CN110590892A - 一种从废弃栝楼果瓤中分离得到的具有抗肿瘤活性的三萜化合物及其应用 - Google Patents

一种从废弃栝楼果瓤中分离得到的具有抗肿瘤活性的三萜化合物及其应用 Download PDF

Info

Publication number
CN110590892A
CN110590892A CN201910933043.8A CN201910933043A CN110590892A CN 110590892 A CN110590892 A CN 110590892A CN 201910933043 A CN201910933043 A CN 201910933043A CN 110590892 A CN110590892 A CN 110590892A
Authority
CN
China
Prior art keywords
waste
triterpene compound
pulp
tumor activity
compound
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201910933043.8A
Other languages
English (en)
Other versions
CN110590892B (zh
Inventor
刘培
张黄琴
钱大玮
赵明
段金廒
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Nanjing University of Chinese Medicine
Original Assignee
Nanjing University of Chinese Medicine
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Nanjing University of Chinese Medicine filed Critical Nanjing University of Chinese Medicine
Priority to CN201910933043.8A priority Critical patent/CN110590892B/zh
Publication of CN110590892A publication Critical patent/CN110590892A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN110590892B publication Critical patent/CN110590892B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07J—STEROIDS
    • C07J9/00—Normal steroids containing carbon, hydrogen, halogen or oxygen substituted in position 17 beta by a chain of more than two carbon atoms, e.g. cholane, cholestane, coprostane

Landscapes

  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Steroid Compounds (AREA)

Abstract

本发明公开了一种从废弃的栝楼或双边栝楼果瓤中分离得到的一个新的三萜类化合物，分子式为C33H48O9，体外抗肿瘤活性研究表明，该化合物具有抗肿瘤活性，包括对结肠癌细胞、前列腺癌细胞、胰腺癌细胞、肺癌细胞均具有很强的抑瘤作用。本发明可解决栝楼或双边果瓤废弃、污染环境的问题，同时可为抗肿瘤药物的开发提供原料，具有重要的实际应用价值。

Description

一种从废弃栝楼果瓤中分离得到的具有抗肿瘤活性的三萜化 合物及其应用
技术领域
本发明涉及具有抗肿瘤活性的化合物，具体涉及从中药材非药用部位栝楼或双边栝楼果瓤提取得到的具有抗肿瘤活性的三萜化合物及其在预防和治疗肿瘤疾病中的用途。
背景技术
葫芦科植物栝楼(Trichosanthes kirilowii Maxim.)或双边栝楼(Trichosanthes rosthornii Harms)是现行版中国药典收录的瓜蒌、瓜蒌皮、瓜蒌子及天花粉药材的基源植物。近年来全国范围的栝楼种植面积约五十万亩，主要集中在安徽、河南、江苏等地，以收集种子，生产吊瓜子产生经济效益，附带收集少量瓜蒌皮和天花粉。瓜蒌全果的果皮、种子和果瓤质量比为1:1:1(干重)，在产地剖瓜取子的过程中，大量的果瓤废弃在田埂、河道，不仅造成资源浪费，也对环境造成了污染，其绿色、健康开发利用亟待解决。缓解这一矛盾的主要方法是对栝楼或双边栝楼的果瓤进行深加工与综合利用。
本发明对废弃的栝楼或双边栝楼果瓤中三萜类成分进行系统提取分离纯化，可解决栝楼或双边栝楼果瓤废弃且污染环境的问题，同时可为抗肿瘤药物的开发提供原料，具有重要的实际应用价值。
发明内容
发明目的：本发明的目的是解决栝楼或双边栝楼果瓤废弃且污染环境的问题，提供一种具有强抗肿瘤活性的新的三萜化合物，为抗肿瘤药物的开发提供原料。
技术方案：为实现以上目的，本发明采取的技术方案为：
一种从废弃栝楼果瓤中分离得到的具有抗肿瘤活性的三萜化合物，其结构式如下：
分子式为：C33H48O9。
本发明所述的具有抗肿瘤活性的三萜化合物的制备方法，其步骤如下：
a.取废弃的栝楼或双边栝楼果瓤，然后加入提取溶剂提取，浓缩，得到浓缩液；
b.将步骤a制备得到的浓缩液，经不同极性溶剂萃取，分别得到不同极性部位。
c.将步骤b得到的萃取部位，经正相、反相色谱层析分离，得到三萜化合物。
作为优选方案，以上所述的具有抗肿瘤活性的三萜化合物的制备方法，提取溶剂为不同浓度的乙醇水溶液，特别优选80％乙醇溶液。
作为优选方案，以上所述的具有抗肿瘤活性的三萜化合物的制备方法，萃取溶剂为石油醚、乙酸乙酯、正丁醇或以上结合梯度萃取。
作为优选方案，以上所述的具有抗肿瘤活性的三萜化合物的制备方法，色谱层析分离的材料为硅胶或十八烷基硅烷键合硅胶或聚苯乙烯基的反相树脂(MCI)或以上几种结合。特别优选几种色谱层析材料结合。
以上制备方法中，步骤a提取方法可以是冷浸、温浸、超声提取、回流提取、渗漉提取等，提取次数1～3次，提取时间1～3小时。
本发明提供的具有抗肿瘤活性的三萜类化合物在制备预防和治疗恶性肿瘤的药物中的应用。
作为优选方案，以上所述的具有抗肿瘤活性的三萜化合物在制备预防和治疗结肠癌、肺癌、胰腺癌、前列腺癌的药物中的应用。
有益效果：与现有技术相比，本发明具有以下优点：
(1)本发明通过对栝楼或双边栝楼果瓤化学成分系统研究，经过波谱和质谱数据分析表明，从栝楼或双边栝楼果瓤中分离得到的三萜化合物为新化合物。
(2)经过体外抗肿瘤实验研究表明，本发明提供的三萜化合物对多种肿瘤细胞，包括结肠癌和肺癌等均具有很强的抗肿瘤活性。
(3)本发明对废弃不用的栝楼或双边栝楼果瓤中三萜类成分进行系统提取分离纯化，可解决栝楼或双边栝楼果瓤废弃且污染环境的问题，同时可为抗肿瘤药物的开发提供原料，具有重要的实际应用价值。
(4)本发明提供的三萜类成分可方便和药学上可接受的载体制备成片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂、注射剂或口服液等制剂，方便临床服用。
附图说明
图1为三萜化合物的结构示意图；
图2为三萜化合物的质谱图；
图3为三萜化合物的1H-NMR图；
图4为三萜化合物的13C-NMR图。
具体实施方案
根据下述实施例，可以更好地理解本发明。然而，本领域的技术人员容易理解，实施例所描述的具体的提取、分离、纯化及其抗肿瘤活性评价仅用于说明本发明，而不应当也不会限制权利要求书中所详细描述的本发明。
实施例1
一种新的三萜化合物，它是通过以下方法制备得到：
(1)取新鲜栝楼果瓤10kg，加入适量体积的95％乙醇使醇浓度达到80％，回流提取2小时，提取2次，过滤，合并滤液，减压浓缩至无醇味，得到栝楼果瓤乙醇提取物浓缩液。
(2)取栝楼果瓤乙醇提取物浓缩液，分别依次用石油醚、乙酸乙酯萃取，得到石油醚部位、乙酸乙酯部位和萃余部位。
(3)取步骤(2)所得的乙酸乙酯萃取液减压浓缩，得到乙酸乙酯萃取部位的浸膏30g，取乙酸乙酯部位与硅胶按重量比1:2拌样，然后以1:1的比例上样量上硅胶柱，用石油醚-乙酸乙酯、乙酸乙酯、乙酸乙酯-甲醇体系梯度洗脱，根据薄层层析情况，将馏分合并成14个部位(F1-F14)，取其中F7(2g)部分经大孔树脂吸附，用不同浓度的甲醇-水体系洗脱，得三萜类成分部位，经液相检测，将80％甲醇、90％甲醇洗脱馏分合并得Ff7。
(4)将步骤(3)制得的Ff7部位浓缩后，经聚苯乙烯基的反相树脂(MCI)柱纯化，依次用体积浓度70％、75％、80％、85％、90、100％的甲醇水体系洗脱，每个浓度的甲醇洗脱五个柱体积，每个柱体积单独接液，分别标记为Ff7-70％-1～Ff7-70％-5，Ff7-75％-1～Ff7-75％-5，Ff7-80％-1～Ff7-80％-5，Ff7-85％-1～Ff7-785％-5，Ff7-90％-1～Ff7-90％-5，Ff7-100％-1～Ff7-100％-5，并分别液相检测，归一化结果显示Ff7-70％-3、Ff7-70％-4、Ff7-70％-5、Ff7-75％-1四个部位在5.85min处峰面积占比85％以上，λmax＝232.9nm，将此四个部位合并成Ff7-MCI-1；Ff7-75％-3、Ff7-75％-4、Ff7-75％-5、Ff7-80％-1、Ff7-80％-2部位在6.85min处峰面积占比85％以上，λmax＝232.9nm，将以上部位合并成Ff7-MCI-2。经检测并与标准品比对，Ff7-MCI-1为葫芦素D，Ff7-MCI-2为未知化合物。
(5)将步骤(4)制得的Ff7-MCI-2部位浓缩，用C18制备液相分离，条件为A相为水，B相为甲醇，0-5min:45-45％A，5-10min:45-30％A，10-30min:30-30％A，30-40min:30-11％A，40-50min:11-11％A，得到纯的化合物15mg。
得到的化合物为淡黄色粉末状，分子式为C33H48O9，易溶于氯仿，质谱图见图2，1HNMR如图3和表1所示，13CNMR见图4和表1。通过文献检索，确定该化合物为新的三萜化合物，其结构式如图1。
表1化合物的1HNMR和13CNMR数据(δ/ppm,J,Hz)
实施例2抗肿瘤实验
以肺癌细胞(A549、H1299)、结肠癌细胞(SW480、HT29)、胰腺癌细胞(BxPC-3、PANC-1)、前列腺癌细胞(PC3、LNCaP)采用CCK-8法进行体外抗肿瘤实验，受试药物为实施例1制备得到的三萜化合物。以样品的溶剂二甲亚砜为对照。由表2实验结果表明，本发明制备得到的三萜化合物对肿瘤细胞显示较强的抑制作用。特别是对肺癌细胞具有特别显著的抑制作用。
表2三萜类化合物对肿瘤细胞的抑制作用
以上实验结果表明，本发明变废为宝，通过优选的方法，以栝楼或双边栝楼的果瓤为原料，制备得到抑瘤作用较好的一种新的三萜葫芦素类化合物，可解决栝楼果瓤废弃且污染环境的问题，同时可为抗肿瘤药物的开发提供原料，具有重要的实际应用价值。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (8)

1.一种从废弃栝楼果瓤中分离得到的具有抗肿瘤活性的三萜化合物，其特征在于，其结构式如下：
该化合物分子式为C33H48O9。
2.权利要求1所述的从废弃栝楼果瓤中分离得到的具有抗肿瘤活性的三萜化合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
a.取废弃的栝楼或双边果瓤，然后加入提取溶剂提取，浓缩，得到浓缩液；
b.将步骤a制备得到的浓缩液，经不同极性溶剂萃取，分别得到不同极性部位；
c.将步骤b得到的萃取部位，经正相、反相色谱层析分离，得到三萜化合物。
3.根据权利要求2所述的从废弃栝楼果瓤中分离得到的具有抗肿瘤活性的三萜化合物的制备方法，其特征在于：提取溶剂为不同浓度的乙醇水溶液。
4.据权利要求2所述的从废弃栝楼果瓤中分离得到的具有抗肿瘤活性的三萜化合物的制备方法，其特征在于：萃取溶剂为石油醚、乙酸乙酯或正丁醇。
5.据权利要求2所述的从废弃栝楼果瓤中分离得到的具有抗肿瘤活性的三萜化合物的制备方法，其特征在于：色谱层析分离的材料为硅胶或十八烷基硅烷键合硅胶或聚苯乙烯基的反相树脂MCI。
6.权利要求1所述的从废弃栝楼果瓤中分离得到的具有抗肿瘤活性的三萜化合物在制备预防和治疗恶性肿瘤的药物中的应用。
7.权利要求1所述的从废弃栝楼果瓤中分离得到的具有抗肿瘤活性的三萜化合物在制备预防和治疗结肠癌、前列腺癌、胰腺癌或肺癌的药物中的应用。
8.一种具有抗肿瘤活性的药物制剂，其特征在于，它包括权利要求1所述的三萜化合物，其制剂剂型为片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂、注射剂或口服液。
CN201910933043.8A 2019-09-29 2019-09-29 一种从废弃栝楼果瓤中分离得到的具有抗肿瘤活性的三萜化合物及其应用 Active CN110590892B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910933043.8A CN110590892B (zh) 2019-09-29 2019-09-29 一种从废弃栝楼果瓤中分离得到的具有抗肿瘤活性的三萜化合物及其应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910933043.8A CN110590892B (zh) 2019-09-29 2019-09-29 一种从废弃栝楼果瓤中分离得到的具有抗肿瘤活性的三萜化合物及其应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN110590892A true CN110590892A (zh) 2019-12-20
CN110590892B CN110590892B (zh) 2021-06-22

Family

ID=68864658

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201910933043.8A Active CN110590892B (zh) 2019-09-29 2019-09-29 一种从废弃栝楼果瓤中分离得到的具有抗肿瘤活性的三萜化合物及其应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN110590892B (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111603499A (zh) * 2020-05-22 2020-09-01 甘肃岷海医药科技有限公司 一种预防和治疗癌症的中药药物及制备方法

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2002078617A2 (en) * 2001-03-28 2002-10-10 University Of South Florida Materials and methods for treatment of cancer and identification of anti-cancer compounds
CN101129387A (zh) * 2007-07-25 2008-02-27 沈阳药科大学 葫芦素在治疗癌症方面的新的医药用途
CN102659888B (zh) * 2012-03-02 2014-07-30 张南 葫芦素衍生物及制备方法
CN104971085A (zh) * 2015-01-05 2015-10-14 谭斌 一种中药瓜蒌皮提取物及其提取方法与应用
CN107857789A (zh) * 2017-12-15 2018-03-30 张南 葫芦素衍生物及其制备方法
CN108785315A (zh) * 2018-08-07 2018-11-13 湖北医药学院 葫芦素b的新应用

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2002078617A2 (en) * 2001-03-28 2002-10-10 University Of South Florida Materials and methods for treatment of cancer and identification of anti-cancer compounds
CN101129387A (zh) * 2007-07-25 2008-02-27 沈阳药科大学 葫芦素在治疗癌症方面的新的医药用途
CN102659888B (zh) * 2012-03-02 2014-07-30 张南 葫芦素衍生物及制备方法
CN104971085A (zh) * 2015-01-05 2015-10-14 谭斌 一种中药瓜蒌皮提取物及其提取方法与应用
CN107857789A (zh) * 2017-12-15 2018-03-30 张南 葫芦素衍生物及其制备方法
CN108785315A (zh) * 2018-08-07 2018-11-13 湖北医药学院 葫芦素b的新应用

Non-Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
HUANG-QIN ZHANG等: "Hierarchical extraction and simultaneous determination of flavones and triterpenes in different parts of Trichosanthes kirilowii Maxim. by ultra-high-performance liquid chromatography coupled with tandem mass spectrometry", 《JOURNAL OF PHARMACEUTICAL AND BIOMEDICAL ANALYSIS》 *
KIMBERLY L.K.DUNCAN等: "Cucurbitacin E-Induced Disruption of the Actin and Vimentin Cytoskeleton in Prdstate Carcinoma Cells", 《BIOCHEMICAL PHARMACOLOGY》 *
ZI-QI JIN等: "Higenamine enhances the antitumor effects of cucurbitacin B in breast cancer by inhibiting the interaction of AKT and CDK2", 《ONCOLOGY REPORTS》 *
张萌: "葫芦素B对肺癌A549细胞增殖、凋亡的影响及其机制的研究", 《中国医科大学硕士学位论文》 *
黄琛: "葫芦素B对于结肠癌细胞生长与增值抑制作用的研究", 《河北医科大学硕士学位论文》 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111603499A (zh) * 2020-05-22 2020-09-01 甘肃岷海医药科技有限公司 一种预防和治疗癌症的中药药物及制备方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN110590892B (zh) 2021-06-22

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN102443613B (zh) 牛樟芝抗癌活性物质、制备方法及其用途
CN108003214A (zh) 一种从土贝母中提取的皂苷化合物及其方法和应用
CN110590892B (zh) 一种从废弃栝楼果瓤中分离得到的具有抗肿瘤活性的三萜化合物及其应用
CN111454317B (zh) 具有抗炎活性的人参二醇型三萜皂苷、三七叶提取物、药物组合物和化妆品组合物
JP2009120518A (ja) 田七人参抽出物
CN116606269B (zh) 米团花二倍半萜化合物与提取物l01及其在制药中的应用
CN111018877B (zh) 一种土木香中倍半萜类衍生物、其制备方法及应用
CN109879921B (zh) 从知母中分离的具有抗肿瘤活性的化合物及其制备方法
CN113861114A (zh) 吗啡烷类和双苄基异喹啉类生物碱化合物及其制备方法和用途
CN109320578A (zh) 一种三萜皂苷化合物及其提取方法
CN111925404B (zh) 一种木脂素类化合物的制备方法与应用
CN106822071B (zh) 一种用于治疗冠心病、高脂血症的中药有效部位、制备方法及从中分离有效成分的方法
CN111909228B (zh) 一种生物碱类化合物及其制备方法和应用
CN110522776B (zh) 一种黄槿中抗肿瘤有效部位的制备方法及应用
CN103027932A (zh) 一种香加皮抗肿瘤有效组分提取物及其制法和用途
CN111217800B (zh) 生物碱及从黑胡椒中的提取方法和用途
CN113583080A (zh) 一种化合物及其制备方法和应用
CN106317155A (zh) 一种还原性葫芦烷型三萜及其制法和用途
CN113214214A (zh) 关苍术中一种新的萜类化合物的制备方法和应用
CN107325069B (zh) 一种倍半萜类化合物的提取方法
CN109970839A (zh) 三萜皂苷类化合物及其制备方法和医药用途
CN104324043B (zh) 一种强心苷化合物的用途
AU753709B2 (en) Substance having steroid-like structure, process for the production thereof and antitumor agents containing the same
CN112920146B (zh) 倍半萜类化合物及其制备方法和在制备抗炎药物中的应用
CN111995645B (zh) 一种苯丙素类化合物及其制备方法和应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant