CN110604817A - 一种转铁蛋白-叶酸多重修饰的双靶向介孔二氧化硅包覆金纳米棒的制备方法 - Google Patents

一种转铁蛋白-叶酸多重修饰的双靶向介孔二氧化硅包覆金纳米棒的制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN110604817A
CN110604817A CN201910948065.1A CN201910948065A CN110604817A CN 110604817 A CN110604817 A CN 110604817A CN 201910948065 A CN201910948065 A CN 201910948065A CN 110604817 A CN110604817 A CN 110604817A
Authority
CN
China
Prior art keywords
solution
transferrin
stirring
reaction
aunr
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201910948065.1A
Other languages
English (en)
Inventor
王秉
徐城锋
王翠
蒋鹏
胡智文
彭志勤
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Zhejiang University of Technology ZJUT
Zhejiang Sci Tech University ZSTU
Zhejiang University of Science and Technology ZUST
Original Assignee
Zhejiang University of Technology ZJUT
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Zhejiang University of Technology ZJUT filed Critical Zhejiang University of Technology ZJUT
Priority to CN201910948065.1A priority Critical patent/CN110604817A/zh
Publication of CN110604817A publication Critical patent/CN110604817A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K41/00—Medicinal preparations obtained by treating materials with wave energy or particle radiation ; Therapies using these preparations
    • A61K41/0052—Thermotherapy; Hyperthermia; Magnetic induction; Induction heating therapy
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/54—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound
    • A61K47/545—Heterocyclic compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/69—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit
    • A61K47/6949—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit inclusion complexes, e.g. clathrates, cavitates or fullerenes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents

Abstract

本发明涉及医用材料领域，公开了一种转铁蛋白‑叶酸多重修饰的双靶向介孔二氧化硅包覆金纳米棒的制备方法，本发明首先配制种子液和生长液反应得到金纳米棒；通过金纳米棒与TEOS试剂反应得到介孔二氧化硅包覆的金纳米棒；加入APTES在AuNR@SiO2修饰上‑NH2；通过酰胺化反应分别将叶酸和转铁蛋白修饰在AuNR@SiO2上面，得到一种转铁蛋白‑叶酸多重修饰的双靶向介孔二氧化硅包覆金纳米棒。

Description

一种转铁蛋白-叶酸多重修饰的双靶向介孔二氧化硅包覆金 纳米棒的制备方法
技术领域
本发明涉及医用材料领域，尤其涉及一种转铁蛋白-叶酸多重修饰的双靶向介孔二氧化硅包覆金纳米棒的制备方法。
背景技术
在过去的20年里，纳米科技取得了很多重要突破，开发新型的智能纳米材料有望开辟医学诊疗的新途径。在医学肿瘤的治疗过程中，由于临床使用的化疗药物无法区分癌细胞和正常细胞，因此在杀灭癌细胞的同时不可避免地带来全身毒副作用，而且多期化疗之后药物对肿瘤的杀伤性效果变弱。为了解决这一问题，化学家和材料学家致力于研发多功能纳米药物载体，将化疗药物负载于纳米载体上，有效地运输到肿瘤部位精确地打击肿瘤细胞。目前纳米载体的研发主要集中在保证化疗药物准确有效地运输到肿瘤部位，而不会提前泄露。针对这一问题，研究人员在纳米载体表面化学修饰靶向性分子，以保证其精确识别肿瘤细胞；此外还设计开发了刺激-响应的药物控释体系，修饰堵孔试剂充当“门卫”，只有在肿瘤病理条件下(如酸性环境、还原性环境、过高的酶活力等)才会打开释放药物分子。开发新型多功能纳米材料，将化疗药物载体、热疗试剂、光动力学治疗试剂及成像造影剂整合在同一种材料上也是目前研发的热点。
其中，介孔二氧化硅包覆金纳米棒作为一种新型的纳米材料，同时具有介孔二氧化硅和金纳米棒的优势，是一种理想化的载体：介孔二氧化硅易制备，易修饰，生物相容性好，载药量大，在药物载体的研发中被广泛使用；金纳米棒表面等离子体共振峰在可见(550nm)到近红外(1550nm)范围内连续可调，其对特定波长光的散射和吸收使其可以作为优良的成像造影剂和光热转换剂，受到了研究者的广泛关注和深入研究。将靶向试剂、“门卫”分子和多功能材料整合为一体是一个挑战性的课题，同时也具有重要意义。
发明内容
为了解决上述技术问题，本发明提供了一种转铁蛋白-叶酸多重修饰的双靶向介孔二氧化硅包覆金纳米棒的制备方法，本发明首先配制种子液和生长液反应得到金纳米棒；通过金纳米棒与TEOS试剂反应得到介孔二氧化硅包覆的金纳米棒，记为AuNR@SiO2；加入APTES在AuNR@SiO2修饰上-NH2，记为AuNR@SiO2-NH2；通过酰胺化反应分别将叶酸和转铁蛋白修饰在AuNR@SiO2上面，得到一种转铁蛋白-叶酸多重修饰的双靶向介孔二氧化硅包覆金纳米棒，记为AuNR@SiO2-FA-Tf。
本发明的具体技术方案为：一种转铁蛋白-叶酸多重修饰的双靶向介孔二氧化硅包覆金纳米棒的制备方法，包括以下步骤：
1)将10-20mL 0.08-0.12mol/L的CTAB与250-500μL 8-12mmol/L HAuCl4混合，加去水至总体积为9.4-18.8mL。
2)然后将0.008-0.012mol/L 0.6-1.2mL冰浴后的NaBH4水溶液加到步骤1)所得混合液中形成纳米金种子。
3)用100-200mL 0.08-0.12mol/L CTAB，5-10mL0.08-0.12mol/L HAuCl4，2.2-4.4mL 8-12mmol/L AgNO3，0.8-1.6mL 0.8-1.2mol/L HCl以及700-1400μL 0.075-0.080mol/L抗坏血酸制成金纳米棒生长液。
4)向步骤3)所得金纳米棒生长液中加入240-480μL纳米金种子进行反应。
5)将合成的金纳米棒进行离心清洗后，向沉淀物中加水稀释到20-40mL。
6)在搅拌条件下加入200-400μL 0.08-0.12mol/L NaOH溶液，随后，将3份60-120μL 18-22wt％TEOS试剂用甲醇稀释，每隔20-30min加入，加入时搅拌，在26-28℃下反应10-12h，得到介孔二氧化硅包覆的金纳米棒，记为AuNR@SiO2。
7)在上述反应完成后加入含10-20μL APTES的100-200μL甲醇溶液，反应5-7h后离心处理，获得红色沉淀；将红色沉淀置于含0.15-0.25mL HCl的20-40mL甲醇溶液中回流加热1-3h，然后用热甲醇反复清洗沉淀物，得到去除CTAB的产物AuNR@SiO2-NH2。
在步骤7)中，加入APTES的作用是在包覆金纳米棒的介孔二氧化硅上修饰上-NH2，方便与叶酸、转铁蛋白酰胺化反应，从而修饰到介孔二氧化硅表面。
8)称取60-80mg FA溶于10-15mL DMSO，35-40℃水浴下搅拌30-60min使其完全溶解，加入30-35mg EDC，35-40mg NHS，35-40℃水浴下搅拌2-4h进行活化，得到活化的FA溶液。
步骤8)中加入EDC和NHS的作用是活化叶酸上的羧基。
9)向活化的FA溶液中加入AuNR@SiO2-NH2，继续反应12-24h后，离心，经DMSO洗涤后用水洗涤，最后用无水乙醇洗涤后干燥，得到AuNR@SiO2-FA。
步骤9)中，通过叶酸上活化的羧基与介孔二氧化硅表面的氨基反应，成功地把叶酸修饰在包覆有金纳米棒的介孔二氧化硅上。
10)称取50-70mg转铁蛋白溶于50-70mL PBS溶液中，制成转铁蛋白溶液后备用。
11)向转铁蛋白溶液中加入370-390mg EDC，140-160mg NHS超声使其完全溶解后于室温搅拌活化2-4h，得到活化的转铁蛋白溶液。
12)在搅拌下将AuNR@SiO2-FA加入到活化的转铁蛋白溶液中，室温下搅拌24-48h反应。
通过步骤12)，通过二硫键的连接，成功地把转铁蛋白修饰在介孔二氧化硅上。
13)反应完成后，将反应液置于透析袋中，透析介质为水，每隔6-12h更换新鲜透析介质，透析60-72h，冷冻干燥，最终得到转铁蛋白-叶酸多重修饰的双靶向介孔二氧化硅包覆金纳米棒。
通过步骤13)，得到了纯净的具有双重靶向性的AuNR@SiO2-FA-Tf。
作为优选，步骤2)中，所得纳米金种子在2-5h内使用。
作为优选，步骤5)中，离心转速为9000-10000r/min，离心20-30min。
在步骤5)中，在上述条件下进行离心清洗，使得合成的金纳米棒纯净无杂质。
作为优选，步骤9)中，干燥温度为50-60℃。
作为优选，步骤4)中，反应过程保持在25-35℃恒温状态。
作为优选，步骤10)中，所述PBS溶液的pH＝7.0-7.5。
作为优选，步骤11)中，超声时间为25-35s。
作为优选，步骤13)中，所述透析袋的规格为Mw 8000-14000。
与现有技术对比，本发明的有益效果是：
1.在步骤5)中，通过离心清洗确保制得的金纳米棒纯净，以保证后续实验的有效进行。
2.在步骤6)中，介孔二氧化硅包覆金纳米棒作为一种新型的纳米材料，同时具有介孔二氧化硅和金纳米棒的优势，是一种理想化的载体：介孔二氧化硅易制备，易修饰，生物相容性好，载药量大；金纳米棒表面等离子体共振峰在可见到近红外范围内连续可调，其对特定波长光的散射和吸收使其可以作为优良的成像造影剂和光热转换剂。
3.在步骤9)中，叶酸和叶酸受体具有极强的亲和力，两者经特异性结合后通过内吞作用进入肿瘤细胞，同样的经叶酸修饰后的复合物也可以经过内吞作用进入肿瘤细胞，利于将亲水性药物运送至细胞内，因此纳米材料经叶酸修饰并装载抗肿瘤药物是向肿瘤细胞输送药物的良好方法。
4.在步骤12)中，转铁蛋白受体在癌细胞表面高表达于正常细胞，如转铁蛋白受体在乳腺癌细胞表面的表达是其在正常细胞表面的4～5倍，而转铁蛋白与转铁蛋白受体的亲和力是正常细胞的10～100倍。转铁蛋白包覆于介孔二氧化硅表面，既可以防止药物从孔中的泄露，同时由于癌细胞上转铁蛋白受体的高度表达，也起到了定向运输的作用
5.发明通过制备一种具有双重靶向性的可负载抗癌药物的纳米颗粒，可实现高效的肿瘤热疗和靶向为一体的治疗手段，增加药物的稳定性，实现主动靶向性，增加与受体的结合能力，从而大大提升对癌细胞的治疗效果。
6.发明通过构建一种安全，无毒性，并且能够高效运输药物的药物载体，能够提高药物的稳定性，便于贮存。
附图说明
图1为实施例1过程中所合成的金纳米棒TEM图；
图2为实施例2过程中所合成的金纳米棒TEM图；
图3为实施例3过程中所合成的金纳米棒TEM图。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步的描述。
实施例1
1)将10mL 0.1mol/L的CTAB与250μL 10mmol/LHAuCl4混合，加去离子水至总体积为9.4mL；
2)然后将0.6mL冰浴后的NaBH4水溶液(0.01mol/L)加到上述混合液中形成纳米金种子(在2-5h内使用)；
3)用100mL 0.1mol/L CTAB，5mL 0.01mol/L HAuCl4，2.2mL 10mmol/LAgNO3，0.8mL1mol/L HCl以及700μL 0.0788mol/L抗坏血酸制成金纳米棒的生长液；
4)加入240μL上述纳米金种子后开始反应，实验过程保持在30℃恒温状态；
5)将合成的金纳米棒进行离心清洗(每管40mL，转速9500r/min，25min)后，向沉淀物中加水稀释到20mL；
6)在搅拌条件下加入200μL 0.1mol/LNaOH溶液，随后，将3份60μL 20％TEOS试剂(用甲醇)稀释，每隔20min加入，加入时轻轻搅拌，在26℃下反应10h，即得到介孔二氧化硅包覆的金纳米棒，记为AuNR@SiO2；
7)在上述反应完成后加入含10μL APTES的100μL甲醇溶液，反应5h后离心处理，获得红色沉淀。将红色沉淀置于20mL甲醇溶液中(含0.2mL的HCl)回流加热1h，然后用热甲醇反复清洗沉淀物，即可得到去除了CTAB的产物AuNR@SiO2-NH2；
8)称取60mg FA溶于10mL DMSO，37℃水浴下搅拌30min使其完全溶解，加入34mgEDC，38mgNHS，37℃水浴下搅拌2h进行活化；
9)向活化过的FA溶液中加入步骤7)制备好的AuNR@SiO2-NH2，继续反应12h后回收样品，离心，经大量DMSO洗涤后用去离子水洗涤两次，最后用无水乙醇洗涤后50℃干燥，得到AuNR@SiO2-FA；
10)称取50mg Tf溶于50mL pH＝7.40PBS溶液中，使成1mg/mL的溶液备用；
11)向步骤10)所制备的溶液中加入380mg EDC，150mgNHS超声30s使其完全溶解后于室温搅拌2h活化；
12)在搅拌下将步骤9)制得的AuNR@SiO2-FA加入到活化后的转铁蛋白溶液中，室温下搅拌24h反应；
13)反应完成后，将反应液置于透析袋中(Mw＝8000-14000)，透析介质为去离子水，每隔6h更换新鲜透析介质，透析60h，冷冻干燥，最终得到AuNR@SiO2-FA-Tf。TEM表征：
如图1所示为本实施例过程中所合成的金纳米棒TEM图(20nm)。从图可以看出合成的金纳米棒形状完整，并且金纳米棒均匀分散在溶液中，说明金纳米棒被成功被合成，可以用于后续步骤的修饰。
实施例2
1)将15mL 0.1mol/L的CTAB与375μL 10mmol/LHAuCl4混合，加去离子水至总体积为14.1mL；
2)然后将0.9mL冰浴后的NaBH4水溶液(0.01mol/L)加到上述混合液中形成纳米金种子(在2-5h内使用)；
3)用150mL 0.1mol/L CTAB，7.5mL 0.01mol/L HAuCl4，3.3mL 10mmol/L AgNO3，1.2mL 1mol/L HCl以及1050μL 0.0788mol/L抗坏血酸制成金纳米棒的生长液；
4)加入360μL上述纳米金种子后开始反应，实验过程保持在30℃恒温状态；
5)将合成的金纳米棒进行离心清洗(每管40mL，转速9500r/min，25min)后，向沉淀物中加水稀释到30mL；
6)在搅拌条件下加入300μL 0.1mol/LNaOH溶液，随后，将3份90μL 20％TEOS试剂(用甲醇)稀释，每隔25min加入，加入时轻轻搅拌，在27℃下反应11h，即得到介孔二氧化硅包覆的金纳米棒，记为AuNR@SiO2；
7)在上述反应完成后加入含15μL APTES的150μL甲醇溶液，反应6h后离心处理，获得红色沉淀。将红色沉淀置于30mL甲醇溶液中(含0.2mL的HCl)回流加热2h，然后用热甲醇反复清洗沉淀物，即可得到去除了CTAB的产物AuNR@SiO2-NH2；
8)称取70mg FA溶于12.5mL DMSO，37℃水浴下搅拌45min使其完全溶解，加入34mgEDC，38mgNHS，37℃水浴下搅拌3h进行活化；
9)向活化过的FA溶液中加入步骤7)制备好的AuNR@SiO2-NH2，继续反应18h后回收样品，离心，经大量DMSO洗涤后用去离子水洗涤两次，最后用无水乙醇洗涤后55℃干燥，得到AuNR@SiO2-FA；
10)称取60mg Tf溶于60mLpH＝7.40PBS溶液中，使成1mg/mL的溶液备用；
11)向步骤10)所制备的溶液中加入380mg EDC，150mgNHS超声30s使其完全溶解后于室温搅拌3h活化；
12)在搅拌下将步骤9)制得的AuNR@SiO2-FA加入到活化后的转铁蛋白溶液中，室温下搅拌36h反应；
13)反应完成后，将反应液置于透析袋中(Mw＝8000-14000)，透析介质为去离子水，每隔9h更换新鲜透析介质，透析66h，冷冻干燥，最终得到AuNR@SiO2-FA-Tf。
如图2所示为本实施例过程中所合成的金纳米棒TEM图(20nm)。从图可以看出合成的金纳米棒形状完整，并且金纳米棒均匀分散在溶液中，说明金纳米棒被成功被合成，可以用于后续步骤的修饰。
实施例3
1)将20mL 0.1mol/L的CTAB与500μL 10mmol/L HAuCl4混合，加去离子水至总体积为18.8mL；
2)然后将1.2mL冰浴后的NaBH4水溶液(0.01mol/L)加到上述混合液中形成纳米金种子(在2-5h内使用)；
3)用200mL 0.1mol/L CTAB，10mL 0.01mol/L HAuCl4，4.4mL 10mmol/L AgNO3，1.6mL 1mol/L HCl以及1400μL 0.0788mol/L抗坏血酸制成金纳米棒的生长液；
4)加入480μL上述纳米金种子后开始反应，实验过程保持在30℃恒温状态；
5)将合成的金纳米棒进行离心清洗(每管40mL，转速9500r/min，25min)后，向沉淀物中加水稀释到40mL；
6)在搅拌条件下加入400μL 0.1mol/L NaOH溶液，随后，将3份120μL 20％TEOS试剂(用甲醇)稀释，每隔30min加入，加入时轻轻搅拌，在28℃下反应12h，即得到介孔二氧化硅包覆的金纳米棒，记为AuNR@SiO2；
7)在上述反应完成后加入含20μL APTES的200μL甲醇溶液，反应7h后离心处理，获得红色沉淀。将红色沉淀置于40mL甲醇溶液中(含0.2mL的HCl)回流加热3h，然后用热甲醇反复清洗沉淀物，即可得到去除了CTAB的产物AuNR@SiO2-NH2；
8)称取80mg FA溶于15mL DMSO，37℃水浴下搅拌60min使其完全溶解，加入34mgEDC，38mgNHS，37℃水浴下搅拌4h进行活化；
9)向活化过的FA溶液中加入步骤7)制备好的AuNR@SiO2-NH2，继续反应24h后回收样品，离心，经大量DMSO洗涤后用去离子水洗涤两次，最后用无水乙醇洗涤后60℃干燥，得到AuNR@SiO2-FA；
10)称取70mg Tf溶于70mL pH＝7.40PBS溶液中，使成1mg/mL的溶液备用；
11)向步骤10)所制备的溶液中加入380mg EDC，150mg NHS超声30s使其完全溶解后于室温搅拌4h活化；
12)在搅拌下将步骤9)制得的AuNR@SiO2-FA加入到活化后的转铁蛋白溶液中，室温下搅拌48h反应；
13)反应完成后，将反应液置于透析袋中(Mw＝8000-14000)，透析介质为去离子水，每隔12h更换新鲜透析介质，透析72h，冷冻干燥，最终得到AuNR@SiO2-FA-Tf。
如图3所示为本实施例过程中所合成的金纳米棒TEM图(20nm)。从图可以看出合成的金纳米棒形状完整，并且金纳米棒均匀分散在溶液中，说明金纳米棒被成功被合成，可以用于后续步骤的修饰。
本发明中所用原料、设备，若无特别说明，均为本领域的常用原料、设备；本发明中所用方法，若无特别说明，均为本领域的常规方法。
以上所述，仅是本发明的较佳实施例，并非对本发明作任何限制，凡是根据本发明技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、变更以及等效变换，均仍属于本发明技术方案的保护范围。

Claims (8)

1.一种转铁蛋白-叶酸多重修饰的双靶向介孔二氧化硅包覆金纳米棒的制备方法，其特征在于，以mg和μL、mL计，包括以下步骤：
1)将10-20mL 0.08-0.12mol/L的CTAB与250-500μL 8-12mmol/L HAuCl4混合，加去水至总体积为9.4-18.8mL；
2)然后将0.008-0.012mol/L 0.6-1.2mL冰浴后的NaBH4水溶液加到步骤1)所得混合液中形成纳米金种子；
3)用100-200mL 0.08-0.12mol/L CTAB，5-10mL 0.08-0.12mol/L HAuCl4，2.2-4.4mL8-12mmol/L AgNO3，0.8-1.6mL 0.8-1.2mol/L HCl以及700-1400μL 0.075-0.080mol/L抗坏血酸制成金纳米棒生长液；
4)向步骤3)所得金纳米棒生长液中加入240-480μL纳米金种子进行反应；
5)将合成的金纳米棒进行离心清洗后，向沉淀物中加水稀释到20-40mL；
6)在搅拌条件下加入200-400μL 0.08-0.12mol/L NaOH溶液，随后，将3份60-120μL18-22wt％TEOS试剂用甲醇稀释，每隔20-30min加入，加入时搅拌，在26-28℃下反应10-12h，得到介孔二氧化硅包覆的金纳米棒，记为AuNR@SiO2；
7)在上述反应完成后加入含10-20μL APTES的100-200μL甲醇溶液，反应5-7h后离心处理，获得红色沉淀；将红色沉淀置于含0.15-0.25mL HCl的20-40mL甲醇溶液中回流加热1-3h，然后用热甲醇反复清洗沉淀物，得到去除CTAB的产物AuNR@SiO2-NH2；
8)称取60-80mg FA溶于10-15mL DMSO，35-40℃水浴下搅拌30-60min使其完全溶解，加入30-35mg EDC，35-40mg NHS，35-40℃水浴下搅拌2-4h进行活化，得到活化的FA溶液；
9)向活化的FA溶液中加入AuNR@SiO2-NH2，继续反应12-24h后，离心，经DMSO洗涤后用水洗涤，最后用无水乙醇洗涤后干燥，得到AuNR@SiO2-FA；
10)称取50-70mg转铁蛋白溶于50-70mL PBS溶液中，制成转铁蛋白溶液后备用；
11)向转铁蛋白溶液中加入370-390mg EDC，140-160mg NHS超声使其完全溶解后于室温搅拌活化2-4h，得到活化的转铁蛋白溶液；
12)在搅拌下将AuNR@SiO2-FA加入到活化的转铁蛋白溶液中，室温下搅拌24-48h反应；
13)反应完成后，将反应液置于透析袋中，透析介质为水，每隔6-12h更换新鲜透析介质，透析60-72h，冷冻干燥，最终得到转铁蛋白-叶酸多重修饰的双靶向介孔二氧化硅包覆金纳米棒。
2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤2)中，所得纳米金种子在2-5h内使用。
3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤4)中，反应过程保持在25-35℃恒温状态。
4.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤5)中，离心转速为9000-10000r/min，离心20-30min。
5.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤9)中，干燥温度为50-60℃。
6.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤10)中，所述PBS溶液的pH＝7.0-7.5。
7.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤11)中，超声时间为25-35s。
8.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤13)中，所述透析袋的规格为Mw＝8000-14000。
CN201910948065.1A 2019-10-05 2019-10-05 一种转铁蛋白-叶酸多重修饰的双靶向介孔二氧化硅包覆金纳米棒的制备方法 Pending CN110604817A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910948065.1A CN110604817A (zh) 2019-10-05 2019-10-05 一种转铁蛋白-叶酸多重修饰的双靶向介孔二氧化硅包覆金纳米棒的制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910948065.1A CN110604817A (zh) 2019-10-05 2019-10-05 一种转铁蛋白-叶酸多重修饰的双靶向介孔二氧化硅包覆金纳米棒的制备方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN110604817A true CN110604817A (zh) 2019-12-24

Family

ID=68894365

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201910948065.1A Pending CN110604817A (zh) 2019-10-05 2019-10-05 一种转铁蛋白-叶酸多重修饰的双靶向介孔二氧化硅包覆金纳米棒的制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN110604817A (zh)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112168977A (zh) * 2020-10-27 2021-01-05 西南大学 转铁蛋白修饰的二氧化硅荷载白藜芦醇及制备方法和应用
CN114309633A (zh) * 2021-12-16 2022-04-12 杭州电子科技大学 一种亲油金纳米棒制备方法
CN116441555A (zh) * 2023-06-16 2023-07-18 北京建工环境修复股份有限公司 功能化金纳米棒探针、制备方法及其在五氯苯酚暗场显微成像检测中的应用

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105617392A (zh) * 2016-01-15 2016-06-01 武汉理工大学 金纳米复合靶向给药系统制备方法
US20160325257A1 (en) * 2015-05-08 2016-11-10 North Carolina State University Method for synthesizing non-spherical nanostructures
US20180344654A1 (en) * 2007-12-06 2018-12-06 The Regents Of The University Of California Mesoporous silica nanoparticles for biomedical applications

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20180344654A1 (en) * 2007-12-06 2018-12-06 The Regents Of The University Of California Mesoporous silica nanoparticles for biomedical applications
US20160325257A1 (en) * 2015-05-08 2016-11-10 North Carolina State University Method for synthesizing non-spherical nanostructures
CN105617392A (zh) * 2016-01-15 2016-06-01 武汉理工大学 金纳米复合靶向给药系统制备方法

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
VICTORIA LOPEZ, ET AL.: "Janus Mesoporous Silica Nanoparticles for Dual Targeting of Tumor Cells and Mitochondria", 《ACS APPL. MATER. INTERFACES》 *
孟胜男等主编: "《药剂学》", 31 January 2016, 北京：中国医药科技人民出版社 *
金新天等: "透明质酸修饰的介孔二氧化硅包覆金纳米棒的制备及在肿瘤化疗-热疗联合治疗中的应用", 《高等学校化学学报》 *

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112168977A (zh) * 2020-10-27 2021-01-05 西南大学 转铁蛋白修饰的二氧化硅荷载白藜芦醇及制备方法和应用
CN114309633A (zh) * 2021-12-16 2022-04-12 杭州电子科技大学 一种亲油金纳米棒制备方法
CN116441555A (zh) * 2023-06-16 2023-07-18 北京建工环境修复股份有限公司 功能化金纳米棒探针、制备方法及其在五氯苯酚暗场显微成像检测中的应用
CN116441555B (zh) * 2023-06-16 2023-08-22 北京建工环境修复股份有限公司 功能化金纳米棒探针、制备方法及其在五氯苯酚暗场显微成像检测中的应用

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Niculescu Mesoporous silica nanoparticles for bio-applications
CN107412195B (zh) 一种pH响应的抗肿瘤药物载体材料及其制备和应用
CN108837161B (zh) 一种聚多巴胺包裹的金核/中空硅壳纳米材料及其制备和应用
CN110604817A (zh) 一种转铁蛋白-叶酸多重修饰的双靶向介孔二氧化硅包覆金纳米棒的制备方法
CN101721372B (zh) 金壳包覆的中空介孔二氧化硅球及其制备方法和在肿瘤治疗方面的用途
Xu et al. Group IV nanodots: synthesis, surface engineering and application in bioimaging and biotherapy
CN107812200B (zh) Bsa-钆离子络合物包载的空心金纳米壳及制备方法
CN108324955B (zh) 一种超小硫化铜负载的中空介孔硅靶向纳米载药复合物的制备方法
CN105997944A (zh) 一种具有磁热、光热效应的纳米药物载体及其制备方法
CN105920601B (zh) 偶联叶酸靶向的四氧化三铁/介孔二氧化硅/硫化铜纳米复合粒子及其制备方法和应用
CN109248327B (zh) 一种介孔二氧化硅药物递送系统及其应用
CN104491866A (zh) 一种硫化铜/介孔二氧化硅核壳纳米粒子及其制备和应用
CN105056233A (zh) 具有近红外光热和体内荧光成像特性的多功能介孔二氧化硅纳米粒及其制备方法和应用
CN111821283B (zh) 一种癌细胞膜包裹负载三苯基膦-氯尼达明的谷氨酸锌包裹普鲁士蓝纳米粒及其制备方法
CN111978556B (zh) 一种硒化zif-67的制备方法及应用
CN107469078A (zh) 硒量子点/二氧化硅/硫化铜纳米复合粒子及其制备与应用
Gao et al. AuNRs@ MIL-101-based stimuli-responsive nanoplatform with supramolecular gates for image-guided chemo-photothermal therapy
CN112641946A (zh) 聚多巴胺包裹金纳米复合物及其制备方法与在肿瘤多模态诊疗中的应用
CN101797387A (zh) 一种可携带基因和药物的磁性靶向载体及其制备方法和应用
CN110812495B (zh) 一种基于中空介孔硅载药纳米颗粒及其制备和应用
CN108721321B (zh) 一种肿瘤靶向的纳米诊疗剂、其制备方法及其用途
WO2023284134A1 (zh) 一种细胞核靶向上转换荧光探针及其制备方法和应用
Li et al. Construction of WS2/Au-lipid drug delivery system for multiple combined therapy of tumor
CN111686249B (zh) 一种纳米载体材料及其制备方法和在制备抗肿瘤药物中应用
CN112336858B (zh) 一种铋-锰基复合颗粒及其制备方法和应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20191224

RJ01 Rejection of invention patent application after publication