠饱和水溶液之间分配。水层用二氯甲烷提取。合并有机相，用氯化钠水溶液洗涤，用MgSO₄干燥，真空蒸发。残余物在硅胶上层析，得到白色无定形粉末（1.05g，83%）。

¹H-NMR（200MHz，CDCl₃）δ：1.32（3H，t，J＝7.2Hz），2.53（3H，s），2.54（3H，s），4.26（2H，q，J＝7.2Hz），4.85（2H，s），5.35（2H，s），7.01-7.44（8H，m）.

IR（KBr）：1750，1711，1669，1562，1528，1475 cm^-1.

FAB-MS m/z：628.9（MH⁺）

实施例35

制备2，4（1H，3H）-二氧代-6-（4-联苯基）-5-甲基-1-（2-甲硫基苯基）噻吩并[2，3-d]嘧啶-3-乙酸乙酯（化合物182）

在氩气流下，向实施例34制备的化合物（0.40g，0.64mmol）、苯基硼酸（0.08g，0.64mmol）和2M碳酸钠水溶液（1.60ml，3.20mmol）在1，2-二甲氧基乙烷（20ml）中的溶液中加入四（三苯基膦）钯（0.11g，0.10mmol），将混合物回流4小时。反应混合物用乙酸乙酯稀释，滤除不溶物。滤液在乙酸乙酯和氯化钠饱和水溶液之间分配。水层用乙酸乙酯萃取。合并有机相，用氯化钠水溶液洗涤，用MgSO₄干燥，真空蒸发。残余物在硅胶上层析，得粗品，再在乙酸乙酯-己烷中重结晶，得到白色晶体（0.24g，67%）。

m.p. 159-160℃

元素分析（%）for C₃₁H₂₈N₂O₄S₂·0.5C₄H₈O₂·0.35CHCl₃：

理论值：C 62.34，H 5.07，N 4.35;

实测值：C 62.34，H 4.88，N 4.17.

¹H-NMR（200MHz，CDCl₃）δ：1.32（3H，t，J＝7.2Hz），2.55（3H，s），2.59（3H，s），4.27（2H，q，J＝7.2Hz），4.87（2H，s），5.37（2H，s），7.03-7.64（13H，m）.

IR（KBr）：1742，1709，1661，1533，1475，1446 cm^-1.

FAB-MS m/z：557.2（MH⁺）.

实施例36

制备2，4（1H，3H）-二氧代-5-甲基-1-（2-甲硫基苄基）-6-（4-甲氧乙基苯基）噻吩并[2，3-d]嘧啶-3-乙酸乙酯（化合物183）

在氩气流下，向参考例13制备的化合物（0.40g，0.83mmol）、4-甲氧苯基硼酸（0.22g，1.24mmol）和2M碳酸钠水溶液（2.10ml，4.20mmol）在1，2-二甲氧基乙烷（20ml）中的溶液中加入四（三苯基膦）钯（0.14g，0.13mmol），将混合物回流5小时。反应混合物用乙酸乙酯稀释，滤除不溶物。滤液在乙酸乙酯和氯化钠饱和水溶液之间分配。水层用乙酸乙酯萃取。合并有机相，用氯化钠水溶液洗涤，用MgSO₄干燥，真空蒸发。残余物在硅胶上层析，得粗品，再在乙酸乙酯-己烷中重结晶，得到白色晶体（0.19g，43%）。

m.p. 126-128℃

元素分析（%）for C₂₈H₃₀N₂O₅S₂：

理论值：C 62.43，H 5.61，N 5.20;

实测值：C 62.32，H 5.39，N 5.09.

¹H-NMR（200MHz，CDCl₃）δ：1.30（3H，t，J＝7.2Hz），2.51（3H，s），2.54（3H，s），2.89（2H，t，J＝6.9Hz），3.35（3H，s），3.61（2H，t，J＝6.9Hz），4.26（2H，q，J＝7.2Hz），4.86（2H，s），5.34（2H，s），7.05-7.40（8H，m）.

IR（KBr）：1754，1709，1663，1477 cm^-1.

FAB-MS m/z：539.2（MH⁺）.

实施例37

制备2，4（1H，3H）-二氧代-6-噻吩基-5-甲基-1-（2-甲硫基苯基）噻吩并[2，3-d]嘧啶-3-乙酸乙酯（化合物184）

用3-噻吩硼酸（0.32g，1.24mmol）代替4-甲氧苯基硼酸，使用参考例13中制备的化合物（0.40g，0.83mmol）、2M碳酸钠水溶液（2.1ml，4.2mmol）、二甲氧基乙烷（20ml）和四（三苯基膦）钯（0.20g，0.17mmol）进行实施例36中相同操作，得化合物184（产率：45%）。

m.p. 119-121℃

¹H-NMR（200MHz，CDCl₃）δ：1.31（3H，t，J＝7.1Hz），2.54（3H，s），2.57（3H，s），4.25（2H，q，J＝7.1Hz），4.85（2H，s），5.34（2H，s），7.00-7.35（2H，m）.

IR（KBr）：1709，1665，1541，1477 cm^-1.

FAB-MS m/z：494（MH⁺）.

实施例38

制备2，4（1H，4.3H）-二氧代-6-[4-（3-噻吩基）苯基]-5-甲基-1-（2-甲硫基苄基）噻吩并[2，3-d]嘧啶-3-乙酸乙酯（化合物185）

用3-噻吩硼酸（0.14g，1.09mmol）代替苯基硼酸，使用实施例34制备的化合物（0.33g，0.53mmol）、2M碳酸钠水溶液（1.3ml，2.6mmol）、二甲氧基乙烷（15ml）和四（三苯膦）钯（0.11g，0.10mmol）进行实施例35中相同的操作，得到化合物185（收率：50%）

m.p. 166-168℃

元素分析（%）for C₂₉H₂₆N₂O₄S₃·0.5H₂O：

理论值：C 61.47，H 4.79，N 4.89;

实测值：C 61.82，H 4.81，N 4.60.

¹H-NMR（200MHz，CDCl₃）δ：1.31（3H，t，J＝7.1Hz），2.54（3H，s），2.57（3H，s），4.26（2H，q，J＝7.1Hz），4.86（2H，s），5.36（2H，s），7.01-7.64（11H，m）.

IR（KBr）：1736，1707，1665，1475 cm^-1.

实施例39

制备2，4（1H，3H）-二氧代-5-甲基-1-（2-甲硫基苄基）-6-（4-丙酰氨基苯基）-噻吩并[2，3-d]嘧啶-3-乙酸乙酯（化合物186）

向实施例24中制备的化合物（0.30g，0.61mmol）在二氯甲烷（10ml）中的溶液中加入三乙胺（0.10g，0.73mmol），然后加入N，N-二甲基氨基吡啶（15mg，0.12mmol）和丙酰氯（0.11ml，1.72mmol）。室温下搅拌混合物一小时。反应混合物在NH₄CL饱和水溶液和二氯甲烷之间分配。水层用二氯甲烷萃取。合并有机相，用氯化钠水溶液洗涤，用MgSO₄干燥。真空蒸发。残余物在硅胶上层析，得无色结晶（0.25g，74%）。

m.p. 218-219℃

元素分析（%）for C₂₆H₂₅N₃O₅S₂·0.5H₂O：

理论值：C 58.63，H 4.92，N 7.89;

实测值：C 58.71，H 4.90，N 7.79.

¹H-NMR（200MHz，CDCl₃）δ：1.22-1.34（6H，m），2.41（2H，q，J＝7.5Hz），2.51（3H，s），2.53（3H，s），4.26（2H，q，J＝7.1Hz），4.85（2H，s），5.32（2H，s），7.00-7.56（8H，m）.

IR（KBr）：1707，1661，1537，1479 cm^-1.

实施例40

制备2，4（1H，3H）-二氧代-6-噻吩基-5-甲基-1-（2-甲硫基苄基）-噻吩并[2，3-d]嘧啶-3-乙酸乙酯（化合物187）

用实施例37中制备的化合物（0.10g，0.21mmol）、1N氢氧化钠水溶液（1.03，1.03mmol）、四氢呋喃（3ml）和乙醇（3ml）进行实施例22中相同的操作，得到化合物187（收率：59%）。

m.p. 255-257℃

元素分析（%）for C₂₁H₁₈N₂O₄S₃：

理论值：C 55.00，H 3.96，N 6.11;

实测值：C 54.78，H 3.87，N 6.14.

¹H-NMR（200MHz，CDCl₃）δ：2.53（3H，s），2.58（3H，s），4.64（2H，s），6.98（1H，d，J＝7.5Hz），7.15（1H，t，J＝7.5HZ），7.23-7.45（3H，m），7.67-7.71（2H，m）.

IR（KBr）：1696，1659，1635，1477 cm^-1.

实施例41

用100mg实施例23制备的化合物131、165mg乳糖、25g玉米淀粉、4mg聚乙烯醇和1mg硬脂酸镁，用常规方法制备片剂。

实施例42

将实施例23制备的化合物131（5g）溶解在注射用蒸馏水中，使总体积为100ml。用0.22微米的滤膜（由日本Sumitomo Electric或德国Saltorius生产），将溶液进行无菌过滤。将每2ml滤液置于一洗净并消毒的管形瓶中，按常规方法冷冻干燥，制备冷干注射剂，100mg/管。

实施例43

用100mg实施例23制备的化合物115、165mg乳糖、25g玉米淀粉、4mg聚乙烯醇和1mg硬脂酸镁，用常规方法制备片剂。

实施例44

将实施例23制备的化合物115（5g）溶解在注射用蒸馏水，使总体积为100ml。用0.22微米的滤膜（由日本Sumitomo Electric或德国Saltorius生产），将溶液进行无菌过滤。将每2ml滤液量置于一洗净并消毒的管形瓶中，按常规方法冷冻干燥，制备冷干注射剂，100ml/管。

实施例45

用100mg实施例23制备的化合物144、165mg乳糖、25mg玉米淀粉、4mg聚乙烯醇和1mg硬酯酸镁，按常规方法制备片剂。

实施例46

将实施例23制备的化合物144（5g）溶解在注射用蒸馏水中，使总体积为100ml。用0.22微米的滤膜（由日本Sumitomo Electric或德国Saltorius生产），将溶液进行无菌过滤。将每2ml滤液置于一洗净并消毒的管形瓶中，按常规方法冷冻干燥，制备冷干注射剂，100mg/管。

实施例47

用100mg实施例23制备的化合物145、165mg乳糖、25mg玉米淀粉、4mg聚乙烯醇和1mg硬酯酸镁，按常规方法制备片剂。

实施例48

将实施例23制备的化合物145（5g）溶解在注射用蒸馏水中，使总体积为100ml。用0.22微米的滤膜（由日本Sumitomo Electric或德国Saltorius生产），将溶液进行无菌过滤。将每2ml滤液置于一洗净并消毒的管形瓶中，按常规方法冷冻干燥，制备冷干注射剂，100mg/管。

试验实施例1

内皮素受体测定

将用于内皮素A受体测定的猪心室肌膜片段和用于内皮素-B受体测定的牛脑膜片段用试验缓冲液[包括20mM的Tris-HCL，2mM的EGTA（乙二醇双（2-氨基乙基醚）四乙酸）、5mM的乙酸镁、0.1%的BSA（牛血清白蛋白）、0.03%的NaN₃、0.5mM的PMSF（苯基甲磺酰氟）、20μg/ml的亮肽素（Leupeptin）、4μg/ml的E-64（日本Peptine Instistute生产）和1μg/ml的胃酶抑素（Pepstatin）;pH7.2]分别稀释到12μg/ml和180μg/ml。

向100μl每种稀释液中加入5nM[¹²⁵I]内皮素-1（2μl）。加入样品溶液（3μl），混合物在25℃培育60分钟。为了测定最大结合率（B₀）和非特异性结合率（NSB），向一份中加入二甲亚砜（3ml）或内皮素在二甲亚砜中的10-5M的溶液（3μl），并温育。加入用0.05%的CHAPS（3-[（3-牛胆酰氨基丙基）二甲胺合]-1-丙磺酸盐，（1.5ml）补充的试验缓冲液，将混合物滤过GF/F玻璃纤维滤器（商品名为Whatman，英国），然后用1.5ml同一缓冲液洗涤。滤清的放射活性用γ-计数器计数，按式（1）进行计算，从而测定最大结合百分数（以下称为PMB）。另外，也计算了PMB为50%时的浓度（IC₅₀）。本发明化合物的IC₅₀值示于下表13中。

表13

化合物号	IC₅₀（μmol）
			内皮素－A受体（猪）	内皮素－B受体（牛）
	化合物 102化合物 99	1.312			7.539

试验实施例2

内皮素测定试验

按如下制备内皮素（ET）受体。将其中表达了人内皮素-A（ETA）变体的昆虫细胞（Sf9）膜片段和表达了人内皮素-B（ETB）受体的昆虫细胞（Sf9）膜片段用试验缓冲液[包括20mM的Tris-HCL，2mM的EGTA（乙二醇双（2-氨基乙基醚）四乙酸）、5mM的乙酸镁、0.1%的BSA（牛血清白蛋白）、0.03%的NaN₃、0.5mM的PMSF（苯基甲磺酰氟）、20μg/ml的亮肽素、4μg/ml的E-64（日本Peptine Instistute生产）和1μg/ml的胃酶抑素;pH7.2]分别稀释到1.4μg/ml和0.7μg/ml。各取出100μl，并加入2μl5nm[¹²⁵I]内皮素-1。向其中加入样品的二甲亚砜溶液（3μl），混合物在25℃培育60分钟。另外为了测定最大结合率（B₀）和非特异性结合率（NSB），向一份中加入3ml二甲亚砜或3ml内皮素-1在二甲亚砜中的10-5M的溶液，并温育。加入用0.05%的CHAPS（3-[（3-牛胆酰氨基丙基）二-甲胺合]-1-丙磺酸盐，1.5ml）悬浮的试验缓冲液，将混合物滤过GF/F玻璃纤维滤器（商品名为Whatman，英国），然后用1.5ml同一缓冲液洗涤。滤清的放射活性用γ-计数器计数，按试验实施例1中描述的相同方法测定PMB。计算PMB＝50%时的值，用IC₅₀表示。本发明化合物的IC₅₀值示于下表14中。

含本发明的噻吩并嘧啶衍生物的拮抗内皮素的药物组合物可有利地用于预防或治疗急性肾机能不全、心肌梗塞、肝机能不全、心绞痛、脑梗塞形成、蛛网膜下出血（SAH）、高血压、肾机能不全、哮喘、绞痛变体、Raynand氏综合症、肺性高血压、手术中风、慢性心机能不全、心肥大、动脉硬化、偏头痛等，另外还可治疗或预防由手术或移植、微循环不足引起的器官机能减退（如肝等）、另外还预防经皮透照冠状血管形成术（PTCA）后的restenosis。

Claims

1、拮抗内皮素的药物组合物，其包括式(Ⅰ)化合物或其盐和药用载体、赋形剂或稀释剂，

其中每个R¹和R²为氢或任意取代的烃残基；R³为氢或通过碳原子或氮原子键合的基团；R⁴为任意取代的烃残基；W为一化学键或连结基团；n为1-3的整数。

2、权利要求1的组合物，其中组合是用于预防或治疗急性肾机能不全、心肌梗塞和/或肝机能不全的组合物。

3、权利要求1的组合物，其中组合物是用于预防或治疗由手术或移植引起的器官机能减退的组合物。

4、权利要求3的组合物，其中器官为肝。

5、权利要求1的组合物，其中R¹为氢或任意取代的烷基。

6、权利要求1的组合物，其中R¹为下式基团：

-（CH₂）_mQ

其中m为0-3的整数，Q为任意取代的芳基、任意取代的环烷基或任意取代的杂环基。

7、权利要求6的组合物，其中Q为可被选自（i）卤原子、（ii）硝基、（iii）氰基、（iv）氨基、（v）任意取代的羧基、（vi）低级亚烷基二氧基、（vii）式-A-R⁵基团（其中A为一化学键或连结基团;R⁵为低级烷基）的基团取代的芳基。

8、权利要求7的组合物，其中芳基为苯基。

9、权利要求1的组合物，其中R²为氢或烷基。

10、权利要求1的组合物，其中R²为氢。

11、权利要求1的组合物，其中R³为氢、烷基、可被烷基或芳基单取代或双取代的氨基。

12、权利要求1的组合物，其中R³为低级烷基。

13、权利要求1的组合物，其中R⁴为任意取代的芳基、任意取代的环烷基、任意取代的杂环基或可被烷基酯化的羧基。

14、权利要求1的组合物，其中R⁴为芳基。

15、权利要求1的组合物，其中连结基团为式-SO_f-的基团（其中f为0-2的整数）;式-CO-基团;或式-CONR⁶-基团（其中R⁶为低级烷基）。

16、权利要求1的组合物，其中化合物选自以下各种：

2，4（1H，3H）-二氧代-5-甲基-6-[4-甲氧苯基]-1-（2-甲硫基苄基）噻吩并[2，3-d]嘧啶-3-乙酸，

2，4（1H，3H）-二氧代-5-甲基-6-（4-甲氧甲氧基苯基-1-（2-甲硫基苄基）噻吩并[2，3-d]嘧啶-3-乙酸，

2，4（1H，3H）-二氧代-5-甲基-6-（4-甲硫基甲氧基苯基）-1-（2-甲硫基苄基）噻吩并[2，3-d]嘧啶-3-乙酸，2，4（1H，3H）-二氧代-5-甲基-6-（4-甲硫基甲氧基苯基）-1-（2-甲氧苄基）噻吩并[2，3-d]嘧啶-3-乙酸，

2，4（1H，3H）-二氧代-5-甲基-1-（2-甲硫基苄基）-6-[4-（2-氧代丙氧基）苯基]噻吩并[2，3-d]嘧啶-3-乙酸。

17、式（Ⅰ′）的化合物或其盐：

其中R′为氢、低级烷基或式-（CH₂）_mQ′的基团，其中m为0-3的整数，Q′为可被（i）卤原子、（ii）硝基、（iii）氰基、（iv）氨基、（v）任意取代的羧基、（vi）低级亚烷基二氧基或（vii）式-A-R⁶（其中A为一化学键或连结基团，R⁶为低级烷基）取代的芳基、任意取代的环烷基或任意取代的杂环基;

R²为氢或任意取代的烃残基;

R³为氢或通过碳原子或氮原子键合的基团;

R⁴′为芳基、环烷基、杂环基或式-COOR⁵′基团（其中R⁵′为氢或低级烷基），其中每个都可被取代;

W为一化学键或连结基团及n为1-3的整数。

18、权利要求17的化合物，其中Q′为式-A-R⁵的基团，其中A为化学键或连结基团;R⁵为低级烷基。

19、权利要求17的化合物，其中R¹′为可被式-A-R⁵基团（其中A为化学键或连结基团;R⁵为低级烷基）取代的苄基。

20、权利要求17的化合物，其中R²为氢或烷基。

21、权利要求17的化合物，其中R²为氢。

22、权利要求17的化合物，其中R³为氢、烷基或可被烷基或芳基单取代或双取代的氨基。

23、权利要求17的化合物，其中R³为低级烷基。

24、权利要求17的化合物，其中R⁴′为任意取代的芳基。

25、权利要求17的化合物，其中R⁴′为可被烷氧基或烷硫基取代的芳基。

26、权利要求17的化合物，其中连结基团为式-SO_f-的基团（其中f为0-2的整数）;式-CO-基团，或式-CONR⁶-基团（其中R⁶为低级烷基）。

27、权利要求17的化合物，其中化合物选自以下各种：

28、其中R¹′为氢和R²为任意取代的烃残基的权利要求17的化合物的制备方法，其包括将式（Ⅱ）的化合物或其盐与碱反应：

其中R²′为任意取代的烃残基;R³为氢、通过氧原子或氮原子键合的基团;R⁴′为芳基、环烷基、杂环基或式-COOR⁵′基团（其中R⁵′为氢或低级烷基），其中每个都可被取代;R⁷为氢或任意取代的烃残基;W为化学键或连结基团;n为1-3的整数。

29、其中R¹′为氢和R²为任意取代的烃残基的权利要求17的化合物的制备方法，其包括将式（Ⅲ）的化合物或其盐与碱反应，将生成的产物进行亲电取代反应：

其中R²′为任意取代的烃残基;R³为氢、通过氧原子或氮原子键合的基团;R⁴′为芳基、环烷基、杂环基或式-COOR⁵′基团（其中R⁵′为氢或低级烷基），其中每个都可被取代，R⁷为氢或任意取代的烃残基;W为化学键或连结基团;n为1-3的整数。

30、权利要求17的化合物的制备方法，其中R¹′为低级烷基或式-（CH₂）_mQ′基团，其中m为0-3的整数，Q′为可被（i）卤原子、（ii）硝基、（iii）氰基、（iv）氨基、（v）任意取代的羧基、（vi）低级亚烷基二氧基或（vii）式-A-R⁶基团（其中A为化学键或连结基团，R⁶为低级烷基）取代的芳基、任意取代的环烷基或任意取代的杂环基;及R²为任意取代的烃残基，

其包括将式（Ⅳ）的化合物或其盐：

与式（Ⅴ）的化合物或其盐反应：

其中R¹″为低级烷基或式-（CH₂）_mQ′基团，其中m为0-3的整数，Q′为可被（i）卤原子、（ii）硝基、（iii）氰基、（iv）氨基、（v）任意取代的羧基、（vi）低级亚烷基二氧基或（vii）式-A-R⁶基团（其中A为化学键或连结基团，R⁶为低级烷基）取代的芳基、任意取代的环烷基或任意取代的杂环基;X为卤原子。

31、如权利要求1所定义的化合物的用途，用于制备在患有内皮素相关的疾病的哺乳动物上有拮抗内皮素活性的药物组合物。

32、权利要求31的用途，其中内皮素相关疾病选自肾机能不全、心肌梗塞和/或肝机能不全。

33、权利要求31的用途，其中内皮素相关疾病是由手术或移植引起的器官机能减退。

34、权利要求33的用途，其中器官为肝。